Tôi cũng chân thành cảm ơn phòng sau đại học, Khoa Sinh học và Bộ môn Sinh lý thực vật và Hoá sinh, các thầy cô trong Khoa Sinh học, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên đã giúp đỡ [r]
(1)ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
-
Trần Đình Ngọc
VAI TRỊ CỦA BBAP
TRONG QUÁ TRÌNH PHÁT TRIỂN
UNG THƯ DA DẠNG MELANOMA
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
(2)ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
-
Trần Đình Ngọc
VAI TRỊ CỦA BBAP
TRONG QUÁ TRÌNH PHÁT TRIỂN
UNG THƯ DA DẠNG MELANOMA
Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm
Mã số: 60420114
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
Người hướng dẫn khoa học
TS NGUYỄN ĐÌNH THẮNG
(3)LỜI CẢM ƠN
Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Đình Thắng ngƣời thầy
tận tâm hƣớng dẫn, dìu dắt, dành nhiều thời gian quý báu, tạo điều kiện
tốt tâm huyết giúp đỡ cho tơi hồn thành luận văn
Tôi bày tỏ lòng cảm ơn chân thành đến cán giáo viên
bạn sinh viên thực tập phịng thí nghiệm trọng điểm Cơng nghệ Enzymee
protein giúp đỡ chia sẻ kinh nghiệm thực tế q trình thực thí
nghiệm phân tích
Tơi chân thành cảm ơn phịng sau đại học, Khoa Sinh học Bộ mơn
Sinh lý thực vật Hoá sinh, thầy cô Khoa Sinh học, Trƣờng Đại học
Khoa học Tự nhiên giúp đỡ tận tình thời gian tơi học tập, thực tập
hồn thành luận văn
Tôi xin gửi lời biết ơn sâu sắc tới gia đình thân u tơi đồng hành,
động viên mặt tinh thần nhƣ mặt vật chất để tơi n tâm học
tập, cơng tác hồn thành luận văn
Nghiên cứu đƣợc tài trợ Quỹ phát triển Khoa học Công nghệ quốc
gia (NAFOSTED) đề tài mã số 106-NN.02-2013.07
Hà nội, ngày 25 tháng 12 năm 2015
(4)MỤC LỤC
DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT
DANH MỤC HÌNH ẢNH DANH MỤC BẢNG MỞ ĐẦU
CHƢƠNG 1.TỔNG QUAN Error! Bookmark not defined.
1.1 Cấu trúc chức Da Error! Bookmark not defined.
1.2 Ung thƣ Da Error! Bookmark not defined.
1.2.1 Định nghĩa Error! Bookmark not defined.
1.2.2 Phân loại Error! Bookmark not defined.
1.3 Melanoma Error! Bookmark not defined.
1.3.1 Lịch sử phát Error! Bookmark not defined.
1.3.2 Dịch tễ học Error! Bookmark not defined.
1.3.3 Cơ chế phát sinh Error! Bookmark not defined.
1.3.4 Diễn tiến sinh học melanoma Error! Bookmark not defined.
1.3.5 Sinh học phân tử melanoma Error! Bookmark not defined.
1.4 Gen Deltex Error! Bookmark not defined.
CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUError! Bookmark not defined.
2.1 Đối tƣợng nghiên cứu Error! Bookmark not defined.
2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu Error! Bookmark not defined.
2.3 Các bƣớc tiến hành Error! Bookmark not defined.
2.3.1 Lựa chọn ni cấy dịng tế bào Error! Bookmark not defined.
2.3.2 Tạo dòng tế bào nhân dòng Error! Bookmark not defined.
2.3.3 Tạo dòng tế bào biểu Error! Bookmark not defined.
2.3.4 Tạo dịng tế bào có biểu BBAP cao so với dòng tế bào nguyên thủy Error! Bookmark not defined.
(5)2.3.6 Phƣơng pháp phân tích real-time PCR ……….39 2.3.7 Phƣơng pháp kiểm tra di xâm lấn (invasion) in-vitro……….40 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Error! Bookmark not defined.
3.1 Khảo sát mức độ biểu BBAP mô ung thƣ daError! Bookmark not defined.
3.2 Khảo sát mức độ biểu BBAP tế bào da thƣờng tế bào ung thƣ ……… 49 3.3 Tạo dòng tế bào nhân dòng mang gen BBAP Error! Bookmark not defined.
