Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học và phân lập phân đoạn n hexane của thân cây đại tướng quân hoa trắng (crinum asiaticum l ) được thu hái tại địa bàn đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HĨA HỌC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU KHOA HỌC SINH VIÊN NĂM 2020 NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ PHÂN LẬP PHÂN ĐOẠN N-HEXANE CỦA THÂN ĐẠI TƯỚNG QUÂN HOA TRẮNG ĐƯỢC THU HÁI TẠI ĐỊA BÀN ĐÀ NẴNG (Crinum asiaticum l.) Chủ nhiệm : VÕ THỊ VẠN LỢI Lớp : 16CHDE Khóa học : 2016 – 2020 Người hướng dẫn: TS.GVC TRẦN MẠNH LỤC Chuyên ngành: HÓA HỌC CÁC HỢP CHẤT CÓ GỐC HỮU CƠ Đơn vị: KHOA HÓA - ĐẠI HỌC SƯ PHẠM - ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG MỞ ĐẦU LÍ DO CHỌN ĐỀ TÀI Hóa học hợp chất thiên nhiên nói chung hợp chất có hoạt tính sinh học nói riêng lĩnh vực ln nhà khoa học quan tâm Ở nước ta, y học cổ truyền sử dụng nhiều thuốc dân gian, nghiên cứu sản xuất nhiều chế phẩm dược vơ q giá để phịng điều trị bệnh Ngày với tiến khoa học kĩ thuật thảm thực vật phong phú, nhà khoa học chiết xuất nhiều hợp chất từ thuốc quý có giá trị chữa bệnh mà cịn mang đậm sắc văn hóa dân tộc Nước ta có nguồn dược liệu phong phú Theo số liệu thống kê thảm thực vật Việt Nam có 12000 lồi, số có 3200 loài sử dụng làm thuốc Y học Ở Việt Nam, Đại tướng quân hoa trắng (Crinum asiaticum L.) trồng nhiều song tác dụng dược lý chưa nhiều người biết đến Vì nguồn dược liệu quý giá chưa tận dụng Trên giới có nhiều cơng trình khoa học nghiên cứu hoạt tính sinh học chất có Đại tướng quân hoa trắng Tại Việt Nam cơng trình nghiên cứu lồi chưa nhiều, có chủ yếu tập trung vào hoạt tính cơng dụng lá, mà chưa có nhiều cơng trình nghiên cứu thân rễ Do đó, tơi chọn đề tài “Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học phân lập phân đoạn cao chiết n-Hexane thân Đại Tướng Quân hoa trắng (crinum asiaticum l.)được thu hái địa bàn Đà Nẵng’’ cho luận văn để góp phần vào việc tìm hiểu nguồn tài ngun dược liệu quý giá đất nước 2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU - Tìm hiểu lồi Đại tướng qn hoa trắng (Crinum asiaticum L.), thuộc họ Thuỷ tiên - Amaryllidaceae thành phố Đà Nẵng - Nghiên cứu chiết tách, phân lập xác định thành phần hóa học chất thu từ Đại tướng quân hoa trắng (Crinum asiaticum L.) ĐỐI TƯỢNG VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng nghiên cứu Đại tướng quân hoa trắng (Crinum asiaticum L.) thu hái thành phố Đà Nẵng 3.2 Phạm vi nghiên cứu - Tiến hành chiết tổng cao ethanol cao phân đoạn từ tổng cao ethanol - Phân lập chất từ sắc ký cột, sắc ký mỏng xác định thành phần chất từ liệu phổ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 4.