1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp

71 5 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Tiêu đề Biểu hiện gene fliC cải biến của Salmonella dublin trong Escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Tác giả Nguyễn Thị Nhung
Người hướng dẫn TS. Võ Viết Cường, PGS.TS. Nguyễn Lai Thành
Trường học Đại học Quốc gia Hà Nội
Chuyên ngành Sinh học thực nghiệm
Thể loại luận văn thạc sỹ
Năm xuất bản 2020
Thành phố Hà Nội
Định dạng
Số trang 71
Dung lượng 2,55 MB

Nội dung

Ngày đăng: 05/07/2021, 09:04

Nguồn tham khảo

Tài liệu tham khảo Loại Chi tiết
2. Nguyễn Thị Trung, Đỗ Thị Huyền, Trương Nam Hải (2011), "Biểu hiện và tinh sạch Epitope kháng nguyên Roi H:1,2 (FljB1) để tạo Kit chẩn đoán Salmonella". Khoa hoc và Công nghệ, 2, pp. 63-71.Tài liệu tiếng Anh Sách, tạp chí
Tiêu đề: Biểu hiện và tinh sạch Epitope kháng nguyên Roi H:1,2 (FljB1) để tạo Kit chẩn đoán Salmonella
Tác giả: Nguyễn Thị Trung, Đỗ Thị Huyền, Trương Nam Hải
Năm: 2011
3. Akira S, U. S., Takeuchi (2006), "Pathogen recognition and innate immunity". Cell, 124 (4), pp. 783-801 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Pathogen recognition and innate immunity
Tác giả: Akira S, U. S., Takeuchi
Năm: 2006
5. Butt TR, E. S., Hall JP, Mattern MR (2005), "SUMO fusion technology for difficult-to-express proteins". Protein Expression and Purification, 43 (1), pp.1-9 Sách, tạp chí
Tiêu đề: SUMO fusion technology for difficult-to-express proteins
Tác giả: Butt TR, E. S., Hall JP, Mattern MR
Năm: 2005
6. Chiron D, P.-D. C., Maillasson M, Bataille R, Jego G (2009), "Phosphorothioate-modified TLR9 ligands protect cancer cells against TRAIL-induced apoptosis". Journal of Immunology, 183 (7), pp. 4371-4377 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Phosphorothioate-modified TLR9 ligands protect cancer cells against TRAIL-induced apoptosis
Tác giả: Chiron D, P.-D. C., Maillasson M, Bataille R, Jego G
Năm: 2009
7. CJ, H., "Type III protein secretion systems in bacterial pathogens of animals and plants". Microbiology and Molecular Biology Reviews, 62 (2), pp. 379- 433 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Type III protein secretion systems in bacterial pathogens of animals and plants
8. CP, C. (2007), "Engineering cell physiology to enhance recombinant protein production in Escherichia coli". Applied Microbiology and Biotechnology, 76 (3), pp. 521-532 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Engineering cell physiology to enhance recombinant protein production in Escherichia coli
Tác giả: CP, C
Năm: 2007
10. De Togni P, F. H., Morrissey S, Tansey LR, Levy SB, Babior BM (1988), "Plasmids in bacteria exposed to activated neutrophils mediate mutagenesis when transferred to new hosts". Blood, 71 (2), pp. 463-466 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Plasmids in bacteria exposed to activated neutrophils mediate mutagenesis when transferred to new hosts
Tác giả: De Togni P, F. H., Morrissey S, Tansey LR, Levy SB, Babior BM
Năm: 1988