3.4 Tạo dòng tế bào biểu mang gen BBAP Error! Bookmark not defined.
3.5 Tạo dong tế bào có biểu BBAP thấp (G361) mang plasmid tái tổ hợp chứa gen BBAP quan sát ảnh hƣởng BBAP 54
3.6 Khảo sát vai trò protein BBAP phát triển melanomaError! Bookmark not defined.
3.6.1 Khả xâm lấn (di căn) trực tiếp Error! Bookmark not defined.
3.6.2 BBAP tham gia tham gia điều hòa xâm lấn (di căn) tế bào G361 thông qua đƣờng FAK/AKT Error! Bookmark not defined.
KẾT LUẬN Error! Bookmark not defined.
(6)DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT
Ký hiệu
chữ viết tắt Nghĩa đầy đủ
3q21 băng 2.1 cánh dài nhiễm sắc thể số Aa (aa) Acid amin
ACS American Cancer Society – Hiệp hội Ung thƣ Hoa Kỳ
AIDS Aquired Immuno Deficiency Syndrome – Hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải
AKT Một serine/threonine kinase tham gia tƣơng tác màng tế bào vị trí photpho hóa
Amp Ampicillin
BAL B Aggressive Lymphoma
BBAP B – lymphoma and BAL Associated Protein
BCC Basal Cell Carcinoma – ung thƣ biểu mô tế bào đáy Bp Base pair – cặp bazơ
cDNA Complementary – DeoxyriboNucleic Acid
DLBCL Diffuse Large B-Cell Lymphoma – U lympho tế bào B lớn lan tỏa
DmDTX Drosophila melagogaster DelTeX DMEM Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium DNA DeoxyriboNucleic Acid
DOPE L-dioleoly phosphatidyl-ethanolamine
DTX DelTeX
FAK Focal Adhesion Kinase
FBS Fetal Bovine Serum
(7)LB Luria Broth
NCI National Cancer Institute – Viện Ung thử Quốc gia Hoa Kỳ NHEM Normal Human Epidermal Melanocytes
NOTCH Là lộ trình tín hiệu có tính bảo tồn cao, có vai trị quan trọng trình phát triển liên quan đến việc định số phận tế bào tế bào gốc
PCR Polymerase Chain Reaction – Phản ứng chuỗi trùng hợp PI3K Phosphatidyl Inositol Kinase
Q-PCR Quantitative Polymerase Chain Reaction – Phản ứng định lƣợng chuỗi trùng hợp
Realtime PCR Realtime Polymerase Chain Reaction
RNA Ribonucleic Acid
SCC Squamous Cell Carcinoma – Ung thƣ biểu mô tế bào vẩy SDS – PAGE Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide
SKMEL Skin melanoma
UV UltraViolet – tia cực tím hay tia tử ngoại
UVA UltraViolet A – tia tử ngoại có bƣớc sóng dài 315 – 380 nanomet UVB UltraViolet B – tia tử ngoại có bƣớc sóng trung bình 280 – 315
nanomet
UVC UltraViolet C – tia tử ngoại có bƣớc sóng ngắn, nhỏ 280 nanomet
WB Western Blot
(8)DANH MỤC HÌNH ẢNH
Hình 1.1 Sơ đồ cấu trúc Da
Hình 1.2 Sơ đồ cấu tạo lớp biểu bì
Hình 1.3 Vị trí cấu trúc hệ thống sợi chống đỡ
Hình 1.4 Cấu trúc lớp hạ bì
Hình 1.5 Biểu đồ phân bố tuổi giới 13
Hình 1.6 Quang phổ điện từ xạ nhìn thấy cà tia cực tím
cùng hiệu ứng sinh học da 14
Hình 1.7 Sơ đồ diễn tiến sinh học melanoma 15 Hình 1.8 Notch hỗ trợ chuyển đổi ác tính nhiều cách 19
Hình 1.9 Con đƣờng chuyển hóa AKT/PI3K 20
Hình 1.10 Cấu trúc vùng chuỗi C-terminal BBAP
protein DTX ngƣời Drosophilia 21
Hình 1.11 Sơ đồ biểu diễn gene mã hóa BBAP BAL1 22
Hình 2.1 Sơ đồ vector nhân dịng pGEMT-easy 28
Hình 2.2 Cơ chế tác dụng β-galacctosidase 30
Hình 2.3 Tạo dịng theo phƣơng thức khử hoạt tính chèn đoạn 31 Hình 2.4 Sơ đồ vector biểu pCMV-Flag tagged 33
Hình 2.5 Cấu trúc màng kép Liposome 34
