Nghiên cứu cố định enzyme lipase trên nano từ tính ứng dụng trong phản ứng chuyển hoá lipit

BӜGIÁO DӨ&9¬Ĉ¬27 ҤO ĈҤI HӐ&Ĉ¬1 ҸNG VÕ THӎTHÙY TRANG NGHIÊN CӬU CӔĈӎ NH ENZYME LIPASE TRÊN NANO TӮ TÍNH ӬNG DӨNG TRONG PHҦN ӬNG CHUYӆN HÓA LIPIT LUҰ19Ă17+ Ҥ&6Ƭ.+2$+ ӐC Ĉj1 ҹng ±1ăP BӜGIÁO DӨ&9¬Ĉ¬27 ҤO ĈҤI HӐ&Ĉ¬1 ҸNG VÕ THӎTHÙY TRANG NGHIÊN CӬU CӔĈӎ NH ENZYME LIPASE TRÊN NANO TӮ TÍNH ӬNG DӨNG TRONG PHҦN ӬNG CHUYӆN HĨA LIPIT Chuyên ngành: Hóa hӳXFѫ Mã sӕ: 60 44 01 14 LUҰ19Ă17+ Ҥ&6Ƭ.+2$+ ӐC 1Jѭ ӡLKѭ ӟng dүn khoa hӑc: TS NGUYӈN BÁ TRUNG Ĉj1 ҹng ±1ăP LӠ,&$0Ĉ2$1 7{L[LQFDPÿRDQÿk\ cơng trình nghiên cͱu cͯ a riêng tơi Các s͙li͏ u, k͇ t qu̫nêu lu̵ Q YăQ Oj ͹FWUXQJ Yjͳ FK˱D ng WK ÿ˱ ͫc công b͙trong b̭t kǤcơng trình khác Tác giҧluұ QYăQ Võ ThӏThùy Trang MӨC LӨC MӢĈҪU 1 Tính cҩ p thiӃ t cӫDÿ Ӆtài MөFÿtFKQJKLrQF ӭu Ĉ ӕLWѭ ӧng phҥ m vi nghiên cӭu Cách tiӃ p cұ QYjSKѭѫQJSKiSQJKLrQF ӭu éQJKƭDNKRDK ӑc thӵc tiӉ n cӫDÿ Ӆtài Bӕcөc luұ QYăQ &+ѬѪ1* : TӘNG QUAN 1.1 KHÁI QUÁT VӄCÔNG NGHӊNANO 1.1.1 Giӟi thiӋ u vӅcông nghӋnano 1.1.&ѫV ӣkhoa hӑc cӫa công nghӋnano 1.1.3 &iFSKѭѫQJSKiSÿL Ӆ u chӃvұ t liӋ u nano 1.2 TӘNG QUAN Vӄ NANO TӮTÍNH 1.2.1 Giӟi thiӋ u vӅhҥ t nano tӯtính 1.2.2 Cҩ u trúc hҥ t nano oxit sҳ t tӯ(Fe3O4 NPs) 10 1.2.3 Nhӳng tính chҩ Wÿ һ c biӋ t cӫa MNPs 13 1.2.4 &iFSKѭѫQJSKiSÿL Ӆ u chӃMNPs 15 Ĉ ӜBӄ19¬Ĉ Һ&75Ѭ1*& ӪA MNPs 22 1.3.1 Bҧ o vӋbҵ ng cách bao bӑ c bҵ ng lӟp phӫlà hӧp chҩ t hӳXFѫ 22 1.3.2 Bҧ o vӋbҵ ng cách bao bӑ c bҵ ng lӟp phӫlà hӧp chҩ WY{Fѫ 23 1.4 SӴBIӂ1Ĉ ӘI VÀ Ә1Ĉ ӎ NH CӪA MAGNETITE Fe3O4 24 1.5 ӬNG DӨNG SINH HӐC CӪA MNPs 24 1.5.1 Ӭng dө ng y sinh 24 1.5.2 Ӭng dө ng xӱOêP{LWUѭ ӡng 28 1.5.3 Chҩ t mang xúc tác 29 1.6 GIӞI THIӊU VӄENZYME 30 1.6.1 Khái quát vӅenzyme 30 &ѫFK Ӄxúc tác cӫa enzyme 30 1.7 ENZYME LIPASE 31 1.7.1 Giӟi thiӋ u vӅenzyme lipase 31 1.7.2 Nguӗ n thu nhұ n enzyme lipase 31 Ĉ һ FÿL Ӈ m cӫa lipase 32 7tQKÿ һ c hiӋ u 33 1.7.5 KhҧQăQJFK ӏ u nhiӋ t 34 1.7.6 KhҧQăQJFK ӏ u lӵc cҳ t 34 1.7.7 Trung tâm hoҥ Wÿ ӝQJYjFѫFK Ӄxúc tác 34 1.7.8 Ӭng dө ng cӫ a lipase 35 1.8 ENZYME CӔĈӎ NH 37 6ѫOѭ ӧc vӅenzyme cӕÿӏ nh 37 .ƭWKX ұ t cӕÿ ӏ nh enzyme chҩ t mang nano 38 1.9 PHҦN ӬNG THӪY PHÂN CӪA LIPIT 42 1.9.1 Lipit 42 1.9.2 Xúc tác enzyme cho phҧ n ӭng thӫy phân 45 1.10 TÌNH HÌNH NGHIÊN CӬU THUӜ&/Ƭ1+9 ӴC CӪ$Ĉ ӄTÀI 47 1JRjLQѭ ӟc 47 7URQJQѭ ӟc 52 &+ѬѪ1* : NGUYÊN LIӊ89¬3+ѬѪ1*3 HÁP NGHIÊN CӬU 54 2.1 HÓA CHҨT, DӨNG CӨ, THIӂT Bӎ 54 2.1.1 Hóa chҩ t 54 2.1.2. 