375 mẫu cá chẽm (Lates calcarifer), chiều dài < 15cm, được thu từ 32 đàn cá nuôi trong khu vực Khánh Hòa đã được kiểm tra và phát hiện 14 loài ký sinh trùng, trong đó có 9 loài ngoại ký sinh và 5 loài nội ký sinh. Bệnh do trùng bánh xe (giống Trichodina) và do sán lá đơn chủ (Monogenea) thường xuyên xuất hiện và gây tác hại ở cá chẽm nuôi. Formalin với các nồng độ từ 150-250 ppm và chiết xuất từ củ tỏi với nồng độ 700-900ppm đã được sử dụng để trị hai bệnh này ở cá chẽm. Kết quả trị bệnh đã xác định rằng, formalin 250ppm hoặc chiết xuất từ tỏi 900ppm đã đạt hiệu quả cao trong trị bệnh do trùng bánh xe hoặc sán lá đơn chủ ký sinh ở cá chẽm.
Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 4/2013 THÔNG BÁO KHOA HỌC THÀNH PHẦN LỒI VÀ THỬ NGHIỆM TRỊ BỆNH DO KÝ SINH TRÙNG GÂY RA TRÊN CÁ CHẼM (Lates calcarifer Bloch 1790) NI TẠI KHÁNH HỊA PARASITE SPECIES COMPOSITION AND THE TREATMENT TRIALS FOR PARASITIC DISEASES OF SEABASS (Lates calcarifer Bloch 1790) CULTURED IN KHANH HOA Phan Văn Út1 Ngày nhận bài: 21/6/2012; Ngày phản biện thơng qua: 03/6/2013; Ngày duyệt đăng: 10/12/2013 TĨM TẮT 375 mẫu cá chẽm (Lates calcarifer), chiều dài < 15cm, thu từ 32 đàn cá nuôi khu vực Khánh Hịa kiểm tra phát 14 lồi ký sinh trùng, có lồi ngoại ký sinh loài nội ký sinh Bệnh trùng bánh xe (giống Trichodina) sán đơn chủ (Monogenea) thường xuyên xuất gây tác hại cá chẽm nuôi Formalin với nồng độ từ 150-250 ppm chiết xuất từ củ tỏi với nồng độ 700-900ppm sử dụng để trị hai bệnh cá chẽm Kết trị bệnh xác định rằng, formalin 250ppm chiết xuất từ tỏi 900ppm đạt hiệu cao trị bệnh trùng bánh xe sán đơn chủ ký sinh cá chẽm Từ khóa: cá chẽm, ký sinh trùng, trùng bánh xe, sán đơn chủ, Formalin ABSTRACT Three hundred seventy five seabass (Lates calcarifer), < 15cm in length, sampled from 32 fish farms in Khanh Hoa province were used to examine the infestation of parasites The result revealed the presence of 14 species, including ecto- and endo-parasites Trichodinosis and Monogeneasis were found frequently, causing serious impacts on the fishes Trials for the control of two diseases were conducted by using formalin at 150-250 ppm and garlic extract at 700-900ppm Treatments used formalin at 250ppm and garlic extract at 900ppm showed highly effective against diseases caused by Trichodina and Monogenean on the fish Keywords: Seabass, parasite, trichodinidae, monogenean, Formalin I ĐẶT VẤN ĐỀ Cá chẽm (Lates calcarifer) đối tượng ni có giá trị kinh tế cao, tốc độ tăng trưởng nhanh, nuôi chủ yếu số nước thuộc khu vực châu Á Thái Bình Dương Tuy nhiên, đôi với phát triển nghề nuôi cá chẽm nguy bùng phát dịch bệnh, có nhiều báo cáo giới ký sinh trùng gây bệnh đối tượng Leong Tak Seng Wong See Young có thời gian dài nghiên cứu ký sinh trùng cá chẽm nhiều nước Đông Nam Á Năm 1986, kiểm tra 149 cá chẽm Thái Lan 43 