Nghiên cứu phân tích đánh giá hàm lượng kháng sinh họ betalactam trong đối tượng dược phẩm và sinh học bằng phương pháp phân tích hiện đại

Nghiên cứu phân tích đánh giá hàm lượng kháng sinh họ betalactam đối tượng dược phẩm sinh học phương pháp phân tích đại Nguyễn Thị Ánh Tuyết Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Luận án TS Chun ngành: Hố Phân tích; Mã số 62 44 29 01 Người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Văn Ri; GS.TS Phạm Hùng Việt Năm bảo vệ: 2013 Abstract Nghiên cứu chọn điều kiện tối ưu thông số máy, pha tĩnh, pha động… để tách xác định đồng thời kháng sinh họ betalactam kỹ thuật RP- HPLC với detector UV Đánh giá phương pháp phân tích ứng dụng phân tích mẫu dược phẩm, mẫu nước tiểu Nghiên cứu điều kiện tối ưu tạo dẫn xuất phát huỳnh quang betalactam với thuốc thử 7-Fluoro-4-nitrobenzo-2-oxa-1,3diazole (NBD-F) để tách xác định đồng thời kháng sinh betalactam kỹ thuật RP- HPLC/ detector huỳnh quang, đánh giá phương pháp phân tích Ứng dụng phương pháp RP- HPLC/ detector huỳnh quang có độ nhạy độ chọn lọc cao để phân tích mẫu dược phẩm đặc biệt phân tích mẫu sinh học: nước tiểu mẫu huyết Nghiên cứu tìm chọn điều kiện tối ưu thơng số máy điện di mao quản, kích thước mao quản, áp vào đầu mao quản, dung dịch đệm điện di để tách xác định đồng thời chất kháng sinh betalactam kỹ thuật điện di mao quản điện động học mixen Ứng dụng phương pháp điện di mao quản điện động học mixen xác định hàm lượng kháng sinh betalactam mẫu dược phẩm mẫu nước tiểu Keywords Hóa phân tích; Thuốc kháng sinh; Dược phẩm; Betalactam; Phương pháp phân tích đại Content MỞ ĐẦU Các kháng sinh thuốc thiết yếu y học đại, nhờ thuốc kháng sinh mà y học loại bỏ dịch bệnh nguy hiểm người động vật dịch hạch, dịch tả, thương hàn điều trị hiệu nhiều loại bệnh gây vi khuẩn.Từ Alexander Fleming tìm penicillin (1928) việc điều trị bệnh nhiễm khuẩn có tiến lớn, kháng sinh giúp điều trị nhiều bệnh hiểm nghèo, mang lại sống cho người mà trước y học khơng có khả chữa trị Đối với nước phát triển, thuốc kháng sinh lại giữ vị trí quan trọng, nước điều kiện vệ sinh mức sống thấp nên thường xảy dịch tả, kiết lị, nhiễm khuẩn đường hô hấp… Ở nước ta có số tài liệu cơng bố kháng sinh chiếm 25-30% tổng số thuốc sử dụng hàng năm mà chưa có tài liệu xác cơng bố việc điều tra chi tiết vấn đề này, chắn thuốc kháng sinh thuốc sử dụng nhiều nước ta nước phát triển, nước Châu Âu Nhật Bản… nhóm thuốc sử dụng nhiều lại thuốc điều trị tim mạch, thuốc điều trị bệnh thần kinh- tâm thần, thuốc chống viêm thuốc giảm béo Kháng sinh họ β-lactam gồm nhiều loại như: Penixilin, Ampixilin, Amoxilin … với vô số tên biệt dược khác nhau, loại kháng sinh đơn độc kết hợp với số hóa chất khác Augmentin (gồm Amoxilin muối axit Clavulanic), Unasyn (gồm Ampixilin Sulbactam) Các thuốc có hoạt phổ kháng khuẩn rộng, dùng để điều trị hầu hết bệnh nhiễm khuẩn cho người cho vật nuôi Tuy nhiên, lạm dụng kháng sinh, sử dụng kháng sinh không liều lượng cách dùng kháng sinh không dễ bị vi khuẩn nhờn thuốc, kháng thuốc, từ việc chữa trị khó khăn [2] Đối với người cao tuổi , lươ ̣ng dư kháng sinh nước tiể u nhiề u , gây bệnh thận Đồng thời, lươ ̣ng dư này thải môi trường sẽ gây lên những hâ ̣u vơ nghiêm trọng Vì vậy, kiểm sốt phân tích thuốc kháng sinh người bệnh biện pháp cần thiết để nâng cao hiệu sử dụng chúng Mặt khác việc phân tích hàm lượng kháng sinh máu, hay nước tiểu ta biết hàm lượng kháng sinh tồn thể bao nhiêu, có đủ hàm lượng để tiêu diệt vi khuẩn hay không, từ có phác đồ điều trị hợp lý Có nhiều phương pháp phân tích hàm lượng kháng sinh mẫu sinh học quang phổ hấp thụ phân tử UV-Vis, phương pháp von-ampe hòa tan, sắc ký lỏng hiệu cao với nhiều detector