Bài viết được tiến hành nhằm tìm ra loại dịch trích thực vật có hiệu quả ức chế căn bệnh này. Dịch trích củ tỏi, lá mù u và lá dừa cạn đã được sử dụng dưới dạng dịch trích đơn thuần và dịch trích kết hợp với dung dịch kẽm acetate 1 mM.
Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 97–106, 2021 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 KHẢ NĂNG KÍCH KHÁNG BỆNH CHÁY BÌA LÁ LÚA CỦA HAI LOẠI DỊCH TRÍCH THỰC VẬT Ở KHÍA CẠNH MƠ HỌC Lê Thanh Tồn*, Văng Viết Bình Khoa Nơng nghiệp, Trường Đại học Cần Thơ, Đường 3/2, Ninh Kiều, Cần Thơ, Việt Nam * Tác giả liên hệ Lê Thanh Toàn (Ngày nhận bài: 28-04-2020; Ngày chấp nhận đăng: 05-09-2020) Tóm tắt Cháy bìa bệnh vi khuẩn gây hại nghiêm trọng hầu trồng lúa giới Do đó, nghiên cứu thực nhằm tìm loại dịch trích thực vật có hiệu ức chế bệnh Dịch trích củ tỏi, mù u dừa cạn sử dụng dạng dịch trích đơn dịch trích kết hợp với dung dịch kẽm acetate mM Trong điều kiện in vitro, dịch trích dừa cạn dịch trích dừa cạn kết hợp kẽm acetate cho hiệu ức chế phát triển khuẩn lạc Xanthomonas oryzae pv oryzae 24,32 100% Ở điều kiện nhà lưới, xử lý dịch trích dừa cạn thơng qua áo hạt phun lên tán lúa 15, 30 45 ngày sau gieo giúp kích thích tế bào lúa tổng hợp polyphenol kháng khuẩn sớm kéo dài đến 96 h sau lây bệnh Thời gian giảm bệnh lúa sau xử lý dịch trích kéo dài đến 14 ngày sau lây bệnh Ở thời điểm này, mật số vi khuẩn gây bệnh lúa xử lý dịch trích thấp so với đối chứng khơng xử lý Từ khóa: cháy bìa lá, dịch trích, dừa cạn, lúa, Xanthomonas oryzae Plant extracts against rice leaf blight from histopathological aspect Le Thanh Toan*, Vang Viet Binh College of Agriculture, Can Tho University, 3/2 St., Ninh Kieu, Can Tho, Vietnam * Correspondence to Le Thanh Toan (Received: 28 April 2020; Accepted: 05 September 2020) Abstract Leaf blight is one of the most severe bacterial diseases in most rice-cultivating countries all over the world Therefore, this research was carried out to seek effective plant extracts for managing this disease The extracts of garlic, tamanu, and periwinkle were utilized as pure and combined with the zinc acetate solution mM Under in vitro conditions, the pure extract of periwinkle and its combination with zinc acetate induces the inhibition efficiency against Xanthomonas oryzae pv oryzae of approximately 24.32 and 100%, respectively In net houses, the seed-soaked and foliar sprayed treatments at 15, 30, and 45 days after growing cause rice plants to produce bactericide polyphenol compounds, and the effect lasts until 96 hours after pathogen inoculation The disease reduction of treated rice leaves lasts to the 14th day after pathogen inoculation At this moment, the pathogen density in treated leaves is lower than that of the control Keywords: plant extract, leaf blight, rice, periwinkle, Xanthomonas oryzae DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5797 97 Lê Thanh Tồn Văng Viết Bình Đặt vấn đề nhận dạng; tín hiệu sau nhận diện chuyển nhanh vào Sự chuyển tín hiệu Lúa (Oryza sativa L.) lương thực quan khác từ chất protein kinase, Ca2+, trọng Việt Nam, đồng thời nguồn cung phosphorylase, phospholypase, ATPase, hydrogen cấp tinh bột cho gần nửa dân số giới [1] peroxide (H2O2), ethylene chất khác Sự Cháy bìa vi khuẩn cháy nấm hai chuyển tín hiệu lưu dẫn