Việt Nam hiện là nước xuất khẩu hồ tiêu đứng đầu trên thế giới. Tuy nhiên, ngành sản xuất hồ tiêu trong nước đang đứng trước nhiều thách thức do thiên tai, sâu bệnh. Trong đó, bệnh chết nhanh do Phytophthora capsici là bệnh gây thiệt hại nặng cho ngành trồng tiêu. Tại nhiều vùng chuyên canh hồ tiêu, bệnh lây lan nhanh, thường tạo thành ổ dịch, làm giảm đáng kể diện tích canh tác và khó tái canh hồ tiêu trên nền đất cũ. Từ 100 mẫu rễ, thân và lá cây hồ tiêu có biểu hiện bệnh chết nhanh và đất xung quanh cây bệnh, đã phân lập được 08 dòng P. capsici. Tất cả các dòng P. capsici phân lập đều có khả năng gây bệnh chết nhanh trên lá hồ tiêu sau hai ngày lây nhiễm trong điều kiện thí nghiệm. Trong đó, ba dòng thể hiện độc tính gây bệnh mạnh nhất so với các dòng còn lại là BR-L1, ĐN-Đ1 và ĐN-Đ2.
26 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Evaluation of tolerance to Phytophthora capsici -the causal agent of foot rot disease in black pepper Anh T Ton∗ , Tram T N To, Thanh T L Bien, Phong V Nguyen, & Don D Le Department of Biotechnology, Nong Lam University, Ho Chi Minh City, Vietnam ARTICLE INFO ABSTRACT Research Paper Vietnam is the leading black pepper export country in the world However, the production of pepper may be affected by natural disReceived: April 10, 2018 asters, pests such as Phytophthora capsici The Phytophthora capsici disease has caused a significant decline in pepper yields The desease Revised: May 18, 2018 is characterized with a high mortality rate (up to 100%) and rapid Accepted: May 30, 2018 outbreak and thus is very challenging to control In the present study, eight strains of P capsici were isolated from 100 samples of leaf, stem, root and soil that were collected from pepper-growing Keywords areas of Dong Nai, Binh Duong and Ba Ria – Vung Tau provinces These isolates’ straits had capacity to cause foot rot on pepper leaf Black pepper after two days of inoculation Among them, the isolates with the Infection highest pathogenicity are BR-L1, DN-D1 and DN-D2 In order to Phytophthora capsici determine the resistance level to P capsici of commonly grown pepTolerance per varieties (Vinh Linh, Se, Xanh, Trau and Kuching), the pepper leaves wewe in vitro infected with P capsici BR-L1 spores in laboratory and greenhouse conditions Trau variety showed the highest ∗ Corresponding author resistance level to P capsici with the as indicated by (P < 0.01) disease ratio (74.1%) and disease index (73.7%) after days in laboratory condition and the corresponding numbers of 17.3% and 15.8% Ton Trang Anh Email: tontranganh@hcmuaf.edu.vn after 12 days in greenhouse condition Cited as: Ton, A T., To, T T N., Bien, T T L., Nguyen, P V., & Le, D D (2019) Evaluation of tolerance to Phytophthora capsici -the causal agent of foot rot disease in black pepper The Journal of Agriculture and Development 18(1), 26-34 Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 18(1) www.jad.hcmuaf.edu.vn 27 Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Đánh giá khả chống chịu bệnh chết nhanh (Phytophthora capsici ) số