Nghiên cứu xác định phương pháp phá vỡ tế bào nấm men để thu được dịch chiết có khả năng chống oxy hóa

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM  NGUYỄN THỊ LOAN NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP PHÁ VỠ TẾ BÀO NẤM MEN ĐỂ THU ĐƢỢC DỊCH CHIẾT CÓ KHẢ NĂNG CHỐNG OXY HÓA ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Th.S PHẠM HỒNG NGỌC THÙY Nha Trang – 2014 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan tồn nội dung thực đồ án kết nghiên cứu thân, không chép kết nghiên cứu người khác Tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm có gian dối Ngƣời cam đoan Nguyễn Thị Loan ii LỜI CẢM ƠN Để hồn thành đợt thực tập ngồi nỗ lực khơng ngừng thân em nhận nhiều giúp đỡ từ gia đình, thầy bạn bè Trước hết em xin gửi tới Ban Giám Hiệu trường Đại Học Nha Trang, Ban Chủ Nhiệm khoa Cơng Nghệ Thực Phẩm, Phịng Đào tạo Đại học niềm kính trọng, tự hào học tập tường năm qua Sự biết ơn sâu sắc em xin giành cho cô Phạm Hồng Ngọc Thùy – người tận tình truyền đạt kiến thức trình học tập trực tiếp hướng dẫn, bảo kinh nghiệm quý báu để em hoàn thành tốt đồ án tốt nghiệp Em xin bày tỏ lịng biết ơn, tơn trọng đến Thầy Vũ Ngọc Bội – chủ nhiệm khoa Công Nghệ Thực Phẩm, thầy cô khoa Công Nghệ Thực Phẩm, thầy phụ trách phịng thí nghiệm Bộ mơn Cơng nghệ thực phẩm, Bộ mơn Hóa – Vi sinh cho em lời khuyên quý báu tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt thời gian thực tập Đặc biệt xin ghi nhớ tình cảm, giúp đỡ nhiệt tình Nguyễn Thị Thanh Hải thầy Nguyễn Xuân Duy suốt thời gian em thực đồ án Xin chân thành cảm ơn bạn nhiệt tình giúp đỡ suốt thời gian thực tập Cuối xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bố mẹ anh chị em thân yêu tạo điều kiện, động viên khích lệ vượt qua khó khăn q trình học tập vừa qua Sinh viên Nguyễn Thị Loan iii MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH v DANH MỤC KÍ HIỆU VIẾT TẮT vi LỜI MỞ ĐẦU CHƢƠNG I: TỔNG QUAN VỀ LÝ THUYẾT .3 1.1 Nấm men 1.1.1 Giới thiệu nấm men [5]: .3 1.1.2 Phân loại nấm men [5]: 1.1.3 Hình thái cấu tạo tế bào nấm men [2],[5]: 1.1.4 Thành phần hóa học tế bào nấm men [5] 13 1.2 Q trình oxy hóa 14 1.2.1 Gốc tự 14 1.2.2 Chất chống oxy hóa 16 1.2.3 Một số chất chống oxy hóa thực phẩm [3] .17 Hình 1.5 Cơng thức cấu tạo axit phytic .19 Hình 1.6: Cơng thức cấu tạo tanin 19 1.2.4 Chất chống oxy hóa nấm men 20 1.3 Một số phương pháp phá vỡ tế bào 22 1.4 Một số phương pháp đánh giá hoạt tính chống oxy hóa áp dụng phổ biến26 1.4.1 In vitro 26 1.3.1 In vivo 29 1.5 Tình hình nghiên cứu nước 31 1.5.1 Tình hình nghiên cứu nước[32] .31 1.5.2 Tình hình nghiên cứu ngịai nước [32] 32 CHƢƠNG II: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.1 Đối tượng nghiên cứu : .33 2.2.