Phương pháp thu thập xử lý và bảo quản mẫu vật côn trùng ở ngoài thực địa và trong phòng thí nghiệm

16 B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 01(44) (2021) 16-29 Phương pháp thu thâ ̣p, xử lý và bảo quản mẫu vâ ̣t côn trùng ở ngoài thực điạ và phòng thí nghiê ̣m The methodologies of collection, preparation and preservation of insect specimens in fields and in laboratories Bùi Anh Phonga,b, Phan Quố c Toảna,b*, Ngô Quố c Phúa,b Bui Anh Phonga,b, Phan Quoc Toana,b*, Ngo Quoc Phua,b Trung tâm Côn trùng - Ký sinh trùng, Trường Y - Dược, Đại học Duy Tân, Đà Nẵng, Viê ̣t Nam b Khoa Y, Trường Y - Dược, Đại học Duy Tân, Đà Nẵng, Việt Nam a Center for Entomology & Parasitology Research, College of Medicine & Pharmacy, Duy Tan University, 550000, Vietnam b Faculty of Medicine, College of Medicine & Pharmacy, Duy Tan University, 550000, Vietnam a (Ngày nhận bài: 16/12/2020, ngày phản biện xong: 27/12/2020, ngày chấp nhận đăng: 18/02/2021) Tóm tắt Nghiên cứu này giới thiê ̣u những phương pháp thu thâ ̣p, xử lý và bảo quản mẫu vâ ̣t côn trùng ngoài thực điạ cũng phòng thí nghiê ̣m, theo tiêu chuẩ n thế giới và đươ ̣c sử du ̣ng phổ biế n rô ̣ng raĩ Tùy thuộc vào tâ ̣p tiń h sinh thái ho ̣c, môi trường số ng, kić h thước và đă ̣c điể m cấ u ta ̣o của mỗi nhóm côn trùng thì sử du ̣ng các phương pháp khác Bô ̣ sưu tâ ̣p mẫu vâ ̣t côn trùng ho ̣c bảo tàng trường đại học là nguồn tài liê ̣u tham khảo có giá trị, rấ t cầ n thiế t cho nghiên cứu các ngành khoa ho ̣c khác phân loa ̣i ho ̣c, ̣ thố ng ho ̣c, các mố i quan ̣ tiế n hóa, các quá trình tiế n hóa, điạ sinh vâ ̣t, sinh thái, biế n đổ i khí hâ ̣u, ô nhiễm môi trường và các vấ n đề thực tiễn nông nghiê ̣p, y ho ̣c, văn hóa, nhân ho ̣c… Bên cạnh đó, các bơ ̣ sưu tâ ̣p mẫu vâ ̣t cũng góp phần hoạt động hợp tác quốc tế, giảng dạy tham quan triển lãm, cho người dân điạ phương Từ khóa: Côn trùng; phương pháp; thu thâ ̣p; xử lý mẫu vâ ̣t; bảo quản khô; bảo quản lỏng Abstract This study presents the standard methodologies for collecting, preparing and preserving insect specimens in fields and in laboratories We use different methodologies to collect and preserve insects depending on their ecological behavior, habitat, body size, and morphological characters Entomological collections in museums and universities are the fundamental reference materials that document the locality’s biological diversity and essential for researches in the science of systematics, classification, taxonomy, evolutionary relationships, evolutionary processes, geobiology, ecology, climate change, environmental pollution, agriculture, medicine, culture or anthoropology, etc In addition, the entomological collections are also important in international coorperation, educational activies and conducting exhibition for local people Keywords: Insect; methodology; collect; preparation; dried preservation; liquid preservation * Corresponding Author: Phan Quoc Toan; Center for Entomology & Parasitology Research, College of Medicine & Pharmacy, Duy Tan University, 550000, Da Nang; Faculty of Medicine, Duy Tan University, Da Nang, 550000, Vietnam Email: pqtoan84@gmail.com B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 Giới thiệu Côn trùng là nhóm đô ̣ng vâ ̣t không xương số ng có số lươ ̣ng loài đa da ̣ng nhấ t hành tinh (ước tính có khoảng đế n 80 triê ̣u loài [3]) đóng vai trò rấ t quan tro ̣ng sinh giới cũng đố i với đời số ng người Côn trùng học (Entomology) là mô ̣t lĩnh vực khoa học cực kỳ quan tro ̣ng và thiế t yế u, nhằ m giúp hiể u biế t đầ y đủ về đă ̣c điể m sinh ho ̣c, sinh thái ho ̣c, đă ̣c tính của các loài côn trùng để từ đó có thể ứng du ̣ng vào các liñ h vực đời số ng người Để nghiên cứu côn trùng mô ̣t cách đầ y đủ thì cầ n thiế t phải tiế n hành thu thâ ̣p mẫu vâ ̣t của chúng nhằ m phu ̣c vu ̣ cho quá trình phân tích, nghiên cứu mô ̣t cách tỉ mỉ, chi tiế t Mẫu vâ ̣t nế u không đươ ̣c thu thâ ̣p, xử lý và bảo quản đúng cách sẽ gây những khó khăn nhấ t đinh ̣ cho quá trình nghiên cứu sau này và trở nên vơ giá tri.