giống hồ tiêu điều kiện thí nghiệm Tơn Trang Ánh∗ , Tô Thị Nhã Trầm, Biện Thị Lan Thanh, Nguyễn Vũ Phong & Lê Đình Đơn Bộ Mơn Cơng Nghệ Sinh Học, Trường Đại Học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh, TP Hồ Chí Minh THƠNG TIN BÀI BÁO TÓM TẮT Bài báo khoa học Việt Nam nước xuất hồ tiêu đứng đầu giới Tuy nhiên, ngành sản xuất hồ tiêu nước đứng trước nhiều thách thức thiên tai, sâu bệnh Trong đó, bệnh chết nhanh Phytophthora capsici bệnh gây thiệt hại nặng cho ngành trồng tiêu Tại nhiều vùng chuyên canh hồ tiêu, bệnh lây lan nhanh, thường tạo thành ổ dịch, làm giảm đáng kể diện tích canh tác khó tái canh hồ tiêu đất cũ Từ 100 mẫu rễ, thân hồ tiêu có biểu bệnh chết nhanh đất xung quanh bệnh, phân lập 08 dòng P capsici Tất dòng P capsici phân lập có khả gây bệnh chết nhanh hồ tiêu sau hai ngày lây nhiễm điều kiện thí nghiệm Trong đó, ba dịng thể độc tính gây bệnh mạnh so với dòng lại BR-L1, ĐN-Đ1 ĐN-Đ2 Khả chống chịu bệnh P capsici giống hồ tiêu trồng phổ biến Việt Nam gồm Vĩnh Linh, Sẻ, Xanh, Trâu Kuching khảo sát điều kiện phòng thí nghiệm nhà lưới Kết quả, giống tiêu Trâu có khả chống chịu P capsici tốt thể qua tỉ lệ bệnh số bệnh thấp (P < 0,01) giống tiêu lại, cụ thể tỉ lệ bệnh số bệnh 74,1% 73,7% sau ngày lây nhiễm phịng thí nghiệm 17,3% 15,8% sau 12 ngày lây nhiễm nhà lưới Ngày nhận: 10/04/2018 Ngày chỉnh sửa: 18/05/2018 Ngày chấp nhận: 30/05/2018 Từ khóa Chống chịu Hồ tiêu Lây nhiễm Phytophthora capsici ∗ Tác giả liên hệ Tôn Trang Ánh Email: tontranganh@hcmuaf.edu.vn - 20% lên đến 52% (Sitepu & Mustika, 2000) Tác nhân gây bệnh hồ tiêu sống Cây hồ tiêu (Piper nigrum L.) công đất, công vào tất phận nghiệp nhiệt đới có giá trị kinh tế cao, lợi nhuận rễ, thân, (Nazeem & ctv., 2008) Do đó, mang lại từ việc xuất tiêu lớn Tuy việc sử dụng giống tiêu có khả chống nhiên, ngành trồng tiêu nước đứng chịu bệnh cần thiết để quản lý bệnh giảm trước nhiều thách thức thiên tai sâu bệnh thiệt hại hồ tiêu (Anandaraj & Sarma, 1995) Bệnh chết nhanh Phytopthora capsici gây Nghiên cứu thực nhằm mục thiệt hại nghiêm trọng cho ngành trồng tiêu tiêu phân lập Phytophthora capsici gây bệnh chết nói riêng ngành nơng nghiệp nói chung nhanh xác định khả chống chịu bệnh Việt Nam giới (Anandaraj, 2000) Ở P capsici hồ tiêu Kết nghiên cứu vùng chuyên canh hồ tiêu nước ta, bệnh cung cấp thông tin quan trọng nguồn phát triển thành ổ dịch, có nơi tỉ lệ chết lên gây bệnh khả chống chịu bệnh đến 100%, làm giảm đáng kể diện tích tiêu canh chết nhanh giống hồ tiêu trồng phổ tác (Bui & Le, 2013) Ở Indonesia, khoảng biến Việt Nam, sở để nhà quản lý từ năm 1965 đến 1990, ước tính tổn thất đưa biện pháp thích hợp quản lý trồng bệnh thường dao động khoảng bệnh hồ tiêu Đặt Vấn Đề www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 18(1) 28 Vật Liệu Phương Pháp Nghiên Cứu 2.1 Vật liệu Các giống tiêu sử dụng gồm Vĩnh Linh, Trâu, Sẻ, Sẻ Xanh Kuching thu thập vườn hồ tiêu tỉnh Bà Rịa – Vũng Tàu, Đồng Nai Bình Dương Hom hồ tiêu giâm từ dây lươn trồng nhà lưới tháng trước chủng bệnh Riêng tiêu Vĩnh Linh in vitro (nhân giống phương pháp nuôi cấy