Đề cương - Cẩm

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KIÊN GIANG KHOA KHOA HỌC THỰC PHẨM VÀ SỨC KHỎE LƯƠNG NGỌC CẨM KHẢO SÁT SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ, THỜI GIAN VÀ PH ĐẾN QUÁ TRÌNH TRÍCH LY POLYPHENOL TỪ CÂY SIM (Rhodomyrtus tomentosa) ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Ngành: Công nghệ thực phẩm Mã số ngành: 7420201 Kiên Giang - năm 2021 TRƯỜNG ĐẠI HỌC KIÊN GIANG KHOA KHOA HỌC THỰC PHẨM VÀ SỨC KHỎE LƯƠNG NGỌC CẨM MSSV: 1804202006 KHẢO SÁT SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ, THỜI GIAN VÀ PH ĐẾN Q TRÌNH LY TRÍCH POLYPHENOL TỪ CÂY SIM (Rhodomyrtus tomentosa) ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Mã số ngành: 7420201 GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN ThS HUỲNH KIM YẾN ThS HUỲNH VĂN QUỐC CẢNH Kiên Giang - năm 2021 MỤC LỤC Trang CHƯƠNG GIỚI THIỆU 1.1ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU .2 1.2.1 Mục tiêu chung 1.2.2 Mục tiêu cụ thể .2 1.2.3 Nội dung nghiên cứu 1.3 PHẠM VI NGHIÊN CỨU CHƯƠNG TỔNG QUAN NGHIÊN CỨ .3 2.1 TỔNG QUAN VỀ CÂY NGỌC NỮ BIỂN 2.1.1 Đặc điểm hình thái 2.1.2 Hoạt tính sinh học 2.1.3 Thành phần hóa học .5 2.2 TỔNG QUAN VỀ CÂY CÓC TRẮNG 2.2.1 Đặc điểm hình thái Cóc Trắng 2.2.3 Thành phần hóa học .7 2.3 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ CÂY NGỌC NỮ BIỂN VÀ CÂY CÓC TRẮNG 2.3.1 Trong nước .7 2.3.2 Ngoài nước .8 2.4 TỔNG QUAN VỀ GỐC TỰ DO 10 2.4.1 Khái niệm gốc tự 10 2.4.2 Nguồn gốc phát sinh 10 2.4.3 Tác hại gốc tự 10 2.4.4 Lợi ích gốc tự 11 2.5 TỔNG QUAN VỀ CHỐNG OXY HÓA 11 2.5.1 Khái niệm chất chống oxy hóa .11 2.5.2 Chất chống oxy hóa tự nhiên 11 2.5.3 Chất chống oxy hóa tổng hợp .12 2.6 MỘT SỐ VI KHUẨN GÂY BỆNH THỦY SẢN ĐƯỢC SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU .12 2.6.1 Vi khuẩn Aeromonas hydrophila 12 2.6.2 Vi khuẩn Aeromonas dhakensis 13 2.6.3 Vi khuẩn Edwardsiella ictaluri .14 2.6.4 Vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus .14 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP VÀ PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU 15 3.1 PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU 15 3.1.1 Địa điểm thời gian 15 3.1.2 Nguyên liệu 15 3.1.3 Thiết bị thí nghiệm .15 3.1.4 Hóa chất thí nghiệm .15 3.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.2.1 Thu mẫu, định danh, điều chế cao chiết .16 3.2.2 Xác định hàm lượng polyphenol tổng, flavonoid tổng 17 3.2.3 Khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa in vitro 19 3.2.4 Khảo sát khả kháng khuẩn cao chiết .25 3.3 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ KẾT QUẢ VÀ SỐ LIỆU .25 CHƯƠNG KẾT QUẢ DỰ KIẾN .26 TÀI LIỆU THAM KHẢO .27 DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 2.1 Cây Ngọc Nữ Biển Hình 2 Cây Cóc Trắng Hình 3.1 Phản ứng trung hòa gốc tự DPPH DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng Quy trình thử nghiệm chi tiết với Vitamin C 21 Bảng Quy trình thử nghiệm chi tiết với cao chiết ethanol 21 CHƯƠNG GIỚI THIỆU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ Loài Sim (Rhodomyrtus tomentosa) loài lâm sản gỗ đa tác dụng cho dùng làm thực phẩm ăn tươi, làm siro, chế biến rượu vang, rượu mạnh, kẹo gôm, socola Sim…(Tung, N.H., cộng sự, 2009) phục vụ tiêu dùng xuất Thân, rễ cành Sim dùng y học để chữa bệnh tiêu hóa, xương khớp (Trần Ngọc Hải, 2018) Đặc biệt, sim nhiều sở nghiên cứu sử dụng làm thuốc chữa bỏng có kết tốt Lá Sim dùng làm thuốc chữa đau bụng, tiêu chảy, kiết lỵ Trong nghiên cứu gần đây, 19 hợp chất phenolic đặc trưng sim xác định (Phạm Thị Mai, 2014) Các hợp chất phenolic có sim bao gồm ellagitannin, stillben, anthocyanin, flavonol acid phenolic Chúng chất có hoạt tính chống oxy hóa, chống ung thư, chống viêm chống béo phì Polyphenol hợp chất thơm chứa nhóm hydroxyl đính trực tiếp với nhân benzene, có nhiều thực vật cơng nhận nhóm chất chuyển hóa thứ cấp lớn phổ biến với đặc tính chống oxy hóa rõ rệt Về y học polyphenol hợp chất tự nhiên có nhiều tác dụng kháng viêm, kháng khuẩn, chống dị ứng, chống lão hóa số bệnh