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết - Thu thập, tổng hợp, phân tích tư liệu ngồi nước đặc điểm, hình thái thực vật, thành phần hóa học, tác dụng dược lý Đại tướng quân hoa trắng (Crinum asiaticum L.) - Tổng hợp tài liệu phương pháp chiết tách phân lập hợp chất thiên nhiên 4.2 Phương pháp nghiên cứu thực nghiệm - Phương pháp thu hái xử lý mẫu dược liệu - Phương pháp chiết rắn - lỏng, lỏng - lỏng dung mơi có độ phân cực khác - Phương pháp sắc ký cột (SKC), sắc ký mỏng (SKBM) để phân lập số hợp chất cao chiết - Phương pháp GC-MS xác định thành phần hóa học cao chiết Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI 5.1 Ý nghĩa khoa học Cung cấp thơng tin khoa học quy trình chiết tách, thành phần cấu tạo số hợp chất hóa học, hoạt tính sinh học dịch chiết ethanol Đại tướng quân hoa trắng (Crinum asiaticum L.) 5.2 Ý nghĩa thực tiễn Góp phần mở rộng ni trồng, khai thác sử dụng loài dược liệu cách hiệu bền vững BỐ CỤC CỦA LUẬN VĂN Chương Tổng quan (24 trang) Chương Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu (15 trang) Chương Kết thảo luận (42 trang) CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ HỌ THỦY TIÊN VÀ CHI CRINUM 1.1.1 Họ Thủy tiên 1.1.2 Thực vật chi Crinum 1.2 TỔNG QUAN VỀ ĐẠI TƯỚNG QUÂN HOA TRẮNG (Crinum asiaticum L.) 1.2.1 Tên gọi, phân loại thực vật 1.2.2 Đặc điểm hình thái thực vật học 1.2.3 Phân bố 1.2.4 Điều kiện sinh trưởng phát triển 1.2.5 Thuộc tính dược lý 1.2.6 Một số thuốc dân gian từ Đại tướng quân hoa trắng 1.3 TỔNG QUAN VỀ KỸ THUẬT CHIẾT TÁCH HỢP CHẤT RA KHỎI MẪU CÂY 1.3.1 Lựa chọn xử lý mẫu 1.3.2 Phương pháp chiết rắn - lỏng 1.3.3 Phương pháp chiết lỏng - lỏng 1.3.4 Phương pháp xác định thành phần nhóm chức cao chiết thuốc thử đặc trưng 1.3.5 Phương pháp sắc ký a Sắc ký mỏng b Sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT VÀ DỤNG CỤ 2.1.1 Nguyên liệu Các phận Đại tướng quân hoa trắng thu hái Hòa Vang - Đà Nẵng 2.1.2 Hóa chất 2.1.3 Dụng cụ thiết bị 2.2 PHƯƠNG PHÁP CHIẾT TÁCH THU NHẬN CÁC MẪU CAO CHIẾT 2.2.1 Phương pháp ngâm dầm (chiết rắn - lỏng) điều chế tổng cao ethanol 2.2.2 Phương pháp chiết lỏng - lỏng tách phân đoạn cao từ tổng cao ethanol 2.3 ĐỊNH TÍNH NHĨM CHẤT BẰNG CÁC THUỐC THỬ ĐẶC TRƯNG 2.3.1 Định tính alkaloid 2.3.2 Định tính flavonoid 2.3.3 Định tính sesquiterpen-lacton 2.3.4 Định tính steroid 2.3.5 Định tính chất béo 2.3.6 Định tính glycoside 2.3.7 Định tính hợp chất phenol 2.4 CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ 2.4.1 Sắc ký mỏng 2.4.2 Phương pháp sắc ký cột 2.4.3 Sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) định danh chất Nội dung nghiên cứu thể sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm Hình 2.11 Hình 2.11 Sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG CAO ETHANOL CÁC BỘ PHẬN CỦA CÂY ĐẠI TƯỚNG QUÂN HOA TRẮNG 3.1.1 Nguyên liệu phận Đại tướng quân hoa trắng Các phân Đại tướng quân hoa trắng sau thu hái tách riêng, rửa