11. Durfee T, N. R., Baldwin S, Plunkett G 3rd, Burland V, Mau B, Petrosino JF, Qin X, Muzny DM, Ayele M, Gibbs RA, Csửrgo B, Púsfai G, Weinstock GM, Blattner FR. (2008), "The complete genome sequence of Escherichia coli DH10B: insights into the biology of a laboratory workhorse". Journal of Bacteriology, 190 (7), pp. 2597-2696 Sách, tạp chí
Tiêu đề: The complete genome sequence of Escherichia coli DH10B: insights into the biology of a laboratory workhorse
Tác giả: Durfee T, N. R., Baldwin S, Plunkett G 3rd, Burland V, Mau B, Petrosino JF, Qin X, Muzny DM, Ayele M, Gibbs RA, Csửrgo B, Púsfai G, Weinstock GM, Blattner FR
Năm: 2008
12. Eaves-Pyles TD, W. H., Odoms K, Pyles RB (2001), "Salmonella flagellin- dependent proinflammatory responses are localized to the conserved amino and carboxyl regions of the protein". Journal of Immunology, 167 (12), pp.7009-7016 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Salmonella flagellin-dependent proinflammatory responses are localized to the conserved amino and carboxyl regions of the protein
Tác giả: Eaves-Pyles TD, W. H., Odoms K, Pyles RB
Năm: 2001
13. Federica Ciacci-Woolwine, I. C. B., Stephen H. Richardson, Steven B. Mizel (1998), "Salmonella Flagellin Induces Tumor Necrosis Factor Alpha in a Human Promonocytic Cell Line". Infection and Immunity, 66 (3), pp. 1127- 1134 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Salmonella Flagellin Induces Tumor Necrosis Factor Alpha in a Human Promonocytic Cell Line
Tác giả: Federica Ciacci-Woolwine, I. C. B., Stephen H. Richardson, Steven B. Mizel
Năm: 1998
14. Franchi L, A. A., Body-Malapel M, Kanneganti TD, Ozửren N, Jagirdar R, Inohara N, Vandenabeele P, Bertin J, Coyle A, Grant EP, Nỳủez G (2006),"Cytosolic flagellin requires Ipaf for activation of caspase-1 and interleukin 1beta in salmonella-infected macrophages". Nature Immunology, 7 (6), pp.576-582 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Cytosolic flagellin requires Ipaf for activation of caspase-1 and interleukin 1beta in salmonella-infected macrophages
Tác giả: Franchi L, A. A., Body-Malapel M, Kanneganti TD, Ozửren N, Jagirdar R, Inohara N, Vandenabeele P, Bertin J, Coyle A, Grant EP, Nỳủez G
Năm: 2006
15. Gewirtz AT, N. T., Lyons S, Godowski PJ, Madara J (2001), "Cutting edge: bacterial flagellin activates basolaterally expressed TLR5 to induce epithelial proinflammatory gene expression". Journal of Immunology, 167 (4), pp. 1882- 1885 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Cutting edge: bacterial flagellin activates basolaterally expressed TLR5 to induce epithelial proinflammatory gene expression
Tác giả: Gewirtz AT, N. T., Lyons S, Godowski PJ, Madara J
Năm: 2001
1. Đỗ Huyền, Lê Giang., Sven Olof Enfors, Lựa chọn môi trường nuôi cấy nhằm tăng sản lƣợng flagellin fliC tái tổ hợp của Salmonella enterica serovar Typhimurium từ Escherichia coli. 2014; Vol. 10 Khác
4. Burdelya LG, K. V., Tallant TC, Strom E, Gleiberman AS, Gupta D, Kurnasov OV, Fort FL, Osterman AL, Didonato JA, Feinstein E, Gudkov AV Khác

