Nghiên cứu ảnh hưởng của một số điều kiện môi trường đến đặc điểm sinh học của vi tảo haematococcus lacustris trong pha tích lũy

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH – MÔI TRƢỜNG U N T T NG I P NG I N ỨU N MÔI TRƢỜNG ƢỞNG Ủ M T S N I M SIN HAEMATOCOCCUS LACUSTRIS TRONG P NGU NT TR NG Đà Nẵng, năm 2020 I U I N Ủ VI T O T ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH – MÔI TRƢỜNG U N T T NG I P NG I N ỨU N MÔI TRƢỜNG ƢỞNG Ủ M T S N I M SIN Ng nh: Kh : 2016-2020 T T Ngƣời hƣớng d n: TS T Đà Nẵng, năm 2020 I N Ủ VI T O HAEMATOCOCCUS LACUSTRIS TRONG P Sinh viên: N I U M T LỜI CAM ĐOAN Tôi xin c m đo n l cơng trình nghiên cứu củ riêng tơi Các số liệu kết nêu luận văn l trung thực v chƣ đƣợc i cơng bố cơng trình n o khác Đ Nẵng, ng y tháng năm 2020 i ỜI M ƠN Đầu tiên, xin b y tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Trịnh Đăng Mậu, giảng viên khoa Sinh – Môi trƣờng Đại học Đ Nẵng tận tình hƣớng d n, bảo v giúp đỡ suốt thời gi n thực v ho n th nh kh luận tốt nghiệp Thứ h i, xin cảm ơn thầy, cô giáo kho Sinh – Môi trƣờng, trƣờng Đại học Sƣ phạm, đại học Đ Nẵng giảng dạy, truyền đạt kiến thức, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập v ho n th nh kh luận tốt nghiệp Thứ b , xin cảm ơn nh Ph n Nhật Trƣờng giúp đỡ ho n th nh kh luận Cảm ơn bạn Trần Thị ch Trâm lớp 17 CNSH v Đoạn Thế ảo giúp đỡ suốt thời gi n thực v ho n th nh kh luận V lời cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến gi đình, bạn bè động viên suốt thời gi n l m kh luận Tôi xin chân th nh cảm ơn! Đ Nẵng, ng y tháng năm 2020 Tác giả Nguyễn Thị Tr ng ii MỤ Ụ LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii ANH MỤC C C TỪ VI T TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii T M TẮT ix MỞ ĐẦU 1 T NH CẤP THI T CỦA Đ TÀI MỤC TIÊU CỦA Đ TÀI Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN NỘI DUNG NGHIÊN CỨU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 GIỚI THIỆU CHUNG V VI TẢO HAEMATOCOCCUS LACUSTRIS 1.1.1 Vị trí phân loại phân bố Haematococcus lacustris 1.1.2 Đặc điểm sinh học v đặc điểm hình thái 1.2 GIỚI THIỆU CHUNG V SẮC T QUANG HỢP TRONG TẢO HAEMATOCOCCUS LACUSTRIS 1.2.1 Đặc điểm chung 1.2.2 Chlorophyll 1.2.3 Carotenoids 1.2.2 Ast x nthin vi tảo Haematococcus lacustris Đặc điểm củ st x nthin b Cấu trúc astaxanthin c Các yếu tố môi trƣờng khác ảnh hƣởng đến t ch lũy st x nthin vi tảo Haematococus lacustris 1.3 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU V VI TẢO HAEMATOCOCCUS LACUSTRIS TỔNG HỢP ASTAXANTHIN TRÊN TH GIỚI VÀ VIỆT NAM 10 1.3.1 Trên giới 10 1.3.2 Ở Việt Nam 13 CHƢƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PH P NGHIÊN CỨU 15 2.1 VẬT LIỆU 15 2.2 PHƢƠNG PH P NGHIÊN CỨU 15 2.1.1 ố tr th nghiệm ởng nồ Haematococcus lacustris 15 độ nitrat, phosph t đế đ đ ủ t o 15 iii b Nghiên c u lacustris ởng củ ế đế đ đ vi t o Haematococcus 15 ủ t đế đ đ ủ t t 16 2.2.1 Phƣơng pháp theo dõi h m lƣợng nhóm sắc tố quang hợp q trình ni 16 2.3.2 Phƣơng pháp theo dõi mật độ v k ch thƣớc 18 2.4.3 Phƣơng pháp xử lý số liệu 18 CHƢƠNG 3: K T QUẢ VÀ THẢO LUẬN 19 3.1 ẢNH HƢỞNG CỦA MÔI TRƢỜNG INH ƢỠNG Đ N ĐẶC ĐI M SINH HỌC CỦA VI TẢO HAEMATOCOCCUS LACUSTRIS TRONG PHA T CH L Y 19 3.1.1 Ảnh hƣởng củ môi trƣờng dinh dƣỡng đến sinh trƣởng phát triển củ vi tảo H lacustris 19 3.1.2 Ảnh hƣởng củ môi trƣờng dinh dƣỡng đến h m lƣợng sắc tố tảo H lacustris 3.2 ẢNH HƢỞNG CỦA PHỔ NH S NG Đ N ĐẶC ĐI M SINH HỌC CỦA VI TẢO HAEMATOCOCCUS LACUSTRIS 21 24 3.2.1 Ảnh hƣởng củ ph ánh sáng đến mật độ v k ch thƣớc củ vi tảo H lacustris 24 3.2.2 