Xây dựng quy trình điều chế cao khô sấy phun ngải trắng (curcuma aromatica salisb zingiberaceae)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN ĐĂNG KHOA XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐIỀU CHẾ CAO KHƠ SẤY PHUN NGẢI TRẮNG (CURCUMA AROMATICA SALISB ZINGIBERACEAE) LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC TP Hồ Chí Minh – Năm 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH NGUYỄN ĐĂNG KHOA XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐIỀU CHẾ CAO KHÔ SẤY PHUN NGẢI TRẮNG (CURCUMA AROMATICA SALISB ZINGIBERACEAE) Chuyên ngành : Công Nghệ Dƣợc Phẩm & Bào Chế Mã số : 8720202 GIÁO VIÊN HƢỚNG DẪN: TS NGUYỄN ĐỨC HẠNH TP Hồ Chí Minh – Năm 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan công trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chƣa đƣợc cơng bố cơng trình khác (ký tên ghi rõ họ tên) MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG .vi DANH MỤC HÌNH viii MỞ ĐẦU Chƣơng – TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 NGẢI TRẮNG 1.1.1 Phân loại tên gọi 1.1.2 Phân bố sinh thái đặc điểm thực vật 1.1.3 Bộ phận dùng, thu hái chế biến 1.1.4 Thành phần hóa học 1.1.5 Tác dụng dƣợc lý 1.1.6 Công dụng, cách dùng 1.1.7 Tổng quan zedoarondiol 1.2 PHƢƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT DƢỢC LIỆU 11 1.2.1 Đại cƣơng 11 1.2.2 Phƣơng pháp chiết hồi lƣu nóng 12 1.3 CAO DƢỢC LIỆU 13 1.3.1 Cao thuốc 13 1.3.2 Các phƣơng pháp sản xuất cao khô 15 1.4 CÔNG NGHỆ SẤY PHUN 16 1.4.1 Tổng quan 16 1.4.2 Trang thiết bị 16 1.4.3 Quá trình phun sấy 17 1.4.4 Các yếu tố ảnh hƣởng đến trình sấy phun 18 1.4.5 Ứng dụng công nghệ sấy phun 19 Chƣơng – ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 NGUYÊN LIỆU - HÓA CHẤT - TRANG THIẾT BỊ 21 2.1.1 Nguyên liệu - hóa chất 21 2.1.2 Trang thiết bị 21 2.1.3 Phần mềm 21 i 2.2 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 22 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.3.1 Kiểm nghiệm dƣợc liệu Ngải trắng 22 2.3.2 Xây dựng thẩm định quy trình định lƣợng zedoarondiol dịch chiết Ngải trắng phƣơng pháp HPLC 22 2.3.3 Xây dựng quy trình chiết xuất dƣợc liệu Ngải trắng 26 2.3.4 Xây dựng quy trình sấy phun dịch chiết đậm đặc Ngải trắng 28 2.3.5 Xây dựng thẩm định quy trình định lƣợng zedoarondiol cao khô sấy phun Ngải trắng 31 2.3.6 Xây dựng tiêu chuẩn sở cao khô sấy phun Ngải trắng 34 Chƣơng – KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 36 3.1 KIỂM NGHIỆM DƢỢC LIỆU NGẢI TRẮNG 36 3.2 XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG ZEDOARONDIOL TRONG DỊCH CHIẾT NGẢI TRẮNG 37 3.2.1 Xây dựng quy trình định lƣợng zedoarondiol dịch chiết Ngải trắng 37 3.2.2 Thẩm định quy trình định lƣợng zedoarondiol dịch chiết Ngải trắng 39 3.3 XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT DƢỢC LIỆU NGẢI TRẮNG 44 3.3.1 Sơ khảo sát số lần chiết dƣợc liệu Ngải trắng 44 3.3.2 Thiết kế mơ hình thực nghiệm 45 3.3.3 Tối ƣu hóa điều kiện chiết xuất 47 3.4 XÂY DỰNG QUY TRÌNH SẤY PHUN DỊCH CHIẾT ĐẬM ĐẶC NGẢI TRẮNG 53 3.4.1 Chuẩn bị dịch sấy phun Ngải trắng 53 3.4.2 Khảo sát chọn tá dƣợc độn cho dịch sấy phun Ngải trắng 55 3.4.3 Quy trình điều chế cao khô sấy phun Ngải trắng 55 3.5 XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG ZEDOARONDIOL TRONG CAO KHƠ SẤY PHUN NGẢI TRẮNG 68 3.5.1 Khảo sát dung môi 68 3.5.2 Thẩm định quy trình định lƣợng zedoarondiol cao khô sấy phun Ngải trắng phƣơng pháp HPLC 70 3.6 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CAO KHÔ SẤY PHUN NGẢI TRẮNG 73 3.6.1 Kiểm nghiệm lô cao khô sấy phun Ngải trắng 73 3.6.2 Xây dựng tiêu chuẩn sở cao khô sấy phun Ngải trắng 77 Chƣơng – BÀN LUẬN 81 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 84 TÀI LIỆU THAM KHẢO 85 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Từ viết tắt Từ nguyên ngh 10S Cao Ngải trắng độn 10% colloidal silicon dioxid vào dịch sấy phun 30M Cao Ngải trắng độn 30% maltodextrin vào dịch sấy phun 30S Cao Ngải trắng độn 30% colloidal silicon dioxid vào dịch sấy phun As Asymmetry CSD Colloidal silicon dioxid DĐVN V Dƣợc điển Việt Nam V FDA US Food and Drug Administration Cục quản lý Thực phẩm Dƣợc phẩm Hoa Kỳ HPLC High Performance Liquid Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao N Theoretical plate Số đĩa lý thuyết 10 NC 11 Rs Resolution Độ phân giải 12 RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tƣơng đối 13 S Peak area Diện tích pic 14 SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn 15 SEM Scanning electron microscope Kính hiển vi điện tử quét 16 SKLM Sắc ký lớp mỏng 17 tR Retention time Hệ số bất đối Cao Ngải trắng không độn tá dƣợc vào dịch sấy phun Thời gian lƣu DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Công thức số hợp chất Ngải trắng Bảng 1.2 Chƣơng trình gradient pha động định lƣợng sesquiterpen Curcuma wenyujin 10 Bảng 2.1 Dụng cụ trang thiết bị 21 Bảng 2.2 Khảo sát chƣơng trình dung mơi pha động 23 Bảng 2.3 Nồng độ zedoarondiol khảo sát tính tuyến tính 25 Bảng 2.4 Ý nghĩa mức biến theo thiết kế D-optimal 27 Bảng 2.5 Thiết kế thí nghiệm theo mơ hình D-Optimal 27 Bảng 2.6 Thành phần mẫu dịch sấy phun 29 Bảng 3.1 Kết kiểm nghiệm dƣợc liệu Ngải trắng 37 Bảng 3.2 Tính tƣơng thích hệ thống phƣơng pháp HPLC định lƣợng zedoarondiol dịch chiết Ngải trắng 39 Bảng 3.3 Tƣơng quan nồng độ diện tích đỉnh zedoarondiol 41 Bảng 3.4 Kết xử lý thống kê khảo sát tính tuyến tính phƣơng pháp HPLC định lƣợng zedoarondiol 42 Bảng 3.5 Độ lặp lại phƣơng pháp định lƣợng zedoarondiol dịch chiết Ngải trắng 43 Bảng 3.6 Độ phƣơng pháp định lƣợng zedoarondiol dịch chiết Ngải trắng 43 Bảng 3.7 Sơ khảo sát hiệu suất chiết zedoarondiol hiệu suất chiết cao lần chiết 45 Bảng 3.8 Dữ liệu thực nghiệm hiệu suất chiết cao (Y1) 45 Bảng 3.9 Dữ liệu thực nghiệm hiệu suất chiết zedoarondiol (Y2) 46 Bảng 3.10 Dữ liệu thực nghiệm tổng hợp 46 Bảng 3.11 Tƣơng quan hồi quy phƣơng pháp tối ƣu hóa 47 Bảng 3.12 Điều kiện chiết xuất tối ƣu giá trị dự đoán biến Y 52 Bảng 3.13 So sánh kết dự đoán thực nghiệm kiểm chứng (n=3) 53 Bảng 3.14 So sánh cảm quan mẫu cao khô sấy phun 55 Bảng 3.15 Độ ẩm mẫu cao khô sấy phun 59 Bảng 3.16 Góc nghỉ mẫu cao khô sấy phun 59 i Bảng 3.17 Tốc độ chảy mẫu cao khô sấy phun 60 Bảng 3.18 Tỷ trọng mẫu cao khô sấy phun 61 Bảng 3.19 Chỉ số Carr’s Index mẫu cao khô sấy phun 61 Bảng 3.20 Chỉ số Hausner mẫu cao khô sấy phun 62 Bảng 3.21 Đánh giá khả chảy nguyên liệu