Đánh giá khả năng kháng vi khuẩn edwardsiella ictaluru của 16 giống nghệ đen curcuama zedoaria roscoe trồng tại an giang

TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG KHÁNG VI KHUẨN EDWARDSIELLA ICTALURI CỦA 16 GIỐNG NGHỆ ĐEN (Curcuma zedoaria Roscoe) TRỒNG TẠI AN GIANG TRẦN KIM HOÀNG AN GIANG, THÁNG NĂM 2018 TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG KHÁNG VI KHUẨN EDWARDSIELLA ICTALURI CỦA 16 GIỐNG NGHỆ ĐEN (Curcuma zedoaria Roscoe) TRỒNG TẠI AN GIANG TRẦN KIM HOÀNG AN GIANG, THÁNG NĂM 2018 Đề tài nghiên cứu khoa học “Đánh giá khả kháng vi khuẩn Edwardsiella ictaluri 16 giống Nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe.)”, tác giả Trần Kim Hồng, cơng tác Khoa Nơng nghiệp TNTN thực Tác giả báo cáo kết nghiên cứu đƣợc Hội đồng Khoa học Đào tạo Trƣờng Đại học An Giang thông qua ngày 21/6/2018 Thƣ ký Phản biện Phản biện Chủ tịch Hội đồng i LỜI CẢM TẠ Xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu, Ban Chủ nhiệm Khoa Nơng nghiệp – TNTN, Phịng Quản lý Khoa học ĐTSĐH, Ban Quản lý Khu Thực hành Thí nghiệm anh chị, em đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình thực đề tài Xin gởi lời cảm ơn đến đồng nghiệp Bộ môn Cây trồng - ĐHAG : cô Huỳnh Trƣờng Huê, cô Võ Thị Xuân Tuyền cô Nguyễn Thị Thúy Diễm giúp đỡ tơi hồn thành đề tài Xin chân thành cảm ơn Ban Giám đốc Trung tâm Công nghệ Sinh học An Giang nhận ứng dụng kết nghiên cứu đề tài Gửi lời cảm ơn đến em sinh viên lớp DH15TS nhiệt tình hỗ trợ tơi thời gian thực nghiên cứu Trân trọng! Long Xuyên, ngày 12 tháng năm 2018 Ngƣời thực Trần Kim Hồng ii TĨM TẮT Edwardsiella ictaluri tác nhân gây bệnh gan thận mủ cho cá Tra (Pangasianodon hypophhalmus) Nghiên cứu đƣợc thực nhằm đánh giá hiệu kháng vi khuẩn Edwardsiella ictaluri 16 giống Nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe) phƣơng pháp kháng sinh đồ (phƣơng pháp Kirby-Bauer) Mƣời sáu giống Nghệ đen Curcuma zedoaria Roscoe hoang dại đƣợc thu thập từ Trung tâm Tài nguyên Thực vật, Hà Nội, Đà Lạt, Cần Thơ, An Giang Campuchia Sau đó, giống Nghệ đen đƣợc trồng Xã Mỹ Hòa, thành phố Long Xuyên, An Giang từ tháng 5/2016 – 2/2017 Vi khuẩn E ictaluri đƣợc phân lập từ mẫu cá bệnh gan thận mủ mội trƣờng Trypticase soya agar định danh test API 20E Kết nghiên cứu cho thấy khả ức chế E.ictaluri giống nghệ đen nồng độ 20 mg/ml Nhóm 1: khơng có khả ức chế vi khuẩn E.ictaluri: gồm giống: CZ – 5739, CZ – 11161, CZ – TB2, CZ – LX Nhóm 2: có khả ức chế vi khuẩn E.ictaluri với thể tích dịch Nghệ đen sử dụng 20µl: gồm giống : CZ–1150, CZ–1152, CZ–HN1, CZ–CT, CZ–CPC Đƣờng kính vịng kháng E.ictaluri trung bình giống 21,40 ± 3,86 mm Nhóm 3: Ức chế vi khuẩn E ictaluri hai mức thể tích dịch chiết 10 20µl Gồm giống: CZ–11154, CZ–HN2, CZ–ĐL, CZ–TT1, CZ–TB1, CZ–FGB436, CZ–TT2, với đƣờng kính vịng kháng khuẩn trung bình lần lƣợt 19,71 ± 3,31 mm 26,36 ± 3,89 mm Từ khóa: Edwardsiella ictaluri, Curcuma zedoaria Roscoe, phương pháp