tổng hợp và đánh giá chất lượng tạp chất liên quan aceclofenac ethyl ester (tạp e) và aceclofenac benzyl ester (tạp f) của aceclofenac

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - TRIỆU QUỐC VƯƠNG TỔNG HỢP VÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG TẠP CHẤT LIÊN QUAN ACECLOFENAC ETHYL ESTER (TẠP E) VÀ ACECLOFENAC BENZYL ESTER (TẠP F) CỦA ACECLOFENAC LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Thành Phố Hồ Chí Minh – Năm 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - TRIỆU QUỐC VƯƠNG TỔNG HỢP VÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG TẠP CHẤT LIÊN QUAN ACECLOFENAC ETHYL ESTER (TẠP E) VÀ ACECLOFENAC BENZYL ESTER (TẠP F) CỦA ACECLOFENAC Chuyên ngành: Kiểm nghiệm Thuốc - Độc chất Mã ngành: 8720210 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Giảng viên hướng dẫn: TS Nguyễn Hữu Lạc Thủy PGS TS Trương Ngọc Tuyền Thành Phố Hồ Chí Minh – Năm 2020 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình nghiên cứu khác Nếu không nêu trên, xin hoàn toàn chịu trách nhiệm Người cam đoan Triệu Quốc Vương i MỤC LỤC Trang DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC CÁC HÌNH iv DANH MỤC BẢNG BIỂU vi MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan aceclofenac 1.2 Tổng quan tạp A aceclofenac 1.3 Tổng quan tạp E aceclofenac 1.4 Tổng quan tạp F aceclofenac 10 1.5 Một số cơng trình nghiên cứu có liên quan đến tạp E F 11 1.6 Kiểm nghiệm tạp E tạp F nguyên liệu aceclofenac 11 1.7 Xác định độ tinh khiết nhiệt nóng chảy tạp E F DSC 14 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .18 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU – NGUYÊN VẬT LIỆU 18 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 18 2.1.2 Nguyên liệu tổng hợp – Hóa chất – Dung môi 18 2.1.3 Trang thiết bị 19 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.2.1 Tổng hợp tạp E F aceclofenac 20 2.2.2 Thử tinh khiết 22 2.2.3 Xác định cấu trúc sản phẩm tạp E F 23 2.2.4 Xây dựng quy trình xác định độ tinh khiết sản phẩm tổng hợp E F phương pháp HPLC 23 2.2.5 Xây dựng tiêu chuẩn đánh giá chất lượng cho mẫu thử tạp E F 26 2.2.6 Ứng dụng kiểm nghiệm tạp chất nguyên liệu aceclofenac 27 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 30 3.1 TỔNG HỢP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC 30 ii 3.1.1 Quy trình tổng hợp xác định cấu trúc tạp E 30 3.1.2 Quy trình tổng hợp xác định cấu trúc tạp F 39 3.2 QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH ĐỘ TINH KHIẾT TẠP E VÀ TẠP F BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG 49 3.3 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG TẠP E VÀ TẠP F 58 3.4 KIỂM TRA TẠP E VÀ TẠP F TRONG NGUYÊN LIỆU ACECLOFENAC THEO BP 2019 60 Chương BÀN LUẬN 62 4.1 Tổng hợp tạp E tạp F 62 4.2 Đánh giá tạp E tạp F 63 4.3 Kiểm tra tạp E tạp F nguyên liệu aceclofenac 64 Chương KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .65 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT Nghĩa tiếng việt Từ viết tắt Từ nguyên CĐC Chất đối chiếu CADTH Canadian Agency for Drugs and