Nghiên cứu nhân giống cây lõi thọ gmelina arbrea roxb bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT TRƯỜNG ĐẠI HỌC LÂM NGHIỆP NGUYỄN VĂN DŨNG NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY LÕI THỌ (GMELINA ARBOREA ROXB.) BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY IN VITRO Chuyên ngành: Lâm học Mã số: 60620201 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC LÂM NGHIỆP NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS HÀ VĂN HUÂN Hà Nội, 2013 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi, có hỗ trợ giáo viên hướng dẫn TS Hà Văn Huân Các nội dung nghiên cứu kết đề tài trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu trước Những số liệu bảng biểu phục vụ cho phân tích, nhận xét, đánh giá tác giả thu thập từ nguồn khác có phần tài liệu tham khảo Ngồi ra, đề tài cịn sử dụng số nhận xét, đánh số liệu tác giả, quan tổ chức khác thể phần tài liệu tham khảo Nếu phát có gian lận tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước Hội đồng, kết luận văn cuả Hà Nội, tháng năm 2013 Tác giả Nguyễn Văn Dũng ii LỜI CẢM ƠN Để hồn thiện Luận văn này, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn đến giúp đỡ Thầy, Cô trường Đại học Lâm nghiệp Việt Nam, giúp đỡ nhiệt tình Thầy (Cô) Anh (Chị) công tác Viện CNSH Lâm nghiệp – Trường Đại học Lâm nghiệp Việt Nam Với lịng biết ơn sâu sắc tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới Thầy giáo hướng dẫn TS Hà Văn Huân ThS Hà Bích Hồng, ThS Lã Ngun Khang tận tình giúp đỡ tơi suốt q trình hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới Thầy, Cô Hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp Thạc sỹ dành thời gian đọc góp ý cho Luận văn Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn đến tất bạn bè người thân động viên, giúp đỡ tơi suốt q trình học tập Hà Nội, tháng năm 2013 Tác giả Nguyễn Văn Dũng iii MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa Lời cam đoan i Lời cảm ơn i Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu khái quát Lõi thọ 1.1.1 Đặc điểm hình thái, phân loại giá trị sử dụng 1.1.2 Đặc tính sinh học, sinh thái phân bố 1.2 Nhân giống trồng in vitro 1.2.1 Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.2.2 Cơ sở khoa học chung nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.2.3 Lợi ích nhân giống nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.2.4 Các phương thức nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.2.5 Các giai đoạn nhân giống in vitro 1.2.6 Các yếu tố ảnh hưởng đến nhân giống in vitro 10 1.2.7 Những vấn đề nhân giống in vitro 13 1.2.8 Chất điều hoà sinh trưởng thực vật (ĐHSTTV) 16 1.2.9 Những thành tựu nuôi cấy mô rừng