TIỂU LUẬN các PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN LAO (bộ môn LAO)

LOGO CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN LAO www.themegallery.com  Sự đời làm đời trở nên rõ ràng  Cùng với Atoni Leeuwenhook trở thành ông tổ ngành vi sinh học - Những kính hiển vi ban đầu phát minh vào năm 1590 Middelburg, Hà Lan Ba người thợ tạo kính Hans Lippershey (người phát triển kính viễn vọng trước đó), Zacharias Janssen, với cha họ Hans Janssen người xây dựng nên kính hiển vi sơ khai -Đóng góp lớn thuộc nhà phát minh người Hà Lan Antoni Philips van Leeuwenhoek, người phát triển kính hiển vi, người quan sát thấy vi khuẩn động vật nguyên sinh trở thành ông tổ ngành vi sinh học  Bạn nhìn thấy ghế đá, ngồi bãi cỏ, gốc cây, thùng rác chí đơi dép  Là kết vận chuyển từ hốc mũi xuống phế nang miệng Đờm chất tiết từ hốc mũi tới phế nang thải ngồi miệng Đờm gồm dịch tiết khí phế quản, phế nang, họng, xoang hàm trán, hốc mũi.   24/03/1882, buổi họp Viện sinh lý học Berlin, Robert Koch -39 tuổi tuyên bố dõng dạc “ Bệnh lao loại trực khuẩn gây ra” ĐẶC ĐIỂM VI KHUẨN LAO VK lao thuộc họ Mycobacteriaccae Dài từ 3-5µm, rộng 0.3-0.5µm, khơng có lơng, đầu trịn, thân có hạt, đứng đám hay riêng rẽ tiêu nhuộm Ziehl-Nelsen Không bị cồn acid làm màu Ngồi có nhóm vi khuẩn kháng cồn, kháng toan khơng điển hình PHÂN LOẠI VI KHUẨN LAO Phân loại dựa vào khả gây bệnh cho người động vật:    Vi khuẩn lao người(M Tuberculosis Hominis)    Vi khuẩn lao bò(M.bovis)    Vi khuẩn lao chim(M Avium)    Vi khuẩn lao chuột (M Microti) PHÂN LOẠI VI KHUẨN LAO Vi khuẩn kháng cồn kháng toan khơng điển hình (M.Atipique)  Đây nhóm vi khuẩn có hình thể giống vi khuẩn lao Khi nhuộm Ziehl – Neelsen bắt màu đỏ fuchsin, có nghĩa khơng thể phân biệt chúng với vi khuẩn lao phương pháp nhuộm soi kính Trước thập kỷ 80 kỷ XX, chúng gây bệnh người, thường gây bệnh lao bệnh nhân bị bệnh bụi phổi, ghép quan, điều trị corticoid kéo dài… Nhưng nay, ngày gặp nhiều gây bệnh lao người có HIV/AIDS PHÂN LOẠI VI KHUẨN LAO  Phân loại dựa cấu trúc ADN:Đoạn IS 6110 (với 1361 cặp base) có loại Mycobacteria M tuberculosis, M bovis, M avium , M microti (gọi chung M tuberculosis complex), mà khơng có Mycobacteria khác Kỹ thuật ELISA “SANDWICH” Xác định kháng nguyên: PHÂN TÍCH KẾT QUẢ: Kết xác định kháng thể đặc hiệu M.Tuberculosis phân tích thơng qua giá trị mật độ quang học (OD) trung bình giếng mẫu, so sánh với giá trị ngưỡng Giá trị khác tùy sinh phẩm cộng đồng  Dương tính: > giá trị ngưỡng  Âm tính: < giá trị ngưỡng Kháng thể đơn dịng sử dụng với cặp phù hợp Kháng thể đơn dịng tốn chi phí nhiều với kháng thể đa dịng Kháng thể đơn dịng khó tìm kiếm Nhược điểm PHƯƠNG PHÁP MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG VÀ MIỄN DỊCH PHÓNG XẠ (Radioimmunoassay-RIA) Cũng với kỹ thuật tương tự phương pháp ELISA, nhiên thay cho enzyme chất tạo màu phương pháp miễn dịch huỳnh quang sử dụng chất đánh dấu huỳnh quang kết đọc kính hiển vi huỳnh quang Chất thường dùng FITC (Flourescein Isothiocyanat) Phương pháp miễn dịch phóng xạ chất đánh dấu đồng vị phóng xạ Interferon gamma (Quanti FERON TB Gold test:QFT) Interferon Gamma Release Whole Blood IFN-γ Assay QuantiFERON-TB Test Stage Whole Blood Culture Nil Mitogen ESAT-6 CFP 10 Control Control Draw blood Aliquot blood & add Incubate → INF-γ from sensitized + heparin antigen T-cells Stage IFN-gamma ELISA COLOR TMB Harvest plasma from above settled cells Computerized Measure [ IFN-γ ] in ‘Sandwich’ interpretation ELISA 123 Cellestis Chỉ định sử dụng QFT: Bệnh nhân nghi lao hoạt động Bệnh nhân có nguy tiến triển thành lao hoạt động Bệnh nhân có nguy cao nhiễm lao tiềm ẩn Để chẩn đoán loại trừ nguyên nhân khác Các phương pháp khác: Định lượng Adenosin Deaminase Chụp sắc tố lỏng kỹ thuật cao (HPLC) Chụp sắc tố khí mao quản Chụp sắc tố khí lỏng (GLC) Kỹ thuật Firefly luciferase Các phương pháp khác: LOGO Thank You ! www.themegallery.com ... khác CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN VI KHUẨN LAO: CÓ PHƯƠNG PHÁP Phương pháp gián tiếp: Phương pháp trực tiếp: Xác định trực khuẩn thành phần cấu trúc đặc trưng BK Xác định có mặt vi khuẩn lao thành... cam) PHƯƠNG PHÁP TRỰC TIẾP I Soi trực tiếp 2 .Phương pháp nhuộm huỳnh quang với ánh sáng cực tím (Flouro chrome procedure) • Các bước tiến hành: PHƯƠNG PHÁP TRỰC TIẾP I Soi trực tiếp 2 .Phương pháp. .. vi CÁC KỸ THUẬT TRỰC TIẾP: CÁC KỸ THUẬT TRỰC TIÊP Nuôi cấy phân lập môi trường nuôi cấy nhân tạo Xác định kháng nguyên vi khuẩn lao Xác định AND, ARN vi khuẩn lao? ?? • Xác định enzyme protein phát