khác nhau, đặc biệt phương pháp điện di mao quản phát triển gần Vì việc nghiên cứu lựa chọn phương pháp phân tích đảm bảo độ đúng, độ chọn lọc, chi phí phân tích khơng cao, đơn giản, áp dụng để kiểm tra song hành với phương pháp dược điển cần thiết có ý nghĩa thực tiễn Trong số phương pháp phân tích cơng cụ đại phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao điện di mao quản có nhiều lợi thế, đáp ứng u cầu đặt ra, chúng tơi chọn phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao điện di mao quản để tách xác định kháng sinh β-lactam Hơn nước ta phương pháp điện di mao quản chưa nghiên cứu nhiều Xét hiệu tách thời gian phân tích, phương pháp điện di mao quản có nhiều lợi nên gần nhà khoa học bắt đầu quan tâm tới phương pháp Do chúng tơi chọn đề tài: “Nghiên cứu phân tích đánh giá hàm lượng kháng sinh họ betalactam đối tượng dược phẩm sinh học phương pháp phân tích đại”, đề tài có tính thực tiễn, cấp thiết khoa học phù hợp với tình hình phát triển kinh tế nước ta Xuất phát từ vấn đề trên, mục tiêu luận án đặt nghiên cứu tối ưu điều kiện kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao, điện di mao quản để tách định lượng đồng thời số kháng sinh họ β-lactam đối tượng dược phẩm sinh học, nhằm tìm phương pháp phù hợp để phân tích β-lactam mẫu sinh học, đặc biệt nước tiểu NỘI DUNG NGHIÊN CỨU CỦA LUẬN ÁN BAO GỒM: (1) Nghiên cứu chọn điều kiện tối ưu thông số máy, pha tĩnh, pha động… để tách xác định đồng thời kháng sinh họ betalactam kỹ thuật RP- HPLC với detector UV Đánh giá phương pháp phân tích ứng dụng phân tích mẫu dược phẩm, mẫu nước tiểu (2) Nghiên cứu điều kiện tối ưu tạo dẫn xuất phát huỳnh quang betalactam với thuốc thử 7-Fluoro-4-nitrobenzo-2-oxa-1,3-diazole (NBD-F) để tách xác định đồng thời kháng sinh betalactam kỹ thuật RP- HPLC/ detector huỳnh quang, đánh giá phương pháp phân tích (3) Ứng dụng phương pháp RP- HPLC/ detector huỳnh quang có độ nhạy độ chọn lọc cao để phân tích mẫu dược phẩm đặc biệt phân tích mẫu sinh học: nước tiểu mẫu huyết (4) Nghiên cứu tìm chọn điều kiện tối ưu thông số máy điện di mao quản, kích thước mao quản, áp vào đầu mao quản, dung dịch đệm điện di để tách xác định đồng thời chất kháng sinh betalactam kỹ thuật điện di mao quản điện động học mixen (5) Ứng dụng phương pháp điện di mao quản điện động học mixen xác định hàm lượng kháng sinh betalactam mẫu dược phẩm mẫu nước tiểu Điểm khoa học luận án: Phương pháp tách xác định đồng thời kháng sinh họ betalactam nghiên cứu Việt Nam có tính chất hệ thống, phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao với detector huỳnh quang để phân tích kháng sinh betalactam mẫu sinh học nước ta chưa có cơng trình đề cập tới, đặc biệt phương pháp điện di mao quản (MEKC) tiến hành phân tích đồng thời chất kháng sinh betalactam mẫu dược phẩm nước tiểu chưa có cơng trình cơng bố Reference TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Lê Thị Huyền Dương (2000), Tách phân tích đồng thời số chất quan trọng nhóm vitamin A phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao điện di mao quản, Luận án tiến sĩ Hóa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQGHN, Hà Nội Nguyễn Văn Đích (2005), "Khơng nên lạm dụng kháng sinh", Báo Y học đời sống (27), tr.16-20 Trần Tứ Hiếu, Từ Vọng Nghi, Nguyễn Văn Ri, Nguyễn Xn Trung (2003), Hố học phân tích - Các phương pháp phân tích cơng cụ, NXB ĐHQG Hà Nội, Hà Nội Phạm Gia Huệ (2009), Giáo trình khối phổ sắc ký lỏng khối phổ, Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm, Bộ Y tế Hồng Tích Huyền (2000), Hướng dẫn sử dụng thuốc kháng sinh, NXB Y học, Hà Nội Phạm Luận (1998), Cơ sở lý thuyết phân tích sắc ký lỏng hiệu cao, NXB ĐHQG Hà Nội, Hà Nội Phạm Luận (2004), Giáo trình vấn đề sở kỹ thuật xử lý mẫu, trường ĐH KHTN - ĐHQG Hà Nội, Hà Nội Phạm Luận (2004), Cơ sở lý thuyết điện di mao quản hiệu cao, NXB ĐHQG Hà Nội, Hà Nội Nhà xuất Y học (2009), Dược điển Việt Nam, tái xuất lần thứ 4, Hà Nội 10 Đào Văn Phan, Nguyễn Trọng Thông, Nguyễn Trần Giáng Hương (2005), Dược lý học lâm sàng, NXB Y học, Hà Nội 11 Đào Văn Phan (2009), Dược lý học, NXB Y học, Hà Nội 12 Ngọc Phương (2006),"Thảm họa lạm dụng kháng sinh cho trẻ", Báo lao động 10-10-2006, tr.3-5 13 Trương Phương, Trần Thành Đạo (2011), Hóa dược, tập 2, NXB Giáo dục Việt Nam, Hà Nội 14 Nguyễn Văn Ri (2007), Các phương pháp tách sắc ký, NXB ĐHQG Hà Nội, Hà Nội 15 Tiêu chuẩn Việt Nam 6910- 2001, Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo, TCVN 6910-2001 16 Lê Minh Trí, Huỳnh Thị Ngọc Phương (2010), Hóa dược, tập 1, NXB Giáo dục Việt Nam, Hà Nội 17 Lê Văn Truyền Ban biên soạn Dược thư Quốc gia (2002), Dược thư Quốc gia Việt Nam, lần xuất thứ 1, NXB Y học, Hà Nội 18 Phạm Hùng Việt (2003), Sắc ký khí, sở lý thuyết ứng dụng, NXB ĐHQG Hà Nội, Hà Nội Tiếng Anh 19 Abraham E.P, Chain E, (1940), “An enzyme from bacteria able to destroy penicillin”, Nature 146, pp 837- 845 20 Adam R.N (1969), Electrochemistry at solid electrodes, Dekker Pub., New York 21 Alwarthan A.A, Fattah S.A and Zahran N.M (1992), “Spectrophotometric determination of cephalexin in dosage forms with imidazole reagent”, Talanta 39(6), pp.703-707 22 Ang C.Y.W, W.H Luo, E.B Hansen, J.P Freeman, H.C Thompson (1996), "Rapid determination of ampicillin in bovine milk by liquid chromatography with fluorescence detection", Journal of AOAC International 80(1), pp 107-190 23 AOAC International (2007), How to meet ISO 17025 requirements for method verification, USA 24 Attila Gaspar, Melinda Andrasi, Szilvia Kardos (2002), "Application of capillary zone electrophoresis to the analysis and to a stability study of cephalosporins", Journal of Chromatography B 775(2), pp 239–246 25 Bailon - Perez M.I, A.M García-Campanã, C Cruces-Blanco, M del Olmo Iruela (2008) “Trace determination of lactam antibiotics in environmental aqueous samples using off-line and on-line reconcentration in capillary electrophoresis”, Journal of Chromatography A 1185, pp 273–280 26 Bailon-Perez M.I, L.CuadrosRodr´ıguez, C.Cruces-Blanco (2006), " Analysis of different β-lactam antibiotics in pharmaceutical preparations Using micellar electrokinetic capillary chromatography", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 43(2007), pp 746–752 27 Bailon-Perez M.I, L Cuadros Rodr´ıguez, C Cruces-Blanco (2007), “Single-step enantioselective amino acid flux analysis by capillary electrophoresis sing on-line sample preconcentration with chemical derivatization”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 43, pp 746-752 28 Bailon-Perez M.I, A.M.Garcia-Campana, C Cruces-Blanco, M del Olmo Iruela (2008), "Trace determination of β-lactam antibiotics in environmental aqueous samples using off-line and on-line preconcentration in capillary electrophoresis", Journal of Chromatography A 185(2), pp 273-280 29 Belal F, M M El-Kerdawy, S M El-Ashry and D R El-Wasseef (2000), "Kinetic spectrophotometric determination of ampicillin and amoxicillin in dosage forms", Il Farmaco 55(11-12), pp 680-686 30 Benito-pena E, A.I.Partal-Rodera, M.E.Leon-Gonzalez, M.C.Moreno-Bondi (2005), “Evaluation of mixed mode solid phase extraction cartridges for the preconcentration of beta-lactam antibiotics in wastewater using liquid chromatography with UV-DAD detection”, Analytical Chimica Acta 556(2), pp 415-422 31 Biyang Deng, Aihong Shia, Linqiu Lia and Yanhui Kang (2008), "Pharmacokinetics of amoxicillin in human urine using online coupled capillary electrophoresis with electrogenerated chemiluminescence detection", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 48(4), pp 1249-1253 32 Blanchflower WJ, Hewitt SA, Kennedy DG (1994), "Confirmatory assay for the simultaneous detection of five penicillins in muscle, kidney and milk using liquid chromatography - electrospray mass spectrometry", Analytical Chimica Acta 119(12), pp 2595-2601 33 Bu W, P.Kowalski, I.Ole˛dzka, P.Torres, P.Houston (2003), “Capillary electrophoresis in analysis of veterinary drugs”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 32(3), pp 937-947 34 Burke A Cunha (2008), Antibiotic essentials, 7th edition, Physicians' Press 35 Cha J.M, S Yang, K.H Carlson (2006), "Trace determination of β-lactam antibiotics in surface water and urban wastewater using liquid chromatography combined with electrospray tandem mass spectrometry", Journal of Chromatography A 1115(1-2), pp 46-57 36 Christian Horstkoătter, Dirk Schepmann, Gottfried Blaschke (2003), Separation and identification of zaleplon metabolites in human urine using capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection and liquid chromatography–mass spectrometry”, Journal of Chromatography A 1014(2), pp 71-81 37 Challapkul O, Fujishima A, Tipthara P and Siriwongchai H (2001), “Electroanalysis of glutathione and cephalexin using the boron-doped diamond thin-film electrode applied to flow injection analysis”, Analytical Sciences 17, pp i419- i422 38 Craig W.A (1998), “Pharmacokinetic/pharmacodynamic parameters: rationale for antibacterial dosing of mice and men”, Clin Infect Dis 26(1), pp 1-10 39 Daniela P.Santos, Marcio F.Bergamini and Maria Valnice B.Zanoni (2008), “Voltammetric sensor for amoxicillin determination in human urine using polyglutamic acid/glutaraldehyde film”, Sensors and Actuators B: Chimica 133(2), pp 398-403 40 David Felmingham (2002), “Increasing prevalence of antimicrobial resistance among isolates of S pneumoniae from the PROTEKT surveillance study, and comparative in-vitro activity of the ketolide, telithromycin”, Journal of Antimicrobial Chemotherap 50(1), pp 25-37 41 Dewey D.Y Ryu, Doo-Hyun Nam (2000), “Biomolecular engineering: a new frontier in biotechnology”, Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic 10(2), pp 23–37 42 Fagerquist C.K, F Borrull, M Herna´ndez (2000), “Determination of quinolones in plasma samples by capillary electrophoresis using solid-phase extraction”, Journal of Chromatography B 742, pp 255–265 43 FernándezA- González, R Badía and M E Díaz-Gar (2003), "Micelle-mediated spectrofluorimetric determination of ampicillin based on metal ion-catalysed hydrolysis", Analytica Chimica Acta 484(2), pp 223-231 44 Fogg A G, Fayad N M, Burgess C and Mcglynn A (1979), “Differential pulse polarographic determination of cephalosporins and their degradation products”, Analytica Chimica Acta 108, pp 205-211 45 Gallo-Martinez L, Sevillano-Cabeza A, Campins-Falco P, Bosch-Reig F (1998), “A new derivatization procedure for the determination of cephalexin with 1,2-naphthoquinone 4-sulphonate in pharmaceutical and urine samples using solid-phase extraction cartridges and UV-visible detection”, Analytica Chimica Acta 370, pp 115-123 46 Hammam E, El-Attar M.A, Beltagi A.M (2006), “Voltammetric studies on the antibiotic drug cefoperazone: Quantification and pharmacokinetic studies”, Journal of pharmaceutical and biomedical Analysis 42(4), pp 523-527 47 Hong Wan1, Lars G Blomberg J Kay (1997), “Enantiomeric separation of small chiral peptides by capillary electrophoresis”, Journal of Chromatography A 792(1), pp 393– 400 48 Ivaska A and Nordstrom F (1983), “Determination of some cephalosporins by differential pulse polarography and linear scan voltammetry”, Analytica Chimica Acta 146, pp 87-95 49 Jae-Hoon Song and ANSORP members (2004), “Macrolide resistance and genotypic characterization of Streptococcus pneumoniae in Asian countries: a study of the Asian Network for Surveillance of Resistant Pathogens (ANSORP)”, Journal of Antimicrobial Chemotherapy 53, pp 457- 463 50 Katarzyna Michalskaa, Genowefa Pajchela, Stefan Tyski (2008), “Different sample stacking strategies for the determination of ertapenem and its impurities by micellar electrokinetic chromatography in pharmaceutical formulation”, Journal of chromatography A 832(1), pp 121-129 51 Kazuo Iwaki, Norio Okumuru and Mitsuru Yamazaki and noriyuki Nimura and Toshio Kinoshita (1990), “Precolumn derivatization technique for high-performance liquid chromatographic determination of penicillins with fluorescence detection”, Journal of Chromatography 504(1), pp 359-367 52 Khuroo A.H, Wen-Chu Yang, Ai-Min Yu, S Gurule (2001), “Applications of a copper microparticle-modified carbon fiber microdisk array electrode for the simultaneous determination of aminoglycoside antibiotics by capillary electrophoresis”, Journal of Chromatography A 905(1), pp 309–318 53 Kimai and Y Watanabe (1981), “Fluorimetric determination of secondary amino acids by 7-Chloro-4-nitrobenzyl-2-oxa-1,3-diazole”, Analytica chimica Acta 130, pp 377383 54 Kovach P.M, Lantz R.J and Brier G.(1991), “High-performance liquid chromatographic determination of loracarbef, a potential metabolite, cefaclor and cephalexin in human plasma, serum and urine”, Journal of chromatography B: Biomedical sciences and applications 567(1), pp.129-139 55 Lasia A (2002), “Electrochemical impedance spectroscopy and its applications”, Modern aspects of electrochemistry 32, pp 143-248 56 Li Q and Chen S (1993), “Studies on electrochemical behaviour of cephalexin”, Analytica chimica acta 282, pp.145-152 57 Li Y.M, A Van Schepdael, Y Zhu, E Roets, J Hoogmartens, (1998), J Chromatogr A 812, pp 227–236 58 Masaaki Kai, Hiromi Kinoshita, Mikio Morizono (2003), “Chromatographic determinations of a β-lactam antibiotic, cefaclor by means off luorescence, chemiluminescence and massspectrometry”, Journal of Mass Spectrometry 39(3), pp 329 – 340 59 Mastovska K, Katarzyna Michalska (2004), “Determination of ciprofloxacin and its impurities by capillary zone electrophoresis”, Journal of Chromatography A 1051(4) 267–272 60 Michael R Jacobs (2003), “The Alexander Project 1998-2000: susceptibility of pathogens isolated from community-acquired respitatory tract infection to commonly used antimicrobial agenta”, Journal of antimicrobial Chemotherap 52, pp 229-246 61 Najib N M, Suleiman M S, El-Sayed Y M, Abdulhameed M E (1987), “High performance liquid chromatographic analysis of cephalexin in serum and urine”, Journal of Clinical Pharmacy and Therapeutics 12(6), pp 419 - 426 62 Nozal L, L.Arce1, A.R´ıos2, M.Valcárcel (2004), "Development of ascreening method for analytical control of antibiotic Residues by micellar electrokinetic capillary chromatography", Journal of Analytica Chimica Acta 523(2), pp 21–28 63 Ogorevc B , Hudnik V and Gomiscek S (1988), “Polarographic analysis of some cephalosporin antibiotics”, Fresenius Journal of Analytical Chemistry 330(1), pp 5964 64 Orgorevc B and Gomiscek S (1991), “Electrochemical analysis of cephalosporin antibiotics”, Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis 9(3), pp 225-236 65 Pajchel G, Stefan Tyski, K Pawlowski (2000), “Adaptation of capillary electrophoresis to the determination of selected