Tối ưu hóa quá trình trích ly hợp chất có hoạt tính sinh học trong thượng đẳng sâm

TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN CHUYÊN ĐỀ TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC TỐI ƯU HĨA Q TRÌNH TRÍCH LY HỢP CHẤT CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRONG THƯỢNG ĐẲNG SÂM (Campanumoea javanica Blume) LÊ TUẤN VŨ AN GIANG, 7-2020 TRƯỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN CHUYÊN ĐỀ TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM TỐI ƯU HĨA Q TRÌNH TRÍCH LY HỢP CHẤT CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRONG THƯỢNG ĐẲNG SÂM (Campanumoea javanica Blume) LÊ TUẤN VŨ DTP163756 Cán hướng dẫn ThS.TRẦN XUÂN HIỂN AN GIANG, 7-2020 Chuyên đề “Tối ưu hóa q trình trích ly hoạt chất sinh học thượng đẳng sâm” sinh viên Lê Tuấn Vũ thực hiện, hướng dẫn ThS Trần Xuân Hiển Tác giả báo cáo kết nghiên cứu Hội đồng chấm điểm thông qua ngày 10 tháng năm 2020 Phản biện Phản biện ThS Trịnh Thanh Duy TS Hồ Thanh Bình Cán hướng dẫn, (thư ký) ThS Trần Xuân Hiển i LỜI CẢM TẠ Trong suốt trình học tập thực chuyên đề tốt nghiệp nhận hướng dẫn giúp đỡ tận tình thầy cơ, anh chị bạn Với lịng biết ơn xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến: ThS Trần Xuân Hiển – giáo viên hướng dẫn tận tình hướng dẫn truyền đạt cho kinh nghiệm quý báu giúp tơi hồn thành tốt chun đề tốt nghiệp Các Thầy Cô Bộ môn Công nghệ Thực phẩm - Trường Đại học An Giang giúp đỡ, truyền đạt cho nhiều kiến thức kinh nghiệm suốt trình học tập làm chuyên đề tốt nghiệp Các cán bộ, nhân viên Khu thực hành thí nghiệm Trường Đại học An Giang nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian thực nghiên cứu phịng thí nghiệm Các bạn sinh viên lớp DH17TP động viên giúp đỡ trao đổi thảo luận kết thu giúp tơi hồn thành chun đề tốt nghiệp Xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến ba mẹ người gia đình động viên tạo điều kiện tốt để tơi hồn thành tốt việc học hoàn thành tốt chuyên đề tốt nghiệp Trân trọng cảm ơn! An Giang, ngày 10 tháng năm 2020 Sinh viên thực Lê Tuấn Vũ ii TĨM TẮT Thượng đẳng sâm loại củ có giá trị kinh tế cao, chất dinh dưỡng hợp chất sinh học tốt cho sức khỏe Việc nghiên cứu trích ly hợp chất thượng đẳng sâm quan tâm Nội dung đề tài nhằm xác định thông số tối ưu trình trích ly để phá vỡ cấu trúc tế bào thượng đẳng sâm, từ tạo điều kiện dễ dàng cho q trình trích ly chất thượng đẳng sâm đạt hiệu cao Nghiên cứu tiến hành khảo sát bốn nhân tố với năm mức độ: nồng độ (40; 45; 50; 55 60%), tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi (1/3; 1/4;1/5; 1/6 1/7 g/ml), nhiệt độ (45; 50; 55; 60 65oC) Tiến hành phân tích tiêu: tannin, hợp chất chống oxy hóa flavonoid, phenolic khả bắt gốc tự thượng đẳng sâm Qua nghiên cứu, kết thu nhận với nồng độ 50%, tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi 1/5, nhiệt độ 55oC thời gian 45 phút giá trị tối ưu điều kiện trích ly đem lại hiệu trích ly tốt Cụ thể, hàm lượng tannin 27,65 mg/l, hàm lượng phenolic tổng 4,73 mgGAE/g, hàm lượng flavonoid tổng 5,25 mgQE/g khả loại gốc tự thượng đẳng sâm 79,31% iii LỜI CAM KẾT Tơi xin cam kết cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu cơng trình nghiên cứu có xuất xứ rõ ràng Những kết luận khoa học cơng trình nghiên cứu chưa cơng bố cơng trình khác An Giang, ngày 10 tháng năm 2020 Sinh viên thực Lê Tuấn Vũ iv MỤC LỤC Nội dung Trang Trang chấp nhận hội đồng i Lời cảm tạ ii Tóm tắt kết nghiên cứu iii Lời cam kết iv Mục lục v Danh sách bảng viii Danh sách hình ix Chương 1: GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Đối tượng nghiên cứu 1.4 Nội dung nghiên cứu 1.5 Những đóng góp đề tài Chương 2: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 Tổng quan nguyên liệu 2.1.1 Nguyên liệu thượng đẳng sâm 2.1.1.1 Phân loại, phân bố 2.1.1.2 Mô tả thượng đẳng sâm 2.1.1.3 Thành phần hóa học 2.1.1.4 Các hợp chất có hoạt tính sinh học thượng đẳng sâm 2.2 Tổng quan q trình cơng nghệ sử dụng nghiên cứu 2.2.1 Quá trình sấy 2.2.1.1 Khái niệm 2.2.1.2 Mục đích 2.2.1.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình sấy 2.2.2 Q trình trích ly 2.2.2.1 Khái niệm v 2.2.2.2 Đặc điểm q trình trích ly 2.2.2.3 Các yếu tố ảnh hưởng tới q trình trích ly 2.2.2.4 Những biến đổi q trình trích ly 10 2.3 nghiên cứu liên quan 10 Chương 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 3.1 Phương tiện nghiên cứu 12 3.1.1 Địa điểm thời gian thực 12 3.1.2 Nguyên liệu 12 3.1.3 Thiết bị dụng cụ 12 3.1.4 Hóa chất 12 3.2 Phương pháp nghiên cứu 13 3.2.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm xử lý số liệu 13 3.2.2 Nội dung nghiên cứu 15 3.2.2.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ trích ly thượng đẳng sâm 15 3.2.2.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/ dung mơi trích ly thượng đẳng sâm 15 3.2.2.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ trích ly thượng đẳng sâm 16 3.2.2.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng thời gian trích ly thượng đẳng sâm 16 3.2.2.5 Thí nghiệm 5: Tối ưu hóa yếu tố ảnh hưởng đến q trình trích ly thượng đẳng sâm theo phương pháp bề mặt đáp ứng 16 3.3 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 19 3.3.1 Phương pháp thống kê số liệu 19 Chương 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 20 4.1 Ảnh hưởng nồng độ dung mơi trích ly đến hợp chất sinh học 20 4.1.1 Ảnh hưởng nồng độ dung mơi trích ly đến hàm lượng tannin 20 4.1.2 Ảnh hưởng nồng độ dung mơi trích ly đến TFC TPC 20 4.1.3 Ảnh hưởng nồng độ dung mơi trích ly đến DPPH 21 vi 4.2 Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi đến hợp chất sinh học 22 4.2.1 Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi đến hàm lượng tannin 22 4.2.2 Ảnh hưởng tỷ lệ ngun liệu/ dung mơi trích ly đến TFC TPC 22 4.2.3 Ảnh hưởng tỷ lệ ngun liệu/ dung mơi trích ly đến DPPH 23 4.3 Ảnh hưởng nhiệt độ trích ly đến hợp chất sinh học 24 4.3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ trích ly đến hàm lượng tannin 24 4.3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ trích ly đến TFC TPC 25 4.3.3 Ảnh hưởng nhiệt độ trích ly đến DPPH 26 4.4 Ảnh hưởng thời gian trích ly đến hợp chất sinh học 27 4.4.1 Ảnh hưởng thời gian trích ly đến hàm lượng tannin 27 4.4.2 Ảnh hưởng thời gian trích ly đến TFC TPC 27 