tật liên quan đến ung thư (Liyana-Pathirana, 2005) Qua thấy Sim góp phần quan trọng y học, trình tách triết dưỡng chất có cần quan tâm mức định Cần có thêm nhiều nghiên cứu Sim để khơng lãng phí nguồn tài ngun sẵn có Do đó, đề tài khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ, thời gian pH đến trình trích ly polyphenol từ sim (Rhodomyrtus Tomentosa) thực 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 1.2.1 Mục tiêu chung Xác định nhiệt độ, thời gian pH tối ưu cho q trình trích ly phương pháp chiết ngâm 1.2.2 Mục tiêu cụ thể Xác đinh nhiệt độ ly trích cho hàm lượng polyphenol cao Xác định thời gian dung mơi tối ưu cho q trình ly trích polyphenol Xác định pH cho q trình ly trích polyphenol 1.2.3 Nội dung nghiên cứu Nội dung 1: Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ ly trích Nội dung 2: Khảo sát thời gian tối ưu cho trình ly trích Nội dung 3: Khảo sát pH cho q trình ly trích 1.3 PHẠM VI NGHIÊN CỨU Thời gian: 15 tuần Địa điểm:Phịng thí nghiệm Trung tâm Thực hành Thí nghiệm, Trường Đại học Kiên Giang CHƯƠNG TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 2.1 TỔNG QUAN VỀ CÂY 2.1.1 Đặc điểm hình thái R tomentosa thực vật có hoa họ Sim (Myrtaceae) Nó chủ yếu tìm thấy nước Đơng Nam Á, đặc biệt phần phía nam Việt Nam, Trung Quốc, Nhật Bản, Thái Lan, Philippines Malaysia Lá mọc đối, dài 5–7 cm rộng 2–3,5 cm, có ba gân từ gốc, hình bầu dục, tù đến nhọn đầu, màu xanh bóng trên, màu xám đậm, có lơng vàng mặt dưới, với cuống rộng toàn mép Hoa đơn độc thành cụm hai ba, đường kính 2,5–3 cm, có năm cánh màu trắng bên ngồi có màu hồng tía toàn màu hồng Quả mọng hình elip có đường kính 1– 1,5 cm với đài hoa bền bỉ Quả chưa chín có vỏ xanh vị chát Chúng chuyển sang màu đen tía chín với cùi có màu tía, mềm (Langeland & Burks,1998) Hình 2.1 Cây Sim (Nguồn: Tự chụp) 2.1.2 Hoạt tính chống oxy hóa Trong số sản phẩm tự nhiên R tomentosa xác định chất chống oxy hóa hiệu Theo Lavanya et al (2012) chiết xuất từ R tomentosa ức chế đáng kể việc tạo peroxit lipid Khả ức chế q trình peroxy hóa lipid dịch chiết 0,93±0,07 mM acid gallic 100 μg/mL Dịch chiết cho thấy xu hướng khử Fe3+ thành Fe2+ nhanh chóng tăng lên, tương ứng với 10,8 ± 1,12 mM acid gallic 30,5 ± 5,22 mM acid ellagic, tương ứng 1mg/mL Hơn nữa, chiết xuất R tomentosa thể tác dụng bảo vệ chống lại CCl4 giảm hoạt động enzym SOD, CAT GPx máu, gan thận Ở liều 0,8 g/kg thể trọng, phục hồi hoạt động enzym có ý nghĩa tương tự tác dụng α-tocopherol (0,1 g/kg thể trọng) Mặt khác, dịch chiết thể hoạt tính thu hồi 62,13% DPPH nồng độ 200 µg/mL với khả tạo chelat kim loại 36% nồng độ 100 µg/mL (di dalam Kolesterol-Induksi., 2014) 2.1.3 Hoạt tính kháng ung thư Ung thư định nghĩa bệnh nhóm tế bào bất thường phát triển khơng kiểm sốt Ung thư tiếp nguyên nhân gây tử vong toàn giới mức độ tử vong tăng lên hàng năm Các liệu pháp điều trị điển phẫu thuật, hóa trị xạ trị có số cải tiến Tuy nhiên, việc sử dụng liệu pháp không cho kết ý, chí cịn gây tác dụng phụ Hiện nay, Người ta kết hợp điều trị với sản phẩm tự nhiên có sẵn tác nhân bảo vệ hóa học chống lại bệnh ung thư Trong số đó, R tomentosa báo cáo chất chống ung thư tự nhiên đầy hứa hẹn thể Bảng Bảng Hoạt tính chống ung thư R tomentosa STT Tác nhân hoạt tính sinh học Chiết xuất etyl axetat rễ Hoạt động sinh học TLTK Hoạt tính chống tăng sinh HepG2 (Abd Hamid (IC 50 = 11,47 ± 0,280 µg / mL), MCF-7 et al., 2017) (IC 50 = 2,68 ± 0,529 µg / mL), HT29 (IC 50 = 16,18 ± 0,538 µg / mL) sau 72 Rhodomyrtone Ức chế 61,82–85,34% tăng sinh tế bào (Chorachoo HaCaT sau 72 điều trị et al., 2016) Gây chết 21,0-77,8% tế bào sừng sau 72 điều trị Rhodomyrtone Ức chế tăng sinh tế bào ung thư (Tayeh et biểu mô tế bào A431 người (IC 50 = al., 2018) 8,04 ± 0,11 µg/mL) Gây q trình chết rụng tế bào thơng qua việc kích hoạt phân cắt polymerase caspase-7 poly (ADPRibose), gây ngừng chu kỳ tế bào pha G1 Rhodomyrtone Ức chế di tế bào ung thư A431 (Tayeh et cách giảm di chuyển tế bào, al., 2017) khả kết dính tế bào xâm lấn tế bào Rhodomyrtoson Ức chế tế bào HeLa Vero (IC 50