đưa đến kích kháng bệnh phổ biến gây hại nghiêm trọng hầu hết lưu dẫn acid salicylic, acid jasmonic, systemin, nước trồng lúa, làm giảm sản lượng từ đến acid béo, ethylene chất khác Các tín hiệu 60% [2, 3] Ở Việt Nam, bệnh gây hại hoạt hóa gen lưu dẫn sản phẩm kích kháng giống lúa mùa trước giống lúa cao sản đến phần không xử lý khác cây, từ [4] Ở đồng sông Cửu Long, tăng cường tổng hợp protein Những PR giống lúa kháng có hiệu phịng trừ bệnh trước protein có khả kháng nấm, kháng vi khuẩn suất khơng cao không cách phân giải màng polysaccharide vách hiệu kháng bệnh trước biến đổi thành tế bào nấm [6] Ngoài ra, số PR protein ức chế phần quần thể vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv phóng thích nảy mầm bào tử, có khả oryzae, nên bệnh cháy bìa bộc phát nặng, kéo dài vách tế bào, làm vách tế bào sinh vụ Hè Thu Thu Đông Bên cạnh trưởng mức, phá vỡ cấu trúc chitin vách tế đó, nơng dân sử dụng loại thuốc trừ vi khuẩn bào vi sinh vật gây hại Bên cạnh đó, số PR có cách bất hợp lý thời gian dài với liều khả phân giải phân tử glucosamine lượng lớn để phịng trị bệnh, làm ảnh hưởng khơng muramic vách tế bào vi khuẩn Các hợp chất tốt đến môi trường, sức khỏe cộng đồng người ký chủ tổng hợp tạo hàng rào bảo tiêu dùng vệ tích tụ callose lignin, tích tụ Vì thế, việc tìm biện pháp quản lý bệnh chất glycoprotein giàu hydropoline vách tế bào, đạt hiệu cao hạn chế việc sử dụng thuốc hóa gia tăng tổng hợp polypeptide, gia tăng học nhu cầu cấp thiết Một enzyme thủy phân chitinase gia tăng tích biện pháp quản lý bệnh đạt hiệu hạn lũy glycoprotein giàu hydroxyproline [7] Trong chế việc sử dụng thuốc hóa học sử dụng dịch trình trồng kháng bệnh, polyphenol tích trích thực vật tác nhân sinh học Dịch trích lũy nhanh sau trồng bị nấm bệnh xâm thực vật tác nhân sinh học tạo tín nhiễm hình thành thông qua biến đổi hiệu chất kích thích tổng hợp nhóm phenylpropanoid Các polyphenol có vai trị tín hiệu Các tín hiệu dịng ion hay tín phản ứng tự vệ trồng chúng gây hiệu điện tử Sau xuất hiện, tín hiệu độc với mầm bệnh hầu hết phytoalexin có di chuyển nhanh làm hoạt hóa gen nguồn gốc từ phenol Bên cạnh đó, hợp chất lưu dẫn đến phần không xử lý khác cây, từ phenol tham gia vào thay đổi vách tế tăng cường tổng hợp protein có tính gây bào làm cho chúng trở nên kháng bệnh gọi PR protein (pathogenesis-related enzyme phân hủy vách tế bào mầm bệnh tiết protein) [5] Khi trồng mầm bệnh tiếp xúc Khi có có mặt mầm bệnh, hợp chất hình nhau, trồng nhận biết có mặt mầm bệnh thành nhanh xung quanh vị trí xâm nhiễm hạn nhờ phóng thích chất glycoprotein, chế xâm nhiễm mầm bệnh phản ứng carbohydrate, acid béo, peptide oligosaccharide tự chết nhanh tế bào (phản ứng siêu nhạy cảm, mầm bệnh [5] Các chất hoạt động HR) [8] chất mồi, có nguồn gốc từ mầm bệnh ký chủ 98 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 97–106, 2021 Một số nghiên cứu sử dụng dịch trích thực vật bệnh lúa thực Nguyễn polyphenol, giảm mật số mầm bệnh giảm chiều dài vết bệnh Chí Cương [9] cho biết số dịch trích thực vật có khả kháng lại bệnh cháy bìa lúa Nguyễn Phương tiện phương pháp 2.1 chế phát triển vết bệnh đốm vằn có khả Nguồn vi khuẩn, giống lúa loại dịch trích giảm tương đối chiều dài vết bệnh cháy bìa từ Vi khuẩn, Xanthomonas oryzae pv oryzae 19,1 đến 37,8% so với đối