1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Nghiên cứu nuôi cấy in vitro rễ cây mật nhân eurycoma longifolia jack

48 4 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 48
Dung lượng 843,72 KB

Nội dung

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MÔI TRƯỜNG MAI THỊ HUYỀN NGHIÊN CỨU NUÔI CẤY IN VITRO RỄ CÂY MẬT NHÂN (EURYCOMA LONGIFOLIA JACK) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Đà Nẵng – Năm 2016 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MÔI TRƯỜNG MAI THỊ HUYỀN NGHIÊN CỨU NUÔI CẤY IN VITRO RỄ CÂY MẬT NHÂN (EURYCOMA LONGIFOLIA JACK) Ngành: CỬ NHÂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC Người hướng dẫn: TS Võ Châu Tuấn Đà Nẵng – Năm 2016 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu khóa luận trung thực, khách quan chưa cơng bố cơng trình khác Đà Nẵng, ngày 28 tháng năm 2016 Sinh viên MAI THỊ HUYỀN LỜI CẢM ƠN Đề hoàn thành khóa luận tơi xin chân thành cảm ơn Trường Đại học Sư phạm, khoa Sinh – Môi trường, môn công nghệ sinh học, quý thầy cô tận tình dạy dỗ, bảo cung cấp cho tơi nhiều kiến thức bổ ích Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Võ Châu Tuấn, thầy giáo trực tiếp hướng dẫn bảo tận tình cho tơi từ nhận đề tài hồn thành khóa luận Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc đến gia đình, bạn bè thương u ln động viên, khích lệ tơi vật chất lẫn tinh thần để tơi đạt kết tốt Xin chân thành cảm ơn! Đà Nẵng, tháng năm 2016 Sinh viên thực MAI THỊ HUYỀN MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH DANH MỤC CÁC BẢNG MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề 10 Mục tiêu đề tài 11 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 11 3.1 Ý nghĩa khoa học 11 3.2 Ý nghĩa thực tiễn 11 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .12 1.1 NUÔI CẤY RỄ BẤT ĐỊNH VÀ CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG TRONG NUÔI CẤY RỄ IN VITRO Ở THỰC VẬT .12 1.1.1 Nuôi cấy rễ bất định 12 1.1.2 Một số yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng rễ bất định nuôi cấy in vitro 12 1.2 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU NUÔI CẤY RỄ BẤT ĐỊNH IN VITRO 15 1.2.1 Một số nghiên cứu giới 15 1.2.2 Một số nghiên cứu nước .16 1.3 GIỚI THIỆU VỀ CÂY MẬT NHÂN 20 1.3.1 Phân bố 20 1.3.2 Đặc điểm hình thái 20 1.3.3 Thành phần hóa học 20 1.3.4 Tác dụng dược lí 21 1.3.5 Các nghiên cứu đối tượng .21 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 23 2.2 Phương pháp nghiên cứu 23 2.2.1 Tạo rễ in vitro mật nhân 24 2.2.2 Nuôi cấy rễ in vitro mật nhân môi trường lỏng .24 2.3 PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH SINH KHỐI TƯƠI VÀ SINH KHỐI KHÔ CỦA RỄ .24 2.4 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU 24 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN .25 3.1 ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHẤT ĐHST ĐẾN KHẢ NĂNG TẠO RỄ IN VITRO CÂY MẬT NHÂN 25 3.1.1 Ảnh hưởng NAA đến khả tạo rễ in vitro mật nhân 25 3.1.2 Ảnh hưởng 2,4D đến khả tạo rễ in vitro mật nhân 27 3.1.3 Ảnh hưởng IBA đến khả tạo rễ in vitro mật nhân 28 3.2 KHẢO SÁT ĐƯỜNG CONG SINH TRƯỞNG CỦA RỄ CÂY MẬT NHÂN IN VITRO .30 3.3 ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHẤT ĐHST ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TRƯỞNG CỦA RỄ IN VITRO CÂY MẬT NHÂN 31 3.3.1 Ảnh hưởng NAA IBA 31 3.3.2 Ảnh hưởng IBA KIN 34 3.4 ẢNH HƯỞNG CỦA ĐƯỜNG SUCROSE ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TRƯỞNG CỦA RỄ IN VITRO CÂY MẬT NHÂN 35 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 PHỤ LỤC HÌNH ẢNH DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT 2,4-D : diclorophenoxyacetic acid BA : 6-benzyl adenine IBA : indole 3-butyric acid IAA : indole - acetic