Luận án tiến sĩ nghiên cứu kỹ thuật hỗ trợ phôi thoát màng bằng tia laser trong một số chỉ định trên bệnh nhân

1 Nghiên cứu kỹ thuật hỗ trợ phơi màng tia laser số định bệnh nhân thụ tinh ống nghiệm Chuyên ngành: Mô Phôi thai học Mã số: 62.72.01.03 Nghiên cứu sinh: Nguyễn Thị Liên Hƣơng Ngƣời hƣớng dẫn: PGS TS Nguyễn Thị Bình Cơ sở đào tạo: Bộ môn Mô Phôi Thai học- Đại học Y Hà nội ĐẶT VẤN ĐỀ Kỹ thuật thụ tinh ống nghiệm (TTTON) phát triển Việt Nam Với kỹ thuật này, phơi đƣợc ni cấy thành cơng ngồi thể, nhƣng cấy vào tử cung, khả bám vào niêm mạc tử cung làm tổ phôi đạt trung bình khoảng 20%, tỷ lệ thai lâm sàng khoảng 35% tỷ lệ em bé sinh cịn thấp [66] Có nhiều yếu tố ảnh hƣởng đến khả làm tổ phôi Trong đó, yếu tố định phơi phải khỏi đƣợc màng suốt Năm 1989, Cohen cộng chứng minh việc tạo lỗ thủng màng suốt giúp phơi TTTON màng dễ tỉ lệ làm tổ phôi cao Kỹ thuật đƣợc tác giả đặt tên kỹ thuật ―hỗ trợ thoát màng‖ (assisted hatchingAH) [trích dẫn 39] Có ba chế giải thích hiệu hỗ trợ phơi màng: (1) Trong điều kiện nuôi cấy nhân tạo kéo dài đông lạnh, màng suốt bị cứng bất thƣờng khơng mỏng q trình phơi phát triển, làm cho phơi khơng thể ngồi bám vào nội mạc tử cung để làm tổ [33], [41] (2) Hỗ trợ phơi màng giúp phơi màng sớm hơn, phù hợp với ―cửa sổ làm tổ‖ niêm mạc tử cung sớm 1-2 ngày chu kỳ kích thích buồng trứng so với chu kỳ tự nhiên [114] (3) Mở màng suốt nhân tạo tạo kênh trao đổi chất chuyển hóa, yếu tố tăng trƣởng ―tín hiệu dẫn truyền‖ phôi niêm mạc tử cung [34] Có nhiều phƣơng pháp hỗ trợ phơi màng, làm mỏng hay làm thủng màng suốt phơi học, hóa chất tia laser Tuy nhiên, kỹ thuật hỗ trợ phơi màng tia laser đƣợc nhiều trung tâm ƣa chuộng tính tiện dụng an tồn Mặc dù hỗ trợ phơi màng sử dụng rộng rãi cho nhiều trƣờng hợp, nhƣng nói chung, kỹ thuật thƣờng đƣợc dùng cho số định bệnh nhân thụ tinh ống nghiệm [38], [156] Tại Việt Nam, kỹ thuật hỗ trợ phơi màng tia laser đƣợc áp dụng Bệnh viện Phụ Sản Trung Ƣơng bắt đầu thực hỗ trợ phơi màng vào năm 2009 Cho đến nay, có nhiều nghiên cứu giới số nghiên cứu nƣớc đánh giá hiệu kỹ thuật hỗ trợ thoát màng TTTON Các nghiên cứu chứng minh hỗ trợ màng nói chung giúp làm tăng tỉ lệ phôi làm tổ tỉ lệ có thai TTTON [38], [156] Bên cạnh có khơng nghiên cứu cho thấy kỹ thuật khơng đem lại hiệu [38], [141], [163] Nhìn chung, tồn số vấn đề mà nghiên cứu trƣớc chƣa đề cập đến chƣa thống Đó hỗ trợ phơi màng nhóm đối tƣợng TTTON có hiệu quả? Nếu có hiệu cách thức đục lỗ hay làm mỏng tốt hơn? Nếu đục lỗ hay làm mỏng kích thƣớc tối ƣu? Để góp phần trả lời câu hỏi này, chúng tơi tiến hành nghiên cứu với Đề tài “ Nghiên cứu kỹ thuật hỗ trợ phơi màng tia laser số định bệnh nhân thụ tinh ống nghiệm” Mục tiêu nghiên cứu Đánh giá hiệu kỹ thuật hỗ trợ phơi màng tia laser diode 1.48µm với hai phƣơng pháp đục lỗ làm mỏng màng suốt phôi bệnh nhân thụ tinh ống nghiệm 38 tuổi chuyển phôi tƣơi Đánh giá hiệu kỹ thuật hỗ trợ phơi màng tia laser diode 1.48µm với hai phƣơng pháp đục lỗ làm mỏng màng suốt phôi bệnh nhân chuyển phôi đông lạnh CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Thụ tinh ống nghiệm (IVF) [39], [57] TTTON có nghĩa cho tinh trùng thụ tinh với noãn ni cấy thành phơi ống nghiệm Sau đó, số phôi đƣợc chuyển trở lại vào buồng tử cung Q trình phát triển phơi thai diễn hồn tồn bình thƣờng tử cung ngƣời mẹ Kỹ thuật đƣợc thực thành công giới lần vào năm 1978 lần Việt Nam năm 1998 Một chu kỳ TTTON bao gồm: kích thích nang nỗn, chọc hút lấy nỗn ngồi cho kết hợp với tinh trùng phịng thí nghiệm, ni cấy thành phơi để chuyển trở lại vào buồng tử cung Có phác đồ KTBT thƣờng đƣợc sử dụng: Phác đồ dài (thƣờng dùng IVF cổ điển): dùng GnRH đồng vận (GnRH a) ngày thứ chu kỳ kinh từ ngày thứ 21 chu kỳ liên tục 14 ngày Sau đó, dùng FSH phối hợp với GnRH tiêm hCG Phác đồ ngắn: GnRHa đƣợc tiêm với FSH từ đầu chu kỳ Phác đồ ngắn thƣờng đƣợc định cho phụ nữ có dự trữ buồng trứng Có thể sử dụng GnRH đối vận (GnRH-antagonis) từ ngày 5-6 chu kỳ để đề phòng đỉnh LH nội sinh để giảm nguy kích buồng trứng Từ ngày thứ 8-13 FSH, định cho thuốc rụng noãn (thƣờng dùng hCG) siêu âm có > nang 18mm > nang nỗn kích thƣớc > 16 mm Chọc hút noãn sau tiêm hCG 34-36 Noãn thu đƣợc ủ ấm tủ cấy CO2, 370C khoảng 3-6h trƣớc đƣợc cấy với tinh trùng cho thụ tinh kỹ thuật ICSI Đánh giá thụ tinh đƣợc tiến hành 18-20h sau cấy với tinh trùng kỹ thuật IVF cổ điển, 14-16h sau tiêm tinh trùng vào bào tƣơng nỗn Đánh giá thụ tinh bình thƣờng thấy hai tiền nhân Hiện nay, trung tâm hỗ trợ sinh sản giới đánh giá chất lƣợng phơi chủ yếu dựa vào hình thái tốc độ phân chia phơi Hình thái phơi đƣợc theo dõi đánh giá từ hình thái nỗn, hợp tử đến phơi phân chia Đánh giá hình thái phôi giai đoạn phân chia sớm (ngày 2, 3) dựa vào tiêu số lƣợng phơi bào, độ đồng phôi bào, tỷ lệ mảnh vỡ (fragment) Các tiêu phụ gồm có phân chia phôi bào đồng thời (synchronise - phân chia 2-4-8), mật độ hạt bào tƣơng, số lƣợng hạt nhân, khơng bào phơi bào Đánh giá hình thái phơi nang dựa vào độ nở rộng phơi, hình thái khối tế bào nội phôi (ICM) nguyên bào ni (TE) Kích thích nang nỗn Chọc hút nỗn qua âm đạo Chuyển phơi Ni cấy phơi Hình 1.1 Quy trình thụ tinh ống nghiệm (Nguồn http://www.kjivf.com/ivf.php) Các phôi tốt đƣợc chọn để chuyển phôi Hiện đa số trung tâm lớn Mỹ Châu Âu thƣờng chuyển 1-2 phôi ngày (phôi nang) Hai tuần sau chuyển phôi, ngƣời phụ nữ đƣợc lấy máu để thử thai Nếu kết thử thai dƣơng tính (hCG > 50 IU/l), 2-3 tuần sau, sản phụ đƣợc siêu âm để xác định túi ối tim thai buồng tử cung Tỉ lệ thành công chu kỳ điều trị TTTON trung bình giới khoảng 25%-70% Tỉ lệ phụ thuộc vào tuổi bệnh nhân, định điều trị phác đồ điều trị trung tâm 1.2 Một số kỹ thuật hỗ trợ sinh sản thông dụng kèm theo TTTON 1.2.1 Đông lạnh phôi Đây kỹ thuật phổ biến hầu hết trung tâm làm thụ tinh ống nghiệm Nguồn phôi đông lạnh chủ yếu từ phôi thừa sau chu kỳ chuyển phôi tƣơi, từ phôi bệnh nhân số lý khơng chuyển đƣợc phơi tƣơi hay từ phơi ngƣời hiến tặng Phơi đƣợc đông lạnh giai đoạn phát triển khác phôi phƣơng pháp đông lạnh khác nhƣ đông lạnh chậm, đông phôi thuỷ tinh hố Trong đó, phƣơng pháp đơng phơi thủy tinh hóa phổ biến 1.2.2 Đông tinh trùng Kỹ thuật đƣợc định cho trƣờng hợp chồng khó lấy tinh trùng trƣớc xa hay điều trị tia xạ, hoá chất Tuy nhiên, cần phân tích chất lƣợng tinh trùng trƣớc đơng để rã đơng có định thích hợp cho mẫu tinh trùng 1.2.3 Đơng nỗn Đơng nỗn thƣờng đƣợc định cho trƣờng hợp: Chồng không lấy đƣợc tinh trùng ngày vợ chọc hút noãn mà không muốn xin tinh trùng ngƣời khác; Các trƣờng hợp xin noãn mà chƣa chuẩn bị niêm mạc tử cung phù hợp; trƣớc điều trị tia xạ, hoá chất; Bảo tồn khả sinh sản Noãn sau rã đông muốn thụ tinh đƣợc phải làm ICSI để khắc phục khả thụ tinh thấp thay đổi cấu trúc màng suốt đông lạnh Tỷ lệ thai lâm sàng từ chu kỳ đơng nỗn cịn thấp 1.2.4 Xin, cho phơi, nỗn, tinh trùng Có nhiều trƣờng hợp khơng có tinh trùng khơng có nỗn, cần phải dùng noãn tinh trùng ngƣời cho Một số trƣờng hợp khơng có phơi mà muốn có xin phơi hiến 1.2.5 Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI) ICSI (intra-cytoplasmic sperm injection) kỹ thuật dùng hệ thống vi thao tác xử lý tiêm tinh trùng vào bào tƣơng nỗn Kỹ thuật giúp kiểm sốt đƣợc tỷ lệ thụ tinh, đảm bảo khả có phơi Do vậy, ICSI góp phần ổn định gia tăng hiệu chu kỳ TTTON 1.2.6 Kỹ thuật lấy tinh trùng từ tinh hoàn mào tinh Các kỹ thuật thực cho bệnh nhân vơ sinh nam xuất tinh khơng có tinh trùng (azoospermia) tắc không tắc ống dẫn tinh Tinh trùng thu đƣợc chƣa trƣởng thành hoàn toàn, phải tiến hành ICSI để thụ tinh với noãn 1.2.7 Hỗ trợ phơi màng (AH) Kỹ thuật giúp phơi dễ màng nhằm tăng tỷ lệ có thai làm tổ phôi Đến nay, giới có phƣơng pháp đƣợc áp dụng để hỗ trợ phơi màng: Làm mỏng làm thủng màng suốt học, men pronase, axit Tyrode tia laser Có nhiều tranh cãi xung quanh định kỹ thuật cho đối tƣợng TTTON hiệu 1.2.8 Chẩn đốn di truyền tiền làm tổ (PGD) Chẩn đoán di truyền trƣớc làm tổ đƣợc tiến hành nhằm sàng lọc phơi khơng có bất thƣờng di truyền trƣớc chuyển phôi, thực nỗn trƣớc cho thụ tinh Kỹ thuật cho phép cặp vợ chồng có nguy truyền bệnh di truyền cho có hội sinh không mắc bệnh, bỏ thai thai lớn, tránh đƣợc hậu xấu ảnh hƣởng lên tâm lý ngƣời mẹ gia đình 1.2.9 Ni cấy nỗn non (IVM) Trƣởng thành nỗn non kỹ thuật ni nỗn non đến giai đoạn trƣởng thành môi trƣờng nuôi cấy chuyên biệt ngồi thể Nỗn sau trƣởng thành đƣợc thụ tinh phƣơng pháp IVF/ICSI nuôi cấy tiếp nhƣ trƣờng hợp TTTON thông thƣờng 1.3 Quá trình phát triển phơi tiền làm tổ 1.3.1 Q trình phát triển phơi tiền làm tổ tự nhiên Thụ thai kết trình làm tổ nỗn thụ tinh Nỗn thụ tinh hay cịn gọi phôi tiền nhân (phôi ngày 1) trải qua ba giai đoạn suốt trình làm tổ: * Giai đoạn 1: Di chuyển đến buồng tử cung - Các yếu tố tác động đến trình di chuyển dịch ổ bụng, hoạt động trơn vòi tử cung hoạt động nhung mao vòi tử cung - Ngồi ra, nỗn thực q trình phân bào biệt hố tế bào suốt trình di chuyển này: + Ngày 0: Noãn thụ tinh với tinh trùng, tƣợng thƣờng xảy phần ba ngồi vịi tử cung + Ngày 1: Phôi ngày (hợp tử có hai tiền nhân) suốt q trình di chuyển đƣợc bảo vệ màng suốt (zona pellucida) đƣợc dinh dƣỡng nhờ chế thẩm thấu + Ngày 2: Phơi phân chia có từ 2-4 tế bào + Ngày 3: Phơi phân chia có từ 6-8 tế bào, lúc phôi nằm khoảng eo vịi tử cung + Ngày 4: Phơi tiếp tục phân bào trở thành phơi dâu, có từ 15-50 tế bào Phơi nằm đoạn kẽ vịi tử cung + Ngày 5: Hình thành phơi nang (blastocyst), biệt hố thành hai nhóm tế bào phơi (ngun bào ni khối tế bào nội phôi) Phôi đến buồng tử cung + Ngày (hatching): Phơi khỏi màng suốt * Giai đoạn 2: Tƣơng tác nguyên bào nuôi phôi nang niêm mạc tử cung thƣơng lƣợng miễn nhiễm để niêm mạc tử cung chấp nhận phôi làm tổ * Giai đoạn 3: Làm tổ niêm mạc tử cung + Ngày 8: Phơi màng chìm vào niêm mạc tử cung, hình thành phôi hai lá, chƣa tiếp xúc với mạch máu mẹ + Ngày 9: Phơi chìm hồn tồn vào niêm mạc tử cung, tạo hốc hợp bào nuôi, chƣa tiếp xúc với mạch máu mẹ + Ngày 10: Tiếp xúc với mạch máu mẹ nên diện hCG máu mẹ 1.3.2 Quá trình phát triển phôi tiền làm tổ TTTON + Ngày 0: Nỗn sau chọc hút đƣợc chun viên phơi học thu nhặt đánh giá chất lƣợng noãn dựa vào hình thái trƣởng thành tế bào hạt bao quanh noãn, bào tƣơng noãn, cực cầu nhân noãn Cho noãn thụ tinh với tinh trùng sau chọc hút 3- 6h + Ngày 1: Kiểm tra thụ tinh Hình thái hai tiền nhân tiên lƣợng đƣợc khả phát triển phôi [140], [154], [155] Đánh giá hình thái dựa vào kích cỡ, vị trí hai tiền nhân hạt nhân + Ngày 2, 3: Giai đoạn phôi phân chia sớm: Đánh giá chất lƣợng phơi dựa vào hình thái: số lƣợng (ngày 2: tế bào; ngày 3: tế bào) độ đồng phôi bào, phân chia đồng (2-4-8) phôi bào, độ chiết quang, mật độ hạt bào tƣơng phôi bào, Đánh giá chất lƣợng phôi ngày quan trọng để định ngày chuyển phơi Có thể chuyển phơi ngày 2, (tùy trung tâm) Thơng thƣờng, có 2-3 phơi ngày chất lƣợng tốt nuôi cấy tiếp để chuyển phôi ngày + Ngày 4: Phôi dâu, bắt đầu xuất hốc dịch nhỏ + Ngày 5: Phôi nang nở rộng, dịch nang lấp đầy thể tích phơi, khối tế bào nội phơi có nhiều tế bào nhỏ, liên kết chặt, nguyên bào ni có nhiều tế bào, liên tục + Ngày 6: Phơi màng Kỹ thuật hỗ trợ phơi màng đƣợc thực phơi ngày 2, (tùy trung tâm) Khi tiến hành AH phôi ngày 2, ngày 3, thƣờng đến ngày phơi màng (sớm tự nhiên ngày), giúp cho phôi làm tổ sớm hơn, dễ đồng với niêm mạc tử cung [100] 1.4 Hỗ trợ phơi màng 1.4.1 Các yếu tố ảnh hưởng đến màng phơi - Màng suốt Một yếu tố định khả màng phơi màng suốt Phơi màng đƣợc hay khơng cịn phụ thuộc vào độ dày màng suốt tính đàn hồi màng Ở ngƣời, màng suốt dày khoảng 13-15 m Tuy nhiên, số nghiên cứu cho thấy màng suốt đối tƣợng bệnh nhân thụ tinh ống nghiệm có độ dày trung bình vào khoảng 16-19 m [16], [72], [112], [118], [124] Màng suốt có chất glycoprotein có nhiều chức quan trọng Cấu trúc màng suốt ngƣời gồm bốn loại glycoprotein (ZP1, ZP2, ZP3, ZPB) [92] Ngƣời ta xác định đƣợc ba gen mã hóa loại protein [143] Ở số loài protein tổng hợp nên màng suốt đƣợc sản xuất gan, động vật có vú, protein đƣợc sản xuất buồng trứng [94] Các protein đƣợc hoạt tiết q trình nang nỗn phát triển để hình thành màng suốt [64], [143] Nhiều nghiên cứu đƣợc tiến hành nhƣng cấu trúc màng suốt noãn phôi ngƣời chƣa đƣợc biết rõ Các mơ hình cấu trúc đƣợc xây dựng dựa phân tích màng suốt động vật có vú Một số nghiên cứu gần cho thấy màng suốt màng kép có ba lớp đồng tâm [36], [174] Các sợi lớp (lớp 1) tỏa trịn hình vành tia Các sợi lớp (lớp 3) xếp theo hƣớng tiếp tuyến Các sợi lớp xếp ngẫu nhiên Dƣới kính hiển vi (KHV) phân cực, lớp lƣỡng chiết, phân biệt rõ lớp với lớp chiết quang (hình 1.2) [36] Thoi vơ sắc Nỗn Phơi Mặt màng suốt Lớp3 Lớp Màng suốt Lớp Thƣớc đo 20µm Mặt màng suốt Hình 1.2 Cấu trúc nhiều lớp màng suốt chụp KHV phân cực (PolScope) A: noãn người chụp KHV đảo ngược bình thường B: nỗn người chụp KHV phân cực C: Phôi ngày chụp phân cực D: Các lớp màng suốt phân biệt KHV phân cực E: Các lớp màng suốt nỗn phơi (Nguồn: Pelletier PolScope views laminar zona Fertil Steril 2004 [36]) Trong nang nỗn, màng suốt đóng vai trò nhƣ hàng rào sinh lý ngăn noãn tế bào nang Khi thụ tinh, tinh trùng gắn với thụ thể bề mặt màng suốt Những thay đổi sinh hoá màng suốt xảy sau thụ tinh làm màng cứng lại ngăn chặn tƣợng đa thụ tinh [44] Trong q trình phát triển phơi giai đoạn tiền làm tổ, màng suốt bảo vệ tồn vẹn phơi [17] Khi di chuyển từ vịi trứng tử cung, màng suốt cần thiết để đảm bảo cấu trúc phơi liên kết tế bào phơi yếu Ngồi ra, tách bỏ toàn phần màng suốt phơi cừu phơi bị thối hoá gặp số kháng thể tử cung [158] Khi làm thụ tinh ống nghiệm, màng suốt phơi bị cứng lại ảnh hƣởng q trình ni cấy kéo dài phải trải qua đông lạnh rã đông [33], [41] Bên cạnh đó, màng suốt cịn chịu ảnh hƣởng số yếu tố khác Môi trƣờng nội tiết dùng thuốc kích thích rụng trứng yếu tố liên quan đến độ dày màng suốt [23] Đã có nghiên cứu cho thấy độ dày hình dạng màng suốt có liên quan đến chất lƣợng phôi, phát triển phơi tỷ lệ có thai [58], [78] Đặc biệt q trình mỏng màng phơi phát triển Trong tự nhiên, phôi ngày (phôi nang-blastocyst), di chuyển đến tử cung, phơi tự màng tƣợng làm tổ xảy Trƣớc màng, phơi nang nở to, màng suốt giãn mỏng Trong q trình 10 màng, màng suốt mỏng hai yếu tố: (1) Xuất chu kỳ co thắt dãn phơi; (2) Vai trị chất lysins nguyên bào nuôi niêm mạc tử cung tiết làm ly giải màng suốt Khi chất dẫn tới việc làm tổ thất bại [62] Chu kỳ co giãn màng suốt đƣợc theo dõi thực nghiệm phôi nang chuột, cừu, bò ngƣời Kết sau vài chu kỳ nhƣ vậy, màng suốt mỏng Tƣơng tự nhƣ vậy, chu kỳ co giãn xảy nguyên bào nuôi phôi nang ngƣời, tƣợng giúp cho phơi màng xảy điều kiện nuôi cấy Tuy vậy, điều kiện tự nhiên, chƣa rõ co giãn có làm phơi màng tốt hay khơng, nhƣng dƣờng nhƣ giúp cho phơi tiếp xúc làm tổ niêm mạc tử cung [63] Ngƣời ta nhận thấy q trình mỏng khơng thƣờng thấy rõ giai đoạn phôi nang nở ra, mà thấy đƣợc từ giai đoạn hợp tử nhƣ giai đoạn phân chia phôi Những phôi tốt thƣờng có thay đổi độ dày mỏng màng suốt Theo Gabrielsen cộng (2000), màng suốt mỏng 25%, tỷ lệ có thai 40% (24/60) Ngƣợc lại, với phơi có màng mỏng 10% khơng ghi nhận đƣợc trƣờng hợp có thai (0/21) Ngồi ra, mỏng màng suốt liên quan đến tỷ lệ có thai cao mà cịn liên quan đến hình thái phơi tốt [55], [56] - Men lysins Nghiên cứu Schiewe cộng (1995) chuột cho thấy, chế khởi phát làm tổ dƣờng nhƣ lysins màng suốt chu kỳ co giãn phôi nang Các tác giả cho nuôi phôi (TE) chịu trách nhiệm chế tiết lysins cần thiết cho làm tổ [135] - Sự phát triển phôi Các số liệu nghiên cứu phôi nang chuột gần cho thấy phơi màng ni cấy nhân tạo phụ thuộc vào số lƣợng tế bào đầy đủ để cấu thành phơi Đối với phơi ngừng phát triển (có thể nhiều yếu tố: Chất lƣợng noãn, chất lƣợng tinh trùng, chất lƣợng phôi không tốt nguyên nhân di truyền, phác đồ KTBT yếu tố khách quan: môi trƣờng nuôi cấy, chất lƣợng lab thụ tinh ống nghiệm không đảm bảo ), tƣợng màng khơng thể xảy Phơi khơng có đủ số lƣợng tế bào, áp lực nội phơi không đủ làm cho phôi không nở đƣợc để màng [trích dẫn 39, 76] - Một số yếu tố khác Phơi màng tự nhiên khơng giống nhƣ phôi nuôi cấy Phôi nuôi cấy (in vitro) thƣờng tự màng chậm so với phơi tự nhiên (in vivo) khoảng 1-2 ngày [62] Sự khác biệt liên quan đến tử cung yếu tố gây ly giải nuôi phôi (TE) niêm mạc tử cung [88] 1.4.2 Hỗ trợ phơi màng: khái niệm, định, phương pháp 26 702/09 Vũ thị Y chứng 27 241/07 Đỗ thị H chứng 28 361/09 Lƣ Lan Ph chứng 29 813/08 Trần thị Đ chứng 30 1227/07 Hoàng thị O chứng 31 339/09 NGuyễn T Thu H chứng 32 1048/07 Nguyễn T Thanh H chứng 33 564/09 Uông T Vĩnh H chứng 34 1214/08 Nguyễn thị D chứng 35 527/09 Tôn T Thanh B chứng 36 413/04 Ngô thị Th chứng 37 270/04 Nguyễn thị T chứng 38 508/09 Phạm T Phƣơng L chứng 39 1025/09 Vũ thị Bích H chứng 40 279/03 Nguyễn thị Th chứng 41 1040/09 Nông thị H chứng 42 810/09 Nguyễn thị L chứng 43 1131/07 Trần T Thanh H chứng 44 1426/09 Ngô T Tuyết D chứng 45 1156/09 Nguyễn thị H chứng 46 432/09 Lê thị Tuyết H chứng 47 413/09 Nguyễn T Hồng T chứng 48 22/10 Ngô T Trầm H chứng 49 262/02 Nguyễn Thu Ph chứng 50 1003/09 Ngô T Mai H chứng 51 1414/09 Phạm thị Th chứng 52 1137/09 Nguyễn thị L chứng 53 933/06 Nguyễn Thanh Th chứng 54 327/10 Nguyễn thị Th chứng 55 1290/09 Đoàn T D chứng 56 395/10 Nguyễn thị H chứng 57 1051/09 Lƣu T Thu H chứng 58 743/10 Phan thị H chứng 59 921/07 Nông kim N chứng 60 289/06 Nguyễn phƣơng H chứng 61 1035/09 Phạm T.Ngọc Th chứng 62 478/10 Đỗ thị H chứng 63 965/10 Đàm thị Bảo H chứng 64 1075/10 Trịnh H chứng 65 128/03 Nguyễn thị L chứng 66 907/10 Ong thị V chứng 67 1491/10 Phạm Thị Đ chứng 68 911/10 Trịnh Minh Th chứng 69 890/10 Phạm thị D chứng 70 175/07 Đỗ thị Lan chứng 71 884/10 Trần T Thái N chứng 72 82/11 Dƣơng thị L chứng 73 428/02 Nguyễn Kim Th chứng 74 210/03 Vi thị H đục lỗ 75 481/09 Trần T Thƣơng H đục lỗ 76 538/09 Phạm thị T đục lỗ 77 446/08 Hoàng t Minh O đục lỗ 78 834/09 Nguyễn Thanh H đục lỗ 79 830/08 Đỗ thị Q đục lỗ 80 722/08 Phạm thị V đục lỗ 81 662/07 Nguyễn T Minh Th đục lỗ 82 567/09 Nguyễn thị H đục lỗ 83 918/09 Nguyễn thị L đục lỗ 84 814/09 Phạm T Thúy H đục lỗ 85 928/09 Lê thị S đục lỗ 86 582/08 Hà Thu T đục lỗ 87 204/07 Vũ thị Liên đục lỗ 88 323/07 Tống T Quỳnh Tr đục lỗ 89 1133/09 Tạ T Hằng Ng đục lỗ 90 991/09 Nguyễn thị H đục lỗ 91 1219/09 Dƣơng T Thanh Th đục lỗ 92 684/09 Nguyễn thị Th đục lỗ 93 54/10 Dƣơng thị H đục lỗ 94 354/07 Nguyễn Tuyết M đục lỗ 95 1256/09 Đinh Phùng L đục lỗ 96 1233/09 Hà thị S đục lỗ 97 26/9 Phạm T Hồng Ph đục lỗ 98 72/10 Nguyễn thị N đục lỗ 99 1143/09 Nguyễn thị Th đục lỗ 100 105/ Phạm thị Ph đục lỗ 101 17/10 Lục Bích H đục lỗ 102 914/09 Phạm Lê Th đục lỗ 103 218/10 Lê thị M đục lỗ 104 1034/09 Kiều Kim Th đục lỗ 105 368/10 Vũ T Kim O đục lỗ 106 118/07 Tạ thị L đục lỗ 107 1014/09 Lại thị Y đục lỗ 108 233/10 Lê thị Ng đục lỗ 109 532/09 Chu thị N đục lỗ 110 210/03 Vi thị H đục lỗ 111 1366/09 Đào T Kim D đục lỗ 112 407/10 Đào T Hồng H đục lỗ 113 06/10 Nguyễn Thị M đục lỗ 114 634/2010 Chu Thị H đục lỗ 115 417/2010 Nguyễn T Thanh T đục lỗ 116 364/2010 Lý Thị T đục lỗ 117 755/10 ̃Trịnh Ngọc D đục lỗ 118 730/10 Phạm Thị S đục lỗ 119 1350/09 Nguyễn Thị Ng đục lỗ 120 375/02 Nguyễn Thị B đục lỗ 121 1003/09 Ngô T Mai H đục lỗ 122 711/07 Lý Thị M đục lỗ 123 232/11 Ngô Thị Thùy M đục lỗ 124 239/11 Đỗ Hồng Ng đục lỗ 125 329/11 Nguyễn thị H đục lỗ 126 03/11 Lê Bích Ng đục lỗ 127 1020/06 Nguyễn Bích L đục lỗ 128 475/11 Trần thị Thu H đục lỗ 129 930/09 Lê thị Hồng V đục lỗ 130 637/10 Phạm thị X đục lỗ 131 416/10 Bùi thị L đục lỗ 132 437/11 Đỗ thị H đục lỗ 133 06/02 Lê thị Th đục lỗ 134 799/11 Dƣơng thị Gi đục lỗ 135 286/02 Nguyễn thị L đục lỗ 136 321/11 Nguyễn thị Kim L đục lỗ 137 122/11 Nguyễn thị Th đục lỗ 138 1028/11 Hoàng Y đục lỗ 139 519/11 Nguyễn thị H đục lỗ 140 169/10 Ngô t Kim D đục lỗ 141 1301/11 Phạm thị L đục lỗ 142 270/07 Nguyễn Kim C đục lỗ 143 1253/11 Trần thị Thúy H đục lỗ 144 214/02 NguyễnThúy Lam đục lỗ 145 1115/11 Nguyễn thị B đục lỗ 146 226/05 Nguyễn thị T làm mỏng 147 596/05 Đặng t Minh H làm mỏng 148 351/09 Nguyễn T M làm mỏng 149 57/09 Phạm thị H làm mỏng 150 901/08 Đào thị H làm mỏng 151 140/07 Hà T Tuyết M làm mỏng 152 306/09 Phạm T Thanh H làm mỏng 153 887/08 Lê Hồng L làm mỏng 154 543/07 Trần Ng Tƣờng L làm mỏng 155 469/09 Lê thị Tr làm mỏng 156 653/06 Đoàn thị V làm mỏng 157 547 Đào T Thu H làm mỏng 158 452/09 Nguyễn thị H làm mỏng 159 314/09 Phạm thị H làm mỏng 160 475/09 Nguyễn thị Tr làm mỏng 161 433/09 Hoàng thị H làm mỏng 162 909/09 Đào T Kim Ng làm mỏng 163 989/08 Nguyễn thị Ph làm mỏng 164 418/09 Nguyễn Tuyết Tr làm mỏng 165 832/09 Mai thị H làm mỏng 166 593/05 Nguyễn T Hồng M làm mỏng 167 289/06 Nguyễn Phƣơng H làm mỏng 168 831/09 Vũ thị L làm mỏng 169 996/09 Nguyễn Phƣớc Vĩ A làm mỏng 170 192/09 Nguyễn T Thanh H làm mỏng 171 1032/09 Bùi thị Th làm mỏng 172 1159/09 Nguyễn thị Th làm mỏng 173 1070/07 Tạ T Kim Nh làm mỏng 174 1359/09 Ngô T Thanh Th làm mỏng 175 1230A/07 Bùi thị L làm mỏng 176 42/10 Dƣơng thị M làm mỏng 177 1411/09 Lê Kiều Ng làm mỏng 178 103/08 Nguyễn T Thu H làm mỏng 179 506/09 Lê thị Th làm mỏng 180 610/05 Đỗ Thu H làm mỏng 181 700/07 Đào Hồng Ng làm mỏng 182 232/10 Nguyễn thị L làm mỏng 183 492/08 Hoàng T Thu H làm mỏng 184 918/09 Nguyễn thị L làm mỏng 185 1423/09 Nguyễn thị T làm mỏng 186 953/07 Lê thị H làm mỏng 187 90/10 Ngô T Thu Th làm mỏng 188 424/10 Phùng T Tuyết M làm mỏng 189 347/09 Hoàng thị M làm mỏng 190 356/10 Nguyễn thị H làm mỏng 191 613/10 Nguyễn thị H làm mỏng 192 270/04 Nguyễn thị T làm mỏng 193 1377/09 Lê Thu H làm mỏng 194 565/10 Trần thị Th làm mỏng 195 129/06 Nguyễn thị V làm mỏng 196 116/10 Nguyễn thị H làm mỏng 197 735/2010 Lê thị Th làm mỏng 198 22/07 Trần Thanh Th làm mỏng 199 620/10 Nguyễn thị Ph làm mỏng 200 649/09 Đặng T Kim D làm mỏng 201 1426/09 Ngô thị Tuyết D làm mỏng 202 707/10 Lê Thu H làm mỏng 203 732/09 Dƣơng thị Ng làm mỏng 204 98/10 Trƣơng thị Minh L làm mỏng 205 264/06 Nguyễn T Kim O làm mỏng 206 462/10 Hoàng thị Ch làm mỏng 207 1683/10 Lê thị X làm mỏng 208 151/11 Bùi thị Lê Nh làm mỏng 209 447/11 Nguyễn thị Ph làm mỏng 210 923/09 Trung thị H làm mỏng 211 1153/10 Nguyễn thị Ngh làm mỏng 212 1194 Tăng t Ng làm mỏng 213 61/10 Nguyễn t Hoàng Y làm mỏng DANH SÁCH BỆNH NHÂN (Đối tƣợng nghiên cứu 2) Số TT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Mã hồ sơ 878/08 793/08 209/09 337/04 412/08 85/09 449/08 26/06 793/08 1056/08 812/08 1083/06 204/08 612/06 23/02 643/09 632/06 376/10 440/09 1041/09 1404/09 268/08 127/10 142/10 204/10 89/10 723/08 47/10 146/10 838/09 Họ tên bệnh nhân Ng t hai Y Ta phuong Nh Ng t H Vu lan H Vu thuy H Ng thi kim A Bui t M Đao Ngoc Th Ng t phung Nh Vu t Nh Vu t mai Th Vu t X Tran minh D Ng t H Vu thu H Ng t bich Ng Tran thi Nh Ng thi V Bui t Gi Ng t Ch Nghiem t Ng Ng t thu H Ng anh T Ng t Th Chu t H Đỗ t D Ng t thu H Pham t H Đo t bich D Đo t phuong Nh Nhóm chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 565/10 512/08 1095/09 917/09 464/09 651/09 967/09 1328/09 346/04 1105/10 1345/09 1029b/09 1087/09 1050/09 996/10 127/09 1301/09 387/10 377/09 665/09 760/10 1232/09 191/10 809/10 634/10 376/10 1106/09 294/04 268/08 804/06 548/06 522/09 457/09 817/06 Tran t Th Ng t hong Ph Pham t hoang Y Bui t my H Trinh t M Dang t van A Ng t L Hoang t Ph Tong thu Th Thieu t Th Truong t kim Nh Pham t hoang Y Ng thi Ch Ng t Th Ng thi Kh Ng t L Ng t Ng Ng t bich Ng Le minh Th Ng t H Chu t T Do phuong Th Tran t H Ng t Anh Chu t H Ng t V Đinh t N Đinh thi kim Ph Ng t thu H Tran manh H Khoa thi C Vo t bich Th Bui t H Ng t Đ chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng chứng 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 798/08 619/05 511/08 395/08 1233/07 16/9 646/09 157/08 250/06 843/08 456/06 309/07 879/08 432/07 861/06 711/08 562/09 1067/08 977/09 335/09 261/09 73/09 68/10 165/09 233/04 905/06 844/09 801/09 310/09 115/09 458/09 705/07 581/09 861/06 Han vân Kh Ng t L Đo thai H Ng t T Bui t lan A Cao t Th Vu t H Ng Th Ng t H Ng t Hoi Ng H Đinh t H Ng thu H Ng t Th Pham thi Ch Phan t L Ng t thu H Luyen thi Th Pham t thuy L Le t H Ng thi Th Đo t phuong A Đo hong M Ngo t thu Tr Ng t ngoc A Ng t D Phan t L Vu t H Pham t ngoc H Duong thi M Ng thi S Pham thuy Qu Ng t B Pham t Ch chứng chứng đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 367/09 791/09 97/06 755/08 504/09 675/07 545/09 446/08 340/09 256/09 1168/09 692/07 90 381/07 650/07 623/09 648/09 386/05 234/08 1362/09 10/08 750/06 409/09 812/08 1256/09 793/09 861/06 262/06 471/10 1186/10 1178/10 1122/10 1495/10 811/08 Ng thi thuy M Ng t hong A Le t thuy L Trinh thi L Hoang t H Vu minh H Vu t T Hoang t minh O Duong t bich L Bui t bich H Bui t H Ng t lan H Le thi H Ng t hoai Th Pham t S Đao t M Ng t my H Le t kim O Đo t bich Th Ng an Gi Ng t Tr Pham t B Ng thu H Vu t mai Th Đinh phung L Ng t hong V Pham thi Ch Ng t lan H Đao t hai H Đam t Th Vu t thu H Ng t Th Tran ngoc A Pham hong Nh đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 715/10 610/05 79a/08 653/06 672/08 57/09 526/08 767/09 590/07 1189/08 319/08 85/09 834/06 636/06 352/09 672/08 18/08 77/09 685/08 65/07 145/09 1088/08 760/08 1074/09 217/09 1064/08 455/05 87/09 590/07 1034/08 549/09 1195/08 694/09 085/08 Luu t M Do t H Ng thuy D Doan t V Ng t Th Pham t Hoa Đo t thuy H Đo t H Đo t T Ng le D Ng t H Ng t lan Ph Đang th H Vu H Ng t Thu H Ng Th Pham t bich Th Phan t cam T Ng t H Ng t Nh Luong t H Pham thu H Vu t H Duong t Ng Vu t L Hoang thi Ph Vu t thu H Ng t minh Th Do t T Tran thi Th Hoang t thu H Kieu thi minh A Tran t L Ng t H đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ đục lỗ làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 324/08 713/07 793/09 574/08 72/09 217/09 602/08 727/09 423/07 620/09 379/09 1168a/07 361/10 1048/08 840/09 1169/09 688/09 463/05 22/10 225/09 1140/08 975/08 259/10 1251/09 94/04 665/09 410/07 525/07 35/04 1205/07 10/08 235/05 53/10 894/09 Bui t H Le t H Ng t hong V Ng hai H Ng t thu H Vu t L Lam mai H Ng thi thu L Than t H Do t L Le t minh Th Trinh kieu Tr Ng t ngoc l Ng t T Lai nhu H Đo t H Hoang t T Hoang phuong L Ngo t tram H Ng t Qu Pham quynh Tr Tran t Linh Gi Đoan thi M Le van A Vu bich Th Ng t H Pham t S Đao t ngoc L Đinh t N Ng t Mai Tr Ng Tr Cao t Ngh Le t minh L Ng t Th làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng làm mỏng Xác nhận số liệu nghiên cứu Giám đốc Bệnh viện Phụ Sản Trung Ƣơng Giám đốc Trung tâm Hỗ trợ sinh sản PGS.TS Nguyễn Viết Tiến Phụ lục: Đánh giá chất lƣợng phôi ngày 2, ngày Tốc độ phân chia tế bào: đếm số lƣợng phôi bào (B) Phân chia đồng (S: tế bào chia TB-8TB, 3-6-7TB có TB lớn chia thành 8TB; aS: phân chia không Tỷ lệ mảnh vỡ (% fragment): (F0: 20-50%, F3>50% Độ liên kết tế bào (C0: ko compact, C1: compacting, C2: compacted): Đánh giá phôi từ ngày Độ đồng tế bào: B0: đồng đều, B1: không đồng Mật độ hạt bào tƣơng-độ chiết quang: G0: không hạt, mịn đều, chiết quang sáng, G1 hạt ít, G2 hạt nhiều, có điểm thối hố Tỷ lệ không bào (KB) phôi bào (B) (V0: khơng có KB, V1: 1-vài KBx1B, V2: 1-vài KB x vài B, V3: vài KB x vài B, B4: KB toàn Tỷ lệ đa nhân (ĐN) phôi bào (M0: không ĐN, nhân/1B, M1 không thấy nhân, M2: ĐN