Phân lập tuyển chọn vi khuẩn bacillus spp ứng dụng bảo quản nông sản

Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC DANH MỤC VIẾT TẮT v DANH MỤC CÁC BẢNG Error! Bookmark not defined DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ,ĐỒ THỊ, SƠ ĐỒ, HÌNH ẢNH Error! Bookmark not defined TĨM TẮT CƠNG TRÌNH Error! Bookmark not defined ĐẶT VẤN ĐỀ TỔNG QUAN TÀI LIỆU Error! Bookmark not defined 1.1 Nấm Aspergillus flavus Error! Bookmark not defined 1.1.1 Hình thái Error! Bookmark not defined 1.1.2 Sinh thái Error! Bookmark not defined 1.1.3 Thành tế bào Error! Bookmark not defined 1.2 Độc tố aflatoxin Error! Bookmark not defined 1.2.1 Lịch sử phát aflatoxin Error! Bookmark not defined 1.2.2 Các lồi có khả sinh độc tố Error! Bookmark not defined 1.2.3 Cơ chất môi trường Error! Bookmark not defined 1.2.4 Cấu trúc tính chất aflatoxin Error! Bookmark not defined 1.2.5 Cơ chế gây độc aflatoxin Error! Bookmark not defined 1.2.6 Độc tính aflatoxin Error! Bookmark not defined 1.2.7 Giới hạn mức cho phép độc tố aflatoxin Error! Bookmark not defined i Đồ án tốt nghiệp 1.2.8 1.3 Tình hình nhiễm độc aflatoxin Error! Bookmark not defined Các phương pháp phát aflatoxin Error! Bookmark not defined 1.3.1 Phương pháp phát quang sinh học (Hamed K.Abass cộng sự, 2004) .Error! Bookmark not defined 1.3.2 Phát đường lý - hoá học Error! Bookmark not defined 1.3.3 Các phương pháp định lượng Error! Bookmark not defined 1.4 Phương pháp khử nhiễm aflatoxin Error! Bookmark not defined 1.4.1 Phương pháp vật lý học Error! Bookmark not defined 1.4.2 Phương pháp hóa học Error! Bookmark not defined 1.4.3 Phương pháp sinh học: Error! Bookmark not defined MỤC TIÊU – PHƯƠNG PHÁP Error! Bookmark not defined KẾT QUẢ - THẢO LUẬN Error! Bookmark not defined CHƯƠNG I: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu – thiết bị – hóa chất 35 2.1.1 Vật liệu 35 2.1.2 Thiết bị dụng cụ 35 2.1.3 Mơi trường - Hóa chất 35 2.2 Phương pháp nghiên cứu 37 2.2.1 Mục tiêu: 37 2.2.2 Nội dung: 37 ii Đồ án tốt nghiệp 2.2.3 Bố trí thí nghiệm phương pháp 37 CHƯƠNG II: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 51 3.1 Phân lập nấm sinh aflatoxin từ sản phẩm nông nghiệp 51 3.1.1 Phân lập nấm từ sản phẩm nông nghiệp khảo sát đặc điểm hình thái 51 3.1.2 Khảo sát hình thái nấm phân lập mơi trường phân biệt AFPA 53 3.1.3 Khảo sát khả sinh aflatoxin chủng nấm phân lập 54 3.1.4 Định tính aflatoxin phương pháp HPLC 55 3.2.Phân lập vi khuẩn Bacillus spp từ nguồn nông sản dễ nhiễm mốc đất trồng Error! Bookmark not defined 3.3 Tuyển chọn vi khuẩn tổng hợp hợp chất kháng nấm sinh aflatoxinError! Bookmark not defined 3.3.1 Khảo sát vi khuẩn có khả kháng nấm đồng nuôi cấy với nấm sinh aflatoxin 57 3.3.2 Chọn lọc chủng có khả tổng hợp chất kháng nấm mạnh 59 3.3.3 Phương pháp đối kháng sử dụng dịch ni cấy có tơ nấm làm chất cảm ứng 59 3.4 Khảo sát đặc điểm VK chọn lọc xác định sản phẩm trao đổi chất kháng nấm 62 3.4.1 Khảo sát hình thái, sinh lý, sinh hóa khả sinh enzyme ngoại bào chủng VK chọn lọc 62 3.4.2 Xác