Tìm hiểu quy trình định lượng lượng HCV bằng kỹ thuật Real time PCRx

Tìm hiểu quy trình định lượng lượng HCV bằng kỹ thuật Real time PCRx Tìm hiểu quy trình định lượng lượng HCV bằng kỹ thuật Real time PCRx Tìm hiểu quy trình định lượng lượng HCV bằng kỹ thuật Real time PCRx luận văn tốt nghiệp,luận văn thạc sĩ, luận văn cao học, luận văn đại học, luận án tiến sĩ, đồ án tốt nghiệp luận văn tốt nghiệp,luận văn thạc sĩ, luận văn cao học, luận văn đại học, luận án tiến sĩ, đồ án tốt nghiệp

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN SVTH: BÙI QUANG THIỆU Trang KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP 1.1 Giới thiệu bệnh viêm gan C [1,9] 1.1.1 Giới thiệu chung Gan quan nội tạng lớn đảm nhận nhiều vai trò chức quan trọng thể hỗ trợ tiêu hóa, điều hịa chuyển hóa lượng, dự trữ máu, khử độc,… Viêm gan tính trạng gan bị sưng hoại tử tế bào gan, giảm dần chức hoạt động Có nhiều nguyên nhân gây viêm gan thuốc, rượu, chất độc,… quan trọng phổ biến nhiễm siêu vi Có nhiều loại siêu vi viêm gan: A, B, C, D, E, G, TT virus, Sen virus,… đó, có virus gây viêm gan B, C, D gây viêm gan mãn tính, xơ gan dẫn đến ung thư gan Bệnh viêm gan siêu vi C lần đầu phát vào năm 1989, Hepatitis C virus gây Bệnh thường gây triệu chứng rõ ràng điển hình Chủ yếu dấu hiệu mệt mỏi, chán ăn rối loạn tiêu hóa, bị vàng da Việc phát bệnh hầu hết tình cờ xét nghiệm máu kiểm tra sức khỏe Diễn tiến bệnh âm thầm, chưa có vacxin phịng ngừa, tỷ lệ chuyển thành xơ gan ung thư gan cao so với bệnh viêm gan so siêu vi B Mặt khác, chi phí điều trị bệnh cao cần tuân theo phát đồ điều trị chặt chẽ Do đó, việc xét nghiệm máu định kỳ cần thiết để phát bệnh gan sớm 1.1.2 Lịch sử phát viêm gan siêu vi C Năm 1975, Prince cộng nhận định có chứng bệnh viêm gan siêu vi sau truyền máu không viêm gan siêu vi B có thời kỳ ủ bệnh dài thời ủ bệnh viêm gan siêu vi A Sau đó, tác giả: Bassler cộng (1995), Lee cộng (1993), Livak cộng (1995) chứng minh mặt huyết học bệnh viêm gan siêu vi loại khơng có liên quan đến bệnh viêm gan siêu vi A từ lúc danh từ “bệnh viêm gan siêu vi không A không B” đời Vào tháng năm 1989 phương pháp ly tâm siêu tốc huyết tương thu từ tinh tinh bị bệnh viêm gan siêu vi, Choo cộng (1989) tách chiết nucleic acid virus, tổng hợp cDNA từ RNA tách chiết, chèn vào gen λgt11 xâm nhiễm E coli, thu có dịng có phản ứng đặc hiệu với kháng thể có huyết người bị bệnh viêm gan siêu vi không A không B sau SVTH: BÙI QUANG THIỆU Trang KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP truyền máu Cuối cùng, Choo cộng (1989) xác định bệnh viêm gan siêu vi không A không B loại siêu vi gây ra, siêu vi C (HCV) 1.2 Dịch tể học [3,11] 1.2.1 Tình hình nhiễm siêu vi C giới Khơng có Hình 1.1: Bản đồ phân bố tỷ lệ nhiễm HCV giới (Nguồn: www: WHO, 2008) Theo ước tính tổ chức y tế giới WHO, trung bình 3% dân số giới nhiễm viêm gan siêu vi C , 170 triệu người mang virus dạng mạn tính Trong đó, Đơng Nam Á có khoảng 32,3 triệu người bị nhiễm, chiếm 2.15% dân số khu vực Tần suất toàn HCV cộng đồng chung báo