mô) tháng tuổi cung cấp Bộ môn Công nghệ Sinh học - Trường Đại học Nông Lâm TP.HCM Các giống tiêu trồng chậu nhựa, kích thước 23 × 18 cm, giá thể trồng gồm tro trấu, phân chuồng đất trộn với tỉ lệ 1:1:1 Phân bón sử dụng NPK 20-20-15 phun thuốc phịng ngừa bệnh Treppach Bul 607SL (probamocarb) tuần/lần, ngưng phun thuốc tuần trước chủng bệnh 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Thu thập mẫu bệnh hồ tiêu Mẫu bệnh gồm đất, rễ, thân hồ tiêu thu thập vườn hồ tiêu năm tuổi thuộc ba tỉnh Đồng Nai, Bình Dương Bà Rịa – Vũng Tàu, có biểu bệnh chết nhanh héo rũ phần hay toàn với màu xanh tái, xuất đốm nâu đen lá, rụng đốt phần thân non, rễ thối đen mềm nhũn, mạch dẫn bên thân biến màu từ trắng sang nâu đen chạy dọc theo thân (Bui & Le, 2013) Các mẫu bệnh bảo quản thùng lạnh (dưới 100 C) phân lập vòng 24 Đất xung quanh vùng rễ hồ tiêu có biểu bệnh thu cách mặt đất 0,5 - 15 cm Ở có biểu bệnh chết nhanh, đất lấy 10 vị trí khác xung quanh vùng rễ, sau trộn chung lại tính mẫu Mẫu đất chứa túi nilong bảo quản tủ mát (10 - 150 C) sử dụng Danh sách nguồn mẫu thu thập phân lập Phytophthora trình bày Bảng Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh mm sau đặt lên đĩa môi trường PDA (Potato dextrose agar) ủ 25 - 300 C Quan sát hàng ngày để kiểm tra phát triển hệ sợi Mẫu đất (50 g) cho vào hộp nhựa, sau thêm 100 mL nước cất vô trùng Đặt tiêu trưởng thành vết bệnh lên bề mặt ủ nhiệt độ phòng Sau - ngày, với vết loét đặc trưng bệnh chết nhanh rửa vịi nước, thấm khơ giấy lọc, khử khuẩn bề mặt ethanol 70%, rửa lại nước cất vơ trùng, cắt thành mẫu có kích thước khoảng 0,5 cm2 đặt lên môi trường chọn lọc, ủ tối nhiệt độ 25 – 300 C quan sát kính hiển vi sau - ngày (Nguyen, 2008) Chọn dịng P.capsici có hệ sợi màu trắng co cụm lại tạo hình hoa (Zhijun & ctv., 2007) đĩa thạch để cấy chuyền sang môi trường CR 20%, ủ tối 280 C 48 Sau đó, loại bỏ dịch CR 20%, thay nước cất hấp khử trùng phơi sáng 36 - 48 để kích thích hình thành túi bào tử Quan sát hình dạng kích thước túi bào tử, hình dạng kích thước nuốm, cành sinh túi bào tử, lổ phóng thích bào tử, xuất túi trương phồng chlamydospore (nếu có) kính hiển vi độ phóng đại X10 X40 để định danh P capsici (Ho & ctv., 1995) Khả gây bệnh chết nhanh hồ tiêu dòng nấm phân lập xác định phương pháp lây nhiễm nhân tạo Dịng nấm có khả gây bệnh cao sử dụng cho thí nghiệm 2.2.3 Phương pháp lây nhiễm nhân tạo Chuẩn bị dịch động bào tử: dòng P capsici phân lập cấy môi trường CRA ủ nhiệt độ phịng Khi đường kính hệ sợi đạt – cm lấy 10 khoanh hệ sợi có đường kính mm rìa mép cấy vào đĩa petri (đường kính 90 mm) có chứa 15 mL dung dịch CR 20% ủ điều kiện tối 270 C 48 Hệ sợi sau rửa nước cất tiệt trùng đến lần phơi sáng 36 - 48 nhiệt độ 270 C để kích thích hình thành túi bào tử Thay dung dịch khống nước cất vơ trùng ủ 100 C 30 phút để 2.2.2 Phân lập Phytophthora từ mẫu thu thập kích thích phóng bào tử động Dịch bào tử động đếm buồng đếm hồng cầu Thomas, Mẫu rễ, thân hồ tiêu bệnh rửa với điều chỉnh đến nồng độ 106 động bào tử/mL nước khử trùng cồn 70% 30 nước cất vô trùng Lây nhiễm: Mỗi giống chọn 100 