định tác nhân đối kháng nấm mốc 65 3.5 Khảo sát khả sử dụng sản phẩm trao đổi chất chủng CS1b bảo quản hạt phương pháp tạo màng bao 69 KẾT LUẬN, KIẾN NGHỊ 73 iii Đồ án tốt nghiệp Kết luận 73 Kiến nghị 74 TÀI LIỆU THAM KHẢO VÀ PHỤ LỤC Error! Bookmark not defined TÀI LIỆU THAM KHẢO 75 PHỤ LỤC 77 iv Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC VIẾT TẮT AFPA: Aspergillus flavus and parasiticus agar EA: Ethyl Acetat NA: Nutrient agar NB: Nutrient broth MT: Môi trường PDA: Potato dextrose agar HPLC: High ferformane thin layer chromatography TLC: Thin layer chromatographi UV: Ultraviolet v Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC BẢNG TRANG Bảng 1.1: Một số loài nấm mốc có khả sinh Aflatoxin Bảng 1.2: Ảnh hưởng chủng Asp flavus điều kiện nuôi cấy để sản sinh Aflatoxin 10 Bảng 1.3: Ảnh hưởng đường hexose khác lên lượng Aflatoxin sinh 11 Bảng 1.4: Tính chất hóa lý số aflatoxin 14 Bảng 1.5: Ảnh hưởng Aflatoxin có mặt thức ăn đến biểu bệnh lý vật nuôi 16 Bảng 1.6: Giới hạn aflatoxin số nuớc theo tiêu chuẩn FDA 18 Bảng 1.7: Những quy định tạm thời cho phép thức ăn chăn nuôi nguyên liệu làm thức ăn chăn nuôi Việt Nam 19 Bảng 1.8: Các phương pháp khử nhiễm aflatoxin đường sinh học 34 Bảng 2.1: Thành phần dung dịch sử dụng để làm màng bao đậu phộng 48 Bảng 3.1: Khả sinh aflatoxin nấm mốc phân lập sản phẩm nông nghiệp 55 Bảng 3.2: Tỉ lệ đối kháng trực tiếp chủng vi khuẩn với chủng nấm 57 Bảng 3.3: Tỉ lệ đối kháng (%) chủng vi khuẩn tuyển chọn chủng nấm CĐP1 theo phương pháp 60 vi Đồ án tốt nghiệp Bảng 3.4: Đặc điểm nuôi cấy vi khuẩn CSb1 62 Bảng 3.5: Đường kính vịng phân giải chất dịch ni cấy CSb1 65 Bảng 3.6: Kết phân tích định tính chất có dung dịch trích ly 66 Bảng 3.7: Khả ức chế nấm mốc vi khuẩn phát triển hạt đậu phộng bao màng chitosan sản phẩm trao đổi chất CS1b 69 vii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC ĐỒ THỊ, SƠ ĐỒ, HÌNH ẢNH TRANG Hình 1.1: Hình thái nấm mốc Asp.flavus Hình 1.2: Nấm mốc Asp.flavus hạt đậu phộng Hình 1.3: Cấu tạo Aflatoxin 13 Hình 1.4: Cơ chế tác dụng aflatoxin B1 mức tế bào gan 15 Hình 2.1: Sơ đồ chi tiết phân lập vi nấm sinh aflatoxin từ hạt đậu phộng, đậu nành, cà phê hư hỏng, khảo sát khả sinh aflatoxin chúng 38 Hình 2.2: Sơ đồ phân lập vi khuẩn Bacillus spp từ nguồn hạt 41 Hình 2.3: Sơ đồ thí nghiệm sàng lọc tuyển chọn VK đối kháng nấm mốc sinh aflatoxin 43 Hình 2.4: Sơ đồ bố trí thí nghiệm khảo sát đặc điểm VK chọn lọc xác định sản phẩm trao đổi chất có hoạt tính kháng nấm 46 Hình 2.5: Sơ đồ thí nghiệm ứng dụng bảo quản hạt đậu phộng màng bao kháng nấm 48 Hình 3.1: Mẫu hạt ni cấy mơi trường WA 51 Hình 3.2: Các chủng nấm phân lập PDA 53 Hình 3.3: Kết chạy sắc ký mỏng (TLC) chủng vi nấm phân lập phát phát huỳnh quang chiếu tia UV 254 nm 54 Hình 3.4: Kết định tính aflatoxin phương pháp HPLC 55 viii Đồ án tốt nghiệp Hình 3.5: Kết khẳng định khả sinh tính aflatoxin phương pháp tái nhiễm 56 Hình 3.6 : Đồ thị biểu diễn khả đối kháng chủng vi khuẩn Bacillus spp nấm sinh aflatoxin 59 Hình 3.7: Đồ thị biểu diễn