Luận văn chế biến thủy sản công ty agifish

LỜI CẢM TẠ Tác giả xin chân thành cảm ơn Phó Tiến só Nguyễn văn Hảo, Phó Viện trưởng Viện Nghiên Cứu Nuôi trồng Thủy sản II, hướng dẫn giúp đỡ nhiều suốt trình thực Luận văn tốt nghiệp Cao học Thạc só Lê Minh Tùng, Giám đốc, Kỹ sư Phan văn Ninh, Phó Giám đốc, Kỹ sư Phan thị Yến Nhi anh chị Sở Khoa học Công nghệ & Môi trường AG giúp đỡ, ủng hộ kinh phí cho thực Luận văn tốt nghiệp nầy Cử nhân Nguyễn Thành Tâm, Phó Ban Tổ chức Chính quyền tỉnh An giang, tạo điều kiện hổ trợ trình học tập Cử nhân Vương Bình Thạnh, Giám đốc, Kỹ sư Nguyễn Văn Phương, Phó GĐ, Kỹ sư Đoàn Hữu Lực, Phó GĐ sở Nông Nghiệp & Phát Triển Nông Thôn An Giang, KS Nguyễn Văn Phong, CN Nguyễn Văn Hinh anh chị đồng sở Nông nghiệp & PTNT giúp đỡ gánh vác thay phần công việc thời gian học tập Kỹ sư Vương Học Vinh, Gíam Đốc Trung tâm Ứng dụng & Chuyển giao Khoa học Công nghệ AG, KS Võ Phước Hưng Gíam Đốc Xí nghiệp Nuôi trồng &ø Chế biến Nước Mắm- CTy Agifish, KS Lê Phước Hiền, KS Trang Kim Liên, anh chị em công nhân trại cá Mỹ Châu, trại cá Mỹ Thới ủng hộ cá giống để thực thí nghiệm Kỹ sư Nguyễn Đình Huấn, Phó Gíam Đốc Agifishco, KS Phan Công Bằng, KCS Lê Phước Định Phượng Xí nghiệp Đông lạnh F7, giúp số liệu thu mẫu cá bệnh Bác só Thú y Lê Hồng Phước, Kỹ sư Đinh thị Thủy, Cử nhân Phạm Công Thành, KS Trình Trung Phi, KS Nguyễn Tuần, KS Đỗ Quang Tiền Vương, Thạc só Nguyễn Thanh Tùng,, KS Nguyễn Thu Viễn, KS Nguyễn Xuân Trinh, KS Trương Thanh Tuấn, CN Lý Thị Thanh Loan, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II, Msc Flavio Corsin giúp đỡ suốt thời gian thực tập hòan thành Luận văn tốt nghiệp KS Võ Thu Vân Trạm Thú Y H.Tân Châu, KS Nguyễn Thị Hồng Hoa Trạm Thú Y xã Long Sơn, KS Hùynh Thị Thu Loan Hội Nông Dân Việt Nam Tx Long Xuyên, KS Hùynh Khắc Hạnh Phòng Nông nghiệp H Châu Phú, giúp đỡ thời gian thực Luận văn nầy Thầy Cô giảng dạy Lớp Cao học Nuôi trồng Thủy sản khóa II bạn bè lớp, chia sẻ vui, buồn thời gian học tập 11 Gia đình KS Mai Ngữ -Trần Kim Hằng, Viện Nghiên Cứu Nuôi trồng Thủy sản II, dẫ tận tình giúp đỡ thời gian trú ngụ gia đình để thực Luận văn tốt mghiệp 12 Gia đình Ba mẹ em lo lắng, tạo điều kiện để học tập Cuối xin chân thành cảm ơn Tiến só Nguyễn Hữu Dũng (trường Đại học Thủy sản) tận tình động viên, hướng dẫn thực hoàn thành Luận văn nầy HỨA THỊ PHƯNG LIÊN Mục Lục Lời cảm tạ Trang Mục lục i Danh sách bảng, biểu đồ hình iv Chữ viết tắt ix Mở đầu Chương I: Tổng quan tài liệu I.1 Sơ lược đặc điểm điều kiện tự nhiên & kinh tế xã hội tỉnh AG I.1.1Vị trí địa lý điều kiện tự nhiên I.1.2 Tình hình kinh tế xã hội tỉnh An giang I.2 Nuôi trồng Thủy sản An giang I.2.1 Tình hình Nuôi trồng Thủy sản An giang I.2.2 Những nhân tố hạïn chế phát triển nghề nuôi cá tạiAn giang 12 I.3 Bệnh cá nuôi An giang 14 I.4 Tình hình nghiên cứu bệnh