Khảo sát bộ gen của 30 giống đậu nành glycine max l merril bằng dấu chuẩn phân tử SSR đề tài nghiên cứu khoa học cấp trường ngành công nghệ sinh học

TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN HỒ THỊ NGỌC HÀ KHẢO SÁT BỘ GEN CỦA 30 GIỐNG ĐẬU NÀNH (Glycine max L MERRIL) BẰNG DẤU CHUẨN PHÂN TỬ SSR ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP TRƯỜNG NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC An Giang, Tháng 12 2011 TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN HỒ THỊ NGỌC HÀ KHẢO SÁT BỘ GEN CỦA TẬP ĐOÀN ĐẬU NÀNH (Glycine max L MERRIL) BẰNG DẤU CHUẨN PHÂN TỬ SSR ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP TRƯỜNG NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC DUYỆT CỦA LÃNH ĐẠO KHOA DUYỆT CỦA GV HƯỚNG DẪN DUYỆT CỦA DUYỆT CỦA PHÒNG QLKH – HTQT BAN GIÁM HIỆU LỜI CẢM TẠ Để hoàn thành đề tài này, em xin chân thành cảm ơn: Cha mẹ gia đình ln ủng hộ động viên lúc khó khăn chỗ dựa tinh thần cho sống Ban giám hiệu trường Đại học An Giang, thầy cô khoa Nông Nghiệp – Tài Nguyên Thiên Nhiên, thầy cô thuộc Bộ môn Công nghệ Sinh học tất thầy tận tình dạy dỗ, giúp đỡ truyền đạt kiến thức quý báu cho em suốt thời gian qua Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học – Đại học Cần Thơ, thầy cô cán thuộc Viện tạo điều kiện thuận lợi cho em trình thực đề tài Ks Phạm Trường An – Bộ môn Công nghệ Sinh học – Đại học An Giang, Ts Trương Trọng Ngôn – Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học – Đại học Cần Thơ, trực tiếp hướng dẫn truyền đạt kiến thức chun mơn giúp đỡ em lúc khó khăn, quan tâm tạo điều kiện suốt trình em thực đề tài Hai bạn Dương Văn Đạo Huỳnh Trung Hiếu giúp đỡ em thực đề tài Tất bạn sinh viên lớp DH8SH, bạn ngồi lớp ln ủng hộ tinh thần, chia sẻ kinh nghiệm giúp đỡ em suốt trình học Ký tên HỒ THỊ NGỌC HÀ i.1 TÓM LƯỢC Đậu nành (Glycine max L Merril) trồng có giá trị dinh dưỡng cao nguồn thực phẩm quan trọng cho người gia súc Đậu nành có vai trị quan trọng hệ sinh thái nơng nghiệp bền vững có khả cố định đạm tăng độ phì tự nhiên cho đất (Smil, 1999) Để nâng cao suất sản lượng từ việc trồng đậu nành để đáp ứng nhu cầu tiêu thụ ngày tăng sản phẩm từ đậu nành, bên cạnh biện pháp cải tiến kỹ thuật canh tác việc cải thiện giống yếu tố quan trọng Khâu định thành công việc tuyển chọn giống công tác tuyển chọn vật liệu lai ban đầu Để chọn vật liệu lai với nhu cầu mục đích đề nhà chọn giống phải có tay nguồn tập đoàn giống dồi mặt số lượng đa dạng mặt di truyền (Trần Thị Thanh Thủy, 2001, trích Phạm Trường An, 2010) Đánh giá đa dạng di truyền có vai trị quan trọng việc cung cấp thơng tin cho quản lí sử dụng hiệu nguồn vật liệu khởi đầu chọn tạo giống Những kết đạt được: Khảo sát khác biệt 30 giống đậu nành có nhiều nguồn gốc khác nhau, khảo sát tiêu thời gian sinh trưởng, chiều cao trổ, chiều cao chín, cành hữu hiệu, số lóng, số trái/cây, số hạt/cây, suất, trọng lượng 100 hạt Dựa phần mềm NTSYSpc 30 mẫu giống chia thành nhóm mức khác biệt 26,67 Kết thể giống có nguồn gốc khác lại xếp nhóm Khảo sát mồi cho quy trình phản ứng PCR – SSR mồi có tỷ lệ cho băng hình cao, cao 100% thấp 86,67%, số lượng alen tạo nhiều alen Phân nhóm di truyền 30 giống đậu nành dựa liệu sản phẩm PCR – SSR phân thành nhóm tương đồng mặt di truyền mức 67% Tương tác nghiên cứu kiểu gen kiểu hình mức 26,67% Qua nghiên cứu giúp nhà nghiên cứu chọn nhận diện giống, có chiến lược khai thác nguồn gen đậu nành hiệu Trong công tác sưu tầm nghiên cứu giống cần kết hợp nghiên cứu đặc tính di truyền tiêu hình thái để có nhìn tồn diện xác i2 Mục lục Lời cảm tạ i.1 Tóm lược i.2 Mục lục i.3 Danh sách hình ii Danh sách bảng iii Danh mục từ viết tắt iv Chương Giới thiệu 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu 1.3 Nội dung nghiên cứu Chương Lược khảo tài liệu 2.1 Tổng quát đậu nành 2.1.1 Tổng quát gen nguồn gốc đậu nành 2.1.2 Tổng quát đặc điểm hình thái 2.1.2.1 Rễ 2.1.2.2 Thân, cành, 2.1.2.3 Hoa 2.1.2.4 Trái hạt 2.2 DNA marker 2.3 Dấu chuẩn SSR 2.3.1 Khái niệm SSR 2.3.2 Dấu chuẩn SSR đậu nành 2.4 PCR 2.5 Một số thơng số phân tích thống kê 2.5.1 Các thành phần phương sai (Aravind G, 2006) 2.5.2 Hệ số biến thiên (Aravind G, 2006) 2.5.3 Phân tích đa dạng di truyền dựa vào phần mềm NTSYSpc 2.6 Đa dạng sinh học 2.6.1 Đa dạng sinh học 2.6.2 Đa dạng di truyền 2.6.3 Ý nghĩa nghiên cứu đa dạng di truyền 2.7 Một số nghiên cứu đa dạng di truyền nước dấu chuẩn SSR Chương Vật liệu phương pháp nghiên cứu 11 3.1 Vật liệu 11 3.1.1 Vật liệu đồng 11 3.1.2 Vật liệu phịng thí nghiệm 12 3.1.2.1 Dụng cụ 12 3.1.2.2 Hóa chất 12 i.3 3.2 Phương pháp nghiên cứu 12 3.2.1 Thí nghiệm ngồi đồng 12 3.2.1.