Malaysia, tìm thấy 17 lồi ký sinh trùng Năm 1990, kiểm tra 642 cá chẽm từ Thái Lan Malaysia, xác định 16 loài ký sinh trùng, cá Thái Lan bị cảm nhiễm nặng Trichodina sp., Cryptocaryon irritans, Pseudorhabdosynochus latesi Diplectanum sp Năm 1992, Leong Wong kiểm tra 141 cá chẽm Malaysia phát loài ký sinh trùng thuộc lớp gồm: 2-Monogenea, 2-Trematoda, 1-Nematoda 1-Acanthocephala Năm 1994 Leong Tak Seng có lồi sán đơn chủ ký sinh da cá Lates calcarifer gồm Pseudorhabdosynochus latesi; P monosquamodiscus loài thuộc giống Diplectanium Năm 2008, Rückert ctv nghiên cứu khu hệ ký sinh trùng cá chẽm La pung (Indonesia), kết xác định 19 loài ký sinh trùng, bao gồm: 1-Protozoa, 1-Myxozoan, 3-Digenea, 5-Monogenea, 3-Cestoda, 5-Nematoda 1-Acanthocephala ThS Phan Văn Út: Viện Nuôi trồng thủy sản - Trường Đại học Nha Trang TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • 55 Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sản Do nghiên cứu ký sinh trùng bệnh chúng gây sở khoa học cho biện pháp phòng trị bệnh thực tiễn sản xuất II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 375 mẫu thuộc 32 đàn cá chẽm từ ao, lồng nuôi Khánh Hòa thu kiểm tra, chiều dài trung bình cá 7-12cm Cá vận chuyển hở từ vùng ni phịng thí nghiệm có sục khí Phương pháp nghiên cứu ký sinh trùng cá Dogiel 1929 mô tả lại Hà Ký (1993) sử dụng nghiên cứu với bước chính: Các quan bên ngồi bên cá kiểm tra phát ký sinh trùng kính lúp tay kính hiển vi; Ký sinh trùng thu cố định, đồng thời xác định mức độ cảm nhiễm cá; Phương pháp làm tiêu lưu giữ xác định kích thước ký sinh trùng theo Margolis et al (1982); Ký sinh trùng định danh dựa vào tài liệu Kabata (1992); Lom Dykova (1992); Williams Jones (1994) nhiều tài liệu khác Trong trình nghiên cứu, số bệnh ký sinh trùng gây cá chẽm nuôi phát hiện, bệnh gây tác hại đáng kể cho người ni cá chẽm Khánh Hịa, đặc biệt giai đoạn cá nhỏ Do vậy, số thí nghiệm trị bệnh hóa chất dịch chiết rút từ tỏi thực Thí nghiệm thực xơ nhựa 60 lít, cá thí nghiệm bắt từ ao lồng có tượng chết bị nhiễm ký sinh trùng ngoại ký sinh sán đơn chủ (Monogenea) trùng bánh xe (Trichodinidae) với mức độ cảm nhiễm cao (tỷ lệ nhiễm 100%; cường độ nhiễm 18.8 trùng/cá sán đơn chủ da 47.5 trùng/TTK 10X trùng bánh xe), Số 4/2013 15 cá/1 xô Formalin nồng độ 150ppm, 200ppm, 250ppm dịch chiết rút từ củ tỏi cồn etylic (tỷ lệ 100g tỏi tươi 100ml cồn etylic, sau làm bay hoàn toàn cồn) với nồng độ 700ppm, 800ppm, 900ppm (chỉ dùng sau dung môi bay hết) dùng để trị hai bệnh nêu Mỗi thí nghiệm có nghiệm thức đối chứng, cá bệnh không chữa trị formalin dịch chiết rút từ tỏi Tất loại hóa dược xác định liều gây chết 50% (LC50) theo công thức Reed Muench (1983) Cá xác định cường độ nhiễm ký sinh trùng trước thí nghiệm (tỷ lệ nhiễm 100%), tắm lần 30 phút với formalin dịch chiết xuất từ tỏi, sau tiếp tục ni xơ nhựa 