Ức chế sự tăng sinh và tăng kiểu hình apoptosis ở tế bào ung thư gan và ung thư vú bằng dịch chiết methanol từ lá cây đìa đụm (Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum)

Trong nghiên cứu này, dịch chiết methanol từ lá của cây Đìa đụm được sử dụng để đánh giá khả năng ức chế các tế bào ung thư vú và ung thư gan bằng phương pháp sàng lọc MTT, phân tích hình thái tế bào và hình thái kiểu nhân apoptosis bằng thuốc nhuộm nhân tế bào DAPI.

Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 51–59, 2021 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 ỨC CHẾ SỰ TĂNG SINH VÀ TĂNG KIỂU HÌNH APOPTOSIS Ở TẾ BÀO UNG THƯ GAN VÀ UNG THƯ VÚ BẰNG DỊCH CHIẾT METHANOL TỪ LÁ CÂY ĐÌA ĐỤM (Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum) Nguyễn Phú Hùng*, Phạm Thị Quỳnh, Nguyễn Hồi Hương, Vũ Thị Ngọc Dương, Ngơ Thu Hà, Nguyễn Thị Hương, Lê Thị Thanh Hương Trường Đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên, Tân Thịnh, Tp Thái Nguyên, Thái Nguyên, Việt Nam * Tác giả liên hệ Nguyễn Phú Hùng (Ngày nhận bài: 15-07-2020; Ngày chấp nhận đăng: 03-09-2020) Tóm tắt Cây Đìa đụm (Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum) có nhiều tác dụng điều trị bệnh sử dụng rộng rãi thuốc y học cổ truyền người dân tộc thiểu số Trong nghiên cứu này, dịch chiết methanol từ Đìa đụm sử dụng để đánh giá khả ức chế tế bào ung thư vú ung thư gan phương pháp sàng lọc MTT, phân tích hình thái tế bào hình thái kiểu nhân apoptosis thuốc nhuộm nhân tế bào DAPI Kết cho thấy dịch chiết methanol Đìa đụm ức chế tăng sinh tế bào ung thư gan dòng HepG2 ung vú dòng MCF7 với giá trị IC 50 tương ứng 0,084 mg/mL 0,812 mg/mL Dịch chiết cảm ứng trình apoptosis dòng tế bào HepG2 mạnh so với dòng tế bào MCF7, có tiềm chống lại tăng sinh tế bào ung thư gan Từ khóa: apoptosis, Heliciopsis lobata, tăng sinh tế bào, ung thư gan, ung thư vú Inhibition of cell proliferation and enhancement of apoptosis of liver and breast cancer cells by methanol extract of Heliciopsis lobata leaves Nguyen Phu Hung*, Pham Thi Quynh, Nguyen Hoai Huong, Vu Thi Ngoc Duong, Ngo Thu Ha, Nguyen Thi Huong, Le Thi Thanh Huong University of Sciences, Thai Nguyen University, Tan Thinh, Thai Nguyen City, Thai Nguyen, Vietnam * Correspondence to Nguyen Phu Hung (Received: 15 July 2020; Accepted: 03 September 2020) Abstract Heliciopsis lobata is effective in the treatment of diseases and is used in the traditional medicine of ethnic minorities In this study, the methanol extract of the leaves of Heliciopsis lobata is used to assess its ability to inhibit cell growth of breast and liver cancer cells by using the MTT assay, cell morphology, and apoptotic morphology by DAPI staining The results show that this extract inhibits the proliferation of HepG2 and MCF7 cell lines with IC50 values of 0.084 mg/mL and 