Đang tải... (xem toàn văn)
Trong phạm vi luận văn thạc sĩ “ Xác định hàm lƣợng prabens trong thực phẩm và mỹ phẩm bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) ” chúng tôi tiến hành khảo sát các điều ki[r]
(1)ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
-
LÊ THỊ XUÂN
XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG PARABENS TRONG THỰC PHẨM VÀ MỸ PHẨM BẰNG
SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) Chun ngành: Hóa phân tích
Mã số: 60440118
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
Người hướng dẫn khoa học
PGS.TS PHẠM THỊ NGỌC MAI
(2)LỜI CẢM ƠN
Lời cho em gửi lời cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Phạm Thị Ngọc Mai tận tình hướng dẫn tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình thực đề tài viết luận văn
Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban lãnh đạo Viện Kiểm nghiệm An toàn Vệ sinh Thực phẩm Quốc gia anh chị, bạn công tác Khoa Chất lượng Phụ gia chất hỗ trợ chế biến thực phẩm – Viện An toàn Vệ sinh Thực phẩm Quốc gia tạo điều kiện thuận lợi cho học tập nghiên cứu môi trường đại
Em xin bày tỏ lịng biết ơn tới thầy giáo giảng dạy Khoa Hố, đặc biệt thầy Bộ mơn Hố Phân tích, cho em kiến thức quý giá trình học tập thực đề tài
Tôi xin gửi lời cảm ơn anh chị, bạn bè tập thể lớp cao học hoá K24, đặc biệt người bạn nhóm Hố Phân tích K24 giúp đỡ, chia sẻ khó khăn suốt q trình học tập thực đề tài
Cuối xin gửi lời cảm ơn tới gia đình bạn bè ln động viên, chia sẻ khó khăn tơi
Hà Nội, tháng 12 năm 2016 Học viên
Lê Thị Xuân
MỤC LỤC
ĐẶT VẤN ĐỀ 1 CHƢƠNG I TỔNG QUAN 3
1.1 Tổng quan hợp chất parabens
1.1.1 Cơng thức phân tử tính chất vật lý parabens
1.1.2 Tác dụng kháng khuẩn parabens
1.1.3 Tác động parabens sức khỏe
(3)1.1.3.2 Hiện tượng lão hóa da 1.1.3.3 Mối liên hệ với parabens bệnh ung thư vú 1.2 Tình hình sử dụng parabens giới Việt Nam
1.3 Các phương pháp phân tích parabens
1.3.1 Phương pháp điện di mao quản (CE)
1.3.2 Phương pháp sắc ký lỏng 10
1.3.2.1 Sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) ghép nối detector UV-VIS 10 1.3.2.2 Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS) 11 1.3.3 Phương pháp sắc ký khí khối phổ (GC-MS) 13
1.3.4 Đại cương phương pháp sắc ký lỏng 14
1.3.4.1 Nguyên tắc chung phương pháp sắc ký lỏng 14 1.3.4.2 Một số đại lượng đặc trưng sắc ký lỏng 15
1.4 Các phương pháp xử lý mẫuError! Bookmark not defined.
CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUError! Bookmark not defined
2.1 Mục tiêu nghiên cứuError! Bookmark not defined.
2.2 Đối tượng nghiên cứuError! Bookmark not defined.
2.3 Nội dung nghiên cứuError! Bookmark not defined.
2.4 Hóa chất, dụng cụ thiết bịError! Bookmark not defined.
2.4.1 Hóa chất Error! Bookmark not defined. 2.4.2 Dụng cụ Error! Bookmark not defined. 2.4.3 Thiết bị Error! Bookmark not defined.
2.5 Phương pháp nghiên cứuError! Bookmark not defined.
2.5.1 Xác định điều kiện phân tích Error! Bookmark not defined. 2.5.1.1 Xác định thông số cho detector khối phổ Error! Bookmark not defined. 2.5.1.2 Khảo sát điều kiện đo sắc ký Error! Bookmark not defined. 2.5.1.3 Khảo sát điều kiện chiết mẫu Error! Bookmark not defined. 2.5.2 Xác nhận giá trị sử dụng phương pháp Error! Bookmark not defined. 2.5.2.1 Xây dựng đường chuẩn Error! Bookmark not defined. 2.5.2.2 Độ lặp lại (độ chụm) Error! Bookmark not defined. 2.5.2.3 Độ thu hồi (độ đúng) Error! Bookmark not defined. 2.5.2.4 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) Error! Bookmark not defined. CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Error! Bookmark not defined
(4)3.1.2.1 Khảo sát chương trình rửa giải Error! Bookmark not defined. 3.1.2.2 Khảo sát nồng độ dung dịch đệm Error! Bookmark not defined. 3.1.3 Khảo sát điều kiện chiết mẫu Error! Bookmark not defined. 3.1.3.1 Khảo sát loại dung môi chiết Error! Bookmark not defined. 3.1.3.2 Khảo sát thành phần dung môi chiết MeOH:H2O Error! Bookmark not defined.
3.1.3.3 Khảo sát thời gian rung siêu âm Error! Bookmark not defined. 3.1.3.4 Khảo sát nhiệt độ rung siêu âm Error! Bookmark not defined.
3.2 Đánh giá phương pháp phân tíchError! Bookmark not defined.
3.2.1 Xây dựng đường chuẩn Error! Bookmark not defined. 3.2.3 Độ thu hồi (độ đúng) phương pháp Error! Bookmark not defined. 3.2.4 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) Error! Bookmark not defined. 3.3 Phân tích parabens mẫu mỹ phẩm thực phẩm chức năngError! Bookmark not defined. KẾT LUẬN Error! Bookmark not defined
TÀI LIỆU THAM KHẢO 16
DANH SÁCH BẢNG BIỀU
Chƣơng
Bảng Bảng nồng độ dung dịch chuẩn gốc parabens Error! Bookmark not defined.
Chƣơng
Bảng Bảng điều kiện detector khối phổError! Bookmark not defined.
Bảng Bảng điều kiện chương trình gradientError! Bookmark not defined.
Bảng 3 Ảnh hưởng gradient đến độ phân giải Iso-PrP PrP Error! Bookmark not defined.
Bảng Ảnh hưởng gradient đến cường độ tín hiệu mảnh định lượng parabens Error! Bookmark not defined.
