Báo cáo khóa luận tốt nghiệp: Bước đầu nghiên cứu nuôi cấy chủng Lactobacillus acidophilus trên môi trường bán rắn

Mục tiêu Báo cáo khóa luận tốt nghiệp: Bước đầu nghiên cứu nuôi cấy chủng Lactobacillus acidophilus trên môi trường bán rắn xác định hàm lượng sinh khối L. acidophilus thu được khi lên men trên môi trường MRS bán rắn, so sánh với lên men trên môi trường MRS rắn thông thường. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết tài liệu.

TRƯỜNG ĐẠI HỌC ĐÀ LẠT KHOA SINH HỌC     BÁO CÁO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHÓA 32 ĐỀ TÀI: BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU NUÔI CẤY CHỦNG LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS TRÊN MƠI TRƯỜNG BÁN RẮN GVHD: Ths Hồng Việt Hậu SVTH: Nguyễn Thị Phương Thủy Mục tiêu đề tài Xác định hàm lượng sinh khối L acidophilus thu lên men môi trường MRS bán rắn, so sánh với lên men môi trường MRS rắn thông thường ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU Chủng Lactobacillus acidophilus • Nguồn: viện Human Hungary • Được cung cấp từ phịng công nghệ vi sinh trường Đại học Đà Lạt BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM NGHIỆM THỨC 1: Khảo sát hàm lượng sinh khối L acidophilus nuôi cấy môi trường bán rắn với hàm lượng agar (g/l) NGHIỆM THỨC 2: Khảo sát hàm lượng sinh khối L acidophilus nuôi cấy môi trường bán rắn với hàm lượng agar (g/l) NGHIỆM THỨC 3: Khảo sát hàm lượng sinh khối L acidophilus nuôi cấy môi trường bán rắn với hàm lượng agar (g/l) NGHIỆM THỨC 4: Khảo sát hàm lượng sinh khối L acidophilus nuôi cấy môi trường bán rắn với hàm lượng agar (g/l) NGHIỆM THỨC 5: Khảo sát hàm lượng sinh khối L acidophilus nuôi cấy môi trường rắn với hàm lượng agar 16 (g/l) CHỦNG GIỐNG PHỤC HỒI GIỐNG CẤY PHÂN VÙNG NHÂN GIỐNG CẤP KIỂM TRA GIỐNG QUY TRÌNH THỰC HIỆN LÊNMEN MENBỀ BỀMẶT MẶT LÊN THU SINH KHỐI TẾ BÀO CỐ ĐỊNH SINH KHỐI TẾ BÀO SẤY VÀ XAY SINH KHỐI SAU CỐ ĐỊNH KIỂM TRA MẬT ĐỘ VÀ HÌNH THÁI TẾ BÀO L ACIDOPHILUS CỦA SẢN PHẨM VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP VẬT LIỆU • Môi trường MRS nghiệm thức agar khác PHƯƠNG PHÁP • Phục hồi giống • Cấy phân vùng • Nhân giống cấp • Lên men bề mặt • Thu cố định sinh khối tế bào • Sấy xay sau cố định • Kiểm tra mật độ hình thái tế bào Hình 3.1 Kết phục hồi L acidophilus Hình 3.2 Kết cấy phân vùng L acidophilus Hình 3.3 MRS lỏng trước nhân giống Hình 3.4 Kết nhân giống cấp L acidophilus Kết kiểm tra mật độ tế bào L acidophilus trước lên men 4.65*10 CFU/ml > 10 CFU/ml Hình 3.6 Hình thái tế bào L acidophilus Hình 3.7 Kết lên men L acidophilus mơi trường bán rắn Hình 3.7 Kết lên men L acidophilus mơi trường bán rắn Hình 3.8 Kết lên men L acidophilus mơi trường rắn Hình 3.9 Sinh khối L acidophilus cố định