0.812 mg/mL, respectively The extract induces apoptosis in HepG2 cells more strongly than in MCF7 cells; and therefore, it is potent to inhibit the proliferation of liver cancer cells Keywords: apoptosis, Heliciopsis lobata, cell proliferation, liver cancer, breast cancer DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5924 51 Nguyễn Phú Hùng CS Mở đầu phân lập hợp chất glycozit chứa phenol từ dịch chiết Đìa đụm, có hợp chất arbutin Ung thư thách thức lớn Chất có nhiều tác dụng chống oxy hóa tăng nhân loại Theo thống kê cường biệt hóa tế bào Một số dẫn xuất arbutin Tổ chức Y tế giới, tính riêng năm 2018, ước có tác dụng gây độc cho tế bào ung thư vú [5] tính Việt Nam có khoảng 165 nghìn trường hợp Để khảo sát tiềm chống ung thư Đìa mắc khoảng 115 nghìn trường hợp tử vong đụm làm sở cho nghiên cứu xa phát ung thư [1] Nghiên cứu, phát triển thuốc triển thuốc chống ung thư, tiến hành chống ung thư quan tâm đặc đánh giá khả ức chế tế bào ung thư vú ung biệt nhiều quốc gia khác giới Việc thư gan dịch chiết methanol từ loại nghiên cứu sử dụng thảo dược phát triển thành thuốc chống ung thư số quốc gia giàu tài nguyên thực vật đặc biệt trọng, có Việt Nam [2] Cây Đìa đụm có tên khoa học Heliciopsis Vật liệu phương pháp 2.1 Môi trường hóa chất sử dụng ni cấy phân tích tế bào lobata (Merr.) Sleum, thuộc họ Proteaceae (Chẹo thui), mọc tự nhiên rừng tỉnh Bắc Kạn, Môi trường RMPI 1640 huyết bào Vĩnh Phúc, Ninh Bình, Lạng Sơn, Quảng Ninh, thai bò FBS (fetal bovine serum) sử dụng Thái Nguyên số tỉnh miền núi phía Bắc Cây ni cấy Invitrogen, Mỹ, cung cấp Dung Đìa đụm sử dụng rộng rãi thuốc dịch đệm PBS (phosphate-buffered saline), thuốc y học cổ truyền người dân tộc thiểu số thử MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphe vùng có phân bố Theo kinh nghiệm dân nyltetrazolium bromide), thuốc nhuộm nhân DAPI gian, Đìa đụm có tác dụng lợi tiểu, chống viêm, (4′,6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride), dùng trường hợp viêm gan virus, thuốc nhuộm nhân PI (propidium iodide) vàng da, mắt vàng Đìa đụm dùng để kháng sinh P/S (penicilin/treptomycin) chữa bệnh thấp khớp, lao hạch, nấu nước tắm cho Thermo Fisher, Mỹ, cung cấp phụ nữ sau sinh đẻ cho khỏe người chống đau nhức Trong nghiên cứu gần đây, Li cs phân lập hợp chất có Đìa đụm gồm myricetin, myrincitrin, syringetin-3-O-betaD-glucopyranoside, hydroquinone, D-1-O-methylmyo-inositol, medioresinol beta-sitosterol [3] Mặc dù, khả kháng ung thư hợp chất tách từ Đìa đụm chưa nghiên cứu, trước đó, số hợp chất mycricetin chứng minh có tính chất 2.2 Thu mẫu chiết dịch từ methanol Lá Đìa đụm (Hình 1) thu hái xã Phú Thượng, huyện Võ Nhai, tỉnh Thái Nguyên (tọa độ N20°45’18,9”; E105°05’44,5”), vào tháng năm 2020 dạng nguyên vẹn không sâu bệnh Lá rửa nước cất, sấy khô 50 °C 48 h nghiền thành bột mịn trước tiến