chứng khơng kích kháng (Xoo), với độc tính cao Phịng thí nghiệm Phịng Như vậy, đa số nghiên cứu dịch trích thực vật trừ Sinh học, Bộ môn Bảo vệ Thực vật, Khoa Nông đánh giá hiệu giảm vết bệnh lúa, nghiệp, Trường Đại học Cần Thơ cung cấp Giống chưa khảo sát tích tụ phenol mật số mầm lúa sử dụng nghiên cứu Jasmine bệnh có mặt lúa 85 Dịch trích từ củ tỏi (Allium sativum), dừa cạn Ngọc Thiều [10] cho thấy việc ngâm hạt lúa với dịch trích cỏ cứt lợn (cỏ hơi) 4% có khả hạn Các kết nghiên cứu họ bầu bí (Catharanthus roseus) mù u (Calophyllum cho thấy tích tụ hợp chất phenol có liên quan inophyllum) [13-15] sử dụng nghiên đến phản ứng tự vệ kích kháng dưa cứu leo Thực vật xử lý kích kháng với acibenzolar-S-methyl có khả kháng lại nấm hàm lượng tế bào phát sáng cao vị trí nấm bắt Đánh giá hiệu loại dịch trích thực vật Xanthomonas oryzae pv oryzae điều kiện in vitro đầu xâm nhiễm [12] Tương tự, xử lý kích Thí nghiệm bố trí theo thể thức hồn kháng bệnh thán thư nấm Coletotrichum toàn ngẫu nhiên gồm tám nghiệm thức (Bảng 1) với lagenarium gây dưa leo, Lê Minh Châu [12] bốn lần lặp lại Nghiệm thức đối chứng môi ghi nhận chất CaCl2, chitosan CuCl2 kích trường King’s B khơng chứa dịch trích Nhân mật thích tế bào gia tăng tổng hợp hợp chất phenol số Vi khuẩn Xoo môi trường King’s B Thu thời điểm 96 h sau lây bệnh huyền phù vi khuẩn sau 48 h ni cấy pha lỗng Pythium ultimum Sự giảm bệnh liên quan tới 2.2 Do đó, nghiên cứu thực nhằm với nước cất trùng Đo độ đục huyền tìm loại dịch trích giúp lúa chống chịu phù máy đo quang phổ bước sóng λ 600 nm tốt bệnh cháy bìa thơng qua đặc điểm tổng hợp OD có giá trị 0,3, tương ứng với mật số vi khuẩn khoảng 1×108 cfu/mL Bảng Các nghiệm thức sử dụng thí nghiệm in vitro Tên nghiệm thức Nồng độ Dịch trích củ tỏi 1,66% tỏi Dịch trích củ tỏi có xử lý với kẽm acetate 1,66% tỏi + 1,66 mM kẽm acetate Dịch trích mù u 1,66% mù u Dịch trích mù u có xử lý với kẽm acetate 1,66% mù u + 1,66 mM kẽm acetate Dịch trích dừa cạn 1,66% dừa cạn Dịch trích dừa cạn có xử lý với kẽm acetate 1,66% dừa cạn + 1,66 mM kẽm acetate Kẽm acetate 1,66 mM kẽm acetate Đối chứng Môi trường King’s B DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5797 99 Lê Thanh Toàn Văng Viết Bình Mẫu thực vật sau thu rửa Thí nghiệm thực hai lần, với điều nước cất để khô tự nhiên (khoảng 12–14 kiện tương tự Từ kết thí nghiệm, dịch ngày) Đối với nghiệm thức sử dụng dịch trích trích thực vật cho hiệu cao chọn để thực vật, thực vật khô nghiền mịn chày thực thí nghiệm cối, thêm nước cất, chưng cách thủy 62 °C thực vật khô nghiền mịn chày cối, Đánh giá hiệu giảm bệnh cháy bìa tích tụ polyphenol tế bào lúa xử lý điều kiện nhà lưới thêm nước cất, chưng cách thủy 62 °C 15 Thí nghiệm bố trí theo thể thức hồn min, khuấy Lọc lấy dịch trích thêm 10 mL tồn ngẫu nhiên, gồm tám nghiệm thức (Bảng 2) dung dịch kẽm acetate, khuấy h (bố với bốn lần lặp lại Mỗi lượt thí nghiệm chậu sung phương pháp từ [13, 14]) Sau đó, nấu tan 50 với hai cây/chậu 15 min, khuấy Đối với nghiệm thức sử 2.3 dụng dịch trích thực vật có xử lý với kẽm acetate: mL mơi trường PDA lị vi sóng Khi chai mơi Huyền phù vi khuẩn dịch trích thực vật trường đạt nhiệt độ 55–60 °C đưa lượng dịch áp dụng tương tự thí nghiệm Mục 2.2 trích hóa chất thích hợp chuẩn bị vào chai, Lấy kg đất cho vào chậu nhựa trồng với lắc cho mơi trường để hịa tan vào mơi trường đường kính 35 cm; bón lót trước gieo Ngâm Sau đó, chuyển mơi trường chai vào đĩa hạt lúa nước ba sôi hai lạnh 30 Hạt Petri dispenser với lượng 10 mL môi lúa ủ 48 h giấy thấm ướt, để trường/đĩa Sau môi trường đặc lại, mL huyền buồng tối Bốn hạt lúa nẩy mầm tốt gieo phù vi khuẩn Xoo với mật số 1×108 cfu/mL vào bốn góc chậu nhựa trồng cho vào đĩa Petri dùng que chà vi khuẩn chuẩn bị đất Bón phân theo cơng thức 120N- inox để chà, giúp vi khuẩn phân bố khắp bề 40P2O5-30K2O [16] Khi 50 ngày tuổi mặt đĩa Petri Các đĩa Petri thí nghiệm đặt tiến hành lây bệnh nhân tạo phương pháp cắt nhiệt độ phòng Số lượng diện tích khuẩn lạc chóp lá, khoảng cm từ chóp Trên lúa, 12 vi khuẩn Xoo ghi nhận vào thời điểm nở hoàn toàn chọn để cắt chóp (hai để 1, 3, ngày sau cấy (NSKC) Hiệu ức thu mẫu thời điểm 0, 24, 48, 72 96 h; hai chế dịch trích tính theo cơng thức (1) để ghi nhận tiêu bệnh) Các lúa sau lây HQUC = KLđc −KL𝑖 KLđc × 100% (1) bệnh để phòng lây bệnh nhân tạo, giữ 36 h tối độ ẩm tương đối khoảng 98%, HQUC hiệu ức chế dịch trích; điều chỉnh nhiệt độ 25 °C Sau đó, chuyển KLđc số lượng khuẩn lạc nghiệm thức đối chậu thí nghiệm nhà phun sương 30 chứng nước cất; KLi số lượng khuẩn lạc phun lần; che mát 50% nhằm giúp cho bệnh nghiệm thức dịch trích phát triển Bảng Các nghiệm thức sử dụng thí nghiệm nhà lưới Nghiệm thức Cách kích thích tính kháng Lây nhiễm bệnh Dịch trích dừa cạn Áo hạt, phun lên tán 15, 30 45 ngày sau gieo (NSG) Có Dịch trích dừa cạn Áo hạt, phun lên tán 15, 30 45 NSG Khơng Dịch trích dừa cạn với kẽm acetate Áo hạt, phun lên tán 15, 30 45 NSG Có Dịch trích dừa cạn với kẽm acetate Áo hạt, phun lên tán 15, 30 45 NSG Không Salicylic acid mM Áo hạt, phun lên tán 15, 30 45 NSG Có 100 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 97–106, 2021 Nghiệm thức Cách kích thích tính kháng Lây nhiễm bệnh Salicylic acid mM Áo hạt, phun lên tán 15, 30 45 NSG Không Đối chứng Phun nước cất trùng Có Đối chứng Phun nước cất trùng Khơng Mẫu để khảo sát tích tụ phenol phenol tích tụ lá, mật số vi khuẩn g thu thời điểm 0, 24, 48, 72 96 h sau lây lúa số bệnh Tính hiệu giảm bệnh so với nhiễm bệnh (GSLB) Lá lúa tẩy diệp lục tố đối chứng theo công thức (2) dung dịch ethanol/acetic acid (3:1, v/v) Giấy HQGB = thấm dung dịch ethanol/acetic acid thay TLNB𝑖đc −TLNB𝑖 TLNB𝑖đc × 100% (2) ngày mẫu không màu xanh diệp lục tố Cuối cùng, mẫu chuyển sang 2.4 Phân tích số liệu nước cất giờ, giữ lactoglycerol Số liệu xử lý phần mềm Excel (lactic acid/glycerin/nước cất với tỉ lệ 1:1:1, v/v/v) chạy thống kê phần mềm SPSS 16.0 qua kiểm đến quan sát Nhuộm mẫu Toluidine Blue định Duncan O (0,05%, pH 6,8) 60 °C [17] quan sát kính hiển vi thường Quan sát hai Kết thảo luận 3.1 phenol tích tụ (tế bào có màu xanh cây) theo ba Hiệu loại dịch trích thực vật vi khuẩn Xoo điều kiện in vitro mức độ: (+) tế bào màu xanh nhạt, (++) tế bào Cả ba nghiệm thức dịch trích mù u với màu xanh trung bình, (+++) tế bào màu xanh kẽm acetate, dịch trích dừa cạn với kẽm actate sậm [18] Ở 14 ngày sau lây bệnh (NSLB), ghi dịch trích tỏi với kẽm acetate cho hiệu nhận cấp bệnh hại hai lúa lại giảm mật số tương đương nghiệm thức kẽm lây bệnh nhân tạo theo thang đánh giá acetate, khơng cịn khuẩn lạc đĩa Petri Các kết cấp bệnh Ezuka