luận văn
BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TR ƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ……………………………. LÊ THỊ HUỆ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH HỌC VÀ BẢO TỒN TINH DỊCH CHÓ BERGER LU ẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : THÚ Y Mã s ố : 60.62.50 Ng ười hướng dẫn khoa học: TS. ðỖ VĂN THU HÀ N ỘI – 2008 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết qu ả nêu trong luận văn là trung thực và chưa ñược công bố trong bất kỳ công trình nào. Tôi xin cam ñoan các thông tin trích dẫn trong luận văn ñã chỉ rõ nguồn gốc. Tác gi ả luận văn Lê Thị Huệ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… ii LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành luận văn này, ngoài sự nỗ lực của bản thân, tôi còn nh ận ñược sự hướng dẫn trực tiếp của Thầy hướng dẫn: TS. ðỗ Văn Thu. Tôi xin bày t ỏ lòng biết ơn chân thành tới sự chỉ bảo tận tình của Thầy. Tôi xin bày t ỏ lòng biết ơn sâu sắc tơi toàn bộ các thầy cô thu ộc khoa Thú y – Trường ðHNN Hà Nội, những người trực tiép truyền d ạy cho tôi những kiến thức cơ bản, bổ ích trong suốt quả trình tôi học t ập tại khoa. Tôi xin chân thành c ảm ơn Phòng Sinh học tế bào sinh sản, Vi ện Công nghệ Sinh học – Viện Khoa học & Công nghệ Việt Nam, Trung tâm Hu ấn luyện chó nghiệp vụ (C32)- Bộ Công an. Xin chân thành c ảm ơn gia ñình và bạn bè, ñã tạo ñiều kiện giúp ñỡ tôi hoàn thành luận văn này. Hà N ội, ngày tháng năm Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc Nụng nghip iii MC LC STT Trang 1. M ủu 1 1.1. t vn ủ 1 1.2. Mc ủớch nghiờn cu 3 2. Tng quan nghiờn cu 4 2.1. Tỡnh hỡnh phỏt trin v s dng chú nghip v Vit Nam 4 2.2. Tỡnh hỡnh nghiờn cu trờn th gii 6 2.3. Mt s ủc ủim sinh hc tinh dch chú Berger 7 2.4. Mụi trng pha loóng v ủụng lnh tinh dch chú 16 2.5. S lc v quỏ trỡnh giao phi v phúng tinh 23 3. i tng, ni dung v phng phỏp nghiờn cu 25 3.1. i tng, ủa ủim v thi gian nghiờn cu 25 3.2. Ni dung nghiờn cu 25 3.2.1 Nghiờn cu mt s ch tiờu sinh hc tinh dch v cỏc yu t nh h ng lờn phm cht tinh dch 25 3.2.2. Pha loóng, bo tn tinh dch chú 5 0 C 26 3.2.3 ụng lnh tinh dch chú - 196 0 C 26 3.2.4. Th tinh nhõn to chú 26 3.3. Phng phỏp nghiờn cu 26 4. Kết quả và thảo luận 46 4.1. Sinh học tinh dịch chó và các yếu tố ảnh hởng 46 4.2. Pha long, bảo tồn tinh dịch chó ở 5 0 C 57 4.3. Đông lạnh tinh dịch chó ở - 196 0 C 68 4.4. Thụ tinh nhân tạo chó 74 5. Kết luận và đề nghị 78 5.1. Kết luận 78 5.2. Đề nghị 79 Tài liệu tham khảo 80 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc Nụng nghip iv DANH MC CC BNG Bng 1 Mt s ch tiờu sinh hc tinh dch chú Berger 46 Bng 2 Tớnh cht lý húa ca tinh dch chú Berger 52 Bng 3 nh hởng của mùa vụ lên chất lợng tinh dịch 54 Bng 4 nh hởng của chu kỳ khai thác lên phẩm chất tinh dịch 56 Bng 5 nh hng ca mụi trng pha loóng lờn phm cht tinh dch trong quỏ trỡnh bo tn 58 Bng 6 nh hng ca nhit ủ bo tn lờn phm cht tinh dch 60 Bng 7 nh hng ca t l lũng ủ trng g trong mụi trng lờn phm cht tinh dch 62 Bng 8 nh hng ca mt s loi ủng trong mụi trng lờn phm cht tinh dch 64 Bng 9 So sỏnh nh hng ca glycerol v Dimethyl sulfoxide lờn phm cht tinh dch 67 Bng 10 nh hởng của thời gian cân bằng tinh dịch trớc đông lạnh lên phẩm