xuất huyết cá ba sa nói riêng cá nước nói chung 15 I.4.1 Trong nước 15 I.4.2 Trên giới 17 I.4.3 Các nghiên cứu lọai bệnh vi khuẩn Aeromonas Pseudomonas gây đối tượng nuôi thủy sản i 20 Chương II: Vật liệu, phương pháp nghiên cứu bố trí thí nghiệm 26 II.1 Phương pháp thu thập số liệu 26 II.2 Địa điểm thời vụ thu mẫu 26 II.3 Phương pháp kiểm tra tổng thể mẫu cá 27 II.4 Phương pháp thu, bảo quản, vận chuyển xử lý sơ mẫu cá 27 II.5 Phương pháp phân lập, nuôi cấy định danh vi khuẩn 28 II.6 Phương pháp tiến hành thực nghiệm gây nhiễm trở lại 31 II.7 Phương pháp tổng hợp xử lý số liệu 33 Chương III: Kết nghiên cứu thảo luận 34 III.1 Tình hình xuất bệnh xuất huyết cá ba sa An giang thời gian nghiên cứu 34 III.1.1Đánh giá ảnh hưởng yếu tố khí hậu, thủy văn họat động làng bè đến chất lượng nước vùng nuôi 34 III.1.1.1Các yếu tố khí hậu, thủy văn 34 III.1.1.2 số đánh giá mức độ nhiễm bẩn 35 III.1.2 Tình hình xuất bệnh xuất huyết cá ba sa A G An Giang thời gian nghiên cứu 36 III.2 Kết kiểm tra tổng thể mẫu cá bệnh thu thập 37 III.2.1Điểm thu mẫu số lượng mẫu 37 III.2.2 Kết kiểm tra mắt thường dấu hiệu, triệu chứng bệnh lý cá ba sa 38 III.2.3 Phân nhóm dấu hiệu bệnh lý xuất mẫu cá thu ii 40 III.3 Kết phân lập nuôi cấy định danh vi khuẩn mẫu cá thu thập 46 III 3.1 Số lượng mẫu theo mùa vụ khu vực 46 III.3.2 Kết phân lập định tính 46 III.3.3 Kết phân lập vi khuẩn định lượng 50 III.3.4 Tính nhạy cảm chủng vi khuẩn phân lập từ cá bệnh số thuốc kháng sinh thông dụng 51 III.4 Kết thực nghiệm gây nhiễm trở lại 53 III.4.1Các chủng vi khuẩn sử dụng cho thí nghiệm 53 III.4.2 Tính chất gây bệnh A hydrophila SHB681984 54 III.4.3 Tính chất gây bệnh A sobria STB511983 58 Chương IV: Kết luận đề xuất ý kiến 60 IV.1 Kết luận 60 IV.2 Đề xuất ý kiến 62 63-72 Tài liệu tham khảo Phụ Lục DANH SÁCH BẢNG, BIỂU ĐỒ VÀ HÌNH I.BẢNG Sản lượng cá nuôi An giang từ năm 1990 –1997 Số lượng bè nuôi cá An giang từ năm 1990 –1997 10 Phân lọai bè nuôi cá An giang 10 iii Cơ cấu giá thành sản phẩm cá ba sa nuôi bè An giang 11 Bố trí thí nghiệm gây nhiễm trở lại cá ba sa 32 Tần số xuất dấu hiệu bệnh lý mẫu cá giống 40 Tần số xuất dấu hiệu bệnh lý mẫu cá thương phẩm 42 Màu sắc quan gan, thận, lách cá bệnh dấu hiệu xuất huyết bên ngòai 44 Đặc điểm chủnh vi khuẩn phân lập từ cá ba sa 48 10 Kết phân lập định tính vi khuẩn từ gan, thận, lách cá ba sa 50 11 Kết phân lập định lượng vi khuẩn tổng số từ gan cá bệnh cá chưa có biểu bệnh lý bên ngòai thời gian nghiên cứu 51 12 Tính nhạy cảm vi khuẩn phân lập từ cá ba sa bệnh số thuốc kháng sinh thông dụng 52 II BIỂU ĐỒ Bảng đồ Hành chánh tỉnh An giang vi Sơ đồ Quy trình pha loãng hệ thống canh khuẩn 30 Tần số xuất dấu hiệu bệnh lý mẫu cá ba sa giống 41 Tần số xuất dấu hiệu bệnh lý mẫu cá ba sa thương phẩm 43 Màu sắc quan gan thận lách cá bệnh không biểu xuất huyết bên