cáo theo lục địa với tần suất trung bình 5.17% Châu Phi , 3.5% Châu Á, 1,93% Châu Mỹ, 1,75% Châu Âu, 1.88% Châu Đại Dương Tính tồn cầu 2.856% có nghĩa khoảng 210 triệu người nhiễm HCV toàn giới Ở nước phát triển, HCV nguyên nhân 20% ca viêm gan cấp, 70% viêm gan mạn, 40% xơ gan giai đoạn cuối, 60% ung thư gan, 30% ca ghép gan Ở nước phát triển, HCV nguyên nhân 18% ca viêm gan cấp, 69% viêm gan mạn, 33% xơ gan giai đoạn cuối, 52% ung thư gan, 32% ca ghép gan Ở nước phát triển, HCV nguyên nhân 36% ca viêm gan cấp, 75% viêm gan mạn, 50% xơ gan giai đoạn cuối, 66% ung thư gan, 38% ca ghép gan Trong genotype HCV, gen type chiếm tỷ lệ cao giới nói chung nước Mỹ nói riêng với 35% loại 1a 35% loại 1b Genotype thường thấy Pakistan, Úc, Scotland Genotype Trung Đông Châu Phi SVTH: BÙI QUANG THIỆU Trang KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP South Africa Genotype Hồng Kơng Macau 1.2.2 Tình hình nhiễm siêu vi C Việt Nam [7,13] Tại Việt Nam, tỷ lệ nhiễm HCV 1,8% dân số nước , trung bình từ 1-3 trường hợp/100000 người năm Theo Trương Xuân Liên (2010), tỷ lệ nhiễm HCV số đối tượng TP.HCM : người tiêm chích ma túy 96,2%, nhiễm HIV 73,6%, bệnh nhân xơ gan : 47,8%, bệnh nhân viêm gan : 26,6%, bệnh nhân ung thư gan : 23,2%, bệnh nhân nghi viên gan :19,3%, người cho máu : 14%, gái mại dâm : 9,9%, bệnh nhân da liễu : 6,9%, nhân viên y tế : 3,28% người cho máu bình thường : 2,53% Nakata cộng (2007) khảo sát người khơng có bệnh gan thành phố lớn Hồ Chí Minh Hà Nội thấy tỉ lệ có kháng thể kháng HCV (antiHCV) 9% (43/491) 4% (18/511) Phân bố kháng thể không phụ thuộc theo tuổi Cũng nghiên cứu này, TP.HCM, tần suất nhiễm anti-HCV cao người tiêm ma túy 87%, bệnh nhân thẩm tách máu : 54%, có bệnh ưa chảy máu : 29% Nghiên cứu cảnh báo cần sàng lọc anti-HCV người cho máu mục đích thương mại quan trọng Theo Trần Thanh Dương cộng (2009) nghiên cứu kiểu gen 14 bệnh nhân viêm gan Hà Nội thấy kiểu gen 1a, 1b 6a 4, trường hợp Cũng tác giả này, phân tích HCV phụ nữ mại dâm Hà Nội thấy có nhiều kiểu gen : 1a, 1b, 6, 6a, 9a Cao 1a, 6a 1b 1.3 Con đường lây nhiễm HCV [5,7] HCV lây truyền theo đường máu đường lây chủ yếu sau :  Người nhận máu, chế phẩm máu phận thể từ người cho nhiễm HCV  Nhân viên y tế: tiếp xúc với bệnh phẩm chứa siêu vi trình làm việc  Ðường tình dục  Mẹ truyền sang Dùng chung dao cạo, bàn chải răng, kềm cắt móng tay với người bị nhiễm siêu vi C, kim chích xăm hay xỏ lỗ tai không đảm bảo vô trùng Tuy nhiên, 30-40% trường hợp không rõ nguyên nhân SVTH: BÙI QUANG THIỆU Trang KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP 1.4 Diễn tiến bệnh [13,15] Sau bị nhiễm siêu vi, bệnh nhân có thời gian ủ bệnh từ tuần – tháng Đây giai đoạn nhiễm trùng cấp tính Phần lớn bệnh nhân khơng có triệu chứng lâm sàng Một số có biểu mệt mỏi, chán ăn, … Việc chẩn đoán bệnh giai đoạn dựa vào xét nghiệm máu Sau tháng, khoảng 85% bệnh nhân chuyển thành dạng mãn tính Khi đó, bệnh diễn tiến thầm lặng từ 10-30 năm Khi bệnh nhân phát thường vào giai đoạn cuối, tế bào gan xơ, viêm hoại tử