Bảng Khảo sát loại dung môi chiết Error! Bookmark not defined.
Bảng Sự phụ thuộc thành phần dung môi chiết hàm lượng MeP, PrP Error! Bookmark not defined.
Bảng Khảo sát ảnh hưởng dung môi chiếtError! Bookmark not defined.
Bảng Sự phụ thuộc thời gian rung siêu âm hàm lượng MeP, PrP Error! Bookmark not defined.
(5)Bảng 10 Ảnh hưởng nhiệt độ rung siêu âm tới hiệu chiết MeP, PrP Error! Bookmark not defined.
Bảng 11 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ rung siêu âm Error! Bookmark not defined.
Bảng 12.Độ chệch điểm chuẩnError! Bookmark not defined.
Bảng 13 Hàm lượng parabens mẫu khảo sát Error! Bookmark not defined.
Bảng 14 Nồng độ chuẩn thêm vào mẫu khảo sát độ lặp lại Error! Bookmark not defined.
Bảng 15 Độ lặp lại phương pháp phân tíchError! Bookmark not defined.
Bảng 16 Độ thu hồi phương pháp phân tíchError! Bookmark not defined.
Bảng 17 Giới hạn phát giới hạn định lượng phương pháp Error! Bookmark not defined.
Bảng 18 Hàm lượng parabens mẫu TPCN Error! Bookmark not defined.
(6)DANH SÁCH HÌNH
Chƣơng
Hình 1 Công thức phân tử methylparaben 3
Hình Cơng thức phân tử propylparaben 4
Hình Cơng thức phân tử isopropylparaben 4
Hình Cơng thức phân tử isobutylparaben 5
Hình Cơng thức phân tử phenylparaben 5
Hình Công thức phân tử benzylparaben 5
Hình Cơng thức phân tử pentylparaben 6
Hình Cơ chế gây hại ADN da hợp chất parabens 7
Hình Mơ hình phân mảnh parabens phân tích LC-MS/MS 12
Hình 10 Sơ đồ cấu tạo hệ thống UPLC-MS/MS 15 Chƣơng
Hình Lược đồ quy trình phân tích mẫu theo dự kiến Error! Bookmark not defined.
Chƣơng
Hình Sắc đồ khảo sát chương trình rửa giảiError! Bookmark not defined.
Hình Sắc đồ khảo sát thành phần dung dịch đệmError! Bookmark not defined.
Hình 3 Biều đồ khảo sát loại dung mơi chiếtError! Bookmark not defined.
Hình Sắc đồ khảo sát loại dung môi chiếtError! Bookmark not defined.
Hình Biểu đồ phụ thuộc độ thu hồi thành phần dung môi chiết Error! Bookmark not defined.
Hình Biều đồ phụ thuộc hàm lượng MeP, PrP thời gian rung siêu âm Error! Bookmark not defined.
Hình Biểu đồ khảo sát ảnh hưởng độ thu hồi thời gian rung siêu âm Error! Bookmark not defined.
Hình Quy trình xử lý mẫu phân tích Error! Bookmark not defined.
Hình Đường chuẩn parabens theo diện tích pic Error! Bookmark not defined.
Hình 10 Biểu đồ hàm lượng (%) parbens mẫu TPCN Error! Bookmark not defined.
(7)DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT
Tên viết tắt Tên tiếng anh Tên Tiếng việt
MeP Methylparaben Methylparaben
PrP Propylparaben Propylparaben
Iso-PrP Isopropylparaben Isopropylparaben Iso-BuP Isobutylparaben Isobutylparaben
BeP Benzylparaben Benzylparaben
PeP Pentylparaben Pentylparaben
PheP Phenylparaben Phenylparaben
% RSD % Relative standard deviation
% Độ lệch chuẩn tương đối
ACN Acetonitrile Acetonitril
GC–MS Gas chromatography - Mass spectroscopy
Sắc ký khí khối phổ
HPLC High performance liquid Chromatography
Sắc ký lỏng hiệu cao
LC–MS Liquid Chromatography - Mass Spectroscopy
Sắc ký lỏng khối phổ
LOD Limit of Detection Giới hạn phát LOQ Limit of Quantification Giới hạn định
lượng
MeOH Methanol Methanol
UV-VIS Ultraviolet-Visible Tử ngoại khả kiến
R Relative coefficient Hệ số tương quan
Ppm Parts per million Phần triệu
(8)(9)Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân Đại học KHTN Hà Nội
ĐẶT VẤN ĐỀ
Chất bảo quản hóa chất tự nhiên hay tổng hợp thêm vào thực phẩm, dược phẩm, mẫu phẩm sinh học, v.v để ngăn ngừa làm chậm lại thối rữa, hư hỏng gây phát triển vi sinh vật, haycác thay đổi không mong muốn mặt hóa học sản phẩm
Parabens tên gọi chung nhóm chất bảo quản hóa học, sử dụng phổ biến lâu đời Về mặt hóa học, parabens loạt este axit parahydroxybenzoic hay gọi acid 4-hydroxybenzoic Parabens có tính chất kháng khuẩn kháng nấm nên dùng làm chất bảo quản để ngăn ngừa nhiễm khuẩn (do nấm vi khuẩn) hạn chế phân hủy hoạt chất dẫn đến giảm hiệu dược phẩm, thực phẩm chức năng, mỹ phẩm
Gần đâycó nhiều nghiên cứu cho thấy, hợp chất parabens hoạt động tương tự hormone oestrogen tế bào thể Các hoạt động có liên quan định đến bệnh ung thư vú Những thông tin làm cho nhiều phụ nữ lo lắng, người tiêu dùng khuyến cáo hạn chế sử dụng loại mỹ phẩm xung quanh cánh tay, ngực vùng da nhạy cảm Parabens gây dị ứng da người có địa dị ứng hay mẫn cảm Ngồi cịn có thơng tin việc parabens làm thúc đẩy q trình lão hóa da tác động ánh nắng mặt trời
Trước chứng tác hại parabens sức khỏecon người, Cục Quản lý Dược ban hành công văn số 6577/QLD-MP quy định việc sử dụng số chất mỹ phẩm Theo đó, có parabens bị cấm sử dụng Việt Nam từ ngày 30/7/2015là: isopropylparaben, isobutylparaben, phenylparaben, benzylparaben pentylparaben Cũng theo công văn này, propylparaben muối phép dùng riêng lẻ với nồng độ tối đa 0,4% (tính theo acid), dạng hỗn hợp parabens khác với tổng nồng độ tối đa 0,8% (tính theo acid).Thời hạn cơng bố sản phẩm sản xuất nước, nhập đến hết ngày 31/12/2015.Các sản phẩm sản xuất nước, nhập phép lưu hành thị trường đến hết ngày 30/6/2016