cephalosporins for injection”, Journal of Chromatography A 895(2), pp 27–31 66 Pradyot Patnaik (1989), Dean’s Analytical Chemistry Handbook, Mc Graw-Hill Companies, New York 67 Pasha C and Narayana B (2008), “A simple method for the spectrophotometric determination of cephalosporins in pharmaceuticals using variamine blue”, Ecletica Química 33(2), pp.41- 46 68 Reyns T, L Nozal, L Arce1, S Croubels (2004), “Development of a screening method for analytical control of antibiotic residues by micellar electrokinetic capillary chromatography”, Analytica Chimica Acta 523(2), pp 21–28 69 Riediker S, B Sada, R Mohamada, J.M Diserens, R.H Stadler (2002), “Determination of oxolinic acid in feeds and cultured fish using capillary electrophoresis”, Food Chemistry 78(2), pp 383–388 70 Roberts J.A, J Lipman, Itaru Furuta (2001), “Determination of vancomycin in human serum by micellar electrokinetic capillary chromatography with direct sample injection”, Clinica Chimica Acta 312(2), pp 221–225 71 Scaglione F, N Griesea (2002), “Determination of free and liposome-associated daunorubicin and daunorubicinol in plasma by capillary electrophoresis”, Journal of Chromatography A 979(1), pp 379–388 72 Schrider B, Voigtz R, Patsch R, Horn G, and Spencker F B (1988), “Pulsepolarographic determination of beta-lactam antibiotica and its clinical applications”, Fresenius Z Anal Chem 331, pp 529-530 73 Toshimasa Toyoka, Yoshihico Watanabe and Kzuhiro Imai (1983), “Reaction of biological important with 7-Chloro-4-nitrobenzyl-2-oxa-1,3-diazole”, Analytica Chimica Acta 149, pp 305-312 74 Tsutsumi K., Kubo H., Kinoshita T (1981), “Determination of serum cephalexin by high performance liquid chromatography”, Analytical letters 14(20), pp 1735- 1743 75 W Zhao, Tianyan You (2004), “Electrochemiluminescence detection with integrated indium tin oxide electrode on electrophoretic microchip for direct bioanalysis of lincomycin in the urine”, Journal of Chromatography B 810 (2004), pp 137–142 76 Wei Liu, Zhujun Zhang, Zuoqin Liu (2007), "Determination of betalactam antibiotics in milk using micro-flow chemiluminescence system with on-line solid phase extraction", Analytica Chimica Acta 592(2), pp 187–192 77 Wenhongn Luo, Eugene B Hansen (1977), “Simultanoeus Determination of Amoxicillin and Ampicillin in Bocine millk by HPLC with Fluorescence Detection”, Food Chem 45(4), pp 1264-1268 78 Whinney B.C.Mc, Corinne Charlier, J.P.Ungerer (2008), “Simultaneous determination of five β-lactam antibiotics (cefepim, ceftazidim, cefuroxim, meropenem and piperacillin) in human plasma by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection”, Journal of Chromatography B 864(1), pp 161–167 79 Xu M, Ma H, Song J (2004), “Polarographic behavior of cephalexin and its determination in pharmaceuticals and human serum”, Journal of pharmaceutical and biomedical analysis 35, pp.1075-1081 80 Xu R.N, J Liu, Thomas T Dabrah (1997), “Analysis of amino acid enantiomers derived from antitumor antibiotics using chiral capillary electrophoresis”, J Pharm Biomed Anal 16, pp 207-214  ... phương pháp điện di mao quản có nhiều lợi nên gần nhà khoa học bắt đầu quan tâm tới phương pháp Do chúng tơi chọn đề tài: ? ?Nghiên cứu phân tích đánh giá hàm lượng kháng sinh họ betalactam đối tượng. .. điện động học mixen xác định hàm lượng kháng sinh betalactam mẫu dược phẩm mẫu nước tiểu Điểm khoa học luận án: Phương pháp tách xác định đồng thời kháng sinh họ betalactam nghiên cứu Việt Nam... có đủ hàm lượng để tiêu diệt vi khuẩn hay khơng, từ có phác đồ điều trị hợp lý Có nhiều phương pháp phân tích hàm lượng kháng sinh mẫu sinh học quang phổ hấp thụ phân tử UV-Vis, phương pháp von-ampe