hành thu dịch chiết với methanol chống oxy hóa, bảo vệ tế bào, kháng virus kháng Dịch chiết Đìa đụm thu khuẩn Mycricetin có tác dụng đáng kể khả cách cho 10 gam bột vào 20 mL methanol (95%, chống lại bệnh ung thư khác nhau, bao Sigma Aldrick, Pháp) ống falcon lắc qua gồm ung thư vú, ung thư buồng trứng, ung thư đêm tốc độ 200 vòng/phút Lọc dung dịch chứa dày, ung thư da, ung thư biểu mô thai ung methanol bột qua giấy lọc Whatman, thu dịch thư gan [4] Một vài nghiên cứu khác tiến hành lọc ống falcon thể tích 50 mL Cho bay 52 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 51–59, 2021 Hình Cây Đìa đụm (Heliciopsis lobata) mọc tự nhiên (trái); nghiền nhỏ cối chày sứ chiết ống Falcon thể tích 50 mL; cao chiết lưu trữ ống Eppendorf (phải) hồn tồn 37 °C; sau cân hịa tan hồn tồn 5% CO2 độ ẩm 95% Sau 48 h xử lý, tiến hành cao chiết dung dịch DMSO (Sigma Aldrick, phân tích tăng sinh tế bào phương pháp France) nồng độ gốc 200 mg/mL Dung dịch chứa MTT theo bước gồm: Loại bỏ hồn tồn mơi cao chiết sử dụng để đánh giá tác động trường nuôi cấy cũ, bổ sung 100 µL mơi trường dịng tế bào MCF7 HepG2 nuôi cấy chứa 10% MTT nồng độ mg/mL ủ đĩa nuôi cấy 37 °C h, tránh ánh sáng; 2.3 Nuôi cấy tế bào ung thư Tế bào ung thư gan HepG2 tế bào ung thư vú MCF7 phịng thí nghiệm Inserm U1053 – Viện Sức khỏe Nghiên cứu y học Quốc gia Pháp cung cấp, nuôi cấy mơi trường RPMI 1640 có bổ sung kháng sinh P/S 10% huyết loại bỏ môi trường nuôi cấy chứa 10% MTT bổ sung 100 µL DMSO/giếng; đo mật độ quang bước sóng 570 nm máy quang phổ (Multiskan Sky Thermo) Mỗi nồng độ lặp lại giếng cho thí nghiệm Tỉ lệ tăng sinh tế bào tính theo cơng thức: bào thai bò (FBS) đĩa 96 giếng với mật độ ban % tăng sinh tế bào = (OD mẫu xử lý/OD đối chứng) đầu 5.10 tế bào/giếng Sau 24 h ni cấy, tiến hành × 100 xử lý tế bào với dịch chiết methanol từ Đìa Giá trị IC50 dịng tế bào tính đụm theo bước sau: Loại bỏ môi trường dựa độ hấp thụ OD phần mềm chuyên nuôi cấy cũ; rửa bề mặt đĩa nuôi cấy với PBS 1X; bổ dụng GraphPad Prism 5.0, theo hướng dẫn nhà sung môi trường nuôi cấy chứa dịch chiết sản xuất Phân tích thống kê kiểm định methanol có nồng độ 0, 0,1, 0,2, 0,5, Mann-Wishney mg/mL Giếng đối chứng (0 mg/mL) bổ sung lượng DMSO tương đương với lượng DMSO dịch chiết dùng để xử lý tế bào Tế 2.5 Phân tích biến đổi kiểu nhân tế bào bào nuôi cấy điều kiện 37 °C, 5% CO2, độ Tế bào nuôi cấy đĩa 96 giếng với ẩm 95%; quan sát đánh giá kiểu hình tế bào mơi trường RPMI Sau 48 h xử lý với dịch chiết kính hiển vi soi ngược (NIKON, Ts2) sau 48 h methanol Đìa đụm, tế bào rửa lần đệm PBS 1X Tiếp theo tế bào cố định 2.4 Phân tích tăng sinh tế bào sàng lọc MTT Các tế bào xử lý với dịch chiết methanol từ Đìa đụm ni cấy 37 °C, DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5924 dung dịch ethanol 95% 10 phút Tế bào rửa lại lần dung dịch