Ảnh hƣởng củ ph ánh sáng đến t ch lũy sắc tố củ vi tảo H lacutris 26 3.3 ẢNH HƢỞNG CỦA ẠNG MÔI TRƢỜNG NUÔI Đ N ĐẶC ĐI M SINH HỌC CỦA VI TẢO HAEMATOCOCCUS LACUSTRIS 28 3.3.1 Ảnh hƣởng củ dạng môi trƣờng đến mật độ v k ch thƣớc củ vi tảo H lacustris 28 3.3.2 Ảnh hƣởng củ dạng môi trƣờng đến t ch lũy sắc tố củ vi tảo H lacustris 30 K T LUẬN VÀ KI N NGH 33 K T LUẬN 33 KI N NGH 33 iv DANH MỤ TỪ VI T T T SKK Sinh khối khô TLK Trọng lƣợng khô TB Tế b o GS.TSKH Giáo sƣ Tiến s Kho học ĐHĐN Đại học Đ Nẵng OD Optical Density H lacustris Haematococcus lacustris ROS Reactive oxygen species DNA Deoxyribonucleic acid LED Light-emitting diode UV Ultraviolet BBM C old’s s l Medium Closterium medium v D N Số 1.1 MỤ B NG Tê bả Trang Thành phần dinh dƣỡng củ tảo H lacustris gi i đoạn sinh trƣởng khác nh u vi D N Số MỤ ÌN Tên hình Trang 1.1 Hình ảnh hiển vi tế b o vi tảo H lacustris gi i đoạn 1.2 Sự th y đ i hình thái tế b o vi tảo Haematococcus lacustris 1.3 Cấu trúc chlorophyll a 1.4 Cấu trúc chlorophyll b 1.5 Cấu trúc củ 2.1 Quy trình tách chiết sắc tố 17 3.1 Mật độ tế b o nghiệm thức dinh dƣỡng v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm 19 3.2 Đƣờng k nh tế b o nghiệm thức dinh dƣỡng v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm 20 3.3 Sự th y đ i h m lƣợng chlorophyll a, b; carotenoids 1ml (mg/ml) nghiệm thức dinh dƣỡng v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm 21 3.4 Sự th y đ i h m lƣợng chlorophyll a,b; carotenoids tế b o (μg/tb) nghiệm thức dinh dƣỡng v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm 23 3.5 Mật độ vi tảo nghiệm thức ph ánh sáng v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm 24 3.6 K ch thƣớc tế b o vi tảo nghiệm thức ph ánh sáng v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm 25 3.7 Sự th y đ i h m lƣợng chlorophyll a, b; carotenoids ml (mg/ml) nghiệm thức ph ánh sáng v o lúc bắt đầu kết thúc th nghiệm 26 3.8 Sự th y đ i h m lƣợng chlorophyll a, b; carotenoids c tế b o (μg/tb) nghiệm thức ph ánh sáng v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm 27 st x nthin vii 3.2 ƣở ủ thay i c c sắ ố ủ ả H lacutris Nhìn chung h m lƣợng sắc tố ml dịch tảo tăng lên nghiệm thức s u ng y nuôi Ở ph ánh sáng khác nh u s c th y đ i h m lƣợng nh m sắc tố l khác nh u (Hình 3.7) ì Sự th y đ i h m lƣợng chlorophyll a,b; carotenoids ml (mg/ml) nghiệm thức ph ánh sáng v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm Ở ánh sáng trắng, h m lƣợng củ tất nh m sắc tố tăng, với lƣợng chlorophyll tăng 4,07 carotenoids tăng 4,3 1,3 mg/ml, chlorophyll b tăng 6,3 0,23 mg/ml (p >0,05), tăng c o so với nh m lại Ở ánh sáng đỏ, h m lƣợng chlorophyll mg/ml carotenoids tăng 1,03 tăng 3,2 0,5 mg/ml, chlorphyll b tăng 4,4 carotenoids tăng lên 1,02 0,78 0,4 mg/ml Tƣơng tự ánh sáng x nh dƣơng tăng lên h m lƣợng chlorophyll ,b lần lƣợt l 3,23 Lƣu 0,5 mg/ml v h m lƣợng 0,52 mg/ml v 6,4 0,7 mg/ml, 0,74 mg/ml r ng th y đ i h m lƣợng sắc tố ml dịch tảo c thể l th y đ i th nh phần tế b o v /hoặc th y đ i mật độ Để đánh giá đƣợc t ch lũy sắc tố củ tế b o tảo, th y đ i h m lƣợng củ carotenoids, chlorophyll a chlorophyll b tế b o đƣợc khảo sát 26 ì Sự th y đ i h m lƣợng chlorophyll a, b; carotenoids c tế b o (μg/tb) nghiệm thức ph ánh sáng v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm Trên đơn vị tế b o, h m lƣợng nh m sắc tố củ vi tảo s u nuôi cấy nh ng điều kiện ánh sáng khác nh u c th y đ i so với b n đầu Kết Hình 3.8 cho thấy ánh sáng trắng dƣờng nhƣ k ch th ch t ch lũy c rotenoids tế b o ánh sáng x nh thúc đ y t ng hợp chlorophyll