Tối ưu hóa môi trường sinh tổng hợp enzyme cellulase từ nấm mốc trichoderma koningii và tinh sạch bằng sắc ký lọc gel

LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tơi hướng dẫn khoa học Ths Trần Thị Tưởng An Đồ án tiến hành thực hoàn thành Trường ĐH Bách Khoa TP.HCM Các nội dung nghiên cứu, kết đề tài trung thực chưa cơng bố hình thức trước Cam đoan không chép đồ án tốt nghiệp hình thức Những số liệu bảng biểu phục vụ cho việc phân tích, nhận xét, đánh giá tác giả thu thập từ nguồn khác có ghi rõ phần tài liệu tham khảo Ngồi ra, đồ án cịn sử dụng số nhận xét, đánh số liệu tác giải khác, quan tổ chức khác có trích dẫn thích nguồn gốc Nếu có phát gian lận tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm đồ án Trường ĐH Cơng nghệ TP.HCM khơng liên quan đến vi phạm tác quyền, quyền tơi gây q trình thực (nếu có) TP Hồ Chí Minh, ngày 20 tháng năm 2015 Trương Thị Thái Hảo LỜI CẢM ƠN Lời người thực đề tài xin cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại học Cơng Nghệ Tp.Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học- Thực phẩm- Môi trường tạo điều kiện cho thực khóa luận Tơi xin cảm ơn tồn thể thầy cô Bộ môn Công Nghệ Sinh Học truyền đạt kiến thức kỹ chuyên sâu để em hồn thành khóa luận Ngồi ra, suốt khoảng thời gian làm khóa luận tốt nghiệp phịng thí nghiệm Năng Lượng Sinh Học – Đại học Bách Khoa Tp.Hồ Chí Minh Tơi xin chân thành gửi lời cảm ơn đến: Th.S Trần Thị Tưởng An, trường Đại học Bách Khoa Tp.Hồ Chí Minh Cơ ln ln theo sát, tận tình bảo, truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm chuyên môn, hướng dẫn, động viên tơi suốt q trình tơi thực đề tài Tôi xin gửi lời cảm ơn đến TS Nguyễn Đình Quân anh, chị, bạn làm việc phịng thí nghiệm nhiệt tình hỗ trợ suốt thời gian làm việc Cảm ơn bố mẹ, người luôn bên cạnh động viên tinh thần lúc cảm thấy khó khăn, trắc trở Cuối cùng, cảm ơn bạn Trân, bạn Phương – người bạn bên cạnh giúp đỡ việc Đồ án Tốt nghiệp MỤC LỤC NH M TỪ VI T TẮT iii DANH M BẢNG iv HƢƠNG MỞ ĐẦU vi Tính cấp thiết đề tài 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Tầm quan trọng 1.3 Ý nghĩa đề tài .3 1.4 Lý chọn đề tài Tình hình nghiên cứu Mục đích nghiên cứu .5 Nhiệm vụ nghiên cứu 5 Phƣơng pháp nghiên cứu ác kết đạt đƣợc đề tài 6 Kết cấu đồ án tốt nghiệp .7 hƣơng I: Tổng quan tài liệu HƢƠNG 1: TỔNG QU N TÀI LIỆU .8 1.1 BIOETHANOL .8 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Phân biệt Bioethanol Ethanol .8 1.1.3 Tình hình sản xuất Bioethanol 1.1.4 Ƣu nhƣợc điểm bioethanol 12 1.1.5 Ứng dụng Bioethanol 13 1.1.6 Bioethanol hệ Bioethanol 15 1.2 NGUYÊN LIỆU 20 1.2.1 Vỏ chuối 20 1.2.2 Sản xuất Bioethanol từ nguyên liệu vỏ chuối 24 1.2.3 Nấm men tham gia trình lên men rƣợu .29 I Đồ án Tốt nghiệp 1.24 Một số cơng trình nghiên cứu bioethanol từ fruit waste giới: 30 1.2.5 Tình hình nghiên cứu sản xuất bioethanol từ vỏ chuối 33 HƢƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PH P 33 2.1 Thời gian địa điểm thực phƣơng pháp 34 2.2 Đối thƣợng nghiên cứu 34 2.3 Hóa chất .34 2.4 Phƣơng pháp 36 2.4.1 Bố trí thí nghiệm 36 2.4.2 Tiến trình thực .37 HƢƠNG 3: K T QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 51 3.1 Thành phần hóa học nguyên liệu vỏ chuối 51 3.2 Kết khảo sát giá trị dinh dƣỡng thành phần hóa học vỏ chuối 52 3.3 Kết khảo sát thủy phân lên men đồng thời .54 3.4 Quan sát hình thái nấm men 60 HƢƠNG 4: K T LUẬN VÀ KI N NGH 70 4.1 Kết luận 70 4.1.1 Quá trình tiền x lý .70 4.1.2 Quá trình thủy phân .70 4.1.3 Quá trình lên men 70 4.2 Kiến nghị 71 II Đồ án Tốt nghiệp N MỤ Ắ Cfu colony forming unit DNS Acid 3,5- dinitrosalicylic EtOH Ethanol đv Đơn vị HPLC High-performance liquid chromatography MeOH Methanol PL Phụ lục PNV Petro Vietnam S cerevisiae Saccharomyces cerevisiae SHF Separate hydrolysis and fermentation SSF Simulneous saccharification and fermention SSCF Simultaneous Saccharification and Co-Fermentation SDA Sabouraud’s extrose gar SDB Sabouraud’s extrose Broth TXL Tiền x lý h III Đồ án Tốt nghiệp BẢNG DANH MỤ Bảng 1.1: Tình hình sản xuất Bioethanol số nƣớc giới: Bảng 1.2: Một số nhà máy sản xuất bioethanol Việt Nam Bảng 1.3: Thành phần ellulose, Hemicellulose Lignin sinh khối Bảng 1.4: Thành phần Lignocellulose rác thải phụ phế liệu nông nghiệp phổ biến Bảng 1.5 : Thành phần dinh dƣỡng chuối Bảng 1.6: Thành phần hóa học vỏ chuối Bảng 1.7: Tình hình sản xuất xuất chuối giới : Bảng 1.8: Sản lƣợng chuối năm nƣớc giới Bảng 1.9: Một số phƣơng pháp tiền x lý hóa chất đƣợc trình bày bảng Bảng 1.10: ác trình lên men Bảng 1.11: Một số cơng trình nghiên cứu bioethanol từ phụ phẩm trái giới Bảng 1.12: Tình hình nghiên cứu sản xuất bioethanol từ vỏ chuối Bảng 2.1: Tiền x lý tác chất, t lệ nguyên liệu 1:15 Bảng 2.2: Nội dung 2: Khảo sát nhiệt độ lên men Bảng 2.3: Nội dung 3: Khảo sát dinh dƣỡng bổ sung (Glucose) trình lên men SSF Bảng 2.4: Nội dung 4: Khảo sát dinh dƣỡng bổ sung (Peptone) trình lên men SSF Bảng 2.5: Nội dung 5: Khảo sát dinh dƣỡng bổ sung (Mn2SO4)trong trình lên men SSF Bảng 2.6: Nội dung 6: Khảo sát dinh dƣỡng bổ sung (K2HPO4)trong trình lên men SSF Bảng 2.7: Bổ sung tỷ lệ enzyme catalase Bảng 2.8: Bổ sung tỷ lệ giống Bảng 2.9: Khảo sát nuôi lắc IV Đồ án Tốt nghiệp Bảng 3.1: Độ ẩm vỏ chuối sấy mẫu 700 , thời gian 48 Bảng 3.2 Kết khảo sát giá trị dinh dƣỡng thành phần hóa học vỏ chuối Bảng 3.4: Kết TXL vỏ chuối với acid acetic H2SO4 Bảng 3.3: Khảo sát ảnh hƣởng nhiệt độ trình lên men SSF V Đồ án Tốt nghiệp ÌN DANH MỤ Hình 1.1: ấu trúc phân t Ethanol Hình1.2: ấu trúc sinh khối lignocellulose Hình1.3: ấu trúc phân t cellulose Hình 3.1: Hàm lƣợng Glucose biến đổi theo thời gian lên men SHF Hình 3.2: Hàm lƣợng Cellulose biến đổi theo thời gian lên men SHF Hình 3.3: Độ cồn khảo sát thời gian thủy phân lên men đồng thời Hình 3.4: Biến đổi hàm lƣợng Glucose theo thời gian lên men SHF Hình 3.5: Biến đổi hàm lƣợng Cellulose theo thời gian lên men SHF Hình 3.6: Biến đổi độ cồn khảo sát thời gian thủy phân lên men đồng thời SSF Hình 3.7 Đặc điểm hình thái Saccharomyces cerevisiae Hình 3.8: Tế bào S.cerevisiae Hình 3.9: Đƣờng cong sinh trƣởng S.cerevisiae Hình 3.10 (a): Biến đổi mật độ tế bào theo nhiệt độ lên men SSF Hình 3.10(b): Thay đổi hàm lƣợng hóa học theo nhiệt độ SSF Hình 3.10(c): Biến đổi hàm lƣợng cồn theo nhiệt độ lên men SSF Hình 3.11(a): Biến đổi mật độ tế bào theo bổ sung nồng độ Glucose lên men SSF Hình 3.11(b): Thay đổi hàm lƣợng hóa học theo bổ sung nồng độ Glucose SSF Hình 3.11(c): Biến đổi hàm lƣợng cồn theo bổ sung nồng độ Glucose lên men SSF Hình 3.12(a): Biến đổi mật độ tế bào theo bổ sung nồng độ Peptone lên men SSF Hình 3.12(b): Thay đổi hàm lƣợng hóa học theo bổ sung nồng độ Peptone SSF Hình 3.12 (c): Biến đổi hàm lƣợng cồn theo bổ sung nồng độ Peptone lên men SSF Hình 3.13(a): Biến đổi mật độ tế bào theo tỷ lệ cấy giống lên men SSF Hình 3.13(b): Thay đổi hàm lƣợng hóa học theo tỷ lệ cấy giống SSF Hình 3.13(c): Biến đổi hàm lƣợng cồn theo tỷ lệ cấy giống lên men SSF Hình 3.14(a): Biến đổi mật độ tế bào theo bổ sung nồng độ Peptone lên men SSF Hình 3.14(b):Biến đổi thành phần hóa học theo tỷ lệ cấy giống lên men SSFHình 3.14(c): Biến đổi độ cồn theo tỷ lệ cấy giống lên men SSF VI Đồ án Tốt nghiệp ÌN DANH MỤ Sơ đồ 1: Qúa trình sản xuất Bioethanol từ nguồn Lignocellulose Sơ đồ 2: Quy trình sản xuất nguồn lignocllulose từ nguyên liệu vỏ chuối VII Đồ án Tốt nghiệp ƢƠNG MỞ ĐẦU ính cấp thiết đề tài 1.1 Đặt vấn đề Ngày giới đứng trƣớc nguy khủng hoảng lƣợng trầm trọng cấu tiêu thụ lƣợng giới khác nhóm nƣớc Mức tiêu thụ lƣợng đƣợc coi ch tiêu đánh giá trình độ phát triển kinh tế nƣớc ác nƣớc kinh tế phát triển tiêu thụ tới n a tổng số lƣợng đƣợc sản xuất giới Trong đó, nƣớc phát triển với diện tích lớn, dân số đơng, nhƣng ch tiêu thụ khoảng 1/3 Mặc dù năm tới, cấu tiêu thụ lƣợng nhóm nƣớc có thay đổi, nhƣng khơng đáng kể Nguồn lƣợng chủ yếu ngày từ nguồn dầu mỏ khí đốt ầu mỏ khí đốt chiếm 60- 80% nguồn lƣợng giới Theo dự báo nhà khoa học giới, với tốc độ tiêu thụ nhƣ trừ lƣợng dầu mỏ có, nguồn lƣợng bị cạn kiệt vòng 40- 50 năm Để ổn định đảm bảo an ninh lƣợng đáp ứng cho nhu cầu ngƣời nhƣ ngành công nghiệp, nhà khoa học tập trung nghiên cứu tìm nguồn nhiên liệu mới, nghiên cứu phát triển nhiên liệu sinh học có nguồn gốc từ sinh khối động, thực vật hƣớng tạo nguồn nhiên liệu thay phần nguồn nhiên liệu hóa thach, dầu mỏ khí đốt dần bị cạn kiệt [1] [2] Bên cạnh nguy cạn kiệt lƣợng, nhóm nƣớc nói riêng giới nói chung cịn phai đối mặt với nguy ô nhiễm môi trƣờng, với việc s dụng nguồn lƣợng hóa thạch, khí đốt dầu mỏ thải lƣợng lớn khí nhà kính việc đốt nhiên liệu, gây ô nhiễm môi trƣờng, ngồi cịn làm trái đất nóng lên, kéo theo thiên tai, thiệt hại ngƣời Đồ án Tốt nghiệp Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Homogeneous Count Mean Groups Col_2 57,299 X Col_4 58,1863 XX Col_1 62,8967 X Col_3 68,1773 X 5.1.3 Nồng độ cồn theo nhiệt độ lên men SSF ANOVA Table Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0,756667 0,252222 0,08 0,01 0,836667 11 Within groups Total (Corr.) Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD 62 25,22 0,0002 Đồ án Tốt nghiệp Homogeneous Count Mean Groups Col_2 3,4 X Col_4 3,53333 X Col_1 3,73333 X Col_3 4,06667 X 5.1.4 Mật độ vi sinh theo nhiệt độ lên men SSF ANOVA Table Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3,59138 1,19713 0,240443 0,0300554 3,83182 11 Within groups Total (Corr.) Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Homogeneous Count Mean Groups Col_1 7,408 X Col_4 7,53833 X Col_2 7,61833 X Col_3 8,773 63 X 39,83 Đồ án Tốt nghiệp 5.2 ẢNH HƯƠNG CỦA TỶ LỆ GIỐNG ĐẾN QUÁ TRÌNH LÊN MEN SSF 5.2.1 Hàm lượng đường theo tỷ lệ giống ANOVA Table Sum of Source Mean Squares Df Square Between groups 117,341 39,1136 Within groups 6,49247 0,811559 Total (Corr.) 123,833 11 F-Ratio P-Value 48,2 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Homogeneous Count Mean Groups Col_3 58,672 X Col_4 59,7583 X Col_2 63,752 X Col_1 66,478 X 5.2.2 Hàm lượng Cellulose theo tỷ lệ giống ANOVA Table Sum of Source Squares Mean Df Square Between groups 69,1904 23,0635 Within groups 4,27282 0,534102 Total (Corr.) 73,4632 11 64 F-Ratio 43,18 P-Value Đồ án Tốt nghiệp Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Homogeneous Count Mean Groups Col_4 49,0407 X Col_3 51,2023 X Col_2 51,6257 X Col_1 X 55,685 5.2.3 Nồng độ cồn theo tỷ lệ giống ANOVA Table Source Sum of Squares Between groups Df Mean Square 0,5 0,166667 Within groups 0,04 0,005 Total (Corr.) 0,54 11 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Homogeneous Count Mean Groups Col_3 4,1667 X Col_4 4,2667 X Col_1 4,4667 65 X F-Ratio 33,33 P-Value 0,0001 Đồ án Tốt nghiệp Col_2 4,7 X 5.2.4 Mật độ vi sinh theo tỷ lệ giống ANOVA Table Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value 57,11 Between groups Within groups Total (Corr.) 2,7482 0,916066 0,128323 0,0160404 2,87652 11 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Homogeneous Count Mean Groups Col_4 Col_3 7,00767 XX Col_1 7,24433 X Col_2 X 5.3 6,835 X 8,082 ẢNH HƯỞNG CỦA TỶ LỆ ENZYME ĐẾN QUÁ TRÌNH LÊN MEN SSF 5.3.1 Hàm lượng đường theo tỷ lệ Enzyme ANOVA Table Source Between groups Sum of Squares Df 66,5195 Mean Square 66 22,1732 F-Ratio 50,67 P-Value Đồ án Tốt nghiệp Within groups 3,50107 Total (Corr.) 70,0206 11 0,437634 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Homogeneous Count Mean Groups Col_4 51,442 X Col_1 51,738 X Col_2 56,063 X Col_3 56,505 X 5.3.2 Hàm lượng Cellulose theo tỷ lệ enzyme ANOVA Table Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value 5,66 0,0223 Between groups 30,2913 10,0971 14,2757 1,78447 44,567 11 Within groups Total (Corr.) 67 Đồ án Tốt nghiệp Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Homogeneous Count Mean Groups Col_2 47,5563 X Col_4 50,789 X Col_3 50,8113 X Col_1 X 51,746 5.3.3 Nồng độ cồn theo tỷ lệ Ezyme ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between 58,8075 19,6025 7,7124 0,96405 groups Total (Corr.) 66,5199 11 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean P-Value 20,33 0,0004 Square groups Within F-Ratio Homogeneous Groups 68 Đồ án Tốt nghiệp Col_ 50,838 X Col_ 51,442 X Col_ 51,738 X Col_ 56,396 X 5.3.4 Mật độ vi sinh theo tỷ lệ Ezyme ANOVA Table Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1,58 0,526667 0,0666667 0,00833333 1,64667 11 Within groups Total (Corr.) Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Homogeneous Count Mean Groups Col_4 4,83333 X Col_1 5,13333 X 69 63,2 Đồ án Tốt nghiệp Col_3 5,26667 X Col_2 5,83333 X 5.4 ẢNH HƯƠNG CỦA GLUCOSE ĐẾN QUÁ TRÌNH LÊN MEN SSF 5.4.1 Hàm lượng đuuờng theo tỷ lệ Glucose bổ sung ANOVA Table Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 200,043 66,6809 2,62987 0,328734 202,673 11 Within groups Total (Corr.) Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Homogeneous Count Mean Groups Col_1 46,3013 X Col_2 49,9177 X Col_3 50,656 X Col_4 57,5853 X 5.4.2 Hàm lượng Cellulose theo tỷ lệ Glucose bổ sung 70 202,84 Đồ án Tốt nghiệp ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F- P- Ratio Value Between groups 628,01 209,337 299,11 groups 5,59896 0,69987 Total (Corr.) 633,609 11 Within Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Col_3 35,8 X Col_4 37,729 X Col_2 48,301 X Col_1 53,193 X 5.4.3 Nồng độ cồn sinh tye lệ Glucose bổ sung ANOVATable Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups Within groups Total (Corr.) 1,08 0,36 0,1 0,0125 1,18 11 71 28,8 0,0001 Đồ án Tốt nghiệp Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Col_1 4,23333 X Col_2 4,43333 X Col_3 4,7 X Col_4 5,03333 X 5.4.4 Mật độ vi sinh theo tỷ lệ Glucose bổ sung ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3,10745 1,03582 0,291177 0,0363971 3,39862 11 28,46 Within groups Total (Corr.) Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Col_1 7,508 X Col_2 7,605 X Col_3 7,71833 X Col_4 8,773 72 X 0,0001 Đồ án Tốt nghiệp TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt [1] Huỳnh Ngọc Vi (2008) Nghiên cứu sản xuất ethanol từ bã khoai mì, Luận văn tốt nghiệp đại học, khoa Kĩ thuật Hóa học, đại học Bách Khoa, Tp Hồ Chí Minh [2] Nguyễn Thị Hằng Nga (2009), Nghiên cứu khả sản xuất bioethanol sinh học từ phụ phẩm nông nghiệp Luận văn thạc sĩ, ĐH Khoa Học Tự Nhiên Tp HCM, Việt Nam [3] Nguyễn Thị Ngọc Bích (2003) Kỹ thuật cellulose giấy, NXB đại học quốc gia Tp Hồ Chí Minh [4] Nguyễn Văn Mùi (2007), Thực hành hóa sinh học, nhà xuất Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội [5] Trần Diệu Lý (2008), Nghiên cứu sản xuất ethanol từ rơm rạ Luận văn tốt nghiệp Kỹ sư hóa học, ĐH Bách Khoa Tp HCM, Việt Nam [6] Võ Thị Thúy Huệ (2013), Nghiên cứu sản xuất Ethanol sinh học từ vỏ ca cao, Nghiên cứu khao học, đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Tài liệu tiếng nước [7] Karhumaa K, W.B, Hahn-Hagerdal B, Boles E, Gorwa-Grauslund MF, Coutilization of L-arabinose and D-xylose by laboratory and industrial Saccharomyces cerevisiae strains Microb Cell Fact, 2006, 5:18 [8] Karimi, Pretreatment of Lignocellulosic Wastes to Improve Ethanol and Biogas Production from International Journal of Molecular Sciences, 2008, 9, 1621-1651 Lynd LR, v.Z.W, McBride JE, Laser M Consolidated bioprocessing of cellulosic biomass: an update Curr Opin Biotechnol, 2005, 16, 577-583 [9] Mehdi Dashtban, H.S, Wensheng Qin Fungal Bioconversion of Lignocellulosic Residues Opportunities & Perspectives from International Journal of Biological Sciences, 2009, 5(6), 578-595 [10] Nicolas August Otto, F.O Licht, 2006 70 Đồ án Tốt nghiệp [11] Monisha Jaishankar et al.Biosorption of Few Heavy Metal lons Using Agricultural Wastes.Journal ò Eviroment Pollution anh Human Health, 2014, Vol.2, No 1, 1-6.doi:10.12691/jephh-2-1-1 [12] Parveen Kumar, D.M.B, Michael J Delwiche, and Pieter Stroeve Industrial & Engineering Chemistry Research Methods for Pretreatment of Lignocellulosic Biomass for Efficient Hydrolysis and Biofuel Production, 2009, 48(8), 3713–3729 R Arumugam & M.Manikandan Production of ethanol from mango (Mangifera indica L.) peel by Saccharomyces cerevisiae, 2011, vol10(20), 712-749 Rashmi Kataria, Sanjoy Ghosh (2011), “Saccharification of Kans grass using enzyme mixture from Trichoderma reesei for bioethanol production”, Bioresource Technology, 102(2011), p.9970–9975 [14] Sánchez et al (2014) “Fruit residue to ethanol,” Bio Resources 9(2), 18731885 [15] Sun, Y., Cheng, J (2002), “Hydrolysis of lignocellulosic materials for ethanol production: a review”, Bioresour Technol., 83, p.1–11 Tài liệu Internet [17] Tổng quan nhiên liệu sinh học, https://www.pvoil.com.vn/vi-VN/pvoil/chinhsach-chien-luoc/tong-quan-ve-nhien-lieu-sinh-hoc/281/639, truy cập ngày 1/10/2013 [18] Tình hình ngiên cứu sản xuất nhiên liệu sinh học giới Việt Nam, http://thegioidaunhon.vn/vn/detail/news/tinh-hinh-nghien-cuu-va-san-xuat-nhienlieu-sinh-hoc-tren-the-gioi-va-viet-nam/1265, truy cập ngày 5/10/2013.