Luận án tiến sĩ nghiên cứu thành phần hóa học và sắc ký dấu vân tay của thân rễ hai loài củ gấu và củ gấu biển

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI NGUYỄN MINH CHÂU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ SẮC KÝ DẤU VÂN TAY CỦA THÂN RỄ HAI LOÀI: CỦ GẤU (CYPERUS ROTUNDUS L.) VÀ CỦ GẤU BIỂN (CYPERUS STOLONIFERUS RETZ.) LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội – 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI NGUYỄN MINH CHÂU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ SẮC KÝ DẤU VÂN TAY CỦA THÂN RỄ HAI LOÀI: CỦ GẤU (CYPERUS ROTUNDUS L.) VÀ CỦ GẤU BIỂN (CYPERUS STOLONIFERUS RETZ.) Chuyên ngành: Hóa Hữu Mã số: 62440114 LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Trần Thƣợng Quảng TS Nguyễn Tiến Đạt Hà Nội – 2016 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Hà Nội, ngày Tập thể hƣớng dẫn TS Trần Thƣợng Quảng TS.Nguyễn Tiến Đạt tháng năm 2016 Nghiên cứu sinh Nguyễn Minh Châu ii LỜI CẢM ƠN Trƣớc tiên, tơi xin bày tỏ lịng cảm ơn sâu sắc tới TS Trần Thƣợng Quảng TS Nguyễn Tiến Đạt, hai thầy hƣớng nghiên cứu, tận tình hƣớng dẫn, động viên giúp đỡ tơi suốt q trình thực công việc luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn thầy cô giáo, cán Bộ mơn Hóa Hữu - Viện Kỹ thuật Hóa học - Trƣờng Đại học Bách Khoa Hà Nội, cán phịng Hoạt chất Sinh học - Viện Hóa Sinh Biển - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, ban lãnh đạo cán Cơng ty Cổ phần Thiết bị Sài Gịn, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để hồn thành luận án Cuối cùng, tơi xin chân thành cảm ơn gia đình bạn bè cổ vũ, động viên tơi hồn thành tốt luận án Xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng Tác giả Luận án Nguyễn Minh Châu năm 2016 iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ ix MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chi Cyperus L 1.1.1 Chi Cyperus L giới 1.1.2 Chi Cyperus L Việt Nam 1.2 Thành phần hóa học chi Cyperus L 1.2.1 Các hợp chất terpenoid 10 1.2.2 Các hợp chất flavonoid 13 1.2.3 Các hợp chất quinone 14 1.2.4 Thành phần tinh dầu 15 1.2.5 Các hợp chất khác 16 1.3 Nghiên cứu sắc ký dấu vân tay 16 1.4 Giới thiệu hai loài củ gấu củ gấu biển 21 1.4.1 Vài nét thực vật 21 1.4.2 Cơng dụng hoạt tính sinh học 23 1.4.3 Các nghiên cứu thành phần hóa học 24 1.4.4 Các nghiên cứu sắc ký dấu vân tay 34 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 2.1 Mẫu thực vật 36 2.1.1 Mẫu nghiên cứu thành phần hóa học 36 2.1.2 Mẫu nghiên cứu dấu vân tay sắc ký 36 2.2 Phƣơng pháp phân lập hợp chất 37 2.2.1 Phƣơng pháp ngâm chiết 37 2.2.2 Sắc ký lớp mỏng (TLC) 37 2.2.3 Sắc ký cột (CC) 38 2.3 Phƣơng pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất 38 2.3.1 Điểm nóng chảy (Mp) 38 2.3.2 Độ quay cực ([α]D) 38 2.3.3 Phổ hồng ngoại (IR) 38 2.3.4 Phổ lƣỡng sắc tròn (CD) 38 2.3.5 