Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 32, Số (2016) 30-37 Định lượng đồng thời ibuprofen, naproxen, diclofenac bezafibrate nước tiểu phương pháp điện di mao quản vùng kết hợp chiết pha rắn Nguyễn Duy Chiến, Nguyễn Mạnh Huy, Nguyễn Văn Quân, Nguyễn Thanh Đàm, Dương Hồng Anh, Phạm Hùng Việt* Trung tâm Công nghệ Môi trường Phát triển Bền vững (CETASD), Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQGHN, 334 Nguyễn Trãi, Hà Nội, Việt Nam Nhận ngày 15 tháng năm 2015 Chỉnh sửa ngày 18 tháng năm 2015; Chấp nhận đăng ngày 18 tháng năm 2016 Tóm tắt: Trong nghiên cứu này, phương pháp điện di mao quản vùng sử dụng detector độ dẫn khơng tiếp xúc kết hợp với xử lí mẫu chiết pha rắn áp dụng để phân tích hàm lượng ibuprofen, naproxen, diclofenac bezafibrate nước tiểu Mẫu nạp vào cột chiết pha rắn LiChrolut RP-18 sau rửa giải 10 mL hỗn hợp etyl axetat/hexan (v/v = 40/60) Dịch chiết sau chuyển dung mơi phân tích điện di với detector độ dẫn không tiếp xúc sử dụng pha động dung dịch tris-(hidroxymetyl)aminometan 12 mM, hidroxypropyl-β-cyclodextrin mM thêm axit lactic để điều chỉnh pH 8,0 Giới hạn phát phương pháp chất nước tiểu khoảng 2,5 tới 6,0 µg/L; giá trị độ lệch chuẩn tương đối diện tích pic thời gian di chuyển phép đo độ lặp lại độ tái lặp < 5,5%; hiệu suất thu hồi phân tích mẫu thêm chuẩn đạt từ 86% tới 101% Từ khóa: Thuốc giảm đau khơng steroid, ibuprofen, nước tiểu, điện di mao quản, chiết pha rắn đặc biệt điều trị viêm khớp, bệnh gút, đau đầu,… Trong 24 từ vào thể, chất hấp thu, biến đổi thải trừ chủ yếu qua nước tiểu, phần lớn chuyển hóa thành hoạt chất khác, dạng ban đầu chiếm lượng nhỏ 10% Việc đánh giá khả thải trừ qua nước tiểu loại thuốc khách thể khác có ý nghĩa lớn nghiên cứu dược động học, góp phần nâng cao hiệu sử dụng thuốc điều trị Mặc dù có nhiều phương pháp phân tích sử dụng để xác định hàm lượng IBP, DCF, NPX BZF dược phẩm nước Đặt vấn đề∗ Ibuprofen (IBP), diclofenac (DCF) naproxen (NPX) dược phẩm thuộc nhóm thuốc chống viêm khơng steroid (NSAIDs) có tác dụng kháng viêm, giảm đau hạ sốt Bezafibrate (BZF) thuốc hạ lipid máu, thuộc nhóm fibrat Đây tân dược danh mục thuốc chữa bệnh chủ yếu thuộc phạm vi toán quỹ bảo hiểm y tế [1], sử dụng rộng rãi Việt Nam, _ ∗ Tác giả liên hệ ĐT.: 84-913572589 Email: phamhungviet@hus.edu.vn 30 N.D Chiến nnk / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Cơng nghệ, Tập 32, Số (2016) 30-37 thải, số công trình ứng dụng với nước tiểu cịn chưa nhiều đa phần sử dụng phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao (HPLC) Toshio Hirai cộng [2] định lượng IBP, DCF, NPX số NSAIDs khác nước tiểu HPLC sử dụng detector UV bước sóng 230 320 nm kết hợp với chiết pha rắn (SPE) María Ramos Payán cộng [3] sử dụng HPLC detector mảng diode (DAD) 230 nm để phân tích IBP, DCF axit salicylic Các kết thu có độ ổn định độ nhạy cao, nhiên đòi hỏi chi phí tương đối lớn Một số nghiên cứu khác tập trung vào đối tượng riêng lẻ [4-7], dù điều phù hợp với thực tế người bệnh thường sử dụng loại thuốc lại gặp khó khăn việc áp dụng quy trình phân tích chất cho chất khác