Đề cương Vi sinh vật thú y

Tài liệu được biên soạn giúp các bạn sinh viên hệ thống, ôn luyện kiến thức về đại cương vi sinh vật thú ý hiệu quả, một số nội dung trong đề cương bao gồm: đặc tính sinh học và chẩn đoán vi khuẩn học của tụ cầu khuẩn Staphylococcus aureus( tụ cầu khuẩn ); đặc tính sinh học của Streptococcus suis(liên cầu khuẩn); đặc tính sinh học và chẩn đoán vi khuẩn học của trực khuẩn đóng dấu lợn...

ĐỀ CƯƠNG VI SINH VẬT THÚ Y CÂU 1: Đặc tính sinh học chẩn đốn vi khuẩn học tụ cầu khuẩn Staphylococcus aureus( tụ cầu khuẩn ) I Đặc tính sinh học Hình thái + hình cầu, d=0,7-1 + vi khuẩn gram + + không sinh nha bào,giáp mơ, khơng có long + bệnh phẩm thường xếp thành đôi, đám giống chùm nho Đặc tính ni cấy + sống hiếu khí + nhiệt độ thích hợp : 32-37 C + mơi trường nước thịt � Sau 24h : môi trường đục, lắng cặn, mặt khơng có màng + mơi trường thạch thường � Sau 24h : khuẩn lạc dạng S, tròn trơn, nhẵn � sinh sắc tố nên có màu: Màu vàng thẫm Màu vàng chanh Màu trắng + môi trường thạch máu Khuẩn lạc dạng S, mọc tốt Gây tượng dung huyết ( gây tan hồng cầu thỏ) gồm loại : Alpha , Beta, Delta, Gamma + Thạch sapman: môi trường đặc biệt để phân lập kiểm tra độc lực vi khuẩn + Môi trường gelatin : Vi khuẩn cấy theo đường sâu, 20C/2-3 ngày tan chảy Đặc tính sinh hóa + Chuyển hóa đường: lên men đường glucozo,lactozo,levulozo,mannozo,mannit,saccarozo, khơng lên men đường galactozo + phản ứng catalaz : dương tính Sức đề kháng + với nhiệt độ: 70C/1h, 80C/10-30p , 100C vài phút + chất sát trùng thông thường diệt VK nhanh + nơi khô VK sống > 200 ngày Các chất tụ cầu tiết ● Các độc tố: + độc tố dung huyết ( alpha, beta, delta, gamma) + Nhân tố diệt bạch cầu + độc tố ruột ● Enzyme + men đông huyết tương + men làm tan tơ huyết + men phân phải DNA + men phân giải protein + men phân giải lipid + men phân giải penixilinase Tính gây bệnh ● Trong tự nhiên + thường kí sinh da, niêm mạc người gia súc + sức đề kháng giảm, tổn thương tổ chức � Vk xâm nhập gây bệnh: viêm da, mưng mủ Viêm vú Ngộ độc đường ruột Gia cầm: bệnh xương khớp ● Trong phịng thí nghiệm + Thỏ cảm nhiễm Đưa VK vào da� áp xe da Đưa VK vào TM tai � sau 36-48h�thỏ chết� mổ thấy nhiều ổ apxe phủ tạng II Chẩn đốn vi khuẩn học Quy trình chẩn đốn B1 Lấy bệnh phẩm - Đúng quy cách, tuyệt đối vô trùng để tránh nhiễm VK khác - Nếu ổ apxe dùng xilanh hút mủ B2 Kiểm tra kính hiển vi - Làm tiêu bản, nhuộm gram, quan sát : hình cầu, gram +, tụ thành đám giống chùm nho B3 Ni cấy vào mơi trường thích hợp Nuôi vào môi trường nước thịt, thạch máu, thạch sampan B4 Kiểm tra đặc tính sinh hóa - Chuyển hóa đường - Phản ứng catalazo + B5 Tiêm động vật thí nghiệm Dùng thỏ để gây bệnh CÂU Đặc tính sinh học Streptococcus suis( liên cầu khuẩn ) Hình thái - Hình cầu, hình bầu dục - d= 0,5-1 - xếp thành chuỗi ngắn (8-10 