Nghiên cứu thành phần hoá học và hoạt tính sinh học của cây trạch tả Việt Nam Alisma plantago Aquatica L Alismataceae

Nghiên cứu thành phần hoá học và hoạt tính sinh học của cây trạch tả Việt Nam Alisma plantago Aquatica L Alismataceae Nghiên cứu thành phần hoá học và hoạt tính sinh học của cây trạch tả Việt Nam Alisma plantago Aquatica L Alismataceae luận văn tốt nghiệp thạc sĩ

Bộ giáo dục đào tạo trường đại học bách khoa hµ néi Luận văn thạc sĩ khoa học Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học trạch tả việt nam (alisma plantago-aquatica l., alismataceae) Nghành : công nghƯ hãa häc M· sè : Ng­êi h­íng dÉn khoa học : TS Trần Thu Hương Học viên : Phạm Hải Yến Hà Nội 2006 Mục lục Trang Lời cảm ơn Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình Mở đầu 14B Chương Tổng quan 1.1 Vài nét chung Trạch tả Alisma plantago-aquaticaL 3 1.1.1 Về thực vật 1.1.2 Phân bố sinh thái 1.1.3 Tác dụng dược lý 1.1.4 Các thuốc có Trạch tả 0B 1B 2B 3B 1.2 Thành phần hoá học 1.3 Vài nét hợp chất Tecpen 11 1.3.1 Đại cương phân loại 11 1.3.2 Monotecpen 14 1.3.3 Sesquitecpen 18 1.3.4 Ditecpen 23 1.3.5 Sestertecpen 26 1.3.6 Tritecpen 26 1.4 Khö hãa b»ng phøc hydrua kim loại 31 1.4.1 Đại cương 31 1.4.2 Cơ chế phản ứng 31 Chương Các phương pháp nghiên cứu 2.1 Mẫu thực vật 33 33 2.2 Phương pháp phân lập hợp chất 33 2.3 Phương pháp xác định cấu trúc hoá học hợp chất 34 2.4 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính sinh học 34 2.4.1 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 34 2.4.2 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào 35 2.4.3 Đánh giá hoạt tính chống ôxy hóa 37 Chương Thùc nghiÖm 39 3.1 MÉu thùc vËt 39 3.2 Phân lập hợp chất 39 3.3 Hằng số vật lý số liệu phổ chất 42 3.3.1 Hỵp chÊt 42 3.3.2 Hỵp chÊt 42 3.3.3 Hỵp chÊt 43 3.3.4 Hỵp chÊt 44 3.3.5 Hỵp chÊt 44 3.3.6 Hỵp chÊt 45 3.3.7 Hỵp chÊt 45 3.3.8 Hỵp chÊt 45 3.4 Thư nghiƯm ho¹t tÝnh sinh häc 46 3.4.1 Thư nghiệm hoạt tính kháng sinh 46 3.4.2 Thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào 47 3.4.3 Đánh giá hoạt tính chống ôxy hóa 48 3.5 Tổng hợp số dẫn xuất từ chất phân lập Chương kết thảo luận 4.1 Xác định cấu trúc hoá học hợp chất 49 51 51 4.1.1 Xác định cấu trúc hoá học hợp chất 51 4.1.2 Xác định cấu trúc hoá học hợp chất 59 4.1.3 Xác định cấu trúc hoá học hợp chất 65 4.1.4 Xác định cấu trúc hoá học hợp chất 72 4.1.5 Xác định cấu trúc hoá học hợp chất 78 4.1.6 Xác định cấu trúc hoá học hợp chất 83 4.1.7 Xác định cấu trúc hoá học hợp chất 85 4.1.8 Xác định cấu trúc hoá học hợp chất 86 4.1.9 Kết xác định cấu trúc hoá học hợp chất HY-4 89 5B 6B 7B 8B 9B 10B 4.2 Kết thử hoạt tính kháng sinh học 91 4.2.1 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 91 4.2.2 Hoạt tính chống ôxy hóa hoạt tính gây độc tế bào 93 11B 12B 13B Kết luận 94 Các công trình liên quan đến luận văn 95 Tài liệu tham khảo 96 Tóm tắt luận văn 101 SummAry 103 4B Phụ lục Lời cảm ơn Luận