chất tinh dịch đông lạnh 69 Bng 11 nh hởng của thời điểm bổ sung glycerol lên chất lợng tinh dịch đông lạnh 71 Bng 12 nh hởng của tốc độ giải đông lên phẩm chất tinh đông lạnh 72 Bng 13 Kt qu th tinh nhõn to bng tinh bo tn dng lng 5 0 C 75 Bng 14 Kt qu th tinh nhõn to bng tinh ủụng lnh 77 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 1 1. MỞ ðẦU 1.1 ðẶT VẤN ðỀ Từ lâu chó là ñộng vật gần gũi, thân thiện với con người và ñược con người nuôi dưỡng thuần hóa, là con vật thông minh hiểu ý và trung thành với chủ. Ngoài ra chó còn có những khả năng ñặc biệt mà các loài vật khác không có: mắt có khả năng nhìn xuyên trong bóng tối, mũi có khả năng phân biệt 19000 mùi khác nhau. Chính vì thế mà ngày nay một số giống chó ñã ñược huấn luyện, biệt hóa ñể trở thành chó nghiệp vụ phục vụ trong công tác an ninh, quốc phòng. Năm 1960 chúng ta ñã xây dựng ñàn chó nghiệp vụ từ các nguồn giống nhập và lai tạo. Hiện nay có 5 giống chó ngoại (chó Berger, Cocker, Rottweiler, Bốc sơ và Labrador) ñược sử dụng vào công tác nghiệp vụ của ngành Công an và Quân ñội. Hai giống chó ñang ñược sử dụng nhiều và có khả năng nhất là chó Berger Việt Nam và chó Cocker (Tây Ban Nha). Giống chó Berger Việt Nam là con lai hỗn hợp từ chó Berger Trung Quốc (ñược nhập từ những năm 1960), Berger Liên Xô và CHDC ðức (nhập từ những năm 1970, 1980). ðây là hai giống chó chủ lực, ñược huấn luyện trang bị cho các ñơn vị, quản lý sử dụng chó nghiệp vụ của Công an các tỉnh, thành phố và các cơ sở giam giữ thuộc ngành Công an và các ñồn biên phòng. Giống chó này hiện tại ở nước ta có hàng mấy nghìn con ñược nuôi tại Trung tâm Huấn luyện chó nghiệp vụ của Bộ Công an và trường D24 Bộ ñội biên phòng. Tại Trung tâm Huấn luyện chó nghiệp vụ có một ñàn chó tương ñối thuần, nhưng số lượng rất ít. Trong khu vực nhân dân, chúng khá phổ biến và ñược nuôi dưỡng dùng trong việc bảo vệ và làm kinh tế, nhưng lai tạp khá nhiều và không ñược chọn lọc do việc nhân giống tự phát. Chó Cocker (Tây Ban Nha) ñược nhập từ Liên Xô, Cu-ba trong những năm 1980, thường sử dụng vào mục ñích huấn luyện ñể phát hiện hơi ñặc ñịnh (ma tuý và chất nổ). Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 2 ðây là giống chó dễ nuôi, tính thích nghi cao, dễ phát triển. Cũng như giống chó Berger, do việc nhân giống tự phát, cho nên ñàn chó Cocker ñang có nguy cơ bị thoái hoá và tạp pha. Tuy ñàn chó Berger và Cocker có số lượng lớn, nhưng do chưa có một hệ thống nhân giống theo quy hoạch, do ñó ñã làm mất ñi những ñặc ñiểm, khả năng vốn có của giống chó nghiệp vụ. Mặc dù chó nghiệp vụ có vai trò lớn trong việc giữ gìn an ninh, quốc phòng nhưng do số lượng còn ít vì ña số các giống chó nghiệp vụ ñều nhập giống từ nước ngoài và giá thành nhập nội từ 5000USD - 8000USD. Ở Việt Nam, hiện nay mạng lưới thụ tinh nhân tạo bằng tinh pha loãng bò, lợn, trâu, ngựa,… ñã phổ biến trên toàn quốc, ngoài ra chúng ta ñã xây dựng ñược ngân hàng tinh ñông lạnh phục vụ cho công tác thụ tinh nhân tạo và lưu giữ gen quí. Bởi vậy, việc nghiên cứu ñể nhân giống chó nghiệp vụ là một việc cần thiết và cấp bách. Vấn ñề ñặt ra là cần có những biện pháp cụ thể ñể nhân giống, lai tạo giống chó. Thụ tinh nhân tạo là phương pháp tối ưu ñể sử dụng có