Phổ khối lƣợng (MS) 38 2.3.6 Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân (NMR) 38 2.4 Phƣơng pháp xây dựng dấu vân tay sắc ký 39 2.4.1 Phƣơng pháp chuẩn bị mẫu 39 iv 2.4.2 Sắc ký lớp mỏng hiệu cao (HPTLC) 39 2.4.3 Sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 39 CHƢƠNG THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 40 3.1 Chiết phân lập hợp chất từ thân rễ củ gấu 40 3.1.1 Quy trình chiết phân lập 40 3.1.2 Thông số vật lý kiện phổ chất phân lập từ thân rễ củ gấu 43 3.2 Chiết phân lập hợp chất từ thân rễ củ gấu biển 49 3.2.1 Quy trình chiết phân lập 49 3.2.2 Thông số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập từ thân rễ củ gấu biển 52 3.3 Phân tích định tính sắc ký dấu vân tay HPTLC 55 3.3.1 Chuẩn bị mẫu phân tích HPTLC 55 3.3.2 Điều kiện sắc ký HPTLC 55 3.3.3 Kết 55 3.4 Nghiên cứu sắc ký dấu vân tay HPLC 55 3.4.1 Chuẩn bị mẫu phân tích HPLC 55 3.4.2 Điều kiện phân tích HPLC 55 3.4.3 Kết 56 3.5 Nghiên cứu định lƣợng số thành phần HPLC 56 3.5.1 Chuẩn bị mẫu phân tích định lƣợng HPLC 56 3.5.2 Phân tích định lƣợng HPLC 56 3.5.3 Kết 56 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 57 4.1 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất 57 4.1.1 Hợp chất CR1: ()-3,5,6,7,8,4-hexahydroxyflavane (Hợp chất mới) 57 4.1.2 Hợp chất CR2: (+)-catechin 60 4.1.3 Hợp chất CR3: eriodictyol 63 4.1.4 Hợp chất CR4: luteolin 67 4.1.5 Hợp chất CR5: 7,4'-dihydroxy-5,3'-dimethoxyflavone 70 4.1.6 Hợp chất CR6: hovetrichoside C 71 4.1.7 Hợp chất CR7: piceatannol 75 4.1.8 Hợp chất CR8: resveratrol 78 4.1.9 Hợp chất CR9: trans-scirpusin A 79 4.1.10 Hợp chất CR10: trans-scirpusin B 83 4.1.11 Hợp chất CR11: cassigarol E 84 4.1.12 Hợp chất CR12: 1,4-dihydroxyeudesm-11-ene 88 4.1.13 Hợp chất CR13: 1β,4β-dihydroxyeudesm-11-ene 90 4.1.14 Hợp chất CR14: 5,7-dihydroxychromone 91 4.1.15 Hợp chất CR15: (+)-lyoniresinol 3a-O--D-glucoside 94 4.1.16 Hợp chất CS1: (S)-5,5,7-trihydroxy-2,4-dimethoxy-6-methylflavanone (Hợp chất mới) 97 v 4.1.17 Hợp chất CS2: 3',4',6-trihydroxy-4-methoxyaurone 102 4.1.18 Hợp chất CS3: -mangostin .105 4.1.19 Các hợp chất khác 109 4.2 Nghiên cứu định tính dấu vân tay sắc ký HPTLC 112 4.3 Nghiên cứu định tính dấu vân tay sắc ký HPLC 114 4.3.1 Đánh giá độ lặp lại phân tích dấu vân tay sắc ký 114 4.3.2 Kết phân tích dấu vân tay sắc ký 115 4.4 Nghiên cứu định lƣợng số thành phần HPLC 124 4.4.1 Chuẩn bị chất thị thiết lập đƣờng chuẩn định lƣợng .124 4.4.2 Đánh giá hàm lƣợng chất mẫu 126 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 129 TÀI LIỆU THAM KHẢO 131 DANH MỤC CÁC C NG TR NH Đ C NG Ố CỦA LUẬN ÁN 146 PHỤ LỤC 147 vi DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Tiếng Anh 13 Cacbon-13 Nuclear Resonance Spectroscopy C-NMR Tiếng Việt Magnetic Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân Cacbon 13 H-1H COSY H-1H