Hình 2.6 Cấu trúc tổng quát cationlipid tổng hợp 34
Hình 2.7 Cấu trúc DOPE 35
Hình 2.8 Phức hợp Liposome-DNA 35
Hình 2.9 Sơ đồ hoạt động vector Liposome 36
Hình 2.10 Sơ đồ mơ tả phƣơng pháp Western Blot 38
Hình 2.11 Sơ đồ giếng Boyden 40
Hình 2.12 Cơng thức Hematoxylin Hematin 41 Hình 2.13 Sơ đồ phản ứng gắn màu hematoxylin (hematin) vào DNA
của tế bào
42
Hình 2.14 Cơng thức Eosin 42
Hình 2.15 Sơ đồ bƣớc thực nhuộm tế bào 43 Hình 3.1a
và 3.1b
Tỷ lệ so sánh tƣơng đối mức độ biểu BBAP
các dạng khối u chuột 44
Hình 3.2a BBAP biểu mức độ phiên mã tế bào da thƣờng
(NHEM) dịng tế bào ung thƣ 46
Hình 3.2b Mức độ biểu protein BBAP tế bào da thƣờng
(9)Hình 3.2c Kiểm tra kích thƣớc đoạn gen BBAP điện di 49 Hình 3.3a Hình thái màu sắc khuẩn lạc mơi trƣờng chọn lọc 50 Hình 3.3b Kiểm tra có mặt vector tái tổ hợp khuẩn lạc
trắng 50
Hình 3.4a Kiểm tra có mặt gen BBAP có khuẩn lạc
(colony) trắng 52
Hình 3.4b Kiểm tra có mặt gen BBAP vector biểu 53 Hình 3.5 Kiểm tra có mặt BBAP tế bào G362 WB 55 Hình 3.6.1 Ảnh hƣởng BBAP lên khả xâm lấn tế bào G361 56 Hình 3.6.2a Mức độ biểu protein BBAP (81KDa) 57 Hình 3.6.2b Mức độ biểu protein FAK bị photphat hóa vị trí
Tyrosine 397 (125KDa) 58
Hình 3.6.2c Mức độ biểu protein FAK tổng số (125KDa) 58 Hình 3.6.2d Mức độ biểu protein AKT bị photphat hóa vị trí
Threonine 308 (60KDa) 59
(10)DANH MỤC BẢNG
Bảng Trình tự cặp mồi 27
(11)TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tài liệu Tiếng Việt
1 Trần Đăng Quyết, (2000) Sinh lý Da, Đại học Y Hà nội
2 Nguyễn Duy Phƣơng, Najaren Tuleja, Lê Huy Hàm, Phạm Xuân Hội, (2012), Biểu tinh protein tái tổ hợp NLI-IF từ tế bào Escherichia coli, số 34, 3, trang 347 – 353
3 Trần Quốc Dung, Nguyễn Hoàng Lộc, Trần Thị Lệ, (2006), Công nghệ chuyển gen (động vật, thực vật), Đại học Huế
4 Lê Trung Thọ, (2012), Bệnh học U, Đại học Y Hà nội
5 Vũ Thái Hà, Nguyễn Hữu Sáu, Lê Đức Minh, Trần Hậu Khang, Nguyễn Sỹ Hóa, Ngơ Văn Tồn, (2011), Nghiên cứu phân bố loại ung thư da bệnh viện Da liễu Trung Ương giai đoạn 2007 – 2010, Y học thực hành, tập 8, trang 33 – 36
6 Vũ Thanh Phƣơng, Nguyễn Đại Bình, Bùi Diệu, (2010), Kết sống thêm năm sau điều trị triệt ung thư hắc tố giai đoạn I – III bệnh viện K, Y học TP Hồ Chí Minh, tập 14, phụ số 4, trang 589 – 595
Tài liệu Tiếng Anh
7 About melanoma Skin Cancer - A quick Guide, (2014), Cancer Research UK American Cancer Society Cancer Facts & Figures 2015 Atlanta, Ga: American
Cancer Society; 2015
9 American Joint Committee on Cancer, "Melanoma of the skin", AJCC Cancer Staging Manual, 7th ed New York: Springer; 2010, p 325-344
10 Annegret Vogl, Ute Sartorius, Thomas Vogt, Alexander Roesch, Micheal Landthaler, Wihelm Stolz, and Bernd Becker, (2005), "Gene Expression Profile Changes between Melanoma Metastases and their Daughter Cell Lines: Implication for Vaccination Protocols", Journal of Investigative Dermatology, Vol 124, p 401 - 404
(12)of hormone-induced histone hyperacetylation and gene activation via acetylation of an acetylase", Cell, Vol 98, p 675–686