Phương pháp điện di mao quản (CE), đặc biệt điện di mao quản vùng (CZE) phương pháp nhiều tiềm việc phân 31 tích đối tượng dược phẩm mẫu môi trường y sinh với ưu điểm thời gian phân tích ngắn, lượng mẫu dung mơi tiêu tốn nhỏ, pha động độc hại Điều đáng tiếc giống phương pháp khác, việc ứng dụng CE để phân tích đồng thời IBP, DCF, NPX BZF tập trung vào đối tượng mẫu nước môi trường [8] Đối với nước tiểu, nghiên cứu chủ yếu thường xác định chất [9-10], đưa đến hạn chế nói Hiện nay, Dược điển Việt Nam có chuyên luận chung CE [11], với đối tượng dược phẩm, phương pháp mới, chưa ứng dụng nhiều Với mong muốn đóng góp thêm cơng trình áp dụng CE vào lĩnh vực y sinh, nghiên cứu tiến hành xây dựng quy trình phân tích đồng thời bốn hoạt chất IBP, DCF, NPX BZF nước tiểu CZE kết hợp với trình làm giàu mẫu SPE Hình Cấu trúc chất phân tích Thực nghiệm 2.1 Hóa chất Các hóa chất sử dụng nghiên cứu có độ tinh khiết phân tích đặt mua từ Merck (Đức), Sigma-Alrich (Đức) Fluka (Thụy Sĩ), bao gồm chất phân tích (Hình 1); etyl axetat hexan sử dụng làm dung môi chiết; tris-(hidroxymetyl)aminometan (Tris), axit lactic (Lac), 2-hidroxipropyl-βcyclodextrin (HP-β-CD) sử dụng làm pha động CE; axetonitrin, axit fomic sử dụng làm pha động HPLC 32 N.D Chiến nnk / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 32, Số (2016) 30-37 2.2 Thiết bị Hệ thiết bị CE tự chế tạo với detector đo độ dẫn không tiếp xúc (eDAQ, Úc) Mao quản fused-silica 60 cm với chiều dài hiệu dụng 50 cm, đường kính 50 µm sử dụng suốt trình nghiên cứu Điện tách giữ -15 kV Mẫu bơm kiểu xiphong với chiều cao bơm mẫu 20 cm 60 giây Hệ thiết bị HPLC sử dụng LC20AB với cột C18 detector DAD Shimazu (Nhật Bản) chia thành hai phần: phần phân tích CE, phần phân tích HPLC Mẫu sử dụng trình khảo sát điều kiện chiết chuẩn bị sau: thêm 500 µL dung dịch làm việc vào 100 mL mẫu nước tiểu axit hóa, sau tiến hành chiết pha rắn Nồng độ chất phân tích mẫu thêm chuẩn 100 µg/L Kết thảo luận 3.1 Tối ưu hóa điều kiện chiết 2.3 Dung dịch Dung dịch gốc 1000 µg/mL chất phân tích pha metanol, dung dịch bền tháng bảo quản 4oC Dung dịch làm việc sử dụng trình nghiên cứu điều kiện chiết chứa 20 µg/mL chất, thu cách trộn lượng xác định dung dịch gốc bốn chất phân tích, sau pha loãng nước deion Dung dịch làm việc sử dụng để xây dựng đường chuẩn đánh giá khác chuẩn bị theo cách tương tự dung dịch đệm điện di pha loãng 10 lần thay nước deion Các dung dịch pha tuần bảo quản 4oC Pha động q trình phân tích CE pha nước deion, chứa tris 36 mM, HP-β-CD mM điều chỉnh đến pH axit lactic (đệm Tris/Lac) Dung dịch sử dụng ngày 2.4 Xử lí mẫu Cột chiết pha rắn sử dụng cột LiChrolut RP-18 loại mL chứa 500 mg chất hấp phụ (Merck) Trước xử lí mẫu cột chiết pha rắn hoạt hóa mL dung mơi rửa giải, mL H2O Mẫu nước tiểu sau lấy axit hóa tới pH HCl M, sau lọc qua màng lọc 0,45 µm Một thể tích mẫu cố định (100 mL) nạp qua cột chiết Rửa lại cột mL H2O dung môi rửa giải Cô đuổi dung mơi sau chiết N2 đến cạn, sau thêm mL dung dịch đệm Tris/Lac pha loãng 10 lần Dung dịch thu Theo dược động học, lượng hoạt chất nguyên gốc thải trừ theo đường nước tiểu thường không vượt 10%, đồng thời thải trừ diễn thời gian dài lượng thuốc sử dụng khơng cao Chính vậy, lượng thuốc nước tiểu khơng lớn Ngồi ra, nước tiểu mẫu phức tạp nên q trình phân tích gặp nhiều khó khăn Trước thực tế đó, cần thiết phải có q trình làm giàu làm mẫu trước phân tích Đối với phương pháp CE, chiết pha rắn phương pháp xử lý mẫu thông dụng [12] Nghiên cứu sử dụng chiết pha rắn thông qua việc khảo sát yếu tố: loại dung môi rửa giải, thành phần dung mơi rửa giải, thể tích dung môi rửa giải * Lựa chọn dung môi rửa giải: Dựa vào cấu trúc Hình 1, nhận thấy chất phân tích bao gồm đầu phân cực (nhóm cacboxylic) đầu khơng phân cực (gốc hidrocacbon cồng kềnh) Chính vậy, q trình chiết pha rắn dùng dung mơi phân cực lẫn phân cực để thu hồi chất từ cột chiết C18 Đối với nghiên cứu này, bốn hệ dung môi rửa giải sử dụng, bao gồm: a) axetonitrin; b) etyl axetat; c) hexan d) hỗn hợp etyl axetat hexan (v/v = 50/50) Điện di đồ thu sau sử dụng hệ dung mơi khác trình bày Hình cho thấy, dung môi phân cực lớn axetonitrin etyl axetat tỏ không phù hợp khả làm khơng tốt Điều do, hợp chất hữu có nhiều nước tiểu creatinine, axit uric, axit N.D Chiến nnk / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 32, Số (2016) 30-37 amin,… dễ bị rửa giải dung môi phân cực trở thành chất gây nhiễu, cản trở q trình phân tích điện di Ngược lại, hexan có khả làm tốt khả rửa giải chất thấp hơn, thể độ lớn tín hiệu thu thấp so với hệ etyl axetat/hexan Dựa kết này, dung môi rửa giải lựa chọn hỗn hợp etyl axetat/hexan * Xác định thành phần dung môi rửa giải: Yếu tố khảo sát tỉ lệ etyl axetat hexan dung môi rửa giải, đó, tỉ lệ etyl axetat thay đổi từ 30 – 70% (về thể tích) Kết thu lần khẳng định lại xu hướng nói trên: 33 tăng tỉ lệ etyl axetat, đồng nghĩa với việc tăng độ phân cực dung môi rửa giải khả làm mẫu giảm; theo chiều ngược lại, tỉ lệ hexan cao làm giảm hiệu suất thu hồi chất phân tích Với hệ dung mơi có tỉ lệ etyl axetat từ 60% trở lên, điện di đồ thu xuất tín hiệu lạ, ảnh hưởng tới khả phát phân tách chất Theo chiều hướng khác, tỉ lệ etyl axetat 50% cho đường ổn định hẳn hiệu suất thu hồi đạt giá trị lớn chất hệ có 40% etyl axetat (72 – 90%) Đây hệ dung môi rửa giải tối ưu lựa chọn nghiên cứu 2,5 mV (a) (b) IBP BFB NPX DCF (c) (d) 700 800 900 1000 Thời gian di chuyển (giây) Hình Điện di đồ phân tích sử dụng dung mơi rửa giải khác a) axetonitrin; b) etyl axetat; c) hỗn hợp etyl axetat hexan (v/v : 50/50) d) hexan * Khảo sát thể tích dung mơi rửa giải: Thể tích dung mơi rửa giải yếu tố quan trọng có ảnh hưởng tới khả thu hồi chất Trong nghiên cứu này, thể tích dung mơi khảo sát lần lượt: 2, 4, 6, 8, 10 mL; hiệu suất thu hồi tương ứng thể Hình Các kết rằng, tăng thể tích dung môi rửa giải, hiệu suất thu hồi chất phân tích tăng dần Điều phù hợp, lượng dung mơi tăng hịa tan chất phân tích nhiều Ở thể tích dung mơi rửa giải 10 mL, hiệu suất thu hồi đạt tốt (IBP: 89%, BZF: 91%; NPX: 98%, DCF: 95%) Do đó, thể tích tích dung mơi rửa giải 10 mL lựa chọn điều kiện tối ưu Lưu ý rằng, Hình Ảnh hưởng thể tích dung mơi rửa giải đến hiệu suất thu hồi thể tích rửa giải cao khơng khảo sát kéo dài thời gian cô đuổi dung môi, hiệu suất thu hồi không thật khác biệt 3.2 Lựa chọn pha động điện di Sau trình chiết pha rắn, đuổi dung mơi rửa giải, dược phẩm chiết hòa tan trở lại pha nước trước bơm vào hệ CE Đối với việc phân tích chất pha nước, hệ đệm 12 mM Tris/Lac có pH 8,0 bổ sung HP-β-CD mM tỏ thích hợp [13] Vì vậy, hệ đệm nói sử dụng làm pha động điện di nghiên cứu 34 N.D Chiến nnk / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 32, Số (2016) 30-37 chuẩn lớn 0,999 Giá trị LOD cao 0,60 µg/mL DCF, kể tới hệ số làm giàu (100 lần) MDL mẫu thật đạt µg/L, phù hợp để phân tích dược phẩm nước tiểu Độ chụm đánh giá thông qua độ lặp lại (trong ngày) độ tái lặp (trong ngày) Độ lệch chuẩn tương đối (RSD) diện tích pic thời gian di chuyển chất phân tích tốt 5,5% cho thấy phương pháp có độ chụm tốt Các kết trình bày Bảng 3.3 Đánh giá phương pháp Sau tối ưu hóa quy trình phân tích, thơng số đặc trưng đường chuẩn, giới hạn phát (LOD), giới hạn định lượng (LOQ) thiết bị, giới hạn phát phương pháp phân tích (MDL), độ chụm, độ xác định, đánh giá Các thông số đường chuẩn, giá trị LOD (S/N = 3) LOQ (S/N = 10) Bảng Kết cho thấy, tất chất phân tích, hệ số tương quan R2 đường Bảng Giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng, hệ số tương quan (R2) đường chuẩn chất dịch chiết giới hạn phát phương pháp phân tích (MDL) chất nước tiểu Chất phân tích Phương trình đường chuẩn Hệ số R2 Ibuprofen Bezafibrate Naproxen Diclofenac y = (1,15±0,04).10-3x – (0,62±0,49).10-3 y = (7,05±0,25).10-4x – (1,09±2,80).10-4 y = (6,99±0,08).10-4x – (1,54±0, 97).10-4 y = (5,55±0,25).10-4x – (0,53± 2,69).10-4 0,999 0,999 0,999 0,999 Khoảng đường chuẩn (µg/mL) 2,0 – 20 2,0 – 20 2,0 – 20 2,0 – 20 LOD (µg/mL) LOQ (µg/mL) MDL (µg/L) 0,25 0,41 0,55 0,60 0,75 1,23 1,65 1,80 2,5 4,1 5,5 6,0 Bảng Độ lặp lại độ tái lặp chất phân tích mẫu dựng chuẩn Ibuprofen RSDb RSDa 2,7 3,7 3,3 3,8 Chất Độ lặp lại (n = 7, RSD %) Độ tái lặp (n = 7, RSD %) Bezafibrate RSDa RSDb 4,1 3,8 5,5 3,9 Naproxen RSDa RSDb 3,9 3,8 2,1 4,0 Diclofenac RSDa RSDb 5,3 3,8 3,9 4,0 RSDa : độ lệch chuẩn tương đối diện tích pic RSD : độ lệch chuẩn tương đối thời gian di chuyển b Độ phương pháp phân tích, bao gồm q trình xử lý mẫu đo mẫu, xác định hiệu suất thu hồi lượng chất phân tích biết trước thêm vào mẫu nước tiểu Khoảng thu hồi đạt Bảng từ 86 tới 101% chất phân tích, phù hợp tốt so với yêu cầu đặt (80 – 110%) Bảng Hiệu suất thu hồi mẫu thêm chuẩn Mẫu Ca (µg/L) Mẫu Mẫu 40,0 75,0 Ibuprofen b Bezafibrate b Naproxen b Diclofenac b C (µg/L) H (%) C (µg/L) H (%) C (µg/L) H (%) C (µg/L) H (%) 40,3 75,2 100,6 100,3 42,3 64,5 105,6 86,0 38,1 73,6 95,3 98,1 38,1 66,8 95,2 89,0 Ca : nồng độ thêm chuẩn; Cb : nồng độ đo N.D Chiến nnk / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 32, Số (2016) 30-37 3.4 Phân tích mẫu thật Các mẫu nước tiểu lấy theo từ ba tình nguyện viên (2 nam, nữ) độ tuổi 20 – 45, có sử dụng thuốc IBP (400 mg) Mẫu xử lí theo quy trình xây dựng đo đồng thời thiết bị CE – C4D HPLC – DAD Điện di đồ CE thu Hình 4, nồng độ IBP mẫu cho Bảng Độ 35 lệch kết thu phương pháp CE HPLC nhỏ 10% tất mẫu cho thấy phương pháp CE phát triển tin cậy hồn tồn sử dụng để phân tích đối tượng dược phẩm mẫu nước tiểu Ngồi ra, lượng IBP đào thải dạng khơng đổi tất tình nguyện viên nhỏ 1% Điều phù hợp với dược động học thuốc Hình Điện di đồ phân tích mẫu thật Bảng Kết phân tích hàm lượng IBP mẫu thật Mẫu Thời gian (giờ) Thể tích (mL) M11 M12 M21 M22 M31 M32 M33 0–4 – 10 0–4 4–6 0–1 1–4 – 10 250 120 100 255 210 176 130 Nồng độ CE (µg/L) Nồng độ HPLC (µg/L) Độ lệch (%) Lượng đào thải (µg) 356 ± 9,52 336 ± 8,84 342 ± 14,5 132 ± 6,83 394 ± 11,4 264 ± 9,14 159 ± 11,8 390 370 311 141 365 263 154 -8,75 -9,35 9,90 -7,05 7,84 0,30 3,51 89 40 34 34 83 46 21 Kết luận Phương pháp điện di mao quản vùng sử dụng detector độ dẫn không tiếp xúc kết hợp với xử lí mẫu chiết pha rắn phát triển thành công để ứng dụng xác định hàm lượng IBP, DCF, NPX BZF nước tiểu Tổng lượng đào thải (µg) Phần trăm đào thải (%) 129 0,03 68 0,02 150 0,04 Các thông số đánh giá cho thấy, phương pháp ổn định đáng tin cậy với giới hạn phát đủ tốt để phân tích dược phẩm Kết phân tích mẫu thật đối chứng với phương pháp HPLC cho sai số < 10% 36 N.D Chiến nnk / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 32, Số (2016) 30-37 Lời cảm ơn: Các tác giả chân thành cảm ơn hỗ trợ kinh phí từ đề tài TN.15.30 (chủ trì: Nguyễn Duy Chiến) – trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Tài liệu tham khảo [1] Bộ Y tế (2014) Thông tư số 40/2014/TT-BYT Ban hành hướng dẫn thực danh mục thuốc tân dược thuộc phạm vi toán quỹ bảo hiểm y tế Hà Nội [2] Hirai, T., Matsumoto, S., & Kishi, I (1997) Simultaneous analysis of several non-steroidal anti-inflammatory drugs in human urine by highperformance liquid chromatography with normal solid-phase extraction Journal of Chromatography B 692(2), 375-388 [3] Payán, M R., López, M Á., Fernández-Torres, R., Bernal, J L., & Mochón, M C (2009) HPLC determination of ibuprofen, diclofenac and salicylic acid using hollow fiber-based liquid phase microextraction Analytica Chimica Acta, 653(2), 184-190 [4] Oliveira, A R., Cesarino, E J., & Bonato, P S (2005) Solid-phase microextraction and chiral HPLC analysis of ibuprofen in urine Journal of Chromatography B 818(2), 285-291 [5] Sun, Y., Zhang, Z., Xi, Z., & Shi, Z (2009) Determination of naproxen in human urine by high-performance liquid chromatography with direct electrogenerated chemiluminescence detection Talanta 79(3), 676-680 [6] Kole, P L., Millership, J., & McElnay, J C (2011) Determination of diclofenac from [7] [8] [9] [10] [11] [12] [13] paediatric urine samples by stir bar sorptive extraction (SBSE)-HPLC-UV technique Talanta 85(4), 1948-1958 D Castoldi, V M (1985) Determination of bezafibrate in human plasma and urine by highperformance liquid chromatography Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications 334, 259-265 Mai, T D., Bomastyk, B., Duong, H A., Pham, H V., & Hauser, P C (2012) Automated capillary electrophoresis with on-line preconcentration by solid phase extraction using a sequential injection manifold and contactless conductivity detection Analytica Chimica Acta, 272, 1-7 Franciszek K Gł´owka, M K (2005) High performance capillary electrophoresis method for determination of ibuprofen enantiomers in human serum and urine Analytica Chimica Acta 540(1), 95-102 Rafifa Hamoudová, M P (2006) Determination of ibuprofen and flurbiprofen in pharmaceuticals by capillary zone electrophoresis Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 41(4), 1463-1467 Bộ Y tế (2009) Dược điển Việt Nam xuất lần thứ tư NXB Y học Hà Nội Quirino, R T (2014) Capillary Electrophoresis: Preconcentration Techniques In Reference Module in Chemistry, Molecular Sciences and Chemical Engineering Elsevier Lê Minh Đức, Phạm Mạnh Hùng, Dương Hồng Anh, Phạm Hùng Việt (2015) Phát triển quy trình xác định lượng vết số thuốc giảm đau nước thải hệ thiết bị điện di mao quản xách tay điều khiển tự động Tạp chí hóa học 53(6), 790-794 N.D Chiến nnk / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, Tập 32, Số (2016) 30-37 37 Simultaneous Determination of Ibuprofen, Naproxen, Diclofenac and Bezafibrate in Urine Samples Using Capillary Electrophoresis Method Combined with Solid Phase Extraction Nguyễn Duy Chiến, Nguyễn Mạnh Huy, Nguyễn Văn Quân, Nguyễn Thanh Đàm, Dương Hồng Anh, Phạm Hùng Việt Centre for Environmental Technology and Sustainable Development, VNU University of Science, 334 Nguyễn Trãi, Hanoi, Vietnam Abstract: In this research, capillary electrophoresis (CE) zone method using capacitively coupled contactless conductivity detector (C4D), combined with the sample pretreatment using solid phase extraction, and was applied to determine ibuprofen, naproxen, diclofenac and bezafibrate in urine samples Sample was loaded into LiChrolut RP-18 cartridge and was eluted by 10 mL of the mixture of ethyl acetate/hexane (40/60 by volume) The elution was further concentrated, solvent changed and analyzed by CE-C4D using mixture of Tris/Lactic 12 mM with pH=8.0/ hydroxypropyl-β-cyclodextrin mM as the background electrolyte The method detection limits of all compounds in urine samples were in range of 2,5 - 6,0 µg/L; the residue standard deviation RSD for peak area and migration time in the repeated measurements and reproducibility were lower than 5.5%; recovery values ranged between 86 – 101% Keywords: non-steroidal anti-inflammatory drugs, ibuprofen, urine, capillary electrophoresis, solid phase extraction ... luận Phương pháp điện di mao quản vùng sử dụng detector độ dẫn không tiếp xúc kết hợp với xử lí mẫu chiết pha rắn phát triển thành công để ứng dụng xác định hàm lượng IBP, DCF, NPX BZF nước tiểu. .. định lượng, hệ số tương quan (R2) đường chuẩn chất dịch chiết giới hạn phát phương pháp phân tích (MDL) chất nước tiểu Chất phân tích Phương trình đường chuẩn Hệ số R2 Ibuprofen Bezafibrate Naproxen. .. động học, lượng hoạt chất nguyên gốc thải trừ theo đường nước tiểu thường không vượt 10%, đồng thời thải trừ di? ??n thời gian dài lượng thuốc sử dụng khơng cao Chính vậy, lượng thuốc nước tiểu khơng