Nghiên cứu điều kiện tối ưu của phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC để phân tích hàm lượng của natri benzoate trong các sản phẩm thực phẩm từ thịt

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA THÁI THỊ BẢO NGÂN NGHIÊN CỨU ĐIỀU KIỆN TỐI ƢU CỦA PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO ĐỂ PHÂN TÍCH HÀM LƢỢNG CỦA NATRI BENOATE TRONG CÁC SẢN PHẨM THỰC PHẨM TỪ THỊT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Đà Nẵng - 2017 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA NGHIÊN CỨU ĐIỀU KIỆN TỐI ƢU CỦA PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO ĐỂ PHÂN TÍCH HÀM LƢỢNG CỦA NATRI BENOATE TRONG CÁC SẢN PHẨM TỪ THỊT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC GVHD : ThS Phạm Thị Hà SVTH : Thái Thị Bảo Ngân Lớp : 13CHP Đà Nẵng - 2017 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên : Thái Thị Bảo Ngân Lớp : 13CHP Tên đề tài: “Nghiên cứu điều kiện tối ưu phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) để phân tích hàm lượng natri benzoate sản phẩm từ thịt” Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị 1.1 Thiết bị  HPLC Aligent 1200 với đầu dị UV- VIS  Cân phân tích; Bế siêu âm; Máy li tâm; Bếp cách thủy 1.2 Dụng cụ  Pipet thẳng 20 mL; pipet bầu mL, 10mL  Bình định mức 50 mL  Bộ lọc hút chân khơng  Một số dụng cụ khác 1.3 Hóa chất  Chỉ sử dụng hóa chất loại tinh khiết phân tích nước cất dùng cho HPLC  Axit benzoic, axit axetic  Metanol, amoni axetat  Kali hexaxyanoferat, kẽm sunfat Nội dung nghiên cứu  Tối ưu điều kiện thông số kỹ thuật cho hệ tống HPLC  Xây dựng đường chuẩn  Xác định hiệu suất thu hồi phương pháp  Đánh giá sai số thống kê phương pháp  Phân tích hàm lượng phụ gia natri benzoate có mẫu thực Giáo viên hƣớng dẫn: Thạc sĩ Phạm Thị Hà Ngày giao đề tài: ngày 06 tháng 04 năm 2016 Ngày hoàn thành: ngày 31 tháng 12 năm 2016 Chủ nhiệm Khoa Giáo viên hƣớng dẫn (Ký ghi rõ họ, tên) (Ký ghi rõ họ, tên) PGS Lê Tự Hải TS Phạm Thị Hà Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho Khoa ngày….tháng….năm… Kết điểm đánh giá: Ngày … tháng … năm … CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (Ký ghi rõ họ, tên) Trong suốt thời gian học tập trường ĐHSP Đà Nẵng, với lời dạy dỗ ân cần q thầy cơ, quan tâm giúp đỡ tận tình bạn bè gia đình với nổ lực thân giúp em có kiến thức lý thuyết thực tiễn thuộc ngành học mà chọn Em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến quý thầy cô trường ĐHSP Đà Nẵng, quý thầy cô khoa dạy tận tình cho em suốt năm qua Đặc biệt, em xin chân thành cảm ơn cô giáo – ThS Phạm Thị Hà nhiệt tình, tận tâm, trực tiếp hướng dẫn em làm đề tài Em xin chân thành gửi lời cảm ơn sâu sắc đên thầy giáo quản lý phịng thí nghiệm tạo điều kiện thuận lợi giúp cho em hoàn thành tốt luận văn Xin nhận nơi em lòng biết ơn sâu sắc! Đà