Technologies in Health Cơ quan quản lý thuốc công nghệ Y tế Canada DSC Differential scanning calorimetry Quét nhiệt vi sai DMF N,N-dimethylformamide N,N-dimethylformamid GHS Globally Harmonized System Hệ thống phân loại ghi nhãn hóa chất hài hịa toàn cầu HPLC High-performance liquid chromatography HCS Hazard Communication Standard Tiêu chuẩn thông tin mối nguy IR Infrared Hồng ngoại ICH International Conference on Harmonization Hội nghị hòa hợp quốc tế IUPAC International Union of Pure and Applied Chemistry Hiệp hội Quốc tế Hóa học túy ứng dụng LC-MS Liquid chromatography-Mass spectroscopy Sắc ký lỏng ghép khối phổ NMR Nuclear Magnetic Resonance Cộng hưởng từ hạt nhân MHRA Medicines & Healthcare products Regulatory Agency Sắc ký lỏng hiệu cao Cơ quan Quản lý Thuốc Sản phẩm Chăm sóc Sức khỏe (Vương quốc Anh) NSAID Nonsteroidal Anti-inflammatory Drugs Thuốc kháng viêm không steroid OSHA Occupational Safety and Health Administration Cơ quan Quản lý An toàn Sức khỏe Nghề nghiệp (Mỹ) RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối SKLM Sắc ký lớp mỏng iv DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Quy trình tổng hợp aceclofenac .4 Hình 1.2 Quy trình tổng hợp aceclofenac .5 Hình 1.3 Quy trình tổng hợp aceclofenac .5 Hình 1.4 Sơ đồ khối máy phân tích nhiệt vi sai DSC 14 Hình 1.5 Các phương pháp đo DSC 15 Hình 2.1 Phản ứng tổng hợp tạp E 20 Hình 2.2 Phản ứng tổng hợp tạp F 21 Hình Kết xác định nhiệt nóng chảy DSC sản phẩm E dự kiến 31 Hình Sắc ký đồ SKLM kiểm tra độ tinh khiết sản phẩm E dự kiến 31 Hình 3 Phổ UV - Vis sản phẩm tổng hợp E dự kiến .32 Hình Phổ IR sản phẩm tổng hợp E dự kiến 32 Hình Phổ MS sản phẩm tổng hợp E dự kiến 33 Hình Phổ 1H - NMR sản phẩm tổng hợp E dự kiến 35 Hình Phổ 13C - NMR sản phẩm tổng hợp E dự kiến 36 Hình Kết xác định nhiệt nóng chảy DSC sản phẩm F dự kiến 40 Hình Sắc ký đồ SKLM kiểm tra độ tinh khiết sản phẩm F dự kiến 41 Hình 10 Phổ UV - Vis sản phẩm tổng hợp F dự kiến 41 Hình 11 Phổ IR sản phẩm tổng hợp F dự kiến 42 Hình 12 Phổ MS sản phẩm tổng hợp F dự kiến 43 Hình 13 Phổ 1H - NMR sản phẩm tổng hợp F dự kiến 45 Hình 14 Phổ 13C - NMR sản phẩm tổng hợp F dự kiến 46 Hình 15 Sắc ký đồ dung môi pha mẫu pha động tạp E 51 Hình 16 Sắc ký đồ mẫu thử tạp E 51 Hình 17 So sánh sắc ký đồ mẫu trắng mẫu thử tạp E 51 Hình 18 Sắc ký đồ chiều độ tinh khiết pic tạp E 51 Hình 19 Sắc ký đồ dung mơi pha mẫu tạp F 52 Hình 20 Sắc ký đồ mẫu thử tạp F 52 Hình 21 So sánh sắc ký đồ mẫu trắng mẫu thử tạp F 52 v Hình 22 Sắc ký đồ chiều độ tinh khiết pic tạp F 53 Hình 23 Sắc ký đồ mẫu thử nguyên liệu aceclofenac 60 Hình 24 Sắc ký đồ mẫu tạp E đối chiếu .61 Hình 25 Sắc ký đồ mẫu thử aceclofenac tạp F đối chiếu 61 vi DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 2.1 Hóa chất dung mơi dùng nghiên cứu 18 Bảng 2.2 Trang thiết bị dùng nghiên cứu .19 Bảng Các số sóng đặc trung phổ IR sản phẩm tổng hợp E dự kiến 32 Bảng Dữ liệu phổ NMR sản phẩm tổng hợp E 34 Bảng 3 Các số sóng đặc trưng phổ IR sản phẩm tổng hợp F dự kiến 42 Bảng Dữ liệu phổ NMR sản phẩm tổng hợp F 44 