theo USP40-NF35 63 Bảng 3.22 Tính hút ẩm mẫu cao khô sấy phun Ngải trắng 65 Bảng 3.23 Khảo sát dung môi chiết zedoarondiol từ cao khô sấy phun Ngải trắng 68 Bảng 3.24 Tỷ lệ cao khô sấy phun:dung môi chiết 69 Bảng 3.25 Tính tƣơng thích hệ thống phƣơng pháp HPLC định lƣợng zedoarondiol cao khô sấy phun Ngải trắng 70 Bảng 3.26 Độ lặp lại phƣơng pháp định lƣợng zedoarondiol cao khô sấy phun Ngải trắng 72 Bảng 3.27 Độ phƣơng pháp định lƣợng zedoarondiol cao khô sấy phun Ngải trắng 72 Bảng 3.28 Độ ẩm lô cao khô sấy phun Ngải trắng 73 Bảng 3.29 Tro tồn phần lơ cao khơ sấy phun Ngải trắng 74 Bảng 3.30 Tro không tan acid lô cao khô sấy phun Ngải trắng 74 Bảng 3.31 Giới hạn kim loại nặng lô cao khô sấy phun Ngải trắng 75 Bảng 3.32 Kết giới hạn nhiễm khuẩn lô cao khô sấy phun Ngải trắng 76 Bảng 3.33 Định lƣợng zedoarondiol lô cao khô sấy phun Ngải trắng 77 i DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Ngải trắng Hình 1.2 Cơng thức cấu tạo zedoarondiol Hình 1.3 Sắc ký đồ HPLC định lƣợng sesquiterpen Curcuma wenyujin 10 Hình 1.4 Q trình kỹ thuật hịa tan chiết xuất 11 Hình 3.1 Bột dƣợc liệu Ngải trắng 36 Hình 3.2 Các cấu tử bột dƣợc liệu Ngải trắng 36 Hình 3.3 Sắc ký đồ HPLC điều kiện khảo sát chƣơng trình dung mơi pha động 38 Hình 3.4 Sắc ký đồ HPLC (a) mẫu trắng, (b) mẫu chuẩn, (c) mẫu thử, (d) mẫu thử thêm chuẩn 40 Hình 3.5 Tƣơng quan nồng độ diện tích đỉnh zedoarondiol 41 Hình 3.6 SKLM dịch chiết Ngải trắng 44 Hình 3.7 Ảnh hƣởng số lần chiết (X1) độ cồn (X3) hiệu suất chiết cao (Y1) 48 Hình 3.8 Ảnh hƣởng số lần chiết (X1) tỷ lệ dung môi/dƣợc liệu (X2) hiệu suất chiết cao (Y1) 48 Hình 3.9 Ảnh hƣởng tỷ lệ dung môi/dƣợc liệu (X2) độ cồn (X3) hiệu suất chiết cao (Y1) 49 Hình 3.10 Ảnh hƣởng số lần chiết (X1) độ cồn (X3) hiệu suất chiết zedoarondiol (Y2) 50 Hình 3.11 Ảnh hƣởng số lần chiết (X1) tỷ lệ dung môi/dƣợc liệu (X2) hiệu suất chiết zedoarondiol (Y2) 51 Hình 3.12 Ảnh hƣởng tỷ lệ dung môi/dƣợc liệu (X2) độ cồn (X3) hiệu suất chiết zedoarondiol (Y2) 52 Hình 3.13 Sơ đồ chuẩn bị dịch sấy phun 54 Hình 3.14 Sơ đánh giá hiệu suất sấy phun mẫu cao khô 55 Hình 3.15 SEM mẫu cao NC độ phóng đại (a) 500×, (b) 2000×, (c) 10000× 56 Hình 3.16 SEM mẫu cao 30M độ phóng đại (a) 500×, (b) 2000×, (c) 10000× 56 Hình 3.17 SEM mẫu cao 30S độ phóng đại (a) 500×, (b) 2000×, (c) 10000× 57 Hình 3.18 SEM mẫu cao 10S độ phóng đại (a) 500×, (b) 2000×, (c) 10000× 57 Hình 3.19 Cấu trúc CSD (a) SEM CSD (b) độ phóng đại 10000× 58 Hình 3.20 Góc nghỉ mẫu cao khô sấy phun 60 Hình 3.21 Tốc độ chảy mẫu cao khô sấy phun 60 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh 89 44 Saxena PN, et al, (2009), "Effect of arsenic trioxide on renal functions and its modulation by Curcuma aromatica leaf extract in albino rat" J Environ Biol, 30(4), pp.527- 531 45 Sikha A, Harini A, Hegde Prakash L, (2015), "Pharmacological activities of wild turmeric (Curcuma aromatica Salisb): a review", Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry, 3(5) 46 Tian S., Zhou X., Gong H., Ma X., Zhang F (2011), “Orthogonal test design for optimization of the extraction of polysaccharide from Paeonia sinjiangensis K.Y Pan”, Pharmacogn Mag, 7(25), pp 4-8 47 USP 40 – NF 35 (2017) - The United States Pharmacopoeia 40 - National Formulary 35 48 Wang, Yu, et al, (2009), "Study on microencapsulation of curcumin pigments by spray drying", European Food Research and Technology, 229(3), pp, 391396 49 WR Grace & Co Technical literature: Colloidal silicon dioxide, 2002 50 Wu WY, et al, (2000), "Inhibitory effects of Curcuma aromatica oil on proliferation of hepatoma in mice", World J Gastroenterol, 6(2), pp.216-219 51 Yan, Yi-Dong, et al, (2011), "Enhanced oral bioavailability of curcumin via a solid lipid-based self-emulsifying drug delivery system using a spraydrying technique", Biological and Pharmaceutical Bulletin, 34(8), pp.11791186 Tài liệu trang Web 52 http://www.hmdb.ca/metabolites/HMDB0036448 (Truy cập ngày 25/05/2017) 53 http://foodb.ca/compounds/FDB015335 (Truy cập ngày 25/05/2017) Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-1 PHỤ LỤC Phụ lục Tiêu chuẩn kiểm nghiệm dƣợc liệu Ngải trắng Rhizoma Curcumae aromaticae trồng An Giang PL-2 Phụ lục Sắc ký đồ HPLC sơ khảo sát hiệu suất chiết zedoarondiol lần chiết PL-6 Phụ lục Thống kê hồi quy tuyến tính định lƣợng zedoarondiol dịch chiết cao khô sấy phun Ngải trắng PL-8 Phụ lục Thống kê One Sample T-test giá trị thực nghiệm giá trị dự đoán hiệu suất chiết cao PL-9 Phụ lục Thống kê One Sample T-test giá trị thực nghiệm giá trị dự đoán hiệu suất chiết zedoarondiol PL-10 Phụ lục Thống kê Independent Sample T-test chiết xuất zedoarondiol với tỷ lệ cao khô sấy phun: dung môi 1:1000 1:2500 PL-11 Phụ lục Thống kê Independent Sample T-test chiết xuất zedoarondiol với tỷ lệ cao khô sấy phun: dung môi 1:1000 1:500 PL-12 Phụ lục Thống kê Independent Sample T-test tính hút ẩm mẫu NC mẫu 30S PL-13 Phụ lục Thống kê Independent Sample T-test tính hút ẩm mẫu 10S mẫu 30S PL-14 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-2 Phụ lục Tiêu chuẩn kiểm nghiệm dƣợc liệu Ngải trắng Rhizoma Curcumae aromaticae trồng An Giang Ngải trắng Rhizoma Curcumae aromaticae Nghệ trắng, Nghệ rừng Thân rễ phơi sấy khô Ngải trắng (Curcuma aromatica Sablisb.), họ Gừng (Zigiberaceae) Mơ tả Lát cắt thân rễ hình trịn hình bầu dục, kích thƣớc – cm, dày khoảng – mm Mặt cắt ngang nhìn rõ vùng vỏ vùng trung trụ, có nhiều xơ, màu vàng nhạt nâu nhạt Có vết tích lá, lớp vỏ ngồi láng Có mùi thơm đặc trƣng Vi phẫu Biểu bì cịn, gồm lớp tế bào hình đa giác Mơ mềm vỏ có nhiều tế bào tiết; rải rác có bó dẫn có cấu tạo libe I chồng gỗ I Nội bì đai Caspary trụ bì rõ Hệ thống dẫn: gồm nhiều bó libe gỗ xếp lộn xộn, tập trung nhiều khu vực gần trụ bì, bó có hình dạng khác Mơ mềm tủy có tế bào tiết chứa nhiều tinh bột Bột Bột dƣợc liệu có màu vàng nhạt, mùi thơm, vị cay Soi dƣới kính hiển vi có cấu tử sau: Mảnh bần; mảnh mơ mềm chứa tinh bột, tế bào tiết; mảnh mạch vạch, mảnh mạch mạng; nhiều hạt tinh hình bầu dục hình trứng thấy rõ vân tăng trƣởng hình cung tễ rõ đầu nhỏ; mảnh sợi mô cứng Định tính Phƣơng pháp SKLM Bản mỏng: Silica gel F254 Dung môi khai triển: Cloroform - Acid acetic (9:1) Dung dịch thử: Cân khoảng g bột dƣợc liệu thô, thêm 10 ml methanol (TT), siêu âm 20 phút, lọc Lấy dịch lọc làm dung dịch thử Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-3 