b, ánh sáng đỏ lại l m giảm đáng kể chlorophyll a ì Ph hấp thụ ánh sáng củ sắc tố v ph phát xạ ánh sáng củ loại đèn LED (ảnh c chỉnh sử từ https://www.philpoteducation.com/) Kết n y c thể đƣợc giải th ch dự v o ph hấp thụ ánh sáng củ sắc tố, ph phát xạ củ m u đèn LE v cƣờng độ ánh sáng Trong nghiệm thức sử dụng ánh sáng m u x nh dƣơng (bƣớc s ng 450 – 500 nm) k ch th ch t ch lũy, carotenoids 27 đặc biệt l chlorophyll b c khả hấp thụ nhiều photons dải bƣớc s ng n y, nên h m lƣợng sắc tố n y chiếm ƣu tế b o vi tảo nh sáng củ LE trắng c ph rộng với đỉnh phát xạ khoảng 465 nm, 520 nm 640 nm – phù hợp t ng hợp loại sắc tố Nghiên cứu n y ghi nhận tăng lên đáng kể củ carotenoids tế b o vi tảo ánh sáng trắng, điều n y c thể cƣờng độ ánh sáng c o k ch th ch t ng hợp củ sắc tố bảo vệ Đối với LE đỏ, ph phát xạ l khoảng 620 – 670 nm, phù hợp cho hấp thụ tối ƣu củ chlorophyll v b, nhiên kết lại cho thấy h m lƣợng chlorophyll giảm đáng kể Theo nghiên cứu củ K sut thực năm 2003, h m lƣợng astax nthin t ch lũy vi tảo đƣợc nuôi ánh sáng x nh dƣơng l c o (K tsud v cs, 2004) Một nghiên cứu khác cho r ng ánh sáng đỏ th ch hợp cho việc nhân nh nh sinh khối s u đ chuyển s ng ánh sáng x nh nhƣ l yếu tố để k ch ứng t ng hợp carotenoids thứ cấp (Lababpour v cs., 2004) Ở nghiên cứu củ M (2018) ánh sáng x nh cho kết t ng hợp đƣợc st x nthin c o đạt 36 mg/g (TLK) ng y thứ 4, ph ánh sáng trắng v đỏ không c chênh lệch rõ rệch v h m lƣợng st x nthin giảm dần từ ng y th nghiệm thứ (Ma v cs, 2018) Các kết th nghiệm n y cho thấy xu hƣớng th y đ i củ h m lƣợng sắc tố theo ph ánh sáng Tuy nhiên, thời gi n thực th nghiệm ngắn nên th y đ i l không thực rõ r ng o đ cần c nh ng nghiên cứu sâu v d i 33 N SIN ƢỞNG Ủ D NG MÔI TRƢỜNG NUÔI N I M Ủ VI T O HAEMATOCOCCUS LACUSTRIS 331 ƣở ủ ƣờ ƣớ ủ ả H lacustris Hiện n y, việc phát triển hệ thống nuôi đ ng đƣợc nh kho học qu n tâm v nghiên cứu Một mơ hình dạng rắn đƣợc nghiên cứu v phát triển để nuôi cấy vi tảo (Shi v cs, 2007) Mơ hình n y c thể hạn chế đƣợc nhiễm ch o gi chủng vi tảo v giúp chúng tránh khỏi nhiễm vi sinh vật thừ dinh dƣỡng (Naumann v cs, 2013) Việc so sánh đặc điểm sinh học gi môi trƣờng lỏng v môi trƣờng rắn cần thiết cho việc lự chọn loại môi trƣờng phù hợp củ vi tảo nhƣ kiểm chứng lại suất phát triển v t ch lũy hợp chất lo i tảo n y 28 Kết th nghiệm dạng môi trƣờng nuôi ph t ch lũy củ vi tảo H lacustris cho thấy nh ng th y đ i mật độ v k ch thƣớc lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm nhƣ gi ì 31 nghiệm thức (Hình 3.10.) Mật độ tế b o vi tảo nghiệm thức dạng môi trƣờng nuôi v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm Ở môi trƣờng dạng lỏng vi tảo c th y đ i mật độ nhiên th y đ i l không c ngh mặt thống kê (p >0,05) Trong nghiệm thức cho t ch lũy bám d nh m ng lọc mật độ tế b o giảm từ 180503 303 tb/ml xuống 137423 2122 tb/ml Sự th y đ i mật độ s u ng y nuôi n y chủ yếu l sinh khối tảo thu lại kết thúc th nghiệm l không triệt để, tảo v n d nh lại bề mặt củ m ng nuôi Về đƣờng k nh tế b o, nhìn chung h i nghiệm thức thấy tăng nhiên không c khác biệt ng y v ng y cuối Trong môi trƣờng dạng bán rắn, tế b o to r rõ rệt với đƣờng k nh trung bình tăng từ 20,26 0,08 μm lên 22,04 ± 0,9 μm môi trƣờng dạng lỏng tăng khoảng 1,36 μm Tuy nhiên, khác biệt gi lúc b n đầu v kết thúc th nghiệm l không c ngh thống kê theo kết phân t ch ANOVA Điều n y c thể l tế b o tảo b n đầu đƣ v o th nghiệm đ số trạng thái b o tử c k ch thƣớc lớn nên s u ng y nuôi k ch thƣớc tế b o tăng chênh lệch khoảng – μm nên chƣ c độ chênh lệch rõ rệt nghiệm thức 29 ì 11 K ch thƣớc tế b o vi tảo nghiệm thức dạng môi trƣờng nuôi v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm 332 ƣở ủ ƣờ thay ic c ắ ố ủ ả H lacustris Trong môi trƣờng nuôi dạng khác nh u, h m lƣợng chlorophyll , b v carotenoids c th y đ i, thể Hình 3.12 ì 12 Sự th y đ i h m lƣợng chlorophyll a, b; carotenoids c ml (mg/ml) nghiệm thức dạng môi trƣờng nuôi v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm H m lƣợng chlorophyll , b 1ml nghiệm thức giảm s u ng y nuôi, với chlorophyll b giảm đáng kể Ở môi trƣờng lỏng h m lƣợng chlorophyll b giảm 6,71 ± 1,98 mg/ml, môi trƣờng bán rắn giảm 8,16 ± 3,1mg/ml H m lƣợng c rotenoids thời điểm bắt đầu th nghiệm l không phát nghiệm thức S u ng y nuôi 30 cấy, c rotenoids môi trƣờng lỏng v n l thấp, dƣới ngƣỡng phát môi trƣờng bán rắn h m lƣợng tăng khoảng mg/ml ì 13 Sự th y đ i h m lƣợng chlorophyll a, b; carotenoids c tb (μg/tb) nghiệm thức dạng môi trƣờng nuôi v o lúc bắt đầu v kết thúc th nghiệm Xu hƣớng th y đ i sắc tố tế b o l tƣơng tự xu hƣớng qu n sát đƣợc ml, n i bật với t ch lũy carotenoids nhiều v nh nh nghiệm thức môi trƣờng bán rắn H m lƣợng chlorophyll a th nghiệm n y cho thấy xu hƣớng th y đ i, nhiên thời gi n thực th nghiệm ngắn nên th y đ i l không thực rõ r ng o đ cần c nh ng nghiên cứu sâu v d i để c thể kết luận đƣợc nh ng th y đ i sắc tố củ vi tảo dạng môi tƣờng khác nh u Khi vi tảo đƣợc nuôi điều kiện môi trƣờng bán rắn, ánh sáng chiếu trực tiếp lên bề mặt vi tảo v ánh sáng chiếu đến tế b o đ ng so với môi trƣờng lỏng Khi vi tảo đƣợc nuôi cƣờng độ ánh sáng c o hợp chất carotenoids hình th nh bên ngo i lớp vỏ b o bọc lục lạp v bảo vệ tế b o (Solovchenko, 2013) Hơn n , bất động m ng sinh học tạo r đƣờng khuếch tán ngắn cho kh v giảm thiểu căng th ng thủy động lực đến tế b o (Podola et al., 2017) Khi nuôi cấy môi trƣờng bán rắn s xảy r tr o đ i kh trực tiếp gi ph kh v m ng o đ , oxy đƣợc tạo r q trình qu ng hợp khơng t ch lũy mức m ng sinh học, l m tăng cƣờng qu ng hợp cho vi tảo (Murphy erberoglu, 2014; Li v cs, 2015) Tƣơng tự, tế b o c thể trực tiếp hấp thụ CO2 từ pha khí (Wolf & Picioreanu, 2007) L tác dụng phụ, tiêu thụ nh nh CO2 hò t n gần bề mặt m ng sinh học d n đến giá trị pH tăng c o, tạo điều kiện thuận lợi cho việc vận chuyển v hò tan CO2 (Li v cs, 2015) 31 Với nh ng ƣu điểm việc phát triển môi trƣờng nuôi bán rắn thật đem lại hiệu c o So với kết nh ng th nghiệm mục 3.1 v 3.2 môi trƣờng bán rắn cho kết t ng hợp carotenoids nh nh v c o so với th nghiệm nuôi môi trƣờng dạng lỏng Cụ thể h m lƣợng carotenoids môi trƣờng bán rắn tăng 0,23 0,06 μg/tb s u ng y, th nghiệm môi trƣờng lỏng h m lƣợng dinh dƣỡng (kết mục 3.1.2.) thời gi n theo dõi ng y nhƣng h m lƣợng carotenoids tăng c o l 0,27 0,03 μg/tb Còn so với kết củ th nghiệm ph ánh sáng (kết mục 3.2.2) h m lƣợng carotenoids tăng c o 0,07 0,009 μg/tb s u ng y nuôi Nhƣ so với môi trƣờng lỏng mơi trƣờng bán rắn c thời gi n t ch lũy nh nh v h m lƣợng carotenoids tăng nh nh so với môi trƣờng lỏng 32 T U NV I N NG T U N S u thực th nghiệm rút r đƣợc nh ng kết luận s u - Sự thay đ i h m lƣợng dinh dƣỡng c ảnh hƣởng đến số đặc điểm sinh học củ tảo H lacustris, thiếu hụt nitrat phosphat mức khác nh u c ảnh hƣởng rõ rệt đến mật độ tế b o k ch thƣớc tế b o không th y đ i nhiều (d o động từ 17,5 – 21 μm) H m lƣợng sắc tố nghiệm thức c th y đ i, với c rotenoids tế b o tăng mạnh môi trƣờng không nitrat phosphat (đạt 0,27 μg/tb s u ng y t ch lũy) - Ở ph ánh sáng khác c ảnh hƣởng đến đặc điểm sinh học củ tảo H lacustris, ph ánh sáng khác nh u c thay đ i