Nẵng, ngày 20 tháng năm 2017 Sinh viên Thái Thị Bảo Ngân MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Ý nghĩa thực tiễn……………………………………………………………… CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan phụ gia thực phẩm 1.1.1 Định nghĩa phụ gia thực phẩm 1.2 Natri bezoate 1.2.1 Cấu trúc hóa học –tính chất 1.2.2 Ứng dụng natri benzoate 1.2.3 Ảnh hưởng natri benzoate sức khỏe người 1.2.4 Tình hình sử dụng natribenzoate axit benzoic công nghiệp chế biến thực phẩm nước 1.3 Các phương pháp xác định natri benzoate 10 1.3.1 Phân tích định tính 10 1.3.2 Phân tích định lượng 11 1.4 Tổng quan phương pháp sắc ký lỏng hiệu nâng cao (HPLC) 11 1.4.1 Sơ đồ nguyên tắc hoạt động máy HPLC 11 1.4.2 Một số phận quan trọng hệ thống 12 1.4.3 Pha động pha tĩnh HPLC 13 1.4.4 Các đại lượng đặc trưng HPLC 15 1.5 Sai số phân tích 18 1.5.1 Sai số tuyệt đối sai số tương đối 18 1.5.2 Các đại lượng đặc trưng để đánh giá sai số phân tích 19 1.5.3 Cách xác định sai số phân tích 21 CHƢƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Thiết bị, dụng cụ hóa chất dùng nghiên cứu 22 2.1.1 Thiết bị dụng cụ 22 2.1.2 Hóa chất 22 2.1.3 Chuẩn bị dung dịch 22 2.2 Phương pháp nghiên cứu 23 2.2.1 Quy trình tạo mẫu trắng 23 2.2.2 Quy trình tạo mẫu sản phẩm chả có sử dụng chất phụ gia axit benzoic 24 2.2.3 Quy trình khảo sát điều kiện tối ưu phép phân tích HPLC 24 2.2.4 Quy trình phân tích hàm lượng acid benzoic số sản phẩm thực phẩm từ thịt thị trường……………………………………………………….26 2.2.5 Quy trình đánh giá sai số thống kê phương pháp 28 2.2.6 Quy trình xác định hiệu suất thu hồi q trình phân tích 29 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 3.1 Kết tạo mẫu trắng mẫu sản phẩm chả có sử dụng chất phụ gia axit benzoic 30 3.2 Kết khảo sát mẫu chuẩn, tối ưu điều kiện sắc ký 31 3.2.1 Kết khảo sát bước sóng hấp thụ 31 3.2.2 Kết khảo sát thành phần pha động 31 3.2.3 Kết khảo sát tốc độ dòng pha động 32 3.2.4 Kết khảo sát khoảng tuyến tính 33 3.2.5 Kết xây dựng đường chuẩn 35 3.2.6 Kết khảo sát giới hạn phát giới hạn định lượng 36 3.3 Kết đánh giá sai số hệ thống phương pháp 37 3.3.1 Độ lặp lại phương pháp phân tích 37 3.3.2 Xác định độ xác phương pháp 38 3.4 Kết xác định hiệu suất thu hồi q trình phân tích 38 3.5 Kết phân tích số sản phẩm thực phẩm từ thịt thị trường 39 3.4 So sánh, đánh giá hàm lượng chất phụ gia axit benzoic mẫu thực phẩm từ thịt thị trường với TCVN 41 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO 42 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Tính chất muối natri benzoate Bảng 1.2 So sánh sắc ký pha thường pha đảo 14 Bảng 1.3 Tính chất số pha động 15 Bảng 3.1 Các thông số mẫu sản phẩm thực phẩm từ thịt tự chế biến .30 Bảng 3.2 Kết khảo sát thành phần pha động……………………………….31 Bảng 3.3 Kết khảo sát ảnh hưởng tốc độ dòng pha động…………… 32 Bảng 