lá, dùng kim giây, sau rửa lại nước cất vơ trùng để khô giấy thấm Các phần mô gần vết bệnh tiệt trùng tạo vết thương nhẹ bề mặt Nhỏ cắt thành phần nhỏ cú kớch thc ì 40 àL dch ng bo tử P capsici Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 18(1) www.jad.hcmuaf.edu.vn 29 Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Bảng Danh sách nguồn mẫu thu thập phân lập Phytophthora Địa điểm thu mẫu Huyện Phú Giáo, Bình Dương Huyện Trảng Bom, Đồng Nai Huyện Xuân Lộc, Đồng Nai Huyện Châu Đức, Bà Rịa - Vũng Tàu Huyện Xuyên Mộc, Bà Rịa - Vũng Tàu Vị trí lấy mẫu Đất Lá Thân Rễ Đất Lá Thân Rễ Đất Lá Thân Đất Lá Thân Đất Thân Số lượng mẫu 10 5 10 3 7 10 10 5 Kí hiệu mẫu BD-Đ1 BD-L1 BD-T1 BD-R1 ĐN-Đ1 ĐN-L1 ĐN-T1 ĐN-R1 ĐN-Đ2 ĐN-L1 ĐN-T1 BR-Đ1 BR-L1 BR-T1 BR-Đ2 BR-T2 chuẩn bị lên vết thương quan sát nhiễm nhân tạo với dịch động bào tử P capvết bệnh xuất sici gồm ủ 250 C phịng thí nghiệm Lá nhỏ với 40 µL nước cất vơ trùng dùng Các tiêu theo dõi gồm: làm đối chứng Thí nghiệm lặp lại lần, (1) Thời gian xuất vết bệnh: tính từ lần lặp lại gồm hồ tiêu Trong nhà lưới, chọn chủng đến có vết bệnh màu nâu đen xuất hồ tiêu không biểu bệnh gồm giống Vĩnh Linh, Vĩnh Linh in vitro, Trâu, Sẻ (2) Tỉ lệ bệnh (%) = (số bị bệnh/tổng số Kuching, có từ - đếm từ lên Phun thí nghiệm) × 100 dung dịch động bào tử P capsici có nồng độ 106 (3) Chỉ số bệnh (%) = {[(N1 × 1) + (N2 × bào tử/mL ướt lên với 25 mL/chậu Cây 3) + + (Nn × n)]/N × n} × 100 Trong đó, phun với nước cất vô trùng dùng làm N tổng số thí nghiệm; N1 , N2 , , Nn số đối chứng Che kín túi nilong thời bị bệnh cấp 1, 3, 5, , n Các cấp bệnh gian từ - Thí nghiệm bố trí nhà bảng phân cấp mức độ bệnh gồm: cấp lưới theo kiểu khối đầy đủ hồn tồn ngẫu nhiên khơng bị bệnh, cấp 10% diện tích (RCBD) với lần lặp lại, lần lặp lại chậu, bị bệnh, cấp có 10 - 20% diện tích bị chậu hom Ghi nhận thời gian xuất bệnh, cấp 20 - 30% diện tích bị bệnh, vết bệnh, tỉ lệ bệnh số bệnh cấp có 30 - 40% diện tích bị bệnh cấp 40% diện tích bị bệnh (QCVN 2.2.5 Phương pháp xử lý số liệu 01-172:2014/BNNPTNT) Số liệu xử Microsoft Excel 2010 2.2.4 Đánh giá khả chống chịu P capsici trắc nghiệm phân hạng Duncan’s chương giống hồ tiêu điều kiện phịng thí trình xử lý thống kê SAS 9.1 nghiệm nhà lưới Kết Quả Thảo Luận Lá hồ tiêu biểu bệnh cắt từ hồ tiêu khỏe mạnh trồng 3.1 Phân lập xác định tác nhân gây bệnh nhà lưới thuộc giống gồm Vĩnh Linh, chết nhanh hồ tiêu Trâu, Sẻ, Sẻ Xanh Kuching Các rửa với nước khử trùng cồn 70% Từ 100 mẫu gồm rễ, thân hồ tiêu có 30 giây, sau rửa lại nước cất vơ trùng triệu chứng điển hình bệnh chết nhanh để khơ giấy thấm Sau đó, lây mẫu đất xung quanh bệnh vùng www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 18(1) 30 chuyên canh hồ tiêu, phân lập 08 dòng P capsici (Bảng 2) với hệ sợi màu trắng có đường kính từ 20 – 30 mm co cụm lại tạo hình hoa sau ngày ni cấy mơi trường CRA (Hình 1) Kết cho thấy, tỉ lệ Phytophthora phân lập thấp (khoảng 8%) Điều rễ, thân hồ tiêu có biểu bệnh đất xung quanh bệnh tồn nhiều tác nhân gây bệnh khác với biểu bên tương tự Ngoài ra, mẫu bệnh lâu ngày thường bị tạp nhiễm khiến việc phân lập gặp khó khăn Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh hiệu BR-L1 phân lập từ mẫu tiêu bệnh Bà Rịa - Vũng Tàu có kích thước túi bào tử lớn nht, trung bỡnh 19,3 ì 10,8 àm, t l chiu dài/chiều rộng trung bình 1,8 Các dịng Phytophthora phân lập có nuốm dày, khơng sâu, dạng nuốm cụt hay nửa bán cầu, kích thước nuốm biến thiên từ 0,8 - 3,3 µm, túi bào tử nuốm chiếm đa số, kích thước lổ phóng thích động bào tử biến thiên từ 2,5 - 5,7 µm Hình dạng túi bào tử dòng Phytopthora phân lâp thể Hình Tất dịng có cuống sinh túi bào tử dạng tán dù, sợi nấm sợi sinh túi bào tử có kích thước tương đương nhau, hệ sợi phân vng góc Túi bào tử có dạng hình lê ngược, hình trứng, trứng ngược elip đến vơ định hình Các dịng P capsici phân lập khơng hình thành túi trương phồng, bào tử vách dày (chlamydospore) đĩa thạch Hình thái túi bào tử dòng P capsici phân lập phù hợp với mô tả P capsici trước (Zhijun & ctv., 2007) Hình Hệ sợi dịng P capsici phân lập mơi trường CRA thời điểm ngày sau cấy (A) BD-Đ1; (B) BD-T1; (C) ĐN-Đ1;(D) ĐN-Đ2; (E) ĐN-L1; (F) BR-L1; (G) BR-Đ1; (H) BR-Đ2 Khi lây nhiễm nhân tạo 08 dòng P capsici phân lập lên hồ tiêu điều kiện phịng thí nghiệm, xuất triệu chứng tương tự bệnh chết nhanh như: vị trí lây nhiễm từ màu xanh tươi chuyển sang xanh sẫm hóa nâu đen sau ngày Hệ sợi tất dòng P capsici phân lập phù hợp với mô tả P capsici môi trường CRA Le & ctv (2014) có màu trắng, có dạng đồng nhất, hình ngơi tâm, mọc rìa Có khác kích thước túi bào tử dòng Phytophthora phân lập địa điểm khác Túi bào tử dịng P capsici phân lập Bình Dương có kích thước biến thiên khoảng 9,6 – 29,0 × 7,5 - 14,5 µm tỉ lệ chiều dài/chiều rộng trung bình 1,5 Trong khi, dịng P capsici phân lập Đồng Nai có kích thước túi bào tử biến thiên 10,7 - 27,0 × 6,7 - 11,7 µm, tỉ lệ chiều dài/chiều rộng trung bình 1,9 Túi bào tử dòng phân lập Bà Rịa - Vũng Tàu có kích thước biến thiên 9,3 32,5 ì 7,3 - 16,3 àm, t l chiu di/chiu rộng trung bình 1,6 Trong đó, dịng P capsici kí Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 18(1) Hình Hình dạng túi bào tử dịng P capsici phân lập (độ phóng đại 40X) (A) Cành sinh túi bào tử hình tán dù; (B) Sợi nấm phân nhánh vng góc; (C), (D) Túi bào tử phóng thích động bào tử; (E), (F) Túi bào tử với lổ phóng thích hẹp; (G), (H), (I), (J), (K) Các dạng túi bào tử www.jad.hcmuaf.edu.vn 31 Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Bảng Kết phân lập Phytophthora mẫu thu thập Địa điểm thu mẫu Huyện Phú Giáo, Bình Dương Huyện Trảng Bom, Đồng Nai Huyện Xuân Lộc, Đồng Nai Huyện Châu Đức, Bà Rịa - Vũng Tàu Huyện Xuyên Mộc, Bà Rịa - Vũng Tàu Vị trí lấy mẫu Đất Thân Đất Lá Số mẫu có Phytophthora 1 1 Kí hiệu mẫu BD-Đ1 BD-T1 ĐN-Đ1 ĐN-L1 Đất ĐN-Đ2 Đất Lá 1 BR-Đ1 BR-L1 Đất BR-Đ2 3.2 Khả gây bệnh hồ tiêu dòng P capsici phân lập Khi lây nhiễm với động bào tử P capsici, vết bệnh xuất lần sau 18 - 19 Màu sắc hình dạng vết bệnh hồ tiêu sau lây nhiễm thời điểm 2, 3, ngày thể Hình Vết bệnh sau ngày có dạng trịn đều, chia làm hai lớp, lớp có màu đen, lớp màu nâu Từ ngày sau lây nhiễm, vết bệnh có xu hướng