VK) - đơi có giáp mơ - Gram + - Khơng có lơng Đặc tính ni cấy - Sống hiếu khí, yếm khí tùy tiện - Nhiệt độ thích hợp: 37C - Ph: 7,2-7,4 - Môi trường nước thịt: lúc đầu đục sau lắng xuống đáy � sau 24h, mt đáy có cặn - Mơi trường thạch thường: khuẩn lạc dạng S, trịn nhỏ,lồi,màu xám - Mơi trường thạch máu: khuẩn lạc dạng S to hơn, gây tượng dung huyết ( alpha, beta, gamma) Đặc tính sinh hóa - VK lên men đường: glucoz, lactoz,saccaroz, tùy chủng - VK không lên men đường: mannit, Inulin - Các phản ứng sinh hóa: Indol (-) (-) Khơng làm đơng vón huyết tương ( Coagulaz -) Amylaza (+) Các chất liên cầu khuẩn tiết - Độc tố: + ban đỏ ( protein) + dung huyết ( streptolysin O, streptolysin Z) - Các enzyme + Streptokinaza: Men làm tan tơ huyết + Streptodornaza: Men làm lỏng mủ đặc + Hyaluronidaza + DPN: giết bạch cầu + Proteinaza: phân hủy protein Sức đề kháng - Có sức đề kháng nhiệt hóa chất + 70C/35-40p, 100C/1p + chất sát trùng thông thường dễ tiêu diệt VK Tính gây bệnh - Trong tự nhiên + có khắp nơi thể người động vật + người : gây viêm họng, mẩn đỏ,… +ở động vật : thường gây chứng nung mủ, viêm vú, - Trong phịng thí nghiệm + Thỏ động vật dễ cảm nhiễm, chuột nhắt + tiêm da thỏ� apxe nơi tiêm + tiêm vào TM � thỏ chết nhanh nhiễm khuẩn huyết CÂU Đặc tính sinh học chẩn đốn vi khuẩn học trực khuẩn đóng dấu lợn I Đặc tính sinh học Hình thái - Trực khuẩn nhỏ, thẳng, có cong - d= 1-1,5 x 0,2-0,4 - khơng có lơng, khơng di động - khơng có nha bào, giáp mơ - Gram + - Trong canh trùng non,lợn cấp tính : VK đứng riêng lẻ đôi - Trong canh trùng già, lợn mắc bệnh mạn tính: VK dạng sợi tơ dài, cong queo Đặc tính ni cấy - Sống hiếu khí tùy tiện - Nhiệt độ thích hợp: 37C - pH: 7,2-7,6 - Môi trường nước thịt: Sau 24h, mơi trường đục Lắc lên có vẩy đục đám mây - Thạch thường: sau 24h, Khuẩn lạc dạng S nhỏ, rìa gọn,trịn - Thạch máu: khơng dung huyết Khuẩn lạc nhỏ, trịn - Mơi trường Packe: dùng để phân lập VK - Gelatin: ko làm tan chảy Đặc tính sinh hóa - Chuyển hóa đường: phần lớn lên men: glucoz, galactoz,levuloz,mannoz Không lên men: saccaroz,mantoz, socbiton,… - Các phản ứng sinh hóa + phản ứng VP (-) + phản ứng MR (-) + Phản ứng Indol (-) + sinh (+) Sức đề kháng - VK sống 17-35 năm môi trường dịch thể - Phủ tạng lợn chết thối: tháng - Lợn chết chôn: tháng - Sấy khô: tuần - Ánh sáng mặt trời: 12 ngày - Nhiệt độ cao dễ tiêu diệt VK: + 70C/5p, 100C chết + thịt có VK, cắt dày 15cm/100C/2h30p chưa chết - Chất sát trùng thông thường tiêu diệt nhanh Tính gây bệnh - Trong tự nhiên + lợn, lợn (3-4 tháng�1 năm) dễ mẫn cảm + loài chim cảm thụ mức độ : bồ câu-gà-vịt-ngan-ngỗng-vẹt-sáo-chim sẻ Triệu chứng: mào tím, suy nhược, ỉa chảy Bệnh tích: xuất huyết niêm mạc bắp thịt, gan lách sưng to,tụ máu + Trâu bị, dê, cừu, chó dễ mắc + Người mắc bệnh có biểu : sốt cao, nốt đỏ da, đầu