3.4 Kết phân tích dung dịch chuẩn axit benzoic………………… 37 Bảng 3.5 Kết xác định giới hạn định tính LOD giới hạn định lượng LOQ………………………………………………………………………… … 38 Bảng 3.6 Bảng khảo sát độ lặp lại phương pháp phân tích…………… … 39 Bảng 3.7 Kết độ xác phương pháp phân tích………………… …39 Bảng 3.8 Kết xác định hiệu suất thu hồi trình phân tích 40 Bảng 3.9 Kết phân tích mẫu sản phẩm thực phẩm từ thịt thị trường…………………………………………………………………………… 41 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc muối natri benzoate Hình 1.2 Sơ đồ khối hệ thống HPLC 11 Hình 1.3 Thời gian lưu 16 Hình 1.4 Hình ảnh peak 18 Hình 2.1 Sơ đồ quy trình sản xuất chả 24 Hình 2.2 Sơ đồ quy trình phân tích mẫu thị trường 27 Hình 3.1 Sắc ký đồ axit benzoic máy đo quang UV-VIS……………………31 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn mối quan hệ tốc độ dịng diện tích peak .33 Hình 3.3 Sắc ký đồ axit benzoic chuẩn 11.344ppm …………………………………33 Hình 3.4 Sắc ký đồ axit benzoic chuẩn 28.360ppm 34 Hình 3.5 Sắc ký đồ axit benzoic chuẩn 56.720ppm 34 Hình 3.6 Sắc ý đồ axit benzoic chuẩn 85.080ppm 34 Hình 3.7 Sắc ký đồ axit benzoic chuẩn 113.440ppm 35 Hình 3.8 Đồ thị đường chuẩn axit benzoic 35 giữ lại cột lâu hơn, hình dạng peak khơng sắc nhọn Khi tỉ lệ MeOH hỗn hợp pha động tăng làm cho peak xuất sớm hình dạng peak cân đối hơn, nhiên dễ bị nhiễm tạp chất mẫu Do vậy, dựa vào sắc ký đồ thời gian lưu, lựa chọn tỉ lệ pha động MeOH: Đệm acetat = 50:50 ứng với thời gian lưu 3.604 phút để phân tích Kết khảo thời gian lưu, chiều cao, diện tích peak thay đổi thành phần pha động thể bảng 3.1 3.2.3 Kết khảo sát tốc độ dòng pha động Tiến hành khảo sát tốc độ dòng pha động theo 2.2.3.3 thu bảng 3.3 đồ thị biểu diễn mối quan hệ tốc độ dịng diện tích peak thể hình 3.2 Bảng 3.3 Kết khảo sát ảnh hưởng tốc độ dòng pha động Tốc độ dòng Thời gian Bề rộng đáy, (ml/phút) lƣu (phút) Δt (phút) 0.5 7.972 0.45 6805.6 0.8 4.829 0.22 4484.9 1.0 3.604 0.22 4317.0 1.2 3.016 0.20 2934.7 STT Speak Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn mối quan hệ tốc độ dòng diện tích peak 32 Nhận xét: Khi tốc độ dịng pha động nhỏ, thời gian lưu chất phân tích tăng, hình dạng peak khơng sắc nhọn, bề rộng đáy lớn Khi tốc độ dòng tăng lên, thời gian lưu mẫu phân tích pha tĩnh giảm Tuy nhiên, tốc độ dịng q lớn gây tượng nhiễm tạp chất mẫu làm tăng áp suất cột nên dễ gây hỏng cột Ngược lại, vận tốc pha động nhỏ, lực chất phân tích pha tĩnh lớn nên chất phân tích bị lưu giữ cột lâu hơn, tốn nhiều thời gian phân tích mẫu Theo kết phân tích sắc ký đồ, chọn tốc độ dòng tối ưu 0.8mL/phút (áp suất cột 128bar) tương ứng với thời gian lưu 4.823 phút 3.2.4 Kết khảo sát khoảng tuyến tính Thực theo quy trình 2.2.3.4 tiến hành tiêm dung dịch chuẩn nồng độ dung dịch chuẩn làm việc từ 10ppm ÷ 100ppm theo 2.2.3.4 máy HPLC với thông số tối