đệm PBS 1X Tiếp theo, bổ sung vào giếng 100 µL dung dịch nhuộm nhân tế bào DAPI (10 µg/mL) phút Tế bào soi kính hiển vi huỳnh quang 53 Nguyễn Phú Hùng CS Nilkon T2U độ phóng đại 200 lần kính lọc sắc chiết so với mẫu đối chứng (Hình 2) Đối với dịng dành cho kênh mầu DAPI Đặc điểm để nhận diện tế bào HepG2, dịch chiết methanol từ có khả kiểu hình nhân tế bào apoptosis có tượng ức chế mạnh tăng sinh tế bào nồng phân mảnh co nhỏ bắt mầu đậm (cường độ độ 0,1 mg/mL (Hình 2A Hình 2B) Mật độ tế bào phát quang mạnh) với thuốc nhuộm DAPI so với giảm rõ rệt so với đối chứng Sự tăng lên kích thước nhân to, cường độ bắt mầu vừa phải nồng độ dịch chiết từ 0,2 đến mg/mL tăng đồng với thuốc nhuộm DAPI cường ảnh hưởng ức chế tăng sinh tế bào ung thư Sự tăng lên nồng độ dịch 2.6 Phân tích apoptosis Flow cytometry hình thái nhân tế bào Phân tích apoptosis tế bào thực theo phương pháp Riccardi Nicoletti [6] Cụ thể sau: × 105 tế bào nuôi cấy đĩa loại 12 giếng Sau 24 h, tế bào xử lý môi trường ni cấy chứa dịch chiết methanol từ Đìa đụm nồng độ khác chiết cho thấy có xuất tế bào có thay đổi kiểu hình đặc trưng cho tế bào chết Đối với dòng tế bào ung thư gan HepG2, tỷ lệ tăng sinh tế bào giảm xấp xỉ 50% so với đối chứng (Hình 2B) nồng độ 0,1 mg/mL mức độ tăng sinh giảm mạnh nồng độ dịch chiết tăng lên Giá trị IC50 dịng HepG2 0,084 mg/mL (Hình 2B) (0,1, 0,5 mg/mL) Các giếng đối chứng không Đối với dòng tế bào MCF7, ảnh hưởng xử lý với dịch chiết thay thể dịch chiết methanol từ Đìa đụm thể lượng DMSO tương đương với lượng DMSO nồng độ từ 0,5 mg/mL trở lên Ở nồng dùng để pha lỗng dịch chiết Tế bào ni cấy độ thấp (0,1–0,2 mg/mL), khơng tìm thấy 48 h 37 °C 5% CO2 Tiếp theo, khác biệt tốc độ tăng sinh tế bào mẫu tế bào thu nhận cách xử lý với xử lý mẫu đối chứng (Hình 2C) Giá trị IC 50 đối trysin/EDTA ly tâm 1.300 vòng/phút với dòng MCF7 0,812 mg/mL) (Hình 2D) phút Sau đó, tế bào nhuộm với dung dịch fluorochrom (0,1% sodium citrate (wt/v); 0,1% Triton X-100 (v/v), 50 mg/L propidium iodide (PI)) thời gian h °C trước phân tích hệ thống dịng tế bào BD-Accuri C6-Plus Dữ liệu thu phân tích phần mềm chuyên dụng kèm theo máy Một nghiên cứu trước Wei-Yan cs cho thấy năm số bảy hợp chất thuộc nhóm arbutin tách chiết tinh chế từ Đìa đụm có ảnh hưởng ức chế tăng tế bào ung thư biểu mô dày MGC-803 với giá trị IC50 > 0,05 mg/mL; hai chất tinh khiết cịn lại có giá trị IC50 thấp (0,011–0,045 mg/mL) [7] Bên cạnh đó, nghiên cứu khác cho thấy số Kết thảo luận 3.1 Ảnh hưởng nồng độ dịch chiết lên tăng sinh tế bào hợp nhóm arbutin từ Đìa đụm có tác dụng kìm hãm xâm lấn tế bào MGC-803 [3] Mặc dù có nghiên cứu phân lập tinh chế số hợp chất khác có tiềm Dịch chiết methanol từ Đìa đụm ức chế ung thư từ Đìa đụm pha lỗng mơi trường ni cấy theo nhóm glycozit chứa phenol [8], liệu nồng độ khác từ 0,1 đến mg/mL để