văn thực Phòng Xúc tác hữu cơ, Viện Hoá học Hợp chất thiên nhiên, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Trong suốt trình thực luận văn này, đà nhận giúp đỡ nhiệt tình thầy cô, anh chị bạn bè Với lòng biết ơn sâu sắc xin trân trọng gửi lời cảm ơn trân thành tới: TS Trần Thu Hương, người đà giao đề tài, tận tình hướng dẫn bảo giúp đỡ hoàn thành luận văn PGS TS Châu văn Minh, Viện trưởng Viện Hoá học Hợp chất thiên nhiên, TS Phan Văn Kiệm, TS Lê Mai Hương đồng nghiệp Viện Hoá học Hợp chất thiên nhiên đà tận tình giúp đỡ trình thực luận văn Công trình hoàn thành với giúp đỡ kinh phí Chương trình hợp tác Quốc tế theo Nghị Định thư Chính phủ Việt Nam Chính phủ Italia giai đoạn 2006-2008 Hà Nội, ngày 28 tháng năm 2006 Phạm Hải Yến Những chữ viết tắt Ac Nhóm axetyl Et Nhãm etyl CC S¾c ký cét (Column Chromatography) TLC S¾c ký líp máng (Thin Layer Chromatography) Phỉ céng hưởng từ hạt nhân proton P H- NMR P (Proton Magnetic Resonance Spectroscopy) 13 P C-NMR P Phæ céng h­ëng từ hạt nhân cacbon 13 (Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy) DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer 2D-NMR Phæ céng h­ëng từ hạt nhân hai chiều (Two-Dimensional NMR) ESI-MS Phổ khối lượng phun mù điện tử Electron Spray Ionization Mass Spectrum HMBC Heteronuclear Multiple Bond Connectivity HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Coherence P H-1 H COSY P P P P H-1 H Chemical Shift Correlation Spectroscopy P P P NOESY Nucler Overhauser Effect Spectroscopy Me Nhãm metyl Mp NhiƯt ®é nóng chảy (Melting Point) [] D Độ quay cực (Specific Optical Rotation) Vsvkđ Vi sinh vật kiểm định IR Phổ hång ngo¹i (Infrared Spectroscopy) 2B R 3B 4B Danh mơc bảng 7B Bảng Một số hợp chất đà phân lập từ Trạch tả Trang 10 (Alisma plantago-aquatica L.) B¶ng 4.1.1 KÕt qu¶ phỉ NMR cđa hợp chất tham khảo 54 Bảng 4.1.2 Kết phổ NMR hợp chất tham khảo 64 Bảng 4.1.3 Kết phổ NMR hợp chÊt tham kh¶o 70 B¶ng 4.1.4 KÕt qu¶ phỉ NMR cđa 77 B¶ng 4.1.5 KÕt qu¶ phỉ NMR cđa 81 Bảng 4.1.6 Kết phổ NMR hợp chất 87 Bảng 4.2 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định chất 91 5B 0B Danh mục hình Trang Hình 1.1 Cây Trạch tả (Alisma plantago-aquatica L.) H×nh 4.1.1.a Phỉ H-NMR cđa 51 H×nh 4.1.1.b Phỉ H-NMR d·n réng cđa 51 H×nh 4.1.1.c Phỉ 13 C-NMR cđa 52 H×nh 4.1.1.d Phỉ 13 C-NMR d·n réng cđa 52 H×nh 4.1.1.e Cấu trúc hoá học 52 Hình 4.1.1.f Phổ 13 C-NMR phổ DEPT 53 H×nh 4.1.1.g Phỉ HSQC cđa 54 H×nh 4.1.1.h Phỉ HMBC cđa 56 H×nh 4.1.1.i-j Phỉ HMBC cđa 57 Hình 4.1.1.k Một số tương tác phổ HMBC cđa 58 H×nh 4.1.1.l Phỉ ESI cđa 58 Hình 4.1.2.a Cấu trúc hoá học 59 H×nh 4.1.2.b Phỉ H-NMR cđa 59 H×nh 4.1.2.c Phỉ 13 C-NMR cđa 60 H×nh 4.1.2.d Phỉ 13 C-NMR DEPT 60 Hình 4.1.2.e Phổ HSQC 61 Hình 4.1.2.f Một số tương tác phổ HMBC 62 Hình 4.1.2.g Phổ HMBC cđa 62 H×nh 4.1.2.h-i Phỉ HMBC cđa 63 H×nh 4.1.2.j Phỉ ESI cđa 64 H×nh 4.1.3.a CÊu tróc ho¸ häc cđa 66 P P P P P P P 1B P P P P