giới Việt Nam 17 1.3 Kỹ thuật nhân giống, gây trồng chăm sóc Lõi thọ 20 1.3.1 Nhân giống 20 1.3.2 Trồng rừng chăm sóc rừng trồng 21 Chương MỤC TIÊU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 iv 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 22 2.2 Đối tượng nghiên cứu 22 2.3 Nội dung nghiên cứu 23 2.3.1 Kỹ thuật tạo mẫu in vitro 23 2.3.2 Kỹ thuật nhân nhanh kích thích tăng trưởng chồi in vitro 23 2.3.3 Kỹ thuật tạo rễ Lõi thọ in vitro 23 2.3.4 Trồng Lõi thọ in vitro Vườn ươm 23 2.4 Phương pháp thí nghiệm 23 2.4.1 Phương pháp luận 23 2.4.2 Phương pháp thí nghiệm 23 2.4.3 Thu thập số liệu 31 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 32 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Tạo mẫu in vitro 33 3.2 Nhân nhanh kích thích tăng trưởng chồi in vitro 35 3.2.1 Ảnh hưởng riêng rẽ BAP Kinetin đến hiệu tái sinh chồi 36 3.3.2 Ảnh hưởng phối hợp BAP NAA đến hiệu tái sinh chồi in vitro 38 3.2.3 Ảnh hưởng phối hợp BAP GA3 đến kích thích tăng trưởng chồi 40 3.3 Kỹ thuật tạo rễ Lõi thọ in vitro 43 3.3.1 Xác định mơi trường dinh dưỡng thích hợp cho tạo rễ Lõi thọ in vtro 43 3.3.2 Ảnh hưởng phối hợp IBA BAP đến khả rễ chồi 44 3.4 Trồng Lõi thọ in vitro Vườn ươm 47 3.4.1 Ảnh hưởng thành phần giá thể trồng đến khả sống sinh trưởng Lõi thọ in vitro vườn ươm 47 KẾT LUẬN – TỒN TẠI – KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Chú giải BAP Benzil amino purin CNSH Công nghệ sinh học DNA Deoxyribonucleic acid ĐHST Điều hòa sinh trưởng GA3 Gibberellic acid Ki Kinetin NAA Naphthyl acetic acid IBA Indol butyric acid MS Murashige Skoog, 1962 TB Trung bình CTTN Cơng thức thí nghiệm vi DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng TT 2.1 Ảnh hưởng hóa chất thời gian khử trùng đến hiệu tạo mẫu in vitro Trang 25 2.2 Ảnh hưởng riêng rẽ BAP Kinetin đến hiệu tái sinh chồi 26 2.3 Ảnh hưởng phối hợp BAP NAA đến hiệu tái sinh chồi 27 2.4 2.5 2.6 2.7 3.1 Ảnh hưởng phối hợp BAP GA3 đến kích thích tăng trưởng chồi Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến khả rễ chồi Ảnh hưởng phối hợp BAP IBA đến khả rễ chồi Ảnh hưởng thành phần giá thể đến khả sống sinh trưởng Lõi thọ in vitro vườn ươm Ảnh hưởng hóa chất thời gian khử trùng đến hiệu tạo mẫu in vitro 28 29 30 31 34 3.2 Ảnh hưởng riêng rẽ BAP Kinetin đến hiệu tái sinh chồi 37 3.3 Ảnh hưởng phối hợp BAP NAA đến hiệu tái sinh chồi 39 3.4 Ảnh hưởng phối hợp BAP GA3 đến kích thích tăng trưởng chồi 41 3.5 Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến khả rễ chồi 44 3.6 Ảnh hưởng phối hợp IBA BAP đến khả rễ chồi 45 3.7 Ảnh hưởng thành phần giá thể đến khả sống sinh trưởng Lõi thọ in vitro vườn ươm 48 vii DANH MỤC CÁC HÌNH TT Nội dung