4.4.3 Ảnh hưởng thời gian trích ly đến DPPH 28 4.5 Tối ưu hóa nhân tố đến q trình trích ly hoạt chất sinh học 29 4.5.1 Tối ưu hóa q trình trích ly hàm lượng tannin thượng đẳng sâm 29 4.5.2 Tối ưu hóa q trình trích ly TPC 30 4.5.3 Tối ưu hóa q trình trích ly TFC 32 4.5.4 Tối ưu hóa q trình trích ly DPPH 34 4.6 Tối ưu hóa q trình trích ly đến tát tiêu phân tích 35 Chương 5: KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ 37 5.1 Kết luận 37 5.2 Khuyến nghị 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 PHỤ LỤC pc1 Phụ lục A Một số hình ảnh nghiên cứu pc1 Phụ lục B Phương pháp phân tích tiêu pc3 Phụ lục C Kết thống kê pc6 vii DANH SÁCH BẢNG Bảng 1:Phương pháp phân tích tiêu 13 Bảng 2: Giá trị mã hóa thực nghiệm yếu tố thực nghiệm 18 viii Võ Văn Chi Trần Hợp (2002) Cây cỏ có ích Việt Nam Hà Nội: NXB Giáo dục, 2(21) Vũ Hồng Sơn, Hà Duy Tư (2009) Nghiên cứu trích ly polyphenol từ chè xanh vụn Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, tập 47, số 1, tr 81-86 40 PHỤ LỤC PHỤ LỤC A: MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG NGHIÊN CỨU Hình 21: Mẫu trước trích ly Hình 22: Dịch mẫu sau trích ly, cố định nồng độ dung mơi Hình 23: Dịch mẫu sau trích ly, cố định tỷ lệ ngun liệu/ dung mơi pc1 Hình 24: Dịch mẫu sau trích ly, cố định nhiệt độ Hình 25: Dịch mẫu trích ly, cố định thời gian pc2 PHỤ LỤC B: PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH CHỈ TIÊU PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG TANNIN THEO PHƯƠNG PHÁP FOLIN-DENIS Nguyên tắc: Dựa vào phản ứng oxy hóa hợp chất tannin với thuốc thử Foli-Ciocalteau tạo phức màu xanh thẫm Cường độ màu tỷ lệ thuận với hàm lượng tannin có mẫu đo bước sóng 700 nm Acid tannic chọn làm chất chuẩn để tính tốn hàm lượng tannin có mẫu Tiến hành: Hút 0,5 mL dịch trích 0,5 mL nước cất cho vào ống nghiệm Sau cho tiếp 0,5 mL thuốc thử Folin-Denis mL dung dịch Na2CO3 20% lắc đều, làm ấm bể nước sôi phút làm nguội nhiệt độ phòng Đo độ hấp thu phức màu bước sóng 700 nm Hàm lượng tannin tính theo đường chuẩn acid tannic PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG TPC BẰNG PHƯƠNG PHÁP FOLIN-CIOCALTEU Nguyên lý phương pháp: Dựa phản ứng khử hóa học thuốc thử Folin-Ciocalteu có chứa vonfram molypden với diện hợp chất phenol Sản phẩm khử có màu xanh với quang phổ hấp thụ ánh sáng cực đại bước sóng 765 nm Acid gallic sử dụng làm chất chuẩn để xây dựng đường chuẩn Xây dựng đường chuẩn acid gallic: Pha dãy dung dịch acid gallic chuẩn có nồng độ từ 0-0,225 mg/mL Tiến hành đo độ hấp thụ bước sóng 765 nm máy quang phổ UV-VIS Thí nghiệm lặp lại lần lấy kết trung bình vẽ đồ thị tương quan nồng độ acid gallic độ hấp thụ A để xác định phương trình đường chuẩn acid gallic Xác định TPC dịch chiết mẫu Hút xác pipetman 50 µL dịch mẫu, them 200 µL thuốc thử Folin-Ciocalteu 1N, 500 µL dung dịch Na2CO3 7,5% 1750 µL nuớc cất Hỗn hợp đựợc ủ điều kiện bóng tối vịng để phản ứng xảy hoàn toàn Đo độ hấp thụ dung dịch bước sóng 765 nm pc3 Kết tính tốn hàm lượng polyphenol mẫu phân tích dựa vào phương trình đường chuẩn từ Hình Kết biểu diễn theo số mg acid gallic (GAE)/g PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG TFC Hàm lượng flavonoid tổng số mẫu phân tích xác định theo phương pháp quang phổ chủ yếu dựa vào hình thành phức nhôm-flavonoid với dung dịch AlCl3 Quercetin sử dụng chất chuẩn để xây dựng đường chuẩn thực cách đo độ hấp thu bước sóng hấp thụ tối đa quercetin 415 nm Xây dựng đường chuẩn quercetin Pha dãy dung dịch quercetin chuẩn có nồng độ từ 0-0,225 mg/mL Đo độ hấp thụ bước sóng 415 nm máy quang phổ UV-VIS.Thí nghiệm lặp lại lần lấy kết độ hấp thụ trung bình vẽ đồ thị tương quan nồng độ quercetin độ hấp thụ A Xác định TFC dịch chiết mẫu Hút xác pipetman 1500 µL nước cất, thêm 75 µL NaNO2 5% (w/v), 250 µL mẫu cần phân tích 150 µL AlCl3 10% (w/v).Hỗn hợp ủ điều kiện bóng tối vịng 30 phút để phản ứng xảy hoàn toàn Tiến hành đo độ hấp thụ dung dịch bước sóng 415 nm Kết tính tốn hàm lựợng flavonoid mẫu phân tích dựa vào phương trình đường chuẩn quercetin Kết biểu diễn theo số mg quercetin (QE)/g PHƯƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG LOẠI GỐC TỰ DO DPPH DPPH tan methanol có màu tím đậm có bước sóng hấp thu 517 nm Khi tiếp xúc với chất chống oxy hóa hợp chất phenol, DPPH nhận hydro bị khử.Phản ứng xảy làm cho số lượng gốc tự DPPH giảm làm màu tím dung dịch DPPH methanol để chuyển sang màu vàng sáng Khả loại gốc tự DPPH xác định thông qua giảm độ hấp thụ bước sóng 517 nm Xác định phần trăm loại gốc tự DPPH mẫu Hút 800 µL dịch chiết mẫu cho vào ống nghiệm.Thêm 800 µL dung dịch DPPH 0,008%, lắc Sau 30 phút đo độ hấp thụ bước sóng 517 nm pc4 Tính kết Phần trăm loại DPPH tính theo cơng thức: Trong đó: % SC: phần trăm loại DPPH Ac: độ hấp thụ dung dịch mẫu thử Ae: độ hấp thụ dung dịch mẫu thí nghiệm pc5 PHỤ LỤC C: KẾT QUẢ THỐNG KÊ Kết thống kê thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ, tỷ lệ ngun liệu/ dung mơi, nhiệt độ, thời gian trích ly đến hàm lượng TFC ANOVA Table for TFC by nong Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.212377 0.0530942 Within groups 0.139976 130 0.00107674 Total (Corr.) 0.352353 134 Multiple Range Tests for TFC by nong Method: 95.0 percent LSD nong Count Mean Homogeneous Groups X 40 27 5.04348 X 45 27 5.06485 X 50 27 5.12222 XX 55 27 5.13496 X 60 27 5.14159 ANOVA Table for B.TFC by ty le Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.0956609 0.0239152 Within groups 0.212033 130 0.00163102 Total (Corr.) 0.307694 134 Multiple Range Tests for B.TFC by ty le Method: 95.0 percent LSD ty le Count Mean Homogeneous Groups X 1/3 27 5.07956 X 1/4 27 5.10967 X 1/5 27 5.13648 X 1/6 27 5.14522 X 1/7 27 5.15152 ANOVA Table for C.TFC by nhiet Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.278634 0.0696584 Within groups 0.235377 130 0.00181059 Total (Corr.) 0.514011 134 Multiple Range Tests for C.TFC by nhiet Method: 95.0 percent LSD nhiet Count Mean Homogeneous Groups X 45 27 5.07559 X 50 27 5.11781 X 55 27 5.17441 X 60 27 5.18285 X 65 27 5.19556 ANOVA Table for D.TFC by thoi gian Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.437538 0.109384 Within groups 1.06215 130 0.00817039 Total (Corr.) 1.49969 134 Multiple Range Tests for D.TFC