khả đối kháng chủng vi khuẩn nấm CĐP1 61 Hình 3.8: Kết đối kháng VK CS1b với nấm mốc CĐP1 sau 72 62 Hình 3.9: Hình thái vi khuẩn CS1b 64 Hình 3.10: Khả tiết enzyme ngoại bào chủng CS1b sau 48 ủ 65 Hình 3.11: Khảo sát đối kháng cao ethyl acetate phát triển nấm mốc 68 Hình 3.12: Đồ thị biểu diễn khả đối kháng nấm mốc CĐP1 dịch nuôi cấy cảm ứng ly tâm, cao ethyl acetate DMSO thân DMSO 68 Hình 3.12: Kết coating đậu phộng ngày thứ 10 72 ix Đồ án tốt nghiệp MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Trên giới nay, việc nghiên cứu mức độ nhiễm nấm mốc độc tố nấm lương thực, thực phẩm vấn đề quan trọng nhằm bảo vệ sức khoẻ người vật nuôi Độc tố aflatoxin chủ yếu loài vi nấm Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus tạo ra, độc tố nguy hiểm thường nhiễm nông sản, gây độc cho người gia súc, gây tác dụng cấp tính, gây tổn thương gan (ung thư gan…), gây quái thai, gây đột biến, chí với liều lượng cao dẫn tới tử vong Trong nhiều loại aflatoxin tự nhiên aflatoxin B1 coi chất độc nguy hiểm Mặc dù diện Asp flavus lúc gắn liền với việc tồn aflatoxin với hàm lượng gây độc, thể nguy lớn việc nhiễmaflatoxin Ở nước ta, với đặc điểm khí hậu nhiệt đới nóng ẩm, độ ẩm khơng khí thường cao, thời vụ canh tác, thu hoạch thường rơi vào mùa mưa phương tiện thu hoạch, phơi sấy nông sản kém, kho chứa khơng đảm bảo khơ thống mát điều kiện thuận lợi cho nấm mốc phát triển gây nhiễm độc tố cho thực phẩm thức ăn chăn ni Do việc kiểm sốt dư lượng aflatoxin cần thiết quan trọng Giới hạn mức nhiễm aflatoxin tiêu chuẩn an tồn vệ sinh thực phẩm Bảo quản nơng sản áp dụng chất chống mốc hóa học ảnh hưởng xấu lên sức khỏe người tiêu dùng Để áp dụng “bảo quản sinh học”, sản phẩm trao đổi chất vi sinh vật thường áp dụng Đó lý chúng tơi chọn nghiên cứu về: “Phân lập tuyển chọn vi khuẩn Bacillus spp ứng dụng bảo quản nông sản” Đồ án tốt nghiệp Within 2201.33 28 78.619 groups Total (Corr.) 14859.6 41 The StatAdvisor Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 12,3852, tỷ lệ dự toán nhóm với ước tính nhóm P-value F-test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện 14 biến mức độ tin cậy 95,0% Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 66.0b CS1b 64.0b CS1+ 69.7b VK4 61.0b VK01 20.0a VK02 65.0b VK03 55.0b VK05 64.7b VK06 25.0a VK07 68.0b VK08 32.0a VK09 64.3b VK10 29.7a VK11 62.7b C1.4 Đối với chủng nấm ĐN1 92 Đồ án tốt nghiệp I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% CS CS CS VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK 1a 1b 1+ 02 03 05 06 07 08 09 10 11 01 42 46 47 42 13 16 14 21 13 14 10 31 47 53 40 17 21 17 15 10 15 44 34 47 46 14 36 12 21 12 14 11 11 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of Minimum Maximum Range variation CS1a 31.3333 20.232 64.5702% 8.0 44.0 36.0 CS1b 37.0 7.93725 21.452% 31.0 46.0 15.0 CS1 47.0 0.0 0.0% 47.0 47.0 0.0 VK4 47.0 5.56776 11.8463% 42.0 53.0 11.0 VK01 11.6667 3.21455 27.5533% 8.0 14.0 6.0 VK02 25.3333 22.0303 86.9616% 0.0 40.0 40.0 VK03 12.3333 4.50925 36.5615% 8.0 17.0 9.0 VK05 