Nghiên cứu nhân giống cây bưởi diễn (Citrus Grandis L.) bằng kỹ thuật nuôi cấu in vitro (Luận văn thạc sĩ)

Nghiên cứu nhân giống cây bưởi diễn (Citrus Grandis L.) bằng kỹ thuật nuôi cấu in vitro (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu nhân giống cây bưởi diễn (Citrus Grandis L.) bằng kỹ thuật nuôi cấu in vitro (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu nhân giống cây bưởi diễn (Citrus Grandis L.) bằng kỹ thuật nuôi cấu in vitro (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu nhân giống cây bưởi diễn (Citrus Grandis L.) bằng kỹ thuật nuôi cấu in vitro (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu nhân giống cây bưởi diễn (Citrus Grandis L.) bằng kỹ thuật nuôi cấu in vitro (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu nhân giống cây bưởi diễn (Citrus Grandis L.) bằng kỹ thuật nuôi cấu in vitro (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu nhân giống cây bưởi diễn (Citrus Grandis L.) bằng kỹ thuật nuôi cấu in vitro (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu nhân giống cây bưởi diễn (Citrus Grandis L.) bằng kỹ thuật nuôi cấu in vitro (Luận văn thạc sĩ)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HOÀNG THỊ XUÂN NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY BƯỞI DIỄN (CITRUS GRANDIS L.) BẰNG KĨ THUẬT NUÔI CẤY IN VITRO LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC THÁI NGUYÊN - 2017 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HOÀNG THỊ XUÂN NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY BƯỞI DIỄN (CITRUS GRANDIS L.) BẰNG KĨ THUẬT NUÔI CẤY IN VITRO Chuyên ngành: Di truyền học Mã số: 60.42.01.21 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Thị Thu Ngà THÁI NGUYÊN - 2017 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Mọi trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Các số liệu, kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa công bố Thái Nguyên, tháng 11 năm 2017 Tác giả luận văn Hoàng Thị Xuân i LỜI CẢM ƠN Lời tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới TS Nguyễn Thị Thu Ngà tận tình hướng dẫn, bảo tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu hồn thành luận văn Trong q trình nghiên cứu, tơi nhận giúp đỡ kĩ thuật viên Trần Thị Hồng (Phòng thí nghiệm Cơng nghệ tế bào thực vật - Khoa Sinh học Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên) Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ q báu Tơi xin chân thành cảm ơn Bộ môn Sinh học đại Giáo dục sinh học Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi để học tập hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lời cảm ơn đến gia đình, tất thầy cơ, bạn bè động viên, khuyến khích giúp đỡ tơi tiến trình học tập hồn thành luận văn Trong q trình làm luận văn khơng tránh khỏi sai sót, tơi mong nhận đóng góp q báu từ thầy bạn bè để tơi có kết tốt Tơi xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, tháng 11 năm 2017 Tác giả luận văn Hoàng Thị Xuân ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG BIỂU v DANH MỤC CÁC HÌNH vi MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Chương 1: TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU 1.1 Nguồn gốc phân loại bưởi 1.1.1 Nguồn gốc 1.1.2 Phân loại 1.1.3 Đặc điểm hình thái 1.2.4 Cây bưởi Diễn 1.2 Thành phần hóa học giá trị sử dụng bưởi 1.2.1 Thành phần hóa học 1.2.2 Giá trị sử dụng bưởi 1.3 Một số giống bưởi chủ yếu giới Việt Nam 1.3.1 Trên giới 1.3.2 Ở Việt Nam 1.4 Tình hình sản xuất bưởi giới Việt Nam 10 1.4.1 Tình hình sản xuất bưởi giới 10 1.4.2 Tình hình sản xuất bưởi Việt Nam 11 1.5 Kĩ thuật nhân giống in vitro 13 1.6 Một số thành tựu nhân giống có múi 19 iii Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Vật liệu hóa chất 22 2.1.1 Vật liệu nghiên cứu 22 2.1.2 Hóa chất, thiết bị 22 2.2 Địa điểm nghiên cứu 23 2.3.Phương pháp nghiên cứu 23 2.3.1 Phương pháp pha môi trường nuôi cấy 23 2.3.2 Phương pháp nuôi cấy in vitro 23 2.3.3 Phương pháp xử lý số liệu 26 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 3.1 Kết khử trùng hạt bưởi Diễn 27 3.2 Kết tạo chồi in vitro bưởi Diễn 28 3.2.1 Ảnh hưởng nồng độ BAP đến phát sinh chồi mẫu cấy 29 3.2.2 Ảnh hưởng kinetin đến phát sinh chồi mẫu cấy 32 3.2.3 Ảnh hưởng tổ hợp BAP kinetin đến phát sinh chồi mẫu cấy 34 3.