HÌNH ẢNH LIÊN QUAN

Hình 1.1: Vi khuẩn Salmonella[9] - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 1.1 Vi khuẩn Salmonella[9] (Trang 11)
Hình 1.2: Lát cắt ngang cấu trúc roi (a) và cấu trúc protein flagellin (b)[36] - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 1.2 Lát cắt ngang cấu trúc roi (a) và cấu trúc protein flagellin (b)[36] (Trang 13)
Hình 1.3: Cơ chế bảo vệ phóng xạ của flagellin [54]. - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 1.3 Cơ chế bảo vệ phóng xạ của flagellin [54] (Trang 16)
Hình 2.1: Cấu trúc gene fliC3 cải biến. - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 2.1 Cấu trúc gene fliC3 cải biến (Trang 22)
Bảng 2.1: Các loại enzyme, kháng thể và hóa chất dùng trong nghiên cứu - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Bảng 2.1 Các loại enzyme, kháng thể và hóa chất dùng trong nghiên cứu (Trang 23)
Bảng 2.2: Các môi trường và dung dịch dùng cho nghiên cứu - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Bảng 2.2 Các môi trường và dung dịch dùng cho nghiên cứu (Trang 24)
Bảng2.3: Các thiết bị dùng trong nghiên cứu - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Bảng 2.3 Các thiết bị dùng trong nghiên cứu (Trang 25)
Hình 2.2. Theo đó, mẫu ADN ban đầu sẽ đƣợc khuếch đại bằng phản ứng PCR và tinh sạch, sản phẩm thu đƣợc đƣợc cắt bằng enzyme cắt giới hạn với cặp enzyme BsaI và SalI nhằm tạo đầu nối với vector - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 2.2. Theo đó, mẫu ADN ban đầu sẽ đƣợc khuếch đại bằng phản ứng PCR và tinh sạch, sản phẩm thu đƣợc đƣợc cắt bằng enzyme cắt giới hạn với cặp enzyme BsaI và SalI nhằm tạo đầu nối với vector (Trang 26)
Thành phần phản ứng đƣợc thể hiện dƣới bảng sau. - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
h ành phần phản ứng đƣợc thể hiện dƣới bảng sau (Trang 27)
Bảng 2.6: Thành phần phản ứng nối gene fliC vào vector pSUMO3 - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Bảng 2.6 Thành phần phản ứng nối gene fliC vào vector pSUMO3 (Trang 28)
Bảng 2.5: Thành phần hỗn hợp phản ứng cắt - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Bảng 2.5 Thành phần hỗn hợp phản ứng cắt (Trang 28)
Hình 2.3. Sơ đồ cấu tạo đơn giản của hệ thống khối phổ - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 2.3. Sơ đồ cấu tạo đơn giản của hệ thống khối phổ (Trang 32)
Hình 3.1: Kết quả điện di sản phẩm PCR khuếch đại 3 gene fliC Giếng M: Marker; - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3.1 Kết quả điện di sản phẩm PCR khuếch đại 3 gene fliC Giếng M: Marker; (Trang 33)
Hình 3.2: Kết quả điện di sản phẩm cắt gene fliC và vector pSUMO3 Giếng M: marker 1kb (Norgen); - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3.2 Kết quả điện di sản phẩm cắt gene fliC và vector pSUMO3 Giếng M: marker 1kb (Norgen); (Trang 34)
Hình 3.3: Sự phát triển của tế bào E.coli sau biến nạp Đĩa 1: Kiểm tra sức sống của E - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3.3 Sự phát triển của tế bào E.coli sau biến nạp Đĩa 1: Kiểm tra sức sống của E (Trang 36)
PCR các gene fliC sau khi biến nạp vào E.coli DH5α và Rosetta 1. Kết quả Hình 3.4 cho thấy, kích thƣớc của các gene tách từ 2 chủng tế bào không có sự khác biệt với gene fliC 3 đƣợc thiết kế ban đầu - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
c ác gene fliC sau khi biến nạp vào E.coli DH5α và Rosetta 1. Kết quả Hình 3.4 cho thấy, kích thƣớc của các gene tách từ 2 chủng tế bào không có sự khác biệt với gene fliC 3 đƣợc thiết kế ban đầu (Trang 37)
Hình 3.5:Biểu hiện protein ở tế bào E.coli Rosetta 1 Giếng 1: Chủng E. coli Rosetta 1 mang plasmid pSUMO-fliC 3; Giếng 2: Chủng E - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3.5 Biểu hiện protein ở tế bào E.coli Rosetta 1 Giếng 1: Chủng E. coli Rosetta 1 mang plasmid pSUMO-fliC 3; Giếng 2: Chủng E (Trang 38)
Hình 3.6: Biểu hiện của protein flagellin trong các môi trường nuôi cấy - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3.6 Biểu hiện của protein flagellin trong các môi trường nuôi cấy (Trang 40)
Hình 3.7: Kiểm tra sự biểu hiện của fliC ở các nồng độ IPTG - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3.7 Kiểm tra sự biểu hiện của fliC ở các nồng độ IPTG (Trang 42)
Hình 3.8: Kiểm tra sự biểu hiện của fliC ở các điều kiện nhiệt độ khác nhau - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3.8 Kiểm tra sự biểu hiện của fliC ở các điều kiện nhiệt độ khác nhau (Trang 44)
Hình 3.9: Kiểm tra sự biểu hiện của fliC ở các điều kiện thời gian thu mẫu khác nhau - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3.9 Kiểm tra sự biểu hiện của fliC ở các điều kiện thời gian thu mẫu khác nhau (Trang 46)
Hình 3. 10: Kết quả xử lý tiền tinh chế flagellin tái tổ hợp trong ure Giếng TS: Protein tổng số, - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3. 10: Kết quả xử lý tiền tinh chế flagellin tái tổ hợp trong ure Giếng TS: Protein tổng số, (Trang 48)
Hình 3.11: Kết quả tinh sạch flagellin tái tổ hợp bằng sắc ký ái lực Giếng TS: Protein tổng số, - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3.11 Kết quả tinh sạch flagellin tái tổ hợp bằng sắc ký ái lực Giếng TS: Protein tổng số, (Trang 49)
Hình 3.12: Xác định fliC bằng Western blot Giếng 1: Rosetta 1; - Biểu hiện gen flic cải biến của salmonella dublin trong escherichia coli và đánh giá hoạt tính sinh học của protein tái tổ hợp
Hình 3.12 Xác định fliC bằng Western blot Giếng 1: Rosetta 1; (Trang 51)

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w