Với yêu cầu thực tế nay,việc kiểm soát chất bảo quản parabens cần thiết Trong phạm vi luận văn thạc sĩ “Xác định hàm lƣợng prabens thực phẩm mỹ phẩm sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC)” tiến hành khảo sát điều kiện HPLC thích hợp để định tính, định lượng chất parabens, bao gồm: methylparaben, propylparaben, isopropylparaben, isobutylparaben, phenylparaben, benzylparaben, pentylparaben
(10)Luận văn Thạc sĩ Chuyên ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xn Đại học KHTN Hà Nội
Xây dựng chuẩn hóa phương pháp định lượng chất paraben nêu bằngphương pháp sắc ký lỏng kết hợp với đầu dò khối phổ
(11)Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân Đại học KHTN Hà Nội
CHƢƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan hợp chất parabens
Este alkyl acid p-hydroxybenzoic gọi parabens sử dụng rộng rãi làm chất bảo quản dược phẩm từ năm 1920 sử dụng rộng rãi thực phẩm mỹ phẩm thời gian ngắn sau [11]
Một số parabens tìm thấy tự nhiên, nhiên tất parabens sử dụng thương mại đểu sản xuất tổng hơp Chúng sản xuất phản ứng este hóa para-hydroxybenzoic acid rượu thích hợp, ví dụmethanol, ethanol, n-propanol, v.v.khi có mặt chất xúc tác thích hợp (ví dụ axit sulfuric đậm đặc axit p-toluenesulfonic) [11]
1.1.1 Cơng thức phân tử tính chất vật lý parabens
Ở điều kiện bình thường, parabens nghiên cứu tinh thể màu trắng Methylparaben (MeP), propylparaben (PrP), isopropylparaben(Iso-PrP) tan tốt nước, parabens cịn lại khó tan nước, tan tốt dung môi hữu (methanol, ethanol) Nguyên nhân theo chiều khối lượng phân tử tăng lên, độ phân cực parabens giảm xuống [24]
Methylparaben
Danh pháp IUPAC: methyl 4-hydroxybenzoate
Tên gọi khác:nipagin, methylparahydroxybenzoate,methyl p-hydroxybenzoate
Công thức phân tử: C8H8O3
Công thức cấu tạo Hình 1.1:
Hình 1 Cơng thức phân tử methylparaben
Khối lượng mol phân tử: 152,15 g/mol Ký hiệu ngành thực phẩm là: E218 Độ tan nước 25o
C: 2,00 g/100 mL; pKa: 8,17
Propylparaben
(12)Luận văn Thạc sĩ Chuyên ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xn Đại học KHTN Hà Nội
Tên gọi khác: nipazol, propyl parahydroxybenzoate, propyl p-hydroxybenzoate,
Công thức phân tử: C10H12O3
Cơng thức cấu tạo Hình 1.2:
Hình 2.Cơng thức phân tử propylparaben
Khối lượng mol phân tử: 180,2 g/mol Ký hiệu ngành thực phẩm là: E216 Độ tan nước 25o
C: 0,30 g/100 mL; pKa: 8,35
Isopropylparaben
Danh pháp IUPAC: propan-2-yl 4-hydroxybenzoate
Tên gọi khác: isopropyl 4-hydroxybenzoate, isopropyl p-hydroxybenzoate
Công thức phân tử: C10H12O3
Khối lượng mol phân tử: 180,2 g/mol Cơng thức cấu tạo Hình 1.3:
Hình Công thức phân tử isopropylparaben
Isobutylparaben
(13)Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xn Đại học KHTN Hà Nội
Khối lượng mol phân tử: 194,23 g/mol Công thức cấu tạo Hình 1.4:
Hình Cơng thức phân tử isobutylparaben
Phenylparaben
Danh pháp IUPAC: phenyl 4-hydroxybenzoate Công thức phân tử: C13H10O3
Khối lượng mol phân tử: 214,22 g/mol Cơng thức cấu tạo Hình 1.5:
Hình Công thức phân tử phenylparaben
Bezylparaben
Danh pháp IUPAC: benzyl 4-hydroxybenzoate Công thức phân tử: C14H12O3
Khối lượng mol phân tử: 228,24 g/mol Công thức cấu tạo Hình 1.6:
Hình Cơng thức phân tử benzylparaben
Độ tan nước 25oC: 0,05 g/100 mL
(14)Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân Đại học KHTN Hà Nội
Danh pháp IUPAC: pentyl 4-hydroxybenzoate Công thức phân tử: C12H16O3
Khối lượng mol phân tử: 208,25 g/mol Cơng thức cấu tạo Hình 1.7:
Hình Cơng thức phân tử pentylparaben 1.1.2 Tác dụng kháng khuẩn parabens
Các parabens có tác dụng sát khuẩn (tiêu diệt nhiều loại vi khuẩn khác nhau) diệt nhiều loại vi nấm Parabens có hoạt tính kháng khuẩn chúng làm thay đổi đặc tính màng tế bào, khiến cho cấu trúc lớp màng tế bào thay đổi cho phép chất tan tế bào bị rò rỉ ngoài[24]
Tác giả Steinberg Doron cộng sự[24] nghiên cứu đặc tính kháng khuẩn bốn parabens là: methylparaben, ethylparaben, propylparaben, butylparaben vi khuẩn Streptococcus sobrinus gây bệnh sâu Kết thu cho thấy, theo chiều tăng chuỗi akyl khả kháng khuẩn parabens tăng dần
Tuy nhiên, theo chiều tăng chuỗi ankyl khả tan nước giảm dần, vi khuẩn thường phát triển môi trường nước Do đồng phân có chuỗi alkyl ngắn thường lựa chọn sử dụng với mục đích bảo quản
Để tăng hiệu bảo quản, parabens sử dụng kết hợp với Thông thường, người ta phối hợp hai paraben trở lên, thí dụ phối hợp 0,18% methyl parabens, 0,02% propyl parabens để làm chất bảo quản sát khuẩn nhiều loại thuốc tiêm chích phối hợp parabens với số hóa chất khác
