Phân tích đánh giá sự có mặt của các kháng sinh họ eloquinolon trong nước thải bệnh viện

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC T ự NHIÊN PHÂN TÍCH DÀNH GIÁ s ự c ố MẶT CỦA CÁC KHÁNG SINH HỌ FL0QUIN0L0N TRONG NƯỚC THẢI BỆNH VIỆN ■ ■ M Ã SỐ : Q T -0 -4 C H Ủ T R Ì Đ Ề T À I: TS D ương H n g A n h C Á C C Á N B Ộ T H A M G IA : ThS P h m N g ọ c H CN H o n g T h ị T h n g CN N guyễn H ồng Tùng ĐA1 HOC QUỐC GìA HÀ \r R U N C t1/yvi A M TLDHC! flQ N G tin t h u ý lE N ĨRỊ1NC D T / T (5 HÀ NỘI - 2006 BÁO CÁO TÓM TẮ T K ẾT Q U Ả THỰC HIỆN Đề tài cấp Đ H Q G H N năm 2005 Tên đề tài: Phân tích đánh giá có m ặt kháng sinh họ Floquinolon nước thải bệnh viện M ã số: Q T - 05 - 43 Chủ trì đề tài: TS Dương Hồng Anh Các cán tham gia: ThS Phạm N gọc Hà CN Hoàng Thị Thương CN N guyễn H oàng Tùng Mục tiêu nội dung nghiên cứu Mục tiêu đê tài: - Thiết lập phương pháp phân tích lượng vết m ột số kháng sinh họ Floquinolon nước thải bệnh viện; - Cung cấp thông tin nồng độ số chất kháng sinh nước thải bệnh viện Hà nội N ội dung nghiên cứu: - Nghiên cứu qui trình phân tích lượng vết m ột số kháng sinh họ Floquinolon nước thải bệnh viện dựa hai giai đoan: chiết tách làm giàu phương pháp chiết pha rắn sử dụng cột chiết cation hỗn hợp (M PC), định tính định lượng sắc ký lỏng cao áp với detectơ huỳnh quang - Nghiên cứu việc sử dụng cột silicagel tự hoạt hoá thay th ế cho cột MPC giai đoạn chiết tách mẫu - Lấy mẫu nước thải điểm khác hệ thống xử lý nước thải bệnh viện Hữu Nghị theo ngày (24 giờ/ngày, m ẫu/3giờ) Phân tích dư lượng kháng sinh Ciprofloxacin N orfloxacin nước thải bệnh viện Hữu Nghị - Phân tích đối chứng mẫu nước thải Viện K hoa học Công nghệ Môi trường Liên bang Thuỵ sỹ - Phân lập vi khuẩn Ecoli từ mẫu nước thải xác định tính kháng kháng sinh Ciprofloxaxin N oríloxaxin Tóm tắt kết nghiên cứu đạt Tóm tất kết nghiên cứu, ý nghĩa khoa học kết qu ả đạ t được: - Đã hồn thiện qui trình phân tích lượng vết m ột số kháng sinh họ Floquinolon nước thải bệnh viện dựa hai giai đoan: chiết tách làm giàu phương pháp chiết pha rắn sử dụng cột chiết cation hỗn hợp (M PC), định tính định lượng sắc ký lỏng cao áp với detectơ huỳnh quang Qui trình có hiệu suất thu hồi cao (trung bình 84 - 101%), giới hạn định lượng 0,5 - |ig/L đáp ứng yêu cầu phân tích m ẫu môi trường - Đã thành công việc sử dụng cột silicagel tự hoạt hoá thay th ế cho cột MPC giai đoạn chiết tách mẫu, qui trình phân tích cho hiệu suất thu hồi 80 81% Kết phân tích mẫu nước thải thực tế tương đương với qui trình Hiện chưa có cơng trình công bố việc sử dụng cột silicagel chiết tách Floquinolon từ nước thải Sử dụng cột silicagel có ưu tiết kiệm chi phí so với cột MPC, tạo điều kiện chủ động cho nghiên cứu V iệt Nam - Đã xác định dư lượng kháng sinh Ciprofloxacin N orfloxacin nước thải bệnh viện Hữu Nghị mẫu nước thải lấy điểm khác hệ thống xử lý nước thải bệnh viện Hữu Nghị