'өQJFөWKLӃWEӏ 55 3+ѬѪ1*3+È31*+,Ç1& ӬU 55 2.2.1 Tә ng hӧp hҥ t nano sҳ t tӯ(Fe3O4NPs) bҵ QJSKѭѫQJSKiS ӗ ng kӃ t tӫa 55 2.2.2 BiӃ n tính bӅmһ t Fe3O4NPs bҵ ng cách phӫchitosan 57 2.2.3 Cӕÿӏ nh enzyme lipase lên hҥ t nano sҳ t tӯ(Fe3O4NPs)±CS 58 2.2.4 Phҧ n ӭng thӫy phân lipit vӟi xúc tác enzyme cӕÿӏ nh 59 3KkQWtFKÿ һ FWUѭQJY ұ t liӋ u 60 2.2.6 Phân tích sҧ n phҭ m phҧ n ӭng thӫy phân bҵ QJSKѭѫQJSKiS ҳ c kí GC-MS 62 &+ѬѪ1* : KӂT QUҦVÀ THҦO LUҰN 63 3.1 TӘNG HӦP Fe3O4NPs BҴ1*3+ѬѪ1*3+È3Ĉ ӖNG KӂT TӪA VÀ 3+Ỉ17Ë&+&È&Ĉ Һ&75Ѭ1*& ӪA NĨ 63 3.1.1 Tәng hӧp Fe3O4NPs 63 3KkQWtFKFiFÿ һ WWUѭQJF ӫa Fe3O4NPs 64 3.2 TNG H3 9ơ 3+ặ1 7ậ&+ & 75Ѭ1* &È& ӪA Ĉ VҰ &T LIӊU Fe3O4NPs ±CHITOSAN (Fe3O4NPs ±CS) 68 3.2.1.Tә ng hӧp vұ t liӋ u composit Fe3O4NPs ±CS 68 3KkQWtFKFiFÿ һ FWUѭQJF ӫa Fe3O4NPs - CS 68 3.3 CӔĈӎ NH ENZYME LIPASE LÊN BӄMҺT VҰT LIӊU Fe3O4NPS-CS 9¬;È&Ĉ ӎ 1+Ĉ Һ&75Ѭ1*6 ҦN PHҬM 73 3.3.1 Cӕÿӏ nh enzyme lipase lên bӅmһ t vұ t liӋ u Fe3O4NPs- CS 73 3KkQWtFKFiFÿ һ FWUѭQJ)H 3O4NPs- CS - lipase 74 3.4 PHҦN ӬNG THӪY PHÂN LIPIT DҪU THӴC VҰT VӞI XÚC TÁC NANO ENZYME TӮTÍNH Fe3O4NPs-CS-LIPASE 77 3.4.1 Phҧ n ӭng thӫy phân lipit dҫ u thӵc vұ WGѭ ӟi tác dө ng xúc tác cӫa nano enzyme tӯtính Fe3O4NPs-CS-Lipase 77 3.4.2 Phân tích sҧ n phҭ m phҧ n ӭng thӫy phân lipit dҫ u thӵc vұ WGѭ ӟi tác dө ng xúc tác cӫa nano enzyme tӯtính Fe3O4NPs-CS-Lipase 78 KӂT LUҰN VÀ KIӂN NGHӎ 81 TÀI 1LIӊU THAM KHҦO QUYӂ7Ĉ ӎ 1+*,$2Ĉ ӄTÀI (bҧ n sao) DANH MӨ&&È&7Ӯ9,ӂ77Ҳ7 FT-IR : Fourier Transform InfraRed GC-MS : Gas Chromatography - Mass Spectrometry GOD : Glucose Oxidase MNPs : Magnetic Nano Particles MRI : Magnetic Resonance Imaging SEM : Scanning Electron Microscope TEM : Transmission Electron Microscopy XRD : X-ray diffraction DANH MӨC CÁC BҦNG SӕhiӋ u Tên bҧng bҧng 1.1 Trang KӃ t quҧnghiên cӭX һ F ÿ WtQK thíchWѭѫQJ sinh hӑc ÿӝ c tính cӫ a vұ t liӋ u nano tӯtính có khơng có biӃ n 15 tính 3.1 Thành phҫ n cӫa axit béo có sҧ n phҭ m cӫa phҧ n ӭng thӫy phân 79 DANH MӨC CÁC HÌNH SӕhiӋ u Tên hình Trang 1.1 Mơ hình cҩXWU~FWLQKWKӇ)H 3O4 11 1.2 &ҩXKuQKVSLQFӫD Fe3O4 12 hình 1.3 &ѫӃFK hình thành phát triӇ n hҥ t nano dung dӏ ch 16 1.4 &ѫ FKӃ WѭѫQJ WiF WURQJ TXi WUuQK 18 013VEҵQJSKѭѫQJSKiSYLQKNJWѭ 1.5 (a) Nguyên tҳ c nhiӋ t phân bө L KѫL  ҳ cE YjPRQRDOFROFDRÿDYzQJJLiS sterol) 6WHUROOjQKӳQJGүQ[XҩWFӫDFL e, mà ÿҥLGLӋQTXDQWUӑQJFӫDFK~QJOjF 44 CH3 CH3 CH3 - acid beo - acid beo R C O CH3 R C O O CH3 CH3 O cholesterol egosterol F/LSLWSKͱFW̩S KiFYӟLOLSLWWӵGRFyQKLӋPYө WKD\ÿәL/LSLWSKӭFWҥSFyQKLӋPYө KjPOѭӧ QJNK{QJWKD\ÿәLKRһFWKD\ÿәLU - Photpholipit: este FӫDUѭӧXÿDFKӭFYӟLD[L FzQFyWKrPWKjQKSKҫQSKөNKiFQKѭ +uQK&̭XW̩RW͝QJTXiWF - Glycolipit: lipit phӭc tҥ p không chӭa phospho, thành phҫ n cӫa chúng có chӭD KH[RVH ӡng galactose WKѭ hay dү n xuҩ t cӫa galactose Thuӝc nhóm có MGDG, DGDG sulfolipit phәbiӃ n lөc lҥ p thành phҫ n khác cӫa tӃbào ӣlá 45 1.9.2 Xúc tác enzyme cho phҧn ӭng thӫy phân a B̫n ch̭ t cͯa trình thͯy phân Quá trình thӫy phân trình phân cҳ t mӝt sӕliên kӃ t nhӏGѭѫQJ (dispositive bonds) hӧp chҩ t hӳX Fѫ WKjQK ҫ Q FiF ÿѫQ WKjQ SKk Gѭ ӟi tác dө ng cӫa chҩ t xúc tác có sӵtham gia cӫDӟ Qѭ c phҧ n ӭng b Xúc tác sinh h͕c ph̫n ͱng thͯy phân lipit - &ѫ ӣlý VthuyӃ t vӅtác dө ng cӫa enzyme thӫy phân vào liên kӃ t nhӏ GѭѫQJOLrQN Ӄ t thӫy phân) ĈDV ӕenzyme thӫy phân (hydolase) khơng có nhóm ngoҥ i Trong trung tâm hoҥ Wÿ ӝ ng cӫ a chúng chӭa gӕFD[LWDPLQÿ һ c hiӋ u Ĉӕi vӟi hydrolase WKѭ ӡng chӭa hai nhóm chӭc 7KHR %HUQDUG 3XOOPDQ һ FӇ Yj m ÿL chung $OOEHUWH cӫa chҩ t bӏthӫy phân có chӭD³OLrQN Ӄ t bӏthӫ\SKkQ´GRQJX\rQ ӱWtFKÿL Ӌ n GѭѫQJW ҥ RQrQQJѭ ӡi ta gӑi ÿyOj³OLrQN Ӄ t nhӏGѭѫQJ´ Ví dө : Liên kӃ t phân tӱlipit mӝt liên kӃ t nhӏGѭѫQJ - &ѫFK Ӄtác dө ng cӫ DHQ]\PHK\GURODVHWKHRFѫ Ӄchung sau: E- + S+ Æ ES Æ WURQJÿy E: Enzyme 6&ѫFK ҩ t ES: Phӭc hӧp cӫa enzyme-FѫFK ҩ t P: Sҧ n phҭ m PE 46 *LDL ҥ Q ҫ ÿR có sӵhình thành phӭc hӧp trung gian ES, sӵtҥ o thành phӭc hӧp có thӇtheo hai kiӇ u sau: Ki͋ XF˯FK ͇thͱnh̭ t: kiӇ XKuQKWKjQKÿѫQJL ҧ n, tâm nhân (-) cӫ a HQ]\PHWѭѫQJWiFQKDQKY ӟi mӝt hai nguyên tӱtíFKÿL Ӌ QGѭѫQJF ӫ a liên kӃ t nhӏGѭѫQJ6DXNKLWѭѫQJWiFV ӁOjPWKD\ÿ ә i mұ Wÿ ӝelectron (e) làm suy yӃ u liên kӃ t nhӏGѭѫQJW ҥ RÿL Ӆ u kiӋ n cҳ Wÿ ӭt liên kӃ t Các nhà nghiên cӭu cho rҵ ng kiӇ X Fѫ ӃnàyFK xҧ y tâm nhân cӫa enzyme mҥ nh sӵ khuyӃ WÿL Ӌ n tӱcӫa liên kӃ t nhӏGѭѫQJO ӟn Ki͋ XF˯FK ͇thͱhaiO~Fÿ ҫ u nguyên tӱkhuyӃ WÿL Ӌ n tӱtrong liên kӃ t nhӏGѭѫQJFKѭDWK ӇÿtQKWU ӵc tiӃ p vào tâm nhân cӫa trung tâm hoҥ Wÿ ӝ ng cӫDHQ]\PHPjFѫFK ҩ t gҳ n vào tâm nhân bҵ ng mӝt phҧ n ӭng hóa hӑc ÿy giӳa tâm nhân ӣtrung tâm hoҥ Wÿ ӝ ng enzyme vӟi mӝt nhóm hóa hӑc ӣ vӏtrí gҫ n kӅvӟi liên kӃ t nhӏGѭѫQJWURQJFѫFK ҩ W'ѭ ӟi ҧ QKKѭ ӣng cӫa trung tâm hoҥ Wÿ ӝng cӫa enzyme sӁdҫ n dҫ QOjPWăQJP ӭFÿ ӝkhuyӃ WÿL Ӌ n tӱvӕ Qÿm tӗ n tҥ LWUѭ ӟFÿyE ҵ ng cách tҥ o liên kӃ WWѭѫQJ ӭng vӟLFѫFK ҩ t ӣnhӳng vӏtrí gҫ n vӟi liên kӃ t nhӏGѭѫQJ1K ӡvұ y, làm cho sӵphân bӕÿL Ӌ n tӱtrong phân tӱFѫFK ҩ t bӏWKD\ÿ әi theo chiӅ XKѭ ӟng cҫ n thiӃ t, khiӃ n