by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups X 15 27 5.13989 X 30 27 5.17607 X 45 27 5.25548 X 60 27 5.26522 X 75 27 5.28841 pc6 F-Ratio 49.31 P-Value 0.0000 F-Ratio 14.66 P-Value 0.0000 F-Ratio 38.47 P-Value 0.0000 F-Ratio 13.39 P-Value 0.0000 Kết thống kê thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ, tỷ lệ, nhiệt độ thời trích ly đến hàm lượng TPC ANOVA Table for TPC by nong Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.211477 0.0528692 Within groups 0.394616 130 0.00303551 Total (Corr.) 0.606093 134 Multiple Range Tests for TPC by nong Method: 95.0 percent LSD nong Count Mean Homogeneous Groups X 40 27 4.40344 X 45 27 4.42626 X 50 27 4.48511 X 55 27 4.49126 X 60 27 4.50367 ANOVA Table for B.TPC by ty le Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.401785 0.100446 Within groups 0.634101 130 0.0048777 Total (Corr.) 1.03589 134 Multiple Range Tests for B.TPC by ty le Method: 95.0 percent LSD ty le Count Mean Homogeneous Groups X 1/3 27 4.46974 X 1/4 27 4.5267 X 1/5 27 4.5863 X 1/6 27 4.60615 X 1/7 27 4.61296 ANOVA Table for C.TPC by nhiet Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.51106 0.127765 Within groups 0.892023 130 0.00686172 Total (Corr.) 1.40308 134 Multiple Range Tests for C.TPC by nhiet Method: 95.0 percent LSD nhiet Count Mean Homogeneous Groups X 45 27 4.57267 X 50 27 4.63593 X 55 27 4.69644 X 60 27 4.72204 X 65 27 4.74033 ANOVA Table for D.TPC by thoi gian Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.101228 0.025307 Within groups 0.486366 130 0.00374128 Total (Corr.) 0.587594 134 Multiple Range Tests for D.TPC by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups X 15 27 4.68393 X 30 27 4.69707 X 45 27 4.73519 X 60 27 4.74367 X 75 27 4.75422 pc7 F-Ratio 17.42 P-Value 0.0000 F-Ratio 20.59 P-Value 0.0000 F-Ratio 18.62 P-Value 0.0000 F-Ratio 6.76 P-Value 0.0001 Kết thống kê thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ, tỷ lệ, nhiệt độ thời gian trích ly đến hàm lượng tannin ANOVA Table for TANNIN by nong Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 36.9187 9.22968 Within groups 42.6 130 0.327692 Total (Corr.) 79.5187 134 Multiple Range Tests for TANNIN by nong Method: 95.0 percent LSD nong Count Mean Homogeneous Groups X 40 27 24.3427 X 45 27 24.7407 X 50 27 25.4576 X 55 27 25.5491 X 60 27 25.6926 ANOVA Table for B.TANNIN by ty le Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 30.1464 7.5366 Within groups 50.3289 130 0.387146 Total (Corr.) 80.4753 134 Multiple Range Tests for B.TANNIN by ty le Method: 95.0 percent LSD ty le Count Mean Homogeneous Groups X 1/3 27 25.0834 X 1/4 27 25.6153 X 1/5 27 26.0875 X 1/6 27 26.2256 X 1/7 27 26.3793 ANOVA Table for C.TANNIN by nhiet Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 56.7775 14.1944 Within groups 74.1425 130 0.570327 Total (Corr.) 130.92 134 Multiple Range Tests for C.TANNIN by nhiet Method: 95.0 percent LSD nhiet Count Mean Homogeneous Groups X 45 27 25.9402 X 50 27 26.4693 X 55 27 27.3124 X 60 27 27.4707 X 65 27 27.6213 ANOVA Table for D.TANNIN by thoi gian Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 8.06226 2.01557 