KirbyBauer iii ABSTRACT Edwardsiella ictaluri cause “white spot in the internal organs” (kidney, spleen, liver) for Tra fish (Pangasianodon hypophhalmus) and lead to economic losses The research aimed to investigate the anti-bacterial activity shown by the extracts prepared from sixteen turmeric varieties Sixteen wild turmeric varieties (Curcuma zedoaria Roscoe) were collected from Plant Resources Center, Hanoi, Da Lat, Can Tho, An Giang and Cambodia These varieties were cultivated in My Hoa ward, Long Xuyên city, An Giang province from 5/2016 to 2/2017 The presence of E ictacluri was investigated in samples of diseased Tra fish using Trypticase soya agar and Analytical Profile Index (API20E) The antibacterial activity of Curcuma zedoaria extracts on Edwardsiella ictaluri was evaluated by disk diffusion method (Kirby-Bauer method) Our results indicate a potent antibacterial action for sixteen C zedoaria varieties at concentration 20 mg/ml of extract: - Including varieties are CZ – 5739, CZ – 11161, CZ – TB2 and CZ – LX They had no antibacterial activities with volumes of 10 and 20 µl - Including varieties are CZ–1150, CZ–1152, CZ–HN1, CZ–CT, CZ–CPC They against Edwardsiella ictacluri with volumes of 20 µl, mean diameter of the zone of inhibition 21,40 ± 3,86 mm The diameter of the zone of inhibition - Including varieties are CZ–11154, CZ–HN2, CZ–ĐL, CZ–TT1, CZ–TB1, CZ– FGB436, CZ–TT2 They against Edwardsiella ictaluri with volumes of 10 and 20 µl extract, mean inhibited zone from 19,71 ± 3,31 mm to 26,36 ± 3,89 mm Keywords: Edwardsiella ictaluri, Curcuma zedoaria extract, Kirby-Bauer method iv LỜI CAM KẾT Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tơi Số liệu báo cáo hồn tồn trung thực, đƣợc thu thập từ q trình nghiên cứu Những kết luận khoa học cơng trình chƣa đƣợc cơng bố cơng trình nghiên cứu khác Long Xuyên, ngày 12 tháng năm 2018 Ngƣời thực Trần Kim Hoàng v MỤC LỤC Chấp nhận Hội đồng i Lời cảm tạ ii Tóm tắt iii Lời cam kết v Mục lục vi Danh sách bảng viii Danh sách hình ix Danh sách từ viết tắt x CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Tính cần thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Đối tƣợng nghiên cứu phạm vi nghiên cứu 1.4 Nội dung nghiên cứu 1.5 Những đóng góp đề tài Chƣơng TỔNG QUAN NHỮNG VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 Nguồn gốc phân bố 2.2 Công dụng 2.3 Thành phần hóa học 2.4 Giá trị mặt dƣợc liệu 2.5 Mô tả thực vật 2.6 Đặc điểm sinh thái , sinh trƣởng phát triển 2.7 Một số đặc điểm phân biệt Nghệ đen Nghệ rễ vàng 2.8 Bệnh gan thận mủ cá Tra 2.9 Vi khuẩn Edwardsiella ictaluri 10 2.10 Ứng dụng sử dụng thảo dƣợc điều trị bệnh cho động vật thủy sản 10 vi CHƢƠNG PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 3.1 Mẫu nghiên cứu 13 3.2 Thiết kế nghiên cứu 14 3.3 Xử lý số liệu 16 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 17 4.1 Kết phân lập vi khuẩn Edwardsiella ictaluri 17 4.1.1 Đặc điểm khuẩn lạc phân lập từ mẫu cá bệnh 17 4.1.2 Kết định danh 18 4.2 Thí nghiệm cảm nhiễm E ictaluri 19 4.3 Khả ức chế E ictaluri 16 giống Nghệ đen 23 4.3.1 Đặc điểm dịch chiết Nghệ đen 23 4.3.2 Khả ức chế E ictaluri 16 giống Nghệ đen 23 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 5.1 Kết luận 32 5.2 Kiến nghị 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 PHỤ CHƢƠNG 37 vii DANH SÁCH BẢNG Tên bảng Trang Bảng 1: Một vài đặc điểm hình thái lồi Nghệ đen Nghệ rễ vàng Bảng 2: Kí hiệu địa điểm giống nghệ đen đƣợc thu thập 13 Bảng 3: Đặc điểm sinh lý sinh hóa vi khuẩn phân lập đƣợc 18 Bảng 4: Đặc điểm sinh lý, sinh hóa E ictaluri phân lập từ nghiên cứu 22 Bảng 5: Đƣờng kính vịng kháng vi khuẩn E.ictaluri 16 giống Nghệ đen 24 Bảng 6: Hoạt tính kháng khuẩn số dƣợc liệu khác 26 Bảng 7: Đƣờng kính vịng kháng vi khuẩn E.ictaluri nhóm II 28 Bảng 8: Đƣờng kính vịng kháng vi khuẩn E.ictaluri nhóm III 29 viii Holt J.G., Krieg N.R., Sneath P.H.A., Staley J.T & Williams S.T (1994) Bergey’s Manual of deteminative Bacteriology, Ninth Editor, Williams and Wilkins, USA Huỳnh Kim Diệu (2010) Hoạt tính kháng vi khuẩn gây bệnh cá số thuốc nam Đồng Bằng Sông Cửu Long Tạp chí Khoa học 2010:15b, tr 222-229 Trường Đại học Cần Thơ Huỳnh Xuân Đào (2011) Nghiên cứu thành phần cấu tạo số hợp chất củ Nghệ đen huyện Vĩnh Thạnh, tỉnh Bình Định Luận văn thạc sĩ Đại Học Đà Nẵng Huỳnh Trường Huê (2017) Đánh giá tính đa dạng di truyền 16 mẫu giống Nghệ đen Curcuma zedoaria Roscoe trồng An Giang Đề tài nghiên cứu Khoa học cấp Trường Đại Học An Giang Lã Đình Mới, Lưu Đàm Cư, Trần Minh Hợi, Trần Huy Thái Ninh Khắc Bản (2002) Tài nguyên thực vật có dầu Việt Nam, tập II Nhà xuất Nơng Nghiệp Lê Đức Trình (2001) Sinh học phân tử tế bào NXB Khoa học Kỹ thuật Lê Duy Thành (2000) Cơ sở di truyền chọn giống thực vật NXB Khoa học Kỹ thuật Lê Quý Bảo (2004) Các cấu tử dễ bay thân rễ Nga truật (Curcuma zedoaria Roscoe) trồng tỉnh Nghệ An Hà Tĩnh Tạp chí Dược học 343, tr 9-11 Lý Thị Thanh Loan cs (2007) Bước đầu phát Clostridium sp cảm nhiễm cá tra (Pangasius hypophthalmus) nuôi ĐBSCL Việt Nam Trung tâm quốc gia quan trắc, cảnh báo mơi trường phịng ngừa dịch bệnh thủy sản khu vực Nam Viện nghiên cứu NTTS II Mau J.L., Eric Y.C.L., Nai-Phon Wang, Chien-Chou C., Chi-Huarng C., CharngCherng (2003) Composition and antioxidant activity of the essential oil from Curcuma zedoaria Food Chem 82, pp 583-591 Mohanty S., Panda M K., Acharya L & Nayak S (2014) Genetic diversity and gene differentiation among ten species of Zingiberaceae from Eastern India Biotech 4, pp.383–390 Nguyễn Thị Phúc Lộc (2010) Tối ưu hóa điều kiện ni cấy đánh giá khả kháng khuẩn tinh dầu tế bào Nghệ đen nuôi cấy hệ lên men 10 L Đồ án tốt nghiệp Đại học Huế Nguyễn Tiến Bân (1997) Danh mục loài thực vật Việt Nam NXB Nông nghiệp Hà Nội 34 Nguyễn Ngọc Phước cs (2010) Nghiên cứu sử dụng hợp chất từ trầu không để ức chế số vi khuẩn (Aeromonas hydrophila Vibrio parahaemolyticus) gây bệnh động vật thủy sản Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn, trang 42-52 Nguyễn Thị Bạch Mai (2010) Xây dựng qui trình kiểm tra kháng sinh đồ vi khuẩn gây bệnh gan thận mủ cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) điều kiện thực địa Khoa Thủy Sản, Đại học Nông lâm TP.HCM Phan Minh Giang, Văn Ngọc Hưng, Phan Tống Sơn (1997) “Đóng góp vào việc nghiên cứu sesquiterpenoid thân rễ Nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe)” Tạp chí Hóa học Cơng nghiệp hóa chất 4, tr 9-11 Phạm Thanh Hương cs (2010) Nghiên cứu kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn Edwardsiella ictaluri Aeromonas hydophila gây bệnh cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) Đồng sông Cửu Long Luận văn tốt nghiệp Cao học, Khoa Thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ Phạm Xuân Sinh (2004) Kỹ thuật chế biến bào chế thuốc cổ truyền NXB Y học Philip K., Malek S.N.A., Sani W., Shin S.K., Kumar S.A., Lai H.S., Serm L.G., Rahman S.N.S.A (2009) “Antimicrobial activity of some medicinal plants from Malaysia” American Journal of Applied Sciences 6(8), pp 1613-1617 Quách Văn Cao Thi (2014) Hiện trạng kháng thuốc kháng sinh hai loài vi khuẩn Edwardsiella ictaluri Aeromonas hydrophila gây bệnh cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) Đồng sơng Cửu Long Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ số chuyên đề: Thủy sản (2014)(2), tr 7-14 Rao B.S., Shintre V.P., Simonsen J.L (1928) Essential oil from rhizome of Curcuma zedoaria Rosc Soc Chem Ind 47, pp 171-172 Shotts, E.B., Blazer, VS., Waltman, W.D (1986) Pathogenesis of experimental Edwardsiella ictaluri in channel catfish (Ictalurus punctatus) Can J Fish Aquat Sci 43, pp 36-42 Shangliang et al (1990) The antibacterial and antiviral activity of herbal extracts for fish pathogens J Ocean University of Qingdao (20), pp.53-60 Tô Ngọc Châu (2014) Nghiên cứu nuôi cấy tế bào Nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe) khảo sát khả tích lũy số hợp chất có hoạt tính sinh học” Đại học Huế 35 Trần Thị Việt Hoa, Trần Thị Phương Thảo & Vũ Thị Thanh Tâm (2007) Thành phần hóa học tính kháng oxy hóa Nghệ đen Curcuma zedoaria Berg trồng Việt Nam Tạp chí phát triển KH&CN Tập 10, Số 04 Trần Thị Thanh Huyền, Nguyễn Thị Trung, Trương Nam Hải (2011) Phát vi khuẩn Edwardsiella ictaluri gây bệnh cá tra Việt nam kỹ thuật PCR (Polymerase chain reaction) Tạp chí Cơng nghệ sinh học 9(1), tr 169-177 Trịnh Thị Trang Nguyễn Thanh Hải (2016) Tác dụng ức chế vi khuẩn invitro caodi5ch chiết trầu không (Piper betle) vi khuẩn Aeromonas spp Streptococcus agalactiae gây bệnh xuất huyết cá rô phi Tạp chí KH Nơng nghiệp VN 2016, tập 14, số 6, tr 869-876 Từ Thanh Dung (2009) Phân lập vi khuẩn Edwardsiella ictaluri gây bệnh gan thận mủ cá tra Pangasianodon hypophthalmus Việt Nam Tạp chí Thủy sản 295 (1-4), tr 157-159 Đại học Cần Thơ Từ Thanh Dung (2010) Hiện trạng đa kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn Edwardsiella ictaluri gây bệnh gan thận mủ cá tra Pangasianodon hypophthalmus ĐBSCL Tạp chí Khoa học 2010 (15a), tr 162-171 Đại học Cần Thơ Wilson B., Abraham G., Manju V.S., Mathew M., Vimala B., Sundaresan S (2005) Antimicrobial activity of Curcuma Zedoaria and Curcuma Malabarica tubers Journal of Ethnopharmacology (99), pp 147–151 Võ Châu Tuấn (2014) Nghiên cứu nuôi cấy tế bào Nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe) khảo sát khả tích lũy số hợp chất có hoạt tính sinh học chúng Luận án tiến sĩ Trường Đại học Huế Võ Thị Xuân Tuyền (2018) Khảo sát đặc điểm nông học, hàm lượng curcumin 16 mẫu giống Nghệ đen Curcuma zedoaria Roscoe trồng An Giang Đề tài nghiên cứu Khoa học cấp Trường Đại Học An Giang Võ Văn Chi (2003) Tự điển Thực Vật Thông Dụng – tập NXB Khoa học Kỹ thuật Xingyi (1999) The chemical constituents of the essential oil from Curcuma zedoaria (Christm) Rosc Guang Zhiwu 19 (1), pp 95-96 36 PHỤ CHƢƠNG Phụ chƣơng 1: Đặc điểm hình thái củ giống Nghệ đen Giống Hình dạng củ Màu sắc vỏ củ Màu sắc thịt củ Mùi Vị CZ-5739 Củ to, phân nhánh Vàng nâu trung bình, củ nhánh dài, mắt củ thưa Vàng, tím viền Nồng Đắng 2.CZ-1150 Củ to, phân nhánh Vàng nâu nhiều, củ nhánh ngắn, mắt củ nhặt Vàng viền dương tươi, Nồng xanh Đắng 3.CZ-1152 Củ to, phân nhánh Vàng nâu trung bình, củ nhánh dài, mắt củ thưa Vàng, tím viền Rất nồng Rất đắng cay 4.CZ-11161 Củ to, phân nhánh Vàng nâu, Vàng, viền Rất trung bình, củ nhánh bóng xanh tím nồng dài, mắt củ thưa Đắng 5.CZ-11154 Củ to, phân nhánh Vàng nâu trung bình, củ nhánh dài, mắt củ thưa Vàng, viền Rất xanh tím nồng Đắng 6.CZ-HN1 Củ nhỏ, phân nhánh Vàng nâu nhiều, mắt củ nhặt Vàng tươi, Nồng viền xanh tím Đắng 7.CZ-HN2 Củ to, phân nhánh Vàng nâu, Vàng, viền Rất trung bình, củ nhánh bóng xanh tím nồng dài, mắt củ thưa Rất đắng CZ-ĐL Củ to, phân nhánh Vàng nâu, Vàng, viền Nồng trung bình, củ nhánh bóng xanh tím dài, mắt củ thưa Đắng CZ-TT1 Củ to, phân nhánh Vàng nâu, Vàng, viền Rất trung bình, củ nhánh bóng xanh tím nồng Rất cay 37 dài, mắt củ thưa đắng 10 CZ-TB1 Củ to, phân nhánh Vàng nâu, Vàng, viền Rất trung bình, củ nhánh bóng xanh tím nồng dài, mắt củ thưa Cay đắng 11 CZ-TB2 Củ nhỏ, phân nhánh Vàng nâu nhiều nhặt, củ nhánh dài, mắt nhặt Vàng đậm Nồng pha lẫn xanh tím Đắng 12 CZ-LX Củ nhỏ, phân nhánh Vàng nâu nhiều nhặt, mắt nhặt Vàng viền dương Ít đắng 13 CZFGB436 Củ to, củ nhánh Vàng nâu to, phân nhánh nhiều, mắt nhặt Vàng nhạt, Nồng viền tím rõ Đắng, chát 14 CZ-CT Củ to, củ nhánh Vàng nâu to, phân nhánh nhiều, mắt nhặt Vàng nhạt, Nồng viền tím rõ Đắng 15 CZ-TT2 Củ to, củ nhánh Vàng nâu to, phân nhánh nhiều, mắt nhặt Vàng nhạt, Nồng viền tím rõ Đắng, chát 16 CZ-CPC Củ to, củ nhánh Vàng nâu to, phân nhánh nhiều, mắt nhặt Vàng nhạt, Nồng viền tím rõ Đắng tươi Nồng xanh Nguồn: Võ Thị Xuân Tuyền (2018) 38 Phụ chƣơng 2: Hình dạng củ, màu sắc củ dịch chiết 16 giống Nghệ đen 5739(c) 1150 (c) 1152 (c) 11161 (c) (a): Dạng thân rễ (củ cái, củ nhánh) rễ (b): Phẫu diện cắt dọc cắt ngang củ thân rễ (c): Dịch chiết 39 11154 (c) HN1 (c) HN2 (c) ĐL(c) (a): Dạng thân rễ (củ cái, củ nhánh) rễ (b): Phẫu diện cắt dọc cắt ngang củ thân rễ (c): Dịch chiết 40 TT1(c) TB1(c) TB2(c) LX(c) (a): Dạng thân rễ (củ cái, củ nhánh) rễ (b): Phẫu diện cắt dọc cắt ngang củ thân rễ (c): Dịch chiết 41 FGB436(c) CT (c) TT2 (c) CPC(c) (a): Dạng thân rễ (củ cái, củ nhánh) rễ (b): Phẫu diện cắt dọc cắt ngang củ thân rễ (c): Dịch chiết 42 Phụ chƣơng 3: Đường kính vịng kháng vi khuẩn E.ictaluri 10.CZ-TB1 9.CZ-TT1 15.CZ-TT2 7.CZ-HN2 5.CZ-11154 6.CZ-HN1 13.CZ-FGB436 3.CZ-1152 8.CZ-ĐL 14.CZ-CT 43 Phụ chƣơng 4: Bảng thống kê mơ tả tỷ lệ cá chết thí nghiệm cảm nhiễm Ngày NT N Mean Std Std Error Deviation 95% Confidence Interval for Mean Lower Bound N1 N2 N3 N4 N5 N6 N7 N8 Upper Bound DC 2.0000 1.73205 1.00000 -2.3027 6.3027 DL 5.6667 2.30940 1.33333 -.0702 11.4035 Total 3.8333 2.71416 1.10805 9850 6.6817 DC 2.0000 1.73205 1.00000 -2.3027 6.3027 DL 8.0000 1.00000 57735 5.5159 10.4841 Total 5.0000 3.52136 1.43759 1.3046 8.6954 DC 2.6667 2.51661 1.45297 -3.5849 8.9183 DL 8.3333 1.52753 88192 4.5388 12.1279 Total 5.5000 3.61939 1.47761 1.7017 9.2983 DC 2.6667 2.51661 1.45297 -3.5849 8.9183 DL 16.0000 2.00000 1.15470 11.0317 20.9683 Total 9.3333 7.58068 3.09480 1.3779 17.2888 DC 2.6667 2.51661 1.45297 -3.5849 8.9183 DL 37.0000 4.00000 2.30940 27.0634 46.9366 Total 19.8333 19.04118 7.77353 -.1492 39.8158 DC 2.6667 2.51661 1.45297 -3.5849 8.9183 DL 78.3333 13.61372 7.85988 44.5150 112.1517 Total 40.5000 42.35918 17.29306 -3.9532 84.9532 DC 2.6667 2.51661 1.45297 -3.5849 8.9183 DL 94.6667 9.23760 5.33333 71.7192 117.6141 Total 48.6667 50.75300 20.71982 -4.5953 101.9287 DC 2.6667 2.51661 1.45297 -3.5849 8.9183 DL 96.6667 5.77350 3.33333 82.3245 111.0088 Total 49.6667 51.63978 21.08185 -4.5260 103.8593 44 Phụ chƣơng 5: ANOVA tỷ lệ cá chết thí nghiệm cảm nhiễm Sum of Squares N1 N2 N4 20.167 20.167 Within Groups 16.667 4.167 Total 36.833 Between Groups 54.000 54.000 8.000 2.000 Total 62.000 Between Groups 48.167 48.167 Within Groups 17.333 4.333 Total 65.500 266.667 266.667 20.667 5.167 287.333 1768.167 1768.167 44.667 11.167 Total 1812.833 Between Groups 8588.167 8588.167 383.333 95.833 8971.500 12696.000 12696.000 183.333 45.833 Total 12879.333 Between Groups 13254.000 13254.000 79.333 19.833 13333.333 Between Groups Within Groups Total N5 Between Groups Within Groups N6 Within Groups Total N7 Between Groups Within Groups N8 Mean Square Between Groups Within Groups N3 df Within Groups Total 45 F Sig 4.840 093 27.000 007 11.115 029 51.613 002 158.343 000 89.616 001 277.004 000 668.269 000 Phụ chƣơng 6: Thống kê mơ tả đường kính vịng kháng E.ictacluri 16 giơng Nghệ đen N v10 v20 Mean 95% Confidence Interval for Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound 0000 00000 00000 0000 0000 2 0000 00000 00000 0000 0000 0000 00000 00000 0000 0000 0000 00000 00000 0000 0000 20.0000 00000 00000 20.0000 20.0000 0000 00000 00000 0000 0000 18.5000 2.12132 1.50000 -.5593 37.5593 14.0000 00000 00000 14.0000 14.0000 22.0000 00000 00000 22.0000 22.0000 10 25.0000 00000 00000 25.0000 25.0000 11 0000 00000 00000 0000 0000 12 0000 00000 00000 0000 0000 13 20.0000 00000 00000 20.0000 20.0000 14 0000 00000 00000 0000 0000 15 18.5000 70711 50000 12.1469 24.8531 16 0000 00000 00000 0000 0000 Total 32 8.6250 10.16556 1.79703 4.9599 12.2901 0000 00000 00000 0000 0000 2 16.5000 2.12132 1.50000 -2.5593 35.5593 24.5000 2.12132 1.50000 5.4407 43.5593 0000 00000 00000 0000 0000 25.5000 70711 50000 19.1469 31.8531 26.0000 00000 00000 26.0000 26.0000 29.0000 1.41421 1.00000 16.2938 41.7062 20.0000 00000 00000 20.0000 20.0000 29.0000 4.24264 3.00000 -9.1186 67.1186 10 30.0000 00000 00000 30.0000 30.0000 11 0000 00000 00000 0000 0000 12 0000 00000 00000 0000 0000 13 22.5000 70711 50000 16.1469 28.8531 14 20.0000 00000 00000 20.0000 20.0000 15 28.5000 70711 50000 22.1469 34.8531 16 20.0000 2.82843 2.00000 -5.4124 45.4124 Total 32 18.2188 11.38118 2.01193 14.1154 22.3221 46 Phụ chƣơng 7: ANOVA đường kính vịng kháng E.ictacluri 16 giơng Nghệ đen Sum of Squares v10 Between Groups Mean Square F 3198.500 15 213.233 5.000 16 312 Total 3203.500 31 Between Groups 3976.969 15 265.131 38.500 16 2.406 4015.469 31 Within Groups v20 df Within Groups Total Sig 682.347 000 110.184 000 Phụ chƣơng 8: DUCAN đường kính vịng kháng E.ictacluri 16 giơng Nghệ đen (V=10 µl) Subset for alpha = 0.05 giong N 0000 2 0000 0000 0000 0000 11 0000 12 0000 14 0000 16 0000 18.5000 15 18.5000 20.0000 13 20.0000 10 Sig 14.0000 22.0000 25.0000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed 47 1.000 1.000 1.000 Phụ chƣơng 9: DUCAN đường kính vịng kháng E.ictacluri 16 giơng Nghệ đen (V=20 µl) Subset for alpha = 0.05 giong N 0000 0000 11 0000 12 0000 2 16.5000 20.0000 20.0000 14 20.0000 20.0000 16 20.0000 20.0000 13 24.5000 25.5000 25.5000 26.0000 26.0000 15 28.5000 28.5000 29.0000 29.0000 29.0000 29.0000 10 Sig 22.5000 22.5000 30.0000 1.000 053 157 Means for groups in homogeneous subsets are displayed 48 053 057 387 ... HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP & TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG KHÁNG VI KHUẨN EDWARDSIELLA ICTALURI CỦA 16 GIỐNG NGHỆ ĐEN (Curcuma zedoaria Roscoe) TRỒNG TẠI AN GIANG TRẦN KIM HOÀNG AN. .. (Curcuma zedoaria Roscoe) were collected from Plant Resources Center, Hanoi, Da Lat, Can Tho, An Giang and Cambodia These varieties were cultivated in My Hoa ward, Long Xuyên city, An Giang province... Lạt, Cần Thơ, An Giang Campuchia Sau đó, giống Nghệ đen đƣợc trồng Xã Mỹ Hòa, thành phố Long Xuyên, An Giang từ tháng 5/2 016 – 2/2017 Vi khuẩn E ictaluri đƣợc phân lập từ mẫu cá bệnh gan thận mủ