khớp, hạch sung - Trong phịng thí nghiệm + chuột bạch: cảm thụ nhất� tiêm da � sau 2-6 ngày chuột bị bại huyết chết Trước chết, chuột sợ ánh sáng, viêm sưng giác mạc Bệnh tích: phổi sưng, tụ máu, lách sưng, gan màu tro,nát + bồ câu: loài mẫn cảm vs VK, tiêm canh khuẩn 24h/1ml vào bắp thịt, da Sau 3-4 ngày� chết Trước chết: chân bại, thở khó Bệnh tích: chỗ tiêm sưng tụ máu, tim sưng, niêm mạc tụ máu, viêm ngoại tâm mạc tích nước, gan thận viêm tụ máu II Chẩn đốn vi khuẩn học Quy trình chẩn đoán B1 Lấy bệnh phẩm - Đúng quy cách, tuyệt đối vô trùng để tránh nhiễm VK khác - Lấy máu tim lách, bại huyết dùng gan, thận Nếu chết, bại huyết mà ko chết lấy tủy xương ( đốt sống 3-5) B2 Kiểm tra kính hiển vi - Làm tiêu bản, nhuộm gram Thấy VK ngắn, nhỏ, tập trung nhiều bạch cầu Lợn mạn tính : thấy VK có hình sợi dài B3 Ni cấy vào mơi trường thích hợp - Nuôi cấy tốt môi trường Packe - Bệnh phẩm thối� nghiền vs nước sinh lý�tiêm da bồ câu�phân lập VK lấy máu từ tim gan bồ câu chết� ni cấy vào mt qsat tính mọc B4 Kiểm tra đặc tính sinh hóa - Chuyển hóa đường - Phản ứng VP,MR,Indol, B5 Tiêm động vật thí nghiệm Dùng chuột bạch bồ câu Câu Đặc tính sinh học chẩn đốn vi khuẩn học vi khuẩn Pasteurella multocida ? I Đặc tính sinh học Hình thái - có hình thái giống - trực khuẩn nhỏ, hình trứng bầu dục, đầu tròn - d= 0,25-0,4 x 0,4-1,5 - gram – - khơng : có lơng, di động, nha bào - có giáp mơ Đặc tính sinh học - Là VK hiếu khí yếm khí khơng bắt buộc - Nhiệt độ ni cấy : 13-38C - pH: 7,2-7,4 - môi trường nước thịt + sau 24h, đục, lắc có tượng vẩn đục sương mù, đáy ống có cặn nhầy, có màng mỏng mặt mt, có mùi nước dãi khơ - mơi trường thạch thường + khuẩn lạc dạng S, nhỏ, suốt - môi trường thạch máu + không làm dung huyết + pt tốt thạch thường, khuẩn lạc to - mơi trường thạch có huyết huyết cầu tố ( dùng để giám định, phân lập xác định độc lực VK ) + VK độc lực cao: màu xanh lơ, xanh mạ chiếm 2/3, 1/3 màu vàng kim loại + VK độc lực vừa : màu xanh lơ diện tích màu da cam + Vk có độc lực yếu : ko có tượng phát quang - mơi trường gelatin + khơng làm tan chảy gelatin, Khuẩn lạc trịn, mịn Đặc điểm sinh hóa - Chuyển hóa đường + VK lên men đường, không sinh hơi: glucoz, saccaroz,mannit,sozbit,xylo + VK không lên men đường: lactoz,maltoz,rammo, - Các phản ứng sinh hóa khác + Indol – + Vp – + MR – + sản sinh bất thường, lúc có ,lúc ko + catalaz + + Oxydaz + Sức đề kháng - Dễ bị tiêu diệt ánh sáng, nhiệt độ chất sát trùng thông thường + 58C/20p, 80C/10p, 100C vài phút + ánh sáng mặt trời: tiêu diệt VK canh khuẩn ngày + axit phenic 5%/1p, nước vơi 1%/3-5p Tính gây bệnh - Trong tự nhiên + gây bệnh cho loài động vât gia cầm� bại huyết kèm tụ huyết, xuất huyết tổ chức, niêm mạc , phủ tạng + trâu bò: gây triệu chứng viêm ruột, viêm phổi, thủy thũng hạch da + gia cầm: thường bị bệnh nặng hay xảy dịch + Dùng chuột bạch tiêm vào óc hay phúc mạc,chuột chết sau 3-6 ngày II Chẩn đoán virus học - Lấy bệnh phẩm � Xử lý bệnh phẩm � Tiêm động vật thí nghiệm � Kết luận - Lấy bệnh phẩm + - - - Bệnh phẩm não gà nghi mắc Newcatsle Xử lý bệnh phẩm + Nghiền với nước sinh lý ( 1/10 ) + sử dụng kháng sinh để diệt tạp khuẩn ( penixilin, treptomyxin ) Tiêm động vật thí nghiệm + Tiêm da bồ câu : + Tiêm bắp thịt chim ri Kết luận + Với bồ câu : Sau 6-7 ngày bồ câu ủ rũ, nhiệt độ 43°C, bỏ ăn, sã cánh 11-12 ngày sau vật uống nước nhiều, ỉa phân trắng lỏng xanh, bại liệt chân chết + Với chim ri : Con vật bị tê liệt lúc gần chết Bệnh tích : Tụ máu tồn thân, mật sưng, khí quản lầy nhầy Câu 17 Trình bày phương pháp làm phản ứng HA ( nguyên lý, mục đích, cách tiến hành ) ? Trình bày phương pháp làm phản ứng HI để giám định virus Newcastle virus Cúm gia cầm ? Phương pháp làm phản ứng HA - Nguyên lý + Do capxit virus có bán kháng nguyên HN có khả gắn với thụ thể hồng cầu làm hồng cầu dính kết với nhau, sau cắt đứt thụ thể hồng cầu để chúng lại rời - Mục đích + Xác định virus có khả gây ngưng kết hồng cầu + Xác định nồng độ virus cao hay thấp + Xác định đơn vị ngưng kết dùng cho phản ứng HI - Cách tiến hành + Chuẩn bị : Hồng cầu gà 1% ● Lấy 10ml máu gà + 5ml Citrat Na 5% để chống đơng ● Ly tâm 1000 vịng/5-10 phút, bỏ bạch cầu huyết tương ● Cho nước sinh lý vào rửa hồng cầu ly tâm tiếp, loại bỏ phần nước Làm lần ● Lấy hồng cầu đặc pha với nước sinh lý thành nồng độ 1% Nước trứng có virus ● Lấy bệnh phẩm, xử lý, tiêm huyễn dịch bệnh phẩm qua trứng, phôi chết, mổ trứng thu nước để phát virus + Tiến hành phản ứng Thực nhựa vi ngưng kết: Chữ U chữ V Cho vào dãy phản ứng theo sơ đồ + Để yên 15-20 phút đọc kết Phản ứng dương tính : Hồng cầu ngưng kết (NK) nằm rải thành mảng đáy lỗ Phản ứng âm tính: Hồng cầu lắng xuống đáy thành cục màu đỏ, nước bên Hiệu giá ngưng kết : Là độ pha loãng virus lớn mà có tượng ngưng kết hồng cầu rõ Phương pháp làm phản ứng HI - Chuẩn bị + Kháng nguyên nghi : Là virus phân lập có gây ngưng kết hồng cầu, pha : + ● Hiệu giá có đơn vị HA với virus Newcastle ● Hiệu giá đơn vị HA với virus cúm gia cầm Dung dịch hồng cầu gà 1%: chuẩn bị cho phản ứng HA + Kháng thể chuẩn: ● Kháng thể Newcastle ● Kháng thể cúm gia cầm(ví dụ:H5N1) - Tiến hành + cho nước sinh lý kháng thể theo sơ đồ virus Newcastle : đơn vị HA virus cúm gia cầm : đơn vị HA ● Trộn giếng thứ 1, hút 25 ml chuyển giếng thứ ● Trộn giếng thứ 2, hút chuyển tiếp… đến giếng thứ 10 hút bỏ 25 ml ● Cho tiếp 25 ml dung dịch virus pha loãng nồng độ HA (với virus Newcastle), 8HA (với virus cúm gia cầm) vào tất cả giếng, trừ giếng 12 làm ĐC + ● Để 20 phút cho kháng thể trung hoà virus tương ứng ● Cho 50 ml hồng cầu vào tất cả giếng dãy phản ứng ● Trộn để 20 phút đọc kết quả - Kết : + Nếu