Correlation Spectroscopy H-NMR Proton Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân Spectroscopy proton Phổ tƣơng tác proton-proton CC Column Chromatography Sắc ký cột CD Circular Dichroism spectroscopy Phổ lƣỡng sắc tròn CE Capillary Electrophoresis Điện di mao quản Cơng thức phân tử CTPT Đầu dị mảng diốt DAD Diode Array Detector DEPT Distortionless Enhancement Polarization Transfer DMSO Dimethyl sulfoxide ESI-MS ElectroSpray Spectroscopy GC Gas Chromatography GC-MS Gas Chromatography spectroscopy Glu Glucose Glucozơ HMBC Heteronuclear Multiple Phổ tƣơng tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết by Phổ DEPT (CH3)2SO Mass Phổ khối phun mù điện tử Ionization Sắc ký khí Mass Sắc ký khí khối phổ Bond Correlation spectroscopy Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao HPLC High Performance Chromatography HPTLC High Performance Chromatography HR-ESI-MS High Resolution ElectroSpray Phổ khối ion hóa phun mù điện Ionization Mass Spectroscopy tử phân giải cao HSQC Heteronuclear Single Coherence spectroscopy IR Infrared spectroscopy Phổ hồng ngoại J Coupling constant Hằng số tƣơng tác KLPT Thin Layer Sắc ký lớp mỏng hiệu cao Quantum Phổ tƣơng tác trực tiếp H-C Khối lƣợng phân tử vii Kí hiệu Tiếng Anh LC-MS Liquid Chromatography Spectroscopy MEEKC Microemulsion electrokinetic Tiếng Việt Mass Sắc ký lỏng khối phổ Sắc ký điện động vi nhũ tƣơng chromatography MeOH Methanol Methanol Mp Melting point Điểm nóng chảy NMR Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân NOE Nuclear Overhauser Effect Hiệu ứng NOE NOESY Nuclear Overhauser Phổ hiệu ứng NOE Effect Spectroscopy ppm part per million Phần triệu QTOF Quadrupole Time Of Flight Tứ cực thời gian bay RT Retention time Thời gian lƣu SPME Solid-phase microextraction Vi chiết pha rắn TLC, SKLM Thin Layer Chromatography Sắc ký lớp mỏng TMS Tetramethylsilane (CH3)4Si TOF-MS Time Of Flight Mass Spectroscopy Khối phổ thời gian bay UPLC Ultra performance chromatography UV Ultraviolet liquid Sắc ký lỏng siêu hiệu Tử ngoại VAST Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam YHCT Y học cổ truyền δC Độ chuyển dịch hóa học cacbon δH Độ chuyển dịch hóa học proton viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Danh sách loài thực vật thuộc chi Cyperus L Việt Nam Bảng 1.2 Danh sách chất đƣợc phân lập từ loài chi Cyperus L Bảng 1.3 Thành phần tinh dầu có loài chi Cyperus L 15 Bảng 1.4 Một số cơng trình giới nghiên cứu dấu vân tay sắc ký 18 Bảng 1.5 Các loại dƣợc liệu cơng trình [5] 20 Bảng 1.6 Danh sách chất đƣợc phân lập từ Cyperus rotundus L 25 Bảng 2.1 Địa điểm thu thập mẫu nghiên cứu 36 Bảng 3.1 Chƣơng trình dung mơi sắc ký dấu vân tay HPLC 56 Bảng 3.2 Nồng độ chất thị (µg/ml) để xây dựng đƣờng chuẩn 56 Bảng 4.1 Số liệu phổ NMR hợp chất CR1 chất tham khảo 60 Bảng 4.2 Số liệu phổ NMR hợp chất