phát triển dọc theo gân (nhiều đường gân chính) hướng cuống phát triển rộng hai bên Sau phủ kín lá, vết bệnh có màu nâu đen, chuyển dần từ xanh sang vàng Trong số 08 dịng nấm phân lập, có 03 dịng thể khả gây bệnh mạnh xác định dịng có kí hiệu BR-L1, ĐN-L1 BD-T1 phân lập từ mẫu hồ tiêu bệnh Bà Rịa - Vũng Tàu, Đồng Nai mẫu thân hồ tiêu bệnh Bình Dương Dịng nấm kí hiệu BR-L1 có mức độ gây bệnh mạnh so với hai dòng lại 3.3 Khả chống chịu P capsici hồ tiêu điều kiện phịng thí nghiệm nhà lưới Nhằm đánh giá khả chống chịu bệnh chết nhanh P capsici giống hồ tiêu trồng phổ biến Việt Nam, động bào tử dịng P.capsici phân lập có mức độ gây bệnh cao kí hiệu BR-L1 lây nhiễm lên năm giống Vĩnh Linh, Sẻ, Trâu, Xanh Kuching điều kiện phịng thí nghiệm nhà lưới Khả chống chịu bệnh hồ tiêu thể qua tỉ lệ bệnh số bệnh Trong điều kiện phịng thí nghiệm, tỉ lệ bệnh số bệnh hồ tiêu lây nhiễm sau 2, 3, 4, ngày thể Bảng Bảng Vết bệnh phát triển từ vị trí gây vết thương tăng dần qua ngày (Hình 4) Tại thời điểm ngày sau lây nhiễm, năm giống tiêu xuất triệu chứng bệnh ban đầu Trong đó, tỉ lệ bệnh số bệnh cao (lần lượt 88,89% 11,11%) giống tiêu Sẻ thấp (lần lượt 37,04% 4,12%) giống tiêu Trâu, khác biệt có ý nghĩa so với giống tiêu lại Như vậy, năm giống tiêu thử nghiệm, tiêu Sẻ thể khả chống chịu với P capsici thấp Sau xâm nhập vào vị trí gây vết thương, động bào tử P capsici tiết độc chất (gồm enzyme cutinase, capsaicin) gây hoại tử mô tế bào làm hồ tiêu bị chết nên có màu nâu đen Sau ngày lây nhiễm, toàn hồ tiêu giống Vĩnh Linh, Sẻ Kuching chuyển sang màu đen với tỉ lệ bệnh 100% số bệnh 99,69% Lá tiêu Trâu thể khả chống chịu P capsici tốt với tỉ lệ bệnh Hình Triệu chứng bệnh hồ tiêu Vĩnh Linh 74,07% số bệnh 73,66%, khác biệt có ý giai đoạn khác nghĩa so với giống tiêu lại (P < 0,01) (A) NSLN; (B) NSLN; (C) NSLN; (D) NSLN; Khả chống chịu bệnh Phytophthora (1) BR-L1; (2) ĐN-L1; (3) BD-T1 hồ tiêu chứng minh có liên quan đến hoạt www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 18(1) 32 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Bảng Tỉ lệ bệnh giống hồ tiêu lây nhiễm phịng thí nghiệm Giống Vĩnh Linh Sẻ Xanh Trâu Kuching CV (%) Mức ý nghĩa Tỉ lệ NSLN 77,78ab 88,89a 48,15bc 37,04c 85,19ab 14,70 ** bệnh (%) sau ngày lây nhiễm NSLN NSLN NSLN NSLN 100,00a 100,00a 100,00a 100,00a a a a 100,00 100,00 100,00 100,00a b a a 85,19 92,59 96,30 96,30a b b b 70,37 74,07 74,07 74,07b a a a 96,30 100,00 100,00 100,00a 7,24 8,91 6,25 6,25 ** ** ** ** a-c Số liệu chuyển đổi sang dạng arcsin(x ) trước xử lý thống kê Trong cột, giá trị có kí tự theo sau giống khơng có khác biệt mặt thống kê **: khác biệt có ý nghĩa mức P ≤ 0,01; NSLN: ngày sau lây nhiễm Bảng Chỉ số bệnh giống hồ tiêu lây nhiễm phòng thí nghiệm Giống Vĩnh Linh Sẻ Xanh Trâu Kuching CV (%) Mức ý nghĩa Chỉ số bệnh (%) hồ tiêu NSLN NSLN NSLN 8,23ab 35,80ab 81,07a a a 11,11 57,20 76,13a bc bc 5,35 20,16 39,92b c c 4,12 13,58 29,63b a a 11,11 45,68 96,50a 4,50 6,77 8,24 ** ** ** sau ngày lây nhiễm NSLN NSLN 98,15a 99,69a a 98,97 99,69a b 69,96 88,48b c 49,79 73,66c a 98,15 99,69a 4,08 3,15 ** ** a-c Số liệu chuyển đổi sang dạng arcsin(x ) trước xử lý thống kê Trong cột, giá trị có kí tự theo sau giống khơng có khác biệt mặt thống kê **: khác biệt có ý nghĩa mức P ≤ 0,01; NSLN: ngày sau lây nhiễm tính enzyme β-1,3 glucanase (Nazeem & ctv., 2008) Kết giải thích hoạt tính β-1,3 glucanase giống tiêu Trâu cao (Ton & ctv., 2018) nên thể khả chống chịu tốt so với giống tiêu khác thí nghiệm Trong nhà lưới, triệu chứng bệnh xuất năm giống hồ tiêu sau ngày lây nhiễm Triệu chứng bệnh đa dạng, vết bệnh chóp lá, cuống lá, mép lá, toàn phiến lá, làm cho bị đen dọc theo gân lá, bị héo treo lơ lững dây tiêu Tỉ lệ bệnh số bệnh sau 3, 5, 7, 12 ngày lây nhiễm trình bày Bảng Bảng Sau ngày lây nhiễm, bệnh phát triển nhanh, gây hại nặng đồng loạt năm giống tiêu, bệnh công hầu hết phận cây, số có biểu thối thân, gãy Thời điểm từ đến 12 ngày sau lây nhiễm, hồ tiêu có biểu bị héo rũ toàn thân, cuống thân bị thối đen gãy ngang Giống tiêu Trâu tiếp tục cho thấy khả chống Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 18(1) Hình Hình dạng vết bệnh P capsici gây số giống hồ tiêu thời điểm khác (1) ngày sau lây nhiễm; (2) ngày sau lây nhiễm; (3) ngày sau lây nhiễm (A) Tiêu Vĩnh Linh; (B) Tiêu Sẻ; (C) Tiêu Xanh; (D) Tiêu Trâu; (E) Tiêu Kuching www.jad.hcmuaf.edu.vn 33 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Bảng Tỉ lệ bệnh giống hồ tiêu lây nhiễm nhà lưới Giống Vĩnh Linh Kuching Trâu Vĩnh Linh in vitro Sẻ CV (%) Mức ý nghĩa Tỉ lệ bệnh (%) sau ngày lây nhiễm NSLN NSLN NSLN NSLN 12 NSLN 3,0 14,4a 23,2a 24,5b 30,5b a a a 2,9 13,3 22,7 29,0 37,4a b c d 2,8 11,6 14,9 16,0 17,3d a bc c 2,1 14,6 15,9 19,5 20,7dc ab a c 2,1 12,9 17,9 19,3 23,2c 26,1 7,3 7,8 7,6 7,9 ns * * * * a-c Số liệu chuyển đổi sang dạng arcsin(x ) trước xử lý thống kê Trong cột, giá trị có kí tự theo sau giống khơng có khác biệt mặt thống kê *: khác biệt có ý nghĩa mức P ≤ 0,05; NSLN: ngày sau lây nhiễm Bảng Chỉ số bệnh giống hồ tiêu lây nhiễm nhà lưới Giống Vĩnh Linh Kuching Trâu Vĩnh Linh in vitro Sẻ CV (%) Mức ý nghĩa Chỉ số bệnh (%) hồ tiêu sau NSLN NSLN NSLN 1,8 8,1a 14,3a a 1,5 7,9 16,3a b 1,5 5,5 11,7b b 1,3 4,3 10,3b b 1,3 5,6 11,3b 18,5 10,8 8,9 ns * * ngày lây nhiễm NSLN 12 NSLN 18,2a 26,4a a 20,0 26,7a b 15,3 15,8c b 14,9 17,8cb b 15,5 19,4b 6,3 6,5 * * a-c Số liệu chuyển đổi sang dạng arcsin(x ) trước xử lý thống kê Trong cột, giá trị có kí tự theo sau giống khơng có khác biệt mặt thống kê *: khác biệt có ý nghĩa mức P ≤ 0,05; NSLN: ngày sau lây nhiễm chịu tốt P capsici, khác biệt có ý nghĩa so với giống tiêu khác (P < 0,05) Như vậy, lây nhiễm điều kiện phịng thí nghiệm nhà lưới, giống tiêu Trâu thể khả chống chịu P capsici tốt so với giống lại Kết Luận Từ 100 mẫu gồm rễ, thân hồ tiêu có biểu bệnh chết nhanh đất xung quanh bệnh, phân lập tám dòng xác định P capsici Các dòng thể khả gây bệnh chết nhanh hồ tiêu Trong đó, dịng có kí hiệu BR-L1 phân lập từ hồ tiêu bệnh thu thập Bà Rịa - Vũng Tàu có khả gây bệnh cao Sau lây nhiễm động bào tử P capsici giống hồ tiêu gồm Vĩnh Linh, Sẻ, Xanh, Trâu Kuching điều kiện phịng thí nghiệm điều kiện nhà