P P P P P H×nh 4.1.3.b Phỉ H-NMR cđa 66 H×nh 4.1.3.c Phỉ H-NMR d·n réng cđa 67 H×nh 4.1.3.d Phỉ 13 C-NMR cđa 67 H×nh 4.1.3.e Phổ 13 C-NMR phổ DEPT 67 H×nh 4.1.3.f Phỉ HSQC cđa 68 H×nh 4.1.3.g Phỉ ESI cđa 68 H×nh 4.1.3.h Phỉ HMBC cđa 69 H×nh 4.1.3.i Phỉ ROESY cđa 72 H×nh 4.1.4.a Phỉ 1H-NMR cđa 73 H×nh 4.1.4.b Phỉ 13 C-NMR cđa 73 H×nh 4.1.4.c Phỉ 13 C-NMR cđa 74 H×nh 4.1.4.d Phỉ DEPT cđa 74 H×nh 4.1.4.e Phỉ HSQC cđa 74 H×nh 4.1.4.f Phỉ HMBC 75 Hình 4.1.4.g Cấu trúc hoá học 76 H×nh 4.1.4.h Phỉ ESI-MS cđa 76 H×nh 4.1.5.a Phỉ 1H-NMR cđa 78 H×nh 4.1.5.b Phỉ 13 C-NMR cđa 78 H×nh 4.1.5.c Phỉ DEPT cđa 79 H×nh 4.1.5.d Phỉ HSQC cđa 79 H×nh 4.1.5.e Phỉ H-H COSY cđa 80 H×nh 4.1.5.f CÊu tróc hoá học 80 Hình 4.1.5.g Phổ ESI 81 H×nh 4.1.5.h Phỉ HMBC cđa 82 H×nh 4.1.6.a Phỉ H-NMR cđa 83 H×nh 4.1.6.b Phỉ 13 C-NMR cña 84 P P P P P P P P P P P P P P P P P P P 6B P P P P P P P H×nh 4.1.8.b Phỉ H-NMR cđa P P H×nh 4.1.8.c Phỉ 13 C-NMR cđa P P Bảng 4.1.6 Kết phổ NMR hợp chất C δC R δ C [33] R R R 37,27 (125MHz) 37,67 δ H (500MHz) R R 31,64 32,05 71,77 72,19 42,29 42,70 140,76 141,17 121,69 122,50 31,92 32,32 31,92 32,32 50,15 50,55 10 36,51 36,91 11 21,10 21,49 12 39,80 40,19 13 42,33 42,73 14 56,78 57,18 15 24,31 24,71 16 28,25 28,65 17 56,08 56,48 18 11,89 12,26 0,68 (3H, s) 19 19,39 19,79 1,01 (3H, s) 20 36,15 36,55 21 18,80 19,18 22 33,96 34,36 23 26,11 26,51 24 45,85 46,25 25 29,18 29,57 26 19,82 20,24 0,83 (3H, d, J = 7,3 Hz) 27 19,05 19,44 0,81 (3H, d, J = 6,8 Hz) 28 23,08 23,48 3,54 (tt, J = 5,1, 11,7 Hz) 5,37 (br d, J = 5,1 Hz) 0,92 (3H, d, J = 6,5 Hz) 29 11,99 a P 12,39 0,84 (3H, t, J = 7,5 Hz) §o CDCl b 125MHz c 500MHz P R R P P P P Phæ 13 C-NMR cho thÊy cã 29 cabon Nh­ vËy, hỵp chÊt nµy lµ mét steroit cã P P mét nèi đôi nhóm hydroxyl So sánh kiện phỉ NMR cđa víi hỵp chÊt β-sitosterol [33] thÊy kết so sánh trùng khớp Từ kiện nêu trên, hợp chất nhận dạng -sitosterol (Bảng 4.1.8) 4.1.9 Kết xác định cấu trúc hoá học hợp chất HY-4 Hợp chất HY-4 nhận từ sản phẩm phản ứng khử alisol A (1) với tác nhân NaBH Trên phổ NMR (1 H-NMR 13 C-NMR) đà xuất hiƯn thªm tÝn R R P P P P hiƯu cđa nhãm oximetin thay cho nhãm cacbonyl t¹i C-3 (δ H 3,28, 1H, dd, R R J H2e-H3a = 6,0, J H2a-H3a =11,5 Hz, C 79,30) Kết cho thấy sản phẩm R R R R R R phản ứng khử đà tạo thành Sự tạo thành nhóm hydroxyl C-3 thay cho nhóm cacbonyl làm thay đổi độ dịch chuyển hoá học cacbon proton vòng A, điển hình C-2 (δ C 29,6/33,7 (1), ∆ = -4,1 ppm) C-4 R R (δ C 39,4/46,9 (1), ∆ = -7,6 ppm) C-28/C-29 Căn vào số tương R R t¸c J cđa H-3 (J H2e-H3a = 6,0, J H2a-H3a =11,5 Hz) khẳng định R R R R proton H-3 n»m ë vÞ trÝ cã cÊu h×nh axial (α) hay nhãm OH sÏ cã cÊu hình equatorial () So sánh liệu phổ HY-4 với (alisol A) khẳng định hợp chất HY-4 dihydroalisol A OR OH OH HO OH OH HO NaBH4/MeOH O HO H×nh 4.1.9.a Sơ đồ phản ứng khử alisol A (1) Hình 4.1.9.b Phỉ H-NMR cđa HY-4 P P OH H×nh 4.1.9.c Phỉ 13 C-NMR cđa HY-4 P P H×nh 