bên dãy có chứa KT Newcastle khơng ngưng kết hồng cầu kết luận nước trứng có chứa virus Newcastle, kháng thể Newcastle trung hồ hết virus Newcastle + Cịn bên dãy có chứa KT cúm gà có ngưng kết hồng cầu gà kết luận nước trứng chứa virus Newcastle Vì KT cúm gà khơng trung hồ virus Newcastle + Nếu bên dãy có chứa KT cúm gia cầm (H5N1) hồng cầu không bị ngưng kết kết luận nước trứng có chứa virus cúm gia cầm (H5N1), KT cúm gia cầm trung hồ hết virus cúm + Cịn bên dãy có chứa KT Newcastle có tượng ngưng kết hồng cầu gà kết luận nước trứng có chứa virus cúm gia cầm Vì KT Newcastle khơng trung hồ virus cúm gia cầm + Nếu cả hai bên không gây ngưng kết hồng cầu kết luận nước trứng có cả hai loại virus Newcastle virus cúm gia cầm Câu 18 Đặc tính sinh học virus gây bệnh Gumboro chẩn đốn virus học bệnh Gumboro I Đặc tính sinh học Hình thái - Thuộc họ Birnavirideae, giống Birnavirus - Là loại virus trần, khơng có vỏ bọc ngồi cùng, có hình dạng khối đa diện - Kích thước: 50-70 nm Cấu trúc Capxit: • Lớp capxit virus cấu tạo 32 capsome • Mỗi capsome tạo thành loại protein có cấu trúc khác với tên gọi VP1, VP2, VP3, VP4, VP5 (VP: viral protein) Hệ gen: chứa đoạn RNA sợi đơi Virus Gumboro có serotyp serotyp ­ Serotyp 1: gây bệnh cho gà 10 tuần tuổi ­ Serotyp 2: gây bệnh cho gà tây ­ Khác biệt tính gây bệnh � khơng gây miễn dịch chéo, phân biệt phản ứng trung hịa virus Đặc tính ni cấy - Nuôi cấy phôi gà + Cấy virus vào màng niệu, xoang niệu, túi lịng đỏ phơi gà ấp 9-11 ngày tuổi + Phôi chết sau gây nhiễm 3-5 ngày + Bệnh tích: phơi sung huyết, xuất huyết, phù phôi + Nuôi cấy môi trường tế bào Trên môi trường tế bào xơ phôi gà, xơ phôi vịt, thận thỏ, thận khỉ + Sau vài lần cấy chuyển virus thích ứng gây hủy hoại tế bào: tế bào biến dạng, co cụm lại + Virus gây hủy hoại tế bào sau 48-96h gây nhiễm + Ni cấy gà thí nghiệm Đối tượng: gà từ 3-6 tuần tuổi, huyết gà kháng thể Gumboro + Sau 2-3 ngày gà có triệu chứng, bệnh tích đặc trưng + Virus Gum cấy chuyển nhiều lần độc lực virus tăng cường Sức đề kháng - Virus có sức đề kháng cao tự nhiên 56 độ C 5h - 60 độ C 30 phút - 70 độ C virus chết nhanh chóng • Virus bị vơ hoạt độ pH: pH = 12 • pH = - Các chất hóa học thơng thường diệt virus như: formalin 0,5% (6h); phenol 0,5% (1h); chloramin 0,5% (10’) Trong phân, rác, chất độn chuồng virus tồn lâu (122 ngày) - � Nguồn tàng trữ virus khiến cho bệnh hay xảy Tính gây bệnh Trong tự nhiên Gà loài mắc bệnh Hiện số tác giả cho gà tây, vịt bị nhiễm bệnh Gumboro + Gà 3-9 tuần tuổi (đặc biệt 3-6 tuần tuổi) cảm nhiễm mạnh ● Tỷ lệ chết thấp: 10-30 % ● Gây thiệt hại kinh tế lớn virus Gumboro gây suy giảm hệ miễn dịch + �dễ mắc bệnh kế phát VD: bệnh Marek, CRD, bệnh Cúm, bệnh Newcastle,… Lý do: ­ Túi Fabricius quan đích virus ­ Túi Fabricius là quan miễn dịch trung tâm biệt hóa tế bào