cho liên kӃ t nhӏGѭѫQJ ÿѭ ӧFWăQJFѭ ӡng có thӇWѭѫQJWiFY ӟi tác nhân nhân cӫa trung tâm hoҥ W ӝ ng ÿcӫ a enzyme tiӃ n hành làm yӃ u liên kӃ t tiӃ QÿrQOLrQ Ӄ t bӏ thӫy phân có yӃ u tӕQѭ ӟc tham gia c M͡t s͙ÿ ̿FÿL ͋ m cͯa ph̫n ͱng thͯy phân bͧi enzyme Các yӃ u tӕÿL Ӆ u chӍ nh phҧ n ӭng thӫ\SKkQQѭ ӟc; nhiӋ Wÿ ӝ; pH cӫa môi WUѭ ӡng ѬXÿL Ӈ m: - Không tҥ o sҧ n phҭ m phөGRHQ]\PHFyWtQKÿ һ c hiӋ u cao - ĈL Ӆ u kiӋ n thӫy phân nhҽnhàng (nhiӋ Wÿ ӝthҩ S GRÿytW ҧ QKKѭ ӣQJÿ Ӄ n chҩ WOѭ ӧng sҧ n phҭ m 47 - ĈL Ӆ u chӍ nh sҧ n phҭ m theo ý muӕn, tiêu tӕQtWQăQJOѭ ӧng 1Kѭ ӧFÿL Ӈ m: - Thӡi gian thӫy phân dài dү Qÿ Ӄ n chu kǤsҧ n xuҩ t kéo dài - Muӕn có hiӋ u quҧcao phҧ i có chӃphҭ m enzyme tinh khiӃ t - Khó lӑ FKѫQWK ӫy phân bҵ QJD[LWGRÿyF ҫ n phҧ i nâng cao nhiӋ Wÿyÿ Ӈ lӑc, có thӇkhҳ c phөFQKѭ ӧFÿL Ӈ m bҵ ng enzyme axit 1.10 TÌNH HÌNH NGHIÊN CӬU THUӜ&/Ƭ1+9 ӴC CӪ$Ĉ ӄTÀI 1JRjLQѭ ӟc HiӋ n nay, nghiên cӭu vӅvұ t liӋ u hҥ t nano tӯlà mӝWKѭ ӟng nghiên cӭu ÿѭ ӧc nhà khoa hӑ c thӃgiӟLÿDQJW ұ p trung khai thác ӭng dөQJÿ һ c biӋ WWURQJOƭQKY ӵc y sinh, cҧ m biӃ n, xúc tác sinh hӑc nhӳQJѭ XÿL Ӈ m nәi bұ c cӫa loҥ i vұ t liӋ XQj\QKѭ [21] NtFKWKѭ ӟc hҥ t nano có thӇhiӋ u chӍ nh phù hӧp cho viӋ c gҳ n kӃ t phân tӱsinh hӑ c (tӃbào, protein, gen) hoһ c virut nhӡsӱdө QJFiFSKѭѫQJSKiSW әng hӧp khác nhau; (2) ttQKÿ ӗng nhҩ t cӫ a hҥ t cao, diӋ n tích bӅmһ t lӟn, tӯÿӝbão hòa lӟn ӣnhiӋ Wÿ ӝphòng; (3) tính WѭѫQJWKtFKVLQKK ӑc cao, dӉdàng biӃ n tính bӅmһ t bҵ QJFiFSKѭѫQJ KyDÿ Ӈgҳ n kӃ t phân tӱsinh hӑ c, phù hӧp cho ӭng dөng có liên quan ÿӃ n y sinh &KRÿ Ӄ n nay, viӋ c ӭng dөng vұ t liӋ u nano tӯWtQKÿ Ӈphân tách phân tӱsinh hӑc; xúc tác cҧ m biӃ n sinh hӑ c; vұ n chuyӇ n thuӕFÿ Ӄ n tӃbào mөc WLrXWURQJÿL Ӆ u trӏbӋ QKÿ һ c biӋ t tiêu diӋ t tӃEjRXQJWKѭÿmÿ ӧc nhà khoa hӑc tұ p trung nghiên cӭXYjEѭ ӟFÿ ҫ u mang lҥ i nhiӅ u kӃ t quҧkhҧquan, tҥ Rÿ ӝng lӵFWK~Fÿ ҭ y nghiên cӭXVkXÿ ӇNKDLWKiFѭXÿL Ӈ m nәi bұ c cӫa vұ t liӋ u ӭng dөQJOLrQTXDQÿ Ӄ n thӵc tӃ , cөthӇQKѭVDX a Phân tách ch͕n l͕c t͇bào +ѭ ӟng nghiên cӭu vӅphân tách tӃEjRÿѭ ӧc nhà khoa hӑ FÿDQJW ұ p trung khai thác dӵa vào tính chҩ t tӯcӫ a vұ t liӋ u nano oxit sҳ t Các phân tӱ 48 nhұ n dҥ QJÿѭ ӧc gҳ n bӅmһ t cӫD013Vÿmÿѭ ӧc biӃ n tính bӣi phân tӱ polyme Fy WtQK WѭѫQJ ӑ F FDR WKtFK QKѭ VLQK GH[WULQ K phospholipits Các phân tӱmөc tiêu sӁgҳ n kӃ Wÿ һ c hiӋ u vӟi phân tӱnhұ n dҥ QJ'ѭ ӟi tác dө ng cӫa tӯWUѭ ӡng ngồi, MNPs có gҳ n phân tӱmөc tiêu ÿѭ ӧc giӳlҥ i, phân tӱkhông gҳ n kӃ t sӁÿLUDQJRjL% ҵ ng cách này, nhà khoa hӑ FÿmWKjQKF{QJWURQJYL Ӌ c tách tӃbào hӗ ng cҫ u, tӃEjRXQJW phә i, vi khuҭ n, tӃEjRXQJWKѭXURORJLFDO b C̫ m bi͇ n sinh h͕c Sӱdө ng tính chҩ t tӯtính cӫa MNP kӃ t hӧp vӟLSKѭѫQJSKiS TXDQJ Ӈphát ÿ triӇ n hӋcҧ m biӃ n sinh hӑF ÿm ӧc ÿѭ nhà khoa hӑc nghiên cӭu thӵc hiӋ n Các hӋcҧ m biӃ n sӱdө ng phân tӱnhұ n dҥ ng có tính chҩ t phát huǤ nh quang gҳ n bӅmһ t cӫD013Vÿ Ӈ[iFÿ ӏ nh phân tӱmөc tiêu 'ѭ ӟLWiFÿ ӝ ng cӫa tӯWUѭ ӡng ngoài, MNPs sӁchuyӇ Qÿ ӝng, làm WăQJKL Ӌ u quҧWѭѫQJWiFJL ӳa phân tӱnhұ n dҥ ng vӟi tӃbào mөc WLrX.ƭ thuұ t làm giàu mү u mӟi cho phép nâng cao giӟi hҥ n phát hiӋ n, rút ngҳ n thӡi gian phân tích có thӇdùng mӝWOѭ ӧng lӟn mү u so vӟLNƭWKX ұ t phân tích miӉ n dӏ ch truyӅ n thӕng c D̳n truy͉ n thu͙ c ViӋ FGQJ013VQKѭOjFK ҩ t mang thuӕ Fÿ Ӄ n vӏtrí mөFWLrXWUrQ Ӈ WK{QJWKѭ ӡQJGQJÿ ӇÿL Ӆ u trӏcác khӕ LXXQJWKѭ ÿmÿѭ ӧc triӇ QNKDLYj tiӃ p tө c nghiên cӭu sâu rӝng thӡi gian gҫ Qÿk\3KѭѫQJSK lӧLtFKFѫE ҧ n: (i) thu hҽ p phҥ m vi phân bӕthuӕFWURQJFѫWK Ӈnên làm giҧ m tác dө ng phөcӫa thuӕc; (ii) giҧ POѭ ӧng thuӕ FYjWăQJFѭ ӡng hiӋ u quҧÿL Ӆ u trӏ Công nghӋnày lҫ Qÿ ҫ XWLrQÿѭ ӧc sӱdөQJÿ Ӈÿӏ QKKѭ ӟng thuӕFF\WRWR[LF Ӄ n tӃEjRXEѭ ӟXÿѭ ӧc cҩ y ӣÿX{LFKX ӝ t Nghiên cӭXEDQÿ ҫ u cho kӃ t quҧ khҧquan viӋ c giúp thuyên giҧ m khӕi u ӣnhóm chuӝ t có sӱdө ng thuӕc gҳ n MNPs, nhóm chuӝt có sӱdө ng liӅ u thuӕc cao gҩ p 10 49 lҫ QQKѭQJNK{QJJ ҳ n MNPs không thӇhiӋ n rõ rӋ t hiӋ u quҧÿL Ӆ u trӏ Các kӃ t quҧWѭѫQJW ӵFNJQJÿѭ ӧc công bӕWURQJÿL Ӆ u trӏtiêu diӋ t khӕ i u lӧn thӓ Nghiên cӭu dү n truyӅ n thuӕ F ÿm ѭӧc thӱ ÿnghiӋ m rҩ t thành công ÿӝ ng vұ Wÿ һ c biӋ t ӭng dөQJÿ ӇÿL Ӆ u trӏu não ViӋ c dү n truyӅ n thuӕFÿ Ӄ n u não rҩ t khó khă n thuӕc cҫ n phҧ i vѭӧt qua hàng rào ngă n cách giӳa não máu, nhӡcó trӧgiúp cӫa MNPs tӯcó kích thѭӟc 10-20 nm, viӋ c dү n truyӅ n thuӕc có hiӋ u quҧhѫn rҩ t nhiӅ u ViӋ c áp dө ng phѭѫ QJSKiSQj\ ӕi vӟi ngѭӡLWX\ÿmFyP ӝt sӕthành công, nhѭng cịn khiêm tӕn d Xúc tác enzyme tͳtính Mӝ t nhӳng ӭng dөng quan trӑ ng cӫa vұ t liӋ u MNP dùng làm chҩ WPDQJÿ Ӈcӕÿ ӏ nh enzyme ±chҩ t xúc tác phҧ n ӭng sinh hóa nhӳQJ ѭX Ӈ m cӫaÿL vұ t liӋ u mang lҥ L &KR Ӄ Q QD\ ÿ Ӆ ÿm u chҩ t Fy Q PDQJNKiFQKDXÿѭ ӧc lӵa chӑn, ӭng dө ng nhiӅ XOƭQKY ӵFQKѭ[~F sinh hӑc, thiӃ t bӏy tӃ , phân tán thuӕc cҧ m biӃ n sinh hӑFQKѭ polyme tә ng hӧp, polyme sinh hӑ c, hydrogels, chҩ W PDQJ Y{ ӛ i loҥ iFѫ« chҩ t PDQJFyѭXYjQKѭ ӧFÿL Ӈ m riêng Vì vұ y, viӋ c lӵa chӑn chҩ t mang phù hӧp tùy thuӝ c vào cơng nghӋhiӋ n có, u cҫ u vӅÿӝbӅ QFѫK ӑc, sӵWѭѫQJWiF ӳa chҩ t mang vӟi dung môi, mӭFÿ ӝyêu cҫ u vӅÿ ӝtinh khiӃ t cӫ a sҧ n phҭ m, khҧ QăQJWKXK ӗ i tái sӱdө ng lҥ L[~FWiF« So vӟi chҩ t mang hiӋ QÿDQJÿѭ ӧc sӱdө ng rӝ ng rãi, MNP thӇhiӋ n nhӳQJѭXÿL Ӈ m nәi bұ FKѫQF ҧ ÿiS ӭng yêu cҫ u khҳ t khe cӫ a xúc tác sinh (1) hӑ FQKѭ ÿ ӝWѭѫQJWKtFKVLQKK ӑc cao nên hҥ n chӃtӕ LÿDYL Ӌ c giҧ m hoһ c mҩ t hoҥ t tính cӫa enzyme sau cӕÿӏ nh; (2) diӋ n tích bӅmһ t riêng lӟn nên WăQJFѭ ӡng khҧQăQJFK ҩ t chӭa enzyme cҧ i thiӋ n khҧQăQJWѭѫQ g tác giӳa HQ]\PHYjFѫFK ҩ t; (3) ÿ ӝbӅ n cao cӫD013Vÿѭ ӧFGX\WUuNKLFy biӃ n tính phù hӧp; (4) tính chҩ t siêu tӯcӫa MNPs cho phép tách loҥ i hoàn toàn enzyme khӓ i sҧ n phҭ m phҧ n ӭng tái sӱdө ng chúng Chính nhӳQJѭX 50 ÿL Ӈ m nә i bұ c mà thӡi gian gҫ Q ÿk\ ӟng nghiên Kѭcӭu sӱdө ng MNPs làm chҩ WPDQJHQ]\PHWKXK~Wÿѭ ӧc nhiӅ u nhà khoa hӑc thӃgiӟi tұ p trung nghiên cӭu, giҧ i quyӃ t vҩ Qÿ Ӆcó liên quan vӟi mөc tiêu trì tӕLÿDKR ҥ t tính enzyme sau cӕÿ ӏ QKWUrQ013Vÿ Ӈcó thӇtái sӱdөng nhiӅ u lҫ n Các nhà khoa hӑF ÿm QJKLrQ ӭu giҧ i quyӃ t F yêu cҫ u ӣnhiӅ u SKѭѫQJGL Ӌ n khác nhau, cөthӇQKѭVDX - Liên quan v͉tính ͝Qÿ ͓ nh ÿ ͡ho̩ Wÿ ͡ng cͯa enzyme c͙ÿ ͓ nh ĈӇӭng dөng enzyme cӕÿ ӏ nh sҧ n xuҩ t công nghiӋ p, ÿ ӝә nÿ ӏ nh hoҥ Wÿ ӝcӫ a xúc tác hai yӃ u tӕthen chӕ t cҫ n quan tâm ĈӇÿҧ m bҧ Rÿѭ ӧc yêu cҫ u này, Yang cӝ ng sӵÿm ÿyQJ JyL HQ]\PH ӭu QJ enzyme glucose oxidase) nӅ n polyme poly (acid pyrrole-N- propylsulfonic) ÿѭ ӧc bao bӑc bên MNPs KӃ t quҧnghiên cӭu cho thҩ y vӅFѫ ҧ nE enzyme cӕÿӏ nh bҵ QJ SKѭѫQJ SKiS ҥ W ӝng ÿtӕ JyL t vӟi sӵQj\ WKD\ÿ ә i pH, dung môi hӳXFѫYjQKL Ӌ Wÿ ӝcao so vӟi enzyme dҥ ng tӵdo Sӵә Qÿ ӏ nh vӅphân tán cӫa hӋxúc tác FNJQJOjP ӝt yӃ u tӕkhá quan trӑ ng quyӃ W ӏ QKÿ ÿ ӝhoҥ W ӝng ÿcӫa enzyme Enzyme cӕÿӏ nh trӵc tiӃ p MNPs trҫ n dӉGjQJ QJѭQJ Ӄ t N trình tách thu hӗ i tái sӱdө ng bҵ ng tӯ WUѭ ӡQJGRÿyKR ҥ t tính cӫa enzyme MNPs sӁbӏgiҧ m mӝt phҫ n sӵhҥ n chӃ tiӃ p xúc giӳDHQ]\PHYjFѫFK ҩ t phҧ n ӭng Vì vұ y, viӋ FGX\WUuÿ ӝbӅ n phân tán cӫa enzyme nano tӯWtQKOjÿL Ӆ u cҫ n thiӃ t Rossi cӝ ng sӵÿmEL Ӄ n tính bӅmһ t MNP bҵ QJ DPPRQLXP Ӈcӕ SHUVXOIDWH ÿ ӏ nh enzyme glucose ÿ oxidase [27] Tuy nhiên, hoҥ t tính cӫa enzyme chӍcịn 50% so vӟLEDQÿ ҫ u sau lҫ n sӱdөng Ngồi ra, nhiӅ u nhóm nghiên cӭXFNJQJÿmF ӕÿ ӏ nh enzyme lên bӅmһ W 013V ӧc bӑcÿѭ bҵ QJ VLOLFD ӭF QăQJ VDX ҵ ngÿy KyD nhóm FKE amino ViӋ c bӑ c MNP bҵ QJ VLOLFDӧcJL~S phҫ n hiӋ WUiQK Qӧ Wѭ ng ÿѭ QJѭQJ Ӄ W NQKѭQJ ү Q FKѭD ӫY lӟQ Ӈÿ ÿҧ m bҧ R ӝÿ bӅ n cӫ a xúc tác enzyme MNP cho viӋ c tái sӱdө ng trӣlҥ i Lee cӝ ng sӵÿmQJKLrQF ӭu enzyme 51 cӕÿ ӏ nh MNPs có bӑc silica, kӃ t quҧcho thҩ y hoҥ t tính cӫ a enzyme liên tөc giҧ m suӕ t trình tái sӱdө ng Sau 10 chu kì xúc tác, hoҥ t tính cӫa enzyme chӍcòn lҥ i 60% so vӟLEDQÿ ҫ u 1JRjLUDSKѭѫQJSKiSF ӕÿ ӏ QKHQ]\PHFNJQJ ҧ QKKѭ ӣQJÿ Ӄ Qÿ ӝә Qÿ ӏ nh cӫa hӋxúc tác %D SKѭѫQJ ҧ Q SKiS WKѭ ӡQJ ӧcFѫ ÿѭ sӱdө QJ E Ӈcӕ ÿÿӏ nh enzyme nӅ n chҩ t mang, bao gӗm: liên kӃ t cӝ ng hóa trӏ , hҩ p phөvұ t lý, gói cҩ u trúc polyme Cӕÿӏ nh bҵ ng liên kӃ t cӝ ng hóa trӏcó thӇgiúp enzyme gҳ n chһ t lên bӅmһ t chҩ WPDQJ013QKѭQJKR ҥ Wÿ ӝcӫa enzyme có thӇbӏgiҧ m mӝt phҫ n sau cӕÿ ӏ QK7URQJ ұ t cӕNƭ ÿӏ nh enzyme WKXbҵ ng SKѭѫQJSKiSY ұ t lý, enzyme gҳ n lên chҩ t mang MNP bҵ QJWѭѫQJWiF Van der Waals hoһ F WѭѫQJWiF ӷQѭ ӟc 7X\ NQKLrQұ GRWѭѫQJ W OêOjWѭѫ Wi yӃ u nên enzyme dӉdàng tách khӓ i chҩ W PDQJ 013V Ӆ u kiӋ nWURQJ khҳ c ÿ nghiӋ t cӫa trình hӗ i sinh tái sӱdө ng xúc tác Lee cӝ ng sӵÿmF ӕ ÿӏ nh enzyme lipase bӅmһ t nano tӯkӷQѭ ӟFQJѭ ӡi ta nhұ n thҩ y hoҥ t tính cӫa enzyme mҩ t khoҧ ng 50% sau lҫ n sӱdө QJ ҫ uÿ tiên 1JX\rQӧ QKkQ c giҧ i thích hiӋ QWѭ ӧng giҧ i hҩ p phөenzyme khӓ i chҩ t mang MNP trình xúc tác cho phҧ n ӭQJ&NJQJF ó mӝt vài nghiên cӭu vӅÿyQJ gói enzyme nӅ n silica Tuy nhiên, giӕ QJQKѭSKѭѫQJSKiS nӅ n polyme khơng có hҥ t nhân tӯWtQKSKѭѫQJSKiSQ ӝc lӝ nhiӅ u yӃ XÿL Ӈ m sӵWѭѫQJWiFK ҥ n chӃgiӳa enzyme chҩ t mang nên có hiӋ QWѭ ӧng enzyme bӏtách khӓ i chҩ t mang suӕt trình phҧ n ӭng tái chӃ - /LrQTXDQÿ ͇ Qÿ ̿c tính tͳcͯDHQ]\PH013ÿ ͋tách tái s͵dͭng DӉdàng tách khӓ i hӛ n hӧp sҧ n phҭ m phҧ n ӭng bҵ ng cách áp dөng tӯ WUѭ ӡng bên mӝW WtQK ÿӝ F QăQJ ÿiR cӫ a enzyme cӕÿ ӏ nh MNPs mà enzyme cӕÿӏ QK NKiF NK{QJ ӧc Vӟi mөc Fy tiêu Fy ÿѭ ӧcÿѭ hiӋ u quҧtách tӕ t nhҩ t, nhà khoa hӑF FNJQJ ұ p trung ÿm nghiên W cӭu 52 SKѭѫQJSKiSW әng hӧS013VFyÿ ӝtӯbão hòa cao tӯGѭE ҵ ng bҵ ng SKѭѫQJ pháp khác Lee cӝng sӵÿmQJKLrQ ӭu tәng hӧp F MNP siêu tӯWKHRSKѭѫQJSKiSW ә ng hӧp mi[HQÿ ҧ o 7X\QKLrQWtQK ӗng nhҩ t vӅ NtFKWKѭ ӟFYjÿ ӝbӅ n cӫa hҥ t nano tӯvү n vҩ Qÿ Ӆcҫ Qÿѭ ӧc nghiên cӭu sâu rӝng - /LrQTXDQÿ ͇ n kh̫QăQJSKkQWiQ WURQJP{LWU˱ ͥQJQ˱ ͣc Do phҧ n ӭng sinh hóa xҧ \UDWURQJGXQJP{LOj ӟc, vұ \ÿ ӝbӅ n cӫD 013V WURQJ ӡQJ ӟcQѭ P{L yӃ u tӕWUѭ cҫ Q TXDQ Ӈÿҧ WkP m bҧ o cácÿ enzyme MNP có khҧQăQJ ҥ W ӝ KR ng ÿtӕ t, tránh hiӋ Qӧ Wѭ QJ QJѭQJ Ӄ t làm N giҧ m hoҥ t tính cӫa enzyme cӕÿӏ nh hҥ n chӃOLrQTXDQÿ Ӄ n sӵtiӃ p xúc giӳD HQ]\PH ҩ t Yj Hong vàFѫ cӝ FK ng sӵÿm tә ng hӧp polyme ѭD Qѭ ӟc ÿ Ӈbӑc MNPs bҵ ng phҧ n ӭng trùng hӧp quang hóa tҥ i chӛ[23] Lee ÿm chӭng minh WtQKѭDQѭ ӟc cӫa polyme bҵ ng khҧQăQJSKk n tán tӕ t Qѭ ӟF QKѭQJ Ӆ n NK{QJ tұ p hӧp E dung môi hӳX Fѫ -hexanQ[24] 1JRjLUDFiFKѭ ӟng nghiên cӭXOLrQTXDQÿ Ӄ n chӭFQăQJKyDE Ӆmһ t MNPs FNJQJ ӧc nghiên ÿѭ cӭu rҩ W ÿD ҥ ng CóGrҩ t nhiӅ u công bӕsӱdөng amine chҩ t chӭFQăQJKyDWUXQJJL an cho MNPs ViӋ c sӱdө ng nhóm chelating FNJQJ mӝt NƭWKX ұ t phәbiӃ Qÿѭ ӧc sӱdө ng 7URQJQѭ ӟc HiӋ QQD\Kѭ ӟng nghiên cӭu vӅvұ t liӋ X013ÿmYjÿDQJÿ ӧc nhà khoa hӑFWURQJQѭ ӟc tiӃ p cұ n mӝt vài ӭng dө ng, mà chӫyӃ u chӍdùng làm vұ t liӋ u hҩ p phөÿӇtách kim loҥ i nһ QJ WURQJ ӟc Tuy nhiên, Qѭ viӋ c sӱ dө ng vұ t liӋ u cho mөFÿtFKFyJLiWU ӏFDRKѫQOLrQTXDQÿ Ӄ n ӭng dө ng y sinh vү QFKѭDÿѭ ӧFTXDQWkPÿ һ c biӋ t viӋ c sӱdө ng MNPs làm chҩ t mang xúc tác enzyme Bên cҥ QKÿyKѭ ӟng nghiên cӭu vӅ[~FWiFHQ]\PHÿѭ ӧc nhà khoa hӑ F WURQJ ӟc tұ p trung Qѭ khai thác cho ӭng dө QJ NKiF QKDX ӱlý Q 53 Qѭ ӟc thҧ i, chӃbiӃ n thӵc phҭ m, thuӝc da, phân tích nhanh, « Tuy nhiên, enzyme chӍÿѭ ӧc nghiên cӭu sӱdөng ӣdҥ ng hòa tan hoһ c cӕÿӏ nh nӅ n thô (polyme hӳXFѫKR һ c vұ t liӋ XY{Fѫ QrQKL Ӌ u quҧWѭѫQJWiFJL ӳa enzyme vӟLFѫFK ҩ t không lӟn nguyên nhân gây giҧ m hiӋ u suҩ t chuyӇ n hóa Ngồi ra, viӋ c tái sӱdө ng chúng vү n vҩ Qÿ Ӆcҫ Qÿѭ ӧc xem xét HiӋ n nay, nghiên cӭu nano enzyme tӯWtQKOjKѭ ӟQJÿLP ӟi thӃgiӟi Tuy nhiên, ӣViӋ W1DPKѭ ӟng nghiên cӭu vү QFKѭDÿѭ ӧFTXDQWkP mӭc hҥ n chӃvӅthông tin khoa hӑFFNJQJQKѭÿzLK ӓi sӵhiӇ u biӃ t sâu rӝ ng ӣnhiӅ XOƭQKY ӵc cơng nghӋcó liên quan Chính nhӳng lí trên, viӋ c triӇ n NKDLKѭ ӟng nghiên cӭu ӣViӋ W1DPOjÿL Ӆ u cҫ n thiӃ t 54 &+ѬѪ1* NGUYấN LI89ơ3+1*3+ẩ31*+,ầ1 U 2.1 HểA CHT, DNG C, THIT B 2.1.1 Hóa chҩt &iFKyDFKҩWÿѭӧFVӱGөQJWURQJÿ NKLӃW pKkQ WtFK 6ҳW,, ...BӜGIÁO DӨ&9¬Ĉ¬27 ҤO ĈҤI HӐ&Ĉ¬1 ҸNG VÕ THӎTHÙY TRANG NGHIÊN CӬU CӔĈӎ NH ENZYME LIPASE TRÊN NANO TӮ TÍNH ӬNG DӨNG TRONG PHҦN ӬNG CHUYӆN HĨA LIPIT Chun ngành: Hóa hӳXFѫ Mã sӕ: 60 44 01 14 LUҰ19Ă17+... - lipase 74 3.4 PHҦN ӬNG THӪY PHÂN LIPIT DҪU THӴC VҰT VӞI XÚC TÁC NANO ENZYME TӮTÍNH Fe3O4NPs-CS -LIPASE 77 3.4.1 Phҧ n ӭng thӫy phân lipit dҫ u thӵc vұ WGѭ ӟi tác dө ng xúc tác cӫa nano. .. tác cӫa nano enzyme t? ?tính Fe3O4NPs-CS -Lipase 77 3.4.2 Phân tích sҧ n phҭ m phҧ n ӭng thӫy phân lipit dҫ u thӵc vұ WGѭ ӟi tác dө ng xúc tác cӫa nano enzyme t? ?tính Fe3O4NPs-CS -Lipase 78