theo ngày (24 giờ/ngày, mẫu/3giờ) Phát thấy tổng dư lượng Ciprofloxacin N orfloxacin khoảng 3,5 tới 50,3 \xglL Dư lượng Ciprofloxacin N orfloxacin lại nước thải sau xử lý so với nước thải chưa xử lý 13 ± 3% 21 ± 3% - Vi khuẩn Ecoli phân lập từ mẫu nước thải chưa xử lý có tính kháng kháng sinh C iprofloxaxin N orfloxaxin cao so với vi khuẩn phân lập từ nước thải xử lý m inh chứng cho xuất tính kháng kháng sinh vi khuẩn sống mơi trường có dư lượng kháng sinh tương đối thấp Tóm tắt kết nghiên cứu, ý nghĩa thực tiễn kết đạt được: - Qui trình phân tích lượng vết số kháng sinh họ Floquinolon nước thải bệnh viện dựa phương pháp chiết pha rắn kết hợp sắc ký lỏng cao áp với detectơ huỳnh quang có hiệu suất thu hồi cao, giới hạn phát đáp ứng yêu cầu phân tích mẫu nước thải thực tế Sử dụng cột silicagel giai đoạn chiết tách mẫu giải pháp tiết kiệm chi phí, tạo điều kiện chủ động cho nghiên cứu Việt Nam - Đã xác định dư lượng kháng sinh Ciprofloxacin N orfloxacin nước thải bệnh viện Hữu Nghị công đoan xử lý khác hệ thống xử lý nước thải Kinh phí đề tài 6.1 K inh p h í c ấ p : 15 triệu đồng 6.2 Giải trình khoản chi: - Th khốn chun mơn: Hố chất, ngun liệu, dụng cụ: Hội nghị, hội thảo: Điện nước quản lý phí: KHOA QUẢN LÝ Phó Giám đốc, Trung tâm NC C N M T &PTBV PGS.TS Vũ Q uyết Thắng 6.700.000 đồng 7.100.000 180.000 đồng 1.200.000 đồng CHỦ TRÌ ĐỂ TÀI TS Dương H ồng Anh TR Ư Ờ N G ĐẠI HỌC K H O A HỌ C T ự N H IÊN BRIEF OF TH E PR O JE C T Nam e o f project: Research on analytical method developm ent and determ ination o f Fluoroquinolone A ntibacteria A gents in hospital w astew ater T he code n u m b e r: Q T - 05 - 34 The C oordinator: Dr Duong Hong Anh The Participants o f the project: MSc Pham N goc Ha BSc H oang Thi Thuong BSc N guyen H oang Tung Purpose and contents of the research Purpose: - Development and evaluation of analytical m ethod for determ ination of Fluoroquinolone A ntibacteria agents (FQs) in hospital w astw ater - Pleliminary providing inform ation on the occurence o f FQ s in hospital wastwater in Hanoi Content: - Evaluation of analytical procedure based on solid phase extraction method (using M ix Phase Cation - MPC exchange disk cartridge) com bined with high perform ance chrom atography/ fluorensence detector for determ ination of FQs in hospital wastew ater - Studying on using hom e-m ade sillicagel cartridge instead for M PC cartridge in the solid phase extraction step - Sampling and analysing FQs in wastew ater o f Huu N ghi hospital Samples were collected at various points in the w astew ater treatm ent system and various day and night times - Cross- checking analysis in Swiss Federal Institute for Environm ental Science and Technology - Determ ination of antibiotic resistance of Ecoli strains isolated from w astew aters of Huu Nghi hospital Sum m ary o f obtained investigation results - Com pleting