1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Giáo trình sinh học: Cầu khuẩn

7 7 0

Đang tải... (xem toàn văn)

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 7
Dung lượng 191,88 KB

Nội dung

Nếu giấy lọc quá ướt sẽ cản trở khuẩn lạc tiếp xúc với không khí.. nên chuy ển m àu ch ậm, tạo n ên âm tính gi ả...[r]

(1)

GIÁO TRÌNH SINH HỌC

(2)

CÁC ĐẶC ĐIỂM SINH HÓA CẦU KHUẨN – Phần 1

3.1 Xét nghiệm oxidaza

Mục đích: phân biệt nhóm vi khuản dựa hoạt tính cytochrom oxidaza

Pha dung dịch Tetramethyl-p-phenylen diamin dihydrochlorid (TPPDD)

1% nước, bảo quản lọ màu tối C, sử dụng tuần

Đặt miếng giấy lọc nắp hộp Petri sạch, nhỏ dung dịch TPPDD

1% lên miếng giấy lọc cho vừa đủ ẩm, không để ướt

Dùng que cấy có đầu que làm sợi platin hay dùng đũa thủy tinh

(không dùng đầu que cấy sợi kim loại sắt, niken ) lấy vi khuẩn hoạt hố (18-24 giờ) bơi lên miếng giấy lọc

Sau 10 giây vi khuẩn chuyển sang màu hồng tức có oxydaza

dương tính; sau 60 giây chuyển màu oxydaza âm tính

Chú ý: dung dịch tự chuyển sang màu hồng khơng

sử dụng Nếu giấy lọc ướt cản trở khuẩn lạc tiếp xúc với khơng khí

nên chuyển màu chậm, tạo nên âm tính giả

(3)

3.2. Xét nghiệm catalaza

Mục đích: kiểm tra khả phân huỷ H2O2 vi sinh vật nhờ sản sinh

enzyme catalaza

Chuẩn bị dung dịch H2O2 nồng độ 3-10%, nhỏ giọt lên phiến kính

Dùng đầu que cấy platin lấy vi khuẩn hoạt hoá (24 giờ) trộn

vào giọt H2O2 phiến kính

Nếu thấy sủi bọt dương tính, khơng sủi bọt âm tính

Có thể nhỏ trực tiếp dung dịch H2O2 lên khuẩn lạc thạch đĩa

cho kết tương tự

Hình 3.1. Phản ứng sủi bọt tiếp xúc với dung dịch H2O2 vi khuẩn có

catalaza dương tính

3.3. Khả lên men/ơxy hóa glucoza

(4)

Môi trường I:

Pepton g

NaCl g

K2HPO4 0,2 g

Glucoza 10 g

Thạch g

Dung dịch BTB 1% ml (pha cồn 95%, sau thêm nước để thành dung dịch 1%)

Nước cất 1000 ml

pH = 7,0 - 7,2

Phân môi trường vào ống nghiệm (4-5 ml), khử trùng 115 0C 20 phút

Môi trường II:

NH4H2PO4 0,5 g

K2HPO4 0,5 g

(5)

Glucoza 10 g

Thạch 5-6 g

Dung dịch BTB 1% ml (pha trên)

Nước cất 1000 ml

pH = 7,0 - 7,2

Phân môi trường vào ống nghiệm khử trùng

Lấy vi khuẩn hoạt hố (18-24 h) cấy chích sâu vào mơi trường

que cấy thẳng (mỗi chủng vi khuẩn cấy vào ống) Bịt kín ống nút bơng

bằng vaselin-paraffin (lấy vaselin làm chảy ra, thêm 1/3 dầu paraffin) để

cách ly với khơng khí Ngồi lấy thêm ống không cấy vi khuẩn làm đối

chứng Theo dõi kết sau 1,2,3,7 14 ngày

Kết quả: - Nếu có ống khơng bịt kín sinh axit (chuyển màu vàng)

tức vi khuẩn thuộc dạng ơxy hóa

- Nếu ống khơng bịt ống bịt kín sinh axit (chuyển màu vàng) tức vi khuẩn thuộc dạng lên men

(6)

Kết quả: phần môi trường chuyển màu nâu phản ứng IPA dương tính, khơng phản ứng âm tính

Sau nhỏ thêm thuốc thử Kovac vào quan sát Nếu mặt

thạch xuất màu đỏ đào phản ứng Indol dương tính

Hình 3.11. Ví dụ minh hoạ phản ứng Indol dương tính

Tài liệu tham khảo :

(7)

2 Hans Trueper & Karl-Heinz Schleifer, 2000 Prokaryote Characterization and Identification In: Dworkin W., Falkow S., Rosenberg E., Schleifer K.-H & Stackebrandt E (ed.) The Prokaryotes: an Evolving electronic resource for the microbiological community Springer-Verlag, New York

3 Vũ Thị Minh Đức, 1998 Thực tập Vi sinh vật NXB GD, ĐHTH Hà Nội

4 Krieg N.R & Holt J.G (ed.) 1984 Bergey’s manual of systematic bacteriology Williams & Wilkins, Baltimore, USA

5 Đông Tú Châu et al.,2001, Thường kiến tế khuẩn hệ thống giám định thủ

Ngày đăng: 01/04/2021, 15:45