lympho B � virus tấn công và phá hủy các lympho B chín và chưa chín � suy giảm miễn dịch ­ ­ Bệnh xảy quanh năm, tập trung nhiều vào vụ đông xuân Nơi cư trú: + Trong thể bệnh, virus có nhiều túi Fabricius, sau lách, thận quan phủ tạng khác + Trong chất tiết, thức ăn, nước uống, dụng cụ chăn nuôi, chất độn chuồng + Trong phịng thí nghiệm Gây nhiễm cho phơi gà 9-11 ngày + Gây nhiễm cho gà 3-6 tuần tuổi Chẩn đoán virus học Lấy bệnh phẩm � Xử lý bệnh phẩm� Tiêm động vật thí nghiệm� Kết luận - Lấy bệnh phẩm Túi Fabricius lách gà mắc bệnh Xử lý bệnh phẩm + Nghiền với nước sinh lý ( tỷ lệ 1/5 1/10 ) + xử lý kháng sinh để loại bỏ tạp khuẩn + ly tâm loại bỏ cặn Tiêm động vật thí nghiệm + Nhỏ vào miệng, mắt, hậu môn cho gà từ 3-6 tuần tuổi ( gà chưa tiêm vacxin Gumboro ) Kết luận + sau 2-3 ngày gây nhiễn, gà mệt mỏi, ỉa phân trắng, loãng, ủ rũ, bỏ ăn, lơng xù, + nhìn bề ngồi thấy túi Fabricius sưng to, tư chết ngối cổ phía sau + bệnh tích : Cơ ngực,cơ đùi xuất huyết, + - - - Túi Fabricius sưng, xuất huyết, phù thũng Dạ dày xuất huyết ranh giới dày tuyến Câu 19 Đặc tính sinh học virus cúm gia cầm chẩn đoán virus học bệnh cúm gia cầm ? I Đặc tính sinh học Hình thái - Hình cầu hình xoắn - d = 80-100nm Có vỏ bọc ngồi Có hai loại kháng ngun : • HA giúp virus bám xâm nhiễm tế bào chủ • NA giúp virus rời khỏi tế bào sâm nhiễm tế bào khác Cấu tạo - Virus có cấu tạo đơn giản bao gồm vỏ (capsid), vỏ bọc lõi ARN sợi đơn âm - Nhân ARN chứa đoạn mã hóa:NP, M1, M2, PB1, PB2, PA, NS1, NS2 - Dựa vào phản ứng huyết học có serotype chính: A, B, C Độc lực - Thường đột biến gen tạo subtyp mới: • Drift: đột biến kháng nguyên H N => Dịch nhỏ lẻ • - Shift: tái tổ hợp hai đoạn gen virus đồng nhiễm tạo kháng nguyên HA NA => Đại dịch Đến virus cúm phân chia thành 18 subtyp HA 11 subtype NA Đặc tính ni cấy - Môi trường phôi gà 9-11 ngày tuổi, tiêm xoang niệu mô Môi trường tế bào xơ phôi gà, thận chó madin, tạo plaque < 1mm Gây bệnh gà thực nghiệm Ni cấy trứng gà có phơi: Trứng gà có phơi 9-11 ngày tuổi Bệnh phẩm phủ tạng, dịch ngốy hầu họng, ổ nhớp Tiêm 0,2ml dịch bệnh phẩm xử lý vào xoang niệu mô cho trứng (3-5 trứng/bệnh phẩm) + ấp trứng nhiệt độ 370C, theo dõi từ 24-72 h sau tiêm + Kiểm tra bệnh tích phôi trứng (phôi xuất huyết), thu hoạch nước niệu mô để giám định virus phân lập + + + Sức đề kháng • Dễ bị bất hoạt chất sát trùng thơng thường formaldehyde, natri hypochorite, axit lỗng, xút,… Bị tiêu diệt formol, virkon, vôi bột,… Không bền với nhiệt: Mất độc tính 56 – 60 oC Chết 100oC • Sống tháng 4oC • Bảo quản lâu -70o C - Tính gây bệnh + + + + Trong tự nhiên Lồi mắc bệnh : Cá voi, chó mèo, dơi, lợn,người, gia cầm thủy cầm, Tỷ lệ ốm - chết cao : 20-100% Dễ phát triển thành đại dịch Trong phịng thí nghiệm gây nhiễm cho phơi gà 9-11 ngày tuổi II Chẩn đoán virus học Lấy bệnh