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm tổng quát 34 2.2.2 Bố trí thí nghiệm xác định thời gian nghiền thích hợp để thu dịch chiết nấm men có hoạt tính chống oxy hóa cao 35 iv 2.2.3 Bố trí thí nghiệm xác định thời gian đồng hóa thích hợp để thu dịch chiết nấm men có hoạt tính chống oxy hóa cao 37 2.2.4 Bố trí thí nghiệm xác định nồng độ ethanol sử dụng để chiết nấm men 39 2.2.7 Hóa chất 41 2.3 Phương pháp xử lý số liệu 41 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 4.1 Kết luận 59 4.2 Đề xuất ý kiến 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO 60 v DANH MỤC HÌNH Hình 1: Tỉ lệ phá vỡ tế bào nấm men khơ phƣơng pháp nghiền bi đồng hóa 42 Hình 2: Tỉ lệ phá vỡ tế bào nấm men tƣơi phƣơng pháp nghiền bi đồng hóa 43 Hình 3: Ảnh hƣởng thời gian nghiền bi đến giá trị IC50 dịch chiết nấm men khô 44 Hình 4: Ảnh hƣởng thời gian nghiền bi đến giá trị IC50 dịch chiết nấm men tƣơi 45 Hình 5: Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến giá trị IC50 DPPH dịch chiết nấm men khô 46 Hình 6: Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến giá trị IC50 dịch chiết nấm men tƣơi 47 Hình 7: Ảnh hƣởng thời gian nghiền tới hàm lƣợng polyphenol dịch chiết nấm men khô 48 Hình 8: Ảnh hƣởng thời gian nghiền tới hàm lƣợng polyphenol dịch chiết nấm men tƣơi 49 Hình 9: Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa tới hàm lƣợng polyphenol dịch chiết nấm men khô 50 Hình 10: Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa tới hàm lƣợng polyphenol dịch chiết nấm men tƣơi 51 Hình 11: Ảnh hƣởng thời gian nghiền tới hàm lƣợng protein hịa tan dịch chiết nấm men khơ 52 Hình 12: Ảnh hƣởng thời gian nghiền tới hàm lƣợng protein hòa tan dịch chiết nấm men tƣơi 53 Hình 13: Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa tới hàm lƣợng protein hịa tan dịch chiết nấm men khô 54 Hình 14: Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa tới hàm lƣợng protein hòa tan dịch chiết nấm men tƣơi 55 Hình 15: Ảnh hƣởng nồng độ ethanol đến giá trị IC50 dịch chiết nấm men 58 vi DANH MỤC KÍ HIỆU VIẾT TẮT Kí hiệu viết tắt Diễn giải DPPH 2,2 diphenyl-1picrylhydrazyl GTTB UV – Vis Giá trị trung bình Số lượng tb/ml Số lượng tế bào/ml Ultraviolet – visible spectroscopy LỜI MỞ ĐẦU Khi xã hội ngày phát triển, người phải đối mặt với nguy mắc bệnh mãn tính nguy hiểm tình trạng nhiễm mơi trường, stress, tiếp xúc với hóa chất độc hại Nhiều nghiên cứu dịch tễ học việc sử dụng thường xuyên chất kháng oxy hóa tự nhiên có khả ngăn ngừa bệnh nguy hiểm tim mạch hay ung thư [25] Con người ngày nhận thức rõ tầm quan trọng thực phẩm tự nhiên việc phịng chống bệnh tật Vì chất kháng oxy hóa tự nhiên ngày thu hút quan tâm người tiêu dùng nhà khoa học Theo công bố nhà khoa học họp thường niên Washington cho thấy nấm nguồn dưỡng chất tự nhiên quan trọng, chống oxy hóa cao Việc sản xuất nấm men khơng bị ảnh hưởng thời tiết, khí hậu, q trình cơng nghệ dễ hóa tự động hóa, chi phí lao động ít, sử dụng nguồn nguyên liệu rẻ tiền (phế phẩm phụ phẩm nghành khác rỉ đường, nấm men bia, dịch kiềm sulfit, paraffin dầu mỏ…) hiệu suất chuyển hóa cao Nấm men sinh sản nhanh chóng với sinh khối giàu protein, vitamin, acid amin peptit [5][22]… nên việc tái sử dụng nguồn sinh khối nấm men ,sản xuất nấm men công việc cần thiết triển khai phổ biến năm gần Hiện nay, nguồn nấm men dùng làm thức ăn cho gia súc chủ yếu, phần lại đem thải bỏ theo kết nghiên cứu Nguyễn Hồng Ngân (2012), Anusha cộng (1986) protein hịa tan, peptit ngắn mạch, axit amin số vitamin có khả chống oxy hóa[4][8], tế bào nấm men giàu protein, peptit, axit amin, vitamin màng glucan tế bào nấm men dai nên khó để phá vỡ tế bào nấm men Do để thu protein, peptit, axit amin chất có khả chống oxy hóa có tế bào nấm men em thực đề tài “Nghiên cứu xác định phương pháp phá vỡ tế bào nấm men để thu dịch chiết có khả chống oxy hóa ” Mục đích đề tài Nghiên cứu phương pháp phá vỡ tế bào để thu dịch chiết có khả chống oxy hóa Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu phá vỡ tế bào nấm men phương pháp nghiền phương pháp đồng hóa để thu dịch chiết có khả chống oxy hóa - Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ cồn chiết tế bào nấm men đến khả chống oxy hóa dịch chiết Ý nghĩa đề tài Ý nghĩa khoa học: - Bổ sung nguồn tài liệu nấm men, khả chống oxy hóa dịch chiết nấm men - Là sở cho nghiên cứu chuyên sâu Ý nghĩa thực tiễn: - Đề xuất phương pháp phá vỡ tế bào nấm men để thu dịch chiết có hoạt tính chống oxy hóa để ứng dụng vào ngành công nghệ thực phẩm, dược phẩm - Tận dụng nguồn nấm men thải bỏ từ trình sản xuất bia - Đưa phương pháp để phá vỡ tế bào nấm men thích hợp Do điều kiện thí nghiệm thời gian nghiên cứu hạn chế nên đề tài khơng tránh khỏi thiếu sót, mong nhận góp ý qúy thầy để đề tài hoàn chỉnh Em xin chân thành cảm ơn Nha Trang, ngày tháng năm 2014 Sinh viên thực Nguyễn Thị Loan CHƢƠNG I: TỔNG QUAN VỀ LÝ THUYẾT 1.1 Nấm men 1.1.1 Giới thiệu nấm men [5]: Nấm men (yeast) tên chung để nhóm nấm thường có cấu tạo đơn bào và thường sinh sản vơ tính cách nảy chồi Phần lớn loại nấm men thuộc ngành nấm túi (Ascomycota), số loài thuộc ngành nấm đảm (Basidiomycota) Nấm men phân bố rộng rãi tự nhiên: đất, nước, lương thực thực phẩm, rau Đặc biệt, chúng diện nhiều đất trồng nho ăn Nấm men sinh sản nhanh chóng, sinh khối giàu protein vitamin chúng sử dụng rộng rãi công nghiệp chế biến thức ăn bổ sung cho người gia súc Nấm men dùng làm nở bột mì, gây hương nước chấm, làm dược phẩm, lên men rượu Nấm men người sử dụng từ lâu, trước chữ viết đời Những chữ viết tượng hình cổ xưa cho thấy người Ai Cập cổ xưa sử dụng nấm men cho lên men rượu từ cách 5000 năm Tuy nhiên vào thời người chưa hiểu chế sinh học q trình lên men, chí người Ai Cập cổ xưa cho tượng siêu nhiên Người ta cho quy trình lên men rượu nhiễm vi sinh vật tự nhiên vào bột, ngũ cốc từ trái có chứa đường Quần thể vi sinh vật bao gồm nấm men vi khuẩn lên men lactic tìm thấy đại mạch trái Chất men kinh thánh coi dạng bột nhão Người ta sử dụng phần bột để lên men mẻ rượu Sau thời gian người biết lựa chọn mẻ lên men tốt giữ lại cho lần lên men Mãi kính hiển vi đời, nấm men định nghĩa vi sinh vật sống tác nhân trình lên men rượu Một thời