Within groups 51.3744 130 0.395188 Total (Corr.) 59.4367 134 Multiple Range Tests for D.TANNIN by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups X 15 27 27.2497 X 30 27 27.3216 X 45 27 27.6603 X 60 27 27.7813 X 75 27 27.8556 pc8 F-Ratio 28.17 P-Value 0.0000 F-Ratio 19.47 P-Value 0.0000 F-Ratio 24.89 P-Value 0.0000 F-Ratio 5.10 P-Value 0.0008 Kết thống kê thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ, tỷ lệ, nhiệt thời gian trích ly đến khả khử gốc tự DPPH ANOVA Table for DPPH by nong Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 109.698 27.4245 Within groups 351.33 130 2.70253 Total (Corr.) 461.028 134 Multiple Range Tests for DPPH by nong Method: 95.0 percent LSD nong Count Mean Homogeneous Groups X 40 27 72.3228 X 45 27 73.1548 X 50 27 74.2692 X 55 27 74.4845 X 60 27 74.6817 ANOVA Table for B.DPPH by ty le Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 231.856 57.9639 Within groups 450.425 130 3.46481 Total (Corr.) 682.281 134 Multiple Range Tests for B.DPPH by ty le Method: 95.0 percent LSD ty le Count Mean Homogeneous Groups X 1/3 27 73.6329 X 1/4 27 75.2676 X 1/5 27 76.4265 X 1/6 27 76.9169 X 1/7 27 77.2179 ANOVA Table for C.DPPH by nhiet Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 272.103 68.0257 Within groups 509.167 130 3.91667 Total (Corr.) 781.27 134 Multiple Range Tests for C.DPPH by nhiet Method: 95.0 percent LSD nhiet Count Mean Homogeneous Groups X 45 27 75.8354 X 50 27 76.9088 X 55 27 78.6921 X 60 27 78.9557 X 65 27 79.6763 ANOVA Table for D.DPPH by thoi gian Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 84.7221 21.1805 Within groups 400.675 130 3.08211 Total (Corr.) 485.397 134 Multiple Range Tests for D.DPPH by thoi gian Method: 95.0 percent LSD thoi gian Count Mean Homogeneous Groups X 15 27 77.7003 X 30 27 78.3466 X 45 27 79.3124 X 60 27 79.643 X 75 27 79.7249 pc9 F-Ratio 10.15 P-Value 0.0000 F-Ratio 16.73 P-Value 0.0000 F-Ratio 17.37 P-Value 0.0000 F-Ratio 6.87 P-Value 0.0000 Kết thống kê thí nghiệm tối ưu hóa q trình trích ly đến hàm lượng tannin Analysis of Variance for TANNIN Source Sum of Squares Df A:nong 0.000759375 B:ty le 0.000176042 C:nhiet 0.000155042 D:thoi gian 0.000210042 AA 0.00227088 AB 0.0000390625 AC 0.000189063 AD 0.000826562 BB 0.00158565 BC 0.000126563 BD 0.000826562 CC 0.00735765 CD 0.0000390625 DD 0.00818606 Total error 0.00005975 11 Total (corr.) 0.0144526 25 Mean Square 0.000759375 0.000176042 0.000155042 0.000210042 0.00227088 0.0000390625 0.000189063 0.000826562 0.00158565 0.000126563 0.000826562 0.00735765 0.0000390625 0.00818606 0.00000543182 R-squared = 99.5866 percent Regression coeffs for TANNIN Coefficient Estimate constant 22.38 A:nong 0.0453125 B:ty le 2.20521 C:nhiet 0.0902208 D:thoi gian -0.00236806 AA -0.00045625 AB 0.003125 AC -0.0001375 AD 0.0000958333 BB -0.953125 BC 0.005625 BD 0.00479167 CC -0.00082125 CD -0.0000208333 DD -0.00009625 Optimize Response Goal: maximize TANNIN Optimum value = 27.6535 Factor Low High nong 40.0 60.0 ty le 1.3 1.7 nhiet 45.0 65.0 thoi gian 15.0 75.0 Optimum 51.2598 1.51714 55.2702 45.0043 pc10 F-Ratio 139.80 32.41 