analytical procedure based on solid phase extraction m ethod (using Mix Phase Cation - MPC exchange disk cartridge) com bined with high perform ance chrom atography/ fluorensence detector for determ ination of FQs in hospital w astew ater Average recoveries obtained for FQ s were in range o f 84 101% Q uantitative determ ination limits were in range o f 0,5 - |ig/L The investigated m ethod was suitable for naalysis o f environm ental sam ples - The hom e- m ade silicagel cartridge was successfully applied for solid phase extraction step instead o f the com m ercial M PC cartridge A verage recoveries obtained for FQs were in range of 80 -81% Q uantitative determ ination limits were in range o f 0,6 - |ig/L The com parison analysis o f FQ s in real w astew ater sam ples showed a high relative value (> 0,9) It is the first publication on using o f sillicagel for FQs extraction from wastewater This solution was the cost saving and suitable solution for laboratory in Vietnam Ciprofloxacin and N orfloxacin were found in hospital collected at various points in w astew ater treatm ent system of Huu Nghi Hospital at total concentration in range of 3,5 - 50,3 Hg/L Levels of Ciprofloxacin and N orfloxacin in raw w astew ater were 13 ± 3% and 21 ± 3%, respectively, in com pared with those in finished wastewater Ecoli strains isolated from raw wastew ater showed higher antibiotic resistance incompare with those isolated from finished wastewater It is a evidence for the extention of antibiotic resistance of bacteria grow ing in the environm ent, which contained low level of antibiotic MỤC LỤC Trang MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, Đ ổ THỊ MỚ ĐẦU I TỔNG QUAN 1.1 Khía cạnh mơi trường vấn đề dược phẩm 1.2 Giới thiệu kháng sinh nhóm Floquinolon 10 II MỤC TIÊU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 13 2.2 Phương pháp nghiên cứu 13 2.2.1 Xây dựng, đánh giá phương pháp chiết pha rắn/ kết hợp sắc ký lỏng hiệu cao phân tích lượng vết FQ mẫu 2.2.2 nước thải 13 Lấy mẫu, phân tích FQ m ẫu thực tế 12 III THỰC NGHIỆM 14 3.1 Hoá chất, dụng cụ, thiết bị 14 3.2 Điều kiện phân tích sắc ký lỏng hiệu cao 14 3.3 Thực nghiệm 15 3.3.1 Pha dung dịch chuẩn dung dịch cần sử dụng 3.3.2 Xây dựng, đánh giá phương pháp chiết pha rắn/ kết hợp sắc 15 ký lỏng hiệu cao phân tích lượng vết FQ mẫu nước thải 3.3.3 Phân tích FQ mẫu nước thải lấy bệnh viện Hữu Nghị 3.3.4 J^ 18 Xác định tính kháng kháng sinh FQ vi khuẩn Ecoli phân lập từ mẫu nước thải lấy bệnh viện Hữu Nghị 20 IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Đánh giá phương pháp chiết pha rắn cột M PC/ kết hợp sắc kí lỏng hiệu cao phân tích lượng vết FQ mẫu nước: 4.2 Xãy dựng, đánh giá phương pháp chiết pha rắn cột silicagel/ kết hợp sắc kí lỏng hiệu cao phân tích lượng vết FQ m ẫu nước 4.3 23 Kết phân tích FQ mẫu nước thải lấy bệnh viện Hữu Nghị 4.4 21 26 Kết xác định tính kháng kháng sinh FQ vi khuẩn Ecoli phân lập từ mẫu nước thải lấy bệnh viện Hữu Nghị 29 V KẾT LUẬN 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT CIP : kháng sinh ciprofloxacin FQ : kháng sinh họ floquinolon HPLC/FLD : sắc kí lỏng hiệu nãng cao/ detectơ fluoresen LOD : giới hạn phát phương pháp LEV : kháng sinh levofloxacin LOME : kháng sinh lom efloxacin LOQ : giới hạn định lượng phương pháp MIC : nồng độ ức chế tối thiểu kháng sinh vi khuẩn MPC : cột chiết pha rắn loại cation hỗn hợp NOR : kháng sinh norfloxacin OFL : kháng sinh ofloxacin SPE : chiết pha rắn DANH MỤC CÁC BẢNG Khối lượng silicagel nước hoạt hoá cột chiết pha rắn silicagel tự nhồi 17 Hiệu suất thu hổi phương pháp phân tích FQ s nước thải sử dụng kĩ thuật SPE (cột chiết M PC)/H PLC-FLD 21 Hiệu suất thu hồi trung bình [%] trình chiết FQ cột chiết silicagel tự nhồi 24 Nồng độ CIP NOR nước thải bệnh viện Hữu Nghị 26 Tải lượng CIP NOR nước thải bệnh viện Hữu Nghị đưa vào hệ thống nước thải thành phố 27 Số lượng Ecoli nồng độ ức chế tối thiểu (M IC) CIP NOR chủng Ecoli phân lập từ mẫu nước thải bệnh viện Hữu Nghị 30 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, Đ ổ THỊ Trang K hoảng nồng độ loại dược phẩm phát môi trường nước khu vực châu Âu Bắc Mỹ Các nguồn đường dược phẩm xâm nhập vào mơi trường Cấu trúc chung nhóm FQ m ột số FQ tiêu biểu 11 Sơ đổ hệ thống xử lí nước thải bệnh viện Hữu nghị điểm lấy mẫu 19 Ảnh toàn cảnh hộ thống xử lý nước thải bệnh viện Hữu Nghị lấy m ẫu nước thải trước xử lý 19 Quy trình phân tích lượng vết FQ nước phương pháp chiết pha rắn cột M PC/ kết hợp sắc kí lỏng hiệu cao 21 Hình Giới hạn định lượng (LOQ) phương pháp phân tích FQs nước thải sử dụng kĩ thuật SPE (cột chiết M P Q /H P L C FLD Hình 22 Kết thí nghiệm xác định thể tích Breakthrough chiết tách FQ khỏi nước thải nước ngầm sử dụng cột chiết MPC Hình Quy trình phân tích lượng vết FQ nước phương pháp chiết pha rắn cột silicagel/ kết hợp sắc kí lỏng hiệu cao Hình 10 23 23 Kết thí nghiệm xác định thể tích Breakthrough chiết tách FQ khỏi nước thải nước ngầm sử dụng cột chiết Silicagel Hình 11 So sánh kết phân tích mẫu thật sử dụng cột MPC cột Silicagel Hình 12 26 Dư lượng CIP NOR lại (so với ban đầu) qua cơng đoạn cùa hệ thống xử lí nước thải bệnh viện Hữu Nghị Hình 14 25 Nồng độ NOR CIP phát nước thải chưa xử lý sô' bệnh viện Thuỵ sỹ Việt Nam Hình 13 25 28 Nồng độ N O R CIP mẫu nước thải lấy theo mẫu trộn điểm lấy mẫu thuộc hệ thống xử lí nước thải bệnh viện Hữu nghị Hình 15 28 Thí nghiệm xác định nồng độ ức chế tối thiểu N O R CIP chủng Ecoli phân lập từ m ẫu nước thải bệnh viện Hữu nghị 29 ội nghị khoa học Phản tích, Hố, Lý Sinh học Việt Nam lần thứ 2/2005 ng (điểm số 3) mẫu xử lý qua toàn hệ th ố n s (điểm số ) thải ực tiếp vào cống thải thành phố Các mẫu nước thái vị trí trẽn theo thời gian vòng 24h 3h lấy m ột mẫu để phân tích Mẫu đươc V in chuyến phịng thí nghiêm, lọc qua m ang lọc có đườniỉ kính 0.45um éu chinh vê pH = đế tránh sư phân huý vi sinh, sau đươc bao quan tron-i thúy tinh nâu 4"C trước phân tích Q ua khao sát sơ bỏ cho thay CIP va OR loai FQs đươc dùng nhiêu nhut bênh viện Việt Nam chi ực hiên phàn tích kháng sinh nàv theo quv trình trình bàv tron'Ị [1 ] K Ế T Q I Ả VA T H A O LUẬN Các kõ’r qua ve khoan‘ nong dô phai cua CIP \à NOR :r liu lây theo ui vù mẫu trộn 2ìd n iỊ K é ) c/iui p h a n Đicm lúv mau tonii so m au) ỈU h đư(Yc irinh Kiv tro nụ \ in ụ \ ( ) R J C IP iro n : nút < th a i b rn h lơn H ữ u \\> y Ị \o n ii dn 1Ui!' I- > NOR ITK1U tlicu liió NOR mãu tron ( IP mau then liio 5.2 - ‘).5 0.1 Ki.o - 44.1 - ẫu) 2.5 - 6.9 5.6 6.6 - 1s 1) I5 Í -ì iem sỏ (10 ẫu) -4 6.0 - Ỉ5.\ S.6 2.5 - 5.5 4.0 I (10 au) icm sỏ T ( 10 iếm số (10 iu) 'lom sỏ ( IP in;iu trnn 1.2 N so sánh tươna quan aiữa mẫu lây diêm dọc theo hộ xir lí TC thái k hoản g nổng độ phát 2Íá trị thu phân lích mãu ơiiim dán từ đáu vào qua cơn2 đoạn xứ lí tới đàu cua hệ thòng Tinh n hiệu loại bỏ FQs qua cón2 đoạn cùa hệ thõng xứ lí (hình 3) cho V so với nước thải đáu vào hàm Iượns CIP N O R nước dâu r:i chi tươn° ứ ns 13 ± 3°ó 21 ± c 'c M ặc dù theo tài liệu cho ihãy g phân huv vi sinh cùa FQs tháp giám co thê giai thích ng có khà n ã n hấp thu cao bùn [3] N OR 100% NOR7I±17% : thải I váo "hoạt tinh \ CIP100% * CI P 42 ± 10% NOR42±137r thoáng khi, lắng CIP29±»% N()R21±J% kị khi, lắng xử li bùnBévis in h _ Bẽ Vl s in h _ Nước thai dã xứ li C IP1J±J* nh D lượng C IP N O R lại (so với ban thỉu) qua cơng itoựn cìia hệ thống xìt li nước ỉluii bệnh viện Hữu n-ihị nghị khoa học Phàn tich, Hoá, Lý Sinh học Việt Nam lần thứ 2/2005 K Tại điếm s ố - đầu vào hộ thống xử lí, kết phân tích phản ánh B c h ấ t lượng nước thải bệnh viện, nồng độ phát cao CIP 4 P j i g / I N O R ,5 fig /l Đ ây s ố liệu cao phân tích B m ọi điém lấy m ẫu Trong mẫu riêng biệt n ổn độ CIP cao NOR ■ khoảng 3-5 lần Tương quan ngược so với kết mà tác aià Golet » E.M tìm thấy phân tích nước thải bệnh viện Thụy Sỹ [2], Sự khác í biệt tý lệ sử dụng cùa loại kháng sinh N O R CIP để điểu trị bệnh r tai hai q u ố c Ía k h c Hệ thống xử lí nước thải bệnh viện Hữu nshị khóng hoạt động liên tục buổi đêm lưu lượne nước thái thấp, bơm hút cơng đoạn tát nên khó giái thích dao độns nổn2 độ CIP NOR theo thời gian ngày điẽm trons hệ thốna Tuy nhiên theo dõi điểm sô tranh chuns vể dao độns nổn2 độ theo thời sian trons ngày diêm cịn lại (hình 4) thấy xu hướng nổng độ NOR CIP cao vào ban ngày đặc biệt khoáns thời 2Ían sau bệnh nhãn Uỏn2 thuốc Vào buổi đêm từ 24 aiờ tới 2ÍỜ sán2 nổn2 độ FQs nước thái oiám xuống thấp Sự dao động nổns dộ khỏn2 chi phụ thuộc vào thời điếm bệnh nhân sứ đụníỉ thuốc, di vệ sinh mà phụ thuộc vào khà nãns tiếp nhận thái khỏi thê’ từna loại kháns sinh ” - *=— 00 08:00 11 00 &— 0,9 Sử dụng cột silicagel giai đoạn chiết tách mẫu giải pháp tiết kiệm chi phí, tạo điểu kiện chủ động cho nghiên cứu Việt Nam Lời cám ơn Nhóm tác giả chán thành cám ơn Dự án hợp tác quốc tếV iệt Nam - Thụy Sỹ ESTN\' Đê tời NCKH cấp Đại học Quốc gia Hà lĩội QT.05.43 hỗ trợ kinh phí thực nghiên cínt; cám ơn TS Alfredo Alder, ông Michael Berg, GS Walter Giger thuộc Viện KH & CNMT Liên Bang Thuỵ S\ (EAWAG) đóng góp ý kiến q báu q trình nghiên cínt tạo điều kiện thực tập cho cán nhóm Tài liệu tham khảo [1] Dương Hổng Anh, Phạm Ngọc Hà, Hoàng Thị Thương, Nguyễn Hoàng Tùng, Phạm Hùng Việt (2005) "Phân tích đánh giá có mặt dư lượng thuốc kháng sinh Floquinolon nước thài bệnh viện Hĩm N g h ị".Hội nghị Phân tích Hố Lý Sinh học toàn quốc lần thứ 2, tr.348-352 [2] Golet E M., Environmental Exposure Assessment o f Fluoroquinolone antibacterial agents in Sewage,River Water and Soil, Diss ETH 2002, No 14690 [3] Kuemmerer K., (2001) Pharmaceuticals in the Environment Sources, Fate, Effects and Risk Springer- Verlag; Berlin- Heidelberg, 2001 [4] Moore p., Cobby J (1998), Introductory statistics for environmentalistics, Prentice Hall Europe Publisher, Great Britain ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC T ự NHIÊN KHOA HOÁ HỌC N g h iê m M a i P h n g PHÂN TÍCH DƯ LƯỢNG KHÁNG SINH HỌ FLUOROQUINOLON TRONG NƯỚC THẢI BANG PHƯƠNG PHÁP CHIẾT PHA RẮN KẾT HỢP VỚI PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO K H O Á L U Ậ N T Ố T N G H IỆ P H Ệ Đ Ạ I H Ọ C C H ÍN H Q U Y N gành: H oá học C Á N BỘ HUỚNG DẪN : G S T S P h m H ù n g V iệt TS D n g H n g A n h Hà Nội - 2004 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC T ự NHIÊN KHOA HOÁ HỌC Đ ặ n g T h ị N g ọ c D iệp S ự TỒN TẠI VÀ CHUYỂN HOÁ CỦA KHÁNG SINH HỌ FL0QUIN0L0N TRONG NƯỚC THẢI BỆNH VIỆN VÀ Nước MẶT N IÊ N LU Ậ N N gành: C ông n g h ệ H oá học C Á N BỘ HƯỚNG DẪN : TS D n g H n g A n h Hà Nội - 2005 MẪU 2: SCIENTIFIC PROJECT BRANCH: ENVIRONMENTAL SCIENCE AND TECHNOLOGY PROJECT CATEGORY: LEVEL OF HANOI UNIVERSITY OF SCIENCE Title Research on analytical method development determination of Fluoroquinolone A ntibacteria Agents in hospital wastewater Code M anaging Institution and : Q T - 05 - 43 : Vietnam National University, Hanoi Implem enting Institution: Hanoi University of Science Collaborating Institutions: Coordinator : Dr Duong Hong Anh Key im plem entors : MSc Pham Ngoc Ha BSc Hoang Thi Thuong BSc Nguyen Hoang Tung Duration : from 1/2005 to 12/2005 Budget : 15,000,000 VND 10 Main results : Results in science and technology: - Completing analytical procedure based on solid phase extraction method (using Mix Phase Cation - MPC exchange disk cartridge) com bined with high perform ance chrom atography/ fluorensence detector for determ ination of FQs in hospital wastewater A verage recoveries obtained for FQs were in range of 84 101% Q uantitative determ ination limits were in range of 0,5 - |ig/L The investigated m ethod was suitable for analysis of environm ental samples - The home- m ade sillicagel cartridge was succesfuly applied for solid pjase extraction step instead o f the comercial MPC cartridge Average recoveries obtained for FQs were in range of 80 -81% The comparison analysis of FQs in real wastewater sam ples show ed a high relative value (> 0,9) It is the first publication on using o f sillicagel for FQs extraction from wastewater This solution was the cost saving and suitable solution for laboratory in Vietnam - Ciprofloxacin and N orfloxacin were found in hospital collected at various points in wastew ater treatm ent system of Huu Nghi Hospital at total concentration in range of 3,5 - 50,3 fig/L Levels o f Ciprofloxacin and N orfloxacin in raw wastewater were 13 ± 3% and 21 ± 3%, respectively, in com pared with those in finished wastewater - E coli strains isolated from raw w astew ater sh ow ed higher antibiotic resistance incom pare with those isolated from finished wastewater It is a evidence for the extention o f antibiotic resistance of bacteria growing in the environment, which contained low level of antibiotic Results in pra ctica l application: - Investigated analytical m ethods were suitable for determ ination o f FQs in environm ental sam ples U sing hom e-m ade sillicagel cartridge for solid phase extraction step was the cost saving and suitable solution for laboratory in Vietnam - Providing prim ary inform ation on the occurence o f Ciprofloxacin and Norfloxacin in hospital collected o f H uu Nghi Hospital Results in training: B achelor thesis, research for student Publications: publications Duong H ong Anh, Pham Ngoc Ha, Hoang Thi Thuong, Pham Hung Viet Determ ination o f fluoroquinolone antibacterial agents in w astew ater o f Huu Nghi Hospital Proceeding o f the nd National Conference on Analytical Sciences, pp 348-352, 12/2005 Duong H ong Anh, Pham Ngoc Ha, Hoang Thi Thuong, Pham Hung Viet “A nalytical m ethod D evelopm ent for Determination o f Fluoroquinolone antibacterial agents in w astew ater by solid phase extraction technique using hom e-m ade silicagel cartridge and high perform ance chrom atography/ fluorescence detection14 subm ited to Vietnam Analytical Sciences Journal 11 Evaluation grade (if the project has been evaluated by the the evaluation committee: excellent, good, fair) PHIÊU ĐÃNG KÝ KẾT QUẢ NGHIÊN c ứ u KH - CN Tèn Đề Tài: Phan tích đanh gia co mật cua kháng sinh họ Floquinolon nước thải bênh viện Mã số: Q T- 05- 43 Cơ quản chủ trì đề tài: Trường Đại học Khoa học tự nhiên 33 - N gu yễn Trãi, Thanh X uân, Hà N ội Tel: 8585277 Cơ quan quản lý đề tài: Đại học Quốc gia Hà nội 144 - Xuân Thuỷ, Cầu Giấy, Hà Nội Tel: Tổng kinh phí thực chi: 15.000.000 đồng T rong đó: - T Ngân sách Nhà nước: 15.000.000 đồng Thòi gian thực hiện: lnăm Thời gian bắt đầu: 1/2005 Thời gian kết thúc: 12/2005 Tên cán phối hợp: Sô' đăng ký đề tài Ngày: TS Dương Hồng Anh (chủ trì) ThS Phạm Ngọc Hà CN Hồng Thị Thương CN Nguyễn Hoàng Tùng Số chứng nhận đăng ký kết nghiên cứu: Bảo m ậ t: a Phổ biến rộng rãi: X b Phổ biến hạn chế: c Bảo mật: Tóm tắt kết nghiên cứu: ' Đ ã hồn thiện qui trình phân tích lượng vết m ột số kháng sinh họ Floquinolon nước thải bênh viện dựa hai giai đoan: chiết tách làm giàu bang phương pháp chiết pha rấn sử dung cột chiết cation hỗn hợp (M PC), định tính định lương bang sắc ký lỏng cao áp với detectơ huỳnh quang Qui trình có hiệu suat thu hoi cao (trụng bình 84 - 101%), giới hạn định lượng 0,5 - Hg/L đáp ứng u cầu phân tích mẫu m trường Đã thành công việc sử dụng cột silicagel tự hoạt hoá thay cho cột MPC giai đoạn chiết tách mẫu, qui trình phàn tích cho hiệu suat thu hồi 80 -81% Kết phân tích m ẫu nước thải thực tế tương đương với qui trình trẽn Hiện chưa có cơng trình cơng bố vể việc sử dụng cột silicagel chiết tách Floquinolon từ nước thải Sử dụng cột silicagel có ưu tiết kiệm chi phí so với cột MPC tạo điều kiện chủ động cho nghiên cứu Việt Nam Đã xác định dư lượng kháng sinh Ciprofloxacin N orfloxacin nước thải bệnh viện Hữu Nghị mẫu nước thải lấy tai điểm khác hệ thống xử lý nước thải cùa bệnh viện Hữu Nghị theo ngày (24 giờ/ngày, mẫu/3giờ) Phát thấy tổng dư lượng Ciprofloxacin Norfloxacin khoảng 3,5 tới 50,3 |ig/L Dư lượng Ciprofloxacin Norfloxacin lại nước thải sau xử lý so với nước thải chưa xử lý 13 ± 3% 21 ± 3% Vi khuẩn Ecoli phàn lập từ mẫu nước thải chưa xử lý có tính kháng kháng sinh Ciprofloxaxin N orfloxaxin cao so với vi khuẩn phân lập từ nước thải xử lý m inh chứng cho xuất tính kháng kháng sinh vi khuẩn sống mơi trường có dư lượng kháng sinh tương đối thấp Kiến nghị v ề qui mò v đối tượng áp dụng: M rộng qui mô xác định dư lượng FQ mẫu nước thải bệnh viện lớn Hà nội Tiếp tục nghiên cứu dư lượng kháng sinh bùn hệ thống xử lí tính kháng kháng sinh vi khuẩn có mơi trường bùn thải để đánh giá m ột cách toàn diện phân bố FQ hệ thống xử lí nước thải tác động chúng tới vi khuẩn _ Chủ nhiệm nhiệm đẻ đề tài tài Chu -ỉọTên ■ỉọc h m , 1ỌC v ị Ký tồn Đóng dấu Dương Hồng Anh Thủ trưởng quan cJrá trj tài j-i'tr /V ỹ ^ Chủ tịch Hội đồng đánh giá thức ĩfâ ỹ ) T u Thủ trường quan quàn lý đề tài ... qui trình phân tích áp dụng để đánh giá tồn lưu dư lượng số kháng sinh họ floquinolon nước thải bệnh viện nước mặt Đây nghiên cứu cung cấp qui trinh phân tích xác đặc biệt thơng tin có mặt dư lượng... phương pháp phân tích lượng vết m ột số kháng sinh FQ nước thải - Cung cấp thông tin nồng độ sô' kháng sinh FQ nước thải bệnh viện Hà nội tìm hiểu khả kháng kháng sinh FQ vi khuẩn Ecoli nước thải 2.2... lượng vết FQ mẫu nước thải 3.3.3 Phân tích FQ mẫu nước thải lấy bệnh viện Hữu Nghị 3.3.4 J^ 18 Xác định tính kháng kháng sinh FQ vi khuẩn Ecoli phân lập từ mẫu nước thải lấy bệnh viện Hữu Nghị 20