24h để theo dõi, xác định mức độ cảm nhiễm sau tắm hóa dược, thí nghiệm lặp lại thời điểm lần Một số yếu tố môi trường thí nghiệm trị bệnh ghi nhận nhiệt độ, độ mặn pH Mức độ nhiễm ký sinh trùng cá thí nghiệm xác định theo hai tiêu: Tỷ lệ nhiễm (%) = số cá bị nhiễm/số cá kiểm tra x 100; Cường độ nhiễm, sán đơn chủ xác định số trùng/1 cá, với trùng bánh xe xác định số trùng/thị trường kính 10X III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN Thành phần loài ký sinh trùng ký sinh cá chẽm Trên 375 cá chẽm kiểm tra, có 14 lồi, thuộc 10 giống ký sinh trùng phát ký sinh cá chẽm ni Khánh Hịa có loài định danh Tên loài ký sinh trùng, quan ký sinh mức độ nhiễm trình bày bảng Bảng Thành phần loài ký sinh trùng cá chẽm ni Khánh Hịa (n=375) STT Loài ký sinh trùng Trichodina rostrata Cryptocaryon sp Ceratomyxa sp Henneguya cerebralis Goussia sp 10 Diplectanum latesi Diplectanum papaverensis Diplectanum nenue Diplectanum querni Neobenedenia melleni 11 Lecithochirium neopacificum 12 Proteocephalus sp 13 Piscicola sp 14 Caligus epidemicus (TTK 10X: Thị trường kính 10X) 56 • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG Cơ quan ký sinh Tỷ lệ nhiễm (%) Protozoa Da, mang 50,70 Da, mang 16,13 Mật 17,76 Mang 10,43 Dạ dày 1,24 Metazoa Lớp Monogenea Cường độ nhiễm trung bình Số lượng Đơn vị 35,26 3,60 55,80 12,30 19,78 Trùng/TTK 10X Trùng/TTK 10X Bào tử/TTK 40X Bào nang/cá Trùng/lam Mang 59,84 35,76 Trùng/cá Da 47,45 8,50 Trùng/cá 4,50 6,50 Trùng/cá 4,68 1,50 Trùng/cá 37,87 25,63 Trùng/cá 39,52 7,56 Trùng/cá Lớp Digenea Dạ dày, ruột Lớp Cestoida Ruột Lớp Hirudinea Da, mang Lớp Crustacea Da Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 4/2013 Ký sinh trùng tìm thấy đa phần thuộc nhóm ngoại ký sinh trùng (Ectoparasite), có lồi nội ký sinh (Endoparasite) Lecithochirium neopacificum; Proteocephalus sp.; Ceratomyxa sp.; Goussia sp Henneguya cerebralis Ký sinh trùng nội ký sinh cá chẽm có thành phần loài mức độ cảm nhiễm thấp mẫu cá thu từ ao lồng nuôi thức ăn viên Tuy nhiên, hầu hết đàn cá nuôi điều bị nhiễm ngoại ký sinh trùng với mức độ cao, đặc biệt trùng bánh xe (Trichodinidae) sán đơn chủ (Monogenea), ký sinh trùng thường gặp với tỷ lệ cường độ cao cá chẽm, gây chết trực tiếp gián tiếp cho cá chẽm ni Hình Động vật đơn bào ký sinh cá chẽm nuôi Khánh Hòa (1) Henneguya cerebralis ký sinh dạng bào nang mang (Mẫu tươi, độ phóng đại 400 lần) (3) Trichodina rostrata ký sinh mang (Hình vẽ) (5) Goussia sp Ký sinh dày (Mẫu tươi, 100 lần) (2) Ceratomyxa sp Ký sinh mật (Mẫu tươi, 400 lần) (4) Cryptocaryon sp Ký sinh mang (Mẫu tươi, 100 lần) Hình Sán song chủ (Digenea), sán dây (Cestoda), giáp xác (Copepoda) đỉa ký sinh cá chẽm ni Khánh Hịa (1) Lecithochirium neopacificum ký sinh dày (3) Caligus epidemicus ký sinh da, mang khoang miệng (2) Proteocephalus sp ký sinh ruột (4) Piscicola