mật độ tế b o, k ch thƣớc tế b o giảm H m lƣợng sắc tố nghiệm thức c th y đ i, với c rotenoids tế b o tăng mạnh ánh sáng trắng (0,05 μg/tb) - Khi đƣợc nuôi cấy dạng môi trƣờng khác vi tảo s c nh ng đặc điểm sinh học củ vi tảo H lacustris, dạng môi trƣờng khác nh u c ảnh hƣởng đến mật độ tế b o, k ch thƣớc tế b o không th y đ i s u ng y nuôi H m lƣợng c rotenoids môi trƣờng bán rắn tăng c o so với môi trƣờng lỏng (0,23 μg/tb) I N NG S u thực th nghiệm c số kiến nghị s u đây: - Nh ng th nghiệm đƣợc thực riêng l cần c nh ng th nghiệm kết hợp đƣợc nh ng yếu tố nhƣ dinh dƣỡng kết hợp với cƣờng độ ánh sáng, dinh dƣỡng kết hợp với ph ánh sáng khác nh u, - Ở th nghiệm dạng môi trƣờng bán rắn cần c thêm nh ng nghiên cứu thông số CO2, dinh dƣỡng, cƣờng độ ánh sáng th ch hợp để vi tảo c thể sinh trƣởng v t ng hợp đƣợc st x nthin 33 T I I UT M O T I I U TI NG VI T Đặng Phú Ho ng, Phạm Tú Anh (2017) Nghiên c u nhân sinh khối vi t o Haematococcus pluvialis yếu tố đến kh ă t ng hợp astaxanthin Trịnh Ngọc N m, Trƣơng Ngọc Hiền, Trần Thị t e ảo Trân, Hu nh Thị Hiếu, Nguyễn trần ch Liên (n.d.) t bở â đề k ự tí te ủ ũy t x tƣ t uy 10 T I I U TI NG N Ambati, R R., Phang, S.-M., Ravi, S., & Aswathanarayana, R G (2014) Astaxanthin: Sources, Extraction, Stability, Biological Activities and Its Commercial Applications—A Review Marine Drugs, 12(1), 128–152 Bjerkeng, B (1997) Chromatographic Analysis of Synthesized Astaxanthin—A Handy Tool for the Ecologist and the Forensic Chemist? The Progressive FishCulturist, 59(2), 129–140 Boussiba, S (2000) Carotenogenesis in the green alga Haematococcus pluvialis: Cellular physiology and stress response Physiologia Plantarum, 108(2), 111–117 Chekanov, K., Lobakova, E., Selyakh, I., Semenova, L., Sidorov, R., & Solovchenko, A (2014) Accumulation of Astaxanthin by a New Haematococcus pluvialis Strain BM1 from the White Sea Coastal Rocks (Russia) Marine Drugs, 12(8), 4504–4520 https://doi.org/10.3390/md12084504 Chlorophyll b | CAS 519-62-0 | SCBT - Santa Cruz Biotechnology (n.d.) Retrieved July 10, 2020, from https://www.scbt.com/p/chlorophyll-b-519-62-0 Christian, D., Zhang, J., Sawdon, A J., & Peng, C.-A (2018) Enhanced astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis using high carbon dioxide concentration and light illumination Bioresource Technology, 256, 548–551 Czygan, F C (1970) [Blood-rain and blood-snow: Nitrogen-deficient cells of haematococcus pluvialis and chlamydomonas nivalis] Archiv Fur Mikrobiologie, 74(1), 69–76 34 10 Do, T.-T., Ong, B.-N., Nguyen Tran, M.-L., Nguyen, D., Melkonian, M., & Tran, H.-D (2019) Biomass and astaxanthin productivities of Haematococcus pluvialis in an angled twin-layer porous substrate photobioreactor: Effect of inoculum density and storage time Biology, 8(3), 68 11 Drago, N., & Coman, C (n.d.) ASTAXANTHIN PRODUCTION FROM A NEW STRAIN OF HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS GROWN IN BATCH CULTURE 2, 10 12 Fábregas, J., Domínguez, A., Maseda, A., & Otero, A (2003) Interactions between irradiance and nutrient availability during astaxanthin accumulation and degradation in Haematococcus pluvialis Applied Microbiology and Biotechnology, 61(5), 545–551 13 García-Malea, M C., Acién, F G., Fernández, J M., Cerón, M C., & Molina, E (2006) Continuous production of green cells of Haematococcus pluvialis: Modeling of the irradiance effect Enzyme and Microbial Technology, 38(7), 981– 989 14 Gong, X., & Chen, F (1998) Influence of medium components on astaxanthin content and production of Haematococcus pluvialis Process Biochemistry, 33(4), 385–391 15 Guerin, M., Huntley, M E., & Olaizola, M (2003) Haematococcus astaxanthin: Applications for human health and nutrition Trends in Biotechnology, 21(5), 210– 216 16 Hagen, Ch., Braune, W., & Greulich, F (1993) Functional aspects of secondary carotenoids in Haematococcus lacustris [Girod] Rostafinski (Volvocales) IV Protection from photodynamic damage Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 20(2), 153–160 17 Han, S.-I., Yao, J., Lee, C., Park, J., & Choi, Y.-E (2019) A novel approach to enhance astaxanthin production in Haematococcus lacustris using a microstructure-based culture platform Algal Research, 39, 101464 18 Harker, M., Tsavalos, A J., & Young, A J (1996) Factors responsible for astaxanthin formation in the Chlorophyte Haematococcus pluvialis Bioresource Technology, 55(3), 207–214 35 19 Hata, N., Ogbonna, J C., Hasegawa, Y., Taroda, H., & Tanaka, H (2001) Production of astaxanthin by Haematococcus pluvialis in a sequential heterotrophic-photoautotrophic culture Journal of Applied Phycology, 13(5), 395– 402 20 Ho ng Thị Thụ Thụ (2013) Effect of nitrat concentration on growth of green microalga Haematococcus pluvialis under laboratory conditions | Thom | Academia Journal of Biology 21 Hong D D., Mai D T N., Lam B D., Tam L T., Thuy N T T., Ha N C., Thom L T., Hoang D D., Anh H L., & Thu N T H (2012) Combined effects of nitrat concentration and illumination conditions on the growth of microalga Haematococcus pluvialis Academia Journal of Biology, 34(4), 493–499 22 Imamoglu, E., Dalay, M C., & Sukan, F V (2010) Semi-continuous Cultivation of Haematococcus pluvialis for Commercial Production Applied Biochemistry and Biotechnology, 160(3), 764–772 23 Katsuda, T., Lababpour, A., Shimahara, K., & Katoh, S (2004) Astaxanthin production by Haematococcus pluvialis under illumination with LEDs Enzyme and Microbial Technology, 35(1), 81–86 24 Kim, Z.-H., Kim, S.-H., Lee, H.-S., & Lee, C.-G (2006) Enhanced production of astaxanthin by flashing light using Haematococcus pluvialis Enzyme and Microbial Technology, 39(3), 414–419 25 Kobayashi, M., Kakizono, T., Nishio, N., & Nagai, S (1992) Effects of light intensity, light quality, and illumination cycle on astaxanthin formation in a green alga, Haematococcus pluvialis Journal of Fermentation and Bioengineering, 74(1), 61–63 26 Kobayashi, M., Kurimura, Y., & Tsuji, Y (1997) Light-independent, astaxanthin production by the green microalga Haematococcus pluvialis under salt stress Biotechnology Letters, 19(6), 507–509 27 Lababpour, A., Hada, K., Shimahara, K., Katsuda, T., & Katoh, S (2004) Effects of Nutrient Supply Methods and Illumination with Blue Light Emitting Diodes (LEDs) on Astaxanthin Production by Haematococcus pluvialis J BIOSCI BIOENG., 98, 36 28 Lee, S.-A., Lee, N., Oh, H.-M., Kim, D G., & Ahn, C.-Y (2020) Fast-track production of st x nthin by reduced cultiv tion time with the ―red cell inocul tion system‖ (RCIS) nd v rious chemic l cues in Haematococcus lacustris Journal of Applied Phycology, 32(1), 41–50 29 Li, J., Zhu, D., Niu, J., Shen, S., & Wang, G (2011) An economic assessment of astaxanthin production by large scale cultivation of Haematococcus pluvialis Biotechnology Advances, 29(6), 568–574 30 Li, T (2015) Scopus preview—Scopus—Welcome to Scopus https://www.scopus.com/home.uri 31 Lichtenthaler, H K., & Wellburn, A R (1983) Determinations of total carotenoids and chlorophylls a and b of leaf extracts in different solvents Biochemical Society