ngòai 44 Tỷ lệ sống nhóm cá thí nghiệm gây nhiễm vi khuẩn Aeromonas hydrophila SHB681984 iv 57 III HÌNH Làng bè nuôi cá Châu Đốc vii Dấu hiệu bệnh lý bên cá ba sa giống 38 Dấu hiệu bệnh lý nội quan cá ba sa giống 39 Khuẩn lạc vi khuẩn Aeromonas hydrophila môi trường TSA 46 Vi khuẩn Aeromonas hydrophilai nhuộm Gram 47 Kháng sinh đồ vi khuẩn Aeromonas hydrophila 52 Các bể kính bố trí thí nghiệm gây nhiễm trở lại cá ba sa 54 Dấu hiệu bệnh lý bên cá ba sa gây nhiễm vi khuẩn Aeromonas hydrophila SHB681984 trở lại đối chứng 55 Dấu hiệu bệnh lý nội quan cá ba sa gây nhiễm vi khuẩn Aeromonas hydrophila SHB681984 trở lại đối chứng v 56 vi BẢNG ĐỒ HÀNH CHÁNH TỈNH AN GIANG vii Hình1 LÀNG BÈ NUÔI CÁ CHÂU ĐỐC viii cỏ phân hủy, dư lượng nông dược hóa chất dùng nông nghiệp Vì vậy, vào thời điểm nầy thường gặp cá bệnh III.3 Kết phân lập nuôi cấy định danh vi khuẩn mẫu cá thu thập III.3.1 Số lượng mẫu theo mùa vụ, khu vực Số lượng mẫu cá bệnh thu 75 mẫu, mẫu đối chứng (thu vào mùa khô, bè sông Hậu) cá nuôi bè, chia theo mùa khu vực - Mùa mưa có 53 mẫu, gồm 32 mẫu, thu khu vực bè sông Tiền, 21 mẫu thu khu vực bè sông Hậu - Mùa khô có 22 mẫu, gồm 10 mẫu, thu khu vực bè sông Tiền, 12 mẫu thu khu vực bè sông Hậu III.3 Kết phân lập vi khuẩn định tính Vi khuẩn phân lập từ quan gan, thận, lách cá bệnh, nuôi cấy môi trường BHI, TSA môi trường phân lập Aeromonas Trên môi trường TSA khuẩn lạc ghi nhận sau: khuẩn lạc hình tròn, rìa đều, bóng, suốt bán suốt, lồi thấp dẹp, đường kính khuẩn lạc - mm Tiến hành nhuộm Gram, quan sát hình thái vi khuẩn Nhận thấy vi khuẩn hình que, hình que cong mảnh, bắt màu Gram âm Hình Khuẩn lạc vi khuẩn Aeromonas hydrophila môi trường TSA 46 Hình Vi khuẩn Aeromonas hydrophila nhuộm Gram Đặc điểm chủng vi khuẩn phân lập từ cá basa trình bày Bảng Dựa vào kết này, xác định loại vi khuẩn thuộc hai giống: Giống Aeromonas gồm lòai: A hydrophila, A caviae, A sobria Aeromonas sp.; 47 Giống Pseudomonas : Pseudomonas sp Bảng Đặc điểm chủng vi khuẩn phân lập từ cá basa Đặc điểm Motility Gram stain OF/O, OF/F Sinh Indol ONPG MR-VP Gelatine H2S Simmon citrate Lysine Arginine Ornithine KCN Nitrate Oxydase Catalase Urea Phenylalanine Gas from glucose Arabinose Manitol Maltose Sucrose Ghi chuù: Aeromonas sp A caviae A.sobria + +/+ + +/+ + +/d + + d + + + + + + + + +/+ + + +/+ + + d d + + + + + + + + +/- + + - + +/+ + + +/+ d + + + + + + + + - - + - nd + + + + + + d + + + + nd nd nd nd + nd nd nd nd nd nd nd nd nd nd : không thực hieän; A.hydrophila Pseudomonas sp nd nd nd nd nd nd nd nd nd nd + + - nd nd nd + : dương tính; - :âm tính Theo Poppoff (1984), loài vi khuẩn thuộc giống Aeromonas chia thành nhóm, nhóm không di động di động Nhóm Aeromonas di động gồm A hydrophila, A caviae, A sobria loài ưa nhiệt ôn hòa, di động A 48 hydrophila, A caviae, A sobria vi khuẩn gắn liền