phẩm � Xử lý bệnh phẩm� Tiêm động vật thí nghiệm� Kết luận + - - Lấy bệnh phẩm Máu tim gà Xử lý bệnh phẩm + Nghiền với nước sinh lý ( 1/10 ) + sử dụng kháng sinh để diệt tạp khuẩn ( penixilin, treptomyxin ) Tiêm động vật thí nghiệm + Tiêm vào phơi gà - 11 ngày tuổi + Tiêm da bồ câu - Kết luận + + Triệu chứng ủ rũ mệt mỏi, ủ rũ, bỏ ăn, lơng xơ xác Bệnh tích : Xuất huyết hầu hết quan Câu 20 Đặc tính sinh học virus dịch tả vịt chẩn đoán virus học bệnh dịch tả vịt ? I Đặc tính sinh học Hình thái, cấu trúc - Là virus ADN thuộc họ Herpesvirideae - Cấu tạo phức tạp hình cầu Vỏ bọc lipid Đường kính 136 – 250 nm Không gây ngưng kết hồng cầu Đặc tính ni cấy + + + ● ● Trên tế bào Xơ phôi vịt, ngan; gan phôi ngan, xơ phôi gà Sau 2- ngày, virus gây hủy hoại tế bào Trên xơ phôi vịt Dùng phôi 12 ngày tuổi Sau 48h, plaque hình thành ngày - 3mm ngày - đến mm 14 ngày - 10mm + + + Trên phôi Trên phôi vịt 12 ngày Sau 4-10 ngày phơi chết Bệnh tích : xuất huyết da vùng lưng,cánh, đầu, tối xuất huyết điểm Tính gây bệnh - Trong tự nhiên vịt cảm nhiễm Ngồi cịn có lồi thủy cầm khác - Trong phịng thí nghiệm, gây bệnh cho vịt, ngỗng, ngan gà ngày tuổi - Ngồi cịn có động vật thí nghiệm khác thỏ, chuột - Lây nhiễm chủ yếu qua đường tiêu hóa Lây nhiễm nhân tạo tiêm virut da, bắp, tĩnh mạch nhỏ mũi Sức đề kháng - Nhạy cảm với ether, chloroform, cồn 75° diệt virus 5-30p - Bất hoạt pH< pH>10 - Đề kháng với nhiệt độ cao ( 30°C/2h, 70°C/20p, ) - Với nhiệt độ lạnh virus bảo quản ( -10°C đến -20°C / năm - làm đơng khơ chất chứa virus bảo quản nhiều năm mà không độc lực II Chẩn đoán virus học Lấy bệnh phẩm � Xử lý bệnh phẩm� Tiêm động vật thí nghiệm� Kết luận + + + + + + Lấy bệnh phẩm Máu phủ tạng làm tiêu quan sát kính hiển vi Nếu có VK khác Salmonella, bệnh ghép theo bệnh Xử lý bệnh phẩm Xử lý kháng sinh để diệt tạp khuẩn Ly tâm để loại bỏ cặn Tiêm động vật thí nghiệm Tiêm cho vịt khỏe da hay bắp thịt sườn Kết luận Nếu có virus, sau 2-3 ngày vịt có triệu chứng ● Tiêu chảy nặng, phân xanh ● Đầu sưng to thủy thũng hàm ● Chân mềm mí mắt sưng Khó thở chảy nước mũi Vịt sốt cao 42-43 °C + Bệnh tích: ● Xuất huyết điểm da đầu, lưng, bụng ● Niêm mạc thực quản viêm, xuất huyết ● Gan sưng tụ máu, có điểm hoại tử trắng to đầu đinh ghim, mật sưng, lách có chấm hoại tử ● Xoang bao tim tích nước vàng suốt ● ● Câu 21 Đặc tính sinh học virus viêm gan vịt chẩn đoán virus học bệnh viêm gan vịt ? I Đặc tính sinh học Hình thái, cấu trúc - Họ Picornavirus - Hình cầu,bề mặt xù xì,kích thước nhỏ - Là virus dạng trần khơng có vỏ bọc ngồi - Capxit gồm 32 capxome có cấu trúc đối xứng khối bao bọc lấy sợi ARN cuộn tròn - Virus viêm gan vịt khơng có khả gây ngưng kết hồng cầu - Khơng có miễn dịch chéo với virus viêm gan người virus dịch tả vịt Đặc tính ni cấy - Trên phơi Trên phôi vịt : Phôi vịt 10 -14 ngày