đánh giá thử nghiệm hoạt tính sinh học hợp chất ảnh hưởng lên tăng sinh tế bào ung sau tách chiết hạn chế Từ kết thư gan HepG2 tế bào ung thư vú MCF7 Sau 48 phân tích tác động lên tăng sinh dịch h nuôi cấy, tốc độ tăng sinh tế bào có khác chiết methanol từ Đìa đụm nghiên biệt rõ rệt mẫu xử lý với dịch 54 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 51–59, 2021 cứu này, chúng tơi nhận thấy Đìa đụm lồi thư gan HepG2 nhạy cảm dịch chiết từ thảo dược có tiềm ức chế nhân lên tế Đìa đụm so với dịng tế bào ung thư vú bào ung thư, đặc biệt tế bào ung thư gan Nghiên MCF7 cứu chúng tơi cho thấy rằng, tế bào ung Hình Ảnh hưởng ức chế dịch chiết methanol Đìa đụm lên tăng sinh tế bào ung thư gan HepG2 (A, B) tế bào ung thư vú MCF7 (C, D) Tế bào xử lý với dịch chiết nồng độ khác (0,1–2 mg/mL, đối chứng mg/mL) *p ≤ 0.05; n = 5; thang đo 50 µm DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5924 55 Nguyễn Phú Hùng CS 3.2 Ảnh hưởng nồng độ dịch chiết lên kiểu nhân tế bào ung thư gan HepG2 xử lý với dịch chiết Để đánh giá tác động dịch chiết tế bào có nhân bắt màu đậm, kích methanol từ Đìa đụm lên kiểu nhân tế thước nhỏ bị phân mảnh (Hình 3A 3B) bào ung thư gan HepG2 ung thư vú MCF7, tế Đây kiểu nhân đặc trưng cho tế bào chết bào nhuộm với thuốc nhuộm DNA apoptosis Số lượng tế bào có kiểu nhân apoptosis nhân tế bào DAPI Hình ảnh nhuộm nhân ghi nhận tăng từ 5,8 ± 2,6% đến 57 ± 6,6% theo chiều tăng phương pháp chụp ảnh kính hiển vi nồng độ xử lý (0,1–2 mg/mL) Các nồng độ 0,5 huỳnh quang (Hình 3) Kết phân tích tế bào mg/mL có ảnh hưởng rõ rệt lên kiểu nhân nồng độ 0,1–0,2 mg/mL cho thấy xuất Hình Ảnh hưởng dịch chiết methanol lên kiểu nhân tế bào ung thư gan HepG2 (A, B) tế bào ung thư vú MCF7 (C, D) Tế bào xử lý với dịch chiết nồng độ khác (0,1–2 mg/mL, đối chứng mg/mL) Mũi tên tế bào có kiểu nhân apoptosis *p ≤ 0,05; n = 5; thang đo 50 µm 56 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 51–59, 2021 Đối với dòng tế bào ung thư vú MCF7, xuất tế bào có kiểu nhân tế bào apoptosis quan sát thấy chiếm tỷ lệ thấp (từ 2,3 ± 1,6% đến 14 ± 3,7%) (Hình 3C 3D) Dịch chiết có tác động rõ rệt lên xuất kiểu hình nhân tế bào apoptosis tế bào MCF7 nồng độ từ mg/mL trở lên Điều cho thấy, nồng độ thấp hơn, mức độ apoptosis tạo tác động dịch chiết, lựa chọn nồng độ đại diện gồm (đối chứng), 0,1, 0,5 mg/mL để xử lý tế bào tiến hành phân tích kỹ thuật Flow cytometry Ở nồng độ thấp (0,1 mg/mL), dịch chiết không tạo khác biệt đáng kể tỷ lệ apoptosis so với đối chứng hai dịng tế bào HepG2 MCF7 (Hình 4) dịch chiết từ Đìa đụm tác động lên Tuy nhiên, nồng độ từ 0,5 mg/mL trở lên, tăng sinh tế bào ảnh hưởng không đáng mức độ tăng tỷ lệ tế bào apoptosis có khác kể lên q trình apoptosis tế bào ung thư vú biệt so với đối chứng Cụ thể dòng tế bào MCF7 Như vậy, thấy rằng, dịch chiết MCF7, tỷ lệ ± 2,3% so với 3,2 ± 1,2% Ở methanol từ Đìa đụm có ảnh dịng tế bào HepG2, tỷ lệ apoptosis tạo xử lý hưởng khác mức độ tăng sinh hình với dịch chiết nồng độ 0,5 mg/mL 22,7 ± 2,7%, thái nhân tế bào hai dòng tế bào HepG2 so với đối chứng 2,5 ± 1,8% Đáng ý, nồng MCF7 độ cao (2 mg/mL), dịch chiết methanol từ Đìa đụm gây apoptosis rõ rệt dòng tế 3.3 Ảnh hưởng nồng độ dịch chiết lên tỷ lệ apoptosis tế bào Kết phân tích kiểu hình nhân (Hình 3) cho thấy dịch chiết từ Đìa đụm làm tăng cường xuất tế bào có kiểu nhân điển bào HepG2 (50,5 ± 3,1%) làm tăng nhẹ mức độ apoptosis dòng tế bào MCF7 với tỷ lệ 13,5 ± 2,7% Như vậy, thấy kết phân tích Flow cytometry cho thấy tương đồng tỷ lệ apoptosis với tỷ lệ kiểu nhân apoptosis (Hình 3) hình tế bào apoptosis Để có đánh giá xác Hình Tác động dịch chiết methanol từ Đìa đụm lên tỷ lệ apoptosis tế bào ung thư gan HepG2 (A) ung thư vú MCF7 (B) DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5924 57 Nguyễn Phú Hùng CS Trong phân tích độc học tế bào, việc xác định chế tác động thuốc tác nhân gây độc tế bào nói chung có ý nghĩa quan trọng, giúp giải thích cho cách thức mà thuốc tác động lên tế bào Apoptosis biết đến cách thức mà tế bào tự chết theo chương trình [9] Cơ chế đảm bảo cân thể trình phát triển, chống lại phát sinh ung thư Chính vậy, việc tìm kiếm tác nhân có khả nhắm đích vào đường tín hiệu apoptosis ln quan tâm việc phát triển liệu pháp chống ung thư [10] Hiệu kháng ung thư nhiều loại thảo dược khác nghiên cứu thông qua khả cảm Kết luận Trong nghiên cứu này, dịch chiết methanol từ Đìa đụm (Heliciopsis lobata) ức chế mạnh tăng sinh tế bào ung thư gan HepG2 so với tế bào ung thư vú MCF7 Dịch chiết methanol làm tăng xuất tế bào có kiểu nhân apoptosis tỷ lệ apoptosis tăng theo chiều tăng nồng độ dịch chiết Tế bào ung thư gan HepG2 nhạy cảm với dịch chiết methanol so với tế bào ung thư vú nồng độ mg/mL Cây Đìa đụm lồi thảo dược có tiềm ức chế tăng sinh tế bào ung thư gan Tài liệu tham khảo ứng trình apoptosis tế bào Điều cho thấy rằng, hợp chất tự nhiên có dịch chiết từ nhiều loại thảo dược khác có khả can thiệp vào điều hịa chu kỳ tế bào, đưa tế bào ung thư kiểm sốt phân chia vào chu trình chết apoptosis [11] Helicia nilagirica loài họ Proteaceae với Đìa đụm đánh giá có khả kìm hãm phát triển khối u chuột, đồng thời thúc đẩy trình apoptosis tế bào khối u [12] Mặc dù biết đến loại thảo dược có giá trị y học, đặc biệt tế bào gan qua kinh nghiệm địa, tác động dịch chiết Đìa đụm lên tế bào ung thư nói chung khả cảm ứng apoptosis nói riêng cịn nghiên cứu Ngồi ra, nghiên cứu cho thấy rằng, dịch chiết methanol tổng thể từ Đìa đụm sở để tiếp tục phân tách, tinh chế, thu nhận hợp chất tinh khiết đánh giá hiệu kháng ung thư hợp chất Kết nghiên cứu cho thấy rằng, dịch chiết methanol từ Đìa đụm thúc đẩy mạnh trình apoptosis chế