Horino [trích dẫn từ 19] Tại khác biệt có ý nghĩa thống kê so với đối 14 NSLB, thu lây bệnh nhân tạo, lấy g chứng Số liệu Bảng cho thấy dịch trích lúa nghiền thật kỹ; cho vào ống nghiệm chứa dừa cạn cho hiệu tốt, giúp giảm mật số xuống mL nước cất dung dịch Tween 80 (1‰) lắc 5,6×103 vi khuẩn, thấp có ý nghĩa so nghiệm máy lắc tự động; vớt bỏ xác bã lúa Sử thức đối chứng nước 7,4×103 vi khuẩn Các dịch dụng phương pháp pha loãng chà huyền phù vi trích thực vật cịn lại cho cho mật số vi khuẩn khác khuẩn đĩa Petri để xác định mật số vi khuẩn biệt không ý nghĩa so với đối chứng (Bảng 3) nghiệm thức; quan sát tế bào vùng thịt phần chóp Đồng thời, ghi nhận tiêu Các tiêu ghi nhận bao gồm mức độ Bảng Mật số vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae điều kiện in vitro Nghiệm thức Mật số vi khuẩn đĩa Petri (×103 khuẩn lạc) Dịch trích củ tỏi 6,90a Dịch trích củ tỏi với kẽm acetate 0,00c Dịch trích mù u 7,10a Dịch trích mù u với kẽm acetate 0,00c DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5797 101 Lê Thanh Toàn Văng Viết Bình Nghiệm thức 1/ Mật số vi khuẩn đĩa Petri (×103 khuẩn lạc) Dịch trích dừa cạn 5,60b Dịch trích dừa cạn với kẽm acetate 0,00c Kẽm acetate 1,67 mM 0,00c Đối chứng nước cất 7,40a Mức ý nghĩa ** CV (%) 7,96 Trong cột, số có chữ theo sau khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê mức 1% qua kiểm định Duncan Trong đó, diện tích khuẩn lạc nghiệm thức xử lý dịch trích dừa cạn nhỏ Các nghiệm thức xử lý dịch trích với kẽm acetate cho thấy khả ức chế hiệu phát triển khuẩn lạc Xoo Diện tích khuẩn lạc nghiệm thức dịch tỏi với kẽm acetate, mù u với kẽm acetate, dừa cạn với kẽm acetate nghiệm thức kẽm acetate 5,49, 3,66, 3,08 3,74 đơn vị diện tích, thấp có ý nghĩa so với đối chứng (5,89) Nếu so sánh nghiệm thức khác dịch trích dừa cạn với kẽm acetate cho hiệu tốt (Hình 1) Như vậy, hai nghiệm thức dịch trích dừa cạn dịch trích dừa cạn với kẽm acetate chọn để tiếp tục đánh giá hiệu giảm bệnh cháy bìa tích tụ polyphenol điều kiện nhà lưới Ở tiêu tổng diện tích khuẩn lạc đĩa Petri, nghiệm thức xử lý dịch trích dừa cạn, mù u, tỏi cho tổng diện tích khuẩn lạc tương đương khơng có khác biệt ý nghĩa so đối chứng Các nghiệm thức dừa cạn với kẽm acetate, mù u với kẽm acetate, tỏi với kẽm acetate có tổng diện tích khuẩn lạc thấp so với nghiệm thức kẽm acetate có khác biệt ý nghĩa so với nghiệm thức đối chứng (Bảng 4) Ở thời điểm ngày, nghiệm thức xử lý dịch trích có tổng diện tích khuẩn lạc đạt khoảng 5,83–5,93 (đơn vị diện tích), khác biệt không ý nghĩa mặt thống kê so với đối chứng Bảng Tổng diện tích khuẩn lạc vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv oryzae điều kiện in vitro Tổng diện tích khuẩn lạc (đơn vị diện tích) Nghiệm thức Ngày 1/ Ngày 1/ Ngày 1/ Ngày 1/ Dịch trích củ tỏi 5,83c 5,89d 5,90e 5,87d Dịch trích củ tỏi với kẽm acetate 2,29a 5,24c 5,45d 5,49c Dịch trích mù u 5,65c 5,77d 5,91e 5,95d Dịch trích mù u với kẽm acetate 2,62a 2,68a 3,03b 3,66b Dịch trích dừa cạn 5,61c 5,65d 5,79e 5,83d Dịch trích dừa cạn với kẽm acetate 2,50a 2,53a 2,87a 3,08a Kẽm acetate 1,67 mM 3,32b 3,58b 3,63c 3,74b Đối chứng nước cất 5,79c 5,83d 5,87e 5,89d * * * 5,84 5,18 2,28 Mức ý nghĩa CV (%) * 1,57 Trong cột, số có chữ theo sau khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê mức 