12 Christopher Haqq, Mehdi Nosrati, Daniel Sudilovski, Julia Crothers, Daniel Khodabakhsh, Brian L Pulliam, Scot Federman, James R.Miller III, Robert E.Allen, Mark I.Singer, Stanley P.L Leong, Britt-Marie Ljung, Richard W Sagebiel, and Mohammed Kashani-Sabet, (2004), "The gene expression signatures of melanoma progression", PNAS, Vol 102(17), p 6092 - 6097 13 Corine Bertolotto, (2013), "Melanoma: From Melanocyte to Genetic Alterations
and Clinical Options", Scientifica, Vol 2013, doi: 10.1155/2013/635203 14 Ewan A.Gibb, Katey S.S.Enfield, Ivy F.L.Tsui, Raj Chari, Stephan Lam, Carlos
E.A, and Wan L.Lam, (2010), "Deciphering Squamous Cell Carcinoma Using Multidimensional Genomic Approaches", Journal of Skin Cancer, volume 2011, doi: 10.1155/2011/541405
15 Gary S.Stein, Martin Montecino, Andre' J.van Wijnen, Janet L.Stein, and Jane B.Lian, (2000), "Nuclear Structure-Gene Expression Interrelationships: Implications for Aberrant Gene Expression in Cancer", Cancer Research, Vol 60, p 2067 - 2076
16 Hideya Ando, Yoko Niki, Massaki Ito, Kaoru Akiyama, Mary S Matsui, Daniel B Yarosh, and Masamitsu Ichihashi, (2012), "Melanosomes Are Transferred from Melanocytes to Keratinocytes through the Processes of Packaging, Release, Uptake, and Dispersion", Journal of Investigative Dermatology, Vol 132, p 1222 - 1229
(13)18 J T´ım´ar, T Barbai, B Gy˝orffy, and E R´as´o, (2013), "Understanding Melanoma Progression by Gene Expression Signatures",Cancer Genomics Molecular classification, Prognosis and Response Prediction, Chapter 2, p 47 - 78
19 Janetta Bensouilah, Philippa Buck, (2006), "Skin Structure and Function", Aromadermatology, Chapter 1, p.1 - 11
20 Jin Boo Jeong, Se Chul Hong, Jin Suk Koo, Hyung Jin Jeong, (2011), "Induction of Apoptosis and Acetylation of Histone H3 and H4 by Arctigenin in the Human Melanoma Cell Line SK-MEL-28", Scientific Research, Vol 2, p 128 - 132
21 K Frauenstein, U Sydlik, J Tigges, M Majora, C Wiek, H Hanenberg, J Able, C Esser, E Fritsche, J Krutmann, and T Haarmann-Stemmann, (2013), "Evidence for a novel anti-apoptotic pathway in human keratinocytes involving the aryl hydrocarbon receptor, E2F1, and checkpoint kinase 1", Cell Death and Diffirentation, Vol 20, p 1425 - 1434
22 Katie A Matatall, Olga A Agapova, Michael D Onken, Lori A Worley, Anne M Bowcock, and J William Harbour, (2013), "BAP1 deficiency cause loss of melanocytic cell identity in uveal melanoma", BMC Cancer, Vol 13, p 371 - 383
23 Kenji Matsuno, Mikiko Ito, Kazuya Hori, Fumiyasu Miyashita, Satoshi Suzuki, Noriyuki Kishi, Spyros Artavanis-Tsakonas, and Hideyuki Okano, (2002) "Involvement of a proline-rich motif and RING-H2 finger of Deltex in the regulation of Notch signaling", Development, Vol 129, p 1049 - 1059
(14)25 Lin H-P, Lin C-Y, Hsiao P-H, Wang H-D, Sheng Jiang S, et al., (2013), "Difference in Protein Expression Profile and Chemotherapy Drugs Response of Different Progression Stages of LNCaP Sublines and Other Human Prostate Cancer Cells", PLoS ONE, Vol (12), doi: 10.1371/journal.pone.0082625
26 Linli Zhou, Kun Yang, Thomas Andl, R, Randall Wickett, Yuhang Zhang, (2015), "Perspective of Targeting Cancer-Associated Fibroblasts in Melanoma", Journal of Cancer, Vol 6, p 717 - 726