CR2 chất tham khảo 63 Bảng 4.3 Số liệu phổ NMR hợp chất CR3 chất tham khảo 67 Bảng 4.4 Số liệu phổ NMR hợp chất CR4 chất tham khảo 70 Bảng 4.5 Số liệu phổ 1H-NMR hợp chất CR5 chất tham khảo 71 Bảng 4.6 Số liệu phổ NMR hợp chất CR6 chất tham khảo 74 Bảng 4.7 Số liệu phổ NMR hợp chất CR7 chất tham khảo 78 Bảng 4.8 Số liệu phổ 1H-NMR hợp chất CR8 chất tham khảo 79 Bảng 4.9 Số liệu phổ NMR hợp chất CR9 chất tham khảo 82 Bảng 4.10 Số liệu phổ NMR hợp chất CR10 chất tham khảo 84 Bảng 4.11 Số liệu phổ NMR hợp chất CR11 chất tham khảo 87 Bảng 4.12 Số liệu phổ NMR hợp chất CR12 chất tham khảo 90 Bảng 4.13 Số liệu phổ NMR hợp chất CR13 chất tham khảo 91 Bảng 4.14 Số liệu phổ NMR hợp chất CR14 chất tham khảo 93 Bảng 4.15 Số liệu phổ NMR hợp chất CR15 chất tham khảo 96 Bảng 4.16 Số liệu phổ NMR hợp chất CS1 chất tham khảo 101 Bảng 4.17 Số liệu phổ NMR hợp chất CS2 chất tham khảo 105 Bảng 4.18 Số liệu phổ NMR hợp chất CS3 chất tham khảo 108 Bảng 4.19 Tổng hợp cấu trúc hợp chất phân lập đƣợc từ thân rễ đối tƣợng nghiên cứu củ gấu (Cyperus rotundus L.) củ gấu biển (Cyperus stoloniferus Retz.) khuôn khổ luận án 109 Bảng 4.20 Giá trị Rf cƣờng độ vết sắc ký đồ HPTLC quan sát dƣới ánh sáng UV 366 nm chƣa phun thuốc thử 112 Bảng 4.21 Danh sách chất thị sử dụng nghiên cứu sắc ký dấu vân tay 118 Bảng 4.22 Hệ số tƣơng đồng mẫu so với mẫu CGV1, CGB1 122 Bảng 4.23 Hệ số tƣơng đồng mẫu so với mẫu CGV, CGB trung bình cộng 123 Bảng 4.24 Các thơng số phân tích định lƣợng số chất HPLC 125 Bảng 4.25 Hàm lƣợng chất (µg/g) mẫu nghiên cứu 126 - 39- Phổ DEPT hợp chất CS2 Phổ HMBC hợp chất CS2 - 40- Phổ ESI-MS hợp chất CS2 - 41- Phụ ục 18 Phổ hợp chất CS3 Phổ 1H-NMR hợp chất CS3 Phổ 13C-NMR hợp chất CS3 - 42- Phổ DEPT hợp chất CS3 Phổ HMBC hợp chất CS3 - 43- Phổ ESI-MS hợp chất CS3 - 44- Phụ ục 19 Sắc ký đồ HPTLC Bản HPTLC quan sát dƣới ánh sáng UV 254 nm trƣớc phun thuốc thử Bản HPTLC quan sát dƣới ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử - 45- Phụ lục 20 Thời gian ƣu pic sắc ký đồ HPLC mẫu nghiên cứu TT CGV1 CGV2 CGV3 1,44 1,39 1,40 10,08 10,05 10,08 10,55 10,52 10,54 12,04 12,04 12,67 12,63 12,65 14,06 14,10 14,71 15,10 15,06 15,09 10 15,90 15,87 15,89 11 18,21 18,18 18,19 12 18,89 18,84 18,88 13 19,89 19,84 19,88 14 20,13 20,09 20,13 15 20,42 20,38 20,42 16 20,85 17 21,51 21,46 21,50 18 21,79 21,83 19 20 22,82 22,76 22,81 21 23,11 22 24,27 24,21 24,24 23 27,12 27,09 27,12 24 27,91 27,87 27,90 25 29,55 29,46 29,49 26 31,32 31,28 31,31 27 31,53 31,49 31,52 28 32,52 32,49 32,51 29 32,91 32,87 32,89 30 33,33 33,31 33,33 31 34,53 34,55 32 - CGV4 CGV5 CGV6 CGB1 CGB2 1,40 1,40 1,40 1,44 1,39 8,98 8,97 9,03 8,95 10,09 10,09 10,09 10,55 10,55 10,55 10,55 10,56 12,06 12,04 12,03 12,03 12,03 12,73 12,67 12,67 12,66 12,66 14,10 14,11 13,95 14,11 14,68 14,76 15,10 15,11 15,10 15,10 15,11 15,94 15,91 