Dung dịch đối chiếu: Hòa tan chất đối chiếu zedoarondiol methanol (TT) để đƣợc dung dịch có nồng độ khoảng 0,2 mg/ml Tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 25 µl dung dịch Tiến hành triển khai sắc ký đến dung môi đƣợc khoảng 10 cm Lấy mỏng ra, để khô nhiệt độ phòng Quan sát mỏng dƣới ánh sáng tử ngoại bƣớc sóng 254 nm 365 nm Sau phun dung dịch acid sulfuric 10% ethanol (TT), sấy khô 105 oC rõ vết Trên sắc ký đồ, dung dịch thử phải có vết màu sắc giá trị Rf với vết chất đối chiếu zedoarondiol Định lƣợng Tiến hành phƣơng pháp sắc ký lỏng A Định lƣợng zedoarondiol dƣợc liệu Ngải trắng Pha động: Acetonitril - ƣớc, chƣơng trình gradient Thời gi n (phút) Nƣớc (%) Acetonitril (%) 0-3 98 4-8 92 9-18 84 16 22 82 18 30 82 18 31-35 60 40 Dung dịch đối chiếu: Hòa tan chất đối chiếu zedoarondiol methanol (TT) để thu đƣợc dung dịch có nồng độ xác khoảng 0,2 mg/ml Lắc đều, lọc qua màng lọc cỡ 0,22 µm Dung dịch thử: Cân xác g bột dƣợc liệu Ngải trắng cho vào bình chiết Soxhlet Tiến hành chiết với methanol 100% 100oC Dịch chiết thu đƣợc cô dƣới áp suất giảm tới thu đƣợc cắn khơ Hịa tan cắn lần lƣợt với 10 ml, 10 ml ml methanol 30% Dịch chiết thu đƣợc chuyển vào bình định mức 25 ml, bổ sung thể tích vừa đủ Lắc đều, lọc qua màng lọc cỡ 0,22 µm Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-4 Điều kiện sắc ký: Cột: C18 (250 mm ×4,6 mm, µm) Detector quang phổ tử ngoại đặt bƣớc sóng 258 nm Tốc độ dịng: ml/phút Thể tích tiêm: 20 µl Cách tiến hành: Tiêm riêng biệt dung dịch chất đối chiếu, dung dịch thử Dựa vào diện tích (hay chiều cao) pic thu đƣợc dung dịch thử, dung dịch chất đối chiếu nồng độ zedoarondiol dung dịch chất đối chiếu, tính hàm lƣợng zedoarondiol dƣợc liệu Hàm lƣợng (%) zedoarondiol đƣợc tính theo cơng thức: X(%)= Trong đó: X: hàm lƣợng % hoạt chất có 1g dƣợc liệu St, Sc: lầm lƣợt diện tích đỉnh dung dịch thử dung dịch đối chiếu Cc: nồng độ dung dịch đối chiếu (µg/ml) V: thể tích dung dịch thử (ml) m: khối lƣợng cân dƣợc liệu (g) h: độ ẩm dƣợc liệu k: độ tinh khiết chuẩn Hàm lƣợng zedoarondiol dƣợc liệu phải khơng 0,05% zedoarondiol tính theo dƣợc liệu khơ kiệt Độ ẩm Khơng 15% (Phụ lục 12.13) Tạp chất Tạp chất khác khơng q 1% (Phụ lục 12.11) Tro tồn phần Khơng 9% (Phụ lục 9.8) Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-5 Tro khơng t n cid Không 2% (Phụ lục 9.7) Kim loại nặng Không ppm Pb; 0,2 ppm Hg, 1,0 ppm As (Phụ lục 9.4.8, phƣơng pháp 3, dùng g mẫu thử) Chất chiết đƣợc dƣợc liệu Khơng 3% (Phụ lục 12.10) tính theo dƣợc liệu khô kiệt Tiến hành theo phƣơng pháp chiết lạnh Dùng ethanol 96% (TT) làm dung môi Chế biến Đào lấy thân rễ, bỏ rễ rễ củ, phơi khô Bảo quản Để nơi khơ, bao bì kín, tránh bay tinh dầu Cần phơi sấy để tránh mốc, mọt Tính vị, quy kinh Vị cay, tính ấm Quy kinh Phế, Vị Cơng năng, chủ trị Hành khí, giải uất, phá ứ Chủ trị: Viêm nhiễm, sƣng đau, viêm gan, ho, viêm họng, tê thấp Cách dùng, liều dùng - 12 g/ngày Sắc uống dùng dạng hồn, tán Tn thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-6 Phụ lục Sắc ký đồ HPLC sơ khảo sát hiệu suất chiết zedoarondiol lần chiết Hình PL-2.1 Sắc ký đồ HPLC dịch chiết lần Hình PL-2.2 Sắc ký đồ HPLC dịch chiết