lưới, giống tiêu Trâu thể khả chống chịu bệnh P capsici cao với tỉ lệ bệnh số bệnh thấp số giống hồ tiêu thí nghiệm Cần có nghiên www.jad.hcmuaf.edu.vn cứu chế gene quy định tính kháng P capsici giống tiêu nhằm phục vụ công tác chọn tạo giống hồ tiêu có khả kháng lại tác nhân gây bệnh Tài Liệu Tham Khảo (References) Anandaraj, M (2000) Diseases of black pepper In Ravindran, P N (Ed.) Black pepper (Piper nigrum) (239-267) Amsterdam, The Netherlands: Harwood Academic Publishers Anandaraj, M., & Sarma, Y R (1995) Diseases of black pepper (Piper nigrum L.) and their management Journal of Spices Aromatic Crops 4(1), 17-23 Bui, T C., & Le, D D (2013) Pepper plant, diseases and preventive methods Ha Noi, Vietnam: Agricultural Publishing House Ho, H H., Anm, P J., & Chang, H S (1995) The genus Phytophthora in Taiwan Academia Sinica, Taipei, Taiwan: Institute of Botany Le, L Q., Nguyen, U H P., & Phan, G H (2014) Study on the antifungal effect of silver nano particlechitosan prepared by irradiation method on Phytophthora capsici causing the blight disease on pepper plant Academia Journal of Biology 36(1se), 152-157 Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 18(1) 34 Nazeem, P A., Achuthan, C R., Babu, T D., Parab, G V., Girija, D., Keshavachandran, R., & Samiyappan, R (2008) Expression of pathogenesis related proteins in black pepper (Piper nigrum L.) in relation to Phytophthora foot rot disease Journal of Tropical Agriculture 46(1-2), 45-51 Nguyen, T V (2008) Baiting and monitoring propagules of pathogen causing Phytophthora foot rot of black pepper in soil Journal of Plant Protection 4, 13-26 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Ton, A T., Ton, L B., Nguyen, V P., Bien T T L., To, T T N., & Le, D D (2018) Expression of proteins related to Phytophthora capsici tolerance in black pepper (Piper nigrum L.) International Journal of Agriculture Innovations and Research 6(4), 2319-1473 Zhijun, L., Weiping, L., Jinrong, Z., & Lei, J (2007) Isolation and identification of Phytophthora capsici in Guangdong province and measurement of their pathogenicity and physiological race differentiation Frontiers of Agriculture in China 1(4), 377-381 Sitepu, D., & Mustika, I (2000) Disease of black pepper and their management in Indonesia In Ravindran, P.N (Ed.) Black pepper (Piper nigrum) (297-299) Amsterdam, The Netherlands: Harwood Academic Publishers Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 18(1) www.jad.hcmuaf.edu.vn ... Sẻ, Trâu, Xanh Kuching điều kiện phịng thí nghiệm nhà lưới Khả chống chịu bệnh hồ tiêu thể qua tỉ lệ bệnh số bệnh Trong điều kiện phịng thí nghiệm, tỉ lệ bệnh số bệnh hồ tiêu lây nhiễm sau 2,... Kuching khảo sát điều kiện phịng thí nghiệm nhà lưới Kết quả, giống tiêu Trâu có khả chống chịu P capsici tốt thể qua tỉ lệ bệnh số bệnh thấp (P < 0,01) giống tiêu lại, cụ thể tỉ lệ bệnh số bệnh. .. thân hồ tiêu bệnh Bình Dương Dịng nấm kí hiệu BR-L1 có mức độ gây bệnh mạnh so với hai dòng lại 3.3 Khả chống chịu P capsici hồ tiêu điều kiện phịng thí nghiệm nhà lưới Nhằm đánh giá khả chống chịu