Nghiên cứu thành phần hóa học có trong cây phèn đen phyllanthus reticulatus poir euphorbiaceae

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM PHAN VĂN DÂN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC CĨ TRONG CÂY PHÈN ĐEN (PHYLLANTHUS RETICULATUS POIR EUPHORBIACEAE) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HỐ HỌC THÁI NGUN - 2009 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM - PHAN VĂN DÂN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC CĨ TRONG CÂY PHÈN ĐEN (PHYLLANTHUS RETICULATUS POIR EUPHORBIACEAE) Chuyên ngành Mã số : Hoá hữu : 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HOÁ HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS PHẠM VĂN THỈNH THÁI NGUYÊN - 2009 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS.NGƯT Phạm Văn Thỉnh - người Thầy tận tình hướng dẫn, động viên giúp đỡ tơi suốt trình học tập, nghiên cứu thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Quyết Tiến, TS Phạm Thị Hồng Minh, ThS Vũ Anh Tuấn giúp đỡ nhiều kiến thức bổ ích kinh nghiệm nghiên cứu khoa học Nhân dịp này, xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Ban Lãnh đạo khoa Hóa, khoa Sau Đại học - Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên, phòng hoạt chất sinh học - Viện Hóa học, Hội đồng giáo dục trường THPT Bắc Đơng Quan - Thái Bình, Bố - Mẹ người thân gia đình, anh em bè bạn… hết lịng tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ thời gian học tập, nghiên cứu khoa học hoàn thành luận văn Thái Nguyên, tháng năm 2009 Tác giả Phan Văn Dân Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tôi, số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả PHAN VĂN DÂN Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN SKLM : Sắc kí lớp mỏng UV : Ultraviolet spectrocopy MS : Mass Spectroscopy EI-MS : Electron Impact Mass Spectroscopy LC-MS : Liqud chromatography - Mass Spectroscopy FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy NMR : Nuclear Magnetic Resonance H-NMR : 13 C-NMR : H-Nuclear Magnetic Resonance 13 C- Nuclear Magnetic Resonance DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer COSY : Correlated Spectroscopy HSQC : Heteronuclear Spectroscopy- Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation HIV : Human Immunodeficiency Virus U : Unit Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn MỤC LỤC Trang Lời cảm ơn Lời cam đoan Danh mục chữ viết tắt dùng luận văn Danh mục bảng, hình sơ đồ Mục lục MỞ ĐẦU CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Mô tả thực vật 1.2 Các hợp chất hoá học có hoạt tính sinh học chi Phyllanthus 1.2.1 Một số đại diện khung axit 1.2.2 Một số đại diện nhóm tecpenoit 1.2.3 Một số đại diện lignan 1.2.4 Một số đại diện khung flavonoit 12 1.2.5 Một số hợp chất phenolic khác 14 1.2.6 Một số hợp chất nhóm ankaloit 17 1.3 Tình hình nghiên cứu hóa học lồi Phyllanthus reticulatus Poir 18 1.4 Tác dụng sinh học chi Phyllanthus 19 1.4.1 Một số công dụng chi Phyllanthus 19 1.4.2 Một số tác dụng dược lý chi Phyllanthus 21 CHƯƠNG II THỰC NGHIỆM 22 2.1 Đối tượng phương pháp nghiên cứu 22 2.1.1 Thu mẫu cây, xác định tên khoa học phương pháp xử lý mẫu 22 2.1.2 Phương pháp phân lập hợp chất từ dịch chiết 22 2.1.3 Phương pháp khảo sát xác định cấu trúc hoá học hợp chất 23 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn 2.2 Dụng cụ, hoá chất thiết bị nghiên cứu 23 2.2.1 Dụng cụ hoá chất 23 2.2.2 Thiết bị nghiên cứu 24 2.3 Các dịch chiết từ Phèn đen (Phyllanthus reticulatus P.) 25 2.3.1 Các dịch chiết 25 2.3.2 Khảo sát định tính dịch chiết 26 2.4 Phân lập, tinh chế chất từ Phèn đen (Phyllanthus reticulatus P.) 29 2.4.1 Dịch chiết n-hexane (HP) 29 2.4.1.1 Chất HP-2 29 2.4.1.2 Chất HP-4 30 2.4.1.3 Chất HP-5 30 2.4.2 Dịch chiết ethylacetate (EP) 31 CHƯƠNG III THẢO LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 32 3.1 Nguyên tắc chung 32 3.2 Phân lập nhận dạng hợp chất 32 3.2.1 Chất HP-2 33 3.2.2 Chất HP-4 34 3.2.3 Chất HP-5 36 KẾT LUẬN 43 KIẾN NGHỊ 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 PHỤ LỤC 49 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC BẢNG, HÌNH & SƠ ĐỒ Trang Bảng 2.1: Khối lượng chất tổng số chiết phân đoạn Phèn đen Phyllanthus reticulatus P., Euphorbiaceae…………… … ……….26 Bảng 2.2: Kết định tính nhóm chất Phèn đen Phyllanthus reticulatus Poir, Euphorbiaceae …………………… ………………28 Bảng 3.1: Độ chuyển dịch hóa học 13 C-NMR số sterol loài Phyllanthus ………………………… ………………………….