Trang 2.1 Cây Lõi thọ tuyển chọn để lấy mật liệu nhân giống 3.1 Mẫu Lõi thọ in vitro 3535 3.2 Mẫu Lõi thọ in vitro 38 3.3 Chồi Lõi thọ tái sinh in vitro công thức BI5 40 3.4 Chồi Lõi thọ in vitro mơi trường kích thích tăng trưởng chồi BG6 22 42 3.5 Cây Lõi thọ in vitro hoàn chỉnh 46 3.6a Cây Lõi thọ trồng Vườn ươm giá thể GT4 49 3.6b Cây Lõi thọ tháng tuổi trồng Vườn ươm 49 ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam Quốc gia có tiềm lớn cho phát triển nghề rừng Trong năm gần đây, có nhiều quan tâm cho việc phát triển xã hội hoá nghề rừng, đến diện tích rừng có tăng lên chất lượng rừng chưa cải thiện Do số nguyên nhân chủ yếu là: chất lượng giống không đảm bảo, công tác quản lý giống lâm nghiệp nhiều bất cập chưa kiểm tra nguồn gốc, xuất xứ giống đưa vào trồng rừng; thiếu hướng dẫn kỹ thuật trồng rừng, chăm sóc bảo vệ loài cây, điều kiện lập địa vùng cụ thể; việc lựa chọn loài trồng chưa phù hợp Lõi thọ có tên khoa học Gmelina arborea Roxb thuộc họ Tếch (Verbenaceae) Lõi thọ lồi sinh trưởng nhanh, năm đầu đạt chiều cao 12 – 14 m; đường kính thân đạt 35 – 40 cm; thân thẳng tán đẹp Gỗ Lõi thọ có giác mỏng màu vàng nhạt, lõi nâu vàng, kết cấu mịn dễ làm, biến dạng, khơng bị mối mọt; có trọng lượng riêng từ 0,42 – 0,64 Gỗ Lõi thọ dùng để đóng thuyền, làm nhà, làm giấy, làm gỗ dán lạng Vì vậy, Lõi thọ đối tượng nhà khoa học chọn tạo giống rừng người dân trồng rừng đặc biệt quan tâm Ở Việt Nam, Lõi thọ phân bố rãi rác hầu hết tỉnh nước, phát triển tốt tỉnh phía Bắc, Trung du, vùng núi thấp như: Tuyên Quang, Lạng Sơn, Phú Thọ, Hà Giang Do Lõi thọ loài gỗ lớn, dễ gây trồng, sinh trưởng nhanh đem lại hiệu kinh tế cao, nên Lõi thọ đối tượng trồng rừng nhiều người dân quan tâm lựa chọn Do đó, nhu cầu giống Lõi thọ chất lượng cao phục vụ trồng rừng sản xuất thời gian tới cao Hiện nay, Lõi thọ rừng tự nhiên cịn ít, lại phân bố rải rác nên việc thu hái hạt giống gặp nhiều khó khăn, số lượng khơng đáp ứng đủ cho nhu cầu trồng rừng người dân tương lai Đến nay, có số nghiên cứu nhân giống Lõi thọ hạt, hom đạt số kết bước đầu Việc áp dụng phương pháp nhân giống kỹ thuật ni cấy in vitro số lồi rừng áp dụng rộng rãi, đem lại hiệu kinh tế cao cho nhiều sở sản xuất người trồng rừng Tuy nhiên, Lõi thọ chưa có nghiên cứu nhân giống lồi kỹ thuật ni cấy in vitro, biện pháp thường sử dụng để nhân giống sản xuất gieo ươm từ hạt Hiện nay, xu trồng rừng dịng vơ tính dần trở thành yêu cầu bắt buộc trồng rừng sản xuất, biện pháp trồng rừng tạo quần thể trồng giữ nguyên phẩm chất di truyền tốt mẹ, tránh tượng phân ly hữu tính, nên đồng sinh trưởng sản phẩm, thuận lợi cho việc gây trồng, chăm sóc, khai thác chế biến Vì vậy, nghiên cứu