27 Marcus Muă hlbauer, Nicole Langenbach, Wilhelm Stolz, Ruediger Hein, M Landthaler, Reinhard Buettner, and Anja-Katrin Bosserhoff, (1999) "Detection of Melanoma Cells in the Blood of Melanoma Patients by Melanoma-inhibitory Activity (MIA) Reverse Transcription - PCR", Clin Cancer Res, Vol 5, p 1099 - 1105
28 Nguyen Dinh Thang, Ichiro Yajima, Mayuko Y.K, Machiko I., Tamio S., Masashi Kato, (2015), "Deltex-3-like (DTX3L) stimulates metastasis of melanoma through FAK/PI3K/AKT but not MEK/ERK pathway", Oncotarget, Vol 6, No.16, p.14290 - 14299
29 Nguyen Dinh Thang, Phan Tuan Nghia, Mayuko Y Kumasaka, Ichiro Yajima, Masashi Kato, (2015), "Treatment of Vemurafenib-Resistant SKMEL28 Melanoma Cells with Paclitaxel", Asian Pac J Cancer Prev, Vol 16, p.699 - 705
30 Olivier Meurette, Spyros Stylianou, Rebecca Rock, Giovanna M Collu, Andrew P Gilmore, and Keith Brennan, (2009), "Notch Activation Induces Akt Signaling via an Autocrine Loop to Prevent Apoptosis in Breast Epithelial Cells", American Association for Cancer Research Journals, Vol 69:(12), p.5015 - 5023
(15)Gamma Interferon-Responsive Bidirectional Promoter and Are Overexpressed in Diffuse Large B-Cell Lymphomas with a Prominent Inflammatory Infiltrate", MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY, Vol 26, No 14, p 5348 - 5359
32 Qingsheng Yan, Shilpee Dutt, Rong Xu, Katherine Graves, Przemyslaw Juszczynski, John P.Manis, and Margaret A.Shipp, (2009), "BBAP Monoubiquitylates Histone H4 at Lysine 91 and Selectively Modulates the DNA Damage Response", Mol Cell, Vol 36 (1), p.110 - 120
33 Rudi Bao, Denise C.Connolly, Maureen Murphy, Jeffrey Green, Jillian K Weinstein, Debra A.Pisarcik, Thomas C.Hamilton, (2002), "Activation of Cancer-Specific Gene Expression by the Survivin Promoter", Journal of the National Cancer Institute, Vol 94, No.7, p.522 - 528
34 Samia B.Bachmann, Sandra C.Frommel, Rosalba Camicia, Hans C.Winkler, Raffaella Santoro, and Paul O Hassa, (2014), "DTX3L and ARTD9 inhibit IRF1 expression and mediate in cooperation with ARTD8 survival and proliferation of metastatic prostate cancer cells", Molecular Cancer, (13:125), doi: 10.1186/1476 - 4598 - 13 - 125
35 Samia B.Bachmann, Sandra C.Frommel, Rosalba Camicia, Hans C.Winkler, Raffaella Santoro, and Paul O Hassa, (2014), "DTX3L and ARTD9 inhibit IRF1 expression and mediate in cooperation with ARTD8 survival and proliferation of metastatic prostate cancer cells", Molecular Cancer, Vol 13, doi: 10.1186/1476-4598-13-125
36 Scott E Woodman, Alexander J Lazar, Kenneth D Aldape, and Michael A Davies, (2012), "New Strategies in Melanoma: Molecular Testing in Advanced Disease", Clin Cancer Res, Vol 18(5), p 1195 - 1200
(16)38 The Cancer Genome Atlas Network, (2015), "Genomic Classification of Cutaneous Melanoma", Cell, Vol 161, p.1681 - 1696
39 Thomas L Hocker, Meena K Singh, and Hensin Tsao, (2008), "Melanoma Genetics and Therapeutic Approaches in the 21st Century: Moving from the Benchside to the Bedside", Journal of Investigative Dermatology, Vol 128, p 2575 - 2595