[31] [19] Các nhà máy ethanol việt nam, http://dayvahoc.blogspot.com/2013/09/cac-nhamay-ethanol-viet-nam.html, truy cập ngày 5/10/2013 [20] http://www.rauhoaquavietnam.vn/default.aspx?ID=46&LangID=1&tabID=5&News ID=2202, truy cập ngày 5/10/2013 [21] Thị trường chuối giới, 71 Đồ án Tốt nghiệp http://www.rauhoaquavn.vn/default.aspx?ID=49&LangID=1&tabID=5&NewsID=4 89, truy cập ngày 5/10/2013 [22] http://luanvan.net.vn/luan-van/de-tai-nghien-cuu-san-xuat-nectar-chuoi37922/,truy cập ngày 5/10/2013 [23] Vì nhiên liệu sinh học chưa quan tâm nước ta, http://tailieu.vn/viewdocument/vi-sao-nhien-lieu-sinh-hoc-chua-duoc-quan-tam-onuocta.14940.html?lang=en, 2007, truy cập ngày 2/10/2013 [24] Phát triển nhiên liệu sinh học nước ta, http://www.secoin.vn/PortletBlank.aspx/3D2C3B098A0545E9AB7A8049C2D29A DA/View/Biodiesel_Bioethanol/PHAT_TRIEN_NHIEN_LIEU_SINH_HOC/?print =1750327308, truy cập ngày 2/10/2013 [23] http://luanvan.net.vn/luan-van/do-an-tong-hop-bio-ethanol-de-pha-che-xang- sinh-hoc-37961/, truy cập ngày 3/10/2013 [24] Tình hình sản xuất tiêu thụ Ethanol giới, http://www.asiacreative.vn/tinh-hinh-san-xuat-va-tieu-thu-ethanol-tren-the-gioi/ truy cập ngày 18/12/2013 [25] http://hoahocngaynay.com/vi/hoa-hoc-hien-dai/nhien-lieu-sinh-hoc/429-nhienlieu-sinh-hoc-hien-trang-san-xuat-va-su-dung-phan2.htmL [26] Luận văn phân tích ưu nhược điểm xăng sinh học, 2014 http://luanvan.net.vn/luan-van/de-tai-phan-tich-cac-uunhuoc-diem-khi-su-dungxang-sinh-hoc-thay-the-cho-cac-nhien-lieu-truyen-thong-o-viet-nam-47716/ [27] https://vi.wikipedia.org/wiki/Saccharomyces_cerevisiae [28] https://vi.wikipedia.org/wiki/%C3%8Atanol#L.E1.BB.8Bch_s.E1.BB.AD [29] http://www.doanhnhansaigon.vn/khoi-nghiep/san-xuat-ethanol-giai-cuu-cay- cacao/1087992/ [30] http://doc.edu.vn/tai-lieu/de-tai-san-xuat-ethanol-tu-nguyen-lieu-biomass- 53114/ 72 Đồ án Tốt nghiệp [31] http://123doc.org/document/207316-nghien-cuu-tong-quan-kha-nang-san-xuatva-su-dung-ethanol-lam-nhien-lieu-cho-dong-co.htm Songklanakarin J Sci Technol 31 (6), 605-611, Nov - Dec 2009 [32] https://www.google.com/search?q=lignin+in+banana+peels&oq=lignin+b%C3%A2 nna&aqs=chrome.2.69i57j0l4.14223j0j4&sourceid=chrome&es_sm=93&ie=UTF-8 [33] Ethanol production from Potato peel waste (PPW) www.elsevier.com/locate/wasman 73 ...  Giống nhau: - ơng thức hóa học: C6H12O6 Cấu trúc phân t ác tính chất hóa lý…  Khác nhau:  Ethanol: Tổng hợp đƣờng hóa học  Bioethanol: Là Ethanol tổng hợp đƣờng sinh học 1.1.3 Tình hình...  Phƣơng pháp sinh học: - Enzyme: Enzyme Visscozym cassava , enzyme hỗn hợp Sanferm yield từ công ty Brenntag ( 202 Hoàn Văn Thụ, P9, Q Phú Nhuận, Tp.H M) - Nấm men: S dụng giống nấm men chịu... 2.4.2.2 Ph ng pháp vi sinh a) Khảo sát giống nấm men Quan sát đại thể giống nấm men Giống nấm men sau đƣợc hoạt hóa đƣợc pha lỗng đến nồng độ thích hợp cấy trãi vào đĩa petri chứa môi trƣờng nuôi cấy