với bệnh nhiễm trùng máu xuất huyết cá nước (Roberts, 1993) Aeromonas di động thường phân bố rộng rãi hệ sinh thái thủy sản, chúng gây bệnh cho động vật biến nhiệt, động vật máu nóng người (Faire, 1978; Salton & Schnick 1973) Aeromonas di động xuất thủy vực, trừ nước mặn, xuất nước phong phú nước có hàm lượng hữu cao (Hazen et al 1978; Heuschmann- Brunner 1978; Kaper et al, 19981) Vi khuẩn thuộc giống Pseudomonas phân bố rộng rãi nhiều nơi tự nhiên, bao gồm đất, nước , da, ruột, miệng người, động vật nhiều lọai thực phẩm (Bergan, 1981), Pseudomonas sp xem tác nhân gây bệnh thứ cấp, Pseudomonas sp kèm với Aeromonas sp gây xuất huyết nặng da (Kabata Z,1985) Tần số xuất vi khuẩn phân lập từ gan, thận, lách cá bệnh có biến động theo mùa khu vực thu mẫu (Bảng 10) Vào mùa mưa, Aeromonas sp chiếm ưu mẫu cá bệnh với tỷ lệ 67,7% khu vực sông Tiền 68,2% khu vực sông Hậu Riêng vi khuẩn Pseudomonas sp xuất với tỷ lệ 31,25% sông Tiền không thấy Pseudomonas sp xuất khu vực sông Hậu rên sông Hậu, số lần xuất vi khuẩn Aeromonas hydrophila 57,1% Vào mùa khô, A hydrophila vi khuẩn xuất chiếm ưu hai khu vực sông Tiền sông Hậu 70% 50% Ngoài ra, phân lập Aeromonas sp 33,33% sông Hậu, 20 % khu vực sông Tiền không thấy Pseudomonas sp xuất khu vực sông Hậu vào mùa khô 49 Bảng 10 Kết phân lập định tính vi khuẩn từ gan, thận, lách cá basa Khu vực thu mẫu Số mẫu phân lập vi khuẩn Tổng số mẫu Aeromonas sp A hydrophila A cavia A sobria Pseudomonas sp Mùa Mưa Sông Tiền 96 Sông Hậu 63 65 (67.7%) 22 30 (22,9%) (9,4%) (31,25%) 43 36 18 (68,2%) (57,1%) (28,6%) (6,3%) Muøa Khô Sông Tiền 30 Sông Hậu 36 21 (20%) (70%) 12 18 (33,33%) (50%) 0 15 15 (50%) (30%) (25%) Đặc biệt, phân lập vi khuẩn từ gan, thận, lách mẫu cá không thấy biểu bệnh lý bên Các chủng vi khuẩn phân lập Aeromonas sp (9/15 mẫu = 60%), Pseudomonas sp (6/15 mẫu= 40%) A sorbia (5/15 mẫu = 33,33%) Tuy nhiên, không phân lập A hydrophilla từ mẫu cá Từ kết trên, thấy A hydrophila Aeromonas sp có quan hệ chặt chẽ với xuất bệnh xuất huyết cá basa nuôi bè An Giang thời gian nghiên cứu III.3.3 Kết phân lập vi khuẩn định lượng Kết phân lập định lượng vi khuẩn từ mẫu cá bệnh mùa mưa 50 mùa khô trình bày Bảng 11 Số lượng vi khuẩn trung bình gan cá ba sa thu mẫu sông Tiền (35,83.104 CFU/g) cao sông Hậu (13,35.104 CFU/g) vào mùa mưa Mùa khô số lượngh vi khuẩn gan cá bệnh sông Tiền (5,31.104 CFU/g) cao sông Hậu (0,87 104 CFU/g) Mùa mưa, số lượng vi khuẩn phân lập từ gan cá cao mùa khô hai khu vực sông Tiền sông Hậu Số lượng vi khuẩn phân lập từ gan cá chưa có biểu bệnh lý bên (cá “khỏe”) thấp ( 0,22 104CFU/g) Bảng 11 Kết phân lập định lượng vi khuẩn tổng số từ gan cá bệnh cá chưa có biểu bệnh lý bên thời gian nghiên cứu Điểm thu mẫu cá bệnh Sông Tiền Sông Hậu Cá “khỏe” Số lượng mẫu 19 - Mùa mưa Số lượng vi khuẩn (104CFU/g) Min Max Trung bình 2,0 109 35,83 0,1 218 13,35 - Số lượng mẫu 10 12 Mùa khô Số lượng vi khuẩn (104CFU/g) Min Max Trung bình 0,2 16,7 5,31 0,17 3,75 0,87 0,1 0,29 0,22 Theo kết phân tích thống kê, tổng số vi khuẩn cảm nhiễm gan cá ba sa sông Tiền sông Hậu không sai khác có ý nghóa thống kê (P > 0,05) Số lượng vi khuẩn cảm nhiễm gan cá mùa mưa mùa khô, không sai khác có ý nghóa thống kê ( P > 0,05) Mật độ cảm nhiễm vi khuẩn gan cá mùa mưa sông Tiền sông Hậu, mùa mưa mùa khô sông Hậu không sai khác có ý nghóa thống kê Nhưng có khác biệt có ý nghóa thống kê mùa mưa mùa khô sông Tiền; mùa khô sông Tiền Hậu III Tính nhạy cảm chủng vi khuẩn phân lập từ cá bệnh số thuốc kháng khuẩn thông dụng Tính nhạy cảm vi khuẩn phân lập từ cá basa loại 51 thuốc kháng khuẩn lưu hành phổ biến thị trường trình bày Bảng 12 Nhìn chung, chủng vi khuẩn phân lập từ cá bệnh nhạy cảm với Furazolidone, Neomycine Gentamycine Ngoài A sobria, chủng vi khuẩn thể tính đề kháng thuốc (drug resistance) Penicilline, Ampicilline, Tetramycine, Streptomycine, Chloramphenicol Sulfamethoxazole Bảng 12 Tính nhạy cảm vi khuẩn phân lập từ cá basa bị bệnh số thuốc kháng khuẩn thông dụng TT Tên thuốc Furazolidone Neomycine Gentamycine Penicilline Ampicilline Tetramycine Streptomycine Chloramphenicol Sulfamethoxazole * Ghi chuù: Aeromonas sp S S S R R R R R N R: kháng thuốc; Vi khuẩn A A hydrophila sobria S S S N S S R R R R R S R S R S R S A.cavia e S S S R R R R R R Pseudomonas sp S S S R R R R R N S: nhạy cảm ; N: nhạy cảm Hình Kháng sinh đồ vi khuẩn Aeromonas hydrophila 52 Phan Văn Ninh cộng (1993) nghiên cứu tính nhạy cảm thuốc vi khuẩn Aeromonas sp phân lập từ cá he nuôi bè An giang bị bệnh tuột vảy xuất huyết Kết nghiên cứu cho thấy vi khuẩn gây bệnh nhạy cảm với Chloramphenicol, Furazolidon; nhạy cảm với Streptomycine, Chlotetracyline; đề kháng Ampicilline Penicilline Từ kết nghiên cứu này, tác giả đề xuất việc sử dụng kháng sinh việc trị bệnh cho cá nuôi Kết nghiên cứu người nuôi cá bè An giang vận dụng phòng trị bệnh xuất huyết cho cá basa, nhiên thời hiệu chữa trị thấp Kết thử nghiệm tính nhạy cảm thuốc chủng vi khuẩn phân lập trình bày góp phần giải thích tính hiệu thấp công tác chữa trị bệnh cho cá basa An Giang năm gần Đề tài nghiên cứu chưa tiến hành so sánh chủng Aeromonas sp phân lập với chủng Phan Văn Ninh cộng công bố chủng vi khuẩn không lưu giữ Tuy nhiên, có nhiều khả rằng, việc sử dụng phổ biến loại thuốc kháng khuẩn nghề nuôi cá, hình thành nhiều chủng vi khuẩn kháng thuốc môi trường nước điểm nuôi cá An Giang Tình hình đòi hỏi cần có nghiên cứu sâu khu hệ vi sinh vật nước An Giang, nghiên cứu biện pháp phòng trị bệnh hữu hiệu, hạn chế việc sử dụng thuốc thiếu chọn lọc nhằm đảm bảo phát triển nghề nuôi trồng thủy sản bền vững địa phương III.5 Kết thực nghiệm gây nhiễm trở lại III.5.1 Các chủng vi khuẩn sử dụng cho thí nghiệm 53 Qua trình phân lập, nuôi cấy, định danh vi khuẩn, lưu giống loại vi khuẩn: Pseudomonas sp (chủng STB116971), A caviae (SHB4108972), A sobria (STB511983), A hydrophila (SHB681984), vaø Aeromonas sp (SHB6111985) Từ kết phân lập vi khuẩn định tính, chọn hai chủng vi khuẩn A hydrophila SHB681984 A sobria STB511983 gây nhiễm thực nghiệm cho cá basa để xác định tính chất gây bệnh (pathogenicity) loại vi khuẩn III.5.2 Tính chất gây bệnh A hydrophila SHB681984 + Cá thí nghiệm: Cá thí nghiệm có chiều dài trung bình 9,5cm ( 8,0-10,3 cm), khối lượng trung bình: 8,5 gr/con (5,3 -11,9 gr) Sau tiêm dung dịch muối sinh lý (nhóm cá đối chứng) canh khuẩn, cá nuôi bể kính theo nhóm, bể 10 (Hình7) Nhiệt đôï không khí trung bình thời gian thí nghiệm 35 -37o C 54 Hình Các bể kính bố trí thí nghiệm gây nhiễm trở lại + Kết theo dõi cá thí nghiệm: Thí nghiệm tiến hành từ ngày tháng năm 1998 Sau tiêm xong, cá bơi lội bắt mồi bình thường Sau 28 giờ, số cá có triệu chứng khác thường: trương bụng, bơi lội quay tròn không định hướng, số ngữa bụng, hô hấp mạnh, treo thẳng đứng nước Biểu bên ngòai: xuất huyết vi bụng, vi hậu môn, vi đuôi hậu môn lồi đỏ Khoảng sau quan sát thấy biểu trên, số cá chết Giải phẩu cá thể để quan sát nội tạng, nhận thấy mạch máu trương to, gan sưng có màu đen, mật sưng, ruột trương phồng chứa đầy hơi, thành bụng xuất huyết Hình Dấu hiệu bệnh lý bên cá thí nghiệm gây nhiễm trở lại đối chứng 55 56 Hình Dấu hiệu bệnh lý nội quan cá thí nghiệm gây nhiễm trở lại đối chứng Cá chết nhiều vòng 31- 46 sau tiêm canh khuẩn, sau chết rãi rác ngày đầu Từ ngày thứ không thấy cá bị chết Tỷ lệ sống nhóm cá thí nghiệm trình bày biểu đồ 57 100 Tỷ lệ sống (%) 80 60 40 10 cfu/ml 10 cfu/ml 20 10 cfu/ml Control 0 24 48 72 96 120 144 168 Thời gian thí nghiệm (giờ) 192 216 240 Biểu đồ 5: Tỷ lệ sống nhóm cá thí nghiệm gây nhiễm vi khuẩn A hydrophila SHB681984 Sau 10 ngày theo dõi, nhóm cá tiêm 0,1 ml canh khuẩn chứa 107cfu/ml có tỷ lệ sống thấp (26,67%) Tỷ lệ sống tương ứng nhóm cá tiêm canh khuẩn 105, 103 83,3%, 93,3% Cá thuộc nhóm đối chứng không chết hoàn toàn khỏe mạnh suốt trình thí nghiệm + Kết phân lập vi khuẩn từ cá thí nghiệm: Ngay cá chết, tiến hành giải phẩu quan sát phân lập A hydrophila từ gan, thận lách cá thể Trên môi trường phân lập vi khuẩn thấy xuất dạng khuẩn lạc đặc trưng Kết thí nghiệm cho thấy, chủng A hydrophila SHB681984 phân lập từ cá 58 bệnh An Giang gây tỷ lệ tử vong cao cho cá thí nghiệm Tỷ lệ sống nhóm cáù thí nghiệm có tương quan thuận với lượng vi khuẩn sử dụng Cá thí nghiệm bị bệnh thể dấu hiệu bệnh lý tương tự triệu chứng bệnh lý quan sát bè nuôi cá Tỷ lệ sống 100% nhóm cá đối chứng cho thấy tượng cá chết lô thí nghiệm không liên quan đến yếu tố chăm sóc quản lý trình thực Đồng thời, việc phân lập A hydrophila từ cá thí nghiệm bị bệnh cho thấy chủng A hydrophila SHB681984 tác nhân gây bệnh xuất huyết vi xoang miệng cá basa nuôi bè An Giang Mặt khác, tỷ lệ tử vong thấp nhóm cá tiêm với nồng độ vi khuẩn 103 105 cho thấy A hydrophila SHB681984 tác nhân gây bệnh không bắt buộc (opportunistic pathogen) cá ba sa điều kiện tiến hành thí nghiệm III.5.3 Tính chất gây bệnh A sobria STB511983 + Cá thí nghiệm: Cá thí nghiệm có chiều dài trung bình 10,9cm (10,0 12,7cm), khối lượng trung bình: 9,3 g (8 -11 g) Sau tiêm dung dịch muối sinh lý (nhóm cá đối chứng) canh khuẩn, cá nuôi bể kính theo nhóm, bể 10 tương tự trình bày phần Nhiệt đôï không khí trung bình thời gian thí nghiệm 33 - 36o C + Kết theo dõi cá thí nghiệm: Thí nghiệm tiến hành từ ngày 23 tháng năm 1998 Sau tiêm xong, cá bơi lội bắt mồi bình thường Trong suốt 15 ngày sau gây nhiễm, không phát dấu hiệu bệnh lý khác lạ xảy Tỷ lệ sống 15 ngày nhóm cá gây nhiễm thực nghiệm với A sobria STB511983 liều lượng 0,1 ml dung dịch chứa 107, 105 , 103 cfu/ml nhóm đối chứng 100% 59 + Kết phân lập vi khuẩn từ cá thí nghiệm: Sau ngày thứ 15, chọn cá gây nhiễm với nồng độ 107 cfu/ml, giải phẩu quan sát phân lập vi khuẩn từ gan, thận, lách Kết qủa quan sát nội tạng không phát dấu hiệu bệnh lý bệnh xuất huyết tất cá thể nghiên cứu Đồng thời, phân lập A sobria từ cá thể Kết gây nhiễm thực nghiệm cho thấy, A sobria STB5118983 với liều lượng sử dụng không gây bệnh xuất huyết cho cá basa điều kiện thí nghiệm Sự xuất vi khuẩn mẫu cá bệnh thu từ bè nuôi cá An giang giải thích tác nhân thứ cấp không đóng vai trò quan trọng trình phát sinh bệnh xuất huyết cá ba sa Do đủ số lượng cá giống dùng cho thí nghiệm gây nhiễm trở lại hạn chế mặt thời gian, nên tính chất gây bệnh chủng Aeromonas sp., A caviae, Pseudomonas sp phân lập từ cá bệnh chưa nghiên cứu Tuy nhiên, chủng vi khuẩn A caviae phân lập từ cá bệnh mùa mưa Pseudomonas sp phân lập từ cá bệnh thu bè nuôi sông Tiền (Bảng 10), nhận định loại vi khuẩn tác nhân gây bệnh thứ cấp (secondary pathogens) Ngược lại, chủng Aeromonas sp phân lập từ cá bệnh thu sông Tiền sông Hậu, mùa mưa mùa khô với tần số xuất cao, vậy, vần tiến hành nghiên cứu thêm vị trí phân loại tính chất gây bệnh chủng vi khuẩn 60 ... Giang Agifishco - Công ty Xuất nhập Thủy sản An giang BVNL TS - Cục Bảo vệ Nguồn lợi Thủy sản BOD5 - Nhu cầu oxy sinh hóa ngày COD - Nhu cầu oxy hóa học DO - Oxy hòa tan KHCN & MT - Sở Khoa học Công. .. Thôn, cục Thống kê, sở Khoa Học Công Nghệ & Môi Trường, công ty Xuất nhập Thủy sản An giang (Agifishco) * Phỏng vấn trực tiếp cán kỹ thuật Thủy sản cán quản lý địa phương có nuôi cá ba sa tình hình... Thủy sản I NCNT TS II - Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II NN & PTNT - Sở Nông nghiệp Phát triển Nông thôn PE - Polyethylen TTKH-KTKTTS -Trung tâmThôngTin khoa học-Kỹ thuật Kinh tế Thủy sản