4.1.9.d Phỉ 13 C-NMR cđa HY-4 P P 4.2 KÕt qu¶ thư hoạt tính kháng sinh học 4.2.1 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định Hoạt tính kháng VSVKĐ tiến hành theo phương pháp Vander Bergher Vlietlinck (1991)[15] mô tả mục 2.4 Kết thử nghiệm hoạt tính kháng VSVKĐ bảng 4.2 Bảng 4.2 Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định chất Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC: µg/ml) KÝ hiÖu STT mÉu* Vi khuÈn Gr (-) Vi khuÈn Gr (+) NÊm mèc P E.coli aeruginosa B.subtillis S.aureus Asp.niger NÊm men F.oxysporum S.cerevisiaeC.albicans AP2A (-) (-) (-) 50 50 50 (-) (-) AP7A 50 (-) (-) (-) 12.5 25 50 (-) AP8A (-) (-) 50 50 25 50 (-) (-) AP11A 50 (-) 50 50 12.5 50 (-) (-) AP18A (-) (-) (-) (-) 12.5 50 50 (-) AP9G (-) (-) (-) 50 12.5 50 (-) (-) AP19C (-) (-) (-) 50 12.5 12.5 (-) (-) HY1 (-) (-) 25 25 12.5 (-) (-) (-) HY4 50 (-) 25 25 12.5 (-) (-) (-) * Axit oleic metyl este (AP2A), axit oleic (AP7A), alisol G (AP8A), alisol A (AP11A), alismoxide (AP18A), alisol A 24 axetat (AP9G), pinoresinol (AP19C), dihydroalisol A (HY4) Kết cho thấy: + Hợp chất AP2A kháng vi khuẩn gram dương S.aureus, nấm mốc Asp.niger F.oxysporum với nồng độ ức chế tối thiểu 50 àg/ml + Hợp chất AP7A kháng vi khuẩn gram âm E coli (IC 50 =50 àg/ml), R kháng hai chñng nÊm mèc Asp.niger (IC 50 =12,5 R R R µg/ml), vµ F.oxysporum(IC 50 =25 µg/ml), R vµ kh¸ng nÊm men S cerevisia (IC 50 =50 R R R µg/ml) + Hợp chất AP8A kháng kháng hai chủng vi khuẩn subtillis Gr (+) lµ B vµ S aureus (IC 50 =50 àg/ml) kháng hai chủng nấm mốc R R Asp.niger (IC 50 = 25 µg/ml) vµ F.oxysporum (IC 50 =50 àg/ml) R R R R + Hai hợp chất AP11A HY-4 có hoạt tính kháng vi khuÈn Gr (-) lµ E.coli vµ Gr (+) lµ B.subtillis S.aureus với giá IC 50 thấp 50 R R àg/ml + Các hợp chất AP9G AP19C kháng vi khuẩn Gr (+) S aureus hai chủng nấm mốc Hợp chất AP18A kháng hai nhđng nÊm mèc vµ mét chđng nÊm men Kết cho thấy đa số hợp chất phân lập có hoạt tính kháng VSVKĐ, tức chúng có hoạt tính kháng sinh cao Kết lý giải Trạch tả dùng nhiều thuốc cổ truyền dân tộc để trị bệnh viêm nhiễm, đường tiêu hoá 4.2.2 Hoạt tính chống ôxy hoá hoạt tính gây độc tế bào Các hợp chất 1-8 HY-4 đà thử nghiệm hoạt tính chống oxi hoá hoạt tính gây độc tế bào hai dòng tế bào ung thư người theo phương pháp mô tả mơc 2.4 KÕt qu¶ thư nghiƯm cho thÊy tÊt mẫu thử cho âm tính Kết luận Bằng phương pháp sắc ký kết hợp, hợp chất alisol A, alisol A 24axetat, alisol G, alismoxit, (+) 2,6-bis(4’-hydroxy-3’-metoxy-phenyl)-3,7dioxabicyclo[3,3,0]octan (Pinoresinol), axit oleic, metyl este cña axit oleic, -sitosterol đà phân lập từ dịch chiết metanol Trạch tả Trong đó, alismoxit hợp chất lần đầu phân lập từ Trạch tả Việt Nam Bằng phản ứng khử với tác nhân NaBH đà tổng hợp dihydroalisol A R R Cấu trúc hợp chất xác định phương pháp phổ đại phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (1 H-NMR, 13 C-NMR, P P P P DEPT 90 o , DEPT 135 o ), phổ cộng hưởng từ hạt nhân hai chiÒu (1 H-1 H P P P P P P P P COSY, HMQC, HMBC) phổ khối lượng phun mù điện tử (ESI-MS) Đà thử hoạt tính sinh học hợp chất nêu bao gồm: hoạt tính kháng sinh, hoạt tính chống ôxy hóa độc tính tế bào Kết thử nghiệm cho thấy hầu hết hợp chất thể hoạt tính kháng sinh tốt, mạnh hợp chất alisol A, alisol G dihydroalisol A Tuy nhiên kết thử nghiệm cho thấy hợp chất thể hoạt tính chống oxy hóa độc tế bào Các công trình đà công bố liên quan đến luận văn Phan Văn Kiệm, Phạm Hải Yến, Trần Thu Hương, Châu Văn Minh, Alessandra Braca, Nghiên cứu thành phần hoá học trạch tả (Alisma plantago-aqua L var orientalis Samuelsso, Tạp chí Dược học, Số 8, tr 7-10 (2006) Chau Van Minh, Phan Van Kiem, Pham Hai Yen, Tran Thu Huong, Alessandra Braca, Protostane-Type triterpenes from the rhizomes of Alisma plantago-aquatica, Vietnamese Journal of Chemistry, 2006 (accepted) Tài liệu tham khảo ã Tiếng Việt: Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim MÃn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2004), Cây thuốc động vËt lµm thc ë ViƯt Nam, tËp 2, Nhµ xt Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Phan Đình Châu (2003), Các trình tổng hợp hoá dược hữu cơ, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội Đỗ Tất Lợi (2001), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học , Hà Nội Là Đình Mỡi, Trần Minh Hợi, Dương Đức Huyến, Trần Huy Thái, Ninh Khắc Bản (2005), Tài nguyên thực vật Việt Nam chứa hợp chất có hoạt tính sinh học, tập 1, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Phan Tống Sơn (1986), Hoá học Tecpen Tecpenoid, ĐHTH Hà Nội - ĐHTH Amsterdam, Amsterdam Phan Tống Sơn, Lê Đăng Doanh (1976), Thực hành hoá học hữu cơ, Tập 1, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Phan Tống Sơn, Lê Đăng Doanh (1977), Thực hành hoá học hữu cơ, Tập 2, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Trần Quốc Sơn (1979), Cơ chế phản ứng, Tập 2, Nhà xuất giáo dục 10 Ngô Thị Thuận (2001), Thực tập hóa học hữu cơ, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội ã Tiếng Anh: 11 Viqar Uddin Ahmad and Atta-ur-Rahman, Handbook of natural products data, volume -1 Pentacylic Triterpenoids, H E J Reseach P P Institute of chemistry university of Karachi, Karachi, Pakistan 12 Viqar Uddin Ahmad and Atta-ur-Rahman, Handbook of natural products data, volume -2 Pentacylic Triterpenoids, H E J Reseach P P Institute of chemistry university of Karachi, Karachi, Pakistan 13 Huei-Wen Chen, Ming-Jen Hsu, Chiang-Ting Chien and Huei-Chen Huang (2001), “Effect of alisol B acetate, aplant triterpene, on apoptosis in vascular smooth muscle cells and lymphocytes”, European Journal of Pharmacology, Vol 419, issues 2-3, pp 127-138 14 Do Huy Bich, Nguyen Tap, Tran Toan (1999), Selected medicinal plants in Viet Nam, Volume 2, Science and technology publishing house, Ha Noi 15 Likhitwitayawuid K., Angerhofer C K., Cordell G A