15,92 15,93 18,01 18,22 18,22 18,20 18,22 18,85 18,89 18,89 18,89 18,90 19,89 19,88 19,88 19,89 20,12 20,14 20,14 20,14 20,15 20,44 20,43 20,43 20,79 20,75 20,75 21,50 21,51 21,50 21,52 21,52 21,97 21,95 21,94 22,00 22,00 22,61 22,62 22,62 22,62 22,62 22,81 22,81 23,16 23,16 23,15 23,17 23,18 24,30 24,26 24,27 24,28 24,29 27,12 27,11 27,12 27,12 27,11 27,90 27,90 27,90 27,85 27,90 29,55 29,53 29,53 29,55 29,55 31,31 31,31 31,31 31,31 31,32 31,53 31,53 31,52 31,53 31,54 32,51 32,51 32,51 32,53 32,52 32,92 32,92 32,91 32,92 32,92 33,33 33,33 33,33 33,33 33,33 34,50 34,54 34,66 34,83 - - 46- Phụ lục 20 Thời gian ƣu pic sắc ký đồ HPLC mẫu nghiên cứu (tiếp theo) TT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 CGB3 10,51 11,98 12,60 13,90 15,05 15,86 18,15 18,83 19,83 20,08 20,78 21,45 21,93 22,57 23,12 24,22 27,08 27,85 29,50 31,28 31,50 32,49 32,89 33,30 - CGB4 1,39 10,55 12,03 12,66 14,75 15,10 15,89 18,21 18,89 19,86 20,14 20,76 21,50 21,94 22,62 23,25 24,25 27,10 27,89 29,55 31,32 31,54 32,52 32,92 33,34 - CGB5 1,41 10,56 12,03 12,66 13,96 14,74 15,10 18,21 18,89 19,88 20,14 21,51 21,98 22,62 23,17 24,27 27,13 27,87 29,55 31,31 31,53 32,53 32,92 33,34 - CGB6 1,40 10,56 12,03 12,66 13,94 15,11 18,21 18,90 19,88 20,14 21,51 21,97 22,62 23,17 24,26 27,12 27,85 29,54 31,31 31,53 32,52 32,91 33,33 - HP1 1,43 8,94 10,56 12,02 12,65 14,10 14,76 15,09 15,91 18,33 18,88 19,83 20,13 20,70 21,44 21,99 22,60 23,15 24,30 27,10 27,86 29,53 31,30 31,52 32,51 32,91 33,32 - HP2 1,45 8,93 10,55 12,02 12,65 14,10 14,74 15,10 15,92 18,20 18,89 19,85 20,14 20,79 21,51 22,02 22,62 23,17 24,30 27,11 27,89 29,54 31,31 31,53 32,52 32,91 33,31 - HP3 1,43 8,94 10,56 12,03 12,66 14,11 14,75 15,11 15,94 18,21 18,90 19,88 20,17 20,88 21,52 22,02 22,62 23,17 24,31 27,11 27,89 29,55 31,31 31,54 32,52 32,92 33,33 - HP4 1,43 8,92 10,55 12,02 12,64 14,10 14,74 15,10 15,92 18,19 18,88 19,85 20,13 20,86 21,50 22,01 22,61 23,16 24,29 27,11 27,89 29,53 31,31 31,53 32,51 32,91 33,32 - - 47- Phụ lục 21 Diện tích pic nghiên cứu sắc ký dấu vân tay HPLC STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 RT (phút) 1,44 8,98 10,08 10,55 12,04 12,67 14,06 14,71 15,10 15,90 18,21 18,89 19,89 20,13 20,42 20,79 21,51 21,97 22,62 22,82 23,11 24,27 27,12 27,91 29,55 31,32 31,53 32,52 32,91 33,33 34,53 34,83 CGV1 CGV2 585,12 49,34 34,01 30,67 8,47 12,01 47,69 222,63 20,93 22,72 31,01 29,41 42,13 14,79 17,75 42,50 36,49 115,31 41,26 39,48 32,25 79,33 - 277,46 83,85 216,60 56,16 125,14 29,61 26,89 42,26 9,84 68,02 6,11 19,39 46,10 46,54 26,05 65,90 17,90 23,15 122,11 277,36 112,13 123,47 108,13 17,74 179,54 38,11 - CGV3 630,83 123,41 180,72 31,05 155,33 47,12 8,62 53,19 20,22 230,29 638,84 27,65 59,49 101,04 12,23 108,34 57,13 87,82 3,59 32,15 16,86 130,60 235,60 136,30 127,97 126,26 25,66 223,14 57,45 - CGV4 164,14 