sp ký sinh da, mang khoang miệng TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • 57 Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 4/2013 Hình Sán đơn chủ ký sinh cá chẽm ni Khánh Hịa (1) Neobenedenia melleni ký sinh da (Mẫu tươi) (3) Diplectanium papaverensis ký sinh mang: (3a) Móc (Vẽ: Thanh Nga) (4) Diplectanium querni: (4a) Móc giữa; (4b) Giác bám kitin (Vẽ: Thanh Nga) Trùng bánh xe (Trichodinidae) đượ c phát nhiễm cao phổ biến da, mang vây củ a cá chẽm nhỏ (< 12 cm) nuôi ao đìa Cam Lâm, Cam Ranh Ninh Hịa, sán đơn chủ lại thường xuyên xuất đàn cá chẽ m nuôi lồng Ninh Hịa Vịnh Nha Trang Chính tác nhân gây chết nhiều loài cá biển giai đoạn nhỏ chất lượng nước nuôi độ mặn tăng cao (Yaowanit Danayadol, 1994) Ngoài ra, loài ký sinh trùng thuộc giáp xác Caligus epidemicus đỉa Piscicola sp gây thương tổn bề mặt thể cá nuôi, m cá mấ t má u mẫ n m vớ i tá c nhân thứ cấ p, nhiên cá c tá c nhân thườ ng xuấ t hiệ n vớ i tỷ lệ cườ ng độ cao theo mùa vụ (2) Diplectanium latesi ký sinh mang: (2a) Móc giữa; (2b) giác bám kitin (2c) gai giao cấu (Vẽ: Thanh Nga) (5) Diplectanium nenue: (5a) Móc (Vẽ: Thanh Nga) Kết thử nghiệm LC50 loại hóa dược cá chẽm có chiều dài 10 – 15 cm, tắm 30 phút, theo dõi 24h formalin 894 ppm chiết xuất tỏi 2531 ppm Kết trị số bệnh ký sinh trùng cá chẽm 2.1 Trị bệnh trùng bánh xe Cá bị bệnh trùng bánh xe ký sinh tiến hành trị với formalin (150ppm; 200ppm; 250ppm) dịch chiết xuất từ tỏi (700ppm; 800ppm; 900ppm) điều kiện mơi trường nước có nhiệt độ 28 – 30oC; pH = 7.6; S‰ = 32‰ Sau 30 phút tắm hóa chất, cá bệnh ni mơi trường nước bình thường kiểm tra mức độ nhiễm ký sinh trùng sau ngày Tỷ lệ (%) ký sinh trùng giảm sau trị bệnh trình bày hình Hình Phần trăm (%) trùng bánh xe giảm so với trước trị formalin dịch tỏi nồng độ khác Sau tắm, hai loại hóa dược dùng có khả tiêu diệt >80% trùng bánh xe ký sinh da, vây mang cá chẽm, cá hoàn toàn khỏe khơng có dấu hiệu bị sốc Mức độ nhiễm trùng bánh xe nghiệm thức đối chứng không giảm mà tăng cao so với trước 58 • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG thí nghiệm Tuy nhiên với nồng độ sử dụng thí nghiệm chưa tiêu diệt 100% trùng bánh xe ký sinh Do vậy, tăng nồng độ tăng thời gian tắm cho cá chẽm dịch chiết xuất từ củ tỏi để hiệu trị bệnh triệt để Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Trên giới, có nghiên cứu dùng chiết xuất tỏi để trị bệnh trung bánh xe (Trichodina) Chanagun Chitmanat et al, 2005 thử nghiệm cá rô phi tuần với nồng độ 800ppm điều kiện nhiệt độ 260C pH 7-7.2 tiêu diệt triệt để ký sinh trùng 2.2 Kết trị bệnh sán đơn chủ ký sinh da Cá chẽm bị bệnh chết rãi rác sán đơn chủ Neobenedenia melleni ký sinh da gây Số 4/2013 (với tỷ lệ nhiễm 100%, cường độ nhiễm 18.8 trùng/cá) chữa trị formalin (150ppm; 200ppm; 250ppm) chất chiết xuất từ tỏi (700ppm; 800ppm; 900ppm), điều kiện nhiệt độ nước 29-300C, pH = 7,9-8,1, độ mặn 32‰ Sau 30 phút tắm hóa chất, cá thí nghiệm ni mơi trường nước sạch, kiểm tra mức độ nhiễm sán đơn chủ sau 48h Tỷ lệ % ký sinh trùng giảm sau thí nghiệm trình bày hình Hình Phần trăm (%) sán đơn chủ giảm so với trước tắm cho cá chẽm formalin dịch tỏi nồng độ khác Sau tắm formalin, nồng độ 250 ppm, 100% Neobenedenia melleni ký sinh cá thí nghiệm bị tiêu diệt, dịch chiết xuất từ củ tỏi nồng độ cao thí nghiệm (900ppm) tiêu diệt 86,3% lồi sán Kết phù hợp với nghiên cứu trước nhiều tác giả (Yaowanit Danayadol, 1994; Do Thi Hoa et al, 2007) dùng Formalin để trị sán đơn chủ ký sinh loài cá biển Do khẳng định rằng, formalin hiệu dùng để trị sán đơn chủ ký sinh da cá biển Trong kết thử nghiệm chứng tỏ dịch tỏi dùng để trị sán đơn chủ N melleni, để có hiệu cần phải nâng cao nồng độ tắm, LC50 cá chẽm thảo dược cao (2531ppm), dùng nồng độ cao mà an toàn cho cá Mặt khác, theo nhiều nghiên cứu trước tỏi cịn phịng bệnh vi khuẩn, nấm virus, nên dùng dịch tỏi kiểm sốt cảm nhiễm tác nhân thứ cấp IV KẾT LUẬN 14 loài ký sinh trùng phát ký sinh cá chẽm nuôi (7-12cm), đa phần ký sinh trùng ngoại ký sinh Ngồi ra, có bệnh ký sinh trùng gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến cá chẽm ni, là: bệnh trùng bánh xe, bệnh sán đơn chủ, bệnh đỉa cá bệnh giáp xác ký sinh Dùng formalin 250ppm dịch chiết từ tỏi nồng độ 900ppm để tắm cho cá bị bệnh trùng bánh xe Trichodina sp bệnh sán đơn chủ ký sinh da cá chẽm cách tắm 30 phút tiêu diệt từ 86 - 100% hai loại ký sinh trùng điều kiện nhiệt độ 28 – 30oC; pH = 7.6-8.1; S‰ = 32‰ mà an toàn cho cá TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Hà Ký, 1992 Phương pháp nghiên cứu tác nhân gây bệnh ký sinh trùng cá Bộ Thủy sản, 112 trang Ankri, S and Mirelman, D., 1999 Antimicrobial properties of allicin from garlic Microbes Infect 1: 125-129 Balasuriya, L K.S.W & Leong, T.S., 1995 Pseudorhabdosynochus monosquamodiscus n sp (Monogenea: Diplectanidae) from Lates calcarifer cultured in floating cages in Malaysia Journal of Bioscience 6(1): 30-34 Tiếng Anh TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • 59 Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sản Số 4/2013 Chanagum Chitimanat, Kitiwan Tongdonmuan and Wichan Nunsong, 2005 The use of crude extracts from traditional medicinal plants to eliminate Trichodina sp in tilapia (Oreochromis niloticus) fingerlings Songklanakarin J Sci Technol., 2005: 359 – 364 Do Thi Hoa, Phan Van Ut, 2007 Monogenea disease in cultured grouper (Epinephelus spp.) and snapper (Lutjanus argentimaculatus) in Khanh Hoa province, Vietnam Aquaculture Asia, volume XII, No 4, October – December 2007 Kabata Z., 1992 Copepods parasitic on Fishes Synopses of the British Fauna Universal book service No.47 262 pp Leong T S and Wong S Y., 1986 Parasite Fauna