sạch, để khơ khơng khí, nghiền mịn 3.1.2 Kết xác định hàm lượng cao chiết ethanol phận Mỗi phận Đại tướng quân hoa trắng: 100g, ethanol 96 : 500ml, ngâm chiết lần, lần 24 nhiệt độ phòng Gộp dịch chiết cô đuổi dung môi thu cao ethanol đến khối lượng không đổi Cân xác định khối lượng cao Khối lượng cao chiết thu từ phận Náng hoa trắng là: phần rễ (36,12%) > phần (28,36%) > phần thân (24,88%) > phần hoa (14,65%) Dựa vào kết khảo sát khối lượng cao chiết tình hình nghiên cứu tìm hiểu, chúng tơi chọn phần thân rễ Náng hoa trắng làm nguyên liệu cho nghiên cứu luận văn 3.2 KẾT QUẢ ĐIỀU CHẾ TỔNG CAO ETHANOL VÀ CÁC CAO PHÂN ĐOẠN TỪ TỔNG CAO ETHANOL 3.2.1 Kết điều chế tổng cao ethanol phương pháp ngâm chiết Khối lượng tổng cao ethanol thu từ phần thân (1,3kg, độ ẩm 6,75%) 305,12g (tương ứng 25,17%) từ phần rễ (1,0kg, độ ẩm 7,18%) 333,13g (tương ứng 35,89%) 3.2.2 Kết điều chế cao phân đoạn từ tổng ethanol phương pháp phân bố: Lấy 100g cao chiết ethanol thu đem phân tán vào trở lại 300ml nước cất Sau tiến hành chiết lỏng lỏng với dung mơi có độ phân cực tăng dần hexane, diclorometane ethyl acetate a Chiết phân bố lỏng - lỏng dung môi hexane Tổng cao chiết ethanol sau phân tán vào chiết lần (mỗi lần 500ml) với hexane Gộp dịch chiết lần lại, cô đuổi dung môi ta thu phân đoạn cao chiết hexane b Chiết phân bố lỏng - lỏng dung môi dichloromethane Phần dịch nước sau chiết với hexane loại tiếp tục chiết lần (mỗi lần 500ml) với dung môi dichloromethane Gộp dịch chiết lần, cô đuổi dung môi ta thu phân đoạn cao chiết dichloromethane c Chiết phân bố lỏng - lỏng dung môi ethyl acetate Phần dịch nước sau chiết với dichloromethane tiếp tục chiết lần (mỗi lần 500ml) với dung môi ethyl acetate Gộp dịch chiết lần, cô đuổi dung môi áp suất thấp ta thu cao chiết ethyl acetate d Dịch nước lại Dịch nước lại sau chiết với ethyl acetate, cô đuổi dung môi ta thu cao dịch nước lại thường gọi cao nước Tổng khối lượng cao thu phương pháp chiết lỏng - lỏng với dung môi từ cao tổng ethanol (100,0g) 95,22g Các phân đoạn chiết thu từ tổng cao ethanol là: + Dung môi hexane: 5,92g + Dung môi dichloromethane: 1,45g + Dung mơi ethyl acetate: 1,74g + Cịn lại cao nước: 86,11g 3.3 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN NHÓM CHẤT CÁC PHÂN ĐOẠN CAO TÁCH TỪ TỔNG CAO ETHANOL Bảng 3.6 Thành phần nhóm chất có phân đoạn cao tách từ tổng cao ethanol phần thân Đại tướng quân hoa trắng ALKALOID Mayer Dragendorff Wagne hexane + +++ +++ dichloromethane + +++ +++ ethyl acetate +++ +++ cao nước + +++ +++ FLAVONOID 1% 1% H2SO4 đặc NaOH/ethanol AlCl3/ethanol hexane + +++ dichloromethane + ethyl acetate +++ +++ cao nước ++ STEROID Salkowski Rosenthaler hexane +++ +++ dichloromethane +++ +++ ethyl acetate ++ +++ cao nước ++ +++ GLYCOSID Tollens Keller–Killiani Phenol–H2SO4 hexane +++ +++ ++ dichloromethane +++ +++ ++ ethyl acetate +++ +++ cao nước +++ ++ PHENOL 1% Vanilin + 5% FeCl3/H2O Bortrager HCl đặc hexane + ++ dichloromethane +++ ethyl acetate ++ +++ cao nước +++ SESQUITERPEN–LACTON H2SO4 đậm đặc hexane +++ dichloromethane +++ ethyl acetate ++ cao nước ++ TANNIN Gelatin mặn Stiasny hexane + + dichloromethane + ethyl acetate ++ + cao nước - ++ ++ ++ +++ Tolens ++ +++ +++ +++ 5% FeCl3/H2O +++ +++ +++ +++ Dựa kết định tính thành phần nhóm chức có cao chiết từ cao tổng ethanol thân Đại tướng quân hoa trắng ta thấy: thành phần hóa học cao phân đoạn thân Náng hoa trắng ta thấy có chứa hợp chất alkaloid, flavonoid, sesquiterpen-lacton, steroid, glycosid, phenol, tannin với mức độ khác Chẳng hạn định tính hợp chất alkaloid phân đoạn cho kết dương tính với thuộc thử Dragendorff Wagner, phân đoạn có độ phân cực cao dần biểu thuốc thử Wagne tăng dần, biểu thuốc thử Mayer lại giảm dần 3.4 KẾT QUẢ ĐỊNH DANH CÁC CHẤT CÁC PHÂN ĐOẠN CAO TÁCH TỪ TỔNG CAO ETHANOL CỦA THÂN CÂY ĐẠI TƯỚNG QUÂN HOA TRẮNG 3.4.1 Kết định danh chất phân đoạn cao chiết hexane tách từ tổng cao ethanol thân Đại tướng quân hoa trắng Phương pháp GC-MS định danh 10 cấu tử phân đoạn cao chiết hexane tách từ tổng cao ethanol thân Đại tướng quân hoa trắng 3.4.2 Kết định danh chất phân đoạn cao chiết dichloromethane tách từ tổng cao ethanol thân Đại tướng quân hoa trắng Phương pháp GC-MS định danh cấu tử phân đoạn cao chiết dichloromethane tách từ tổng cao ethanol thân Đại tướng quân hoa trắng 3.4.3 Kết định danh chất phân đoạn cao chiết ethyl acetate tách từ tổng cao ethanol thân Đại tướng quân hoa trắng Phương pháp GC-MS định danh cấu tử phân đoạn cao chiết ethyl acetate tách từ tổng cao ethanol thân Đại tướng quân hoa trắng 3.4.5 Kết định danh chất phân đoạn cao chiết nước thân Đại tướng quân hoa trắng Phương pháp GC-MS định danh cấu tử phân đoạn cao chiết nước thân Đại tướng quân hoa trắng Bằng phương pháp GC-MS, thành phần hóa học chất phân đoạn cao chiết từ tổng cao ethanol phần thân Đại tướng quân hoa trắng tổng hợp đưa Bảng 3.11 Bảng 3.11 Tổng hợp thành phần hóa học chất phân đoạn cao chiết từ tổng cao ethanol phần thân Đại tướng quân hoa trắng S T T 10 Diện tích Pick (%) Tên hợp chất Butanedioic acid, diethyl ester (C8H14O4) Butanedioic acid, hydroxy-, diethyl ester (C8H14O5) Xanthosine (C10H12N4O6) Pentadecanoic acid (C15H30O2) Menthyl chloride (C10H19Cl) Heptadecanoic acid (margaric acid) (C17H34O2) Palmitic acid (Hexadecanoic acid) (C16H32O2) Ethyl palmitate (C18H36O2) Octadeca-9,12dienoic acid methyl ester (Methyl linolate) (C19H34O2) 9-Octadecenal (C18H34O) hexane Dichlo methane ethyl acetate Phân đoạn nước - - 0,49 - - - 0,41 - - - - 3,33 2,53 - - - - 2,80 - - - - - 0,62 44,90 20,17 2,58 - 9,02 - - - 20,68 6,39 1,15 - - 2,66 - - 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 2-Hepadec-2''-yn-1''yloxytetrahydropyran Ethyl linoleate (C20H36O2) Dextromethorphan (C18H25NO) Promethazine (C17H20N2S) 1Cyclohexyleicosane (C26H52) Stigmasta-5,23-dien3.beta.