lần Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-7 Hình PL-2.3 Sắc ký đồ HPLC dịch chiết lần Hình PL-2.4 Sắc ký đồ HPLC dịch chiết lần Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-8 Phụ lục Thống kê hồi quy tuyến tính định lƣợng zedoarondiol dịch chiết cao khô sấy phun Ngải trắng SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R 0.998336 R Square Adjusted R Square 0.996674 Standard Error 0.995842 116.763954 Observations ANOVA Df SS MS F 1198.634 Regression 16341956 16341956 Residual 54535.28 13633.82 Total 16396491 Standard Error Coefficients Intercept X Variable t Stat P-value Significance F 4.153E-06 Lower 95% Upper 95% -38.01301 86.55624 -0.43917 0.683219 -278.33167 202.30565 22.07773 0.637692 34.62129 4.15E-06 20.30721 23.848247 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-9 Phụ lục Thống kê One Sample T-test giá trị thực nghiệm giá trị dự đoán hiệu suất chiết cao T-TEST /TESTVAL=11.925 Syntax /MISSING=ANALYSIS /VARIABLES=VAR00001 /CRITERIA=CI(.95) One-Sample Statistics N VAR00001 Mean Std Deviation 11.6333 Std Error Mean 61076 35263 One-Sample Test Test Value = 11.925 t Df Sig (2-tailed) Mean Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower VAR00001 -.827 495 -.29167 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn -1.8089 Upper 1.2256 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-10 Phụ lục Thống kê One Sample T-test giá trị thực nghiệm giá trị dự đoán hiệu suất chiết zedoarondiol T-TEST /TESTVAL=0.105 Syntax /MISSING=ANALYSIS /VARIABLES=VAR00001 /CRITERIA=CI(.95) One-Sample Statistics N VAR00001 Mean Std Deviation 1090 Std Error Mean 00232 00134 One-Sample Test Test Value = 0.105 t Df Sig (2-tailed) Mean Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower VAR00001 3.005 095 00403 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn -.0017 Upper 0098 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-11 Phụ lục Thống kê Independent Sample T-test chiết xuất zedoarondiol với tỷ lệ cao khô sấy phun: dung môi 1:1000 1:2500 T-TEST GROUPS=VAR00002(1 2) /MISSING=ANALYSIS Syntax /VARIABLES=VAR00001 /CRITERIA=CI(.95) Group Statistics VAR00002 N Mean Std Deviation Std Error Mean 1.00 3453 00064 00037 2.00 3458 00026 00015 VAR00001 Independent Samples Test Levene's Test for Equality of t-test for Equality of Variances Means F Equal variances assumed VAR00001 Equal variances Sig 3.863 T 121 not assumed df -1.329 -1.329 2.659 Independent Samples Test t-test for Equality of Means Sig (2-tailed) Mean Difference Std Error Difference Equal variances assumed 255 -.00053 00040 Equal variances not assumed 286 -.00053 00040 VAR00001 Independent Samples Test t-test for Equality of Means 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper Equal variances assumed -.00165 00058 Equal variances not assumed -.00191 00084 VAR00001 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-12 Phụ lục Thống kê Independent Sample T-test chiết xuất zedoarondiol với tỷ lệ cao khô sấy phun: dung môi 1:1000 1:500 T-TEST GROUPS=VAR00002(1 2) /MISSING=ANALYSIS Syntax /VARIABLES=VAR00001 /CRITERIA=CI(.95) Group Statistics VAR00002 N Mean Std Deviation Std Error Mean 1.00 3453 00064 00037 2.00 3328 00025 