Transactions, 11(5), 591–592 32 Liu, T., Wang, J., Hu, Q., Cheng, P., Ji, B., Liu, J., Chen, Y., Zhang, W., Chen, X., Chen, L., Gao, L., Ji, C., & Wang, H (2013) Attached cultivation technology of microalgae for efficient biomass feedstock production Bioresource Technology, 127, 216–222 33 Lorenz, R T., & Cysewski, G R (2000) Commercial potential for Haematococcus microalgae as a natural source of astaxanthin Trends in Biotechnology, 18(4), 160–167 34 Ma, R., Thomas-Hall, S R., Chua, E T., Eltanahy, E., Netzel, M E., Netzel, G., Lu, Y., & Schenk, P M (2018) Blue light enhances astaxanthin biosynthesis metabolism and extraction efficiency in Haematococcus pluvialis by inducing haematocyst germination Algal Research, 35, 215–222 35 Margalith, P Z (1999) Production of ketocarotenoids by microalgae Applied Microbiology and Biotechnology, 51(4), 431–438 36 may, paul (n.d.) Chlorophyll Retrieved July 9, 2020, from 37 Miki, W (1991) Biological functions and activities of animal carotenoids Pure and Applied Chemistry, 63(1), 141–146 38 Mulders, K J M (n.d.) Phototrophic pigment production with microalgae 39 Murphy, T E., & Berberoglu, H (2014) Flux balancing of light and nutrients in a biofilm photobioreactor for maximizing Biotechnology Progress, 30(2), 348–359 37 photosynthetic productivity 40 Naumann, T., Çebi, Z., Podola, B., & Melkonian, M (2013) Growing microalgae as aquaculture feeds on twin-layers: A novel solid-state photobioreactor Journal of Applied Phycology, 25(5), 1413–1420 41 Olaizola, M (2000) Commercial production of astaxanthin from Haematococcus pluvialis using 25,000-liter outdoor photobioreactors Journal of Applied Phycology, 12(3), 499–506 https://doi.org/10.1023/A:1008159127672 42 Orosa, M., Franqueira, D., Cid, A., & Abalde, J (2005) Analysis and enhancement of astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis Bioresource Technology, 96(3), 373–378 43 Palozza, P., & Krinsky, N I (1992) Astaxanthin and canthaxanthin are potent antioxidants in a membrane model Archives of Biochemistry and Biophysics, 297(2), 291–295 44 Patel, R., Baker, S S., Liu, W., Desai, S., Alkhouri, R., Kozielski, R., Mastrandrea, L., Sarfraz, A., Cai, W., Vlassara, H., Patel, M S., Baker, R D., & Zhu, L (2012) Effect of Dietary Advanced Glycation End Products on Mouse Liver PLOS ONE, 7(4), e35143 45 Photosynthesis (2013, June 29) 46 Pigment Extraction Lab—Theory (n.d.) Retrieved July 15, 2020, from http://ressources.unisciel.fr/tp_virtuels/Pigment_Extraction_Lab/co/module_Virtu al%20Experiment_1.html 47 Podola, B., Li, T., & Melkonian, M (2017) Porous substrate bioreactors: A paradigm shift in microalgal biotechnology? Trends in Biotechnology, 35(2), 121– 132 48 Proctor, V W (1957) Some Controlling Factors in the Distribution of Haematococcus Pluvialis Ecology, 38(3), 457–462 JSTOR 49 Ranjbar, R., Inoue, R., Shiraishi, H., Katsuda, T., & Katoh, S (2008) High efficiency production of astaxanthin by autotrophic cultivation of Haematococcus pluvialis in a bubble column photobioreactor Biochemical Engineering Journal, 39(3), 575–580 50 Recht, L., Töpfer, N., Batushansky, A., Sikron, N., Gibon, Y., Fait, A., Nikoloski, Z., Boussiba, S., & Zarka, A (2014) Metabolite Profiling and Integrative Modeling Reveal Metabolic Constraints for Carbon Partitioning under Nitrogen 38 Starvation in the Green Algae Haematococcus pluvialis Journal of Biological Chemistry, 289(44), 30387–30403 51 Renstrøm, B., Borch, G., Skulberg, O M., & Liaaen-Jensen, S (1981) Optical purity of (3S,3’S)-astaxanthin