nhân giống Lõi thọ kỹ thuật nuôi cấy in vitro nhằm chủ động tạo lượng lớn chất lượng cao thời gian ngắn để cung cấp cho thị trường giống có nhu cầu lớn việc làm cần thiết có nhiều ý nghĩa Để đạt mục tiêu trên, tiến hành thực đề tài : “Nghiên cứu nhân giống Lõi thọ (Gmelina arborea Roxb.) kỹ thuật nuôi cấy in vitro” tốt BI6 0.5 BI7 0.1 BI8 0.8 0.3 BI9 0.5 TB TB TB TB 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 25 25 22 24 19 17 18 18 24 17 22 21 20 24 25 23 83,33 83,33 73,33 80,00 63,33 56,67 60,00 60,00 80,00 56,67 73,33 70.00 67,67 80,00 83,33 76.67 3,1 3,25 3,43 3,26 1,9 2,05 1,69 1,88 2,3 2,1 2,41 2.27 2,78 2,4 2.56 2.58 Tốt Kém TB TB Phụ biểu 7: Phân tích phương sai nhân tố ảnh hưởng BAP NAA đến số chồi trung bình mẫu Lõi thọ in vitro SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ĐC 3.3 1.1 0.01 BI1 7.74 2.58 0.4869 BI2 9.96 3.32 0.2352 BI3 5.49 1.83 0.0487 BI4 8.52 2.84 0.0513 BI5 10.95 3.65 0.1525 BI6 9.78 3.26 0.0273 BI7 5.64 1.88 0.0327 BI8 6.81 2.27 0.0247 BI9 7.74 2.58 0.0364 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Between Groups 16.61247 1.84583 16.69377 1.85E-07 2.392814 Within Groups 2.2114 20 0.11057 Total 18.82387 29 Phụ biểu 8: Phân tích phương sai nhân tố ảnh hưởng BAP NAA đến tỷ lệ mẫu tái sinh chồi Lõi thọ in vitro SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ĐC 30 10 11.0889 BI1 230 76.66667 144.5222 BI2 250 83.33333 77.82223 BI3 170 56.66667 33.33333 BI4 220 73.33333 11.12223 BI5 280 93.33333 77.82223 BI6 239.99 79.99667 33.33333 BI7 180 60 11.0889 BI8 210 70 144.3889 BI9 231 77 68.0589 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Between Groups 14297.39 1588.599 25.93288 3.96E-09 2.392814 Within Groups 1225.162 20 61.25812 Total 15522.56 29 Phụ biểu 9: Kết ảnh hưởng BAP GA3 đến hiệu tái sinh chồi Lõi thọ in vitro Chất ĐHST Số (mg/l) CTTN BAP ĐC GA3 BG1 0.1 0.2 BG2 BG3 BG4 0.3 0.5 Chiều cao Lượng chồi TB (cm) tăng Chất mẫu Trước Sau trưởng lượng Lần thí TN khi chồi chồi nghiệm cấy cấy (cm) 40 2,1 2,5 0,4 40 2,05 2,95 0,9 40 2,3 2,83 0,53 40 2,15 2,76 0.61 TB 40 1,9 3,9 40 2,2 4,24 2,04 40 2,39 4,25 1,86 40 2,18 4,13 1,95 TB 40 1,9 4,55 2,65 40 2,3 4,3 2 40 2,4 4,17 1,77 40 2,20 4,34 2,14 TB 40 2,0 4,5 2,5 40 2,2 4,3 2,1 40 2,1 4,58 2,48 40 2,10 4,46 2,36 TB 40 2,14 4,5 2,36 40 2,13 4,75 2,62 40 2,09 4,64 2,55 40 2,12 4,63 2,51 TB BG5 0.1 BG6 0.3 0.4 BG7 BG8 0.5 40 2,1 4,35 2,25 40 2,4 4,6 2,2 40 1,95 3,89 1,94 40 2,15 4,28 2,13 TB 40 2,08 5,3 3,22 40 2,2 5,05 2,85 40 2,26 5,1 2,84 40 2,18 5,15 2,97 TB 40 2,1 4,75 2,65 40 1,9 5,31 3,41 40 2,15 4,4 2,25 40 2,05 4,82 2,77 TB 40 2,0 4,9 2,9 40 2,1 4,75 2,65 40 2,2 5,2 3,0 40 2,1 4,95 2,85 TB Phụ biểu 10: Phân tích phương sai nhân tố ảnh hưởng BAP GA3 đến hiệu tái sinh chồi SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ĐC 1.83 0.61 0.0673 BG1 5.85 1.95 0.008933 BG2 6.42 2.14 0.2083 BG3 7.08 2.36 0.0508 BG4 7.53 2.51 0.0181 BG5 6.39 2.13 0.0277 BG6 8.91 2.97 0.0469 BG7 8.31 2.77 0.3472 BG8 8.55 2.85 0.0325 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Between Groups 12.07356 1.509195 16.81589 6.98E-07 2.510158 Within Groups 1.615467 18 0.089748 Total 13.68903 26 Phụ biểu 11: Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến khả rễ chồi Lõi thọ in vitro Thời Tổng số MT mẫu cấy Lần thí nghiệm Số chồi rễ (chồi) (mẫu) MS 2MS* 1/2MS* 45 45 45 Tỷ lệ chồi rễ (%) Số rễ TB/chồi (rễ) Chiều gian dài chồi TB rễ (cm) Chất bắt đầu lượng rễ rễ (ngày) 36 80,00 2,7 2,75 12 37 82,22 2,95 2,4 12 32 71,11 2,9 2,5 12 TB 35 77,78 2,85 2,55 12 30 66,67 2,65 2,3 12 32 71,11 2,8 2,6 12 31 68,89 2,74 2,57 12 TB 31 68,89 2,73 2,49 12 44 97,78 3,4 3,2 10 37 82,22 3,85 2,87 10 39 86,67 3,46 3,65 10 TB 40 88,89 3,57 3,24 10 TB TB Tốt Phụ biểu 12: Phân tích phương sai nhân tố ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến số rễ trung bình chồi Lõi thọ in vitro SUMMARY Groups Count Sum Average Variance MS 8.55 2.85 0.0175 2MS* 8.19 2.73 0.0057 1/2MS* 10.71 3.57 0.0597 ANOVA Source of SS df MS 1.2384 0.6192 Within Groups 0.1658 0.027633 Variation Between Groups Total 1.4042 F P-value F crit 22.40772 0.001646 5.143253 Phụ biểu 13: Phân tích phương sai nhân tố ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến chiều dài rễ trung bình chồi Lõi thọ in vitro SUMMARY Groups Count Sum Average Variance MS 7.65 2.55 0.0325 2MS* 7.47 2.49 0.0273 1/2MS* 9.72 3.24 0.1533 ANOVA Source of SS df MS Between Groups 1.0422 0.5211 Within Groups 0.4262 0.071033 Total 1.4684 Variation F P-value F crit 7.335992 0.024452 5.143253 Phụ biểu 14: Ảnh hưởng phối hợp IBA BAP đến khả rễ chồi Lõi thọ in vitro Số chồi rễ Tỷ lệ chồi rễ (%) Số rễ TB/ 3 6,66 4,44 2,22 0,9 1,32 1,2 Thời gian chồi bắt đầu rễ 12 11 13 TB 4,44 1,14 12 34 29 33 75,56 64,44 73,33 2,1 2,8 2,75 10 10 10 TB 32 71,11 2,55 10 41 42 37 91,11 93,33 82,22 3,24 3,7 3,5 10 10 10 TB 40 45 88,89 100,00 3,48 3,45 10 45 100,00 3,8 45 100,00 3,64 TB 45 100,00 3,63 38 84,44 3,02 10 34 75,56 2,5 10 33 73,33 2,76 10 TB 35 77,78 2,76 10 24 53,33 2,1 10 26 57,78 2,17 10 Chất ĐHST CTTN ĐC BAP IBA (mg/l) (mg/l) BI1 0.2 BI2 0.4 Số Lần thí mẫu nghiệm cấy 45 45 45 0.2 BI3 BI4 BI5 0.6 0.8 0.2 45 45 45 Chất lượn g rễ Rất Rất Tốt Rất tốt TB 25 55,56 2,3 10 TB 25 55,56 2,19 10 45 34 29 36 75,56 64,44 80,00 2,5 2,85 2,75 10 10 10 33 38 35 35 73,33 84,44 77,78 77,78 2,70 3,59 3,05 2,9 10 10 10 10 TB 45 TB 