acid NAA : α-naphthalen acetic acid KIN : kinetin ĐHST : điều hòa sinh trưởng MS : Murashige Skoog (1962) SH : Schenk Hildebrandt (1972) cs : cộng NXB : nhà xuất L : lít DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên bảng Trang 3.1 Ảnh hưởng NAA đến khả tạo rễ in vitro mật nhân 16 3.2 Ảnh hưởng 2,4 D đến khả tạo rễ in vitro mật nhân 18 3.3 Ảnh hưởng IBA đến khả tạo rễ in vitro mật nhân 19 3.4 3.5 3.6 Ảnh hưởng NAA IBA đến khả tạo rễ in vitro mật nhân Ảnh hưởng IBA KIN đến khả tạo rễ in vitro mật nhân Ảnh hưởng đường sucrose đến khả tạo rễ in vitro mật nhân 23 25 26 DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình Tên hình Trang 2.1 Cây mật nhân in vitro 14 2.1 Rễ mật nhân in vitro 14 3.1 Rễ mật nhân hình thành sau tuần nuôi cấy môi trường MS + 0,5 NAA 17 Rễ mật nhân hình thành sau tuần nuôi cấy môi 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 trường MS + mg/l 2,4D Rễ mật nhân hình thành sau tuần nuôi cấy môi trường MS + 0,5 mg/l IBA Đường cong sinh trưởng rễ mật nhân nuôi cấy in vitro Nuôi cấy rễ mật nhân máy lắc Sinh khối tế bào rễ mật nhân môi trường bổ sung 0,75mg/l IBA 19 20 21 24 25 MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Trong hàng ngàn năm thực vật xem nguồn dược liệu quan trọng Theo tổ chức Y tế Thế giới (WHO) ước tính có khoảng 80 % dân số giới sử dụng nguồn dược liệu từ thực vật để điều trị chăm sóc sức khỏe [24] Tuy nhiên dân số ngày tăng, nguồn tài nguyên tái tạo ngày giảm khai thác mức, giảm đất canh tác, điều kiện tự nhiên ngày khắc nghiệt… làm suy giảm thiếu hụt nhanh chóng nguồn tài nguyên thực vật [30, 44] Bên cạnh đó, cơng tác bảo tồn loài dược liệu quý chưa trọng nên chúng phải đối mặt với nguy tuyệt chủng cao [10] Nhu cầu sử dụng sản phẩm tự nhiên y - dược ngày tăng sản lượng chúng trồng tự nhiên lại thấp phải khoảng thời gian lâu thu hoạch [30, 45] Do để sản xuất nguồn dược liệu lớn bền vững, khơng phụ thuộc vào điều kiện tự nhiên cần có kỹ thuật ni cấy in vitro hỗ trợ nuôi cấy rễ, tế bào, mô, quan… Trong đó, ni cấy rễ bất định nghiên cứu ứng dụng rộng rãi mở nhiều triển vọng Năm 2004, Betsui Fumie cs nghiên cứu sản xuất hợp chất anthocyanyl thông qua nuôi cấy rễ bất định củ cải đường [2] Năm 2010, Xi – Hua Cui cs nghiên cứu sản xuất rễ bất định khảo sát điều kiện tối ưu cho tích lũy phenol, flavonoid rễ bất định Hypericum perforatum L [60] Năm 2008, Nguyễn Trung Thành cs nghiên cứu nhân nhanh rễ nhân sâm khảo sát ảnh hưởng số nhân tố lý hóa lên tích lũy sản phẩm trao đổi chất ginsenosides [56] Năm 2014, Bùi Định Thạch sản xuất saponon từ rễ bất định tam thất vũ diệp [55] Cây mật nhân (Eurycoma longifolia Jack) xem dược liệu quý Châu Á suy giảm nhanh chóng khai thác mức người [46, 47] Theo nhiều nghiên cứu có nhiều hợp chất hóa học tách chiết từ phận mật nhân, đặc biệt từ rễ chống bệnh tiểu đường, kháng viêm loét, ức chế phát triển khối u ký sinh trùng, kích thích thèm ăn, tăng cường sức khỏe [23, 46] Tuy nhiên, tác dụng bật mật nhân khả tăng cường sức khỏe tình dục cho nam giới, kích thích thể tăng tiết hormon giới a b Hình 3.6 : Sinh khối tế bào rễ mật nhân môi trường bổ sung 0,75mg/l IBA a Sinh khối tươi , b Sinh khối khô 3.3.2 Ảnh hưởng IBA KIN Bên cạnh sử dụng auxin đơn kết hợp chất điều hòa sinh trưởng auxin xytokinin khác tạo hiệu tăng trưởng rễ khác nồng độ thích hợp [6] Khi nồng độ auxin / nồng độ xytokinin lớn lớn, mơ có xu hướng tạo rễ [20] Bảng 3.5 Ảnh hưởng IBA KIN đến khả sinh trưởng rễ in vitro mật nhân Chất ĐHST (mg/l) IBA 0,75 KIN Khả sinh trưởng rễ bất định Khối lượng tươi (g) Khối lượng khô (g) 0,25 1,24a 0,18a 0,5 1,16ab 0,13b 0,75 1,08ab 0,10bc 1,0 0,87b 0,09c Chú thích: Các chữ khác cột sai khác có ý nghĩa thống kê trung bình mẫu với p