Trước đây, parabens sử dụng rộng rãi thuốc chữa bệnh, thường hàm lượng cao, khoảng 1% đến 5% [5] Khi tác hại parabens sức khỏe người phát hiện, việc sử dụng parabens sản phẩm thuốc chữa bệnh giảm xuống So với dược phẩm, hàm lượng parabens sử dụng sản phẩm mỹ phẩm thường nồng độ thấp (khoảng 0,1% đến l0,8%), nay, chúng loại chất bảo quản sử dụng nhiều nhiều lí do: giá thành rẻ, hiệu bảo quản tốt, không màu, không mùi, không làm thay đổi tính chất sản phẩm
1.1.3 Tác động parabens sức khỏe
(15)Luận văn Thạc sĩ Chuyên ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân Đại học KHTN Hà Nội
Tác giả Christen M Mowad [9] trình bày báo hai trường hợp viêm da dị ứng tiếp xúc gây parabens, thông qua việc sử dụng sản phẩm hàng ngày sữa tắm, dầu gội đầu, nước rửa tay, v.v Nghiên cứu rằng, benzylparaben chất có khả gây dị ứng mạnh nhất, khối lượng phân tử lớn
Trong báo cáo khác, tác giảJames E Nagel cộng sự[13] trình bày hai trường hợp dị ứng với parabens đường tiêm da
Cơ chế gây dị ứng parabens chưa rõ ràng, nhiều trường hợp dị ứng với chất bảo quản ghi nhận Một điều tra năm 1973, tiếnhành 1200 cá nhân thực The North American Contact Dermatitis Group cho thấy tỷ lệ dị ứng với parabens 3% [13]
1.1.3.2 Hiện tượng lão hóa da
Theo kết nghiên cứu rác giả Osamu Handa cộng sự[19], methylparaben tăng cường khả gây hại tia UVB tế bào sừng da Tia UVB với cường độ 15 mJ/cm2 30 mJ/cm2 (tương ứng với cường độ
UVB trung bình tiếp xúc với ánh sáng mặt trời vòng phút vào ngày đẹp trời châu Âu) không gây hại đến tế bào sừng Tuy nhiên kết hợp sử dụng methylparaben 0,003% việc chiếu xạ tia UVB với cường độ lượng tế bào sừng bị hoại tử tăng lên đáng kể
Theo kết nghiên cứu khác tác giả Yoshinori Okamoto cộng [28], methylparaben sản phẩm chuyển hóa methylparaben, kết hợp với ánh sáng mặt trời gây tổn hại ADN da Cơ chế tác động mơ tả Hình1.8:
Hình Cơ chế gây hại ADN da hợp chất parabens 1.1.3.3 Mối liên hệ với parabens bệnh ung thư vú
Hơn 50 năm nay, hợp chất parabens biết đến có hoạt tính oestrogen Oestrogen biết có ảnh hưởng đến tỷ lệ mắc bệnh ung thư vú việc ngưng hoạt động oestrogen phương pháp ưu tiên điều trị cho khối u vú nhạy cảm với hormone
(16)Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân Đại học KHTN Hà Nội
chuyển [3H] oestradiol từ thụ thể tế bào tương MCF7 Paraben tăng biểu gen quy định oestrogen tăng khả sản sinh tế bào Liên kết parabens với tế bào MCF7 tăng lên theo chiều dài chuỗi alkyl, nhiên liên kết yếu Kết phù hợp với báo cáo nghiên cứu tính liên kết áp dụng với hệ tử cung chuột
Theo tác giảRoutledge E.J cộng sự [20], tất parabens bao gồm: methylparaben, ethylparaben, n-propylparaben, butylparaben có hoạt tính tương tự oestrogen Trong methyl paraben chất có hoạt tính oestrogen yếu với cường độ thấp khoảng 2500000 lần so với 17-estradiol (một loại oestrogen có tự nhiên) Hoạt tính oestrogen mạnh lên theo chiều tăng chuỗi alkyl, cụ thể ethylparaben, propylparaben butylparaben có cường độ thấp khoảng 150000 lần, 30000 lần, 10000 so với 17-estradiol Nghiên cứu rằng, cường độ hoạt tính oestrogen parabens cá thể chuột thấp đến lần so với cường độ thử nghiệm ống nghiệm Nguyên nhân giải thích parabens nhanh chóng đào thải ngồi thơng qua hệ tiết thể
Một nghiên cứu khác tác giả Thuy T.B Vo cộng sự[25] tiến hành cá thể chuột giai đoạn từ 21-40 ngày tuổi cho kết tương tự Hoạt
động estrgen mạnh lên theo thứ tự sau:
ethylparaben<propylparaben<isopropylparaben<butylparaben<isobutylparaben 1.2 Tình hình sử dụng parabens giới Việt Nam
Năm 1920, parabens lần sử dụng làm chất bảo quản dược phẩm, sử dụng rộng rãi thời gian ngắn sau Hiện chúng chất bảo quản sử dụng phổ biến khơng dược phẩm, mà cịn sản phẩm mỹ phẩm thực phẩm chức
Tác giả Dorota B cộng sự [11], báo cáo ảnh hưởng parabens môi trường sức khỏe người tổng hợp kết nghiên cứu thực trạng sử dụng parabens Theo đó, nghiên cứu tác giảPouillot (năm 2006) cho biết parabens có mặttrong khoảng 80% sản phẩm chăm sóc cá nhân.Tác giả Rastogi(năm 1995) cho biết parabens tìm thấy 77% sản phẩm mỹ phẩm rửa trôi 99% mỹ phẩm lưu lại da.Một nghiên cứu khác tác giả Masten (năm 2005) cho kết butylparaben có mặt 13% sản phẩm khảo sát, methylparaben propylparaben có mặt 48% sản phẩm
Trong nghiên cứu tác giảEriksson E cộng sự[12], khảo sát tổng số 751 sản phẩm thu thập Đan Mạch cho thấy có 36% sản phẩm có chứa parabens Khảo sát Na Uy cho thấy có 32% tổng số 117 sản phẩm chăm sóc da dành cho trẻ em có mặt parabens
(17)Luận văn Thạc sĩ Chuyên ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân Đại học KHTN Hà Nội
thị trường Thừa Thiên Huế có 24 mẫu chứa chất methylparaben propylparaben, mẫu chứa methylparaben mẫu chứa propylparaben