28.54 38.67 418.07 7.19 34.81 152.17 291.92 23.30 152.17 1354.55 7.19 1507.06 P-Value 0.0000 0.0001 0.0002 0.0001 0.0000 0.0213 0.0001 0.0000 0.0000 0.0005 0.0000 0.0000 0.0213 0.0000 Kết thống kê Thí nghiệm tối ưu hóa q trình trích ly đến hàm lượng phenolic tổng Analysis of Variance for TPC Source Sum of Squares A:nong 0.000782042 B:ty le 0.000176042 C:nhiet 0.000165375 D:thoi gian 0.000198375 AA 0.00226259 AB 0.0000330625 AC 0.000189062 AD 0.000798063 BB 0.00157873 BC 0.000115562 BD 0.000826563 CC 0.00734273 CD 0.0000455625 DD 0.008265 Total error 0.00005575 Total (corr.) 0.014488 Df 1 1 1 1 1 1 1 11 25 Mean Square 0.000782042 0.000176042 0.000165375 0.000198375 0.00226259 0.0000330625 0.000189062 0.000798063 0.00157873 0.000115562 0.000826563 0.00734273 0.0000455625 0.008265 0.00000506818 R-squared = 99.6152 percent Regression coeffs for TPC Coefficient Estimate constant -0.583885 A:nong 0.0456958 B:ty le 2.22521 C:nhiet 0.0905958 D:thoi gian -0.00214583 AA -0.000455417 AB 0.002875 AC -0.0001375 AD 0.0000941667 BB -0.951042 BC 0.005375 BD 0.00479167 CC -0.000820417 CD -0.0000225 DD -0.000096713 Optimize Response Goal: maximize TPC Optimum value = 4.73052 Factor Low High nong 40.0 60.0 ty le 1.3 1.7 nhiet 45.0 65.0 thoi gian 15.0 75.0 Optimum 51.2701 1.517 55.2708 45.0277 pc11 F-Ratio 154.30 34.73 32.63 39.14 446.43 6.52 37.30 157.47 311.50 22.80 163.09 1448.79 8.99 1630.76 P-Value 0.0000 0.0001 0.0001 0.0001 0.0000 0.0268 0.0001 0.0000 0.0000 0.0006 0.0000 0.0000 0.0121 0.0000 Kết thống kê Thí nghiệm tối ưu hóa q trình trích ly đến hàm lượng flavonoid tổng Analysis of Variance for TFC Source Sum of Squares A:nong 0.000759375 B:ty le 0.000176042 C:nhiet 0.000155042 D:thoi gian 0.000198375 AA 0.00226259 AB 0.0000390625 AC 0.000189062 AD 0.000826563 BB 0.00157873 BC 0.000126563 BD 0.000826563 CC 0.00734273 CD 0.0000390625 DD 0.008265 Total error 0.00005775 Total (corr.) 0.014496 Df 1 1 1 1 1 1 1 11 25 Mean Square 0.000759375 0.000176042 0.000155042 0.000198375 0.00226259 0.0000390625 0.000189062 0.000826563 0.00157873 0.000126563 0.000826563 0.00734273 0.0000390625 0.008265 0.00000525 R-squared = 99.6016 percent Regression coeffs for TFC Coefficient Estimate constant -0.0118854 A:nong 0.0452292 B:ty le 2.19896 C:nhiet 0.0901292 D:thoi gian -0.00232083 AA -0.000455417 AB 0.003125 AC -0.0001375 AD 0.0000958333 BB -0.951042 BC 0.005625 BD 0.00479167 CC -0.000820417 CD -0.0000208333 DD -0.000096713 Optimize Response Goal: maximize TFC Optimum value = 5.2535 Factor Low High nong 40.0 60.0 ty le 1.3 1.7 nhiet 45.0 65.0 thoi gian 15.0 75.0 Optimum 51.2555 1.51721 55.2673 45.0177 pc12 F-Ratio 144.64 33.53 29.53 37.79 430.97 7.44 36.01 157.44 300.71 24.11 157.44 1398.62 7.44 1574.29 P-Value 0.0000 0.0001 0.0002 0.0001 0.0000 0.0197 0.0001 0.0000 0.0000 0.0005 0.0000 0.0000 0.0197 0.0000 Kết thống kê Thí nghiệm tối ưu hóa q trình trích ly đến khả loại gốc tự Analysis of Variance for DPPH Source Sum of Squares A:nong 0.000748167 B:ty le 0.0001815 C:nhiet 0.00015 D:thoi gian 0.000204167 AA 0.00227503 AB 0.00004225 AC 0.000196 AD 0.000841 BB 0.00158912 BC 0.00013225 