-ol (C29H48O) Stigmasta-5,22-dien3.beta-ol (C29H48O) Flemichapparin (C16H14O4) 2-Monopalmitin (C19H38O4) Clionasterol (C29H50O) 16-Hentriacontanone (C31H62O) 1,2,4-Triazine, 3methoxy-5,6diphenyl(C16H14N3O2+) Galanthan-1,2-diol, 3,12-didehydro-9,10- 2,44 - - - 5,82 - - - - 37,93 - 4,04 - 30,05 - 4,04 1,36 - - - - - 9,24 - - - 15,73 - 2,99 - - - 4,90 - - - - - 28,00 3,03 - - - 75,42 5,36 - - - - - - 10,00 [methylenebis(oxy)], (1.alpha.,2.beta.) (C16H17NO4) 24Methylenecycloartan 24 30,18 ol (C31H52O) Cycloartenol 25 12,22 (C30H50O)  Nhận xét: Từ Bảng 3.11 thống kê phương pháp GCMS định danh 25 cấu tử có cao tổng ethanol từ thân Đại Tướng Quân hoa trắng Trong đó, có số cấu tử chiếm thành phần cao thuộc nhóm chất có ứng dụng thực tế cao Nhóm Alcaloid: gồm 1,2,4-Trizine, 3-methoxy-5,6-diphenyl- ; Dextromethorphan; Promethazine; Xanthosine; 3,12-diehydro-9,10[methylenebis (oxy)]-,(1.alpha.,2.beta.) Nhóm Alcaloid dịch chiết phân bố lỏng – lỏng từ cao tổng ethanol theo kết đo GCMC xuất cao n-Hexan, Diclometan, Ethyl acetate, cao nước Nhiều nghiên cứu hợp chất nhóm Alcaloid có tác dụng kháng viêm giảm phì đại tuyến tiền liệt rõ rệt Kết nghiên cứu tác dụng dược lý khẳng định tác dụng giảm phì đại tuyến tiền liệt rõ, liều độc lớn nên an toàn cho người sử dụng Nhóm Phytosterol: gồm Sigmasta-5,22-dien-3, beta,-ol; Clionasterol; 24-Methylenecycloartanol; Cycloartenol Nhóm chức steroid có mặt dịch chiết n-Hexane Ethylacetate chiết phân bố lỏng - lỏng từ tổng cao ethanol theo kết đo GC–MS Nhiều nghiên cứu hợp chất Phytosterol có ích việc ức chế ung thư phổi, dày, buồng trứng ung thư vú Các nghiên cứu Phytosterol ức chế hấp thụ Cholesterol, làm giảm nồng độ Cholesterol máu giảm nguy bệnh tim mạch Nhóm axit: gồm Pentadecanoic acid; Hexadecanoic acid Trong đó, Hexadecanoic acid có mặt cao dịch chiết nHexan (44,89%), Dichlometan (20,17%), Ethyl acetate (2,58%), cao nước (0,62%) theo kết đo GC–MS Hexadecanoic acid thường gọi Axit Palmitic Hexadecanoic axit béo bão hịa, tìm thấy thể động vật, thực vật số loài vi sinh vật Nó chất oxi hóa có tác dụng chống xơ vữa động mạch 3.5 KẾT QUẢ PHÂN LẬP PHÂN ĐOẠN CAO TÁCH TỪ TỔNG CAO ETHANOL CỦA THÂN CÂY ĐẠI TƯỚNG QUÂN HOA TRẮNG 3.5.1 Kết phân tích sắc ký mỏng thành phần nhóm chức có phân đoạn cao tách từ tổng cao ethanol Kết chạy sắc ký mỏng cao phân đoạn: hexane, dichloromethane, ethyl acetate cao nước cho kết hồn tồn khác Với dung mơi đơn ethyl acetate hệ dung môi hexane - ethyl acetate tỷ lệ 2:8 cấu tử tách rõ xuất nhiều vết phân đoạn cao hexane, chất xuất mỏng rõ ràng, đặc trưng so với phân đoạn cao khảo sát 3.5.2 