gian ngắn sau 89 10.00 2.6189 Sig .067 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Bảng PL2 23: Sự khác biết có ý nghĩa thống kê GTTB nghiên cứu khảo sát ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng polyphenol (nấm men khô) 2.11 Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa tới hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men khô Thời gian Hàm lƣợng polyphenol (mg galilic đồng hóa (phút) acid/g nấm men) GTTB ± sd Lần Lần Lần 0,8921 0,9191 0,8921 0,9011±0.0156a 1,4658 1,4238 1,4258 1,4418±0,0217b 10 1,6545 1,5262 1,8251 1,6686±0,1499bcd 15 1,7887 1,8001 1,8593 1,8161±0,0379cd 20 1,9371 1,7250 2,0564 1,9062±0,1678d 30 1,5598 1,8593 1,2432 1,5541±0,3081bc 90 Bảng PL2 24: Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men khô ANOVA Hamluongpolyphenol Sum of Mean Squares Between Groups df Square 1.933 387 Within Groups 295 12 025 Total 2.229 17 F Sig 15.708 000 Bảng PL2 25: Kết phân tích ANOVA khảo sát ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men khơ Hamluongpolyphenol Duncan Subset for alpha = 05 Thoigiandonghoa N 00 9011 5.00 1.4418 30.00 1.5541 1.5541 91 10.00 15.00 20.00 Sig 1.6686 1.6686 1.6686 1.8161 1.8161 1.9062 1.000 117 075 102 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Bảng PL2 26: Sự khác biết có ý nghĩa thống kê GTTB nghiên cứu khảo sát ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men khô 2.12 Ảnh hƣởng thời gian nghiền tới hàm lƣợng polyphenol dịch chiết nấm men tƣơi Thời Hàm lƣợng polyphenol (mg galilic acid/g nấm men) gian nghiền GTTB ± sd Lần Lần Lần 0,8993 1,2258 0,4034 0,8428±0.0414a 1,1246 1,1931 1,0985 1,1387±0,0489ab 10 1,2255 1,1192 1,3174 1,2207±0,0992ab 15 1,2267 1,3009 1,2138 1,2471±0,047ab 20 1,2261 1,1928 1,3973 1,2721±0,1097b 30 1,6229 1,8902 2,1738 1,8957±0,2755c (phút) 92 Bảng PL2 27: Ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men tƣơi ANOVA Hamluongpolyphenol Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 1.782 356 548 12 046 2.330 17 F Sig 7.810 002 Bảng PL2 28: Kết phân tích ANOVA khảo sát ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men tƣơi Hamluongpolyphenol Duncan Subset for alpha = 05 Thoigiannghien 00 5.00 N 8428 1.1387 1.1387 93 10.00 1.2207 1.2207 15.00 1.2471 1.2471 20.00 30.00 Sig 1.2721 1.8957 052 492 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Bảng PL2 29: Sự khác biết có ý nghĩa thống kê GTTB nghiên cứu khảo sát ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men tƣơi 2.13 Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa tới hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men tƣơi Thời Hàm lƣợng polyphenol (mg galilic gian đồng hóa (phút) acid/g nấm men) GTTB ± sd Lần Lần Lần 0,9059 1,0922 0,8918 0,9633±0.1118a 1,0588 1,0255 1,1742 1,0861±0,0780ab 10 1,2264 1,1988 1,1360 1,1871±0,0463b 15 1,0002 1,1243 1,1.1339 1,0861±0,0746ab 20 1,1008 1,0988 1,1033 1,1003±0,0045ab 30 1,2264 1,5595 1,3484 1,3781±0,1685c 94 Bảng PL2 