Do tầm quan trọng của bước xử lý mẫu như vậy. Đồng thời,căn cứ vào đặc điểm của mẫu và mục đích của phân tích nên chúng tôi tiến hành chuyên đề “Xử lý mẫu huyết tương có chứa thuốc đ[r]
(1)XỬ LÍ MẪU HUYẾT TƯƠNG CĨ CHỨA THUỐC ĐAU DẠ DÀY OMEPRAZOL
BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHIẾT HỌC VIỆN QN Y
BỘ MƠN HĨA PHÂN TÍCH
Nhóm thực hiện: Lê Trung Lâm
Nguyễn Hoàng Hiệp Cao Trung Trường Lê Ngọc Tân
(2)TÀI LIỆU THAM KHẢO
1 Hóa phân tích II – PGS.TS Trần Tử An. 2 Sinh lý học – Học Viện Quân Y.
3 Hóa học hữu – ĐH Dược Hà Nội. 4 Journal of pharmaceutical and
Biomedical Analysis.
(3)NỘI DUNG BÁO CÁO
Đặt vấn đề
Mục tiêu
Cơ sở lý thuyết
Tiến hành xử lý mẫu kiểm định
Kết bàn luận
Kết luận
(4)ĐẶT VẤN ĐỀ
Trong phân tích mẫu, xử lý mẫu bước đầu tiên lại bước quan trọng Nó thường là nguồn sai số lớn cho kết quả, chí định thành cơng phương pháp phân tích. Xử lý mẫu trước hết nhằm bảo đảm chất
(5)MỤC TIÊU
Do tầm quan trọng bước xử lý mẫu Đồng thời,căn vào đặc điểm mẫu mục đích phân tích nên chúng tơi tiến hành chun đề “Xử lý mẫu huyết tương có chứa thuốc đau dày Omeprazol phương pháp chiết” với mục tiêu sau:
Xây dựng qui trình xử lý mẫu huyết tương…bằng kĩ thuật chiết.
(6)CƠ SỞ LÝ THUYẾT
A Mẫu huyết tương
• Huyết tương phần lỏng máu
chứa 92% nước,còn lại chất hữu cơ vơ cơ.
• Trong thành phần huyết tương thì protein thành phần gây cản trở
cho phân tích chất.
Xử lý mẫu huyết tương loại bỏ
(7)CƠ SỞ LÝ THUYẾT
Loại bỏ Protein khỏi mẫu huyết tương:
1)Nhiệt hóa mẫu huyết tương: hầu hết protein huyết tương bị đơng vón nhiệt.
2)Kết tủa protein: acid dung môi hữu cơ.
(8)CƠ SỞ LÝ THUYẾT
B OMEPRAZOL
• Cơng thức: C17H19N3O3S
{5-methoxy-2-[[(4-methoxy-3,5-dimethylpiridin-2-yl) methyl] sulfinyl]-1H-benzimidazol}
N
H O
S
N
N CH3
CH3
(9)CƠ SỞ LÝ THUYẾT
• Tính chất đáng lưu ý:
-Vừa có tính acid, vừa có tính base, hấp thụ mạnh bức xạ tử ngoại.
- Rất khó tan nước, aceton, isopropan Tan trong methanol, ethanol.
- Trong mơi trường acid, omeprazol nhanh chóng bị phân hủy.
(10)CƠ SỞ LÝ THUYẾT
Căn vào đặc điểm mẫu tính chất của omeprazol chọn cách loại bỏ protein phương pháp chiết lỏng-lỏng với hệ dung môi nước-aceton.
C Kĩ Thuật Chiết Lỏng- Lỏng.
1.Nguyên tắc.
(11)CƠ SỞ LÝ THUYẾT
Thực tế chứng minh: với
thể tích dung mơi chiết, chia nhiều lần hiệu xuất chiết cao
(lượng chất cần chiết nằm lại pha nước ít).
Mẫu sau xử lý phải cịn tồn chất
cần phân tích.