bột mì Hình 3.10 Sinh khối L acidophilus cố định sấy Hình 3.11 Chế phẩm L acidophilus sau xay Bảng 3.1 Khối lượng sản phẩm đạt nghiệm thức NGHIỆM THỨC LẦN LẦN LẦN TRUNG BÌNH (g) (g) (g) (g) 750 768 762 760 755 764 766 761.7 760 765 765 763.3 765 763 767 765 750 752 758 753.3 Nghiệm thức ( agar: g/l ) Nghiệm thức ( agar: g/l ) Nghiệm thức ( agar: g/l ) Nghiệm thức ( agar: g/l ) Nghiệm thức ( agar: 16 g/l) Bảng 3.2 Mật độ tế bào L acidophilus nuôi cấy nồng độ agar: 5, 6, 7, 8, 16 (g/l) Định lượng mật độ tế bào sau cố định Kết Hàm lượng agar(g/l) trung bình (CFU/g) Lần Lần Lần (CFU/g) (CFU/g) (CFU/g) 10 3.36*10 5.77*10 2.23*10 3.25*10 16 3.42*10 10 3.89*10 5.84*10 10 10 4.31*10 5.26*10 10 10 3.79*10 5.62*10 10 10 BÁN RẮN RẮN 11 11 11 11 3.27*10 3.71*10 3.28*10 11 11 4.18*10 3.52*10 4.45*10 11 11 11 3.23*10 3.49*10 3.72*10 11 11 11 Bảng 3.3 Kết mật độ tế bào L acidophilus ml môi trường nuôi cấy Khối lượng Nghiệm thức CFU/g sản Tổng thể tích mơi CFU/ml mơi trường phẩm trường ni cấy (ml) nuôi cấy sản phẩm(g) 10 Nghiệm thức 760 3.79*10 Nghiệm thức 761.7 5.62*10 Nghiệm thức 763.3 3.23*10 Nghiêm thức 765 3.49*10 Nghiệm thức 753.3 3.72*10 10 11 11 11 10 1050 2.74*10 1050 4.08*10 1050 2.35*10 1050 2.54*10 1050 2.67*10 10 11 11 11 Biểu đồ 3.1 Biểu đồ thể chênh lệch mật độ L acidophilus lên men môi trường có hàm lượng agar 5, 6, 7, 8, 16 (g/l) CFU/ml 2.5 1.5 0.5 2.67 2.54 2.35 0.27 Column2 0.4 16 Hàm lượng agar (g/lít) KẾT LUẬN Qua nghiên cứu ni cấy vi khuẩn L acidophilus môi trường bán rắn, rút số kết luận sau: Trong nồng độ agar bán rắn khảo sát, nồng độ agar cho sinh khối tế bào cao g/l Hiệu suất nuôi cấy môi trường rắn bán rắn tương đương nhau: môi trường rắn đạt 2.67*10 2.54*10 11 CFU/ml mơi trường ni cấy Có thể sử dụng phương pháp nuôi cấy môi trường bán rắn (agar: g/l) để nuôi cấy L acidophilus thay cho phương pháp nuôi cấy môi trường rắn 11 CFU/ml môi trường nuôi cấy, bán rắn đạt KIẾN NGHỊ Khảo sát theo thời gian khả giảm sút mật độ tế bào L acidophilus nuôi cấy môi trường MRS bán rắn (sau cố định chất mang) CÁM ƠN QUÝ THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN ĐÃ QUAN TÂM THEO DÕI ... môi trường rắn đạt 2.67*10 2.54*10 11 CFU/ml môi trường nuôi cấy Có thể sử dụng phương pháp ni cấy môi trường bán rắn (agar: g/l) để nuôi cấy L acidophilus thay cho phương pháp nuôi cấy môi trường. .. vi khuẩn L acidophilus môi trường bán rắn, rút số kết luận sau: Trong nồng độ agar bán rắn khảo sát, nồng độ agar cho sinh khối tế bào cao g/l Hiệu suất nuôi cấy môi trường rắn bán rắn tương đương... hàm lượng sinh khối L acidophilus nuôi cấy môi trường bán rắn với hàm lượng agar (g/l) NGHIỆM THỨC 3: Khảo sát hàm lượng sinh khối L acidophilus nuôi cấy môi trường bán rắn với hàm lượng agar