ưu (tỉ lệ pha động MeOH:đệm acetat = 50:50; tốc độ dịng pha động 0.8mL/phút; λ= 235nm), chúng tơi thu sắc ký đồ hình 3.3; 3.4; 3.5; 3.6; 3.7 Hình 3 Sắc ký đồ axit benzoic chuẩn 11.344ppm 33 Hình Sắc ký đồ axit benzoic chuẩn 28.360ppm Hình 3.5 Sắc ký đồ axit benzoic chuẩn 56.720ppm Hình Sắc ý đồ axit benzoic chuẩn 85.080ppm 34 Hình 3.7 Sắc ký đồ axit benzoic chuẩn 113.440ppm Nhận xét: Kết khảo sát cho thấy khoảng tuyến tính phương pháp là: 10 – 100ppm Từ xây dựng đường chuẩn nitrit khoảng nồng độ 10 – 100ppm 3.2.5 Kết xây dựng đƣờng chuẩn Phương trình đường chuẩn xây dựng thể hình 3.8 với giá trị diện tích peak điểm chuẩn thể bảng 3.4 6000 y = 41,625x + 46,096 R² = 0,9999 5000 4000 3000 2000 1000 0 20 40 60 80 100 Hình 3.8 Đồ thị đường chuẩn axit benzoic 35 120 Bảng 3.4 Kết phân tích dung dịch chuẩn axit benzoic Nồng độ 11,334 28,360 56,720 85,080 113,440 526,908 1212,08 2404,53 3611,05 4754,91 chuẩn, Cc ppm Diện tích peak Nhận xét: Phương trình đường chuẩn đạt u cầu phân tích định lượng có hệ số hồi quy tuyến tính R2 độ lệch điểm chuẩn phù hợp với tiêu chuẩn, là: 0.99 ≤ R2 ≤ giá trị Δ không vượt ± 15% 3.2.6 Kết khảo sát giới hạn phát giới hạn định lƣợng Thực theo quy trình 2.2.3.5 tiến hành khảo sát nồng độ chuẩn axit benzoic từ 10ppm xuống 0.03ppm để xác định giá trị Cmin cho giới hạn định tính LOD giới hạn định lượng LOQ Kết thể bảng 3.5 Như vậy, giới hạn định tính LOD = 0.03ppm giới hạn định lượng LOQ = 0.05ppm 36 Bảng 3.5 Kết xác định giới hạn định tính LOD giới hạn định lượng LOQ Nồng độ chuẩn, C Lần Chiều cao peak Chiều cao S/N 10 ppm 0.5 0.3 0.2 0.1 0.08 1 1 1 1 1 4 80.7 (H=S) 40.5 26.5 13.9 12.3 11.5 11.2 11.7 7.61 6.24 3.40 3.61 3.23 3.28 1.33 1.38 1.42 1.48 nhiễu0.25 (h=2N) 0.25 0.25 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 322.8 162.0 106.0 46.33 41.00 38.33 37.33 39.00 25.37 20.80 11.33 12.03 10.76 10.93 4.43 4.60 4.73 4.90 0.05 0.03 3.3 Kết đánh giá sai số hệ thống phƣơng pháp 3.3.1 Độ lặp lại phƣơng pháp phân tích Thực theo quy trình 2.2.5.1, kết xác định thể bảng 3.6 Bảng 3.6 Bảng khảo sát độ lặp lại phương pháp phân tích Lần đo Cx% theo QTPT 0.372 0.359 0.360 0.358 0.362 C% trung bình SD RSD% 0.362 0.0037 1.03 37 Nhận xét: Các kết thực nghiệm so sánh với số liệu bảng phụ lục cho thấy RSD% < 2%, nằm khoảng cho phép AOAC Vậy phương pháp có độ lặp lại tốt 3.3.2 Xác định độ xác phƣơng pháp Thực theo quy trình mục 2.2.5.2 ta thu kết bảng 3.7 Bảng 3.7 Kết độ xác phương pháp phân tích C% chất phụ gia thực Mẫu tế theo tính tốn C% chất phụ C% chất phụ gia E210 theo gia tính tốn %E211 % E210 QTPT lại M3 - 0.377 0.287 0.393 M4 - 0.472 0.343 0.471 M5 - 0.607 0.465 0.638 M6 - 0.503 0.355 0.487 M7 0.073 - 0.054 0.074 Nhận xét: Dựa vào kết bảng 3.7 thấy hàm lượng chất phụ gia thu có độ xác cao phù hợp với yêu cầu quy định độ thu