hiệu quả ñực giống tốt, có khả năng di truyền cao, nhằm cải tạo giống, giảm số lượng ñực giống, cùng với công nghệ gen di truyền, thụ tinh nhân tạo ñã ñưa ñược công nghệ sinh sản ñạt ñến ñỉnh cao. Nghiên cứu ñặc ñiểm sinh học tinh dịch là cơ sở khoa học ñể ñánh giá chất lượng tinh dịch, từ ñó giúp xác ñịnh pha loãng bảo tồn tinh ñạt chất lượng cao. Chỉ khi nào tinh dịch có chất lượng tốt mới ñưa vào pha loãng bảo tồn và ñông lạnh. Nếu biết ñược lượng tinh dịch, nồng ñộ, hoạt lực, sức sống, kỳ hình, kỳ hình acrosome của tinh dịch thì có thể xác ñịnh ñược tỷ lệ pha loãng thích hợp. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 3 Hiện nay, ở nước ta việc thụ tinh nhân tạo và ñông lạnh tinh dịch chó còn là vấn ñề mới và ít ñược quan tâm, kể cả các Trung tâm Huấn luyện chó nghiệp vụ vẫn sử dụng hình thức phối tự nhiên, trong khi ñó thì thế giới ñã có từ lâu. ðể tạo ra ñược chó nghiệp vụ có phẩm giống tốt, ñồng thời lưu giữ bảo tồn ñược quỹ gen quí của các giống chó nghiệp vụ chúng tôi tiến hành thực hiện ñề tài: “Nghiên cứu một số chỉ tiêu sinh học và bảo tồn tinh dịch chó Berger” 1.2. MỤC ðÍCH NGHIÊN CỨU - Xác ñịnh một số chỉ tiêu sinh học tinh dịch chó Berger làm cơ sở khoa học ñể ñánh giá phẩm chất tinh dịch và tuyển chọn ñực giống. - Bảo tồn tinh dịch chó. - Thụ tinh nhân tạo chó nghiệp vụ. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 4 2. TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 2.1. TÌNH HÌNH PHÁT TRIỂN VÀ SỬ DỤNG CHÓ NGHIỆP VỤ Ở VIỆT NAM Năm 1960 chúng ta ñã xây dựng ñàn chó nghiệp vụ từ các nguồn giống nhập và lai tạo. Hiện nay, chúng ta có 5 giống chó ngoại ñược sử dụng vào công tác nghiệp vụ của ngành Công an và Quân ñội (chó Berger, Cocker, Rottweiler, Bốc sơ và Labrador). Hai giống chó ñang ñược sử dụng nhiều và có khả năng nhất là chó Berger Việt Nam và chó Cocker (Tây Ban Nha) Giống chó Berger Việt Nam là con lai hỗn hợp từ chó Berger Trung Quốc (ñược nhập từ những năm 1960), Berger Liên Xô và CHDC ðức (nhập từ những năm 1970, 1980). ðây là hai giống chó chủ lực, ñược huấn luyện trang bị cho các ñơn vị, quản lý sử dụng chó nghiệp vụ của công an các tỉnh, thành phố và các cơ sở giam giữ thuộc ngành Công an và các ñồn biên phòng, cửa khẩu của lực lượng Bộ ñội biên phòng. Giống chó này hiện tại ở nước ta có tới hàng mấy nghìn con ñược nuôi tại Trung tâm Huấn luyện chó nghiệp vụ của Bộ Công an, trường D24 Bộ ñội biên phòng. Ngay từ những năm ñầu chúng ta ñã tiến hành giữ giống thuần, lai tạo cho sinh sản và phát triển. Cho tới nay, chúng ñã có ngoại hình, thể chất và năng lực làm việc không kém so với giống gốc ban ñầu, chúng ñã thích nghi tốt trong ñiều kiện khí hậu, nuôi dưỡng ở nước ta và ñã có những thành tích xuất sắc trong phục vụ chiến dấu. Tại Trung tâm Huấn luyện chó nghiệp vụ có một ñàn chó tương ñối thuần, nhưng số lượng rất ít. Trong khu vực nhân dân, chúng khá phổ biến và ñược nuôi dưỡng dùng trong việc bảo vệ và làm kinh tế, nhưng lai tạp khá nhiều và không ñược chọn lọc do việc nhân giống tự phát. Chó Cocker (Tây Ban Nha) ñược nhập từ Liên Xô, Cu-ba trong những năm 1980, thường sử dụng vào mục ñích huấn luyện ñể phát hiện hơi ñặc ñịnh (ma tuý và chất nổ). ðây là giống chó dễ nuôi, tính thích