Trước chứng tác hại parabens sức khỏe người, Cục Quản lý Dược ban hành công văn số 6577/QLD-MP quy định việc sử dụng số chất mỹ phẩm Theo đó, có parabens bị cấm sử dụng Việt Nam từ ngày 30/7/2015là: isopropylparaben, isobutyl araben, phenylparaben, benzylparaben pentylparaben Cũng theo công văn này, propylparaben muối phép dùng riêng lẻ với nồng độ tối đa 0,4% (tính theo acid), dạng hỗn hợp parabens khác với tổng nồng độ tối đa 0,8% (tính theo acid).Thời hạn công bố sản phẩm sản xuất nước, nhập đến hết ngày 31/12/2015.Các sản phẩm sản xuất nước, nhập phép lưu hành thị trường đến hết ngày 30/6/2016
1.3 Các phương pháp phân tích parabens
Trong tình hình sử dụng parabens tác hại parabens sức khỏe, việc kiểm soát hàm lượng parabens vô cần thiết Để phân tích parabens có phương pháp phổ biến như: phương pháp điện di mao quản (CE), phương pháp sắc ký lỏng, phương pháp sắc ký khí, v.v
1.3.1 Phương pháp điện di mao quản (CE)
Đây phương pháp tách chất phân tích ion chất khơng ion có mối liên hệ chặt chẽ với ion ống mao quản hẹp chứa đầy dung dịch đệm, đặt điện trường Do độ linh động ion khác nhau, chúng di chuyển với tốc độ khác tách khỏi
Phương pháp điện di mao quản tác giả Usama A.và cộng sự[26] sử dụng để phân tích bốn parabens methylparaben, ethylparaben, propylparaben butylparaben có sữa mẹ mẫu thực phẩm Mẫu sau chiết tách phương pháp chiết vi lượng lỏng-lỏng phân tán (DLLME) bơm vào máy điện di mao quản với detector UV-VIS bước sóng 298 nm Nhóm tác giả sử dụng cột mao quản silica nóng chảy với đường kính 75µm, tổng chiều dài 48,5 cm, chiều dài hiệu dụng tới detector 40 cm Bơm mẫu anot,và phát chất phân tíchtại catot cuối mao quản Nhiệt độ mao quản trì 120C, điện 25kV dung dịch điện di đệm borat 25 mM pH 9,2 chứa 5,0% acetonitril (ACN), v.v Các chất phân tích bơm 5s áp suất 50 mbar Giới hạn phát (LOD) phương pháp dao động từ 0,9 μg/mL (đối với ethylparaben) cao 2,1 μg/mL (đối với methylparaben)
(18)Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân 10 Đại học KHTN Hà Nội
phương pháp điện di mao quản (CE) phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) q trình phân tích parabens
Cả hainhóm tác giả sử dụng cột silica có kích thước hạt nhồi 75 µm Chiều dài cột 60 cm 70 cm; điện tương ứng 25 kV 20 kV; nhiệt độ mao quản tương ứng 300C 400C ShuPing Wangsử dụng dung dich đệm natri tetraborate 30 mM 5% ACN Labat L.dùng dung dịch đệm hỗn hợp natri tetraborate 15 mM (pH 9,2) methanol (MeOH) [15], [22]
Theo kết nghiên cứu củaLabat L.[15], khoảng tuyến tính parabens phân tíchbằng phương pháp HPLC từ 1-40 mg/mL, với phương pháp CE 5-200 mg/mL Giới hạn phát phân tích CE (0,21 mg/mL) cao HPLC (0,05 mg/mL) Nghiên cứu Labat L. cho thấy phương pháp HPLC CE phù hợp để phân tích parabens mỹ phẩm
Phương pháp điện di mao quản có ưu điểm tiết kiệm, lượng hóa chất sử dụng ít, phân tích nhiều nhóm chất khác Tuy nhiên, độ nhạy đồng thời tính ổn định khơng cao, thiết bị khơng phổ biến cho phịng thí nghiệm 1.3.2 Phương pháp sắc ký lỏng
1.3.2.1 Sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) ghép nối detector UV-VIS
Trong năm gần đây, phương pháp HPLC đóng vai trị vơ quan trọng việc tách phân tích chất lĩnh vực khác nhau, đặc biệt việc tách phân tích lượng vết chất Detector ghép nối máy HPLC cho phép phát xuất chất phân tích sau q trình rửa giải Để phát parabens, hai tác giả Kreuz D.M Saad B sử dụng detector UV-VIS[14],[21]
Tác giả Kreuz D.M cộng sự[14]ứng dụng phương pháp HPLC để phân tích kali sorbat, methylparaben propylparaben dung dịch huyền phù.Nhóm tác giảsử dụng cột Eclipse XDB-C8 (3,0 ×150 mm, µm)
Pha động gồm kênh A có thành phần 20% ACN, 80% dung dich muối citrate 0,02M, đệm pH 5,0 kênh B ACN Chương trình gradient tuyến tính thiết lập sau: phút, 100% kênh A; 35phút,70% kênh A 30% kênh B; 36phút, 100% kênh A; 46phút, 100% kênh A Tốc độ dòng 0,5 mL/phút Detector sử dụng UV bước sóng 260 nm Thể tích bơm 50 µL Thời gian chạy 35 phút để phân tích 11 phút để tái cân bằng.Trong nghiên cứu này, methylparaben có giới hạn định tính (LOD) 0,8 ng/mL, giới hạn định lượng (LOQ) 3,0 ng/mL, khoảng tuyến tính từ 0,3348-0,9917µg/mL Propylparaben có giới hạn định tính 1,0 ng/mL, giới hạn định lượnglà ng/mL, khoảng tuyến tính từ 0,0339-0,1016 µg/mL
(19)UV-Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân 11 Đại học KHTN Hà Nội
VIS cài đặt 254 nm thể tích bơmmẫu 20 µL Pha động tan nướclà dung dịch ammonium acetate 0,05M,pH 4,4
Kết nghiên cứu cho thấy, sử dụng pha động methanol:dung dịch amoni acetate với tỉ lệ 35:65 cho kết tách tốt, nhiên thời gian rửa giải propylparaben lâu (21 phút) Để khắc phục điều này, sau chất acid benzoic, acid sorbic, methylparaben khỏi cột (9 phút), thành phần pha động thay đổi methanol-dung dịch amoni acetate với tỉ lệ 50:50 Trong nghiên cứu này, giới hạn phát (LOD) methylparaben 0,3 mg/L, propylparaben 0,1 mg/L Khoảng tuyến tính methylparaben từ 3,0-100 mg/L, propylparaben từ 1,0-75 mg/L
Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao với detector UV-VIS có nhược điểm có chồng chéo pic phân tích parabens mẫu phức tạp Những hạn chế khắc phục kết hợp sắc ký lỏng với đầu dò khối phổ
1.3.2.2 Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS)
Đây phương pháp nhanh, nhạy phát triển nhiều Sau qua cột tách, chất phân tích hóa hơi, hợp chất hữu trung hồ bị ion hố thành ion phân tử hay ion mảnh phân tử mang điện dương âm, gốc tự Sau đó, ion đựơc đưa sang phận tách theo khối lượng Từ tín hiệu thu được, dựa vào khối lượng ion phân tử, dựa vào đồng vị, dựa vào mảnh ion phân tử, dựa vào chế tách dựa vào ngân hàng liệu ion mảnh ion, người ta định tính định lượng chất phân tích cách xác
Tác giả Chao Han cộng sự[8] tiến hành định lượng parabens methylparaben, ethylparaben, propylparaben butylparaben (đồng thời với benzophenone) mẫu hải sản sắc ký lỏng khối phổ Nhóm tác giảsử dụng cột Waters XBridge TM C18 (150 mm × 2,1 mm, µm), nhiệt độ 30oC Thể tích bơm mẫu 10 µm Pha động sử dụng ACN (kênh A) dung dịch acetate 0,1% (kênh B) Rửa giải chế độ gradient với tốc độ dòng đặt cố định 30mL/phút Thành phần pha động thay đổi theo tỷ lệ A:B sau: phút, 30:70; từ đến 10 phút, 80:20; từ 10,1 đến 20 phút, 30:70
(20)Luận văn Thạc sĩ Chuyên ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân 12 Đại học KHTN Hà Nội
Hình Mơ hình phân mảnh parabens phân tích LC-MS/MS Tác giảYe X cộng sự[27] sử dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao kết hợp đầu dị khối phổ để phân tích parabens (bao gồm: methylparaben, ethylparaben, propylparaben, butylparaben, benzylparaben), triclosan vài phenol sữa mẹ Nhóm tác giả sử dụng cột SPE l RP-18 ADS (25mmì4mm, ng kớnh 25 àm, kớch thc lỗ trống 60Å) Cột HPLC cột XDB C8 (150 mm ì 4,6mm, àm)
Quy trỡnh tách parabens, triclosan phenol khác từ sữa thực qua ba giai đoạn Giai đoạn (từ 0-3 phút), với van 10 cổng vị trí 1-2, bơm 500 µL dung dịch mẫu vào cột SPE bơm SPE với 20% MeOH:80% H2O
và tốc độ dòng 1mL/phút Giai đoạn thứ hai (từ 3-5phút), van 10 cổng chuyển sang vị trí thay (từ 1-10), chất phân tích cịn lại cột SPE tách rửa lại bơm HPLC, với 50% MeOH:50% H2O, tốc độ dòng 0,5 mL/phút Sau chất phân tích khỏi cột, dung dịch tẩy rửa bơm vào cột với tốc độ dòng 0,25 mL/phút bơm SPE Trong giai đoạn thứ ba (từ 5-15 phút), van 10 cổng chuyển trở lại vị trí ban đầu, chất phân tích chuyển đến cột HPLC bơm HPLC với tốc độ dòng 0,75 mL/phút Sử dụng chương trình gradient sau: từ đến 13phút, pha động từ 70% MeOH đến 90% MeOH; từ 13 đến 14 phút, pha động 100% MeOH; từ 14 đến 15phút, pha động 50% MeOH Rửa giải cột SPE với100% MeOH từ đến 10 phút cân cột với 20% MeOH: 80% H2O từ 10 đến 15 phút tốc độ dòng 1mL/phút Giới hạn định lượng
phương pháp parabens phân tích 0,1 ng/mL
Tác giả Cristina Moreta cộng [10] sử dụng cột C18 (100 mm× 2,1 mm, μm)và tiền cột(dài 20 mm) Hệ thống HPLC ghép nối với máy khối phổ ba tứ cực để phân tích parabens (bao gồm: methylparaben, ethylparaben, propylparaben, butylparaben, benzylparaben) dược phẩm
(21)Luận văn Thạc sĩ Chuyên ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xn 13 Đại học KHTN Hà Nội
hạn phát (LOD) parabens nằm khoảng 0,019-0,3 ng/mL, giới hạn định lượng (LOQ) khoảng 0,06-0,8 ng/mL
Sắc ký lỏng siêu hiệu kết hợp đầu dò khối phổ (UPLC-MS/MS) Tác giảNieto A cộng [16] phân tích chất kháng sinh parabens methylparaben, ethylparaben,propylparaben butylparaben có bùn thải phương pháp UPLC kết hợp với đầu dò khối khổ hệ thống HP1200 (Agilent Technologies, Waldbronn, Đức) Hệ thống trang bị buồng ion hóa tia điện (ESI), máy bơm, vòi phun tự động Sử dụng cột sắc ký Zorbax (5,0 cm ì 4,6 mm, 1,8 àm) Th tích bơm mẫu 50 µL, tốc độ dịng 0,6 mL/phút, nhiệt độ cột 500C
Thành phần pha động gồm kênh A acid acetic (pH 3,0) kênh B MeOH Chế độ rửa giải gradient sau: ban đầu 60% kênh B, đến phút thứ tăng lên 100% kênh B, giữ phút cuối trở 60% kênh B phút Tất chất phân tích rửa giải thời gian phút Điều kiện tối ưu thiết lập cho buồng ion hóa ESI điện áp 4000 V, nhiệt độ nguồn 3500C, tốc độ dịng khí nito (N2) 12 L/phút
Phương pháp nghiên cứu có khoảng tuyến tính rộng: từ 0,25-250 µg/L methylparaben, butylparaben, từ 0,1-250 µg/L ethylparaben, propylparaben Giới hạn phát (LOD) thấp 1,75 µg/kg ethyl paraben propyl paraben, cao µg/kg methylparaben Giới hạn định lượng (LOQ) ethylparaben propylparaben 2,5 µg/kg, methylparaben butylparaben 6,3 µg/kg
1.3.3 Phương pháp sắc ký khí khối phổ (GC-MS)
Phương pháp sắc ký khối phổ GC-MS phương pháp có độ nhạy độ tin cậy cao, từ lâu sử dụng để định lượng parabens
Tác giả Alcudia Leon M.C cộng sự[5] sử dụng hệ thống sắc ký khí khối phổ HP 6890-5973N (của hãng Agilent) để phân tích parabens bao gồm: methylparaben, ethylparaben, propylparaben, butylparaben có nước Hệ thống điều khiển thu thập liệu thực phần mềm HP1701CA MS ChemStation, với cột mao quản silica phủ 5% diphenylsiloxane 95% dimethylsiloxane (30m × 0,25 mm, độ dày màng phim 0,25 µm) Nhiệt độ MS source 230o
C, nhiệt độ đầu dò khối phổ 150oC Chương trình nhiệt độ cột sau: nhiệt độ trì 60oC phút, tăng nhiệt với tốc độ 25oC/phút đến
150oC tăng 3oC/phút đến 170oC, tăng 25oC/phút đến 280oC trì 280oC phút Khí mang Helium bơm vào cột với tốc độ 1mL/phút Detector khối phổ phát ion có m/z 121 138 Phương pháp phân tích có giới hạn phát parabens khoảng 23,2-86,1 ng/L
(22)Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân 14 Đại học KHTN Hà Nội
phân tích parabens, phương pháp có ưu điểm là: tốc độ phân tích nhanh, tiêu tốn dung mơi, độ nhạy độ phân giải cao
1.3.4 Đại cương phương pháp sắc ký lỏng
1.3.4.1 Nguyên tắc chung phương pháp sắc ký lỏng
Sắc ký lỏng trình tách xảy cột tách với pha tĩnh chất rắn chất lỏng pha động chất lỏng (sắc ký lỏng - rắn, lỏng - lỏng) Mẫu phân tích chuyển lên cột tách dạng dung dịch Khi tiến hành chạy sắc ký, chất phân tích phân bố liên tục pha động pha tĩnh Trong hỗn hợp chất phân tích, cấu trúc phân tử tính chất lí hố chất khác nhau, nên khả tương tác chúng với pha tĩnh pha động khác nhau, chúng di chuyển với tốc độ khác tách khỏi
* Pha tĩnh sắc ký lỏng
Trong sắc ký lỏng, pha tĩnh chất nhồi cột làm nhiệm vụ tách hỗn hợp chất phân tích Đó chất rắn, xốp kích thước hạt nhỏ, từ 3-7µm Tuỳ theo chất pha tĩnh, phương pháp sắc ký lỏng pha liên kết thường chia làm loại: sắc ký pha thường (NP-HPLC) sắc ký pha đảo (RP-HPLC)
- Sắc ký pha thường: pha tĩnh có bề mặt chất phân cực (đó làcác silica trần silica gắn nhóm ankyl có cacbon mang nhóm chức phân cực: -NH2, -CN v.v.)
- Sắc ký pha đảo: pha tĩnh thường silica ankyl hố, khơng phân cực, loại thông dụng –C18H37
Ưu điểm sắc ký pha đảo tách phân tích chất có độ phân cực đa dạng: từ phân cực, phân cực tới khơng phân cực Hơn nữa, nhiều trường hợp thành phần pha động lại nước nên kinh tế
* Pha động sắc ký lỏng
Trong sắc ký lỏng pha động thành phần cho qua cột liên tục để phân tách hợp chất hỗn hợp, có yêu cầu sau:
- Pha động phải trơ với pha tĩnh
- Bền vững, ổn định không bị phân huỷ q trình chạy sắc ký - Hồ tan mẫu
- Phải có độ tinh khiết cao, có độ nhớt thấp phù hợp với detector
Có thể chia pha động làm hai loại: pha động có độ phân cực cao pha động có độ phân cực thấp Để phân tích nhóm chất, người ta thường phối hợp hay dung môi để có dung mơi có độ phân cực từ thấp đến cao phù hợp với phép phân tích Sự thay đổi thành phần pha động diễn theo thời gian, trường hợp người ta gọi gradient pha động
(23)Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân 15 Đại học KHTN Hà Nội
Detectorlà phận quan trọng định độ nhạy phương pháp Tuỳ thuộc chất lí hố chất phân tích mà lựa chọn detector cho phù hợp
- Detector quang phổ hấp thụ phân tử UV-VIS: áp dụng cho chất có khả hấp thụ ánh sáng vùng tử ngoại (UV) vùng khả kiến (VIS)
- Detector huỳnh quang: sử dụng để phát chất có khả phát huỳnh quang
- Detector độ dẫn: phù hợp với chất có hoạt tính điện hố: Các cation, anion, hợp chất có tính dẫn điện…
- Detector khối phổ: thường dùng để nhận biết xác định hợp chất chúng khó tách phương pháp sắc ký khí khối phổ, chẳng hạn chất có khối lượng phân tử lớn, hợp chất không bền nhiệt hợp chất phân cực
* Cấu tạo hệ thống sắc ký lỏng hiệu cao kết hợp đầu dò khối phổ
▪ Hệ thống bơm (Pumpsystem)
▪ Hệ thống tiêm mẫu (Injectionsystem)
▪ Buồng cột (Column ovent - điều chỉnh nhiệt độcột)
▪ Cột sắc ký (pha tĩnh – stationaryphase)
▪ Pha động (mobile phase – (hỗn hợp) dungmơi)
▪ Đầu dị khối phổ(Detector)
▪ Hệ thống xử lý dữliệu
Hình 10 Sơ đồ cấu tạo hệ thống UPLC-MS/MS 1.3.4.2 Một số đại lượng đặc trưng sắc ký lỏng [2]
Thời gian lưu (tR)
(24)Luận văn Thạc sĩ Chuyên ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xn 16 Đại học KHTN Hà Nội
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt
[1] Trần Công Dũng, Đặng Văn Khánh (2014), Nghiên cứu xây dựng quy trình định tính định lượng đồng thời số chất bảo quản nhóm 4-hydroxybenzoat (paraben) mỹ phẩm, Đề tài nghiên cứu khoa học Trung tâm Kiểm nghiệm Thuốc, Mỹ phẩm, Thực phẩm Thừa Thien Huế [2].Nguyễn Văn Ri(2009), Giáo trình phương pháp tách, khoa Hóa học trường
Đại học Khoa học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội
[3] Viện Kiểm nghiệm An toàn Vệ sinh thực phẩm quốc gia (2010), Thẩm định phương pháp phân tích hóa học vi sinh, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội
Tiếng Anh
[4] Albero B., Sanchez Brunete C., Miguel E., Perez R.A., Tadeo J.L “Determination of selected organic contaminants in soil by pressurized liquidextraction and gas chromatography tandem mass spectrometry with in situderivatization”, Journal of Chromatography A, 1248, pp 9-17
[5] Alcudia Leon M.C.,Lucena R., Cardenas S.,Valcarcel S (2013), “Determination of parabens in waters by magnetically confinedhydrophobic nanoparticle microextraction coupled togas chromatography/mass spectrometry”, Microchemical Journal, 110, pp 643-648