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 12 3.2.1.2 Phương pháp canh tác 12 3.2.1.3 Chỉ tiêu theo dõi cách lấy tiêu 12 3.2.1.3.1 Chỉ tiêu sinh trưởng 12 3.2.1.3.2 Chỉ tiêu nông học 12 3.2.1.3.3 Chỉ tiêu suất 12 3.2.2 Thí nghiệm phòng 13 3.2.2.1 Chuẩn bị mẫu 13 3.2.2.2 Ly trích DNA 13 3.2.2.3 Kiểm tra chất lượng DNA 14 3.2.2.3.1 Load mẫu 14 3.2.3 Thực PCR 14 3.3 Phương pháp phân tích thống kê 16 Chương Kết thảo luận 17 4.1 Đánh giá đa dạng di truyền dựa vào liệu kiểu hình 17 4.2 Đánh giá đa dạng di truyền dựa vào kiểu gen 20 4.2.1 Kết kiểm tra chất lượng DNA 20 4.2.2 Sản phẩm phản ứng PCR – SSR 21 4.2.3 Phân nhóm 30 giống đậu nành dựa liệu SSR 23 Chương Kết luận đề nghị 27 Tài liệu tham khảo 27 Phụ chương 29 i.3 Danh sách bảng Bảng 1: Các loại DNA marker thông dụng Bảng 2: Danh sách dạng SSR thực vật Bảng 3: Số lượng SSR chiều dài (cM) nhóm liên kết gen đậu nành Bảng 4: Danh sách giống đậu nành nghiên cứu đề tài 11 Bảng 5: Thành phần PCR dùng cho phản ứng PCR – SSR đậụ nành 14 Bảng 6: Các mồi sử dụng đề tài 15 Bảng 7: Các tính trạng nghiên cứu 30 giống đậu nành 17 Bảng 8: Phân nhóm cụ thể 30 giống đậu nành dựa vào kiểu hình 20 Bảng 9: Sản phẩm điện di mồi với 30 mẫu giống đậu nành 22 Bảng 10: Phân nhóm cụ thể 30 giống đậu nành 25 Bảng 11: So sánh phân nhóm kiểu gen – kiểu hình 30 mẫu giống 26 iii Danh sách hình Hình 1: Nhóm liên kết gen đậu nành Hình 2: Chu trình PCR……………………………………………………… Hình 3: Phân nhóm đa dạng di truyền 30 giống đậu nành dựa vào liệu kiểu hình 19 Hình 4: Kết kiểm tra chất lượng DNA phương pháp điện di 21 Hình 5: Điều tra đa hình DNA locus Satt578 NST số 21 Hình 6: Điều tra đa hình DNA locus Satt494 NST số 18 22 Hình 7: Phân nhóm đa dạng di truyền 30 giống đậu nành xác định thị phân tử SSR 23 ii Danh mục từ viết tắt AFLP: Amplified fragment length polymorphism ALP: Amplicon length polymorphism AVRDC: Asian Vegetable Research and Development Center bp: Base pair CTAB: Cetyl trimethylammonium bromide CV: Coefficient of Variation DNA: Deoxyribonucleic acid dNTP: deoxyribonucleotriphotphat EDTA: Ethylenediaminetetraacetic acid EtBr: Ethidium Bromide FAO: Food and Agricuture Organization JGI: joint genome institute OD: Optical Density NST: nhiễm sắc thể PCR: Polymerase chain rection RAPD: Random amflified polymorphic DNA RFLP: Restriction fragment length polymorphism SAHN: Sequential agglomerative hierarical nested cluster analysis SDS: Sodium docy sulphate SSCP: Single strand comformation polymorphis SSR: Simple sequence repeat (microsatellite) Stt : Số thứ tự TAE : Tris – acetate EDTA TE : Tris EDTA tt : UPGMA : Unweighted Pair Group Method with Arithmetic mean USDA: United States Department of Agriculture UV: Ultraviolet ctv: cộng tác viên NTSYS: Nunmerical Taxonomy System iv Chương Giới thiệu 1.1 Đặt vấn đề Đậu nành (Glycine max L Merrill) loại lấy dầu có sản lượng cao loại lấy dầu giới, 56% sản lượng toàn cầu (Wilson, 2008) Đậu nành loại thực phẩm chứa nhiều giá trị dinh dưỡng thay protein động vật, cung cấp diesel sinh học, dược phẩm, sản phẩm công nghiệp, chất lecithin, vitamin, nutraceuticals chất chống oxi hóa (Wilson, 2008) Để nâng cao suất sản lượng từ việc trồng đậu nành việc cải thiện giống yếu tố quan trọng Khâu định thành công việc tuyển chọn giống công tác tuyển chọn vật liệu lai ban đầu Đánh giá đa dạng di truyền có vai trị quan trọng việc cung cấp thơng tin cho quản lí sử dụng hiệu nguồn vật liệu khởi đầu chọn tạo giống Trước việc nghiên cứu thường dựa vào tính trạng kiểu hình nơng học đơn giản việc nghiên cứu mang lại hiệu không cao biểu kiểu hình chịu ảnh hưởng tương tác kiểu gen môi trường (M.S Pathan David A Sleper, 2008) Các kỹ thuật DNA marker dựa PCR mang nhiều thuận lợi đẩy mạnh tốc độ nghiên cứu, giảm chi phí việc thu thập số liệu mức độ xác cao Do đó, kết hợp đánh giá đa dạng di truyền kiểu hình kiểu gen cho nhìn tồn diện xác Nghiên cứu dấu phân tử SSR sử dụng phổ biến có nhiều ưu điểm như: khả nhân cao, khả cho đồng trội (codominant), lượng DNA cần cho mẫu nhỏ, chất lượng DNA yêu cầu vừa phải, chi phí cho lần phân tích thấp, khả cho đa hình cao 1.2 Mục tiêu Đề tài: “Khảo sát gen 30 giống đậu nành (Glycine max L Merrill) dấu chuẩn phân tử SSR” nhằm: - Khảo sát đánh giá tính đa dạng di truyền 30 giống đậu nành tập đồn dựa vào đặc điểm hình thái (phenotype) dấu phân tử SSR (genotype) - Xây dựng phân nhóm di truyền phát đặc tính giống giúp cho việc khai thác nghiên cứu giống hiệu 1.3 Nội dung nghiên cứu: Kết hợp nghiên cứu kiểu hình kiểu gen cách đánh giá tiêu đồng nghiên cứu phịng lab Sau phân tích số liệu kiểu hình phần mềm SAS xây dựng phân nhóm di truyền kiểu hình kiểu gen phần mềm NTSYSpc Nhóm III.2 bao gồm giống lại tương đồng mức 82% - 94% Trong nhóm lại chia thành nhóm nhỏ nữa: nhóm gồm giống G20, giống có mức độ tương đồng di truyền với giống cịn lại mức 82%, nhóm cịn lại bao gồm giống G21, G22, G23 Tuy nhiên nhóm lại chia làm nhóm là: nhóm 1a gồm giống G23, giống tương đồng với giống cịn lại 90% - 94%, nhóm 1b gồm hai giống G21 G22 Hai giống tương đồng mặt di truyền mức 94% Nhóm IV: bao gồm giống có mức độ tương đồng mặt di truyền khoảng từ 70% - 88% Trong nhóm có giống nhập nội giống địa phương Trong nhóm phân thành nhóm nhỏ: Nhóm IV.1 gồm giống: G2, G6 G9 giống G2 G6 tương đồng 100% giống G9 tương đồng với hai giống mức 90% Nhóm IV.2 bao gồm giống: G14, G26, G27 G29 Các giống có mức độ tương đồng mặt di truyền khoảng 77% - 88% Trong nhóm lại phân thành nhóm nhỏ hơn: nhóm IV.2a gồm giống G14 G26, giống tương đồng mức di truyền 88%, thấy hai giống có nguồn gốc khác lại giống mặt di truyền Nhóm IV.2b gồm giống G27 G29, hai giống tương đồng mức 88% Nhóm V: bao gồm giống G9, G17, G24, giống có mức độ tương đồng di truyền khoảng 71% - 81%, nhóm chia thành nhóm nhỏ: nhóm V.1 bao gồm giống G9, giống có mức độ tương đồng với giống cịn lại mức 71% Nhóm V.2 bao gồm giống lại giống tương đồng di truyền mức 81% Nhóm VI: bao gồm 11 giống lại, giống khác biệt mặt di truyền khoảng 69% - 94%, bao gồm hai nhóm nhỏ : nhóm VI.1 bao gồm giống G15, giống tương đồng mặt di truyền với giống nhóm VI.2 69% Nhóm VI.2 bao gồm 10 giống cịn lại giống có mức độ tương đồng di truyền khoảng 84% - 94% Nhóm lại chia thành nhóm nhỏ hơn: Nhóm 1: gồm giống G10, G12, G13, G30, G28, giống G12, G13, G30 tương đồng mặt di truyền 100% tương đồng với giống lại mức 94% Nhóm 2: gồm giống cịn lại G1, G3, G5, G6, G7, giống tương đồng mặt di truyền từ 84% - 94%, nhóm giống địa phương nên giống mặt di truyền Tuy nhiên nhóm lại chia thành hai nhóm nhỏ nữa: nhóm 2a gồm giống G1 G5, giống tương đồng mặt di truyền 94% Nhóm 2b bao gồm giống cịn lại có tương đồng di truyền khoảng 90% - 94%, nhóm bao gồm nhóm là: nhóm 2b.1 gồm giống G7, giống tương đồng mặt di truyền với giống lại mức 90%, nhóm 2b.2 gồm giống cịn lại G3 G6, giống tương đồng mức 94% 24 Qua phân nhóm cho thấy nhóm III chủ yếu bao gồm giống nhập nội, nhiên giống G11 giống địa phương lại có mức độ tương đồng mặt di truyền cao so với giống nhập nội (70%) Trong nhóm VI giống G30 có nguồn gốc giống nhập nội lại giống hoàn toàn mặt di truyền so với giống địa phương xếp nhóm Điều có hai giả thuyết số lượng primer sử dụng đề tài cịn hạn chế nên chưa tìm khác biệt giống này, giống tương đồng 100% mặt di truyền với giống địa phương Do đó, kiến nghị nghiên cứu thêm nhiều locus để đánh giá cách xác nguồn gốc di truyền mẫu giống Giống G25 có nguồn gốc với G20, G21, G22, G23 lại xếp nhóm riêng, điều cho thấy tính đa dạng di truyền giống Các mẫu giống có mức độ tương đồng hồn tồn mặt di truyền lai với để tạo giống chủng giống G18 lai với G19, G2 G6, tổ hợp lai G12, G13 G30 Mặt khác, nhóm có khoảng cách di truyền xa lai có khả tạo lai có ưu lai cao (Bùi Chí Bửu, 2008) Do nhóm I, II, III lai với giống thuộc nhóm IV, V, VI để tạo giống đa dạng nguồn gen Bảng 10: Phân nhóm cụ thể 30 giống đậu nành Nhóm Giống Nhóm I GC – 90001 – – 39 – 3, GC – 90013 – 21 – 15 – 10, GC – 90013 – 21 – 15 – Nhóm II IT 162049 Nhóm III Tàu Xí, IT 102668, IT102730, IT161797, IT 161972 Nhóm IV Ba Vì, ĐakMil – ĐakLak, Tứ Quý Xanh, PI 133226, PI 200542, PI 566956 Nhóm V Hậu Giang, GC – 90012 – 18 – 13 – 11, IT 162042 Nhóm VI Ba Thái Rốn Nâu, Đại Bái, Bản Dốc A Hạt Đen, Chỉ Thảo Lông Trắng, Đen Hà Bắc, Hoàng Mai, PI 548659, Thanh Oai, Thương Phẩm, Xanh Hà Bắc, PI 566973 25 Bảng 11 So sánh phân nhóm kiểu gen – kiểu hình 30 mẫu giống Stt Tên giống Ba Thái Rốn Nâu G1 Ba Vì G2 Bản Dốc A Hạt Đen G3 Chỉ Thảo Lông Trắng G4 Đại Bái G5 ĐakMil – Đaklak G6 Đen Hà Bắc G7 ĐT1 (Định Tường) G8 Hậu Giang G9 Hoàng Mai G10 Tàu Xí G11 Thanh Oai G12 Thương phẩm G13 Tứ Quý Xanh G14 Xanh Hà Bắc G15 GC – 90001 – – 39 – G16 GC – 90012 – 18 – 13 – 11 G17 GC – 90013 – 21 – 15 – 10 G18 GC – 90013 – 21 – 15 – G19 IT 102668 G20 IT 102730 G21 IT 161797 G22 IT 161972 G23 IT 162042 G24 IT 162049 G25 PI 133226 G26 PI 200542 G27 PI 548659 G28 PI 566956 G29 PI 566973 G30 Tương quan kiểu gen kiểu hình 26,67% 26 Phân nhóm kiểu hình VI VI V VI VI VI VI VI III III VI III VI VI VI III II VI III IV IV IV VI IV IV VI IV I III III Phân nhóm kiểu gen VI IV VI VI VI IV VI VI V VI III VI VI IV VI I V I I III III III III V II IV IV VI IV VI Chương Kết luận đề nghị 5.1 Kết luận Phân tích đa dạng di truyền dựa vào kiểu hình phân thành nhóm mức 16,5% Nhóm I bao gồm giống có nguồn gốc Việt Nam Nhóm II bao gồm giống có nguồn gốc AVRDC Nhóm III bao gồm giống có nguồn gốc Việt Nam, AVRDC USDA Nhóm IV bao gồm giống nhập nội Hàn Quốc, Nhật Bản USDA Nhóm V bao gồm giống có nguồn gốc Việt Nam Nhóm VI có số lượng giống nhiều có gốc tập trung chủ yếu Việt Nam, Nhật Bản USDA Phân tích đa dạng di truyền dựa vào kiểu gen phân thành nhóm mức độ tương đồng 67% Nhóm I giống có nguồn gốc AVRDC Nhóm II giống có nguồn gốc Nhật Bản Nhóm III bao gồm giống có nguồn gốc Việt Nam, Hàn Quốc Nhật Bản Nhóm IV bao gồm giống có nguồn gốc Việt Nam USDA Nhóm V bao gồm giống có nguồn gốc Việt Nam, AVRDC USDA Nhóm VI có số lượng giống nhiều có nguồn gốc tập trung chủ yếu Việt Nam giống có nguồn gốc USDA Tương quan phân tích kiểu gen môi trường 26,67% 5.2 Đề nghị Tiếp tục nghiên cứu phương pháp marker phân tử nhiều giống khác để đánh giá đa dạng di truyền nhận diện giống 27 Tài liệu tham khảo Aravind G (2006) Genetic ariability and diversity study in Soybean (Glycine max (L.) Merrill) Deparment of Genetics and plant breeding college of Agriculture, Dharwad University of Agriculture Sciences, Dharwad – 580 005 Bùi Chí Bửu Nguyễn Thị Lang 2007 Chọn giống trồng Phương pháp truyền thống phân tử Hà Nội: NXB Nơng Nghiệp: 39 – 56 Bùi Chí Bửu Nguyễn Thị Lang 2008 Di truyền phân tử Hà Nội: NXB Nông Nghiệp Emma marriss 10/ 12/ 2008 Soya genome sequenced Đọc từ: http://www.nature.com/news/2008/081210/full/news.2008.1294.html Đọc trực tuyến: 12/ 01/ 2011 Hymowitz, T (2004) Speciation and cytogenetics:In: H R Boerma and J E Specht (Eds), Soybeans: Improvement, Production, and Uses American Society of Agronomy, Crop Science Society of America, Soil Science Society of America, Madison, Wis., pp 97–136 Hwang T-Y, Nakamoto Y, Kono I, Enoki H, Funatsuki H, Kitamura K, Ishimoto M (2008) Genetic diversity of cultivated and wild soybeans including Japanese elite cultivars as revealed by length polymorphism of SSR markers Breeding Science 58, 315-323 Lê Thị Thanh Tuyền 2005 Nghiên cứu đa dạng nguồn gen dứa Cayenne phương pháp marker phân tử Khóa luận tốt nghiệp Cử nhân Công nghệ Sinh học Bộ môn Công nghệ Sinh học, Đại học Nơng lâm TP Hồ Chí Minh Liu, K 1997 Soybeans: Chemistry, Technology and Utilization Aspen Publishers, Gaithersburg, Maryland, USA M S Pathan and David A Sleper 2008 Advance in Soybean Breeding Genetics and Genomics of Soybean, Springer Science+Business Media, pp 113 – 126 Mohan M, S Nair, A Bhagwat, TG Krishna, M Yano 1997 Genome mapping, molecular markers and marker – assisted selection in crop plant Molecular Breed 3: 87 – 103 Norse D E and McManus R E 1980 ‘Ecology and Living Resourses – Biological Diversity 11th Annual Report of Council on Environmental Quality US: Govt Pringting Office, Washinhton, DC, pp: 31 – 80 Phạm Trường