Kết chạy sắc ký cột phân đoạn cao hexane tách từ tổng cao ethanol a Kết chạy sắc ký cột phân đoạn cao hexane TNH Lấy 5,92g phân đoạn cao hexane (TNH) tiến hành phân lập cột sắc ký silica gel Dựa theo kết thu từ sắc ký mỏng ta gộp lại thành phân đoạn, kí hiệu là: TNH1 (0,67g), TNH2 (2,07g), TNH3 (1,55g), TNH4 (0,73g) TNH5 (0,83g) b Kết chạy sắc ký cột phân đoạn TNH2 Phân đoạn TNH2 có lượng cao nhiều (2,07g) hợp chất phân biệt rõ SKBM nên khảo sát tiếp Dựa SKBM ta gộp phân đoạn kí hiệu là: TNH.2.1 (90mg), TNH.2.2 (130mg), TNH.2.3 (70mg), TNH.2.4 (140mg), TNH.2.5 (260mg), TNH.2.6 (240mg) + Từ phân đoạn TNH.2.1 tiến hành tinh chế thu mẫu có vết chất SKBM, kí hiệu TNH.2.1a Mẫu TNH.2.1a đem đo GC-MS để xác định thành phần + Từ phân đoạn TNH.2.6 tiến hành tinh chế thu mẫu có vết chất SKBM, kí hiệu TNH.2.6a Mẫu TNH.2.6a đem đo GC-MS để xác định thành phần + Trên phân đoạn TNH.2.4 có vết vết chất màu xanh màu đen phân biệt rõ Do ta chọn phân đoạn TNH.2.4 tiến hành sắc ký cột với hy vọng tách riêng cấu tử màu xanh màu đen khỏi c Kết chạy sắc ký cột phân đoạn TNH.2.4 Phân đoạn TNH.2.4 (140mg) có hợp chất cần phân lập (khi định tính sắc ký mỏng) tiếp tục khảo sát Kết sắc ký mỏng cho kết bình hứng thứ tư (kí hiệu mẫu TNH.2.4.4) cho vết hai cấu tử chưa tách riêng được, bình cịn lại không xuất vết chất Mẫu TNH.2.4.4 đem đo GC-MS để định danh thành phần hóa học 3.5.3 Kết định danh chất phân đoạn cao hexane tách từ tổng cao ethanol phần thân Đại tướng quân hoa trắng GC-MS Kết trình phân lập phân đoạn cao hexane thể Hình 3.23 Hình 3.23 Kết phân lập phân đoạn cao hexane a Kết định danh chất mẫu TNH.2.1a Phương pháp GC-MS định danh 16 cấu tử mẫu TNH.2.1a Cấu tử có hàm lượng cao Ethyl palmitate (51,93%) Ngồi có cấu tử đáng quan tâm Morphinan, 3-methoxy-17-methyl-, (9.alpha.,13.alpha.,14.alpha.)- (9,38%); Promethazine (8,67%); Ethyl stearate (6,43%); Ethyl oleate (5,32%) b Kết định danh chất mẫu TNH.2.4.4 Phương pháp GC-MS định danh 15 cấu tử mẫu TNH.2.4.4 Một số cấu tử có hàm lượng cao Pinostrobin chalcone (39,47%); 1,1,3-Triphenylpropane (26,64%); 1,2,4- Triazine,3-methoxy-5,6-diphenyl- (12,09%) c Kết định danh chất mẫu TNH.2.6a Phương pháp GC-MS định danh 23 cấu tử mẫu TNH.2.6a Cấu tử có hàm lượng cao (>5%) bao gồm: Hexadecanoic acid (66,06 %); 16-Hentriacontanone (7,78%) Clionasterol (6,53%)  Nhận xét chung: + Quá trình sắc ký cột làm giàu đáng kể số cấu tử có cao hexane như: cấu tử Ethyl palmitate 9,02% (trong phân đoạn hexane) làm giàu thành 51,93% (trong phân đoạn TNH.2.1a); cấu tử Palmitic acid 44,90% (trong phân đoạn hexane) làm giàu thành 66,06% (trong phân đoạn TNH.2.6a) + Quá trình sắc ký cột phát thêm số cấu tử mới, cấu tử có hàm lượng 5% là: Pinostrobin chalcone (39,47%); 1,1,3-Triphenylpropane (26,64%); Promethazine (8,67%); 16-Hentriacontanone (7,78%); Clionasterol (6,53%); Delta – Tocopherol (5,18%) KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Qua q trình nghiên cứu thành phần hóa học Đại tướng quân hoa trắng thu hái Hòa Vang - Đà Nẵng, đề tài thu kết sau: Đã xác định lượng cao chiết ethanol thu từ phận Đại tướng quân hoa trắng là: phần rễ 36,12%; phần 28,36%; phần thân 24,88% phần hoa 14,65% Đã sử dụng phương pháp chiết lỏng - lỏng để điều chế cao phân đoạn tách từ tổng cao ethanol thân Đại tướng quân hoa trắng Kết quả: + Phân đoạn cao hexane: 5,92% + Phân đoạn cao dichloromethane: 1,45% + Phân đoạn cao ethyl acetate: 1,74% + Phân đoạn cao nước: 86,11 % Đã tiến hành định tính thành phần nhóm chức có cao phân đoạn tách từ cao tổng ethanol thân Đại tướng quân hoa trắng Kết cho thấy có chứa hợp chất alkaloid, flavonoid, sesquiterpen-lacton, steroid, glycosid, phenol, tannin với mức độ khác Bằng phương pháp GC-MS định danh 25 cấu tử phần thân cao phân đoạn tách từ tổng cao ethanol Đã sử dụng sắc ký mỏng, sắc ký cột để phân lập phân đoạn cao hexane tách từ tổng cao ethanol thân Đại tướng quân hoa trắng Kết thu 03 phân đoạn với số chất làm giàu lớn so với ban đầu, đồng thời phát thêm số chất mới, có số chất có hàm lượng cao Cụ thể sau: + Quá trình sắc ký cột làm giàu đáng kể số cấu tử có cao hexane như: cấu tử Ethyl palmitate 9,02% (trong phân đoạn hexane) làm giàu thành 51,93% (trong phân đoạn TNH.2.1a); cấu tử Palmitic acid 44,90% (trong phân đoạn hexane) làm giàu thành 66,06% (trong phân đoạn TNH.2.6a) + Quá trình sắc ký cột phát thêm số cấu tử mới, cấu tử có hàm lượng 5% là: Pinostrobin chalcone (39,47%); 1,1,3-Triphenylpropane (26,64%); Promethazine (8,67%); 16-Hentriacontanone (7,78%); Clionasterol (6,53%); Delta – Tocopherol (5,18%) KIẾN NGHỊ Do thời gian nghiên cứu có hạn, thơng qua kết đề tài mong muốn đề tài phát triển rộng số vấn đề sau: - Tiếp tục nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học phận khác Đại tướng quân hoa trắng nhiều điều kiện, dung môi thổ nhưỡng khác - Thử hoạt tính sinh học dược lực số phân đoạn có chứa cấu tử có dược tính cao, từ phát triển số chế phẩm phục vụ cho mục đích y học  ... ch? ?n đề tài ? ?Nghi? ?n cứu chiết tách, xác định thành ph? ?n hóa học ph? ?n l? ??p ph? ?n đo? ?n cao chiết n- Hexane th? ?n Đại Tướng Qu? ?n hoa trắng (crinum asiaticum l. )? ?ược thu hái địa b? ?n Đà N? ??ng’’ cho lu? ?n. .. thành phố Đà N? ??ng - Nghi? ?n cứu chiết tách, ph? ?n l? ??p xác định thành ph? ?n hóa học chất thu từ Đại tướng qu? ?n hoa trắng (Crinum asiaticum L. ) ĐỐI TƯỢNG VÀ PHẠM VI NGHI? ?N CỨU 3.1 Đối tượng nghi? ?n. .. cao ethanol ph? ?n th? ?n Đại tướng qu? ?n hoa trắng tổng hợp đưa Bảng 3.11 Bảng 3.11 Tổng hợp thành ph? ?n hóa học chất ph? ?n đo? ?n cao chiết từ tổng cao ethanol ph? ?n th? ?n Đại tướng qu? ?n hoa trắng S T