Bảng Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống mẫu thử tạp E tạp F .50 Bảng Kết khảo sát tính tuyến tính tạp E 53 Bảng Kết khảo sát tính tuyến tính tạp F 54 Bảng Kết khảo sát độ lặp lại tạp E .54 Bảng Kết khảo sát độ lặp lại tạp F .55 Bảng 10 Kết khảo sát độ xác trung gian tạp E 55 Bảng 11 Kết khảo sát độ xác trung gian tạp F 56 Bảng 12 Kết khảo sát độ tạp E .56 Bảng 13 Kết khảo sát độ tạp F .57 Bảng 14 Kết kiểm tra độ tinh khiết tạp E 57 Bảng 15 Kết kiểm tra độ tinh khiết tạp F 58 Bảng 16 Kết đánh giá tạp E 58 Bảng 17 Kết đánh giá tạp F 59 Bảng 18 Kiểm tra giới hạn tạp E tạp F nguyên liệu aceclofenac 60 MỞ ĐẦU Hiện nay, có nhiều thuốc kháng viêm, giảm đau không steroid (NSAID) sử dụng aceclofenac số [2], [5] Aceclofenac có tác dụng giảm đau, kháng viêm, chỉ định bệnh viêm khớp dạng thấp, viêm khớp xương mãn tính thối hóa đốt sống, viêm cứng đốt sống Thuốc sử dụng rộng rãi trường hợp đau nhẹ, đau bụng kinh, vết thương xương, đau phận sinh dục Aceclofenac tác động nhanh ít tác dụng phụ đường tiêu hóa NSAID khác, nên aceclofenac sử dụng nhiều Chất lượng, an toàn hiệu thuốc phụ thuộc trực tiếp vào tính độc hại có mặt tạp chất Rất nhiều tổ chức ICH, FDA, CADTH nhấn mạnh đến ý nghĩa việc phát nhận tạp chất lẫn thành phần hoạt tính thuốc [5], [24] Dược điển nước (USP, EP BP) Dược điển Việt Nam V bắt buộc phải kiểm soát tạp chất liên quan Gần đây, theo thông tư 32/2018/TT-BYT ban hành ngày 12/11/2018 hướng dẫn đăng ký lưu hành thuốc nguyên liệu làm thuốc Cục quản lý Dược Việt Nam có yêu cầu phải kiểm tra tạp chất liên quan cách chặt chẽ nguyên liệu thành phẩm đăng ký cho sản xuất lưu hành [1], [16] Dược điển Anh 2019 (BP 2019) Dược điển Châu Âu (EP 9) có chuyên luận nguyên liệu aceclofenac Cả hai chuyên luận quy định tạp chất liên quan bắt buộc phải kiểm sốt có tạp E (aceclofenac ethyl ester) tạp F (aceclofenac benzyl ester) Nguyên nhân xuất tạp nguồn gốc từ trình tổng hợp [16], [23] Hiện giới chỉ có vài nghiên cứu tổng hợp tạp chất liên quan aceclofenac Ở Việt Nam, chưa có cơng trình nghiên cứu tổng hợp tạp chất liên quan aceclofenac công bố Hiện nay, tạp chuẩn E F thương mại hóa Giá tạp chuẩn tạp chuẩn E khoảng 280 USD/lọ 100 mg [13] tạp chuẩn F khoảng 450 USD/lọ 100 mg [12] PL -107 PL -108 PL -109 Sắc ký đồ kiểm tra độ tạp F PL -110 PL -111 PL -112 Phụ lục 19: Kiểm nghiệm tạp E F nguyên liệu theo BP 2019 PL -113 PL -114 PL -115 PL -116 PL -117 PL -118 PL -119 PL -120 PL -121 ... [13] tạp chuẩn F khoảng 450 USD/lọ 100 mg [12] 2 Đề tài ? ?Tổng hợp đánh giá tạp chất liên quan aceclofenac ethyl ester (tạp E) aceclofenac benzyl ester (tạp F) aceclofenac? ?? thực với mục tiêu: - Tổng. .. GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - TRIỆU QUỐC VƯƠNG TỔNG HỢP VÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG TẠP CHẤT LIÊN QUAN ACECLOFENAC ETHYL ESTER (TẠP E) VÀ ACECLOFENAC BENZYL. .. Diethyl sulfat Tổng hợp tạp E Acros 99% Kali carbonat Tổng hợp tạp E Merck 99% Benzyl 2-bromoacetat Tổng hợp tạp F AK Sci 98% Diethyl ether Tổng hợp tạp F Xilong 99,8% Natri sulfat Tổng hợp tạp