An 2006 Đa dạng hóa nguồn gen giống lúa địa phương phương pháp marker phân tử Khóa luận tốt nghiệp Cử Nhân Công nghệ Sinh học Bộ môn Công nghệ Sinh học Đại học An giang Phạm Trường An 2010 Khảo sát gen đậu nành (Glycine max L Merrill) dấu chuẩn phân tử SSR Khóa luận tốt nghiệp thạc sĩ Công nghệ Sinh học Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học Đại học Cần Thơ 28 P B Cregan 2008 Soybean Molecular Genetic Diversity Genetics and Genomics of Soybean, Springer Science+Business Media, pp 17 – 30 Porst P 2005 Ethidium DNA agarose gel electrophoresis: how it started IUBMB Life 57, pp 11 Suggs SV, T Hirose, EH Myake, MJ Kawashima, KI Johnson, RB Wallace 1981 Using purified gene ICN – UCLA Symp Mol Cell Biol 23: 683 – 693 Tổng cục môi trường không ngày tháng Đa dạng di truyền Đọc từ: http://www.nea.gov.vn/VN/quanlymt/baotondadangsh/Gioithieu/Pages/Kh%C 3%A1ini%E1%BB%87m%C4%91ad%E1%BA%A1ngditruy%E1%BB%81n aspx Đọc trực tuyến ngày 12 01 2011 Trần Văn Điền 2007 Giáo trình đậu tương Hà Nội: NXB Nông Nghiêp Trương Trọng Ngôn 2002 Phương pháp nghiên cứu đánh giá tập đoàn giống đậu nành (Glycine max (L.) Merrill) Khoa Nông Nghiệp Bộ môn Khoa học Cây Trồng Trường Đại học Cần Thơ Trương Trọng Ngôn 2006 “Genetic variation in flowering time of soybean based on DNA marker” trích “Morphological and DNA Marker - based Evalution of Genetic diversity in Soybean Glycine max (L.) Merrill” USDA 2010 National plant germplasm system Đọc từ: http://ars-grin.gov/npgs/index.html Đọc trực tuyến ngày 21 02 2011 Wilson R F 2008 Soybean: Market Driven Research Needs Genetics and Genomics of Soybean, Springer Science+Business Media, pp – 14 Steven Cannon 2008 Legum Comparative Genomics Genetics and Genomics of Soybean, Springer Science+Business Media, pp 97 – 136 Wang K-J and Takahata Y (2007) A preliminary comparative evaluation of genetic diversity between Chinese and Japanese wild soybean (Glycine soja) germplasm pools using SSR markers Genetic Resources and Crop Evolution 54, 157-165 29 PHỤ CHƯƠNG Bảng 12: Phân tích ANOVA tiêu thời gian sinh trưởng 30 giống đậu nành Nguồn Tổng bình Độ tự Trung bình F phương bình phương Nghiệm thức 6573,066667 29 226,657471 182,75** Lặp lại 71,933333 3,7 2,98ns Sai số 71,933333 58 1,240230 Tổng cộng 6716,93 89 CV 1,37% Thời gian sinh 81,2 trưởng trung bình ** khác biệt có ý nghĩa mức 1%, ns khác biệt khơng có ý nghĩa Bảng 13: Phân tích ANOVA tiêu chiều cao trổ 30 giống đậu nành Trung bình F Nguồn Tổng bình Độ tự phương bình phương Nghiệm thức 11397,03970 29 393,00137 73,76** Lặp lại 20,82851 10,41425 1,95ns Sai số 309,01667 58 5,32787 Tổng cộng 11726,88 89 CV 7,04% Chiều cao trồ 32,78 trung bình ** khác biệt có ý nghĩa mức 1%, ns khác biệt khơng có ý nghĩa 30 Bảng 14: Phân tích ANOVA tiêu chiều cao lúc chín 30 giống Trung bình F Tổng bình Độ tự phương bình phương Nghiệm thức 24339,30725 29 839,28646 124,90** Lặp lại 42,67933 21,33966 3,18* Sai số 389,74488 58 6,71974 Tổng cộng 24771,73 89 CV 5,01% Chiều cao chín 51,7 trung bình ** khác biệt có ý nghĩa mức 1%, * khác biệt có ý nghĩa mức 5%, Nguồn Bảng 15: Phân tích ANOVA tiêu số cành hữu hiệu 30 giống đậu nành Nguồn Tổng bình Độ tự phương Nghiệm thức 80,50058333 29 Lặp lại 4,40116667 Sai số 13,6605 58 Tổng cộng 98,56 89 CV 19,69% Số cành hữu 2,465 hiệu trung bình ** khác biệt có ý nghĩa mức 1% Trung bình F bình phương 2,77588218 11,63** 2,20058333 9,34** 0,23552586 Bảng 16: Phân tích ANOVA tiêu số lóng 30 giống đậu nành Trung bình F Tổng bình Độ tự phương bình phương Nghiệm thức 387,377333 29 13,3578391 29,63** Lặp lại 0,2426667 0,1213333 0,27ns Sai số 26,144 58 0,4507586 413,764 Tổng cộng 89 5,36% CV Số lóng trung 12,52 bình ** khác biệt có ý nghĩa mức 1%, ns khác biệt khơng có ý nghĩa Nguồn 31 Bảng 17: Phân tích ANOVA tiêu số trái/cây 30 giống đậu nành Nguồn Tổng bình Độ tự Trung bình F phương bình phương Nghiệm thức 41230,46267 29 1421,74009 19,79** Lặp lại 430,59467 215,29733 3ns Sai số 4167,65867 58 71,85618 Tổng cộng 45828,72 89 CV 14,7% Số trái/cây 57,66 trung bình ** khác biệt có ý nghĩa mức 1%, ns khác biệt khơng có ý nghĩa Bảng 18: Phân tích ANOVA tiêu hạt/cây 30 giống đậu nành Trung bình F Tổng bình Độ tự phương bình phương Nghiệm thức 158869,7262 29 5478,2664 18,57** Lặp lại 2311,2382 1155,6191 3,92* Sai số 17106,0818 58 294,9324 Tổng cộng 178287,05 89 CV 15,18% Số hạt/cây 113,1644 trung bình ** khác biệt có ý nghĩa mức 1%, * khác biệt có ý nghĩa mức 5%, Nguồn Bảng 19: Phân tích ANOVA tiêu suất 30 giống đậu nành Trung bình F Tổng bình Độ tự phương bình phương Nghiệm thức 2154,896899 29 74,306790 15,63** Lặp lại 15,346581 7,67329 1,61ns Sai số 275,816154 58 4,755451 Tổng cộng 2446,06 89 CV 14,60% Năng suất 14,94 trung bình ** khác biệt có ý nghĩa mức 1%, ns khác biệt khơng có ý nghĩa Nguồn 32 Bảng 20: Phân tích ANOVA tiêu trọng lượng 100 hạt 30 giống đậu nành Tổng bình Độ tự phương Nghiệm thức 1571,852319 29 Lặp lại 3,575854 Sai số 17,959023 58 Tổng cộng 1593,39 89 CV 3,98% Trọng lượng 13,97287 100 hạt trung bình ** khác biệt có ý nghĩa mức 1% Bảng 21: Kích cỡ allele (bp) 30 giống đậu SSR Nguồn STT G1 G2 G3 G4 G5 G6 G7 G8 G9 G10 G11 G12 G13 G14 G15 G16 G17 G18 G19 G20 G21 G22 G23 G24 G25 G26 G27 G28 G29 G30 Satt396 bp 175 175 175 175 175 175 175 185 185 185 185 200 200 200 200 175 175 175 185 185 185 185 185 185 185 200 200 Satt463 bp 130 140 130 130 130 140 130 140 130 130 140 130 130 140 230 170 130 140 140 130 140 140 140 130 170 140 140 130 140 130 33 Trung bình F bình phương 54,201804 175,05** 1,787927 5,77** 0,309638 nành nghiên cứu với cặp mồi Satt578 bp 180 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 180, 130 155 155 155 155 170 170 170 170 170 170 180 180 180, 130 180, 130 180, 130 Satt294 bp 365 365, 400 365, 400 365, 400 365 365, 400 365, 400 365, 400 365, 400 365, 400 365, 400 365, 400 400 400 365, 400 365 365, 400 365, 400 365 365 365, 400 400 365, 400 365 365, 400 365 365, 400 365 365, 400 Satt494 bp 155 145 145 155 155 145 145 145 145 155 155 155 155 165 155 155 145 155 155 155 155 155 155 145 165 165 165 155 165 155 Bảng 22: Ma trận khác biệt 30 giống đậu nành dựa vào kiểu hình Ba Thái Rốn Nâu Ba Vì Bản Dốc A Hạt Đen Chỉ Thảo Lơng Trắng Đại Bái ĐakMil - ĐakLak Đen Hà Bắc ĐT1 Hậu Giang Hồng Mai Tàu Xí Thah Oai Thương Phẩm Tứ Quý Xanh Xanh Hà Bắc GC – 90001 – – 39 – GC – 90012 – 18 – 13 – 11 GC – 90013 – 21 – 15 – 10 GC – 90013 – 21 – 15 – IT 102668 IT 102730 IT 161797 IT 161972 IT 162042 IT 162049 PI 133226 PI 200542 PI 548659 PI 566956 PI 566973 Đen Hà Bắc ĐT1 Hậu Giang Hoàng Mai Tàu Xí Thanh Oai Thương Phẩm Tứ Quý Xanh Xanh Hà Bắc GC – 90001 – – 39 – Ba Thái Rốn Nâu 0,0000 13,5907 12,6109 Bản Dốc A Hạt Đen Ba Vì Chỉ Thảo Lơng Trắng Đại Bái ĐakMil ĐakLak 0,0000 21,6179 0,0000 8,5378 7,4592 14,1178 5,8794 7,5549 17,7676 13,4126 6,5092 21,1154 3,7958 8,7720 5,0545 10,7122 8,3927 5,2091 12,5719 18,3756 29,7109 24,9945 11,2984 33,6628 15,6244 11,8886 14,7078 12,5211 18,4499 20,1905 16,3360 13,0186 18,8911 19,8908 17,6122 23,2924 11,8900 19,9374 16,4149 0,0000 8,9091 8,8586 9,1665 11,5926 22,2143 19,6224 9,3448 26,7935 10,2272 11,3747 10,8332 0,0000 10,5804 5,1485 11,2832 22,3565 16,7594 3,0930 25,9778 9,2305 4,1460 6,8607 0,0000 13,5491 18,7373 29,6185 25,9538 12,9935 33,6975 16,5486 13,8765 15,5803 16,6630 25,4013 23,4790 20,3238 18,0898 25,3538 29,3879 40,5052 32,3270 34,0926 32,5422 40,6672 12,3088 8,0722 20,4886 8,3879 7,5426 7,0081 11,5555 17,5013 21,7113 26,7502 9,7479 18,2024 23,1620 12,1963 21,9746 58,1176 12,8261 11,2724 7,1229 11,7205 9,1965 13,7414 11,7214 7,2684 10,0473 11,8281 11,1532 69,9716 25,8011 23,7298 18,4252 28,1489 30,5593 33,7715 18,8489 27,4792 31,2083 13,0620 26,0983 56,3422 13,9242 13,8658 6,3379 16,6694 19,4427 22,5718 9,4841 15,5682 19,8095 5,5313 15,6186 61,8193 17,7143 16,2774 8,0514 10,4532 15,7008 21,2639 6,1828 11,8396 17,1696 13,0610 18,0838 62,1398 18,6093 16,3966 4,8436 13,9906 11,9323 14,0985 12,2432 8,8260 11,8344 8,5457 8,6327 69,7295 25,4899 23,8589 Đen Hà Bắc 0,0000 6,8356 17,6051 12,8569 3,6187 21,3911 ĐT1 Hậu Giang Hoàng Mai Tàu Xí Thanh Oai 0,0000 11,8660 9,2754 8,9484 16,5206 0,0000 9,4046 19,6815 6,8846 0,0000 14,0058 10,7510 0,0000 23,3689 0,0000 6,6750 5,6145 15,6185 12,0022 7,6171 19,5757 4,1738 10,0116 20,2432 14,1807 3,1604 23,6767 3,4410 6,6761 16,2651 10,6496 4,7901 19,2769 13,9864 12,6770 11,6470 10,0966 15,6775 13,5286 34 GC – 90012 – 18 – 13 11 GC – 90013 – 21 – 15 10 GC – 90013 – 21 – 15 – IT 102668 IT 102730 IT 161797 IT 161972 IT 162042 IT 162049 PI 133226 PI 200542 PI 548659 PI 566956 PI 566973 28,0685 23,7897 13,9403 17,0559 29,7528 10,7912 9,5305 15,1329 25,3305 21,3826 8,9600 29,3899 9,9362 13,4277 20,3142 25,4837 4,5606 15,6662 21,6359 13,7820 21,2785 57,7563 14,3980 11,9840 15,0107 19,6304 26,7300 31,6027 9,8867 22,2428 27,9097 15,9853 26,1044 52,1043 8,7245 5,8479 25,4980 29,2341 37,7641 42,4403 19,7793 32,8472 38,9574 25,6838 36,6053 41,9842 7,1938 6,9888 22,1279 23,0908 32,0435 37,7323 15,8329 27,5692 33,7055 24,1467 33,6048 46,3488 8,1049 6,8259 9,7029 11,7473 18,5705 24,0084 5,7088 14,4639 19,9721 14,0033 20,3315 59,2943 16,1340 13,8300 29,7653 32,4292 41,1380 46,2557 23,9854 36,2770 42,6463 30,2705 41,1679 39,1654 10,2103 11,3865 Thương Phẩm Thương Phẩm Tứ Quý Xanh Xanh Hà Bắc GC – 90001 – – 39 – GC – 90012 – 18 – 13 -11 GC – 90013 – 21 – 15 -10 GC – 90013 – 21 – 15 – IT 102668 IT 102730 IT 161797 IT 161972 IT 162042 IT 162049 PI 133226 PI 200542 PI 548659 PI 566956 PI 566973 Tứ Quý Xanh Xanh Hà Bắc GC – 90001 – – 39 – GC – 90012 – 18 – 13 11 GC – 90013 – 21 – 15 10 0,0000 9,7505 0,0000 6,2605 5,6375 0,0000 16,2725 15,0206 12,6537 0,0000 27,8431 29,3687 26,3356 16,4595 0,0000 14,4300 9,2053 11,6129 19,4531 35,1650 0,0000 13,7129 19,2020 23,9865 29,0616 10,6041 20,5656 25,3831 13,8789 23,9723 56,2273 11,3928 9,1456 10,5867 10,0757 18,3457 24,0516 5,0011 13,7768 19,8495 16,0650 21,2013 59,3109 17,3405 14,9076 12,1158 14,9674 22,0131 27,4122 7,2812 17,5606 23,5546 15,2788 23,4664 56,1861 12,5185 10,5587 20,8634 21,4031 31,7566 36,2994 14,3536 26,0845 32,9096 24,2815 32,1012 48,0699 13,1113 12,0789 36,2471 36,5562 47,3010 52,3404 29,5153 41,9034 48,6709 38,0856 47,6853 32,5827 19,0090 19,5596 3,1704 9,5614 14,4895 17,7336 6,7460 8,9001 14,7535 11,0602 13,2399 64,8264 22,0564 20,2059 35 GC – 90013 – 21 – 15 – IT 102668 0,0000 12,2533 14,7417 17,5520 8,0038 0,0000 12,9908 18,1106 10,9353 0,0000 7,6730 18,9170 0,0000 23,3653 0,0000 IT 162049 PI 133226 PI 200542 PI 548659 PI 566956 PI 566973 9,9792 14,8820 8,1604 11,8255 65,5066 21,8530 20,0976 8,1720 14,0580 20,0634 18,5268 66,7259 26,7306 24,5067 6,7397 3,1298 19,9288 12,9060 77,4408 33,9897 31,9716 11,0937 4,9797 21,5464 10,1484 82,3973 38,7639 36,8823 13,4543 19,7862 13,7737 19,1444 59,4885 17,4734 15,0402 IT 162049 PI 133226 PI 200542 PI 548659 PI 566956 PI 566973 IT 162049 0,0000 19,8055 10,8220 78,6856 35,2850 33,2613 GC – 90013 – 21 – 15 – IT 102668 IT 102730 IT 161797 IT 161972 IT 162042 PI 133226 IT 102730 PI 200542 0,0000 13,2946 65,5642 21,2444 20,1207 0,0000 76,5357 32,9042 31,2087 IT 161797 PI 548659 0,0000 45,7647 47,2807 IT 161972 IT 162042 PI 566956 0,0000 7,3683 16,9544 12,3074 72,1613 29,5074 27,5072 PI 566973 0,0000 3,6586 0,0000 Bảng 22: Ma trận khác biệt 30 mẫu giống đậu nành dựa vào kiểu gen Ba Thái Rốn Nâu Ba Vì Bản Dốc A Hạt Đen Chỉ Thảo Lông Trắng Đại Bái ĐakMil - ĐakLak Đen Hà Bắc ĐT1 Hậu Giang Hồng Mai Tàu Xí Thah Oai Thương Phẩm Tứ Q Xanh Xanh Hà Bắc GC – 90001 – – 39 – GC – 90012 – 18 – 13 – 11 GC – 90013 – 21 – 15 – 10 GC – 90013 – 21 – 15 – IT 102668 Ba Thái Rốn Nâu 1,0000 0,6250 0,8125 Bản Dốc A Hạt Đen Ba Vì Chỉ Thảo Lơng Trắng Đại Bái ĐakMil ĐakLak 1,0000 0,8125 1,0000 0,8750 0,8750 0,6250 0,7500 0,5000 0,6250 0,7500 0,6250 0,7500 0,7500 0,4375 0,5625 0,7500 0,7500 1,0000 0,8750 0,8750 0,7500 0,6250 0,6250 0,6250 0,6250 0,6875 0,5625 0,9375 0,8125 0,8125 0,9375 0,6875 0,8125 0,8125 0,5625 0,8125 0,8125 0,5000 0,6250 1,0000 0,8750 0,7500 0,8750 0,6250 0,7500 0,8750 0,6250 0,8750 0,8750 0,5625 0,6875 1,0000 0,7500 0,8750 0,6250 0,7500 0,7500 0,6250 0,7500 0,7500 0,5625 0,5625 1,0000 0,8750 0,8750 0,7500 0,6250 0,6250 0,6250 0,6250 0,6875 0,5625 0,6875 0,5625 0,6250 0,6875 0,5625 0,5625 0,6875 0,5625 0,6250 0,5625 0,6875 0,5625 0,6875 0,6875 0,6250 0,6875 0,5625 0,6875 0,6875 0,7500 0,6875 0,3750 0,6250 0,5625 0,6875 0,6250 0,5625 0,6250 0,6875 0,3750 36 IT 102730 IT 161797 IT 161972 IT 162042 IT 162049 PI 133226 PI 200542 PI 548659 PI 566956 PI 566973 Đen Hà Bắc ĐT1 Hậu