tuổi ,vị trí tiêm xoang niệu, sau gây nhiễm 18- 72 h phơi chết + Với bệnh tích phơi xuất huyết nặng da đầu tứ chi + Phù phôi ;gan sưng , có nhiều điểm xuất huyết, bề mặt gan có nhiều điểm hoại tử màu vàng + Nếu phôi chết muộn nước trứng chuyển màu xanh nhạt Trên phôi gà: + Phôi gà -10 ngày tuổi, vị trí tiêm xoang niệu mơ, sau tiêm - ngày phơi chết + Với bệnh tích xuất huyết da , phơi cịi cọc - Trên mơi trường tế bào: + Nuôi cấy virus tế bào xơ phôi gà , phôi vịt thận phôi vịt, thận phôi gà + Sau - ngày gây nhiễm tế bào bị huỷ hoại : màng tế bào bị vỡ, nguyên sinh chất ,chỉ nhân - Trên động vật cảm thụ: + Vịt 1-7 ngày tuổi cảm với virus Bệnh phát giống tự nhiên Sức đề kháng - Virus viêm gan vịt có sức đề kháng cao sử lý ether , cloroform, trypsin… - Với nhiệt độ 50°C /1h ; 60°C/30ph; 37°CC /48h ;4°C/ 2năm -20°C tồn tới năm - Trong chuồng trại, phân vịt tồn khoảng 10 tuần - Các chất sát trùng pha nồng độ cao sử lý thời gian dài diệt virus Khả gây bệnh - Trong tự nhiên + vịt cảm nhiễm, ngan có khả mắc bệnh + Vịt - tuần tuổi mắc chủ yếu gặp vịt nở vịt - tuần tuổi + Vịt trưởng thành lồi gia cầm khác khơng mắc bệnh - + Ở vịt 1- tuần tuổi bị bệnh tỷ lệ chết từ 50-90% - Trong phịng thí nghiệm + Dùng vịt 1-7 ngày tuổi phôi vịt để gây nhiễm II Chẩn đoán virus học Lấy bệnh phẩm → Xử lý bệnh phẩm → Tiêm động vật thí nghiệm → Kết luận - Lấy bệnh phẩm + Gan vịt nghi bệnh - Xử lý bệnh phẩm + Nghiền với dung dịch đệm PBS + Xử lý kháng sinh dể diệt tạp khuẩn + Ly tâm lấy nước - Tiêm động vật thí nghiệm + Dùng phơi vịt 10-14 ngày tuổi , liều 0,2ml/phôi , tiêm virus vào xoang niệu mơ + Nếu có virus phơi chết vịng 18 - 72h với bệnh tích đặc trưng + Gây bệnh cho vịt con: Đây phương pháp có độ tin cậy cao - Kết luận + Nếu có virus sau 1-3 ngày vịt có triệu chứng: ● Bỏ ăn, buồn ngủ, sã cánh,ỉa chảy ,niêm mạc xanh tím - ● Vịt nằm ngửa , co giật, chân duỗi thẳng, đầu ngoẹo sang bên sườn lưng tư chết đặc trưng bệnh gọi Opisthotonus + Bệnh tích ● Tư chết Opisthotonus ● Bệnh tích chủ yếu tập trung gan : gan sưng ,xuất huyết lốm đốm gan, xuất huyết thành đám, vệt ● Ngồi cịn thấy : tim nhợt nhạt bị luộc chín; màng bao tim túi khí bị viêm, thận, lách sưng ... động vật, g? ?y bệnh sức đề kháng vật giảm sút + Có thể x? ?y bệnh truyền nhiễm kế phát sở thiếu vitamin hay mắc bệnh kế phát kí sinh trùng + Thường g? ?y bệnh cho súc vật đẻ từ 2-3 ng? ?y (4-8 ng? ?y) ●... lần c? ?y chuyển virus thích ứng g? ?y h? ?y hoại tế bào: tế bào biến dạng, co cụm lại + Virus g? ?y h? ?y hoại tế bào sau 48-96h g? ?y nhiễm + Ni c? ?y gà thí nghiệm Đối tượng: gà từ 3-6 tuần tuổi, huyết gà... serotyp ­ Serotyp 1: g? ?y bệnh cho gà 10 tuần tuổi ­ Serotyp 2: g? ?y bệnh cho gà t? ?y ­ Khác biệt tính g? ?y bệnh � khơng g? ?y miễn dịch chéo, phân biệt phản ứng trung hịa virus Đặc tính ni c? ?y - Nuôi