36 42 37 38 80,00 93,33 82,22 84,44 3,18 3,5 3,26 3,32 10 10 10 10 Tốt 45 TB TB 39 86,67 3,36 10 Tốt 0.4 BI6 BI7 BI8 0.4 0.6 0.8 Kém Phụ biểu 15: Phân tích phương sai nhân tố ảnh hưởng phối hợp IBA BAP đến tỷ lệ rễ chồi Lõi thọ in vitro SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ĐC 14.32 4.44 3.060633 BI1 213.33 71.11 34.6099 BI2 266.66 88.88667 34.56543 BI3 300 100 BI4 233.33 77.77667 34.54323 BI5 166.67 55.55667 4.950633 BI6 220 73.33333 64.24693 BI7 240 80 14.7852 BI8 259.99 86.66333 34.56543 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Between Groups 18487.77 2310.971 92.30453 5.04E-13 2.510158 Within Groups 450.6548 18 25.03638 Total 18938.42 26 Phụ biểu 16: Phân tích phương sai nhân tố ảnh hưởng phối hợp IBA BAP đến số rễ trung bình chồi Lõi thọ in vitro SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ĐC 3.42 1.14 0.0468 BI1 7.65 2.55 0.1525 BI2 10.44 3.48 0.0532 BI3 10.89 3.63 0.0307 BI4 8.28 2.76 0.0676 BI5 6.57 2.19 0.0103 BI6 8.1 2.7 0.0325 BI7 9.54 3.18 0.1317 BI8 10.08 3.36 0.0156 ANOVA Source of Variation SS df Between Groups 14.4186 Within Groups 1.0818 18 Total 15.5004 26 MS F P-value F crit 1.802325 29.98877 7.12E-09 2.510158 0.0601 Phụ biểu 17: Ảnh hưởng thành phần giá thể đến khả sống sinh trưởng Lõi thọ in vitro vườn ươm CTTN Thành phần giá thể GT1 GT2 GT3 100% đất 100% cát 70% đất : 30% cát Số cấy Lần thí (cây) nghiệm 60 60 60 60% đất : 30% GT4 cát : 10% trấu hun Số sống (cây) Tỷ lệ Chất lượng sống (%) 48 80,00 44 73,33 43 71,67 TB 45 75,00 32 53,33 37 61,67 36 60,00 TB 35 58,33 54 90,00 55 91,67 47 78,33 TB 52 86,67 58 96,67 57 95,00 56 93,33 TB 57 95,00 60 TB Kém TB Tốt Phụ biểu 18: Phân tích phương sai nhân tố ảnh hưởng thành phần giá thể đến khả sống sinh trưởng Lõi thọ in vitro vườn ươm SUMMARY Groups Count Sum Average Variance GT1 225 75 19.4389 GT2 175 58.33333 19.47223 GT3 260 86.66667 52.82223 GT4 285 95 2.7889 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Between Groups 2272.917 757.6389 32.06182 8.29E-05 4.066181 Within Groups 189.0445 23.63057 Total 2461.961 11 ... Trang 2.1 Cây Lõi thọ tuyển chọn để lấy mật liệu nhân giống 3.1 Mẫu Lõi thọ in vitro 3535 3.2 Mẫu Lõi thọ in vitro 38 3.3 Chồi Lõi thọ tái sinh in vitro công thức BI5 40 3.4 Chồi Lõi thọ in vitro. .. trường ni cấy thích hợp cho giai đoạn quy trình nhân giống Lõi thọ phương pháp nuôi cấy in vitro; - Đưa Lõi thọ từ điều kiện in vitro trồng thành công Vườn ươm 2.2 Đối tượng nghiên cứu Cây Lõi thọ. .. trường giống có nhu cầu lớn việc làm cần thiết có nhiều ý nghĩa Để đạt mục tiêu trên, tiến hành thực đề tài : ? ?Nghiên cứu nhân giống Lõi thọ (Gmelina arborea Roxb. ) kỹ thuật nuôi cấy in vitro? ??