00015 VAR00001 Independent Samples Test Levene's Test for Equality of t-test for Equality of Variances Means F Equal variances assumed VAR00001 Equal variances Sig 4.105 t 113 not assumed df 31.359 31.359 2.599 Independent Samples Test t-test for Equality of Means Sig (2-tailed) Mean Difference Std Error Difference Equal variances assumed 000 01250 00040 Equal variances not assumed 000 01250 00040 VAR00001 Independent Samples Test t-test for Equality of Means 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper Equal variances assumed 01139 01361 Equal variances not assumed 01111 01389 VAR00001 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-13 Phụ lục Thống kê Independent Sample T-test tính hút ẩm mẫu NC mẫu 30S T-TEST GROUPS=VAR00002(1 2) /MISSING=ANALYSIS Syntax /VARIABLES=VAR00001 /CRITERIA=CI(.95) Group Statistics VAR00002 N Mean Std Deviation Std Error Mean 1.00 20.2067 61533 35526 2.00 18.3233 72920 42100 VAR00001 Independent Samples Test Levene's Test for Equality of t-test for Equality of Variances Means F Equal variances assumed VAR00001 Equal variances Sig .107 T 760 not assumed df 3.419 3.419 3.890 Independent Samples Test t-test for Equality of Means Sig (2-tailed) Mean Difference Std Error Difference Equal variances assumed 027 1.88333 55087 Equal variances not assumed 028 1.88333 55087 VAR00001 Independent Samples Test t-test for Equality of Means 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper Equal variances assumed 35388 3.41279 Equal variances not assumed 33667 3.43000 VAR00001 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh PL-14 Phụ lục Thống kê Independent Sample T-test tính hút ẩm mẫu 10S mẫu 30S T-TEST GROUPS=VAR00002(1 2) /MISSING=ANALYSIS Syntax /VARIABLES=VAR00001 /CRITERIA=CI(.95) Group Statistics VAR00002 N Mean Std Deviation Std Error Mean 1.00 16.7000 03000 01732 2.00 18.3233 72920 42100 VAR00001 Independent Samples Test Levene's Test for Equality of t-test for Equality of Variances Means F Equal variances assumed VAR00001 Equal variances Sig 6.390 t 065 not assumed df -3.853 -3.853 2.007 Independent Samples Test t-test for Equality of Means Sig (2-tailed) Mean Difference Std Error Difference Equal variances assumed 018 -1.62333 42136 Equal variances not assumed 061 -1.62333 42136 VAR00001 Independent Samples Test t-test for Equality of Means 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper Equal variances assumed -2.79322 -.45345 Equal variances not assumed -3.43045 18378 VAR00001 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn ... đó, đề tài ? ?Xây dựng quy trình điều chế cao khô sấy phun Ngải trắng? ?? đƣợc thực với nội dung cụ thể nhƣ sau: Xây dựng quy trình chiết xuất dƣợc liệu Ngải trắng Xây dựng quy trình sấy phun dịch... quy trình định lƣợng zedoarondiol cao khô sấy phun Ngải trắng phƣơng pháp HPLC 70 3.6 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CAO KHÔ SẤY PHUN NGẢI TRẮNG 73 3.6.1 Kiểm nghiệm lô cao khô sấy phun Ngải trắng. .. khoảng 95 -105% RSD ≤ 2% 2.3.6 Xây dựng tiêu chuẩn sở cao khô sấy phun Ngải trắng 2.3.6.1 Kiểm nghiệm lô cao khô sấy phun Ngải trắng Kiểm nghiệm lô cao khô sấy phun Ngải trắng với tiêu sau: Độ ẩm