hồi AOAC từ 90- 105% 3.4 Kết xác định hiệu suất thu hồi trình phân tích Thực theo quy trình mục 2.2.6 ta thu kết bảng 3.8 38 Bảng 3.8 Kết xác định hiệu suất thu hồi q trình phân tích C% theo Mẫu LT C% theo QTPT Hiệu suất Hiệu suất thu thu hồi % hồi trung bình % Chả chiên M1 0.167 0.120 71.85 Chả hấp M3 0.377 0.287 76.13 Chả hấp M6 0.503 0.355 70.58 72.85 Nhận xét: Dựa vào kết bảng 3.8 biết hiệu suất thu hồi trình phân tích 72.85% 3.5 Kết phân tích số sản phẩm thực phẩm từ thịt thị trƣờng Tiến hành phân tích mẫu sản phẩm thực phẩm từ thịt địa bàn thành phố Đà Nẵng, cụ thể khu vực Hòa Khánh, Chợ Cồn, Cẩm Lệ, Thanh Khê Kết phân tích thể bảng 3.9 39 Bảng 3.9 Kết phân tích mẫu sản phẩm thực phẩm từ thịt thị trường Khu vực Hàm lƣợng chất phụ gia natri benzoate sản phẩm Chả Chả bò heo Hòa Khánh Chợ Tân An, C Lệ Tiệm B.mì C.Lệ Dăm Thịt bơng nguội Nem Chả giị heo sống 0.329 0.133 KPH KPH 0.012 - 0.617 0.140 KPH KPH 0.011 - 0.658 0.129 KPH KPH 0.002 0.064 0.273 0.134 KPH KPH - 0.087 0.273 0.107 - - - - KPH 0.396 KPH 0.006 0.203 - KPH 0.177 0.057 0.003 0.008 - KPH KPH 0.003 0.049 - - 0.022 0.734 0.079 0.070 0.003 - 0.056 0.035 KPH KPH 0.004 0.150 Chợ Cồn - 0.091 0.094 KPH KPH - - Hải Châu 0.051 0.081 KPH KPH - - 0.056 0.031 - - - - 0.843 0.623 0.101 KPH KPH 0.135 0.391 0.421 KPH KPH - 0.141 0.504 0.565 KPH KPH - 0.089 Q.Thanh Khê 40 3.6 So sánh, đánh giá hàm lƣợng chất phụ gia axit benzoic mẫu thực phẩm từ thịt thị trƣờng với TCVN Theo TCVN, hàm lượng axit benzoic sản phẩm thực phẩm không 1000ppm (hay 0.1%) Trong số 80 mẫu thực phẩm thị trường kiểm tra, hàm lượng axit benzoic 18 mẫu không đạt (chiếm 22.5%) Cụ thể: - Mẫu chả heo: Tổng số mẫu phân tích 16 mẫu, có mẫu khơng đạt Hàm lượng mẫu không đạt cao gấp 2-6 lần so với TCVN - Mẫu chả bị: Tổng số mẫu phân tích 16 mẫu, có mẫu khơng đạt Hàm lượng mẫu không đạt cao gấp 1.3-5.3 lần so với TCVN - Mẫu dăm bông, thịt nguội: Tổng số mẫu phân tích 28 mẫu mẫu phân tích có hàm lượng axit benzoic thấp khơng phát Vậy mẫu dăm bơng, thịt nguội có hàm lượng chất phụ gia axit benzoic phù hợp với TCVN - Mẫu nem chua: Tổng số mẫu phân tích mẫu, có mẫu khơng đạt so với TCVN - Chả giò bò sống: Tổng số mẫu phân tích mẫu, có mẫu khơng đạt so với TCVN - Chả giị heo sống: Tổng số mẫu phân tích mẫu, có 1mẫu khơng đạt, so với TCVN Với số liệu phân tích mẫu thực phẩm từ thịt trị trường cho thấy, số sở sản xuất uy tín bước đầu có ý thức việc sử dụng phụ gia thực phẩm trình sản xuất Tuy nhiên, bên cạnh cịn có số sở sử dụng phụ gia bảo quản vô chừng Thông thường mẫu chả heo, chả bò thường bán tiệm bánh mỳ Nhìn chung, việc đăng ký sản xuất theo tiêu chuẩn quản lý, kiểm soát sở sản xuất chưa sát thực, chưa đạt hiệu 41 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Qua trình nghiên cứu, thực đề tài thu kết sau: Đã xây dựng kiện tối