Giang Hồng Mai Tàu Xí Thanh Oai Thương Phẩm Tứ Quý Xanh Xanh Hà Bắc GC – 90001 – – 39 – GC – 90012 – 18 – 13 11 GC – 90013 – 21 – 15 10 GC – 90013 – 21 – 15 – IT 102668 IT 102730 IT 161797 IT 161972 IT 162042 IT 162049 PI 133226 PI 200542 PI 548659 PI 566956 PI 566973 0,6250 0,5625 0,5000 0,5625 0,5000 0,5625 0,6875 0,8125 0,5625 0,7500 Đen Hà Bắc 1,0000 0,6250 0,8125 0,8750 0,8750 0,6250 ĐT1 0,4375 0,5000 0,4375 0,6250 0,3125 0,5000 0,5000 0,8750 0,5000 0,8125 Hậu Giang 0,5000 0,5625 0,5000 0,5625 0,3750 0,5625 0,5625 0,9375 0,5625 0,8750 Hoàng Mai 0,5000 0,4375 0,3750 0,5625 0,5000 0,5625 0,6875 0,8125 0,6875 0,7500 Tàu Xí 0,5000 0,5625 0,5000 0,5625 0,3750 0,6875 0,6875 0,6875 0,6875 0,6250 Thanh Oai 1,0000 0,8125 0,7500 0,7500 1,0000 1,0000 0,9375 0,8125 0,8125 1,0000 0,8750 0,7500 1,0000 0,7500 1,0000 0,7500 0,8750 0,9375 0,8750 0,8750 0,8750 0,5000 0,8750 0,6875 0,6250 0,6250 0,8750 0,6250 0,7500 0,8125 0,7500 0,7500 0,7500 0,7500 0,6250 0,8125 0,8750 0,7500 0,6250 0,6250 0,6250 0,5625 0,6250 0,6250 0,6250 0,7500 0,6250 0,8125 0,8750 0,7500 0,6250 0,7500 0,4375 0,5625 0,6875 0,6875 0,6875 0,6875 0,7500 0,6250 0,5625 0,5000 0,5625 0,6250 0,6875 0,5625 0,5625 0,5625 0,6875 0,6875 0,3750 0,5000 0,5625 0,5000 0,5625 0,8125 0,5000 0,6250 0,6250 0,6250 0,6250 0,6250 0,5625 0,4375 0,5000 0,4375 0,6250 0,8750 0,5625 0,6875 0,6875 0,5625 0,6875 0,6875 0,6250 0,5000 0,5625 0,5000 0,5625 0,7500 0,5625 0,5625 0,5625 0,6875 0,5625 0,5625 0,6250 0,5000 0,4375 0,3750 0,5625 0,6250 0,6875 0,5625 0,5625 0,5625 0,6875 0,6875 0,3750 0,5000 0,5625 0,5000 0,5625 Thương Phẩm Thương Phẩm Tứ Quý Xanh 0,5000 0,5625 0,5000 0,5625 0,3750 0,6875 0,6875 0,6875 0,6875 0,6250 Tứ Quý Xanh Xanh Hà Bắc 1,0000 0,7500 1,0000 37 GC – 90001 – – 39 – GC – 90012 – 18 – 13 11 GC – 90013 – 21 – 15 10 Xanh Hà Bắc GC – 90001 – – 39 – GC – 90012 – 18 – 13 -11 GC – 90013 – 21 – 15 -10 GC – 90013 – 21 – 15 – IT 102668 IT 102730 IT 161797 IT 161972 IT 162042 IT 162049 PI 133226 PI 200542 PI 548659 PI 566956 PI 566973 0,8750 0,8750 1,0000 0,7500 0,7500 0,8750 1,0000 0,5000 0,7500 0,6250 0,7500 1,0000 0,7500 0,6250 0,7500 0,8750 0,6250 1,0000 0,7500 0,5625 0,5625 0,5625 0,6875 0,5625 0,5625 0,5000 0,3750 0,4375 0,3750 0,6875 0,6250 0,6875 0,5625 0,4375 0,5625 0,5625 0,5625 0,5000 0,6250 0,6875 0,6250 0,6875 0,7500 0,5625 0,5625 0,4375 0,6875 0,4375 0,4375 0,6250 0,5000 0,5625 0,5000 0,8125 0,8750 0,5625 0,6875 0,5625 0,5625 0,5625 0,5625 0,7500 0,6250 0,6875 0,6250 0,6875 0,6250 0,6875 0,6875 0,4375 0,4375 0,5625 0,5625 0,6250 0,7500 0,6875 0,7500 0,4375 1,0000 0,6875 0,8125 0,5625 0,5625 0,5625 0,5625 0,6250 0,5000 0,5625 0,5000 0,5625 GC – 90013 – 21 – 15 – IT 102668 GC – 90013 – 21 – 15 – IT 102668 IT 102730 IT 161797 IT 161972 IT 162042 IT 162049 PI 133226 PI 200542 PI 548659 PI 566956 PI 566973 1,0000 0,5625 0,6875 0,7500 0,6875 0,5000 0,4375 0,6250 0,6250 0,6250 0,5000 0,5625 1,0000 0,8750 0,8125 0,7500 0,8125 0,7500 0,5625 0,5625 0,6875 0,4375 0,6250 IT 162049 PI 133226 PI 200542 PI 548659 PI 566956 PI 566973 IT 162049 1,0000 0,6875 0,6875 0,4375 0,5625 0,3750 PI 133226 IT 102730 1,0000 0,9375 0,8750 0,6875 0,7500 0,6875 0,6875 0,5625 0,5625 0,5000 PI 200542 1,0000 0,8750 0,6250 0,7500 0,5625 38 1,0000 0,6250 0,8750 0,5625 IT 161797 1,0000 0,9375 0,7500 0,6875 0,7500 0,6250 0,6250 0,5000 0,5625 PI 548659 1,0000 0,6250 0,9375 IT 161972 1,0000 0,6875 0,6250 0,6875 0,5625 0,5625 0,4375 0,5000 PI 566956 1,0000 0,6875 IT 162042 1,0000 0,6875 0,6250 0,5000 0,6250 0,3750 0,5625 PI 566973 1,0000 ... tử Khóa luận tốt nghiệp Cử Nhân Cơng nghệ Sinh học Bộ môn Công nghệ Sinh học Đại học An giang Phạm Trường An 2010 Khảo sát gen đậu nành (Glycine max L Merrill) dấu chuẩn phân tử SSR Khóa luận tốt...TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN HỒ THỊ NGỌC HÀ KHẢO SÁT BỘ GEN CỦA TẬP ĐOÀN ĐẬU NÀNH (Glycine max L MERRIL) BẰNG DẤU CHUẨN PHÂN TỬ SSR ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA. .. (codominant), l? ?ợng DNA cần cho mẫu nhỏ, chất l? ?ợng DNA yêu cầu vừa phải, chi phí cho l? ??n phân tích thấp, khả cho đa hình cao 1.2 Mục tiêu Đề tài: ? ?Khảo sát gen 30 giống đậu nành (Glycine max L Merrill) dấu