nghi cao, dễ phát triển. Cũng như giống chó Berger, do việc nhân giống tự phát, cho nên ñàn chó Cocker ñang có nguy cơ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 5 bị thoái hoá và tạp pha. Tuy ñàn chó Berger và Cocker có số lượng lớn, nhưng do chưa có một hệ thống nhân giống theo quy hoạch, việc nuôi dưỡng tự phát, do ñó ñã làm mất ñi những ñặc ñiểm, khả năng vốn có của giống chó nghiệp vụ. Chó nghiệp vụ hiện ñang sử dụng tại Bộ Công an, không có nguồn gốc từ Việt Nam mà ñược nhập từ Nga, ðức, Cuba và Trung Quốc (với giá 5000 - 8000 USD/con). Các giống chó này ñang ñược bảo tồn và phát triển tại Việt Nam, ñã và ñang ñược sử dụng trong các lĩnh vực bảo vệ, truy tìm dấu vết hơi, phát hiện ma tuý. Hàng năm chúng thực hiện trên 10.000 nhiệm vụ khác nhau. Hiện nay, chúng ta ñã sử dụng chó nghiệp ñể vụ kiểm tra, phát hiện chất ma tuý tại cửa khẩu Tân Sơn Nhất (Quang Khải, 2004). Tuy chó nghiệp vụ có vai trò rất lớn trong công tác an ninh, quốc phòng, truy tìm ma túy, nhưng vì số lượng chó còn ít nên chỉ ñáp ứng ñược cho cấp tỉnh và thành phố. Bộ Công an ñã có kế hoạch trang bị chó nghiệp vụ tới cấp huyện nhưng khó khăn hiện nay là sự khan hiếm về con giống. Sử dụng chó nghiệp vụ là một biện pháp công tác quan trọng của công tác bảo vệ an ninh trật tự và luôn ñược thể hiện trong các chỉ ñạo của ngành Công an xuyên suốt lịch sử công tác, chiến ñấu của ngành. Cụ thể: chỉ thị số 312/CT- BNV ngày 18/6/1982 về việc tăng cường hiệu quả công tác nuôi dạy và sử dụng chó nghiệp vụ; Chỉ thị số 13/CT- BNV ban hành kèm theo quyết ñịnh số 178/Qð- BNV ngày 29/9/1992 về việc tăng cường hiệu quả công tác huấn luyện, sử dụng chó nghiệp vụ trong lực lượng Công an nhân dân; và gần ñây là chỉ thị số 09/CT- BCA(C12) ban hành kèm theo quyết ñịnh số 564/Qð- BCA (C12) của Bộ trưởng Bộ Công an ngày 16/6/2004 về tăng cường hiệu quả công tác quản lý, sử dụng chó nghiệp vụ trong lực lượng Công an nhân dân. Trong ñó ñặc biệt nhấn mạnh các nội dung: [...]... ð C ðI M SINH H C TINH D CH CHÓ BERGER Tinh d ch g m 2 ph n: tinh trùng chi m 3 - 5% và tinh thanh chi m 95 97% - Tinh trùng ñư c sinh ra t ng sinh tinh d ch hoàn và ñư c gi l i mào tinh - Tinh thanh g m r t nhi u các ch t hoá sinh h c như: ñư ng, axit h u cơ, các ch t hoàn nguyên, các lo i m và các kim lo i, Tinh thanh do các tuy n sinh d c ph ti t ra D ch ti t c a m i tuy n có ch c năng và thành... khai thác tinh d ch - ð a ñi m nghiên c u: Phòng Sinh h c t bào sinh s n - Vi n Công ngh sinh h c - Vi n Khoa h c và Công ngh Vi t Nam Trung tâm Hu n luy n chó nghi p v (C32) - B Công an Th i gian th c t p t tháng 01/2008- 07/2008 3.2 N I DUNG NGHIÊN C U 3.2.1 Nghiên c u m t s ch tiêu sinh h c tinh d ch và các y u t nh hư ng lên ph m ch t tinh d ch Các ch tiêu sinh h c tinh d ch chó - Th tích tinh d ch... chèo giúp tinh trùng ho t ñ ng 2.3.2 Th tích tinh d ch Lư ng tinh d ch là s ml h n h p tinh trùng và tinh thanh do tuy n sinh d c ph ti t ra trong 1 l n l y tinh (ml/l n) theo Tr n Ti n Dũng và c ng s 2002 [2] Theo Salisbury (1987) ( D n t ð Văn Thu (2001) [4] ) lư ng tinh d ch là ch tiêu ki m tra ñánh giá ch t lư ng tinh trùng trong th tinh Theo Dương ðình Long (1996) [3] lư ng tinh d ch là ch tiêu v... l th tinh c