ưu thông số kỹ thuật cho hệ thống HPLC mẫu phân tích Kết cho thấy phương pháp nghiên cứu đề xuất có giá trị sử dụng, đáp ứng yêu cầu tiêu chuẩn AOAC, cụ thể sau: - Bước sóng hấp thụ cực đại λmax = 235nm - Tốc độ dòng pha động 0.8 mL/phút - Thành phần pha động MeOH: đệm acetat 50:50 Khoảng tuyến tính (10ppm÷110ppm); Phương trình đường chuẩn (y = 41.62x + 46.09); Hệ số tương quan: R2=0.999; Giới hạn định tính LOD = 0.03ppm; Giới hạn định lượng LOQ = 0.05ppm; RSDthời gian lưu = 0.33%; RSDdiện tích peak = 1.63% Quy trình phân tích đáp ứng với mẫu có nồng độ khác tương ứng cao gấp 0.5÷6 lần hàm lượng axit benzoic cho phép đạt hệ số thu hồi H% từ 90% đến 96%, phù hợp với yêu cầu quy định độ thu hồi AOAC Phân tích đánh giá hàm lượng axit benzoic natri benzoattrên sản phẩm thị trường với 80 mẫu có 18 mẫu không đạt (chiếm 22.5%) 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Bộ Y tế, Danh mục tiêu chuẩn vệ sinh lương thực thực phẩm, số 867/1998/QĐ-BYT [2] Kiểm nghiệm chất lượng tra vệ sinh an toàn thực phẩm, Nhà xuất Y học, 1991 [3] Nguyễn Minh Đức, Sắc ký lỏng hiệu cao số ứng dụng vào nghiên cứu, kiểm nghiệm dược phẩm, dược liệu hợp chất thiên nhiên Nhà xuất y học chi nhánh thành phố Hồ Chí Minh, 2006 [4] Nguyễn Thị Thanh Hương, Nguyễn Công Khẩn, Hà Thị Anh Đào Bài báo: “Đánh giá hiệu can thiệp đến tình hình sử dụng phẩm màu, hàn the, axit benzoic axit sorbic chế biến thực phẩm Quảng Bình” Tạp chí Khoa học Phát triển, 2012, Tập 10, số 3: 479-486; www.hua.edu.vn [5] Nguyễn Huỳnh Hiệp Luận văn thạc sĩ: “ Phân tích benzene nước giải khát tìm hiểu chế hình thành benzene” Hướng dẫn khoa học: GS.TS Chu Phạm Ngọc Sơn Thành phố Hồ Chí Minh – 2010 [6] Nguyễn Tấn Sĩ, TS Đặng Văn Khánh, Ds Lê Thị Kim Chi “ Nghiên cứu xây dựng quy trình định lượng đồng thời chất phụ gia natribenzoat kalisorbat số sản phẩm thực phẩm phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao” Trung tâm Kiểm nghiệm thuốc mỹ phẩm thực phẩm Thừa Thiên Huế [7] Nguyễn Duy Thịnh (2008), Bài giảng Các chất phụ gia dùng sản xuất thực phẩm, Viện Công nghệ sinh học Thực phẩm – trường Đại Học Bách Khoa Hà Nội [8] Trần Cao Sơn (2010), Thẩm định phương pháp phân tích hoá học vi sinh vật, nhà xuất khoa học kỹ thuật [9] Bùi Xuân Vững (2009), Giáo trình “ Một số phương pháp phân tích cơng cụ hóa hữu cơ” [10] Thơng tư 27/2012/TT-BYT, Hướng dẫn việc quản lý phụ gia thực phẩm 43 [11] Viện Kiểm nghiệm An toàn Vệ sinh Thực phẩm Quốc gia, Phương pháp xác định hàm lượng acid benzoic acid sorbic thực phẩm [12] TCVN 8122:2009, Sản phẩm rau, - Xác định hàm lượng acid benzoic acid sorbic – Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao [13] TCVN 6428:2007, Rau, sản phẩm rau - Xác định hàm lượng acid benzoic – Phương pháp quang phổ [14] Phan Văn Vĩnh (2014) Báo cáo thực tập tốt nghiệp: “ Xác