BD 0.00081225 CC 0.00736512 CD 0.000036 DD 0.00819394 Total error 0.00006325 Total (corr.) 0.014462 Df 1 1 1 1 1 1 1 11 25 Mean Square 0.000748167 0.0001815 0.00015 0.000204167 0.00227503 0.00004225 0.000196 0.000841 0.00158912 0.00013225 0.00081225 0.00736512 0.000036 0.00819394 0.00000575 F-Ratio 130.12 31.57 26.09 35.51 395.66 7.35 34.09 146.26 276.37 23.00 141.26 1280.89 6.26 1425.03 R-squared = 99.5626 percent Regression coeffs for DPPH Coefficient Estimate constant 73.9993 A:nong 0.0452583 B:ty le 2.1975 C:nhiet 0.0901583 D:thoi gian -0.00238611 AA -0.000456667 AB 0.00325 AC -0.00014 AD 0.0000966667 BB -0.954167 BC 0.00575 BD 0.00475 CC -0.000821667 CD -0.00002 DD -0.0000962963 Optimize Response Goal: maximize DPPH Optimum value = 79.2635 Factor Low High nong 40.0 60.0 ty le 1.3 1.7 nhiet 45.0 65.0 thoi gian 15.0 75.0 Optimum 51.2624 1.51756 55.2818 45.0301 pc13 P-Value 0.0000 0.0002 0.0003 0.0001 0.0000 0.0203 0.0001 0.0000 0.0000 0.0006 0.0000 0.0000 0.0294 0.0000 Tối ưu hóa q trình trích ly đến tất tiêu phân tích Row 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 DPPH 79.199 79.183 79.2 79.22 79.205 79.17 79.22 79.21 79.26 79.177 79.215 79.195 79.22 79.205 79.23 79.195 79.2 79.185 79.205 79.23 79.2 79.185 79.175 79.265 79.185 79.175 TANNIN 27.59 27.573 27.59 27.61 27.595 27.56 27.61 27.6 27.65 27.567 27.605 27.585 27.61 27.595 27.62 27.585 27.59 27.575 27.595 27.62 27.59 27.575 27.565 27.655 27.575 27.565 TFC 5.19 5.172 5.19 5.21 5.195 5.16 5.21 5.2 5.25 5.167 5.205 5.185 5.21 5.195 5.22 5.185 5.19 5.175 5.195 5.22 5.19 5.175 5.165 5.255 5.175 5.165 Optimize Desirability Optimum value = 0.984276 Factor Low High nong 40.0 60.0 ty le 1.3 1.7 nhiet 45.0 65.0 thoi gian 15.0 75.0 Optimum 51.2554 1.5171 55.2627 45.0143 Response DPPH TANNIN TFC TPC TPC 4.668 4.649 4.667 4.687 4.671 4.637 4.687 4.677 4.727 4.644 4.682 4.662 4.687 4.672 4.697 4.662 4.667 4.652 4.672 4.697 4.667 4.652 4.642 4.732 4.652 4.642 Predicted Desirability 0.331552 0.120692 0.348245 0.53684 0.368403 0.0 0.51546 0.401753 0.973684 0.0558076 0.469188 0.237168 0.530153 0.375109 0.629934 0.256139 0.329275 0.183219 0.376206 0.612389 0.307346 0.163261 0.0728064 0.973684 0.155246 0.03848 Optimum 79.2635 27.6535 5.2535 4.73052 pc14 Observed Desirability 0.315702 0.131474 0.315789 0.526316 0.365761 0.0 0.526316 0.421053 0.947368 0.0736842 0.473684 0.263158 0.526316 0.368421 0.631579 0.263158 0.315789 0.157895 0.368421 0.631579 0.315789 0.157895 0.0526316 1.0 0.157895 0.0526316 ... tannin thượng đẳng sâm 29 4.5.2 Tối ưu hóa q trình trích ly TPC 30 4.5.3 Tối ưu hóa q trình trích ly TFC 32 4.5.4 Tối ưu hóa q trình trích ly DPPH 34 4.6 Tối ưu hóa q trình trích. .. đẳng sâm? ?? thực nhằm xác định thơng số tối ưu q trình trích ly từ thượng đẳng sâm 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Xác định điều kiện chiết tách tối ưu hợp chất có hoạt tính sinh học thượng đẳng sâm theo... gọi thượng đẳng sâm nhân sâm người nghèo có cơng dụng nhân sâm mà lại rẻ tiền (Đỗ Huy Bích, 2006) Chính vậy, đề tài ? ?Tối ưu hóa q trình trích ly đến hiệu suất trích ly hợp chất sinh học thượng đẳng