Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc và hoạt tính chống loãng xương của một số hợp chất tách được từ cây Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) (Luận văn thạc sĩ)
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Lê Đức Thiện NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG LỖNG XƯƠNG CỦA MỘT SỐ HỢP CHẤT TÁCH ĐƯỢC TỪ CÂY VÓT VÀNG NHẠT (Viburnum lutescens Blume) LUẬN VĂN THẠC SĨ: HÓA HỌC Hà Nội - 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Lê Đức Thiện NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG LỖNG XƯƠNG CỦA MỘT SỐ HỢP CHẤT TÁCH ĐƯỢC TỪ CÂY VÓT VÀNG NHẠT (Viburnum lutescens Blume) Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ: HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: Hướng dẫn 1: TS Nguyễn Phượng Minh Hướng dẫn 2: TS Nguyễn Hải Đăng Hà Nội - 2021 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa sử dụng cơng trình khác Tơi xin cam đoan rằng, giúp đỡ việc hoàn thành luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm số liệu luận văn Hà Nội, 3/2021 Lê Đức Thiện ii LỜI CẢM ƠN Luận văn hoàn thành Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Để hồn thành luận văn tốt nghiệp này, bên cạnh cố gắng nỗ lực thân, nhận động viên giúp đỡ lớn nhiều cá nhân tập thể Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Phượng Minh - Viện Hóa học Mơi trường qn sự, BTL Hóa học, BQP; TS Nguyễn Hải Đăng Trường Đại học Khoa học Công nghệ Hà Nội Cán thuộc Phòng Nghiên cứu cấu trúc, Viện Hoá sinh biển tạo điều kiện, hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình nghiên cứu hồn thiện luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo, Phòng Đào tạo thầy, cô giáo Học viện Khoa học Công nghệ đào tạo giúp đỡ suốt thời gian học tập trường Tôi trân trọng biết ơn sâu sắc tới gia đình bạn bè động viên giúp đỡ vượt qua khó khăn suốt thời gian qua Cuối Tơi xin cảm ơn đề tài: “Nghiên cứu tìm kiếm hợp chất có hoạt tính chống lỗng xương từ nguồn tài nguyên thực vật số tỉnh phía Bắc Việt Nam”, mã số: KHCBHH.02/19-21 hỗ trợ kinh phí để giúp đỡ Tơi hồn thiện luận văn Hà Nội, 3/2021 Lê Đức Thiện iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu 13 C-NMR H-NMR CC DEPT HSQC HPLC Tiếng Anh Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Column chromatography Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer Heteronuclear Single-Quantum Coherence High-performance liquid chromatography Diễn giải Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon 13 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton Sắc kí cột Phở DEPT Phở tương tác dị hạt nhân qua liên kết Sắc ký lỏng áp suất cao DANH MỤC CÁC BẢNG iv Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất VL1 tài liệu tham khảo .38 Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất VL2 tài liệu tham khảo .42 Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất VL3 tài liệu tham khảo .45 Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất VL4 hợp chất tham khảo 47 Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất VL5 hợp chất tham khảo 50 Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất VL6 hợp chất tham khảo 52 Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất VL7 hợp chất tham khảo 56 Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất VL8 hợp chất tham khảo 58 Bảng Số liệu phổ NMR hợp chất VL9 hợp chất tham khảo 62 Bảng 10 Kết đánh giá hoạt tính chống lỗng xương hợp chất VL1-VL9 65 v DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Hình ảnh Vót vàng nhạt Hình 2: Q trình tái mơ hình xương (bone remodeling) .26 Hình 3: Mẫu Vót vàng nhạt chụp nơi thu hái - Mê Linh, Vĩnh Phúc 30 Hình 4: Sơ đồ phân lập hợp chất từ Vót vàng nhạt 35 Hình 5: Cấu trúc hóa học hợp chất VL1 37 Hình 6: Phổ 1H-NMR hợp chất VL1 .39 Hình 7: Phở 13C-NMR hợp chất VL1 40 Hình 8: Phổ DEPT hợp chất VL1 40 Hình 9: Phở ESI-MS hợp chất VL1 .41 Hình 10: Cấu trúc hóa học hợp chất VL2 41 Hình 11: Phở 1H-NMR hợp chất VL2 43 Hình 12: Phở 13C-NMR hợp chất VL2 44 Hình 13: Cấu trúc hóa học hợp chất VL3 44 Hình 14: Phở 1H-NMR hợp chất VL3 46 Hình 15: Phở 13C-NMR hợp chất VL3 47 Hình 16: Cấu trúc hóa học hợp chất VL4 47 Hình 17: Phổ 1H-NMR hợp chất VL4 49 Hình 18: Phở 13C-NMR hợp chất VL4 49 Hình 19: Cấu trúc hóa học hợp chất VL5 50 Hình 20: Phở 1H-NMR hợp chất VL5 51 Hình 21: Phổ 13C-NMR hợp chất VL5 52 vi Hình 22: Cấu trúc hóa học hợp chất VL6 52 Hình 23: Phở 1H-NMR hợp chất VL6 54 Hình 24: Phở 13C-NMR hợp chất VL6 55 Hình 25: Phở HSQC hợp chất VL6 .55 Hình 26: Cấu trúc hóa học hợp chất VL7 56 Hình 27: Phở 1H-NMR hợp chất VL7 57 Hình 28: Phở 13C-NMR hợp chất VL7 58 Hình 29: Cấu trúc hóa học hợp chất VL8 58 Hình 30: Phổ 1H-NMR hợp chất VL8 60 Hình 31: Phở 13C-NMR hợp chất VL8 61 Hình 32: Phổ HSQC hợp chất VL8 .61 Hình 33: Cấu trúc hóa học hợp chất VL9 62 Hình 34: Phổ 1H-NMR hợp chất VL9 64 Hình 35: Phở 13C-NMR hợp chất VL9 64 Hình 36: Cấu trúc hóa học hợp chất VL1- VL9 66 MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii Danh mục chữ viết tắt iii Danh mục bảng iv Danh mục hình v Mục lục Mở Đầu CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI VIBURNUM 1.1.1 Giới thiệu chung chi Viburnum 1.1.2 Giới thiệu chung Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume.) 1.1.3 Nghiên cứu thành phần hóa học chi Viburnum 1.1.4 Các nghiên cứu hoạt tính sinh học chi Viburnum 24 1.2 TỔNG QUAN VỀ LOÃNG XƯƠNG VÀ PHƯƠNG PHÁP ĐIỀU TRỊ 24 1.2.1 Các đặc tính bệnh lỗng xương 25 1.2.2 Các phương pháp điều trị bệnh loãng xương 28 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 30 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.2.1 Phương pháp phân lập hợp chất 30 2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc hoá học hợp chất 31 2.2.3 Phương pháp đánh giá hoạt tính lỗng xương (chống hủy xương) tế bào RAW264.7 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 3.1 XỬ LÝ MẪU VÀ QUY TRÌNH PHÂN LẬP CÁC HỢP CHẤT 34 3.1.1 Xử lý mẫu nghiên cứu .34 3.1.2 Quy trình phân lập hợp chất 34 3.2 THƠNG SỐ VẬT LÍ CỦA CÁC HỢP CHẤT ĐÃ PHÂN LẬP 35 3.2.1 Hợp chất VL1: Kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside 35 3.2.2 Hợp chất VL2: Kaempferol 3-O-rutinoside 36 3.2.3 Hợp chất VL3: Kaempferol 3-O-α-L- rhamnopyranosyl (1→6)-β-Dgalactopyranoside 36 3.2.4 Hợp chất VL4: Kaempferol-3-O-β-D-galactopyranoside .36 3.2.5 Hợp chất VL5: Quercetin 3-O-β-D-glucopyranoside .36 3.2.6 Hợp chất VL6: (7S,8S)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 9-O-β-Dglucopyranoside .36 3.2.7 Hợp chất VL7: (7S,8S)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 9՛-O-β-Dglucopyranoside .36 3.2.8 Hợp chất VL8: (7S, 8R)-5-methoxydihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4O-β-D-glucopyranoside 37 3.3.9 Hợp chất VL9: (7S,8R)-4,9,9՛-trihydroxy-3,3՛,5-trimethoxy-4′,7-epoxy8,5՛-neolignan 9՛-O-β-D-glucopyranoside 37 3.3 ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG CHỐNG LOÃNG XƯƠNG IN VITRO CỦA CÁC HỢP CHẤT 37 3.4 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC CÁC HỢP CHẤT .37 3.4.1 Hợp chất VL1: Kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside 37 3.4.2 Hợp chất VL2: Kaempferol 3-O-rutinoside 41 3.4.3 Hợp chất VL3: Kaempferol 3-O-α-L- rhamnopyranosyl (1→6)-β-Dgalactopyranoside 44 3.4.4 Hợp chất VL4: Kaempferol-3-O-β-D-galactopyranoside .47 3.4.5 Hợp chất VL5: Quercetin 3-O-β-D-glucopyranoside .50 3.4.6 Hợp chất VL6: (7S,8S)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 9-O-β-Dglucopyranoside .52 3.4.7 Hợp chất VL7: (7S,8S)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 9՛-O-β-Dglucopyranoside .56 3.4.8 Hợp chất VL8: (7S, 8R)-5 methoxydihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4O-β-D-glucopyranoside 58 3.4.9 Hợp chất VL9: (7S,8R)-4,9,9՛-trihydroxy-3,3՛,5-trimethoxy-4′,7-epoxy8,5՛-neolignan 9՛-O-β-D-glucopyranoside 62 3.5 HOẠT TÍNH CHỐNG LỖNG XƯƠNG CỦA CÁC HỢP CHẤT ĐÃ PHÂN LẬP 65 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ .66 4.1 CÁC HỢP CHẤT ĐÃ ĐƯỢC XÁC ĐỊNH TỪ CÂY VÓT VÀNG NHẠT 66 4.2 KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC CHẤT ĐÃ XÁC ĐỊNH ĐƯỢC 67 Tài liệu tham khảo .68 Phụ lục 70 Phụ lục phổ hợp chất VL1 .70 Phụ lục phổ hợp chất VL2 .72 Phụ lục phổ hợp chất VL3 .74 Phụ lục phổ hợp chất VL4 .76 Phụ lục phổ hợp chất VL5 .78 Phụ lục phổ hợp chất VL6 .80 Phụ lục phổ hợp chất VL7 .83 Phụ lục phổ hợp chất VL8 .85 Phụ lục phổ hợp chất VL9 88 76 Phụ lục phổ hợp chất VL4 Phổ dãn 1H-NMR hợp chất VL4 77 Phổ dãn 13C-NMR hợp chất VL4 78 Phụ lục phổ hợp chất VL5 Phổ dãn 1H-NMR hợp chất VL5 79 Phổ dãn 13C-NMR hợp chất VL5 80 Phụ lục phổ hợp chất VL6 Phổ dãn 1H-NMR hợp chất VL6 81 Phổ dãn 13C-NMR hợp chất VL6 82 Phổ dãn HSQC hợp chất VL6 83 Phụ lục phổ hợp chất VL7 Phổ dãn 1H-NMR hợp chất VL7 84 Phổ dãn 13C-NMR hợp chất VL7 85 Phụ lục phổ hợp chất VL8 Phổ dãn 1H-NMR hợp chất VL8 86 Phổ dãn 13C-NMR hợp chất VL8 87 Phổ dãn HSQC hợp chất VL8 88 Phụ lục phổ hợp chất VL9 89 Phổ dãn 1H-NMR hợp chất VL9 90 Phổ dãn 13C-NMR hợp chất VL9 ... ? ?Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc hoạt tính chống lỗng xương số hợp chất tách từ Vót vàng nhạt? ?? với nội dung sau: - Phân lập số hợp chất từ Vót vàng nhạt (Viburnum lutescens Blume) - Xác. .. VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Lê Đức Thiện NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT, XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG LỖNG XƯƠNG CỦA MỘT SỐ HỢP CHẤT TÁCH... 3.5 HOẠT TÍNH CHỐNG LỖNG XƯƠNG CỦA CÁC HỢP CHẤT ĐÃ PHÂN LẬP 65 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ .66 4.1 CÁC HỢP CHẤT ĐÃ ĐƯỢC XÁC ĐỊNH TỪ CÂY VÓT VÀNG NHẠT 66 4.2 KẾT QUẢ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA