NGHIEN CUU TAC DUNG CUA DjCH CHIET HHKV DÓl VÓI HOAT DÓNO THAN KINH T r i n h Hufu H a n g , LvCu T h u P h i f t f n g Tri/mg DHKHTN, DHQGHN T r a n Lv^u V n H i é n Vien Y hoc Cdtruyén Viet Nam Nguyèn lieu nghién cùu dich chiet HHKV Chugt nhàt trdng va chuót cóhg trdng dUOc chia lo: lo uóng HHKV lièu 2g/kg thè trgnglngày, lo udng Glioba lieu 2mg/kg the trgng/ngày (ddi vdi chuót nhàt tràng), 4mglkg thè trongjngày (ddi vdi chuót cóhg trdng), lo uóng niidc Sau 14 ngày uóng thude lièn tue, chuót diidc tàp cdc loai phàn xa co dièu kien Kèt qua cho thdy dich chiet HHKV dà co tàc dung tot lèn qua trinh hinh thành va tri cdc phàn xa cho chuót Tuy nhièn, tdc dung Giloba Mat khàc, sau 14 ngày diéu tri, hàm liidug MDA dich dóng thè cht nhàt tràng ị lo uóng HHKV dà gidm ddng ke so vdi lo ddi chùng udng niiàc Kèt qua cho thdy HHKV dà co tdc dung han che qua trinh peroxy hóa lipid tebào chuót DAT VAN DE HHKV dich chiè't cùa vi thuò'c Ha thù dò (Polygonum multiflorum Thunb.), Hoàng ky (Astragalus membranaceus Bunge), Kim ngàn boa (Lonicera japonica Thunb) va Vò hat dau xanh (Vigna radiata L.) Day nbiing vi thuò'c d i tim va khà phò bién Y hgc co truyén Chinh vi vày, thuò'c dà dUdc nhiéu nhà kboa hgc tro^ig nUóc quan tàm nghién cùu Tran LUu Vàn Hien, Pham Bà Tuyén va cgng su dà chùng minh HHKV ed tàc dung ùc che phàn ùng peroxy hóa lipid dị'i vói mó va gan chugt nhàt tràng Dich cbiét tòng bdp co tàc dung ùc che' manh bdn càc dich chiè't thành phàn [2] Phi Thi Nggc va cgng sU cho thà'y th'c HHKV an tồn, khịng co tàc dung phu, kbòng xàe dinh dUde lieu gay tdn tbUdng chùc nàng gan, than thù dòc 53 tinh bàn trUdng dién [3] NgUdi cao tuoi dUdc dùng HHKV sau thàng dà cho két qua tò't nhU: tàng eàn, tàng lUc ed, cài thien tinh trang àn, ngù [1] Tuy nhién, nhiing nghién cùu ve tàc dung cùa thuò'c dòi vdi hoat dòng thàn kinh vàn it va cbua tồn dién Do dị, chùng tói thuc hién de tài "Nghién cùu tàc dung cùa dich chiet HHKV dò'i vdi hoat dòng thàn kinh" vdi bai muc dich: - Nghién cùu tàc dung cùa dich cbiét dị'i vói sU hinh t h n h va dap tàt càc phàn xa co diéu kien d chugt - Dànb già khà nàng ùc che phàn ùng peroxy hóa lipid t é bào chugt tbòng qua hàm lUdng Malonyl dialdehyd (MDA) NGUYÈN LIÈU, DOI TUONO VA PHUONG PHÀP NGHIÉN Ctru Nguyèn lieu; dich cbiét HHKV Phòng Dòng y tbUc ngbiem, Vien Y hgc co truyén Viet Nam cung cà'p Giloba che' phàm dang vièn nén bang Medicap Ltd., Tbài Lan san xuà't Dò'i tvidng: càc dòng vat thUc nghiem Vien Ve sinh Dich té' Trung Udng cung cà'p bao góm: - 80 chugt n h t t r n g , giò'ng due, lUdng t r u n g b ì n h 26- 28g/eon, kbòe m a n h va t u n tuoi - 35 chugt cò'ng t r n g , giò'ng dUc, lUdng t r u n g b ì n h 90- lOOg/con, khòe manh va t u n tuoi Fhxidng phàp nghién cijfu - Dị'i vói phàn xa van dòng dinh dUdng co diéu (PXVDDDCDK) kién PhUdng tien: chuong me lo co nhiéu dUdng, mòi dUdng rgng cm, cao 10 cm Tu cùa xuà't phàt ehi co mot dUdng nhà't tdi dich (ndi co thùc àn), càc dUdng khàc ngò cut Chugt nhàt tràng (n = 50) dUdc chia thành 16: + Lo HHKV (n = 15): uong HHKV vdi héu 2g/kg the trgng/ngày + L6 Giloba (n = 15): uò'ng Giloba vdi liéu 2mg/kg the trgng/ngày + Lo dò'i chùng (DC) (n = 20): uò'ng nUdc 54 Chugt dUdc uò'ng thuò'c làn/ngày vào càc buoi sàng Sau 14 ngày lién tue 'ng th'c, tồn bó chugt déu cho nhin àn qua dém PXVDDDCDK dUdc tap lan vào càc buoi sàng, mòi càch phùt theo quy trinh sau: de thùc àn tai dich, dat chugt d cùa xuà't phàt va dàn dàt chugt tói dich PXVDDDCDK dUdc hinh thành né'u chugt tu chay ve dich ma kbòng càn budng dàn PXVDDDCDK dUde hinh thành ben vùng né'u chugt tu chay ve dich lién tue cà làn/ngày ma khịng càn hng dàn Sau phàn xa dà ben vùng, tié'n hànb dap tàt phàn xa bang càch vàn tié'p tue cho chugt chay me lo nbUng khòng de thùc àn ò dich Lue này, chugt chi chay ve dich mot so'làn PXVDDDCDK bi dap tàt né'u cà lién tié'p ngày cht déu khịng dé'n dich - Dò'i vdi phàn xa vàn dòng tu ve co diéu kién (PXVDTVCDK) PhUdng tien: long phàn xa co kich thuóc 40 x 40 x 40 (cm), day co càc day kim loai màc song song va noi vdi dòng dién O giùa long co tru gò càch day 10 cm de chugt bàm vào trành kich tbich dién Chugt cò'ng tràng dUdc chia thành 16: + Lo HHKV (n = 15): uò'ng HHKV vdi liéu 2g/kg the trgng/ngày + Lo Giloba (n = 15): uò'ng Giloba vdi liéu 4mg/kg the trgng/ngày + Lo dò'i chùng (n = 20): 'ng nc Cht dUdc 'ng th'c làn/ngày vào càc buoi sàng Sau 14 ngày lién tue uò'ng thuò'c, tié'n hành tàp PXVDTVCDK cho chugt theo quy trinh: dat chugt vào long phàn xa, sau bà'm chuòng (3 giày) ta se dóng mach dién giày Khi bi dién giat cht sé tim càch chay trị'n, ta dùng que hng dàn chugt bàm tru gị d giùa long Mòi chugt dUdc tap làn/ngày, mòi càch phùt PXVDTVCDK dUdc bình thành néu chugt tu nhày tru gò kich tbich co dieu kién (tié'ng chng) x't hién PXVDTVCDK dUdc bình thành ben vùng né'u cà tié'p ngày chugt déu nhày tru gò tié'ng chuòng xuà't hien Khi phàn xa dà ben vùng, ta tié'n hành dap tàt phàn xa bang càch bà'm chuòng kéo dai qua giày nhung khịng dóng mach dién PXVDTVCDK bi dap tàt néu cà lién tié'p ngày cht déu khịng nhày tru gị kich tbich co diéu kien kéo dai qua giày - Xàc dinh hàm lUdng MDA: 55 Chugt nhàt tràng (n = 30) dUdc chia thành lo: + Lo HHKV (n = 10): 'ng HHKV vói liéu 2g/kg the trgng/ngày + Lo Giloba (n = 10): uò'ng Giloba vdi héu 2mg/kg the trgng/ngày + Lo dò'i chùng (DC) (n = 10): 'ng nc Sau 14 ngày lién tue uong thuoc, chugt dUdc mo là'y de xàc dinh hàm lUdng MDA, mot càc san pham trung gian cùa qua trinh peroxy boa lipid, theo phUdng phàp Jachiga Robax [4] KÉT QUA NGHIÉN CÙU VA BÀN LUAN 3.1 K è t q u a P X V D D D C D K 3.LI Toc hinh thành PXVDDDCDK Toc dò hinh thành phàn xa dUdc tinh bang so' tap de chugt tu chay tu diém xuà't phàt ve dich ma khòng càn hudng dàn Ké't qua dUde trinh bay bang Bang 1, Toc hinh thành PXVDDDCDK cùa chuót nhat tràng Phàn 16 n So' tàp de hinh thành phàn xa HHKV (1) 15 11,20 ± 1,66 Giloba (2) 15 5,03 ± 1,41 DC(3) 20 2016,75 ±1,94 P 1-2: < 0,05 1-3: < 0,05 Ké't qua trén bang cho thà'y lo Giloba co tò'c bình t h n h phàn xa nbanb nhà't: 5,03 ± 1,41 làn, sau dị tói 16 'ng HHKV: 11,20 ± 1,66 làn, làu nhàt 16 DC pbài càn tói 16,75 ± 1,94 tap NhU vày, HHKV va Giloba déu co xu hudng làm giàm s6' tàp, giùp chugt nbanb chóng thành lap phàn xa Su khàc biet giùa 16 HHKV va 16 DC uò'ng nude co y nghìa tbị'ng ké vói P < 0,05 Tuy nhién, hiéu qua cùa HHKV Giloba (P < 0,05) 3.1.2 Tdc hinh thành phàn xa ben vùng Sau phàn xa dà dUdc thành lap, chùng tói tié'p tue xàc dinh chi so' hinh thành phàn xa ben vùng Ké't qua dUdc trinh bay bang 56 Bang Toc dò h i n h t h n h PXVDDDCDK ben v ù n g cùa chuót nhàt tràng Phàn 16 n So' lèn tàp de phàn xa ben vùng HHKV (1) 15 26,02 ± 1,67 Giloba (2) 15 20,26 ± 1,94 DC(3) 20 48,33 ±3,51 P 1-2: < 0,05 1-3: < 0,05 Két qua trén bang cho thà'y so' tàp de phàn xa ben vùng ò 16 HHKV 26,02 ± 1,67 làn, it hdn gan hai so vdi 16 DC (48,33 ± 3,51 làn) Diéu chùng tò chugt dUdc uò'ng thuò'c dà tbich ùng nbanb vdi test huà'n luyén, dò hinh thành phàn xa nbanb hdn DC (P < 0,05) Mac dù HHKV dà co tàc dung cài thien khà nàng bình thành phàn xa, tàng cUdng tri nhó cho chugt nbUng tàc dung cùa nị vàn Giloba 3.1,3 Thòi gian phàn xa Thdi gian phàn xa thdi gian chuót chay tu diém xuà't phàt tdi dich Chi so'này chi dUdc xàc dinh phàn xa da ben vùng Ké't qua dUdc trinh bay bang Bang Thdi gian phàn xa cùa cht nhàt t r n g dị'i vói PXVDDDCDK" Phàn 16 n So' tàp de phàn xa (giày) HHKV (1) 15 19,06 ±1,67 Giloba (2) 15 18,46 ±1,94 DC(3) 20 27,58 ±3,12 P 1-2: > 0,05 1-3: < 0,05 Ké't qua trén bang cho thà'y thdi gian phàn xa cùa lo HHKV 19.06 ± 1,67 giày, n b a n b hdn so vdi lo DC 27,58 ± 3,12 giày Su khàc biet co y nghìa tbị'ng ké vói P < 0,05, chùng tị chugt dUdc uò'ng thuò'c dà n h a n h nben va linh boat hdn so vdi chugt DC Dac biet khòng co su khàc biet (P > 0,05) giùa 16 HHKV va lo Giloba Chùng tói 57 cho ràng dich chiè't HHKV dà co tàc dung boat hóa càc t é bào thàn kinh giùp chugt co khà nàng tié'p nban va phàn tich thóng tin tị't hdn nén thòi gian phàn xa dà dUdc rùt ngàn 3.1.4 Toc dap tat PXVDDDCDK Sau PXVDDDCDK dà hinh thành ben vùng, chùng tói tien hành xàe dinh tị'c dị dap tàt phàn xa Két qua dUdc trinh bay bang Bang Toc dap tàt PXVDDDCDK cùa chuót nhàt t r n g Phàn 16 n So' tàp de dap tàt phàn xa HHKV (1) 15 28,30 ± 2,56 Giloba (2) 15 47,96 ± 4,28 DC(3) 20 20,26 ± 2,25 P 1-2: < 0,05 1-3: < 0,05 Két qua trén bang cho thà'y 16 HHKV co tị'c dị dap tàt phàn xa (trung bình 28,30 ± 2,56 làn) làu bdn 16 DC (trung bình 20,26 ± 2,25 làn) vdi P < 0,05 Diéu chùng tò HHKV dà cài thien khà nàng tri phàn xa, tàng cUdng tri nhó cho chugt Tuy nhién, 16 Giloba vàn co khà nàng tri phàn xa làu nhà't, the hién ò toc dò dap tàt phàn xa lèn tói 47,96 ± 4,28 Ké't qua cho thà'y tàc dung cùa HHKV vàn Giloba (P < 0,05) 3.2 K e t q u a P X V D T V C D K 3.2.1 Toc hinh thành PXVDTVCDK Sau 14 ngày uòhg thuò'c, chùng tòi tien hành tap PXVDTVCDK cho chugt cò'ng trang Tò'c dị bình thành phàn xa dUdc tinh bang so'làn tàp de chugt nhày tru go tié'ng chuòng (tin hiéu co diéu kien) xuà't hién Ké't qua nghién cùu dUdc trinh bay bang 58 Bang Toc dị hinh thành PXVDTVCDK cùa cht cị'ng tràng Phàn 16 n So' tàp de dap tàt phàn xa HHKV (1) 15 13,65 ±1,63 Giloba (2) 15 7,10 ± 1,41 DC(3) 20 15,25 ±1,86 P 1-2: > 0,05 1-3: < 0,05 Ké't qua trén bang cho thà'y, 16 Giloba co toc dò hinh thành phàn xa nhanh nhà't, trung bình càn 7,10 ± 1,41 phị'i bdp tin hiéu tié'ng chuòng - dòng dién Lo HHKV càn so'làn tap nhiéu hdn (13,65 ± 1,63 làn), két qua khòng co sU khàc biet so vói lo DC (P > 0,05) 3.2.2, Toc hinh thành phàn xa ben vitng Phàn xa dUde coi ben vùng néu cà lan tap ngày chugt déu nhày tru gò tié'ng chuòng xuà't hién Ké't qua dUdc trinh bay bang Bang Toc hinh thành PXVDTVCDK ben viJng cùa chuót có'ng tràng Phàn 16 n So' tàp de dap tàt phàn xa HHKV (1) 15 24,53 ±1,60 Giloba (2) 15 18,33 ±2,34 DC(3) 20 40,02 ± 4,26 P 1-2: < 0,05 1-3: < 0,05 Ké't qua trén bang cho thà'y so'làn tàp de phàn xa ben vùng d 16 HHKV 24,53 ± 1,60 làn, dò 16 DC càn tdi 40,02 ± 4,26 tàp NhU vày, chugt dUdc uòng thuò'c co tị'c dị bình thành phàn xa ben vùng nhanh hdn DC Co the thuò'c dà co tàc dung hoat boa càc té bào thàn kinh, làm cho chùng co khà nàng tié'p nban, xù ly tbòng tin nhanh va chinh xàc hdn Do dị, so'làn tap dà giàm so vói DC (P < 0,05) Ngoài ra, kèt qua trén bang cho thà'y 16 Giloba co toc dị bình thành phàn xa ben vùng n h a n h nhà't, trung bình 18,33 ± 2,34 tap NhU vày, ành hUdng cùa HHKV giò'ng Giloba làm cho cà thè nhanh chóng nhan bié't kich tbich co hai (dòng dién) qua tin hiéu co diéu kién (tié'ng chuòng) de thành lap PXVDTVCDK Tuy nhién, thi nghiem vàn cho thà'y tàc dung cùa HHKV vàn so vdi Giloba 59 3.2.3 Thdi gian phàn xa Thdi gian phàn xa dUdc tinh tu lue phàt tié'ng chuòng cho tdi kbi chuót nhày tru go Két qua dUde trinh bay bang Bang Thòi gian phàn xa cùa cht cị'ng tràng doi vói PXVDTVCDK Phàn 16 n So'làn tàp de dap tàt phàn xa HHKV (1) 15 1,21 ±0,15 Giloba (2) 15 1,26 ±0,28 20 2,00 ±0,21 DC(3) P 1-2: >0,05 1-3: < 0,05 Ké't qua trén bang cho thà'y thdi gian phàn xa cùa lo HHKV trung bình 1,21 ± 0,15 giày, thà'p bdn so vói 16 DC, trung binh 2,00 ± 0,21 giày Diéu chùng tò vdi tin hiéu tié'ng chuòng nhung chugt dUdc uò'ng thuò'c dà tié'p nhan va xù ly tbòng tin nhanh hdn nén thdi gian phàn xa dUdc rùt ngàn Khi so sành 16 thuò'c va 16 Giloba, két qua cho thà'y thdi gian phàn xa giùa càc 16 tUdng dUdng (P > 0,05) Day mot dà'u hiéu tò't cùa thuò'c nghién cùu 3.2.4 Toc dap tàt PXVDTVCDK cùa chuót cóhg trdng Sau phàn xa dà ben vùng, chùng tòi tié'n hành dap tà't PXVDTVCDK Chi so' co the ghi nhan sU ghi nhó phàn xa cùa chugt Ké't qua nghién cùu dUdc trinh bay bang Bang Toc dap tàt PXVDTVCDK cùa cht cị'ng t r n g Phàn 16 n So' tàp de dap tàt phàn xa HHKV (1) 15 48,42 ± 3,26 Giloba (2) 15 110,35 ±11,53 DC(3) 20 38,52 ± 4,67 P 1-2: < 0,05 1-3: < 0,05 Két qua trén bang cho thà'y 16 HHKV tị'c dò dap tàt phàn xa làu hdn so vdi lo DC (P < 0,05), nghia thuò'c dà co tàc dung kéo dai tri nhd cùa chugt Tuy nhién, chuót uò'ng Giloba, mot dUdc phàm dùng de diéu tri chùng suy giàm tri nhd ò nguòi già, vàn cho két qua tò't nhàt (P < 0,05) 60 3.3 K è t q u a x c d i n h h m ìvtdng MDA MDA mot san phàm trung gian cùa qua trinh peroxy bịa lipid nói chung va peroxy hóa màng té bào nói riéng Do dị, thóng qua hàm lUdng MDA co the dànb già mùc dị oxy hóa lipid va sU tịn thUdng cùa té bào thàn kinh Két qua thu dUde dò'i vdi hai loai phàn xa diéu kién ị trén cho thà'y HHKV dà tàc dung tàng cng tri nhó cho chugt Phài chàng th'c nghién cùu dà tàc dung han che qua trinh peroxy hóa, bào ve té'bào va dị góp phàn quan trgng vào sU tri tri nhó cho chugt De làm sàng tò và'n de này, chùng tòi tié'n hànb xàc dinh hàm lUdng MDA dich dóng thè ebt sau 14 ngày uò'ng thuò'c Ké't qua dUdc trinh bay bang Bang Hàm litdng MDA (nmol/1) dich dóng the chuót sau 14 ngày uóng thuóc Phàn 16 n Hàm lircrng MDA (nmol/l) HHKV (1) 10 6,514 ±0,465 Giloba (2) 10 6,407 ± 0,280 DC(3) 10 7,245 ± 0,346 P 1-2: >0,05 1-3: < 0,05 Ké't qua trén bang cho thà'y hàm lUdng MDA dich dong thè chugt d 16 DC cao nhà't, trung bình 7,245 ± 0,346 (nmol/1); già tri d càc 16 HHKV va Giloba lUdt 6,514 ± 0,465 va 6,407 ± 0,280 (nmol/1) Diéu cho thà'y qua trinh peroxy hóa té' bào dà dUdc han che' né'u chugt dUdc xù ly tre bang th'c 14 ngày Mat khàc, bàm lUdng MDA d 16 HHKV va Giloba tUdng dUdng vói P > 0,05 Chùng tò dich cbiét HHKV co khà nàng ùc che' phàn ùng peroxy hóa lipid tịt nhU Giloba KÉT LUAN Dich chiè't HHKV co tàc dung tịt dị'i vói sU bình t h n h va tri càc phàn xa vàn dòng dinh dUdng co diéu kién d chugt nhàt tràng va phàn xa van dòng tu ve co diéu kién d chugt cò'ng tràng Tuy nhién, tàc dung cùa HHKV Giloba Thdi gian phàn xa cùa chugt dUde uò'ng HHKV dUdc rùt ngàn hdn 16 dò'i chùng ò cà hai loai phàn xa HHKV co tàc dung han che'phàn ùng peroxy hóa lipid te bào ebuòt nhàt tràng sau 14 ngày uò'ng thuò'c Khà nàng cùa HHKV va Giloba tUdng dUdng 61 TÀI LIÉU THAM KHÀO Cao Thi Hién, 2002 Tdc dung cùa vièn HHKV trén mot so chi so làm sàng va càn làm sàng fé malonyl dialdehyd va chuyèn dang lympho bào ò ngiidi cao tuoi, Luàn vàn Thac si Y hgc Dai hgc Y Ha Noi Tran LUu Vàn Hién, Ta Thi Phòng, Pham Bà Tuyén, Trinh Hùu Hàng, 2002 "Tàc dung bào ve te bào chuót nhàt tràng chiù càc stress oxy hóa cùa dich chiè't HHKV", Tap chi Sinh ly hoc, (1), tr 52 - 58 Phi Thi Nggc, 2001 Nghién cùu tàc dung cùa thuóc HHKV trén mot sólchi so lipid màu ị thị va chugt, Luàn vàn Thac si Y hgc, Dai hgc Y Ha Nói Jadwiga Robax, Ryszad J., 1988 "Flavonoids are scavengers of superoxide anions", Biochemical pharmacology, 37, pp: 837 - 841 SUMMARY THE EFFECTS OF EXTRACT HHKV ON NERVOUS ACTION Trinh Huu Hang, Luu Thi Thu P h u o n g Hanoi University of Science Tran Luu Van Hien Institute of Traditional Medicine HHKV is the extract of Polygonum multiflorum Thunb, Astragalus membranaceus Bunge, Lonicera japonica Thunb and Vigna radiata L In this study, we use HHKV extract for rais, mice orally Ali rats and mice were divide into groups Group 1: drink HHKV with dose 2g/kg body weight /day Group 2: drink Giloba with dose 2mglkg body weight/day (for mice), 4mg/kg body weight/day (for rats) Group 3: drink water This treatment is applied continuosly for 14 days After that, we train conditional reflex for mice and rats The resulta show that HHKV increases the memory of mice and rats However, the effects of Giloba is better than HHKV in some tests On the other hand, concentration of malonyl dialdehyd in nerve cells of drunk HHKV is lower than mice drunk water So HHKV limit lipid peroxydation of nerve cells 62 ... uò'ng HHKV: 11,20 ± 1,66 làn, làu nhàt 16 DC pbài càn tói 16,75 ± 1,94 tap NhU vày, HHKV va Giloba déu co xu hudng làm giàm s6' tàp, giùp chugt nbanb chóng thành lap phàn xa Su khàc biet giùa 16 HHKV. .. biet khòng co su khàc biet (P > 0,05) giùa 16 HHKV va lo Giloba Chùng tói 57 cho ràng dich chiè't HHKV dà co tàc dung boat hóa càc t é bào thàn kinh giùp chugt co khà nàng tié'p nban va phàn... khàc, bàm lUdng MDA d 16 HHKV va Giloba tUdng dUdng vói P > 0,05 Chùng tò dich cbiét HHKV co khà nàng ùc che' phàn ùng peroxy hóa lipid tịt nhU Giloba KÉT LUAN Dich chiè't HHKV co tàc dung tòt dò'i