[6].Byford J.E.,Shaw L.E., Drew M.G.B., Pope G.S., Sauer, M.J.,Darbre P.D (2002), “Oestrogenic activity of parabens in MCF7 human breast cancer cells”, Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology, 80, pp 49-60 [7] Canosa P., Perez Palacios D., Garrido Lopez A., Tena M.T, Rodrıguez I., Rubi
E., Cela R (2007), “Pressurized liquid extraction with in-cell clean-up followed by gaschromatography–tandem mass spectrometry for the selectivedetermination of parabens and triclosan in indoor dust”, Journal of Chromatography A, 1161, pp 105-112
[8] Chao H., Biqi X., Xiangzhun C., Jincan S., Qian M., Yan S (2016), “Analytical MethodsDetermination of four paraben-type preservatives and three benzophenone type ultraviolet light filters in seafoods byLC-QqLIT-MS/MS”, Food Chemistry, 194, pp 1199-1207
[9] Christen M Mowad (2000), “Allergic Contact Dermatitis Caused byParabens: Case Reports and A Review”, American Journal of Contact Dermatitis11 (No.1), pp 53-56
(25)Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân 17 Đại học KHTN Hà Nội
[11] Dorota B., Jolanta G., Wojciech W (2014), “Review Parabens From environmental studies to human health”, Environment International, 67, pp 27-42
[12] Eriksson E., Andersen H.R , Ledin A (2008), “Substance flow analysis of parabens in Denmark complemented witha survey of presence and frequency in various commodities”, Journal of Hazardous Materials,156, pp 240-259 [13] James E.N., John T.F., Philip F (1977), “Paraben Allergy”, JAMA, 237, 15,
pp 1594-1595
[14] Kreuz D.M., Howard A.L., Dominic Ip (1999), “Determination of indinavir, potassium sorbate,methylparaben, and propylparaben in aqueous pediatricsuspensions”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 19, pp 725-735
[15] Labat L.,Kummer E., Dallet P., Dubost J.P (2000), “Comparison of high-performance liquid chromatographyand capillary zone electrophoresis for the determination ofparabens in a cosmetic product”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 23, pp 763-769
[16] Nieto A., Borrull F., Marce R.M., Pocurull E (2009), “Determination of personal care products in sewage sludge by pressurized liquidextraction and ultra high performance liquid chromatography–tandem massspectrometry”, Journal of Chromatography A, 1216, pp 5619–5625
[17] Nunez L., Tadeo J.L., Garcia Valcarcel A.I., Turiel E (2008), “Short communicationDetermination of parabens in environmental solid samples byultrasonic-assisted extraction and liquid chromatography withtriple quadrupole mass spectrometry”, Journal of Chromatography A, 1412, pp 178-182
[18] Nunez L., Turiel E., Martin Esteban A., Tadeo J.L (2010), “Molecularly imprinted polymer for the extraction of parabens fromenvironmental solid samples prior to their determination by highperformance liquid chromatography–ultraviolet detection”, Talanta, 80, pp 1782-1788
[19] Osamu H., Satoshi K., Satoko A., Tomohisa T., Yuji N., Toru T., Norimasa Y., Toshikazu Y (2006), “Methylparaben potentiates UV-induced damageof skin keratinocytes”, Toxicology, 227, pp 62-72
[20] Routledge E.J., Parker J., Odum J., Ashby J., and Sumpter J.P (1988), Toxicology and applied pharmacology, 153, pp 12-19
(26)Luận văn Thạc sĩ Chun ngành: Hóa Phân tích
Lê Thị Xuân 18 Đại học KHTN Hà Nội
[22] Shu Ping W., Ching Li C (1998), “Determination of parabens in cosmetic products by supercritical fuid extraction and capillary zone electrophoresis”, Analytica Chimica Acta, 377, pp 85-93
[23] Sonia M.G.,Taylor S.L., Greenberg N.A.,Burdock G.A (2002), “ReviewEvaluation of the health aspects of methyl paraben:a review of the published literature”, Food and Chemical Toxicology, 40, pp 1335-1373 [24] Steinberg D., Michael F., Maher F., Ester S., Hirschfeld Z (2001), “Short
communicationAntibacterial effect of parabens against lanktonic and biofilm Streptococcus sobrinus”,International Journal of Antimicrobial Agents, 18, pp.575–578
[25] Thuy T.B Vo., Yeong M.Y., Kyung C.C., Eui B.J (2010), “Potential estrogenic effect(s) of parabens at the prepubertal stage of a postnatalfemale rat model”, Reproductive Toxicology, 29, pp 306-316
[26] Usama A., Nusret E., Nilgun G.G (2015), “Determination of parabens in human milk and other food samples by capillary2 electrophoresis after dispersive liquid-liquid microextraction with back-extraction”, Food Chemistry, 181, pp 1-8
[27] Ye X., Bishop A.M., Needham L.L., Calafat A.M (2008), “Automated on-line column-switching HPLC-MS/MS methodwith peak focusing for measuring parabens, triclosan,and other environmental phenols in human milk”, Analytica Chimica Acta, 622, pp 150-156
(27)Luận văn Thạc sĩ Chuyên ngành: Hóa Phân tích
hóa chất