19.3333 2.88675 14.9315% 16.0 21.0 5.0 VK06 14.3333 2.51661 17.5578% 12.0 17.0 5.0 VK07 16.6667 3.78594 22.7156% 14.0 21.0 7.0 VK08 11.3333 1.52753 13.4782% 10.0 13.0 3.0 VK09 10.0 3.4641 34.641% 8.0 14.0 6.0 VK10 12.0 2.64575 22.0479% 10.0 15.0 5.0 VK11 5.0 4.58258 91.6515% 0.0 9.0 9.0 Total 42 21.4524 15.3912 71.7457% 0.0 53.0 53.0 ANOVA Table 93 Đồ án tốt nghiệp Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 7.44 0.0000 Square 7531.07 13 579.313 2181.33 28 77.9048 groups Within groups Total (Corr.) 9712.4 41 The StatAdvisor Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 7,43617, tỷ lệ dự toán nhóm với ước tính nhóm P-value F-test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện 14 biến mức độ tin cậy 95,0% 94 Đồ án tốt nghiệp Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 31.3cd CS1b 37.0de CS1+ 47.0e VK4 47.0e VK01 11.7ab VK02 25.3bcd VK03 12.3ab VK05 19.3abc VK06 14.3ab VK07 16.7abc VK08 11.3ab VK09 10.0a VK10 12.0ab VK11 5.0a C1.5 Đối với chủng nấm ĐN2 I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% CS CS CS VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK 1a 1b 1+ 02 03 05 06 07 08 09 10 11 01 68 45 40 42 12 17 15 0 55 50 57 60 18 16 22 14 14 64 47 50 55 16 17 22 Summary Statistics Count Average Standard deviation CS1a 62.3333 6.65833 Coeff of Minimum Maximum Range variation 10.6818% 95 55.0 68.0 13.0 Đồ án tốt nghiệp CS1b 47.3333 2.51661 5.31678% 45.0 50.0 5.0 CS1 49.0 17.4367% 40.0 57.0 17.0 8.544 VK4 52.3333 9.29157 17.7546% 42.0 60.0 18.0 VK01 5.33333 6.1101 114.564% 0.0 12.0 12.0 VK02 17.0 1.0 5.88235% 16.0 18.0 2.0 VK03 3.0 2.0 66.6667% 1.0 5.0 4.0 VK05 16.0 1.0 6.25% 15.0 17.0 2.0 VK06 14.6667 12.7017 86.6025% 0.0 22.0 22.0 VK07 4.66667 8.0829 173.205% 0.0 14.0 14.0 VK08 7.33333 5.85947 79.9018% 3.0 14.0 11.0 VK09 0.0 0.0 0.0 0.0 VK10 6.66667 3.21455 48.2183% 3.0 9.0 6.0 VK11 1.33333 2.3094 173.205% 0.0 4.0 4.0 Total 42 20.5 107.642% 0.0 68.0 68.0 0.0 22.0667 96 Đồ án tốt nghiệp ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 38.41 0.0000 Square 18904.5 13 1454.19 1060.0 28 37.8571 groups Within groups Total (Corr.) 19964.5 41 The StatAdvisor Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 38,4126, tỷ lệ dự tốn nhóm với ước tính nhóm P-value F-test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện 14 biến mức độ tin cậy 95,0% Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 62.3f CS1b 47.3e CS1+ 49.0e VK4 52.3ef VK01 5.3ab VK02 17.0d VK03 3.0a VK05 16.0cd VK06 14.7bcd VK07 4.7ab VK08 7.3abcd VK09 0.0a 97 Đồ án tốt nghiệp VK10 6.7abc VK11 1.3a C1.6 Đối với chủng nấm ĐN3 I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% CS CS CS VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK 1a 1b 1+ 02 03 05 06 07 08 09 10 11 01 38 28 29 37 12 27 32 31 21 34 34 27 27 31 41 44 32 31 24 31 32 29 29 38 34 29 32 23 25 28 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of Minimum Maximum Range variation CS1A 32.3333 5.50757 17.0337% 27.0 38.0 11.0 CS1B 28.0 3.57143% 27.0 29.0 2.0 CS1 29.6667 