and Pezzuto J M (1993), “Cytotoxic and antimalarial bisbenzylisoquinoline alkaloids from Stephania erecta” J Nat Prod., Vol 56, pp 30-38 16 SangMyung Lee, ByungSun Min, and KiHwuan Bae (2001), “Cytotoxic triterpenoid from Alisma Rhizoma”, Arch Pharm Res, Vol 24, No 6, pp 524-526 17 SangMyung Lee, ByungSun Min, and KiHwuan Bae (2002), “Chemical modification of Alisol B 23-acetate and their cytotoxic activity”, Arch Pharm Res, Vol 25, No 5, pp 608-612 18 Goad J L and Akihisa T (1997), “Analysis of sterols”, Blackie Academic and Professional Pub., First edition, pp.378 19 Sang M L., Jung H K., Ying Z., Ren B A., Byung S M., Hyouk J., and Hyeong K L (2003), “Anti-complementary activity of protostanetype triterpenes from Alismatis Rhizoma”, Arch Pharm Res, Vol 26, No 6, pp 463-465 20 Sang M L., Jong S K., Gwi S H., Young H K., Cheal G L., Woon H Y., and Ki H B (2004), “Quality evaluation of Alismatis Rhizoma by high performance liquid chromatography”, Arch Pharm Res, Vol 27, No 4, pp 460-464 21 Tadakazu M., Masakazu S., and Masuo M (1970), “Biological – Active Triterpenes of Alismatis Rhizoma IV The structures of Alisol B, Alisol B monoacetate Alisol C monoacetate – some reactions of the α- hydroxy epoxide of the Alisol B derivative ”, Chem Pharm Bull., Vol 18, No 7, pp 1369-11384 22 David J.Matthews, Bridget M.Moran and Marinus L Otte (2005), “Screening the wetland plant species Alisma plantago-aquatica, Carex rostrata and Phalaris arundinacea for innate tolerance to zinc and compairison with Eriophorum angustifolium and Festuca rubra Merlin”, Environmental Pollution, Vol 134, issue 2, pp 343-351 23 Hisashi M., Tadashi K., Iwao T., Toshiyuki M., Akinobu K., and Masyuki Y (1999), “Effects of sesquiterpenes and triterpenes from the rhizome of Alisma orientale on nitric oxide production in lipopolysaccharide-activated macrophages: Absolute stereostructures of alismaketones-B 23-acetate and – C 23-acetate”, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, Vol 9, issue 21, pp 3081-3086 24 Yoshijiro Nakajima, Yohko Satoh, Masumi Katsumata, Kazuko Tsujiyama, Yoshiteru Ida and Junzo Shoji (1994), “Terpenoids of Alisma orientale and the crude drug Alismatis rhizoma”, Phytochemistry, Vol 36, No 1, pp 119-127 25 Yoshijiro Nakajima, Yohko Satoh, Masumi Katsumata (nee Ohtsuka), Kazuko Tsujiyama (nee Mikoshiba), Yoshiteru Ida and Junzo Shoji, (1994), Phytochemistry, Vol 26, Issue 1, pp 119 – 127 26 Yoshiteru Oshima, Tsuneo Iwakawa, and Hiroshi Hikino (1983), “Alismol and Alismoxide, sesquiterpenoid of Alisma Rhizomes”, Phytochemistry, Vol 22, No 1, pp 183-185 27 Guo-Ping Peng, Feng-Chang Lou, Xian-Feng Huang and Gang Tian (2002), “Structure of orientanone from Alisma orientalis, a novel sesquiterpene originating from guaiane-type carbon skeleton by isopropyl shift”, Tetrahedron, Vol 58, issue 44, pp 9045-9048 28 Guo-Ping Peng, Gang Tian, Feng-Chang Lou, and Xian-Feng Huang (2003), “Guaiane-type sesquiterpenoids from Alisma orientalis”, Phytochemistry, Vol 63, issue 8, pp 877-881 29 F.M Patrick and M.W.Loutit, (1977), “The uptake of heavy metals by epiphytic bacteria on Alisma plantago-aquatica”, Water Research, Vol 11, Issue 8, pp 699-703 30 Barbara Vermes, Oto Seligmann and Hildebert Wagner (1991), “Synthesis of Biologically active tetrahydro-furofuranlignan-(Syringin, Pinoresinol)-monosaccarit and Bis-glucosides”, Phytochemistry, Vol 30, No 9, pp 3087-3089 31 Barbara Vermes, Oto Seligmann and Hildebert Wagner (1991), “Synthesis of Biologically active tetrahydro-furofuranlignan-(Syringin, Pinoresinol)-monosaccarit and Bis-glucosides”, Phytochemistry, Vol 30(9), pp 3087-3089 32 Masayuki Yoshikawa, Shoko Hatakeyama, Nobumitsu Tanaka, Youichi Fukuda, and Johji Yamahara (1992), “Orientalols A, B, and C, sesquiterpene constituents from chinese alismatis rhizoma, and revised structures of alismol an alismoxide”, Chem Pharm Bull, Vol 40, No 9, pp 2582-2584 33 Geng Pei-Wu, Yoshiyasu fukuyama, Wang Rei, Bao Jinxian and Kazuyuki Nakagawa, (1988), “An acylated sitosterol glucoside from Alisma plantago-aquatica”, Phytochemistry, Vol 27, Issue 6, pp 18951896 34 Masayuki Yoshikawa, Shoko Yamaguchi, Hisashi Matsuda, Yuku Kohda, Hifumi Ishikawa, Nobumitsu Tanaka, Johji Yamahara and Nobutoshi Murakami (1994), “Crude drugs from Aquatic plants IV On the constituents of Alismatis rhizoma (2) Stereostructures of Bioactive sequiterpenes, Alismol, Alismoxide, Orientalols A, B and C, from Chinese Alismatis rhizoma”, Chem Pharm Bull., Vol 42, No 9, pp 1813-1816 35 Masayuki Yoshikawa, Shoko Hatakeyama, Nobumitsu Tanaka, Youichi Fukuda, Johji Yamahara and Nobutoshi Murakami (1993), “Crude drugs from Aquatic plants I On the constituents of Alismatis rhizoma (1) Absolute stereostructures of Alisols E 23-acetate, F, and G, three new Protostane-type triterpenes from Chinese Alismatis rhizoma”, Chem Pharm Bull., Vol 41, No 11, pp 1948-1954 36 Vander B D A and Vlientinick A J (1991), Methods in plant biochemistry, vol pp 47-68 37 Barbara Vermes, Oto Seligmann and Hildebert Wagner, Synthesis of Biologically active tetrahydro-furofuranlignan-(Syringin, Pinoresinol)monosaccarit and Bis-glucosides, Phytochemistry, 30(9),3087-3089 (1991) ... biệt Theo hướng nghiên cứu trên, Luận văn tập trung nghiên cứu, phân l? ??p hợp chất Trạch tả (Alisma plantago- aquatica L. ) cã ho¹t tÝnh sinh häc cao nh»m t¹o sở cho nghiên cứu l? ?nh vực tìm kiếm phương... hai loài dùng l? ?m thuốc Trạch tả (A plantago - aquatica L. ) loài A canaliculatum Braun et Bouché có Triều Tiên Cây Trạch tả có nhiều Trung Quốc, Nhật Bản, Triều Tiên Việt Nam Cùng với quần thể Trạch. .. monoaxetat, alisol C monoaxetat, epi alisol A Ngoài Trạch tả chứa alismol, alismoxit, alimalacton 23-axetat, alismaxeton-A, β-Sitosterol-3-O-sterat, Tricosan, β-Sitosterol, axit stearic, glyceryl-1-stearat,