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng GA3 đến kéo dài chồi bưởi Diễn 36 3.4 Kết tạo bưởi Diễn in vitro hoàn chỉnh 39 3.4.1 Ảnh hưởng IBA đến phát sinh rễ bưởi Diễn 39 3.4.2 Ảnh hưởng α-NAA đến phát sinh rễ bưởi Diễn 41 3.5 Kết vườn ươm 42 3.5.1 Giai đoạn bầu đất 42 3.5.2 Ra vườn ươm 44 Kết luận 46 Đề nghị 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 iv DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT 2,4-D : 2,4D-Dichlorophenoxy Acetic Acid BAP : 6-Benzyl Amino Purin Cs : Cộng ĐC : Đối chứng MS : Murashige - Skoog (1962) IAA : Indoly Acetic Acid IBA : Indoly Butyric Acid NAA : α - Napthalen Acetic Acid GA3 : Gibberellin Kinetin : 6-furturylamino purine iv DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Tình hình sản xuất ăn có múi Việt Nam giai đoạn 2010- 2014 12 Bảng 2.1 Thành phần môi trường MS 22 Bảng 3.1 Ảnh hưởng thời gian khử trùng javen đến nảy mầm hạt bưởi Diễn (sau tuần) 27 Bảng 3.2 Ảnh hưởng BAP đến phát sinh chồi mẫu cấy 30 Bảng 3.3 Ảnh hưởng kinetin đến phát sinh chồi mẫu cấy mẫu cấy 35 Bảng 3.5 Ảnh hưởng GA3 đến kéo dài chồi bưởi Diễn 37 Bảng 3.6 Ảnh hưởng IBA đến phát sinh rễ bưởi Diễn (sau tuần) 40 Bảng 3.7 Ảnh hưởng α-NAA đến phát sinh rễ bưởi Diễn 41 Bảng 3.8 Ảnh hưởng giá thể đến tỉ lệ sống sinh trưởng bưởi Diễn in vitro (sau tuần) 43 Bảng 3.9 Kết vườn ươm 44 v DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1 Ảnh hưởng thời gian khử trùng đến nảy mầm hạt bưởi Diễn (sau tuần) 28 Hình 3.2 Ảnh hưởng BAP tới phát sinh chồi mẫu cấy (sau tuần) 31 Hình 3.3 Ảnh hưởng kinetin đến phát sinh chồi mẫu cấy 34 Hình 3.4 Ảnh hưởng tổ hợp BAP kinetin đến phát sinh chồi mẫu cấy (sau tuần) 35 Hình 3.5 Ảnh hưởng GA3 đến kéo dài chồi bưởi Diễn (sau tuần) 38 Hình 3.6 Ảnh hưởng IBA đến phát sinh chồi bưởi Diễn 40 Hình 3.7 Ảnh hưởng α-NAA đến phát sinh rễ bưởi Diễn (sau tuần) 42 Hình 3.8 Ảnh hưởng giá thể đến tỉ lệ sống sinh trưởng bưởi Diễn in vitro (sau tuần) 43 Hình 3.9 Cây bưởi Diễn in vitro trồng vườn ươm 44 vi MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Cây Bưởi (Citrus grandis L.) loại ăn thương mại chủ lực, có lịch sử phát triển lâu đời nước ta Do có phổ thích nghi rộng nên trồng khắp vùng sinh thái nước từ Bắc vào Nam tạo nên vùng đặc sản tiếng như: Bưởi Đoan Hùng (Phú Thọ), bưởi Diễn (Từ Liêm, Hà Nội), bưởi Phúc Trạch (Hà Tĩnh), bưởi Da Xanh (Bến Tre), bưởi Đỏ (Thanh Hóa), bưởi Năm Roi,… Mỗi loại bưởi có hương vị đặc trưng riêng Diện tích sản lượng bưởi tăng không tạo cảnh quan đẹp, góp phần bảo vệ mơi trường sinh thái bền vững, nâng cao hiệu kinh tế cho nông hộ mà đáp ứng nhu cầu xuất khẩu, tạo điều kiện chuyển dịch cấu kinh tế nông nghiệp, thực cơng nghiệp hóa, đại hóa nơng nghiệp nơng thơn Nhiều nhà vườn trồng bưởi sau - năm thu lãi 40 - 100 triệu đồng/ha, suất cao tới 250 quả/cây vườn có mật độ khoảng 1000 - 1200 cây/ha [8] Cây bưởi loại ăn quý, có giá trị dinh dưỡng cao Trong lá, hoa, vỏ chứa nhiều tinh dầu; vỏ bưởi có pectin, narigin, men tiêu hóa peroxydaza, amilaza,… Quả bưởi có vị mát, chứa nhiều vitamin, chất khoáng cần thiết cho thể người [23] Chính vậy, bưởi dược liệu quan trọng có nhiều ứng dụng y học cổ truyền dân tộc Bưởi thuộc loại ăn lâu năm chịu ảnh hưởng rõ điều kiện ngoại cảnh, biểu qua sinh trưởng, phát triển, suất phẩm chất Hiện nay, Việt Nam nhiều nước giới rơi vào tình trạng nguồn gen ăn dần suy giảm, đặc biệt loại ăn q Đứng trước việc thị hóa, giới thiệu giống trồng biến đổi khí hậu, nguy xói mòn nguồn gen diễn nhanh chóng Diện tích ăn phá hàng năm khơng nhỏ gặp nhiều khó khăn dịch bệnh chất lượng giống Nhiều nông trại sản xuất giống áp dụng phương pháp truyền thống như: chiết cành, ghép cành, gieo hạt, [3], [15] Tuy nhiên giống xuất vườn chưa cao, thời gian sinh trưởng kéo dài, kết đạt không ổn định, chất lượng không ... PHẠM HOÀNG THỊ XUÂN NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY BƯỞI DIỄN (CITRUS GRANDIS L.) BẰNG KĨ THUẬT NUÔI CẤY IN VITRO Chuyên ngành: Di truyền học Mã số: 60.42.01.21 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Người hướng... thể đến tỉ lệ sống sinh trưởng bưởi Diễn in vitro (sau tuần) 43 Hình 3.9 Cây bưởi Diễn in vitro trồng vườn ươm 44 vi MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Cây Bưởi (Citrus grandis L.) loại ăn thương... 3.2.3 Ảnh hưởng tổ hợp BAP kinetin đến phát sinh chồi mẫu cấy 34 3.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng GA3 đến kéo dài chồi bưởi Diễn 36 3.4 Kết tạo bưởi Diễn in vitro hoàn chỉnh 39 3.4.1