from Haematococcus pluvialis Phytochemistry, 20(11), 2561–2564 https://doi.org/10.1016/0031-9422(81)83094-4 52 Shah, M M R., Liang, Y., Cheng, J J., & Daroch, M (2016) Astaxanthin- Producing Green Microalga Haematococcus pluvialis: From Single Cell to High Value Commercial Products Frontiers in Plant Science, 53 Shi, J., Podola, B., & Melkonian, M (2007) Removal of nitrogen and phosphorus from wastewater using microalgae immobilized on twin layers: An experimental study Journal of Applied Phycology, 19(5), 417–423 54 Solovchenko, A E (2013) Physiology and adaptive significance of secondary carotenogenesis in green microalgae Russian Journal of Plant Physiology, 60(1), 1–13 https://doi.org/10.1134/S1021443713010081 55 Solovchenko, A E., Chivkunova, O B., & Maslova, I P (2011) Pigment composition, optical properties, and resistance to photodamage of the microalga Haematococcus pluvialis cultivated under high light Russian Journal of Plant Physiology, 58(1), 9–17 https://doi.org/10.1134/S1021443710061056 56 Suh, I S., Joo, H.-N., & Lee, C.-G (2006) A novel double-layered photobioreactor for simultaneous Haematococcus pluvialis cell growth and astaxanthin accumulation Journal of Biotechnology, 125(4), 540–546 57 Supply, A R (n.d.) Lighting for Algae Cultures Algae Research Supply Retrieved July 15, 2020, from https://algaeresearchsupply.com/pages/lighting-foralgae-cultures 58 Sydney, E B., Novak, A C., de Carvalho, J C., & Soccol, C R (2014) Chapter 4—Respirometric Balance and Carbon Fixation of Industrially Important Algae In A Pandey, D.-J Lee, Y Chisti, & C R Soccol (Eds.), Biofuels from Algae (pp 67–84) Elsevier https://doi.org/10.1016/B978-0-444-59558-4.00004-8 59 Tripathi, U., Sarada, R., Rao, S R., & Ravishankar, G A (1999) Production of astaxanthin in Haematococcus pluvialis cultured in various media Bioresource Technology, 68(2), 197–199 https://doi.org/10.1016/S0960-8524(98)00143-6 39 60 Von Wettstein, D., Gough, S., & Kannangara, C (1995) Chlorophyll Biosynthesis The Plant Cell, 7(7), 1039–1057 61 Wen, X., Wang, Z., Ding, Y., Geng, Y., & Li, Y (2020) Enhancing the production of astaxanthin by mixotrophic cultivation of Haematococcus pluvialis in open raceway ponds Aquaculture International, 28(2), 625–638 62 Wolf, G., & Picioreanu, C (2007) Kinetic modeling of phototrophic biofilms: The PHOBIA model—Wolf—2007—Biotechnology and Bioengineering—Wiley Online Library 63 Xi, T., Kim, D G., Roh, S W., Choi, J.-S., & Choi, Y.-E (2016) Enhancement of astaxanthin production using Haematococcus pluvialis with novel LED wavelength shift strategy Applied Microbiology and Biotechnology, 100(14), 6231–6238 64 Zhang, W., Zhou, X., Zhang, Y., Cheng, P., Ma, R., Cheng, W., & Chu, H (2018) Enhancing astaxanthin accumulation in Haematococcus pluvialis by coupled light intensity and nitrogen starvation in column photobioreactors Journal of Microbiology and Biotechnology, 28(12), 2019–2028 40 ... ảnh hƣởng củ điều kiện môi trƣờng nuôi đến số đặc điểm sinh học củ vi tảo H lacustris Mụ ê ụ : - Đánh giá đƣợc ảnh hƣởng củ n ng độ dinh dƣỡng (nitrat v phosphat) số đặc điểm sinh học củ vi tảo. .. H lacustris - Đánh giá đƣợc ảnh hƣởng củ ph ánh sáng đến số đặc điểm sinh học củ vi tảo H lacustris - Đánh giá đƣợc ảnh hƣởng dạng môi trƣờng (lỏng v bán rắn) đến số đặc điểm sinh học củ vi tảo. .. dƣỡng đến sinh trƣởng phát triển củ vi tảo H lacustris 19 3.1.2 Ảnh hƣởng củ môi trƣờng dinh dƣỡng đến h m lƣợng sắc tố tảo H lacustris 3.2 ẢNH HƢỞNG CỦA PHỔ NH S NG Đ N ĐẶC ĐI M SINH HỌC CỦA VI TẢO