of Seabass, Lates calcerifer, Bloch culture in ponds and floating cage culture in Penang, Malaysia The First Asia Fisheries Forum: 251-254 Leong Tak Seng and Wong See Yong, 1990a Parasites of Seabass, Lates calcarifer Bloch cultured in ponds and floating net cages in Thailand The second Asia Fisheries Forum: 705-707 Leong Tak Seng and Wong See Yong, 1990b Parasites of healthy and Diseased juvenile Grouper (Epinephelus malabaricus, Bloch) and Sebass (Lates calcarifer, Bloch) in floating cages in Penang, Malaysia School of Biological sciences, University Sains Malyasia 10 Leong Tak Seng and Wong See Yong, 1992 The Parasites fauna of cultured Seabass, Lates calcarifer Bloch from Kelantan and Penang, Malaysia Journal of Bioscience Vol.3 Issue 1&2: 27-29 11 Leong Tak Seng, 1994 Parasites and diseases of cultured marine finfishes in South East Asia School of Biologycal Science, Unversiti Sain Malaysia, 1180 Minden Pulau Pinang, Malaysia: 1-25 12 Leong, T.S., 1997 Control of parasites in cultured marine finfishes in Southeast Asia - an overview International Journal for Parasitology 27(10): 1177-1184 13 Lom & Dykova, 1992 Protozoan parasites of Fishes Elsevier 315pp 14 Marty R Deveney, Leslie A Chisholm, Ian D, 2001 Fish published record of the pathogenic Monogenean parasite Neobenedenia melleni (Capsalidea) from Australia 15 Margolis L et al, 1982 The use of ecological terms inparasitology Journal of parasitology, 68: 131-133 16 Reed, L.J and H.A Muench, 1983 A simple method of estimating fifty percent end points American J Hygiene., 27: 493-497 17 Rückert S., H W Palm and S Klimpel, 2008 Parasites fauna of seabass (Lates calcarifer Bloch) under mariculture conditions in Lampung Bay, Indonesia J Appl Ichthyol 24: 321 – 327 18 Stefano Cecchini, 1994 Influence of temperature on the hatching of eggs of Diplectanum aequans, a parasite of seabass Aquaculture International 2:249-253 19 Yaowanit Danayadol, 1994 Culture Grouper Diseases in Thailand National Institute of Coastal Aquaculture, Kaoseng, Songkhla 90000, Thailand 20 William H.H & Jones A., 1994 Parasitic worms of Fish Taylor & Francis Ltd 593pp 60 • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG ... (7-12cm), đa phần ký sinh trùng ngoại ký sinh Ngồi ra, có bệnh ký sinh trùng gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến cá chẽm ni, là: bệnh trùng bánh xe, bệnh sán đơn chủ, bệnh đỉa cá bệnh giáp xác ký sinh Dùng... ký sinh trùng ký sinh cá chẽm Trên 375 cá chẽm kiểm tra, có 14 lồi, thuộc 10 giống ký sinh trùng phát ký sinh cá chẽm ni Khánh Hịa có lồi định danh Tên lồi ký sinh trùng, quan ký sinh mức độ nhiễm... Henneguya cerebralis Ký sinh trùng nội ký sinh cá chẽm có thành phần lồi mức độ cảm nhiễm thấp mẫu cá thu từ ao lồng nuôi thức ăn viên Tuy nhiên, hầu hết đàn cá nuôi điều bị nhiễm ngoại ký sinh trùng