… 35 Bảng 3.2: Số liệu phổ NMR HP-5………… .38 Bảng 3.3: Bảng so sánh số liệu phổ 1H 13 C-NMR (500MHz, CDCl3) - acetylamino-phenylpropyl -benzoylamino-phenylpropinoate chất thực nghiệm (HP-5) 40 Hình 1.1: Cây Phèn đen Phyllanthus reticulatus P., Euphorbiaceae…… Sơ đồ 2.1: Quy trình ngâm chiết mẫu 25 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn MỞ ĐẦU Lãnh thổ Việt Nam nằm vùng nhiệt đới, gió mùa, độ cao khơng đều, diện tích vùng núi vùng trung du chiếm đến 70% - với điều kiện môi trường tự nhiên thuận lợi tạo nên hệ thực vật phong phú đa dạng Theo số liệu thống kê nhất, thảm thực vật Việt Nam - nguồn tài nguyên sinh học q giá - có 12000 lồi, số có tới 3200 lồi sử dụng làm thuốc hay thực phẩm chức Y học dân gian Dân số Việt Nam gồm nhiều dân tộc anh em sinh sống, từ xa xưa có truyền thống chữa bệnh cỏ mà Hải Thượng Lãn Ông gọi chung Thảo dược Từ nhiều hệ, người dân sử dụng tri thức địa để phòng chữa bệnh cho thân cộng đồng Ngày nay, cơng nghệ tổng hợp hố dược phát triển mạnh mẽ nhờ thành tựu mang tính đột phá đại khoa học công nghệ nhằm giảm thiểu bệnh tật làm tăng tuổi thọ người Song nhu cầu sử dụng cỏ để làm thuốc ngày tăng lên, chúng có chứa biệt dược khó tổng hợp, ngồi ra, việc dùng thuốc Nam khơng gây tác dụng phụ Theo điều tra Bộ Y tế, năm gần đây, Việt Nam số người có mầm bệnh viêm gan chiếm tỷ lệ lớn, trở thành đề tài nghiên cứu cho nhiều ngành khoa học nhằm chăm lo tốt sức khỏe cộng đồng Tham gia vào việc tìm thuốc từ nguồn thực vật, Y học dân gian phát khoảng 20 loại cỏ có khả chữa trị viêm gan, đáng ý loài thuộc chi Phyllanthus (họ Thầu dầu, Euphorbiaceae) [2] Cây Phèn đen (Phyllanthus reticulatus Poir) thực vật thuộc chi Phyllanthus dùng Y học cổ truyền Việt Nam nhiều nước Thế giới Các phận sử dụng làm thuốc: rễ Phèn đen dùng trị lỵ, viêm ruột, ruột kết hạch, viêm gan, viêm thận trẻ em cam tích Lá thường dùng chữa sốt, lỵ, ỉa chảy, phù thũng, ứ huyết địn ngã, Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn huyết nhiệt sinh đinh nhọt, dùng chữa bị thuốc độc mặt xám da vàng rắn cắn Vỏ thân dùng chữa lên đậu có mủ tiểu tiện khó khăn Cho đến nay, Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu thành phần hóa học Phèn đen Với mong muốn làm sáng tỏ kinh nghiệm sử dụng dân gian, nâng cao tính hiệu quả, an toàn dược liệu, đưa dược liệu vào sử dụng cách khoa học đẩy mạnh khai thác sử dụng thuốc vào việc phòng chữa bệnh cho nhân dân cộng đồng dân tộc Việt Nam Chúng tiến hành “Nghiên cứu thành phần hóa học có Phèn đen (Phyllanthus reticulatus Poir, họ Thầu dầu, Euphorbiaceae)” - tên đề tài cho cơng trình nghiên cứu Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 88 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 89 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 90 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 91 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 92 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 93 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 94 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 95 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 96 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 97 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 98 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 99 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 100 http://www.Lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 101 http://www.Lrc-tnu.edu.vn XÁC NHẬN CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 102 http://www.Lrc-tnu.edu.vn ... 1.3- Tình hình nghiên cứu hóa học loài Phyllanthus reticulatus Poir Theo tài liệu GS Đỗ Tất Lợi Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu thành phần hóa học loài Phyllanthus reticulatus Poir [7] Ở Kenya...ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM - PHAN VĂN DÂN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HỐ HỌC CĨ TRONG CÂY PHÈN ĐEN (PHYLLANTHUS RETICULATUS POIR EUPHORBIACEAE) Chuyên... khoa học đẩy mạnh khai thác sử dụng thuốc vào việc phòng chữa bệnh cho nhân dân cộng đồng dân tộc Việt Nam Chúng tiến hành ? ?Nghiên cứu thành phần hóa học có Phèn đen (Phyllanthus reticulatus Poir,