̣ Để có đươ ̣c mô ̣t bô ̣ mẫu vâ ̣t có chấ t lươ ̣ng thì chúng ta cầ n phải thực hiê ̣n thu thâ ̣p mẫu vâ ̣t ngoài thực điạ và tiế n hành xử lý ta ̣i chỗ, sau đó mẫu vâ ̣t sẽ đươ ̣c đưa về phòng thí nghiê ̣m để tiế p tu ̣c xử lý và lưu trữ Tuy nhiên, mỗi nhóm côn trùng có mô ̣t sinh cảnh số ng, tâ ̣p tính sinh thái ho ̣c cũng có kích thước, cấ u ta ̣o thể khác nhau, đó cầ n thiế t phải sử du ̣ng các phương pháp thu thâ ̣p, xử lý và bảo quản khác Mô ̣t bô ̣ mẫu vâ ̣t đươ ̣c thu thâ ̣p, xử lý theo đúng tiêu chuẩ n sẽ mang la ̣i những giá tri ̣to lớn về mă ̣t khoa ho ̣c cũng thực tiễn Về mă ̣t khoa ho ̣c, bô ̣ mẫu vâ ̣t sẽ là những sở dữ liê ̣u khoa ho ̣c quan tro ̣ng phu ̣c vu ̣ nghiên cứu các vấ n đề bản của sinh ho ̣c thuô ̣c các liñ h vực khác tiế n hóa, điạ sinh vâ ̣t, sinh thái, biế n đổ i khí hâ ̣u, ô nhiễm môi trường và cả các vấ n đề thực tiễn nông nghiê ̣p, y ho ̣c, văn hóa, nhân ho ̣c Về thực tiễn, bô ̣ mẫu vâ ̣t là mô ̣t kho dữ liê ̣u khoa ho ̣c lớn về các loài sinh vâ ̣t hiê ̣n có khu vực và nước, giúp các nhà nghiên cứu và ngoài nước đế n tham 17 quan, ho ̣c tâ ̣p, trao đổ i kinh nghiê ̣m Đồ ng thời, nó phu ̣c vu ̣ tố t cho công viê ̣c giảng da ̣y, đào ta ̣o và tham quan, góp phầ n nâng cao nhâ ̣n thức của người dân về các giá tri ̣ to lớn của sinh vâ ̣t nói chung và côn trùng nói riêng đố i với đời số ng người Phương pháp thu thâ ̣p, xử lý và bảo quản mẫu vâ ̣t ngoài thưc̣ điạ 2.1 Nhóm côn trùng thủy sinh (Aquatic insects) Đố i tượng: Là các nhóm côn trùng có đời số ng hoàn toàn dưới nước Nhê ̣n nước (Gerridae), nhiề u loài thuô ̣c bô ̣ Hai cánh (Diptera), Bo ̣ cánh cứng (Coleoptera)… hoă ̣c lồi trùng có giai đoa ̣n ấ u trùng số ng dưới nước Chuồ n chuồ n (Odonata), Muỗi (Culicidae), Cánh rô ̣ng (Megaloptera), Hai cánh (Diptera), Cánh nửa (Hemiptera), Cánh lông (Trichoptera), Phù du (Ephemeroptera)… Phương pháp thu mẫu: Sử du ̣ng loại lưới để thu mẫu ở hai khu vực nước đứng và nước chảy, bằ ng cách đă ̣t vợt lưới ngươ ̣c dòng chảy rồ i dùng chân khuấ y nhe ̣ nề n đáy phía mô ̣t lúc để cho côn trùng nước sống bám đáy trồi lên, theo dòng chảy di chuyể n vào lưới Ở những vi ̣ trí có bu ̣i thủy sinh và các rễ ven bờ ś i thì dùng vơ ̣t có cán dài su ̣c vào Đố i với những loài số ng dưới nề n đáy có đá lớn thì nhấ c đá lên và dùng panh gắ p mẫu mô ̣t cách nhe ̣ nhàng Hin ̀ h Mô ̣t số du ̣ng cu ̣ thu thâ ̣p côn trùng thủy sinh: (a): Khay đựng mẫu; (b): Lưới kéo sinh vâ ̣t phù du; (c): Vơ ̣t lưới cầ m tay; (d): Lưới Surber; (e): Lưới trôi; (f): Lưới na ̣o vét [4] Phương pháp bảo quản: Mẫu vâ ̣t thu được cho vào lo ̣ nhựa hoă ̣c ố ng nhựa có chứa sẵn dung dich ̣ cồ n ethanol 80% giúp cố định mẫu Nếu nồng độ 18 B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 cồn thấp mẫu dễ bị phân hủy, với nồ ng đô ̣ quá cao thì sẽ làm mẫu vâ ̣t bi ̣giòn, cứng và rấ t dễ bi ̣ hỏng Vì vâ ̣y thông thường bảo quản mẫu ở nồ ng đô ̣ khoảng 80% là thích hợp để bảo quản DNA nhằ m phu ̣c vu ̣ cho giải trình tự gen sau [9, 10] Mỗi hô ̣p, lo ̣ hay túi đựng mẫu đề u phải có etiket ghi la ̣i thông tin về điạ điể m, thời gian, người thu mẫu 2.2 Nhóm côn trùng ca ̣n bi ̣ dẫn dụ bởi ánh sáng đèn Đố i tượng: Là các nhóm côn trùng hoa ̣t đô ̣ng vào ban đêm bi ̣ thu hút bởi ánh sáng Ngài đêm (Lepidoptera), nhiề u loài Bo ̣ cánh cứng (Coleoptera), Cánh thẳ ng (Orthoptera), Cánh rô ̣ng (Megaloptera), Ve sầ u (Cicadae), Bo ̣ que (Phasmatodea)… Phương pháp thu thập: Sử du ̣ng các loa ̣i đèn ánh sáng trắ ng công suấ t cao (250W - đố i với bẫy màn) hoă ̣c các loa ̣i đèn có tia cực tím (bẫy nhỏ đă ̣t qua đêm) Cho ̣n vi ̣ trí thông thoáng, cao, rô ̣ng raĩ để ánh sáng có thể chiế u đế n đươ ̣c nhiề u vi ̣ trí rừng Ngoài sử dụng các loa ̣i bẫy đèn (Hình 2) để thu thâ ̣p Bắ t đầ u bẫy đèn vào lúc trời vừa tố i cho đế n gầ n sáng Cầ n phải thường xuyên theo dõi, ghi chép và tiế n hành thu thâ ̣p mẫu liên tu ̣c vì mỗi nhóm sẽ có mô ̣t khoảng thời gian hoa ̣t đô ̣ng riêng của chúng Lưu ý phương pháp bẫy đèn bằ ng bóng đèn trắ ng có công suấ t cao sẽ tăng hiê ̣u quả thu mẫu nế u sử du ̣ng vào những ngày có nhiề u mây mù và tránh những ngày sáng trăng Hin ̀ h Mô ̣t số bẫy đèn thường đươ ̣c dùng thu thâ ̣p côn trùng [8]: (a): Bẫy bằ ng đèn LED hoa ̣t đô ̣ng bằ ng pin; (b): Bẫy bằ ng đèn ánh sáng trắ ng công suấ t cao; (c): Bẫy đèn kiể u Robinson sử du ̣ng đèn huỳnh quang tia cực tím Phương pháp bảo quản: - Ngài đêm: Tiêm mô ̣t lươ ̣ng nhỏ dung dich ̣ ethyl acetate vào phầ n ngực để làm mẫu vâ ̣t chế t lâ ̣p tức, tránh viê ̣c mẫu đâ ̣p, giaỹ giu ̣a làm rách cánh, sau đó đă ̣t mẫu ở nơi khô thoáng để dung dich ̣ ethyl acetate thể mẫu bay hế t Sau khoảng 30 phút thì cho vào túi mẫu rồ i ghi đầ y đủ thông tin thời gian thu mẫu, điạ điể