Có hai dạng viêm gan mạn tính -Viêm gan C mãn tính có men ALT(Aspartate Amino Transferase) bình thường, (ALT gan tạo thường có hàm lượng cố định máu, trị số bình thường ALT < 40 U/L ,AST < 40 U/l) Trường hợp viêm gan C mãn tính có men ALT bình thường bệnh nhân có diện anti-HCV, RNA HCV (+) phương pháp PCR, men ALT bình thường kéo dài -Viêm gan C mãn tính có men ALT tăng : Bệnh nhân viêm gan C mãn tính thuộc vào loại Tùy theo tổn thương mô học mà chia làm hai loại: viêm gan mãn nhẹ viêm gan mãn mức độ từ vừa đến nặng Sự phân biệt quan trọng tiên lượng định điều trị + Viêm gan mãn nhẹ: Viêm gan mãn nhẹ sinh thiết gan cho thấy tổn thương mô học nhẹ Theo cách tính Knodell(1980) viêm gan mãn nhẹ số điểm sơ hóa số điểm hoại tính viêm- hoại tử nhỏ + Viêm gan từ mức độ vừa đến nặng: Viêm gan từ mức độ vừa đến nặng sinh thiết gan thấy có tổn thương viêm- họai tử đáng kể xơ hóa lan rộng Theo cách tính Knodell (1980) viêm gan mãn vừa nặng xác định số điểm sơ hóa số điểm hoạt tính lớn SVTH: BÙI QUANG THIỆU Trang KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Nhiễm cấp tính Nhiễm cấp tính 60% Khơngtriệu triệuchứng chứng Khơng 1% 39 % Viêmgan gannặng nặng Viêm MệtMệt mỏi mỏi tuần- tháng 85% 15% Viêm gan mạn Viêm gan mãn Hồi Hồiphục phục Viêm gan gan Viêm không biến chứng 1030 năm 20% 20%Biến Biến chứng chứngxơ xơvà ung ungthư thư Hình 1.2: Sơ đồ diễn tiến bệnh siêu vi ( Nguồn: bệnh viện Hòa Hảo) 1.5 Biện pháp phòng ngừa điều trị [20.23] 1.5.1 Biện pháp phịng ngừa Các vết máu khơ từ người nhiễm HCV lây cho người khác khồng thời gian từ 16 đến ngày, nhiệt độ phịng Do đó, vết máu cần phải tẩy người thực phải mang bao tay cao su Khơng dùng chung ống chích, kim tiêm, bơng băng Không dùng chung dao cạo râu, bàn chải đánh răng, dụng cụ cắt móng tay Quan hệ tình dục khơng an tồn Băng vết thương để tránh tiếp xúc máu cho người khác 1.5.2 Điều trị Điều trị viêm gan siêu vi địi hỏi phải có kiến thức sâu viêm gan thuốc chống siêu vi Do đó, bệnh nhân nên điều trị theo dõi bác sĩ chuyên viêm gan SVTH: BÙI QUANG THIỆU Trang KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Hiện nay, để chống lại viêm gan C interferon, thuốc ức chế nhân lên virus Các thuốc interferon dùng để điều trị viêm gan gồm: interferon α2b (Intron A), interferon α2a (Roferon-A) interferon alfacon-1 (Infegen) Nhưng interferon có tác dụng khoảng 20% số trường hợp Hiện nay, tiêm interferon thường phối hợp với uống ribavirin-một thuốc kháng sinh virus phổ rộng Điều trị thường sáu tháng đến năm thành công khoảng 40% số người bị HCV Gần đây, thuốc khác, interferon pegyl hóa có hiệu gấp hai lần interferon thông thường Vào tháng 1-2001 Cơ quan quản lý thuốc dược phẩm Mỹ cho phép dùng interferon pegyl hóa, interferon-peginterferon alfa-2b để điều trị viêm gan Theo nghiên cứu bác sĩ Nguyễn Thu Thủy-bệnh viện Hòa Hảo TP.HCM Hiệu điều trị phụ thuộc nhiều yếu tố như: giới tính, thời gian ủ bệnh, độ tuổi…… Yếu tố Giới tính Thuận lợi Nữ Khơng thuận lợi Nam Độ tuổi 40 Thời gian bệnh Ngắn Dài Xơ gan Khơng Có Cân nặng >75 kg