Novocain tan Cloroform – nước có D = 85 Nồng độ lại
Novocain pha nước sau chiết từ 50ml dung dịch nước 1,00.10-3
Cloroform:
1 Chiết lần hết 50ml
1
50
1 a 1, 00.10 1,16.10
50 85
r Novoc in M
50
2 a 1,00.10 5, 28.10
25 85
r Novoc in M
3.Chiết lần x 10ml
5
3 10
50
5 a 1,00.10 5, 29.10
10 85
r Novoc in M
(12) Hằng số phân bố (hệ số phân bố) n S A A D ] [ ] [
A(S) : nồng độ mol CB nước
A(n) : nồng độ mol CB dung môi
- D phụ thuộc vào nhiệt độ, áp suất, tính chất chất tan dung môi
- D lớn chiết có hiệu qủa
Ví dụ: Fe3+ Pha dm S
Ete etylic Ete etylic
Pha n H2O + HF H2O + HCl
D 0,001 99,0
(13) Hệ số phân bố d (hằng số phân bố biểu kiến) n A d ] ] [ [A
S [A]: tổng nồng độ CB A
dm khác
d không bắt buộc số
Hiệu suất chiết R
a0 - số milimol a chất A hoà tan Vn ml nước Chiết VS ml dm
a1 - số milimol lại pha nước Nồng độ CB :
n n
V a A] 1
(14)Hiệu suất chiết R 0 1 a r D r a
r = Vn / VS
Chiết n lần với VS ml dm A lại a0
r D r a n n
Hiệu suất chiết sau n lần Rn : Rn = - Δn Δn – sai số chiết
n n n r D r a a 0
Lượng chất A sau chiết: an = [A]nVn ; a0 = [A0]Vn
0 ] [ ] [ A r D r A n n
(15)XỬ LÝ MẪU VÀ KIỂM ĐỊNH
1 XỬ LÝ MẪU
(16)(17)XỬ LÝ MẪU VÀ KIỂM ĐỊNH
2 KIỂM ĐỊNH
Cho mẫu chế phẩm (lấy từ mẫu huyết tương loại bỏ protein) tác dụng với dung dịch CuSO4 môi trường kiềm Nếu PƯ tạo màu khác từ xanh tím đến đỏ tím mẫu
HT chưa làm protein Nếu khơng có tượng thì mẫu HT loại bỏ protein.
Hòa mẫu chế phẩm vào nước tạo hỗn dịch Thêm dung dịch NaOH 10% Lắc Hỗn dịch trở nên Trung hòa
NaOH dư,dung dịch tạo kết tủa có màu với số kim loại nặng Cu, Pb, Fe…
(18)KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
1 Vật liệu: Mẫu huyết tương 600ml ; 500ml aceton ; dụng cụ
thí nghiệm cần thiết
2 Chia mẫu huyết tương (100ml) :
Trong trình chiết có thay đổi áp suất bình chiết - Mẫu 1: 100ml chiết lần với 100ml aceton Trong trình chiết tăng dần nhiệt độ
- Mẫu 2: 100ml chiết lần với 50ml aceton môi trường PH<7
- Mẫu 3: 100ml chiết lần với 20ml aceton môi trường PH>7
- Mẫu 4: 100ml chiết 10 lần với 10ml acceton
- Mẫu 5: 100ml chiết 20 lần với 5ml aceton
(19)KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
Lượng protein lại mẫu huyết tương:
Mẫu Mẫu Mẫu Mẫu Mẫu Mẫu
C 12g/l 5,88g/l 2,25g/l 1,25g/l 0,83g/l 4,4g/l
Trích từ mẫu mẫu lượng vào ống
(20)KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
ống nghiệm lấy từ mẫu có lượng kết tủa lớn nhiều so với mẫu có số lần chiết 20
Chọn qui trình chiết với dung mơi aceton tốt có hiệu suất chiết lớn nhất, lớn chiết với dung môi NaCl:
1 98,85%
n n n
r R
D r
(21)KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
Lấy dịch chiết mẫu (1 – 5) đem kiểm định ta thu được kết sau:
Mẫu Mẫu Mẫu Mẫu Mẫu
Hiện tượng Không P P ; O P ; O P ; O
Qui Trình Chiết với điều kiện tối ưu: 1.Chiết với dung môi aceton 20 lần
2.Chiết điều kiện nhiệt độ phòng
(22)KẾT LUẬN
1 Đã xây dựng qui trình xử lý mẫu huyết tương có chứa thuốc đau dày Omeprazol.
2 Kiểm định độ tinh
protein mẫu huyết tương sau
(23)(24)