HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ PHÂN HẠNG MỨC ĐỘ NỞ HOA CỦA VI KHUẨN LAM Ở HỒ TRỊ AN DỰA VÀO MẬT ĐỘ TẾ BÀO VÀ HÀM LƢỢNG CHLOROPHYLL-A Phạm Thanh Lƣu1, Lê Thị Trang2, Trƣơng Văn Thân3, Bùi Mạnh Hà4, Phạm Nguyễn Kim Tuyến4 Viện Sinh học Nhiệt đới, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Trung tâm dịch vụ phân tích thí nghiệm TP Hồ Chí Minh Đại học Sài Gòn Vi khuẩn lam (VKL) sinh vật xuất trái đất cách hàng tỷ năm tồn ngày Tuy nhiên VKL chủ yếu diện thủy vực ao hồ, sơng suối có dịng chảy chậm Cùng với vi tảo, VKL đóng vai trị quan trọng sinh thái thủy vực cung cấp nguồn lượng sơ cấp cho chuỗi thức ăn thủy vực, đồng thời giải phóng lượng oxy vào khơng khí thơng qua q trình quang hợp Tuy nhiên, bên cạnh đóng góp tích cực tượng tăng trưởng bùng phát hay gọi nở hoa VKL gây nhiều hệ lụy lên chất lượng môi trường nước, tài nguyên thủy sản cân hệ sinh thái Trong số lồi VKL có khả sản sinh độc tố neurotoxin (độc tố thần kinh) hepatotoxin (độc tố gan) Độc tố VKL tác động nguy hiểm tới sinh vật thủy sinh sức khỏe người Sự cố nghiêm trọng làm chết 76 người thành phố Caruaru, Braxin sử dụng nguồn nước uống có chứa độc tố VKL Tổ chức Y tế giới (WHO) quy định nồng độ giới hạn nước uống µg/L (Duy cs., 2000) Ở nước ta, tượng VKL nở hoa độc tố chúng thường xuyên diện thủy vực nước Hồ Trị An hồ chứa nước nhân tạo có chức ngăn lũ, cấp nước sinh hoạt, tưới tiêu, rửa mặn, cải thiện chất lượng nước nuôi trồng thủy sản Là nguồn cung cấp trực tiếp gián tiếp nước sinh hoạt tưới tiêu cho hàng triệu dân Đồng Nai TP Hồ Chí Minh Các nghiên cứu gần cho thấy tượng VKL nở hoa ngày nghiêm trọng Trong nhiều lồi có khả sản sinh độc tố gây nguy hiểm cho sức khỏe người (Pham cs., 2015) Bài viết nhằm cung cấp số thông tin tượng nở hoa VKL, đồng thời cung cấp công cụ phân hạng đánh giá nhanh nở hoa VKL thông qua hai thông số mật độ tế bào VKL tổng hàm lượng chlorophyll-a I PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Địa điểm nghiên cứu Mẫu thu từ tháng đến tháng 11 năm 2016 (là giai đoạn VKL phát triển mạnh thường gây nở hoa hồ Trị An) vị trí kí hiệu TA1–TA4 hồ Trị An (Hình 1) Phƣơng pháp thu mẫu Mẫu định tính VKL thu lưới vớt thực vật phiêu sinh kiểu Juday hình nón với kích thước mắt lưới 25 µm Mẫu định lượng VKL mẫu phân tích chlorophyll-a thu tầng mặt can nhựa 2-L Mẫu cố định trường dung dịch formaline, nồng độ formaline cuối mẫu vào khoảng 4% Mẫu VKL nở hoa thu can nhựa 2-L giữ lạnh C 1693 TIỂU BAN SINH THÁI HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG Hình 1: Bản đồ vị trí điểm thu mẫu hồ Trị An Phƣơng pháp phân tích Phương pháp định danh lồi VKL dựa vào hình thái, sử dụng kính hiển vi quang học Olympus BX51 độ phóng đại 100–400 theo khóa phân loại VKL tác giả nước Desikachary (1959) Dương Đức Tiến (1996) Mẫu định lượng (0.1–0.5L) để lắng ống đong 48h, sau làm đơng đặc cịn lại khoảng mL Mật độ tế bào 1–5 mL mẫu xác định buồng đếm Sedgewick Rafter theo phương pháp Sournia (1978) Để phân tích hàm lượng chlorophyll-a, khoảng 50–300 mL mẫu lọc qua giấy lọc GF/C Chlorophyll-a tách chiết dung dịch aceton 90% qua đêm điều kiện nhiệt độ phòng khơng có ánh sáng Mẫu sau ly tâm 400 rpm, 20 phút để loại bỏ cặn bã Phần dịch chiết chứa chlorophyll-a phân tích máy UV-DR-500 (Hach, USA) Để phân tích tổng sinh khối khơ VKL, khoảng 50–300 mL mẫu VKL nở hoa lọc qua giấy lọc GF/C Mẫu sau sấy tủ ấm 50 C qua đêm Sinh khối VKL mẫu xác định cách cân cân điện tử Phƣơng pháp xử lý số liệu Các thông số kiểm tra phân phối chuẩn phương pháp Levene's test Trong trường hợp không đạt phân phối chuẩn số liệu chuyển hoá hàm log(X+1) để đạt phân phối chuẩn Phương pháp phân tích phương sai hai yếu tố (one- and two-way ANOVA) phân tích hậu kiểm (Tukey's HSD test) nhờ phần mềm SPSS (IBM Corp., Armonk, NY, Mỹ) sử dụng để kiểm tra khác biệt thông số đo đạc điểm đợt thu mẫu II KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Hàm lƣợng chlorophyl-a Hàm lượng chlorophyll-a tương ứng với mức độ nở hoa VKL trình bày bảng 1, hình Ở mức độ I không thấy xuất VKL mặt nước mắt thường hàm lượng chlorophyll-a vào khoảng 13 µg/L Hàm lượng chlorophyll-a tăng dần theo hàm y = 3.65e1.5x đạt 5500 µg/L mức V (Hình 2) 1694 HỘI NGHỊ KHOA HỌC TỒN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ Hình 2: Hàm lƣợng chlorophyll-a ứng với cấp độ nở hoa Bảng Hàm lƣợng chlorophyll-a tƣơng ứng với cấp độ nở hoa vi khuẩn lam Hàm lƣợng chlorophyll-a Cấp độ Mơ tả (µg/L) I Không thấy VKL mặt nước 13.34 5.45 II VKL lấm mặt nước 77.97 12.31 III VKL tạo ván mỏng mặt nước 517.54 172.56 IV VKL tạo ván dày mặt nước 1798.14 342.36 V VKL tạo ván phủ kín mặt nước 5635.145 772.96 Hình 3: Hình ảnh cấp độ nở hoa vi khuẩn lam 1695 TIỂU BAN SINH THÁI HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG Tất mẫu nở hoa không nở hoa phân thành nhóm kí hiệu I, II, III, IV V, tương ứng với mức đánh giá mắt thường là: không thấy VKL, VKL lấm mặt nước, VKL tạo ván mỏng mặt nước, VKL tạo ván dày mặt nước, VKL tạo ván phủ kín mặt nước (Bảng 1, hình 3) Mật độ tế bào sinh khối vi khuẩn lam Mật độ tế bào phân làm nhóm (Anova, p