a tinh trùng Mào tinh là nơi cu i cùng c a quá trình sinh tinh, là nơi d tr tinh trùng trùng ñây, tinh tr ng thái không ho t ñ ng nên hai tháng v n có kh năng th tinh, n u quá th i gian này tinh trùng s b ch t và ñư c h p th Khi tác nhân nào ñó tác ñ ng b t l i ñ n quá trình sinh tinh, tình tr ng s c kho c a ñ c gi ng thì t l tinh trùng s ng s gi m T l s ng c a tinh trùng ph thu c vào nhi... Pha phóng tinh th ba ch y u là tinh thanh, có tác d ng r a lòng ni u ñ o chó ñ c và nút c t cung chó cái Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………25 3 ð I TƯ NG, N I DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 3.1 ð I TƯ NG, ð A ðI M VÀ TH I GIAN NGHIÊN C U - ð i tư ng nghiên c u: S d ng chó Berger ñư c nuôi t i Trung tâm Hu n luy n chó nghi p v (C32) - B Công an Chó ñ c gi... hình Tinh trùng kỳ hình là nh ng tinh trùng có hình d ng khác thư ng so v i tinh trùng bình thư ng T l tinh trùng kỳ hình là ch tiêu ñánh giá ch t lư ng tinh d ch và là ch tiêu có tính ñ nh lư ng T l tinh trùng kỳ hình cao thì ch t lư ng tinh d ch kém Tinh trùng kỳ hình có nh hư ng x u ñ n kh năng th thai Ch nh ng tinh trùng kho m nh có hình d ng bình thư ng m i tham gia vào quá trình th tinh Tinh... ng chó quý Trong th i gian v a qua, Vi n Công ngh Sinh h c ñã ñư c giao nhi m v th c hi n ñ tài: Nghiên c u công ngh b o t n tinh d ch và th tinh nhân t o chó nghi p v c a ngành Công an” K t qu c a ñ tài ñã b o t n ñư c tinh d ch d ng pha loãng và ñông l nh, thành công trong th tinh nhân t o chó góp ph n phát tri n ñàn chó có ch t lư ng cao ph c v cho công tác an ninh và Qu c phòng 2.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN... (1977) (D n t ð Văn Thu (2001 [5]); Dương ðình Long (1996) [3] cho r ng lư ng tinh d ch t l ngh ch v i n ng ñ tinh trùng Nghĩa là lư ng tinh d ch l n thì n ng ñ tinh trùng gi m N ng ñ tinh trùng là ch tiêu v s c s n xu t sinh h c nên ph thu c vào nhi u y u t N ng ñ tinh trùng cao hay th p ph thu c vào kho ng cách l y tinh, Chemineau và caynie (1991) [9] nh n th y kho ng cách gi a hai l n l y tinh là m t... t l y tinh chưa phù h p nên vi c nghiên c u hình thái tinh trùng kỳ hình ñư c áp d ng r ng rãi trong vi c chu n ñoán hi n tư ng m t kh năng sinh s n c a ñ c gi ng, cũng như vi c áp d ng k thu t khai thác tinh cho phù h p Ngay c v i con ñ c kho m nh, s c sinh s n bình thư ng thì trong tinh d ch v n có tinh trùng kỳ hình B ng phương pháp nghiên c u so sánh tinh hoàn và tinh d ch c a nh ng cá th chó khác... b o t n và ñông l nh tinh d ch chó Theo Chemineau and Caynie (1991) [9]; Evans (1987) [10], ñ ng v t ho t ñ ng sinh s n di n ra theo mùa, vì v y vào mùa sinh s n ho t l c c a Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………10 tinh trùng cao hơn h n so v i ho t l c tinh trùng c a mùa không ph i là mùa sinh s n 2.3.4 N ng ñ tinh trùng N ng ñ tinh trùng là ch tiêu ñánh . DỤC VÀ ðÀO TẠO TR ƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ……………………………. LÊ THỊ HUỆ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH HỌC VÀ BẢO TỒN TINH DỊCH CHÓ BERGER LU ẬN VĂN. giữ bảo tồn ñược quỹ gen quí của các giống chó nghiệp vụ chúng tôi tiến hành thực hiện ñề tài: Nghiên cứu một số chỉ tiêu sinh học và bảo tồn tinh dịch chó