14,41 40,80 106,13 14,77 110,07 21,70 34,99 32,20 9,76 25,02 33,83 51,22 23,23 28,16 10,22 166,82 138,90 67,58 95,81 420,26 45,44 184,25 186,79 214,05 740,53 161,37 5,07 11,42 CGV5 401,86 5,33 80,35 116,00 16,18 80,11 32,12 4,01 22,84 36,95 23,23 134,93 21,21 35,46 61,13 40,89 36,08 13,34 47,29 37,69 36,76 53,99 54,22 165,38 69,37 102,12 90,54 119,67 353,89 149,13 74,21 - CGV6 427,28 5,42 93,23 131,19 82,74 108,04 20,09 21,94 11,15 61,10 7,84 12,79 37,65 30,13 43,09 22,98 18,24 56,57 4,39 27,69 39,66 88,91 70,94 124,77 49,32 65,13 76,23 143,42 126,84 - - 48- Phụ lục 21 Diện tích pic nghiên cứu sắc ký dấu vân tay HPLC (tiếp theo) STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 RT (phút) 1,44 8,98 10,08 10,55 12,04 12,67 14,06 14,71 15,10 15,90 18,21 18,89 19,89 20,13 20,42 20,79 21,51 21,97 22,62 22,82 23,11 24,27 27,12 27,91 29,55 31,32 31,53 32,52 32,91 33,33 34,53 34,83 CGB1 CGB2 CGB3 100,53 278,88 819,62 753,69 186,72 161,58 276,60 436,42 50,21 86,25 57,71 39,77 33,38 46,01 81,45 26,43 286,64 100,02 177,53 50,80 151,15 385,14 151,13 - 581,42 6,67 56,69 267,83 292,29 93,76 12,75 31,75 28,35 99,87 347,25 33,94 66,18 35,66 24,41 47,23 68,57 94,20 43,19 162,59 100,37 228,05 53,67 131,39 763,11 224,54 - 433,11 992,52 1015,80 67,44 122,05 13,86 56,93 154,22 25,43 62,22 34,35 56,35 7,92 48,35 82,28 76,73 20,92 227,53 97,36 259,06 76,83 227,60 629,36 188,57 - CGB4 11,49 126,94 362,48 349,04 16,01 46,74 13,65 38,84 140,10 13,69 39,94 3,82 21,20 6,05 11,08 25,71 52,80 27,25 56,38 17,97 60,36 15,47 34,37 289,11 79,91 - CGB5 155,57 262,65 612,83 633,98 73,06 16,96 131,85 193,14 417,67 28,92 104,26 57,84 32,46 28,07 39,43 110,08 24,16 227,93 83,93 179,01 45,21 130,14 321,70 128,19 - CGB6 220,16 549,50 1122,35 1053,46 39,11 141,28 204,51 418,91 40,01 87,00 68,97 29,89 30,46 43,45 106,22 13,17 234,86 79,69 149,84 42,92 124,48 328,40 129,11 - - 49- Phụ lục 21 Diện tích pic nghiên cứu sắc ký dấu vân tay HPLC (tiếp theo) STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 RT(phút) 1,44 8,98 10,08 10,55 12,04 12,67 14,06 14,71 15,10 15,90 18,21 18,89 19,89 20,13 20,42 20,79 21,51 21,97 22,62 22,82 23,11 24,27 27,12 27,91 29,55 31,32 31,53 32,52 32,91 33,33 34,53 34,83 HP1 118,59 8,50 129,86 154,71 142,60 9,60 15,53 46,79 114,34 788,20 109,49 95,46 87,31 53,54 119,79 43,12 22,79 63,71 76,62 28,02 299,81 46,79 323,38 69,68 254,51 625,57 216,67 - HP2 42,31 272,68 35,93 161,27 244,23 114,61 18,17 29,50 75,45 206,94 626,64 83,71 197,62 33,83 35,41 72,50 94,15 59,80 290,32 38,79 167,05 85,08 224,43 35,62 129,83 657,76 295,89 - HP3 41,54 167,44 115,49 418,18 921,72 123,03 53,12 83,56 47,51 439,98 672,42 45,29 24,99 31,80 35,76 43,43 27,01 39,35 273,96 26,23 129,22 75,19 139,07 35,00 95,36 652,88 144,62 - HP4 230,86 7,88 86,25 62,09 54,73 27,67 13,33 65,72 195,73 524,21 100,21 133,11 32,69 51,67 69,29 36,05 18,35 133,69 43,04 171,63 75,97 235,91 45,93 174,20 415,78 194,08 - - 50- Phụ lục 22 Tín hiệu phổ khối m/z v cƣờng độ (%) pic nghiên cứu sắc ký dấu vân tay HPLC-MS STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 RT (phút) 1,44 8,98 10,08 10,55 12,04 12,67 14,06 14,71 15,10 15,90 18,21 18,89 19,89 20,13 20,42 20,79 21,51 21,97 22,62 22,82 23,11 24,27 27,12 27,91 29,55 31,32 31,53 32,52 32,91 33,33 34,53 34,83 MS Positive m/z (%) 203,1 (60) 268,0 (100) 579,0 (100) 563,2 (100) 291,0 (100) 291,0 (80) 275,1 (100) 393,2 (60) 362,2 (100) 245,1 (100) 487,1 (100) 291,1 (100) 471,1 (100) 271,1 (70) 291,1 (100) 291,1 (100) 289,1 (100) 253,1 (100) 301,1 (100) 315,1 (100) 287,0 (100) 347,2 (100) 257,2 (60) 259,2 (100) 219,2 (100) 219,1 (100) 289,1 (100) 219,1 (100) 216,2 (100) 218,2 (80) 411,2 (100) 219,1 (100) 321,1 (50) 311,1 (50) 273.0 (20) 307,0 (50) 257,0 (20) 297,2 (90) 475,3 (40) 265,1 (40) 588,5 (15) 229,1 (85) 291,1 (100) 307,1 (40) 235,1 (70) 323,1 (30) 253,2 (100) 275,1 (100) 234,2 (100) 275,1 (100) 563,3 (30) 525,3 (40) 241,2 (40) 214,2 (50) 525,3 (40) 507,3 (80) 577,5 (30) 235,1 (35) 325,1 (40) 307,0 (60) 437,2 (20) 307,0 (70) 588,5 (60) 273,2 (100) 337,2 (10) 409,2 (10) 525,3 (100) 509,2 (40) MS Negative m/z (%) 268,8 (100) 295,1 (100) 302,2 (100) 577,2 (100) 561,2 (100) 289,1 (100) 289,0 (100) 449,1 (100) 289,0 (100) 281,2 (100) 243,1 (100) 243,1 (100) 521,0 (100) 505,1 (100) 249,2 (100) 285,1 (100) 303,1 (100) 287,1 (100) 301,0 (95) 299,1 (100) 305,2 (100) 285,0 (100) 345,1 (100) 571,3 (80) 311,2 (100) 339,2 (100) 339,2 (100) 409,1 (100) 353,0 (70) 489,2 (40) 597,2 (45) 325,1 (55) 325,1 (75) 304,9 (15) 561,1 (50) 319,1 (60) 568,6 (20) 597,1 (60) 485,2 (5) 303,1 (75) 469,1 (45) 285,1 (80) 577,1 (60) 323,2 (60) 323,1 (20) 521,1 (100) 599,2 (15) 521,1 (10) 299,1 (5) 249,0 (35) 569,2 (60) 285.1 (20) - 51- Phụ lục 23 Phổ UV chất phân tích định ƣợng Phổ UV hợp chất CR2-CS5 Phổ UV hợp chất CR1-CS4 Phổ UV hợp chất CR15 - 52- Phụ lục 23 Phổ UV chất phân tích định ƣợng (tiếp theo) Phổ UV hợp chất CR7-CS8 Phổ UV hợp chất CR10-CS11 - 53- Phụ lục 23 Phổ UV chất phân tích định ƣợng (tiếp theo) Phổ UV hợp chất CR3-CS6 Phổ UV hợp chất CS1 ... vi nghiên cứu Mục đích luận án làm rõ thành phần hóa học, so sánh khác biệt thành phần hóa học hai lồi củ gấu củ gấu biển Nghiên cứu góp phần xây dựng liệu sắc ký dấu vân tay cho hai loài củ gấu. .. GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI NGUYỄN MINH CHÂU NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ SẮC KÝ DẤU VÂN TAY CỦA THÂN RỄ HAI LOÀI: CỦ GẤU (CYPERUS ROTUNDUS L.) VÀ CỦ GẤU BIỂN (CYPERUS... mẫu thân rễ hai loài: củ gấu, củ gấu biển dƣợc liệu Hƣơng phụ thu thập địa điểm khác Ý nghĩa khoa học luận án Luận án đóng góp hiểu biết thành phần hóa học sắc ký dấu vân tay loài thực vật: củ gấu,