5% qua kiểm định Duncan 1/ 102 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 97–106, 2021 3.2 Hiệu giảm bệnh cháy bìa tích tụ polyphenol xử lý với dịch trích điều kiện nhà lưới nghiệm thức SA (đối chứng dương) dịch trích Sự tổng hợp polyphenol quan sát cho kết tổng hợp polyphenol thấp Đối kính hiển vi quang học sau lúa xử lý chứng dương ghi nhận giúp lúa có khả với dịch trích dừa cạn (có lây bệnh–CLB tổng hợp polyphenol sớm [18] Kết khơng lây bệnh–KLB), dịch trích dừa cạn với SA tương tự xử lý dưa leo giúp kẽm acetate (CLB KLB) thời điểm 24, 48, kháng lại bệnh thán thư nấm Colletotrichum spp 72 96 GSLB Sự tổng hợp polyphenol thể [12] Đến thời điểm 48 GSLB, hai nghiệm thức dừa màu xanh vùng tế bào liền kề vị cạn CLB nghiệm thức SA CLB cho thấy tổng trí cắt chóp lây bệnh nhuộm với Toluidine hợp polyphenol tăng lên, đạt cấp ++, Blue O 12,50 25,00% Các nghiệm thức có lây bệnh Số liệu Bảng cho thấy CLB cho phản ứng tổng hợp polyphenol sớm không lây bệnh Tại thời điểm 24 GSLB, nghiệm thức dịch trích dừa cạn KLB, dịch trích dừa cạn với kẽm acetate KLB, acid salicylic KLB đối chứng nước KLB chưa thấy xuất polyphenol Trong nghiệm thức có lây bệnh, dừa cạn cho hiệu tổng hợp polyphenol cao, nghiệm thức dừa cạn với kẽm acetate đối chứng lại đạt cấp + Trong đó, nghiệm thức KLB khơng cho thấy tổng hợp polyphenol có đạt mức + với tỉ lệ thấp (Bảng 5) Tại thời điểm 72 GSLB, tổng hợp polyphenol nghiệm thức SA CLB đạt mức +++ với tỉ lệ thấp Đến thời điểm quan sát cuối (96 GSLB), tất nghiệm thức KLB có số A B C D Hình Hiệu in vitro dịch trích thực vật NSKC A Nghiệm thức dừa cạn; B Nghiệm thức dừa cạn với kẽm acetate; C Nghiệm thức kẽm acetate; D Đối chứng nước cất DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5797 103 Lê Thanh Toàn Văng Viết Bình polyphenol đạt mức + Các nghiệm thức có xử tổng hợp polyphenol cao tế bào tăng dần lý với SA dịch trích cho tổng hợp phenol so với nghiệm thức đối chứng nước cất Kết cao đạt mức ++, có khác biệt với đối chứng CLB tương tự ghi nhận xử lý kích kháng Nghiệm thức dừa cạn CLB SA cho tổng hợp lúa để chống lại nấm Pyricularia grisea gây bệnh polyphenol cao đạt mức +++ (Bảng 6) Như vậy, SA, cháy [18] dừa cạn dừa cạn với kẽm acetate cho Bảng Khảo sát phần trăm tổng hợp phenol theo cấp +, ++, +++ thời điểm 24 48 h 24 h 48 h + + ++ Dừa cạn có lây bệnh 37,50a 50,00a 12,50b Dừa cạn không lây bệnh 0,00d 12,50bc 0,00c Dừa cạn kẽm có lây bệnh 12,50c 62,50a 0,00c 0,00d 0,00c 0,00c Salicylic acid có lây bệnh 50,00a 50,00a 25,00a Salicylic acid khơng lây bệnh 0,00d 12,50bc 0,00c Đối chứng có lây bệnh 12,50c 25,00b 0,00c Đối chứng không lây bệnh 0,00d 0,00c 0,00c Mức ý nghĩa ** ** ** CV (%) 14,76 29,77 4,32 Nghiệm thức Dừa cạn kẽm không lây bệnh 1/ Trong cột, số có chữ theo sau khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê mức 1% qua kiểm định Duncan Bảng Khảo sát phần trăm tổng hợp phenol theo cấp +, ++, +++ thời điểm 72 96 h 72 h 96 h Nghiệm thức 1/ + ++ +++ + ++ +++ Dừa cạn có lây bệnh 37,50a 12,50a 0,00b 25,00b 25,00b 12,50a Dừa cạn không lây bệnh 25,00b 12,50a 0,00b 25,00b 0,00d 0,00b Dừa cạn kẽm có lây bệnh 37,50a 12,50a 0,00b 12,50c 37,50a 0,00b Dừa cạn kẽm không lây bệnh 0,00d 0,00b 0,00b 37,50a 0,00d 0,00b Salicylic acid có lây bệnh 50,00a 0,00b 12,50a 37,50a 37,50a 0,00b Salicylic