Ngày đăng: 26/06/2021, 18:01

Nguồn tham khảo

Tài liệu tham khảo Loại Chi tiết
[12] Phạm Thị Như Hồng (2006), Khảo sát thành phần hóa học của cây Bá Bệnh (Eurycoma longifolia Jack) họ thanh thất (Simarubaceae), Đại học quốc gia TP Hồ Chí Minh- Đại học khoa học tự nhiên Sách, tạp chí
Tiêu đề: Khảo sát thành phần hóa học của cây Bá Bệnh (Eurycoma longifolia Jack) họ thanh thất (Simarubaceae
Tác giả: Phạm Thị Như Hồng
Năm: 2006
[16] Nguyễn Thị Ngọc Hương và Võ Thị Bạch Mai (2009), “Tìm hiểu sự phát sinh hình thái rễ trong nuôi cấy in vitro cây Nhàu (morinda citrifolia l.)”, Science &Technology Development, 12 (17) Sách, tạp chí
Tiêu đề: Tìm hiểu sự phát sinh hình thái rễ trong nuôi cấy "in vitro" cây Nhàu ("morinda citrifolia" l.)”, "Science & "Technology Development
Tác giả: Nguyễn Thị Ngọc Hương và Võ Thị Bạch Mai
Năm: 2009
[17] Trịnh Thị Hương, Hồ Thanh Tâm, Hà Thị Mỹ Ngân, Ngô Thanh Tài, Nguyễn Phúc Huy, Hoàng Xuân Chiến, Nguyễn Bá Nam, Vũ Quốc Luận, Vũ Thị Hiền, Nguyễn Thị Thúy Hường, Phạm Bích Ngọc, Chu Hoàng Hà, Dương Tấn Nhựt (2012), “Ảnh hưởng của nguồn mẫu, kích thước mẫu và một số loại auxin lên khả năng tái sinh rễ bất định của sâm Ngọc Linh (panax vietnamensis ha et grushv.) nuôi cấy in vitro”, Tạp chí Công nghệ Sinh học 10(4A): 877-886 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Ảnh hưởng của nguồn mẫu, kích thước mẫu và một số loại auxin lên khả năng tái sinh rễ bất định của sâm Ngọc Linh (panax vietnamensis ha et grushv.) nuôi cấy "in vitro”, Tạp chí Công nghệ Sinh học
Tác giả: Trịnh Thị Hương, Hồ Thanh Tâm, Hà Thị Mỹ Ngân, Ngô Thanh Tài, Nguyễn Phúc Huy, Hoàng Xuân Chiến, Nguyễn Bá Nam, Vũ Quốc Luận, Vũ Thị Hiền, Nguyễn Thị Thúy Hường, Phạm Bích Ngọc, Chu Hoàng Hà, Dương Tấn Nhựt
Năm: 2012
[25] Trần Thị Lệ (2010), “Nghiên cứu nhân giống in vitro hoa mắt mèo (Torenia fournieri l.)”, tạp chí khoa học, Đại học Huế, Số 57 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu nhân giống "in vitro" hoa mắt mèo ("Torenia fournieri" l.)”, "tạp chí khoa học, Đại học Huế
Tác giả: Trần Thị Lệ
Năm: 2010
[26] Nguyễn Thị Liễu , Nguyễn Trung Thành, Nguyễn Văn Kết (2011), “Nghiên cứu khả năng tạo rễ bất định của sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis, Ha et Grushv) trong nuôi cấy in vitro”, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ 27, 30-36 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu khả năng tạo rễ bất định của sâm Ngọc Linh ("Panax vietnamensis", Ha et Grushv) trong nuôi cấy "in vitro"”, "Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ
Tác giả: Nguyễn Thị Liễu , Nguyễn Trung Thành, Nguyễn Văn Kết
Năm: 2011
[41] Trương Thị Bích Phượng, Nguyễn Thanh Tùng, Nguyễn Thị Thái Thanh, Nguyễn Tăng Hiển (2010), “Nhân giống in vitro cây dược liệu - Nha đam ( Aloe vera L.)”, tạp chí Công nghệ sinh học 8 (3B), 1221- 1229 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nhân giống "in vitro" cây dược liệu - Nha đam ( Aloe vera L.)”, "tạp chí Công nghệ sinh học 8 (3B