dẫn tới kìm hãm trình tăng sinh đối tế bào ung thư 58 Bray F, Ferlay J, Soerjomataram I, Siegel RL, Torre LA, Jemal A Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries CA: A Cancer Journal for Clinicians 2018;68(6):394-424 Lichota A, Gwozdzinski K Anticancer Activity of Natural Compounds from Plant and Marine Environment International Journal of Molecular Sciences 2018;19(11):3533 Li D, Liu M-S, Li Z-L, Kang S-L, Hua H-M Studies on chemical constituents of Heliciopsis lobata II China Journal of Chinese Materia Medica 2008;33(4):409-511 Feng J, Chen X, Wang Y, Du Y, Sun Q, Zang W, et al Myricetin inhibits proliferation and induces apoptosis and cell cycle arrest in gastric cancer cells Molecular and Cellular Biochemistry 2015 06 27;408(1-2):163-170 Man X, Yang L, Liu S, Yang L, Li M, Fu Q Arbutin promotes MC3T3‑E1 mouse osteoblast precursor cell proliferation and differentiation via the Wnt/β‑catenin signaling pathway Molecular Medicine Reports 2019;19(6):4637-4644 Riccardi C, Nicoletti I Analysis of apoptosis by propidium iodide staining and flow cytometry Nature Protocols 2006;1(3):1458-1461 Qi W-Y, Ou N, Wu X-D, Xu H-M New arbutin derivatives from the leaves of Heliciopsis lobata with cytotoxicity Chinese Journal of Natural Medicines 2016;14(10):789-93 Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 51–59, 2021 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 He Q-Q, Liu M-S, Jin D-J, Kong L-Y Phenolic glycosides from leaves of Hopiciopsis lobata: Note Journal of Asian Natural Products Research 2006;8(4):373-377 11 Safarzadeh E, Sandoghchian Shotorbani S, Baradaran B Herbal Medicine as Inducers of Apoptosis in Cancer Treatment Advanced Pharmaceutical Bulletin 2014;4(5):421-427 Elmore S Apoptosis: A Review of Programmed Cell Death Toxicol Pathol 2007;35(4):495-516 12 Jagetia GC Anticancer activity of Helicia nilagirica bedd in mice transplanted with Dalton’s lymphoma International Journal of Complementary & Alternative Medicine 2018;11(2):112-123 10 Carneiro BA, El-Deiry WS Targeting apoptosis in cancer therapy Clinical Oncology 2020;17(7):395417 DOI: https://doi.org/10.1038/s41571-020-0341-y DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5924 59 ... cứu cho thấy rằng, tế bào ung Hình Ảnh hưởng ức chế dịch chiết methanol Đìa đụm lên tăng sinh tế bào ung thư gan HepG2 (A, B) tế bào ung thư vú MCF7 (C, D) Tế bào xử lý với dịch chiết nồng độ khác... tế bào ung thư gan HepG2 so với tế bào ung thư vú MCF7 Dịch chiết methanol làm tăng xuất tế bào có kiểu nhân apoptosis tỷ lệ apoptosis tăng theo chiều tăng nồng độ dịch chiết Tế bào ung thư gan. .. ảnh hưởng lên tăng sinh tế bào ung sau tách chiết hạn chế Từ kết thư gan HepG2 tế bào ung thư vú MCF7 Sau 48 phân tích tác động lên tăng sinh dịch h nuôi cấy, tốc độ tăng sinh tế bào có khác chiết