m, người thu thâ ̣p… và lưu trữ hô ̣p nhựa kín có ̣t chố ng ẩ m silicagel - Bo ̣ cánh cứng, Cánh thẳ ng, Cánh nửa và nhiề u loài côn trùng có cánh màng, cánh cứng: Cho mẫu vâ ̣t vào lo ̣ nhựa có chứa sẵn mô ̣t ít đã thấ m dung dich ̣ ethyl acetate để làm chế t mẫu vâ ̣t rồ i lấ y ra, bảo quản lo ̣ kín Trong trường hơ ̣p chuyế n dài ngày thì có thể cho mô ̣t ít cồ n ethanol (70 - 80%) để tránh mẫu bi ̣ thố i, hỏng - Đố i với các nhóm côn trùng có kích thước nhỏ thì tiế n hành tương tự trên, sau phải lấy khoảng 30 phút để ethyl acetate bay hế t, sau đó bảo quản lo ̣ nhựa có chứa sẵn cồ n ethanol 80% rồ i ghi la ̣i đầ y đủ thông tin mẫu vâ ̣t 2.3 Nhóm côn trùng ca ̣n số ng đấ t, lá mục, thảm thực vật Đố i tượng: Là các nhóm côn trùng số ng đấ t, lá mu ̣c, thảm thực vâ ̣t Kiế n B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 (Hymenoptera), Mố i (Isoptera), Gián (Blattodea), Bo ̣ đuôi ngắ n nhảy (Archaeognatha), Râ ̣n đấ t (Zoraptera), các loài thuô ̣c bô ̣ Zygentoma, các loài thuô ̣c ho ̣ Bo ̣ (Scarabaeoidea) và Cánh cô ̣c (Staphylinidae)… Phương pháp thu thập: Sử du ̣ng các loa ̣i bẫy (Hình 3) đă ̣t lòng đấ t, mă ̣t đấ t để thu 19 hút các nhóm côn trùng ca ̣n số ng đấ t, lá mu ̣c, thảm thực vâ ̣t nhờ mô ̣t số loa ̣i mồ i có mùi hương đă ̣c trưng dẫn du ̣ hoă ̣c dùng máy hút đơn để hút các mẫu vâ ̣t Với phương pháp sử du ̣ng các loa ̣i bẫy này thì chúng ta cầ n thường xuyên theo dõi hàng ngày để tiế n hành thu thâ ̣p mẫu vâ ̣t cũng thay thế mồ i mới Hin ̀ h Mô ̣t số loa ̣i bẫy dùng để bắ t côn trùng số ng đấ t, lá mu ̣c, thảm thực vâ ̣t: (a): Bẫy cố c; (b): Bẫy điã có mờ i; (c): Ớng hút đơn; (d): Bẫy cố c có dung dich ̣ [7, 8] Phương pháp bảo quản: Đa số các mẫu vâ ̣t thu đươ ̣c đề u có kích thước nhỏ nên bảo quản lo ̣ có chứa dung dich ̣ cồ n ethanol (70 80%) là phương pháp hiê ̣u quả nhấ t Trên lo ̣ đựng mẫu ghi đầ y đủ thông tin về mẫu vâ ̣t 2.4 Nhóm trùng cạn có cánh bay ban ngày Đớ i tượng: Là tấ t cả các nhóm côn trùng có cánh bay ban ngày Chuồ n chuồ n, Ong, Bo ̣ que, Ve sầ u, Bướm và Ngài đêm, Ruồ i, Bo ̣ cánh cứng, Châu chấ u… Phương pháp thu thập: Có rấ t nhiề u phương pháp thu thâ ̣p mẫu vâ ̣t côn trùng bay ở ngoài thực đia.̣ Ở chúng cung cấ p mô ̣t số phương pháp phổ biế n thường đươ ̣c sử du ̣ng: - Sử du ̣ng vơ ̣t cầ m tay: Đây là phương pháp phổ biế n nhấ t, để bắ t những loài côn trùng có kích thước khá lớn Đầ u tiên phải xác đinh ̣ mu ̣c tiêu và hướng di chuyể n của mu ̣c tiêu cầ n thu Hướng vơ ̣t về phía trước để đón đầ u đường bay của mu ̣c tiêu Khi mu ̣c tiêu bay la ̣i gầ n thì tiế n hành vơ ̣t và khóa vơ ̣t (Hình 4) Mẫu vâ ̣t sau đươ ̣c thu thâ ̣p cho vào các túi giấ y hình tam giác khơng thấm nước (giấy scan) (Hình 5) Hin ̀ h Phương pháp thu mẫu côn trùng bay bằ ng vơ ̣t cầ m tay: (a): Hướng miê ̣ng vơ ̣t về phiá côn trùng bay; (b): Đô ̣ng tác khóa vơ ̣t; (c) Bóp nhe ̣ phầ n ngực (đố i với Bướm ngày) Bên ca ̣nh đó, chúng ta có thể sử du ̣ng thêm mơ ̣t sớ loa ̣i bẫy có sử dụng mồi để tiế n hành thu thâ ̣p các mẫu vâ ̣t côn trùng bay khác (Hình 6a, b, c) Các loa ̣i bẫy này có mồi (trái lên men, mồi thối) dễ dẫn dụ côn trùng số loại Hin ̀ h Phương pháp gấ p túi và đă ̣t mẫu côn trùng dung dich ̣ (Bảng 1) mà khiến trùng bị chìm vào tiế p xúc Thường sử dụng loại khay màu vàng (Hình 6d) để đựng mồi dung dịch vì là màu sắ c hấ p dẫn côn trùng nhấ t [6] 20 B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 Hin ̀ h Mô ̣t số loa ̣i bẫy sử du ̣ng mồi: (a): Bẫy tổ ng hơ ̣p; (b): Bẫy lồ ng có mồ i ở dưới; (c): Bẫy đánh chă ̣n màn vải; (d): Khay màu vàng đựng mồi dung dich ̣ [1, 6] Bảng Chấ t lỏng sử du ̣ng các khay thu thâ ̣p [8] Một số dung dich ̣ thường đươ ̣c sử du ̣ng loại bẫy: - 78% nước + 20% propylene glycol + 1% propylen phenoxytol + 1% acid acetic và đươ ̣c thêm vào mô ̣t lươ ̣ng rấ t nhỏ chấ t tẩ y rửa - 50% nước + 50% ethylene glycol - 50% ethanol 80% + 50% ethylene glycol - Đối với số nhóm trùng bay hoạt động mạnh ban đêm (nhưng bị hấp dẫn ánh sáng đèn) sống chủ yếu chủ định chúng Bọ que hay Cánh thẳng cầ n tiế n hành sử du ̣ng đèn pin quan sát chủ vào ban đêm và dùng vơ ̣t có cán dài để thu thâ ̣p mẫu Phương pháp bảo quản: Với mỗi nhóm côn trùng bay sẽ có phương pháp xử lý ta ̣i thực điạ khác nhau: - Bướm: Tiế n hành bóp nhe ̣ vào phầ n ngực của mẫu vâ ̣t (Hình 4c) rồ i dùng panh đă ̣t vào túi mẫu Ghi đầ y đủ thông tin và để nơi thoáng mát - Chuồ n chuồ n: Mẫu vâ ̣t sau bắ t cho vào túi (tuyê ̣t đố i không đươ ̣c bóp ngực), để tự nhiên từ 12 - 24 giờ cho mẫu thải hế t phân thể ngoài và chế t hẳ n Sau đó ngâm mẫu vâ ̣t dung dich ̣ acetone từ - 12 giờ rồ i vớt để nơi khô thoáng cho bay hế t acetone, ghi đầ y đủ thông tin và bỏ các túi mẫu vào hô ̣p nhựa kín có ̣t chố ng ẩ m silicagel - Bo ̣ que: Bỏ mẫu vào lo ̣ đô ̣c có chứa ethyl acetate cho chế t hẳ n, sau đó đă ̣t mẫu vâ ̣t vào túi mẫu ố ng giấ y dài đươ ̣c ghim kín ở hai đầ u rồ i ghi đầ y đủ thông tin và để vào hô ̣p nhựa kín có ̣t chố ng ẩ m silicagel - Các nhóm có thể cứng, cánh cứng khác Ve sầ u, Ong, Ruồ i, Bo ̣ cánh cứng, Châu chấ u, Bo ̣ ngựa: Cho mẫu vâ ̣t vào lo ̣ đô ̣c có chứa sẵn ethyl acetate để giế t chế t mẫu vâ ̣t, sau đó lấ y ra, cho vào từng túi mẫu hoă ̣c bỏ chung vào mô ̣t lo ̣ nhựa kín Phương pháp bảo quản, xử lý và chế tác mẫu vâ ̣t phòng thí nghiêm ̣ 3.1 Bảo quản lỏng Đố i với các nhóm côn trùng có kích thước thể rấ t nhỏ thì thường đươ ̣c bảo quản các dung dich ̣ lỏng, chủ yế u là dung dich ̣ cồ n ethanol Tuy nhiên nế u bảo quản cồn ethanol quá lâu sẽ khiế n mẫu từ từ bi ̣ biế n chấ t, trở nên giòn hoă ̣c bi ̣ mấ t màu, rấ t khó để sử du ̣ng nghiên cứu, phân tích lâu dài [9] Để khắ c phu ̣c nhươ ̣c điể m này, có thể sử du ̣ng mô ̣t số loa ̣i dung dich ̣ khác dung dich ̣ hỗn hơ ̣p AGA (alcohol, glycerol và acid acetic) đố i với côn trùng nhỏ không cánh Ve bét (Ixodidae) và có cánh nhỏ Bo ̣ tri ̃ (Thysanoptera), dung dich acid lactic thích hơ ̣p với Rê ̣p ̣ (Aphidoidea) hoă ̣c Rê ̣p vảy (Coccoidea) [1] Các mẫu vâ ̣t nế u đươ ̣c bảo quản ethanol mô ̣t thời gian dài thì nên lưu giữ tủ đông la ̣nh ở nhiê ̣t đô ̣ -20 đế n -30°C [9] B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 21 Bảng Nơi thu mẫu và phương pháp bảo quản các loa ̣i côn trùng có kích thước nhỏ [8] Nhóm côn trùng Archaeognatha (Bo ̣ đuôi ngắ n nhảy) Blattodea (Gián) T T Môi trường số ng và cách thu thâ ̣p Hin ̀ h thức bảo quản Ethanol 80% Giai đoa ̣n số ng Tấ t cả Ghim Trưởng thành ́ Âu trùng - Trong thảm lá, dưới vỏ cây, khe đá mực nước cao - Lấ y xác lá, vỏ vào phễu sàng - Trong chuồ ng trại, dưới vỏ cây, Ghim trực tiế p Trưởng bu ̣i cây, hang, mô ̣t số thân gỗ thành - Tìm kiế m vào ban đêm, sử du ̣ng bẫy Ethanol 80% Chưa đèn, sàng lo ̣c, bẫy… trưởng thành - Chuồ ng trại, dưới vỏ cây, khúc gỗ, Ghim trực tiế p Trưởng Coleoptera (Bo ̣ cánh cứng) bu ̣i cây, hang, mô ̣t số thành thân gỗ Ethanol 85 - 90% Chưa - Sử du ̣ng ca ̣m bẫy, sàng lo ̣c, chong hoă ̣c tố t là cố trưởng thành đèn, vơ ̣t cầ m tay đinh ̣ dung dich ̣ KAA hoă ̣c Carnoy’s Trưởng Dermaptera - Dưới đá, khúc gỗ, vỏ cây, baĩ biể n và Bảo quản khô (Cánh da) cũng có hoa thành - Tìm kiế m vào ban đêm, sử du ̣ng phễu Cố đinh Tấ t cả ̣ bằ ng Tullgren hoă ̣c dùng ánh sáng dung dich ̣ Pampel’s rồ i bảo quản ethanol 80% Diptera (Ruồ i) - Khắ p mo ̣i nơi - Sử du ̣ng bẫy lưới, quét, ống hút, ánh bẫy đèn, mồ i nhử, khay vàng… Embioptera (Bo ̣ - Có phòng trưng bày lu ̣a, dưới chân dê ̣t) đá, điạ y, vỏ cây, thảm lá ba ̣ch đàn… - Dùng bẫy, quét, nhấ c các tảng đá để tìm Ephemeroptera - Giai đoa ̣n trưởng thành số ng ca ̣nh (Phù du) nguồ n nước, ấ u trùng có thảm thực vâ ̣t dưới nước, bi ̣ vùi bùn hoă ̣c cát, trú ẩ n dưới đá - Đánh lưới, na ̣o vét, sàng bùn và cát, nâng đá để tìm Cá thể trưởng thành sử du ̣ng lưới hoă ̣c tấ m che sáng (không phải bẫy đèn), vơ ̣t lưới cầ m tay Cho vào nước nóng rồ i bảo quản ethanol 80%, ghim gián tiế p hoă ̣c gắ n viên nang gelatine Ghim Euparal hoă ̣c Ethanol 80% Hỗn hơ ̣p ehanol 80% và glycerol 5% Trưởng thành Tấ t cả Tấ t cả 22 T T B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 Nhóm côn trùng Hemiptera (Cánh nửa) Hymenoptera (Cánh màng) Môi trường số ng và cách thu thâ ̣p Bo ̣ xít và - Trên ký chủ, gầ n vùng Ve, rầ y có nguồ n nước - Tiế n hành đâ ̣p và quét rồ i dùng phễu Tullgren, dùng bẫy chă ̣n bay, lưới nước, giăng lưới cao tìm Ve sầ u đă ̣c biê ̣t vào buổ i sáng Rê ̣p vảy - Trên ký chủ, những vi ̣ trí bi ̣ tổ n thương và lồ i cây, lá - Tìm kiế m ký chủ và các bô ̣ phâ ̣n bi ̣ tổ n thương ở thực vâ ̣t Rê ̣p - Trên ký chủ, đă ̣c biê ̣t ở vừng các chồ i và lá bi ̣ quăn, nhựa và các bô ̣ phâ ̣n dưới lòng đấ t - Đâ ̣p, quét, đă ̣t điã vàng, bẫy hút… Rầ y - Tìm thấ y ở mă ̣t dưới lá của phấ n ký chủ trắ ng - Thu thâ ̣p toàn bô ̣ các phầ n bi ̣ ảnh hưởng của vào túi bơm phồ ng rồ i kiể m tra phòng thí nghiê ̣m Hin ̀ h thức bảo quản Ghim Ethanol 80% Giai đoa ̣n số ng Trưởng thành Nhô ̣ng Ethanol 80% hoă ̣c gắ n kế t KOH, Canada balsam Tấ t cả Ethanol 80% hoă ̣c gắ n kế t KOH, Canada balsam Tấ t cả Ethanol 80% hoă ̣c qua KOH thành chloral-phenol sau đó nhuô ̣m bằ ng acid acetic và acid fuchsin rồ i gắ n kế t Canada balsam Rê ̣p - Phầ n lớn ngo ̣n của các Ghim gián tiế p ký chủ thuô ̣c chi Ba ̣ch đàn (Eucalyptus), chi Keo Ethanol 80% (Acacia) và mô ̣t số loài khác Qua KOH rồ i thuô ̣c ho ̣ Sim (Myrtaceae), Canada balsam chi Corymbia… - Thu thâ ̣p toàn bô ̣ các phầ n bi ̣ ảnh hưởng của vào túi bơm phồ ng rồ i kiể m tra phòng thí nghiê ̣m Ong - Hoa và tán lá, thảm thực Ghim trực tiế p, vâ ̣t thấ p và cỏ, thân các mẫu vâ ̣t rấ t và khúc gỗ bi ̣ nga,̃ làm tổ nhỏ thì bảo quản các lỗ mă ̣t đấ t bằ ng Euparal trố ng hoă ̣c các cành cây, lam kính các vâ ̣t nhô ở mái che, Ethanol 80% dưới mái hiên nhà, xung quanh vũng nước đo ̣ng ở những nơi khô cằ n Tấ t cả Trưởng thành Nhô ̣ng Các loài có kích thước nhỏ Trưởng thành Ấu trùng, nhô ̣ng B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 T T Nhóm côn trùng Môi trường số ng và cách thu thâ ̣p 23 Hin ̀ h thức bảo quản Giai đoa ̣n số ng Ghim gián tiế p Trưởng thành có kích thước lớn Ấu trùng, nhô ̣ng - Thu thâ ̣p bằ ng vơ ̣t cầ m tay, bẫy đánh chă ̣n, bẫy lồ ng, khay màu vàng Kiế n - Rô ̣ng raĩ , số ng tổ , mô ̣t số loài kiế n hoa ̣t đô ̣ng về đêm - Sử du ̣ng các loa ̣i mồ i thức ăn, tiế n hành đâ ̣p, xúc rồ i lo ̣c phễu Tullgren Ethanol 80% 10 Isoptera (Mố i) - Số ng theo đàn ở số ng hoă ̣c chế t, đấ t, rác và gỗ khô - Dùng xẻng để xúc đấ t, cuố c gò đấ t, dùng cưa rìu đu ̣c gỗ chế t, lưới-bẫy đánh chă ̣n đố i với các cá thể bay trưởng thành Ethanol 80% Tấ t cả 11 Lepidoptera - Phân bố rô ̣ng raĩ (Bướm Ngài) - Dùng vơ ̣t cầ m tay, bẫy mồi, bẫy đèn là hiê ̣u quả nhấ t Ghim trực tiế p Trưởng thành ́ Âu trùng lớn Cố đinh ̣ KAA rồ i bảo quản ethanol 80% Cố đinh Ấu trùng nhỏ ̣ nước nóng rồ i bảo quản ethanol 80% 12 Mantodea (Bo ̣ ngựa) - Cây bu ̣i, thảo mô ̣c hoă ̣c thân cây, mô ̣t số số ng mă ̣t đấ t - Tìm kiế m, dùng vơ ̣t lưới, mô ̣t số bi ̣ thu hút bởi ánh sáng 13 Mecoptera (Cánh dài) - Môi trường số ng ẩ m mát, thường gầ n Ghim trực tiế p, nước ngo ̣t, tâ ̣p trung nhiề u ở thảm thực mẫu vâ ̣t nghiên vâ ̣t thân thảo nhiề u lá cứu giải phẫu bảo - Dùng vơ ̣t lưới cầ m tay, bẫy đánh quản Kahle chă ̣n, bẫy ánh sáng hoă ̣c các bẫy côn hoă ̣c ethanol 80% trùng đấ t Cố đinh ̣ KAA và bảo quản ethanol 80% Trưởng thành - Giai đoa ̣n ấ u trùng số ng nước Cố đinh ̣ ngo ̣t FAA hoă ̣c ethanol - Đâ ̣p lá ven suố i, dùng bẫy đèn, vơ ̣t 80% và bảo quản lưới, dùng vơ ̣t và sàng thu thâ ̣p ấ u trùng ethanol dưới đá 80% Tấ t cả 14 Megaloptera (Cánh rô ̣ng) Ghim Tấ t cả Tấ t cả 24 T T 15 B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 Nhóm côn trùng Neuroptera (Cánh gân) Môi trường số ng và cách thu thâ ̣p - Rải rác hoă ̣c thảm thực vâ ̣t thấ p, mô ̣t số số ng gầ n nguồ n nước - Dùng vơ ̣t lưới, đâ ̣p lá, bẫy đèn, tìm kiế m cát Hin ̀ h thức bảo quản Ghim trực tiế p Cố đinh ̣ KAA hoă ̣c Carnoy rồ i bảo quản ethanol 80% Ghim trực tiế p Giai đoa ̣n số ng Trưởng thành kích thước lớn Trưởng thành có kích thước nhỏ và ấ u trùng 16 Odonata (Chuồ n - Giai đoa ̣n ấ u trùng số ng nước Trưởng chuồ n) ngo ̣t, cá thể trưởng thành thường ở gầ n thành vùng nước ngo ̣t Ethanol 80% Ấu trùng - Dùng vơ ̣t lưới để bắ t cá thể trưởng Ethanol 80% hoă ̣c Vỏ ấ u trùng thành, đố i với ấ u trùng thì dùng vơ ̣t gắ n thẻ thủy sinh thu thâ ̣p 17 - Cực kỳ phổ biế n, tấ t cả các môi Ghim trực tiế p Trưởng Orthoptera (Cánh thẳ ng) trường số ng (trừ biể n) thành có kích - Sử du ̣ng các loa ̣i bẫy côn trùng đấ t, thước lớn thảm thực vâ ̣t, chiế u sáng, vơ ̣t lưới… Cố đinh Ấu trùng và ̣ Pampel’s và bảo cá thể có quản thân mề m ethanol 80% 18 Phasmatodea - Trên cây, bu ̣i, thảm cỏ Ghim Trưởng (Bo ̣ que) - Tìm kiế m, dùng vơ ̣t lưới… thành Trứng cố đinh Trứng ̣ đươ ̣c giữ khô viên nang gelatine gắ n với cái đã đươ ̣c ghim 19 Phthiraptera - Ký sinh chim và đô ̣ng vâ ̣t có vú Gắ n lam Tấ t cả (Chấ y) - Kiể m tra vâ ̣t chủ và môi trường số ng kính của chúng Gắ n kế t ở KOH rồ i qua Euparal 20 - Giai đoa ̣n ấ u trùng số ng hoàn toàn FAA hoă ̣c ethanol Tấ t cả Plecoptera (Cánh úp) dưới nước, trưởng thành số ng xung 80% quanh khu vực có nguồ n nước - Đố i với trưởng thành dùng vơ ̣t lưới, đâ ̣p thực vâ ̣t, nhấ c các tảng đá lên để thu thâ ̣p ấ u trùng vào ban đêm hoă ̣c sáng sớm 21 Psocoptera (Bọ - Trong tán lá cây, bu ̣i cây, hoă ̣c Ethanol 80% hoă ̣c Tấ t cả nghiền) dưới vỏ cây, rác, hàng tường rào, gắ n Euparal các sản phẩ m gia du ̣ng và lưu trữ rồ i nhuô ̣m - Dùng vơ ̣t lưới, đâ ̣p thực vâ ̣t, tìm kiế m, acid fuchsin sử du ̣ng các loa ̣i bẫy, điã màu vàng hoă ̣c bẫy ánh sáng… B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 Hin Giai đoa ̣n ̀ h thức bảo quản số ng - Ký sinh chim và đô ̣ng vâ ̣t có vú Ethanol 80% hoă ̣c Tấ t cả - Tìm kiế m và thu thâ ̣p vâ ̣t chủ ký gắ n KOH sinh rồ i nhuô ̣m Euparal (nế u cầ n) 23 Ghim Con đực có Strepsiptera - Chủ yế u là ký sinh của Hemiptera (Cánh vuố t) (Cánh nửa), Hymenoptera (Cánh màng) cánh và Orthoptera (Cánh thẳ ng) Ethanol 80% hoă ̣c Tấ t cả - Tìm kiế m và thu thâ ̣p vâ ̣t chủ ký gắ n Euparal sinh 24 Thysanoptera - Môi trường số ng đa da ̣ng hoa, Gắ n Canada Tấ t cả (Cánh viề n) chuồ ng trại, mùn ba,̃ nấ m, sa ̣n mâ ̣t… balsam lam - Dùng lưới quét, đâ ̣p, kiể m tra lá và kính, mă ̣t lưng các lá bi ̣biế n da ̣ng, chiế t xuấ t từ hoa hướng lên 25 Thysanura (Ba - Trong các môi trường ẩ m ướt, dưới Ethanol 80% Tấ t cả đuôi) tán lá, vỏ cây, mô ̣t số số ng kế t hơ ̣p với mố i và kiế n, mô ̣t số la ̣i hoa ̣t đô ̣ng ở các khu vực khô cằ n vào ban ngày - Vứt xác lá hoă ̣c tước vỏ để vào bát nhựa có mă ̣t nhẵn rồ i lo ̣c phễu Tullgren 26 Ethanol 80% Ấu trùng Trichoptera - Gầ n khu vực có nước ngo ̣t và các hồ (Cánh lông) đá ven biể n Ethanol 80% Trưởng - Thu ấ u trùng bằ ng các loa ̣i lưới thủy hoă ̣c ghim thành sinh, tìm kiế m dưới đá và khúc gỗ trực tiế p nước, sàng chấ t nề n Cá thể trưởng thành tìm kiế m và thu thâ ̣p thí nghiê ̣m mô ̣t thời gian dài mới đươ ̣c đưa 3.2 Bảo quản khô để chế tác, mẫu đã bi ̣khô, thể cứng Những mẫu vâ ̣t đươ ̣c cho ̣n phải đảm bảo Vì vâ ̣y cầ n thiế t phải làm mề m thể mẫu vâ ̣t đươ ̣c xử lý tố t nhấ t ở hiê ̣n trường và mới có thể chế tác đươ ̣c không bi ̣ hư hỏng các bô ̣ phâ ̣n Sau đó, thông - Cách 1: Đă ̣t mẫu vâ ̣t lên mô ̣t tấ m xố p qua quá trình xử lý tố t ta ̣i phòng thí nghiê ̣m sẽ nhe ̣ rồ i đă ̣t vào mô ̣t hô ̣p nhựa lớn có nâng cao giá tri ̣ của mẫu vâ ̣t và cả bô ̣ sưu tâ ̣p thể chiụ đươ ̣c nhiê ̣t đô ̣ từ 100°C trở lên Giá tri ̣ của chúng đố i với viê ̣c nghiên cứu cũng Sau đó rót nước nóng (90 - 96°C) xung phu ̣ thuô ̣c rấ t nhiề u vào quá trình xử lý, bảo quanh đậy nắp lại Tu ̣t đớ i khơng rót quản mẫu vâ ̣t trước đó nước trực tiế p vào mẫu vâ ̣t và không để Quá trình xử lý bảo quản khô mẫu vâ ̣t ta ̣i mẫu vâ ̣t bi ̣ dính nước rồ i để từ 12 - 24 giờ phòng thí nghiê ̣m cu ̣ thể sau: (qua đêm) Hơi ẩ m bố c lên sẽ làm mề m 32.1 Làm mề m mẫu vật mẫu vâ ̣t mô ̣t cách từ từ Cần theo dõi để lau, tránh nước ngưng tụ lên nắp Các mẫu vâ ̣t mới đươ ̣c thu thâ ̣p còn tươi thì nhỏ xuống mẫu thể vẫn còn mề m nên có thể chế tác đươ ̣c T T 22 Nhóm côn trùng Siphonaptera (Bo ̣ chét) 25 Môi trường số ng và cách thu thâ ̣p Tuy nhiên phầ n lớn mẫu côn trùng đươ ̣c thu thâ ̣p ngoài thực điạ và lưu trữ phòng - Cách 2: Lót mẫu bằ ng mô ̣t lớp gòn diã rồ i thêm mô ̣t vài gio ̣t phenol tinh 26 B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 thể của chlorocresol hoă ̣c thymol Sau đó nhe ̣ nhàng đă ̣t mẫu vâ ̣t lên, để qua đêm hoă ̣c có thể đế n vài ngày đố i với những mẫu vâ ̣t có kích thước lớn Mẫu vâ ̣t đươ ̣c để nơi thoáng mát, tránh ánh nắ ng trực tiế p và thường xuyên kiể m tra để mẫu vâ ̣t tránh bi ̣ẩ m mố c - Cách 3: Tiêm dung dich ̣ amoniac 10% hoă ̣c nước nóng vào phầ n ngực đố i với mẫu vâ ̣t Bướm ngày và Bướm đêm có kích thước lớn [5] Đây là phương pháp tố n ít thời gian chờ ̣i mẫu vâ ̣t cho tới thể trở nên mề m Lưu ý: Không để mẫu vâ ̣t dưới ánh nắ ng Mă ̣t trời hoă ̣c gầ n nguồ n nhiê ̣t vì nước sẽ ngưng tu ̣ ở mă ̣t dưới của nắ p và rơi xuố ng mẫu vâ ̣t Đảm bảo rằ ng nhañ ghi thông tin của mẫu vâ ̣t đă ̣t bên hô ̣p phải đươ ̣c viế t bằ ng bút chì hoă ̣c bút mực không hoàn tan nước 3.2.2 Ghim mẫu Du ̣ng cu ̣: Kim ghim côn trùng (pins): là loa ̣i kim chuyên du ̣ng, bằ ng thép không gỉ, có chiề u dài 38 mm, gồ m nhiề u kích cỡ khác size 00, 01, 02, 03… Tùy theo kích thước mẫu mà sử du ̣ng các size kim khác cho phù hơ ̣p Hin ̀ h Ghim trực tiếp: (a): Bo ̣ cánh cứng; (b): Châu chấ u, Dế mèn; (c): Ruồ i; (d): Ngài; (e): Ong bắ p cày; (f): Cánh gân; (g): Chuồ n chuồ n; (h): Bo ̣, Ve sầ u, Rầ y [2] Ghim gián tiế p: Đố i với những loa ̣i côn trùng có kích thước cực kỳ nhỏ (< mm) thì phải dùng keo để dán mẫu vào mô ̣t tấ m bìa cứng (Hình 8) Keo đươ ̣c sử du ̣ng phải hòa tan nước hoă ̣c ethanol để có thể lấ y mẫu Bàn trải mẫu: Sử du ̣ng cho các loa ̣i côn trùng có cánh, gồ m hai loa ̣i là bàn trải mẫu có rañ h giữa và bàn trải mẫu không có rañ h - Bàn trải mẫu có rañ h giữa: Sử du ̣ng mô ̣t tấ m ván ép hoă ̣c xố p không thấ m nước làm nề n Dán hai miế ng gỗ mề m (hoă ̣c xố p) có kích thước khác (tùy theo chiề u dài sải cánh của đố i tươ ̣ng côn trùng) lên và chừa mô ̣t rañ h có chiề u rô ̣ng thích hơ ̣p Lưu ý chiề u cao của tấ m xố p đế n nề n của bàn trải mẫu không đươ ̣c cao quá so với kim ghim và chiề u rô ̣ng cầ n điề u chỉnh phù hơ ̣p với kích thước thể của côn trùng - Bàn trải mẫu không có rañ h: Đố i với bàn làm mẫu loa ̣i này thì cấ u ta ̣o rấ t đơn giản, chỉ là mô ̣t tấ m gỗ mề m hoă ̣c mô ̣t tấ m xố p để gắ n mẫu lên Phương pháp ghim mẫu: Ghim trực tiế p: Đố i tươ ̣ng là các loài côn trùng có kích thước lớn Vi ̣ trí ghim tùy theo từng đố i tươ ̣ng côn trùng khác phải tuân theo nguyên tắ c chung, đó là lê ̣ch sang bên phải của đường tru ̣c trung tâm của thể để tránh các đă ̣c điể m quan tro ̣ng bên bề mă ̣t lưng và bu ̣ng (Hình 7) Hin ̀ h Ghim gián tiếp: (a): Ong bắ p cày; (b): Mo ̣t; (c): Kiế n; (d): Bo ̣ cánh cứng [2] khỏi tấ m bìa cầ n Lựa cho ̣n tố t nhấ t là sử du ̣ng shellac, mô ̣t loa ̣i nhựa Rê ̣p vảy (Coccoidea) ta ̣o [1] Nguyên tắ c gắ p mẫu: Gắ p mẫu vâ ̣t theo chiề u dài thân của nó (Hình 10) B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 Hin ̀ h Nguyên tắ c gắ p mẫu vâ ̣t [7] Ghim mẫu: Kim ghim vào mẫu vâ ̣t phải vuông góc 90° ở cả mă ̣t trước và mă ̣t bên Vi ̣trí mẫu vâ ̣t nằ m khoảng 2/3 phía so với chiề u dài của kim (Hình 10a), không đươ ̣c quá thấ p hoă ̣c quá cao so với kim (Hình 10b, c) 3.2.3 Chế tác mẫu Chế tác mẫu vật bàn mẫu có rãnh: Đố i tươ ̣ng là các loa ̣i côn trùng cầ n có cánh đe ̣p, cầ n thiế t phải dang cánh để thể hiê ̣n đươ ̣c màu sắ c cánh của chúng Chuồ n chuồ n, Bướm và Ngài đêm, Ve sầ u, Ong, Bo ̣ ngựa, Bọ que… Phương pháp: Tiế n hành cho ̣n bàn làm mẫu có kích thước phù hơ ̣p với mẫu vâ ̣t Sau đó tiế n hành theo các bước sau: Hin ̀ h 10 Vi ̣trí ghim theo chiề u cao: (a): Tố t nhấ t; (b): Quá thấ p; (c): Không tố t [7] - Bước 1: Ghim giữ mẫu vâ ̣t ở tư thế thẳ ng đứng vào giữa rañ h cho đế n gố c cánh ngang bằ ng với bề mă ̣t của bàn (Hình 11a) - Bước 2: Dùng kim để cố đinh ̣ mẫu vâ ̣t ta ̣i vi ̣ trí giữa bu ̣ng và ngực, phầ n đầ u và ăng ten để ngăn mẫu vâ ̣t bi ̣ di chuyể n tiế n hành dang cánh (Hình 11b) - Bước 3: Dùng giấy đè lên để hai cánh dang (Hình 11c) - Bước 4: Dùng panh kẹp chỉnh sửa tư cánh, sau ghim cố định tư cánh (Hình 11d, e) [8] - Bước 5: Ghi đầ y đủ thông tin về mẫu vâ ̣t (Hình 11f) [2] Hin ̀ h 11 Chế tác mẫu vật Bướm bàn mẫu có rãnh: (a): Ghim mẫu vâ ̣t vào bàn trải mẫu; (b): Chin̉ h sửa tư thế ; (c): Trải cánh bằ ng giấ y đinh ̣ hình; (d): Chin̉ h sửa vi ̣trí cánh; (e): Ghim cố đinh ̣ toàn thể mẫu vâ ̣t; (f): Gắ n nhañ thông tin Chế tác mẫu vật bàn trải mẫu không có rãnh: Đố i tươ ̣ng Bo ̣ cánh cứng, bọ que số loài côn trùng khác không cần giang cánh Phương pháp: Ghim giữ mẫu vâ ̣t vào bàn trải mẫu, chỉnh sửa tư thế và ghim cố đinh ̣ các bô ̣ phâ ̣n các chi, ăng ten, đầ u, bu ̣ng Sau đó 27 Hin ̀ h 12 Chế tác mẫu vâ ̣t Bo ̣ cánh cứng bàn trải mẫu không có rañ h tiế n hành ghim nhañ với đầ y đủ các thông tin về mẫu vâ ̣t (Hình 12) Lưu ý là tùy theo từng loa ̣i Bo ̣ cánh cứng có hình thể khác thì cầ n có tư thế chân, ăng ten khác cho phù hơ ̣p và đe ̣p nhấ t 28 B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 3.2.4 Sấ y khô Các mẫu vâ ̣t sau đươ ̣c xử lý bàn trải mẫu thì phải đươ ̣c làm khô càng nhanh càng tố t cách sử du ̣ng phương pháp làm khô tự nhiên tủ sấ y - Làm khô tự nhiên: Sử du ̣ng các hô ̣p, tủ để chứa mẫu vâ ̣t điề u kiê ̣n khí hâ ̣u khô Không đươ ̣c phơi trực tiếp mẫu ánh sáng Mă ̣t trời và nhiê ̣t đô ̣ không quá 36°C để tránh làm giòn mẫu vâ ̣t, cánh có thể bi ̣ cong và màu sắ c bi ̣thay đổ i - Làm khô nhân tạo: Sấ y khô bằ ng tủ sấ y nhiê ̣t đô ̣ từ 36 - 40°C khoảng từ đế n ngày Sau hoàn thành viê ̣c sấ y khô thì tiế n hành tháo cẩ n thâ ̣n tấ t cả các kim gắ n Mẫu vâ ̣t Hin ̀ h 13 Các du ̣ng cu ̣ lưu giữ mẫu vâ ̣t côn trùng: (a): Hô ̣p lưu trữ mẫu vâ ̣t côn trùng; (b): Ngăn tủ với các khay đơn vi ̣[8] Kế t luâ ̣n Để có đươ ̣c mô ̣t bô ̣ mẫu vâ ̣t hoàn chỉnh có giá tri,̣ đảm bảo đươ ̣c đầ y đủ các yế u tố khoa ho ̣c cầ n phải nghiên cứu thâ ̣t kỹ lưỡng các đă ̣c điể m sinh thái, môi trường số ng và các đă ̣c điể m cấ u ta ̣o của từng nhóm côn trùng để có thể tiế n hành thu thâ ̣p, xử lý và bảo quản mô ̣t cách tố t nhấ t Mẫu thu đươ ̣c quá trình nghiên cứu ngoài thực điạ dài ngày cầ n phải có cách bảo quản cho phù hơ ̣p để tránh bi ̣ phân hủy, hư hỏng Ngâm mẫu vâ ̣t tạm thời thực địa chủ yếu dung dịch cồn ethanol khoảng 80% Sử dụng dung dịch acid acetate, sau lấ y sẽ đươ ̣c gắ n nhañ ghi đầ y đủ tấ t cả các thông tin Lưu giữ, bảo quản mẫu Bô ̣ sưu tâ ̣p côn trùng khô gắ n ghim thường đươ ̣c lưu giữ hô ̣p hoă ̣c tủ chứa mẫu vâ ̣t côn trùng Hô ̣p lưu trữ mẫu vâ ̣t côn trùng có nhiều kích thước, làm bằ ng gỡ hoă ̣c nhựa, có nắp gương nhựa suốt để quan sát mẫu bên Mặt hộp đươ ̣c đă ̣t tấ m xố p polyethylene màu trắ ng dày 10mm để ghim mẫu (Hình 13a) có chứa naphthalene (long naõ ) để phịng chống loại trùng nấm gây hại (Hình 13b) [8] Mẫu cần bảo quản phịng kín, có máy hút ẩm 24/24h Hin ̀ h 14 Mô ̣t số hô ̣p mẫu vâ ̣t côn trùng đươ ̣c xử lý và chế tác ta ̣i Trung tâm Nghiên cứu Côn trùng - Ký sinh trùng (Đa ̣i ho ̣c Duy Tân) acetone để giết ngâm mẫu vật có thể cứng, Bọ cánh cứng, Chuồn chuồn Mẫu vâ ̣t đưa về phòng thí nghiê ̣m thông qua hai hình thức bảo quản khô và bảo quản lỏng, tùy theo kích thước thể của từng loài côn trùng Đố i với những nhóm côn trùng có kích thước lớn, có cánh, màu sắ c thể đe ̣p cầ n phải chế tác mẫu vâ ̣t nhằ m lưu giữ đươ ̣c lâu dài Viê ̣c thu thâ ̣p, xử lý, bảo quản và chế tác mẫu vâ ̣t côn trùng là những nô ̣i dung cực kỳ quan tro ̣ng, đòi hỏi sự tỉ mỉ, cẩ n thâ ̣n, chính xác cao để nhằ m xây dựng đươ ̣c mô ̣t bô ̣ mẫu vâ ̣t có giá tri ̣đố i với công viê ̣c nghiên cứu và đào ta ̣o B.A.Phong, P Q Toản, N Q Phú / Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đại học Duy Tân 01(44) (2021) 16-29 Tài liêụ tham khảo [1] Eymann, J., Degreef, J., Häuser, C., Monje, J.C., Samyn, Y & Vanden, S.D (2010) Manual on field recording techniques and protocols for All Taxa Biodiversity Inventories (ATBIs) Abctaxa, 8(2): 331–653 [2] Gullan, P.J & Cranston, P.S (2005) The Insects: An Outline of Entomology Blackwell Publishing Ltd., Hoboken, 505 pp [3] Gullan, P.J & Cranston, P.S (2010) The Insects: An Outline of Entomology Wiley Blackwell, Chichester, West Sussex, 584 pp [4] Mccafferty, W.P & Provonsha, A.V (1983) Aquatic Entomology: The Fishermen's and Ecologists' Illustrated Guide to Insects and Their Relatives Jones and Bartlett Publishers, London, 448 pp [5] Millar, I.M., Uys, V.M & Urban, R.P (2000) Collecting and Preserving Insects and Arachnids A Manual for Entomology and Arachnology Ultra Litho (Pty) Ltd., Johannesburg, South Africa, 105 pp 29 [6] Russo, L., Stehouwer, R., Heberling, J.M & Shea, K (2011) The Composite Insect Trap: An Innovative Combination Trap for Biologically Diverse Sampling Plos One, (6): e21079 https://doi.org/10.1371/journal.pone.0021079 [7] Schauff, M.E (1986) Collecting and preserving insects and mites: Techniques and tools Systematic Entomology Laboratory, USA, 68 pp [8] Upton, M.S & Mantle, T.L (2010) Methods for collecting, preserving, and studying insects and other terrestrial arthoropods The Australian Entomological Society, Brisbane [9] Walker, A.K., Fitton, M.G., Vane-Wright, R.I & Carter, D.J (1999) Insects and other invertebrates, in: Carter, D & Walker, A K (Eds.) Care and Conservation of Natural History Collections Butterworth Heinemann, Oxford, 37–60 [10] Marquina, D., Ronquist, F & Lukasik, P (2020) The effect of ethanol concentration on the preservation of insects for biodiversity studies bioRxiv: 2020.03.05.978288v1  ... cứng, Châu chấ u… Phương pháp thu thập: Có rấ t nhiề u phương pháp thu thâ ̣p mẫu vâ ̣t côn trùng bay ở ngoài thực đia.̣ Ở chúng cung cấ p mô ̣t số phương pháp phổ biế n thường... đèn pin quan sát chủ vào ban đêm và dùng vơ ̣t có cán dài để thu thâ ̣p mẫu Phương pháp bảo quản: Với mỗi nhóm côn trùng bay sẽ có phương pháp xử lý ta ̣i thực điạ khác... người Phương pháp thu thâ ̣p, xử lý và bảo quản mẫu vâ ̣t ngoài thưc̣ điạ 2.1 Nhóm côn trùng thu? ?y sinh (Aquatic insects) Đố i tượng: Là các nhóm côn trùng có đời số ng hoàn