Tác giả: Trương Thị Bích Phượng, Nguyễn Thanh Tùng, Nguyễn Thị Thái Thanh, Nguyễn Tăng Hiển
Năm: 2010
[42] Nguyễn Thị Quỳnh, Hoàng Ngọc Nhung, Nguyễn Lê Anh Thư (2013), “Sự hình thành và tăng trưởng của rễ bất định từ nuôi cấy in vitro của cây đương quy Nhật Bản, (angelica acutiloba kitagawa)”, Tạp chí sinh học 35 ( 3se) : 165 – 173 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Sự hình thành và tăng trưởng của rễ bất định từ nuôi cấy "in vitro" của cây đương quy Nhật Bản, ("angelica acutiloba" kitagawa)”, "Tạp chí sinh học 35
Tác giả: Nguyễn Thị Quỳnh, Hoàng Ngọc Nhung, Nguyễn Lê Anh Thư
Năm: 2013
[54] Võ Châu Tuấn, Trần Quang Dần (2012), “Nghiên cứu khả năng tái sinh in vitro cây mật nhân (Eurycoma longifolia jack.)”, Tạp chí Khoa hoc và Công nghệ Đại học Đà Nẵng. Số: 12 (61). Trang: 126-130 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nghiên cứu khả năng tái sinh "in vitro" cây mật nhân (Eurycoma longifolia jack.)”, "Tạp chí Khoa hoc và Công nghệ Đại học Đà Nẵng
Tác giả: Võ Châu Tuấn, Trần Quang Dần
Năm: 2012
[55] Bùi Đình Thạch (2016), “Nuôi cấy in vitro rễ bất định cây Tam thất vũ diệp”, Journal of Developmental Biology and Tissue Engineerin, Tập 6, số 1, trang 1-7 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nuôi cấy "in vitro" rễ bất định cây Tam thất vũ diệp”, "Journal of Developmental Biology and Tissue Engineerin
Tác giả: Bùi Đình Thạch
Năm: 2016
[56] Nguyễn Trung Thành, Paek Kee Yoeup (2008), “Nhân nhanh rễ bất định Nhân sâm Panax ginseng C.A. Meyer: ảnh hưởng của một số nhân tố lý hóa lên sự tăng trưởng sinh khối và sản phẩm trao đổi chất ginsenosides”, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ 24, 318-323 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Nhân nhanh rễ bất định Nhân sâm "Panax ginseng" C.A. Meyer: ảnh hưởng của một số nhân tố lý hóa lên sự tăng trưởng sinh khối và sản phẩm trao đổi chất ginsenosides”, "Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ
Tác giả: Nguyễn Trung Thành, Paek Kee Yoeup
Năm: 2008
[58] Lê Thị Thúy, Trịnh Mộng Nhi, Phạm Văn Lộc (2014), “Khảo sát ảnh hưởng của chất điều hòa tăng trưởng thực vật và môi trường nuôi cấy đến khả năng tạo rễ cà rốt trong nuôi cấy in vitro”, Journal of Thu Dau Mot University, 5 (18) [59] Bùi Trang Việt (2002) Sinh lý thực vật đại cương - Phần II: Phát triển, Nxb.Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh: 328-329 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Khảo sát ảnh hưởng của chất điều hòa tăng trưởng thực vật và môi trường nuôi cấy đến khả năng tạo rễ cà rốt trong nuôi cấy "in vitro”, Journal of Thu Dau Mot University", 5 (18) [59] Bùi Trang Việt (2002) "Sinh lý thực vật đại cương - Phần II: Phát triển
Tác giả: Lê Thị Thúy, Trịnh Mộng Nhi, Phạm Văn Lộc
Nhà XB: Nxb. Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh: 328-329
Năm: 2014
[40] Quách Ngô Diễm Phương, Vũ Thị Bạch Phượng, Giống Hối Khoánh, Trần Ngọc Trung, Bùi Văn Lệ (2014), “Nghiên cứu nuôi cấy rễ cây bán tự mốc Khác

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN