Đang tải... (xem toàn văn)
TÀI LIỆU TRẮC NGHIỆM, BÀI GIẢNG PPT CÁC MÔN CHUYÊN NGÀNH Y DƯỢC HAY NHẤT CÓ TẠI “TÀI LIỆU NGÀNH Y DƯỢC HAY NHẤT” ;https://123doc.net/users/home/user_home.php?use_id=7046916. TÀI LIỆU LUẬN VĂN – BÁO CÁO – TIỂU LUẬN (CÔNG NGHIỆP VÀ BÀO CHẾ). DÀNH CHO SINH VIÊN CÁC TRƯỜNG ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH DƯỢC VÀ CÁC NGÀNH KHÁC, GIÚP SINH VIÊN HỆ THỐNG, ÔN TẬP VÀ HỌC TỐT KHI HỌC TÀI LIỆU LUẬN VĂN – BÁO CÁO – TIỂU LUẬN (CÔNG NGHIỆP VÀ BÀO CHẾ)
BƠ Y TÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HA NƠI GĨP PHẦN NGHIÊN CỨU LÊN MEN TỔNG HỢP KHÁNG SINH NHỜ STREPTOMYCES 52.13 KHĨA ḶN TỚT NGHIỆP DƯỢC SI HA NƠI BÔ Y TÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HA NÔI GÓP PHẦN NGHIÊN CỨU LÊN MEN TỔNG HỢP KHÁNG SINH NHỜ STREPTOMYCES 52.13 KHĨA ḶN TỚT NGHIỆP DƯỢC SI Người hướng dẫn: Nơi thực hiện: HA NƠI LỜI CẢM ƠN Tơi xin gửi lời c ảm ơn sâu sắc nhất đến cô giáo DS -Tạ Thu Lan người đa tận tình hướng dẫn tư những bước đầu tiên cho đến hoàn thiện khóa luận này Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo , các cán bô , kỹ thuật viên giảng dạy , công tác Bô môn Vi sinh - Sinh hoc, Bô môn Công nghiệp dược trườ ng Đại hoc Dược Ha Nôi, Bô môn Hóa vật liệu- khoa Hóa trường Đại hoc Khoa hoc tự nhiên Ha Nôi đa giúp đỡ thời gian làm thực nghiệm Nhân dịp này cũng xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu cùng toàn thê các thầy cô giáo trường Đại hoc Dược Ha Nôi đa dạy dỗ va tạo moi điều kiện thuận lợ i cho thời gian hoc tập trường Va cuối cùng là lời cảm ơn gửi tới gia đình va bạn be đa đông viên , giúp đỡ suốt thời gian thực hiện khóa luận Do thời gian làm thực nghiệm cũng kiến thư c của bản thân có hạn, khóa luận không thê tránh khỏi nhiều thiếu sót Tôi rất mong nhận được góp ý của các thầy cô , bạn be đê khóa luận được hoàn thiện Tôi xin chân thành cảm ơn! Ha Nôi, 18, tháng 5, năm Sinh viên Mục lục ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1.1.Đại cương về kháng sinh 1.1.1 Định nghĩa kháng sinh 1.1.2.Tiêu chuẩn đối với môt kháng sinh 1.1.3.Đánh giá tác dụng: 1.1.4 Phân loại kháng sinh 1.1.5 Cơ chê tác dụng của kháng sinh 1.1.6 Các ứng dụng của kháng sinh 1.2.Đặc điêm của xạ khuẩn chi Streptomyces 1.2.1.Đặc điêm hình thái 1.2.2.Đặc điêm sinh lý 1.2.3.Đặc điêm cấu tạo 1.2.4.Kha tạo sắc tố 1.3.Tuyển chon, cải tạo va bảo quản giống xạ khuẩn 1.3.1 Cho n chủng có HTKS cao sang loc ngẫu nhiên 1.3.2.Đôt biến cải tạo giống 1.3.3.Bảo quản giống xạ khuẩn .9 1.4.Sự sinh tổng hợp kháng sinh xạ khuẩn 1.4.1 Sự hình thành KS xạ khuẩn 1.4.2 .ôt số yếu tố ảnh hưởng tới trình sinh tổng hợp KS 10 1.4.3.Lên men sinh tổng hợp kháng sinh tư Streptomyces 11 1.5 .hiết tách va tinh chê kháng sinh tư dịch lên men 12 1.5.1 .Vai trò của chiêt tách va tinh chê kháng sinh 12 1.5.2 .Các phương pháp chiết tách 13 1.6.Bước đầu nghiên cứu cấu trúc kháng sinh 14 1.6.1 .Phổ tử ngoại - kha kiến 144 1.6.2 .Phổ hồng ngoại 14 1.6.3 .Khối phổ 14 1.7 Môt số kết qua nghiên cứu về KS 15 1.7.1.Ảnh hưởng của Panamycin - 607 lên san phẩm chuyển hóa thư cấp san xuất Streptomyces spp 155 1.7.2 Các polyene macrolid mới ho hàng với nystatin có vùng polyol cải biến thông qua công nghê sinh tổng hợp S noursei 15 1.7.3.Acid pivalic- đơn vị khởi đầu sinh tổng hợp acid béo va kháng sinh Alicyclobacillus, Rhodococcus Streptomyces 166 CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .177 2.1 Nguyên vật liệu va thiết bị 177 2.1.1Nguyên vật liệu 177 2.1.2́́y móc thiết bị 199 2.2 Nôi dung nghiên cứu 20 2.2.1 Sàng loc, cải tạo giống 20 2.2.2 Lên men, chiết tách kháng sinh 20 2.2.3 Sơ bô xác định mơt sớ tính chất của kháng sinh tinh khiết thu được 20 2.3 Phương pháp thực nghiêm 20 2.3.1Nuôi cấy va giữ giống xạ khuẩn 20 2.3.2.Đánh giá hoạt tính kháng sinh phương pháp khuếch tán .21 2.3.3 .Phươn g pháp cai tạo giống 222 2.3.4 .Lên men chìm tổng hợp kháng sinh 244 2.3.5 .Chiêt kháng sinh tư dịch lên men dung môi hữu 255 2.3.6 Sơ bô xác định thành phần kháng sinh sắc ký lớp mỏng 255 2.3.7 Thu kháng sinh thô phương pháp cất quay .266 2.3.8 Tinh chê kháng sinh thô sắc ký côt 266 2.3.9 .ết tinh lại KS 277 2.3.10 Sơ bô xác định kháng sinh tinh khiết thu được .277 Chương 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 278 3.1.Nâng cao kha sinh tổng hợp KS của chủng Streptomyces 52.13 288 3.1.1 Kết qua sàng loc ngẫu nhiên .288 3.1.2 .Kết qua đôt biến nâng cao kha sinh tổng hợp kháng sinh của Streptomyces 52.13 299 3.1.2.1 .Đôt biến ánh sáng UV 29 3.1.2.2 Đôt biến hóa chất 311 3.2.Kết qua chon dung môi hữu va pH chiết KS tư dịch loc .322 3.3 Lên men dịch thê sinh tổng hợp kháng sinh 333 3.3.1 Chon môi trường lên men tốt nhất 333 3.3.2 .Chon biến chủng lên men tốt nhất 333 3.4.Chiết xuất va bước đầu tinh chê chất kháng sinh tư dịch lên men .344 3.4.1 .Kết qua sắc ký lớp mỏng 344 3.4.2 .Kết qua tinh chê kháng sinh sắc ký côt 355 3.4.3 .ết qua kết tinh: 40 3.4.4 .Kết qua đo phổ xác định cấu trúc của KS tinh khiết 40 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 411 1.Kết luận 411 2.Kiến nghị .422 Tài liệu tham khảo Phụ lục DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ADN Acid 2’- deoxyribonucleic B.subtilis Bacillus subtilis ATCC 6633 CLNN Chọn loc ngẫu nhiên CW Thành tê bào- Cell wall DM Dung môi DMHC Dung môi hữu ĐB Đôt biến Gr Gram IR Hồng ngoại- Infrared KS Kháng sinh L-DAP L- diaminopimelat MTdt Môi trường dịch thê P mirabilis Proteus mirabilis BV 108 SKLM Sắc ký lớp mỏng SLNN Sang loc ngẫu nhiên TB Tê bào TĐC Trao đổi chất VK Vi khuẩn VSV Vi sinh vật UV Tử ngoại ultra violet DANH MỤC CÁC BẢNG Bang 2.1: Các VSV kiểm định Bang 2.2: Môi trường nuôi cấy xạ khuẩn Bang 2.3: Các môi trường nuôi cấy VSV kiểm định Bang 2.4: Các dung môi đa sử dụng Bang 3.1: Kết qua thử HTKS sang loc ngẫu nhiên chủng Streptomyces 52.13 Bang 3.2: Kết qua thử HTKS đôt biến UV lần Bang 3.3: Kết qua thử HTKS đôt biến UV lần Bang 3.4: Kết qua thử HTKS đôt biến hóa học Bang 3.5: Kết qua chon dung môi va pH chiết Bang 3.6: Kết qua chon môi trường lên men chìm Bang 3.7: Kết qua chon biến chủng lên men chìm tốt nhất Bang 3.8: Kết qua chạy sắc kí lớp mỏng Bang 3.9: Kết qua thử HTKS các phân đoạn sau chạy sắc kí cơt lần Bang 3.10: Kết qua sắc kí lớp mỏng các phân đoạn sau chạy sắc kí cơt lần Bang 3.11: Kết qua thử HTKS các phân đoạn sau chạy cột lần Bang 3.12: Kết qua sắc kí các phân đoạn sau chạy sắc kí cơt lần DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1: Sơ đồ chê tác dụng của các ho KS Hình 1.2: Các khuẩn ty xạ khuẩn Hình 1.3: Đường cong biểu diễn sinh trưởng va phát triển của xạ khuẩn Bảng 3.9: Kết thử HTKS phân đoạn sau sắc kí cột lần Phân đoạn P.mirabilis B.subtilis D (mm) s (mm) D (mm) s (mm) 11,35 0,21 11,22 0,17 22,60 0,28 21,00 0,71 23,10 0,14 21,85 0,64 24,35 0,35 22,50 0,28 22,32 0,45 19,69 1,40 21.47 0,38 19,60 0,28 21,14 0,20 19,20 0,00 18,30 0,28 16,85 0,64 18,20 0,28 16,45 0,07 10 17,67 0,38 16,20 0,11 11 15,25 0,35 14,26 0,06 12 13,16 0.23 13,45 0,07 13 10,38 0.37 9,73 0,07 14 8,50 0.37 8,05 0,04 15 6,13 0,04 5,93 0,10 16-20 0,00 0,00 0,00 0,00 Nhận xét:Các phân đoạn tư 2-10 có hoạt tính tương đới cao, phân đoạn có nồng đô đậm đặc nhất Tiến hanh sắc kí lớp mỏng các phân đoạn tư 2-10 dung môi ethylacetat : n-hexan : methanol (12:5:1) Hiện hình B.subtilis kết qua sau: Bảng 3.10: Kết SKLM phân đoạn sau sắc kí cột lần Các phân đoạn Rf quan sát mắt thường Rf hiện hình VSV Vết Vết Vết Vết 2 0,63 0,43 0,63 0,43 0,64 0,45 0,64 0,45 0,63 0,43 0,63 0,43 0,63 0,44 0,63 0,44 0.63 0.42 0,63 0,42 0,62 0,41 0,62 0,41 0,60 0,39 0,60 0,39 0,61 0,39 0,61 0,39 10 0,61 0,37 0,61 0,37 Nhận xét: Các phân đoạn đều cho bản sắc kí có vêt Tư đó sơ bơ nhận thấy có nhất phần kháng sinh lại các phân đoạn đó vết trước đậm la KS chính, vết sau nhạt la KS phụ Hê dung môi đa hết kha tách tiếp, dung môi mới ethylacetat : n-hexan : methanol (12:5:1) có kha tách tốt Do vậy chọn dung môi đê chạy sắc kí tiếp nhằm thu được KS tinh khiêt Dựa vào kết qua thử hoạt tính kháng sinh va chạy sắc kí bản mỏng có thê thấy các phân đoạn tư 2-7 có HTKS mạnh va kết qua Rf tương tự Do vậy gôp các phân đoạn tư 2-7 la phân đoạn lại, đem thu được 0,0529g bôt kháng sinh màu đỏ cam Hiệu suất tinh chê KS lần la 51,41% b) Chạy cột lần 2: Cân 0,0529g bôt kháng sinh thu được sau tinh chê lần 1, chạy cột với DM ethylacetat:n-hexan:methanol (12:5:1) thu được 32 phân đoạn Thử HTKS các phân đoạn phương pháp khoanh giấy loc thu được kết qua bang 3.11 Bảng 3.11: Kết thử HTKS phân đoạn sau SK cột lần Phân đoạn P.mirabilis B.subtilis D (mm) s (mm) D (mm) s (mm) 9,22 0,78 8,93 0,25 13,63 0,17 10,47 0,40 19,47 0,55 17,83 0,45 23,47 0,58 21,14 1,07 26,91 0,64 23,28 0,67 27,99 0,31 25,53 0,40 28,74 0,36 25,80 0,79 26,69 0,29 22,17 0,40 25,71 0,50 21,75 0,58 10 24,85 0,53 20,60 0,46 11 24,57 0,26 24,45 0,55 12 24,86 0,33 21,77 1,15 13 25,19 0,77 22,45 0,55 14 23,32 0,40 21,01 1,06 15 23,05 1,01 20,15 0,07 16 22,73 1,51 19,85 0,17 17 21,49 0,91 18,76 1,06 18 20,79 0,57 18,57 0,71 19 18,73 0,39 17,91 1,01 20 17,61 1,42 15,53 0,52 21 17,07 0,98 15,37 0,54 22 16,51 0,60 14,28 0,50 23 15,82 0,49 13,55 0,50 24 15,05 0,73 12,98 0,29 25 12,79 0,61 9,91 0,42 26 8,95 0,31 9,00 0,35 27 8,06 0,25 7,17 0,92 28-32 0,00 0,00 0,00 0,00 Các phân đoạn – 15 có hoạt tính KS cao Tiến hành sắc ký lớp mỏng các phân đoạn tư 1-15 dung môi ethylacetat: n-hexan :methanol (12:5:1) thu được kết qua bang 3.12 dưới đây: Bảng 3.12: Kết sắc kí lớp mỏng phân đoạn sau sắc kí cột lần Các phân đoạn Sớ vết Rf Chú thích 1 0,64 0,63 0,63 0,63 0,63 0,62 0,64 0,63 0,63 va 0,42 Vết trước đậm 10 0,62 va 0,44 vết sau 11 - 13 0,63 va 0,43 14 0,63 va 0,42 vết trước 15 0,61 va 0,43 Vết sau đậm 40 Nhận xét: - Phân đoạn la các phân đoạn 1-8 - Phân đoạn 9,10 chứa chất có HTKS :KS va KS phụ, đó KS chiếm hàm lượng chủ yếu - Các phân đoạn lại kê tư phân đoạn 11 chưa chất có HTKS đó KS phụ la chủ yếu, KS chiếm lượng Gộp các phân đoạn 1-8 lại, đem cô chân không thu được bôt KS Sau cô lại ta thu được m’=0,0205g bôt kháng sinh Hiệu suất Hiệu suất tinh chê KS sắc kí cơt là: H1×H2 = 51,41% × 38,75 % = 19,92% 3.4.3.Kết kết tinh: Kháng sinh tinh khiết được kết tinh lại Sau kết tinh ta thu được 0,0193g tinh thê kháng sinh tinh khiêt Hiệu suất của trình kết tinh là: H3=94,15% Vậy hiệu suất của ca trình tinh chê kháng sinh là: H=H1×H2×H3=18,75% Bơt KS tinh khiết được đem đo phổ UV, IR , MS , nhiệt đô nóng chảy 3.4.4.Kết đo phổ xác định cấu trúc KS tinh khiết - Nhiệt đô nóng chảy của KS đo được la 242,3ºC - Phổ tử ngoại cho các đỉnh hấp thụ các bước sóng 442,5 nm; 235,5nm; 212 nm Tư đó có thê sơ bô kết luận KS có các cấu trúc nhân thơm, dị tố va dị vịng - Phổ khới: phân tử lượng của KS thu được dự kiến la 1268,65433 đvC - Phổ hồng ngoại: có các dải hấp phụ đặc trưng sau: -1 + 3434 cm đặc trưng cho lien kết N-H ( giữa amin b1 b2, amid) 41 -1 + 2958; 2928 cm đặc cho liên kết C – H của alkan + 1737 cm đặc trưng cho liên kết C = O (ester, aldehyd ceton ) -1 + 1648 cm đặc trưng cho nhóm chưc amid ( R- CO – NR’R”) imin (C=N) -1 + 1582 cm đặc trưng cho nhóm nitro ( -NO2 ) -1 + 1475 cm đặc trưng cho liên kết C=O -1 + 1294; 1270 cm đặc trưng cho liên kết C – CO – C -1 + 1192; 1098 cm đặc trưng cho liên kêt C – O (có thê có nhóm alcol, ether, anhydride…) -1 + 793 ; 732 ; 637 cm đặc trưng cho nhóm alkyl bromide (R-Br) alkyl clorid (R-Cl) KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 1.Kết luận: Sau trình nghiên cưu về bản khóa luận đa giải quyết được các mục tiêu đề va thu được kết qua sau: - Chủng Streptomyces 52.13 được sàng loc ngẫu nhiên va đôt biến cải tạo giống lần tia UV va sau đó ĐB phương pháp hóa hoc MT nuôi cấy bề mặt MT1 đa tạo môt số biến chủng có HTKS tăng lên đáng kể - Lên men, chiết xuất va tinh chê kháng sinh: + Chọn được môi trường lên men tốt nhất cho Streptomyces 52.13 la MT1dt, biến chủng lên men tốt nhất la ĐBHH 25 + Chiết xuất: kháng sinh Streptomyces 52.13 tổng hợp được chiết tư dịch lên men Ethylacetat pH=3 + Tinh chế: phương pháp rửa giải côt Hê dung môi chạy lần butylacetat:aceton:triethylamin (1:2:1).Hê dung môi chạy lần ethylacetat:n-hexan:methanol (12:5:1) Sau trình tinh chê chạy côt va kết tinh đa thu được kháng sinh tinh khiết Kháng sinh tinh khiết thu được 0,0193g với hiệu suất 18,75% - Phân tích sơ bơ cấu trúc của KS thu được kết qua sau: +Nhiệt đô nóng chảy của KS la 242.3 ºC +Phân tử lượng của KS tinh khiết đo được có dự kiến la 1268,65433 đvC +Phân tích phổ UV va IR cho phép sơ bô xác định một số nhóm chưc đặc trưng của KS Kháng sinh có chưa nhân thơm, nới đơi liên hợp, dị vịng va dị tố Môt số liên kết đặc trưng có phân tử C – O, C = O, N –H, - NO2, amid, alkylbromid Nhận xét: So sánh với KS được tinh chê cách năm ta có thê thấy kháng sinh tinh khiết thu được có nhiệt đô nóng chảy cao hơn, phổ IR có đỉnh hấp phụ nhọn hơn, vậy sơ bô khẳng định KS thu được có đô tinh khiết cao Ngoài ra, đa chon được dung môi chiết mới la ethylacetat, so với nbutanol đa được dùng khóa luận trước có nhiều ơu điểm đơc, tạo nhũ Mơi trường lên men thích hợp chọn được la MT1dt (khóa luận trước la MT2dt) 2.Kiến nghị - Tiếp tục nghiên cứu cải tạo giống nhiều phương pháp khác đê tạo các biến chủng có kha tổng hợp kháng sinh có hoạt tính mạnh nữa - Nghiên cưu điều kiện tối ưu đê lên men nhằm nâng cao hiệu suất lên men Streptomyces 52.13 - Nghiên cưu hoàn thiện qui trình chiết tách tinh chê nhằm thu sản phẩm có đô tinh khiết cao hoạt tính KS mạnh, tách được các thành phần KS khác - Tiếp tục đo phổ cộng hưởng tư hạt nhân đê xác định cấu trúc hóa hoc của KS TAI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt: Trần Tử An (2007), Hóa phân tích, NXB Y hoc, tập 2 Trần Thị Hồng Anh (1993), Quang phổ hấp thụ tử ngoại-khả kiến ứng dụng định lượng kháng sinh, NXB Khoa học va kỹ thuật Bô Y tê (2007): Kỹ thuật bào chế sinh dược học dạng thuốc, nha xuất bản Y hoc, Ha Nôi, Tr 62 – 68, 115 – 133 Bô Y Tê (2008), Vi sinh vật học, nha xuất bản giáo dục , Ha Nôi, Tr 22 – 87 Nguyễn Văn Cách, Công nghệ lên men kháng sinh, NXB Khoa hoc va kỹ thuật Lê Huy Chính (2007), Vi sinh vật y học, nha xuất bản Y hoc, Ha Nôi, tr 15 – 16, 50 – 56 Nguyễn Lân Dũng (2001), Vi sinh vật học, NXB Giáo dục, tr 39-67 Trần Đưc Hậu (2006), Hóa dược, NXB Y hoc, tập Võ Thị Bạch Huê (2008) , Hóa phân tích, NXB y hoc, tập 2, tr 58-122, tr 205225 10 Tư Minh Koóng (2006), Kỹ thuật sản xuất dược phẩm I, NXB Y học, tập 11 Tư Minh Koóng (2006), Kỹ thuật sản xuất dược phẩm II, NXB Y học, tập 12 Lương Đưc Phẩm (1999), Công nghệ vi sinh vật, NXB Nông nghiệp 13 Nguyễn Văn Thạch (2009), Công nghệ sinh học dược, NXB Giáo dục Việt Nam, tr 35-57 14 Nguyễn Văn Thanh (2007), Sinh học phân tử, NXB Giáo dục, tr 40-52 15 Cao Văn Thu (1998), Bài giảng kháng sinh vitamin 16 Cao Văn Thu (2008), Sinh học đại cương, NXB giáo dục, tr.153 – 156 17 Cao Văn Thu (2008), Vi sinh vật học, NXB Y hoc, Ha Nôi 18 Mai Tất Tố, Vũ Thị Trâm (2007), Dược lý học, NXB Y hoc, tập 19 Hồ Viết Quý (2002), Chiết, tách, phân chia, xác định chất dung môi 1, NXB khoa hoc va kĩ thuật, tr 9- Tiếng Anh: 20 Donald L Pavia, Gary M Lampman, George S Kriz (1996), Introduction to Spectroscopy, Thomson Learning, Washington, USA 21 Makoto Hashimoto, Hirotaka Katsura, Risako Kato, Hiroshi KaWaide and Masahiro Natsume (2011), “ Effect of Panamycin – 607 on Secondary Metabolite Production by Streptomyces spp”, Biosci Biostechnol.Bioschem, 75(9), pp 1722 – 1726 22 Rezanka T, Siristova L, Schreiberová O, Rezanka M, Masák J, Melzoch K, Sigler K, (2011) ,“Pivalic acid acts as a starter unit in a fatty acid and antibiotic biosynthetic pathway in Alicyclobacillus, Rhodococcus and Streptomyces”, Envirol of Microbiol, 13(6), pp 1577 – 1589 23.Trygve Brautaset, Havard Sletta, Kristin F.Degnes, Olga N.Sekurova, Ingrid Bakke, Olga Volokhan, trygve Andreassen, Trond E Ellingsen, and Sergey B Zotchev (2011), “New nystatin – related antifungal polyene macrolides with altered polyol region generated via biosynthetic engineering of Streptomyces noursei”, Appl Environ Microbiol, 77 (18), pp.6636 – 6643 24 Weinberrg E.D (1973), “Secondary metabolism Control by temperature and inorganic photphate”, Ind Microbiol, 15, pp 1- 14 PHỤ LỤC Hình P4: Khuẩn lạc xạ khuẩn sau đợt biến hóa hoc Hình P5: Thử HTKS biến chủng sau ĐBHH Hình P6: Thử HTKS MT lên men phương pháp giếng thạch Hình P7: Thử HTKS phân đoạn sắc kí cợt lần phương pháp khoanh giấy loc Hình P8: Sắc kí lớp mỏng hiện hình VSV BO MON HOA VAT LIEU-KHOA HOA-TRUONG DHKHTN Ten may: GX-PerkinElmer-USA Nguoi do: Nguyen Thi Son Resolution: 4cm-1 Mail: sonhuco@yahoo.com Date: 3/13/2013 TAM 52-13 DT: 0912140352 101.6 90 793 1369 637 732 80 1192 1098 1294 70 1270 1475 60 1582 2958 2928 50 %T 1737 40 3434 1648 30 20 10 0.0 4000.0 3600 3200 2800 2400 2000 1800 cm-1 1600 1400 Hình P9: Kết đo phổ hồng ngoại 1200 1000 800 600.0 Hình P10: Kết đo khối phổ ... đa chọn đề tài : ? ?Góp phần vào nghiên cứu lên men tổng hợp kháng sinh tư Streptomyces 52. 13? ?? Nôi dung của khóa luận mong muốn đạt được các mục tiêu sau đây: - Nghiên cưu các biện... giống Streptomyces 52. 13 nhằm làm tăng kha sinh tổng hợp kháng sinh - Nghiên cưu điều kiện lên men, ni cấy va chiết x́t thích hợp - Tìm điều kiện tinh chê KS thích hợp, bước đầu nghiên. .. môi ethylacetat 3.3 Lên men dịch thể sinh tổng hợp kháng sinh 3.3.1 Chọn môi trường lên men tốt Tiến hành thử nghiệm kha sinh tổng hợp kháng sinh của Streptomyces 52. 13 MT1dt, MT2dt, MT5dt