40 V Beral and N.Robinson, (1981), "The Relationship of Maglinant Melanoma, Basal and Squamous Skin Cancers to indoor to outdoor work", Br.J.Cancer, Vol 44, p 886 - 891
41 V J Hearing and S P L Leong, (2006), "Melanocyte Distribution and Function in Skin", From Melanocytes to Melanoma: The Progression to Malignancy,Chapter 6, p 101 - 115
42 Wolfgang G Dippold, Kenneth O Lloyd, Lucy T C Li, Hisami Ikeda, Herbert F Oettgen, and Lloyd J Old, (1980), "Cell surface antigens of human malignant melanoma: Definition of six antigenic systems with mouse monoclonal antibodies", Immunology,Vol 77, p 6114 - 6118
43 Xiao D, Ohlendorf J, Chen Y, Taylor DD, Rai SN, et al., (2012), "Identifying mRNA, MicroRNA and Protein Profiles of Melanoma Exosomes", PLoS ONE, Vol 7(10), doi: 10.1371/journal.pone.0046874
44 Ying Chen, Debora L Kramer, Fengzhi Li, and Carl W Porter, (2003), "Loss of inhibitor of apoptosis proteins as a determinant of polyamine analog-induced apoptosis in human melanoma cells", Oncogene, Vol 22, doi:10.1038/sj.onc.1206725
45 Zhongqiu Zhang, Ruisheng Yao, Jie Li, Yian Wang, Charles W.Boone, Ronald A.Lubet, and Ming You, (2005), "Induction of Invasive Mouse Skin Carcinomas in Transgenic Mice with Mutations in Both H-ras and p53", Mol Cancer Res, Vol 3(10), p 563 - 574
(17)46 http://atlasgeneticsoncology.org/Genes/NOTCH1ID30ch9q34.html
47 http://cancerlink.ru/enmelbiology.html
48 http://docsachysinh.com/dsys-ebook/Phan3/chuong41/index.html
49 http://familydoctor.org/familydoctor/en/diseases-conditions/skin-cancer.html
50 http://voer.edu.vn/m/cac-phuong-phap-chuyen-gen/
51 https://www.bioscience.org/1998/v3/d/meier/d1010.htm
52
https://www.cancer.ca/en/cancer-information/cancer-type/skin-melanoma/melanoma/malignant-tumours
53 http://www.cancer.gov/types/skin/hp/skin-genetics-pdq
54
http://www.dieutri.vn/bgdalieu/19-8-2013/S4489/Bai-giang-mo-hoc-da-trong-da-lieu.htm
55
http://www.intechopen.com/books/recent-advances-in-the-biology-therapy-and-management-of-melanoma
56 http://www.mmmp.org/MMMP/import.mmmp
57 http://www.webmd.com/skin-problems-and-treatments/picture-of-the-skin
58 http://www.who.int/uv/faq/skincancer/en
http://atlasgeneticsoncology.org/Genes/NOTCH1ID30ch9q34.html http://cancerlink.ru/enmelbiology.html http://docsachysinh.com/dsys-ebook/Phan3/chuong41/index.html http://familydoctor.org/familydoctor/en/diseases-conditions/skin-cancer.html http://voer.edu.vn/m/cac-phuong-phap-chuyen-gen/ https://www.bioscience.org/1998/v3/d/meier/d1010.htm https://www.cancer.ca/en/cancer-information/cancer-type/skin-melanoma/melanoma/malignant-tumours http://www.cancer.gov/types/skin/hp/skin-genetics-pdq http://www.dieutri.vn/bgdalieu/19-8-2013/S4489/Bai-giang-mo-hoc-da-trong-da-lieu.htm http://www.intechopen.com/books/recent-advances-in-the-biology-therapy-and-management-of-melanoma . http://www.mmmp.org/MMMP/import.mmmp http://www.webmd.com/skin-problems-and-treatments/picture-of-the-skin http://www.who.int/uv/faq/skincancer/en http://yhoccongdong.com/thongtin/ung-thu-da/