acid không lây bệnh 37,50a 0,00b 0,00b 0,00d 0,00d 0,00b Đối chứng có lây bệnh 12,50c 0,00b 0,00b 37,50a 12,50c 0,00b Đối chứng không lây bệnh 0,00d 0,00b 0,00b 37,50a 0,00d 0,00b Mức ý nghĩa ** ** ** ** ** ** CV (%) 8,96 23,71 4,08 7,67 2,90 4,08 Trong cột, số có chữ theo sau khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê mức 1% qua kiểm định Duncan 104 pISSN 1859-1388 eISSN 2615-9678 Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên Tập 130, Số 1A, 97–106, 2021 Sự tổng hợp polyphenol xảy nghĩa thống kê thấp nhiều so với đối chứng lúa bị mầm bệnh công Đây hợp chất kháng Trong đó, nghiệm thức xử lý với dịch dừa cạn nấm kháng khuẩn trồng Sự tổng hợp cho mật số thấp (7,20×103) thấp SA polyphenol có liên quan đến phản ứng siêu nhạy (18,60×103) Nghiệm thức dịch dừa cạn với kẽm cảm phát sáng tế bào Các polyphenol tích tụ acetate cho hiệu giảm mật số, đạt tế bào có phản ứng siêu nhạy cảm với 31,30×103 vi khuẩn (Bảng 7) tích tụ H2O2 phytoalexin, phản ứng tự vệ có hiệu nhiều loại trồng kháng bệnh Kết luận đề nghị Như vậy, tổng hợp polyphenol giai đoạn sớm tế bào lúa sau lây nhiễm vi khuẩn Xoo Trong loại dịch trích củ tỏi, mù u liên quan đến việc gia tăng chống chịu bệnh dừa cạn, sử dụng đơn kết hợp kẽm cháy bìa lúa Hiệu giảm vết bệnh acetate 1,67 mM, nghiệm thức dịch trích dừa cạn cháy bìa lúa tiếp tục đánh giá 14 nghiệm thức dịch trích dừa cạn với kẽm NSLB Kết cho thấy số bệnh ba nghiệm acetate thể khả hạn chế phát triển thức xử lý thấp có ý nghĩa so với đối chứng vi khuẩn Xoo điều kiện in vitro Hai nghiệm Trong đó, nghiệm thức SA cho số bệnh thấp thức xử lý giúp lúa gia tăng tổng hợp (53,57%); hai nghiệm thức dịch trích dừa polyphenol vào thời điểm từ 24 đến 96 cạn dừa cạn với kẽm acetate có số bệnh lần GSLB, góp phần ức chế phát triển vết bệnh cháy lượt 64,29 69,68% Các nghiệm thức cho bìa giảm mật số vi khuẩn Xoo 14 hiệu giảm bệnh tốt, nghiệm thức xử NSLB Các chế kháng bệnh hình thành lý với SA dịch trích dừa cạn cho hiệu cấu trúc papillae, phát sáng tế bào, tổng hợp giảm bệnh cao, tương tự mặt thống kê phytoalexin, tổng hợp H2O2, callose hay Nghiệm thức xử lý dịch trích dừa cạn với kẽm lignin hóa tế bào thực acetate cho hiệu giảm bệnh thấp (17,10%) nghiên cứu Ngoài ra, hiệu (Bảng 7) Mật số vi khuẩn g thời điểm loại dịch trích đánh giá điều kiện 14 NSLB nghiệm thức khác biệt có ý đồng Bảng Hiệu giảm bệnh cháy bìa mật số vi khuẩn Xoo lúa 14 ngày sau lây bệnh Nghiệm thức Chỉ số bệnh Hiệu giảm bệnh Mật số vi khuẩn (×103 vi khuẩn) Dịch trích dừa cạn 64,29b 23,40a 7,20d Dịch trích dừa cạn với kẽm acetate 69,68b 17,10b 31,30b Salicylic acid 53,57c 36,17a 18,60c Đối chứng 83,93a 0,00c 126,30a Mức ý nghĩa ** ** ** CV (%) 7,09 11,51 4,19 Trong cột, số có chữ theo sau khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê mức 1% qua kiểm định Duncan DOI: 10.26459/hueunijns.v130i1A.5797 105 Lê Thanh Toàn Văng Viết Bình Tài liệu tham khảo Vũ NQH, Hồng HTK Đặc điểm sinh trưởng suất giống lúa Đài Thơm vụ Đông Xuân 2017-2018 Thừa Thiên Huế Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên 2018;127(1C):171-179 Tề LL Trồng trọt (tập 2) Hà Nội (VN): Nhà xuất Giáo dục; 2000 147 p Hải NTT, Phương TNM, Thủy NTT, Hòa TT Tổng hợp vật liệu nano bạc đánh giá khả kháng nấm Pyricularia oryzae gây bệnh đạo ôn lúa Tạp chí Khoa học Đại học Huế: Khoa học Tự nhiên 2019;128(1C):69-76 Tề LL, Mân VT Bệnh vi khuẩn virus hại trồng Hà Nội (VN): Nhà xuất Giáo dục; 1999 207 p Walters D, Newton A, Lyon G Induced resistance for plant defence, 2nd ed New Jersey (USA): WileyBlackwell; 2014 331 p Kim PV Các nguyên lý bệnh hại trồng Cần Thơ (VN): Trường Đại học Cần Thơ; 2000 190 p Agrios GN Plant Pathology Massachusetts (US): Academic Press; 2005 p 93-142 Thuy TTT Infection biology of Bipolaris oryzae in Mekong Delta of Vietnam [dissertation] Copenhagen: The Royal Veterinary and Agricultural University Department of Plant Biology Plant Pathology section; 2002 121 p Cương NC Bước đầu đánh giá hiệu kích kháng lưu dẫn chống lại bệnh cháy lúa (Pyricuaria grisea (Cooke) Sacc) số dịch trích từ thực vật Cần Thơ (VN): Trường Đại học Cần Thơ; 2002 51 p 10 Thiều NN Khảo sát khả kích kháng lưu dẫn số loại dịch trích thực vật bệnh đốm vằn nấm Rhizoctonia solani Kuhn lúa Cần Thơ (VN): Trường Đại học Cần Thơ; 2008 40 p 11 Vân NTK Khảo sát kích thích tính kháng bệnh thán thư (Colletotrichum sp) ớt salisylic acid, 106 clorua đồng monopotassum phosphate khía cạnh mơ học [luận văn] Cần Thơ: Trường Đại học Cần Thơ 2008 82 p 12 Châu LM Khảo sát mô học khả kích kháng số hóa chất bệnh thán thư nấm Colletotrichum lagenarium dưa leo (Cucumis sativus L.) Cần Thơ: Trường Đại học Cần Thơ 2007 66 p 13 Bhumi G, Savithramma N Biological synthesis of zinc oxide nanoparticles from Catharanthus roseus (L.) G Don leaf extract and validation for antibacterial activity International Journal of Drug Development and Research 2014;6(1):208-214 14 Jamdagni P, Khatri P, Rana JS Green synthesis of zinc oxide nanoparticles using flower extract of Nyctanthes arbor-tristis and their antifungal activity Journal of King Saud University – Science 2016;30: 168-175 15 Raut S, Thorat DPV, Thakre R Green synthesis of zinc oxide (ZnO) nanoparticles using Ocimum tenuiflorum leaves International Journal of Science and Research (IJSR) 2013;4/5:1225-1228 16 Đệ NN Giáo trình lúa Cần Thơ: Trường Đại học Cần Thơ; 2008 187 p 17 Neergaard ED Methods in botanical histopathology Denmark: Danish Government Institute of Seed Pathology for Developing Countries; 1997 191 p 18 Châu HM Sinh học xâm nhiễm nấm Pyricularia grisea lúa khả kích thích tính kháng bệnh cháy lúa cloarua đồng acibenzolar-s-methyl khía cạnh mơ học [luận văn] Cần Thơ: Trường Đại học Cần Thơ; 2003 79 p 19 Koch M Methods for assessing resistance to bacterial blight In: International Rice Research Institute Bacterial blight of rice: Proceedings of the International Workshop on bacterial blight of rice Manila (Philippines): International Rice Research Institute; 1989 p 114 ... sử dụng dịch trích thực vật bệnh lúa thực Nguyễn polyphenol, giảm mật số mầm bệnh giảm chiều dài vết bệnh Chí Cương [9] cho biết số dịch trích thực vật có khả kháng lại bệnh cháy bìa lúa Nguyễn... hiệu kích kháng lưu dẫn chống lại bệnh cháy lúa (Pyricuaria grisea (Cooke) Sacc) số dịch trích từ thực vật Cần Thơ (VN): Trường Đại học Cần Thơ; 2002 51 p 10 Thiều NN Khảo sát khả kích kháng. .. cứu dịch trích thực vật trừ Sinh học, Bộ môn Bảo vệ Thực vật, Khoa Nông đánh giá hiệu giảm vết bệnh lúa, nghiệp, Trường Đại học Cần Thơ cung cấp Giống chưa khảo sát tích tụ phenol mật số mầm lúa