1.1547 3.89225% 29.0 31.0 2.0 VK4 38.6667 2.08167 5.38362% 37.0 41.0 4.0 VK1 - 19.5533 -234.64% -27.0 12.0 39.0 1.0 8.33333 VK2 35.0 8.544 24.4114% 27.0 44.0 17.0 VK03 - 5.03322 -14.245% -40.0 -30.0 10.0 35.3333 VK05 31.0 1.73205 5.58726% 29.0 32.0 3.0 VK06 4.33333 4.72582 109.057% -1.0 8.0 9.0 VK07 31.3333 0.57735 1.84261% 31.0 32.0 1.0 VK08 -70.0 -3.77964% -73.0 -68.0 5.0 VK09 22.6667 1.52753 6.73908% 21.0 24.0 3.0 VK10 22.3333 13.2035 59.1203% 8.0 34.0 26.0 2.64575 98 Đồ án tốt nghiệp VK11 31.0 3.0 Total 42 13.7619 31.3383 9.67742% 28.0 34.0 6.0 227.718% -73.0 44.0 117.0 ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 56.76 0.0000 Square 38793.6 13 2984.12 1472.0 28 52.5714 groups Within groups Total (Corr.) 40265.6 41 Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm Chiếc F-tỷ lệ, mà trường hợp 56,7632, tỷ lệ dự tốn nhóm với ước tính nhóm P-value F-test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện 14 biến mức độ tin cậy 95,0% Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1A 32.3ef CS1B 28.0ef CS1+ 29.6ef VK4 38.6f VK1 0.0c VK2 35.0f VK03 0.0b VK05 31.0ef VK06 4.3d VK07 31.3ef 99 Đồ án tốt nghiệp VK08 0.0a VK09 22.7e VK10 22.3e VK11 31.0ef C1.7 Đối với chủng nấm HCP2 I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% CS CS CS VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK 1a 1b 1+ 02 03 05 06 07 08 09 10 11 01 64 55 57 59 41 55 36 18 16 21 56 58 60 57 12 61 51 14 39 12 15 21 96 56 59 57 12 54 51 37 12 13 20 Summary Statistics Count Average Standard Coeff of Minimum Maximum Range deviation variation 21.166 29.3972% 56.0 96.0 40.0 CS1a 72.0 CS1b 56.3333 1.52753 2.71158% 55.0 58.0 3.0 CS1 58.6667 1.52753 2.60374% 57.0 60.0 3.0 VK4 57.6667 1.1547 2.00237% 57.0 59.0 2.0 VK01 10.0 3.4641 34.641% 6.0 12.0 6.0 VK02 52.0 10.1489 19.5171% 41.0 61.0 20.0 VK03 1.0 1.73205 173.205% 0.0 3.0 3.0 VK05 52.3333 2.3094 4.41287% 51.0 55.0 4.0 VK06 4.66667 8.0829 173.205% 0.0 14.0 14.0 VK07 37.3333 1.52753 4.09159% 36.0 39.0 3.0 VK08 14.0 24.7436% 12.0 18.0 6.0 VK09 14.6667 1.52753 10.4149% 13.0 16.0 3.0 3.4641 100 Đồ án tốt nghiệp VK10 1.0 1.73205 173.205% 0.0 3.0 3.0 VK11 20.6667 0.57735 2.79363% 20.0 21.0 1.0 Total 42 32.3095 25.3035 78.316% 0.0 96.0 96.0 ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 40.51 0.0000 Square 24925.6 13 1917.36 1325.33 28 47.3333 groups Within groups Total (Corr.) 26251.0 41 The StatAdvisor Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 40,5075, tỷ lệ dự tốn nhóm với ước tính nhóm P-value F-test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện 14 biến mức độ tin cậy 95,0% 101 Đồ án tốt nghiệp Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 72.0f CS1b 56.3e CS1+ 58.7e VK4 57.7e VK01 10.0abc VK02 52.0e VK03 1.0a VK05 52.3e VK06 4.7ab VK07 37.3d VK08 14.0bc VK09 14.7bc VK10 1.0a VK11 20.7c C2 Kết đối kháng chủng vi khuẩn chọn lọc với CDP1 C2.1 Sử dụng dịch ly tâm canh trường đồng nuôi cấy I% I% I% I% CS1a CS1b VK4 CS1+ 68 32 64 65 30 63 68 30 63 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff variation 102 of Minimum Maximum Range Đồ án tốt nghiệp CS1a 3.66667 0.57735 15.7459% 3.0 4.0 1.0 CS1b 67.0 2.58515% 65.0 68.0 3.0 VK4 30.6667 1.1547 3.76533% 30.0 32.0 2.0 CS1 63.3333 0.57735 0.911606% 63.0 64.0 1.0 Total 12 41.1667 27.028 65.6552% 3.0 68.0 65.0 1.73205 ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 2140.18 0.0000 Square 8025.67 2675.22 10.0 1.25 groups Within groups Total (Corr.) 8035.67 11 Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 2140.18, tỷ lệ dự toán nhóm với ước tính nhóm P-value F-test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện biến mức độ tin cậy 95,0% Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 3.7a CS1b 67.0d VK4 30.7b CS1+ 63.3c C2.2 Sử dụng dịch ni cấy có bổ sung tơ nấm làm chất cảm ứng có ly tâm I% I% I% 103 I% Đồ án tốt nghiệp CS1a CS1b VK4 CS1+ 59 61 57 61 58 61 58 60 58 60 57 57 Summary Statistics Count Average Standard Coeff deviation of Minimum Maximum Range variation CS1a 58.3333 0.57735 0.989743% 58.0 59.0 1.0 CS1b 60.6667 0.57735 0.951676% 60.0 61.0 1.0 VK4 57.3333 0.57735 1.00701% 57.0 58.0 1.0 CS1 59.3333 2.08167 3.50843% 57.0 61.0 4.0 Total 12 58.9167 1.62135 2.75194% 57.0 61.0 4.0 ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 4.56 0.0382 Square 18.25 6.08333 10.6667 1.33333 groups Within groups Total (Corr.) 28.9167 11 Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 4.56, tỷ lệ dự toán nhóm với ước tính nhóm P-value F-test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện biến mức độ tin cậy 95,0% Multiple Range Tests 104 Đồ án tốt nghiệp Vi khuẩn CS1a 58.3a CS1b 60.7b VK4 57.3a CS1+ 59.3ab Summary Statistics Count Average Standard Coeff deviation of Minimum Maximum Range variation CS1a 58.3333 0.57735 0.989743% 58.0 59.0 1.0 CS1b 60.6667 0.57735 0.951676% 60.0 61.0 1.0 VK4 57.3333 0.57735 1.00701% 57.0 58.0 1.0 CS1 59.3333 2.08167 3.50843% 57.0 61.0 4.0 Total 12 58.9167 1.62135 2.75194% 57.0 61.0 4.0 ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 4.56 0.0382 Square 18.25 6.08333 10.6667 1.33333 groups Within groups Total (Corr.) 28.9167 11 Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 4.56, tỷ lệ dự tốn nhóm với ước tính nhóm P-value F-test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện biến mức độ tin cậy 95,0% 105 Đồ án tốt nghiệp Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 58.3a CS1b 60.7b VK4 57.3a CS1+ 59.3ab 106 ... cứu về: ? ?Phân lập tuyển chọn vi khuẩn Bacillus spp ứng dụng bảo quản nông sản? ?? Đồ án tốt nghiệp Mục đích nghiên cứu - Ứng dụng sản phẩm trao đổi chất vi sinh vật bảo quản nông sản (bảo quản sinh... Phân lập tuyển chọn vi khuẩn Bacillus spp từ nơng sản có khả đối kháng nấm mốc sinh aflatoxin để ứng dụng bảo quản nông sản Nội dung nghiên cứu i) Phân lập vi nấm sinh aflatoxin từ hạt nông sản. .. 2.2.1 Mục tiêu: Phân lập tuyển chọn Vi khuẩn Bacillus spp có khả đối kháng nấm sinh aflatoxin ứng dụng bảo quản hạt 2.2.2 Nội dung: i) Phân lập vi nấm sinh aflatoxin từ hạt nông sản sau thu hoạch