định acid ascorbic, acid benzoic, natribenzoat, acid sorbic kali sorbat thực phẩm phương pháp HPLC” Trung tâm kỹ thuật tiêu chuẩn đo lường khu vực [15] Food Standard Agency (FSA) Survey of Benzoates and Sorbates in Soft Drinks - No 84/05 FSA; November 2005 Available from URL:http://www.food.gov.uk/multimedia/pdfs/fsis8405.pdf [16] Food Standards Australia New Zealand (FSANZ) The 21st Australian Total Diet Study - a total diet study of sulphites, benzoates and sorbates Canberra: FSANZ; August 2005 Available from URL: http://www.foodstandards.gov.au/newsroom/publications/21staustraliantotald 2963.cfm [17] Codex Alimentarius Commission (CAC) Joint FAO /WHO Food Standards Programme - Report of the Twenty-seventh Session ALINORM 04/27/41 CAC: Geneva; 2004 Available from URL: ftp://ftp.fao.org/docrep/fao/007/y5549e/y5549e00.pdf [18] International Programme on Chemical Safety Benzoic Acid and Sodium Benzoate Concise International Chemical Assessment Document No 26 Geneva: WHO; 2000 Availablefrom URL:http://www.who.int/ipcs/publications/cicad/cicad26_rev1.pdf 44 [19] Belitz, H.-D.; Grosch, W Food Chemistry nd edition Springer New York; 1999 [20] The Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives (JECFA) Summary of Evaluations Performed by JECFA – Benzoic acid Rome: FAO; May 2005 Availablefrom URL:http://www.inchem.org/documents/jecfa/jeceval/jec_184.htm [21] FDA Data on Benzene in Soft Drinks and Other Beverages FDA: Maryland;May 2006 Available from URL: http://www.cfsan.fda.gov/~dms/benzdata.html [22] FSA Survey of Benzene of Soft Drinks – No 06/06 FSA; March 2006 Available from URL:http://www.food.gov.uk/multimedia/pdfs/fsis0606.pdf [23] WHO Guidelines for Drinking-water Quality Geneva: WHO; 2003 Available from URL: http://www.who.int/water_sanitation_health/dwq/chemicals/benzenesum.pdf [24] WHO Toxicological Evaluation of Certain Food Additives Prepared by the 46th Meeting of the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives (JECFA) Available from http://www.inchem.org/documents/jecfa/jecmono/v37je05.htm 45 URL: ... cứu điều kiện tối ưu phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) để phân tích hàm lượng natri benzoate sản phẩm từ thịt? ?? Ý nghĩa thực tiễn Áp dụng kiến thức học vào thực tiễn phương pháp sắc ký lỏng. .. Tên đề tài: ? ?Nghiên cứu điều kiện tối ưu phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) để phân tích hàm lượng natri benzoate sản phẩm từ thịt? ?? Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị 1.1 Thiết bị  HPLC Aligent... TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA NGHIÊN CỨU ĐIỀU KIỆN TỐI ƢU CỦA PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO ĐỂ PHÂN TÍCH HÀM LƢỢNG CỦA NATRI BENOATE TRONG CÁC SẢN PHẨM TỪ THỊT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