30: Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men tƣơi ANOVA Hamluongpolyphenol Sum of Mean Squares df 291 058 Within Groups 109 12 009 Total 401 17 Between Groups Square F Sig 6.386 004 Bảng PL2 31: Kết phân tích ANOVA khảo sát ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men tƣơi Hamluongpolyphenol Duncan Subset for alpha = 05 Thoigiandonghoa N 00 9633 5.00 1.0861 1.0861 15.00 1.0861 1.0861 95 20.00 10.00 30.00 1.1033 1.1033 1.1871 1.3781 Sig .121 253 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Bảng PL2 32: Sự khác biết có ý nghĩa thống kê GTTB nghiên cứu khảo sát ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến hàm lƣợng polyphenol có dịch chiết nấm men tƣơi 2.14 Ảnh hƣởng thời gian nghiền tới hàm lƣợng protein hịa tan có dịch chiết nấm men khô Thời gian nghiền (phút) Hàm lƣợng protein hòa tan(%) Lần GTTB ± sd Lần Lần 20,0453 20,0092 20,0028 20,0191±0.0229a 23,2739 23,1486 23,1784 23,2003± 0.0655b 10 20,5614 20,5402 20,5062 20,5359±0,0279c 15 23,9643 24,0237 23,8092 23,9324±0,1108d 20 23,3929 23,4694 23,4439 23,4254±0,0389e 96 30 18,4033 18,4734 18,4076±0,0638f 18,3459 Bảng PL2 33: Ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng protein hòa tan (nấm men khô) ANOVA Hamluongprotein Sum of Mean Squares Between Groups df Square 75.576 15.115 Within Groups 047 12 004 Total 75.623 17 F Sig 3867.960 000 Bảng PL2 34: Kết phân tích ANOVA khảo sát ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng protein hòa tan có dịch chiết nấm men khơ Hamluongprotein Duncan Subset for alpha = 05 Thoigianng hien N 97 30.00 00 10.00 5.00 20.00 15.00 Sig 18.4076 20.0191 20.5360 23.2003 23.4354 23.9324 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Bảng PL2 35: Sự khác biết có ý nghĩa thống kê GTTB nghiên cứu khảo sát ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng protein hịa tan có dịch chiết nấm men khô 2.15 Ảnh hƣởng thời gian nghiền tới hàm lƣợng protein hịa tan có dịch chiết nấm men tƣơi Thời gian nghiền Hàm lƣợng protein hòa tan(%) GTTB ± Sd Lần Lần Lần 13,8482 13,8739 13,9317 13,8846±0.0428a 21,6716 21,6395 21,5945 21,6352± 0.0387b 10 16,1798 16,1863 16,1220 16,1627±0,0354c 15 15,7623 15,6146 15,6018 15,6596±0,0892d 20 17,8241 17,8691 17,9205 17,8713±0,0482e (phút) 98 30 15,8458 15,7880 15,7495 15,7944±0,0485f Bảng PL2 36: Ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng protein hịa tan có nấm men tƣơi ANOVA Hamluongprotein Sum of Between Groups Within Groups Squares df Mean Square 107.210 21.442 12 003 034 Total 107.245 F 7472.105 Sig .000 17 Bảng PL2 37: Kết phân tích ANOVA khảo sát ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng protein có dịch chiết nấm men tƣơi Hamluongprotein Duncan Thoigiannghien N Subset for alpha = 05 99 00 15.00 30.00 10.00 20.00 5.00 3 13.8846 15.6596 15.7944 16.1627 17.8712 21.6352 Sig 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Bảng PL2 38: Sự khác biết có ý nghĩa thống kê GTTB nghiên cứu khảo sát ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng protein hịa tan có dịch chiết nấm men tƣơi 2.16 Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa tới hàm lƣợng protein hịa tan có dịch chiết nấm men khơ Thời gian đồng Hàm lƣợng protein hịa tan(%) GTTB ±sd Lần Lần Lần 20,0453 20,0092 20,0028 19,8138 19,8265 10 30,6319 30,5299 30,4428 30,5349±0,0946f 15 17,9934 17,9828 17,8235 17,9332±0,0952a hóa (phút) 19,44290 20,0191±0.0229cd 19,6941± 0.2184bc 100 20 19,2339 19,0597 19,7033 19,3323±0,3329e 30 20,0432 20,0729 20,7186 20,2782±0,3817d Bảng PL2 39: Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến hàm lƣợng protein hịa tan có nấm men khô ANOVA Hamluongprotein Sum of Mean Squares df Square Between Groups 317.261 63.452 Within Groups 645 12 054 317.907 17 Total F 1179.635 Sig .000 Bảng PL2 40: Kết phân tích ANOVA khảo sát ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến hàm lƣợng protein hịa tan có dịch chiết nấm men khơ Hamluongprotein Duncan 101 Subset for alpha = 05 Thoigiandongh oa N 15.00 20.00 19.3323 5.00 19.6941 00 30.00 10.00 3 17.9332 19.6941 20.0191 20.0191 20.2782 30.5349 Sig 1.000 080 112 196 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Bảng PL2 41: Sự khác biết có ý nghĩa thống kê GTTB nghiên cứu khảo sát ảnh hƣởng thời gian đồng hóa hàm lƣợng protein hịa tan có nấm men khô 2.17 Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa tới hàm lƣợng protein hịa tan có dịch chiết nấm men tƣơi Thời gian đồng Hàm lƣợng protein hòa tan(%) Lần 13,8482 13,8739 13,9317 13,8846±0.0428a 20,9907 21,8514 21,3569 21,3997± 0.4319b 10 19,2115 19,2886 19,2629 19,2544±0,0392c 15 20,7402 20,6311 20,5411 20,6375±0,0997d 20 9,3778 9,3649 hóa (phút) Lần GTTB ± sd Lần 9,3264 9,3563±0,0267e 102 30 18,4151 18,4408 18,4408 18,4322±0,0115f Bảng PL2 42: Ảnh hƣởng thời gian đồng hóa đến hàm lƣợng protein hịa tan (nấm men tƣơi) ANOVA Hamluongprotein Sum of Mean Squares df Square Between Groups 323.093 64.619 Within Groups 402 12 033 323.495 17 Total F 1930.619 Sig .000 Bảng PL2 43: Kết phân tích ANOVA khảo sát ảnh hƣởng thời gian nghiền đến hàm lƣợng protein có dịch chiết nấm men tƣơi Hamluongprotein Duncan Thoigiandon N Subset for alpha = 05 103 ghoa 20.00 00 30.00 10.00 15.00 5.00 Sig 9.3563 13.8846 18.4322 19.2544 20.6375 21.3997 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Bảng PL2 44: Sự khác biết có ý nghĩa thống kê GTTB nghiên cứu khảo sát ảnh hƣởng thời gian đồng hóa hàm lƣợng protein hịa tan có nấm men tƣơi ... chống oxy hóa có tế bào nấm men em thực đề tài ? ?Nghiên cứu xác định phương pháp phá vỡ tế bào nấm men để thu dịch chiết có khả chống oxy hóa ” 2 Mục đích đề tài Nghiên cứu phương pháp phá vỡ tế bào. .. bào để thu dịch chiết có khả chống oxy hóa Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu phá vỡ tế bào nấm men phương pháp nghiền phương pháp đồng hóa để thu dịch chiết có khả chống oxy hóa - Nghiên cứu ảnh... tế bào phương pháp đồng hóa Trích ly Xác định tỷ lệ tế bào nấm men bị vỡ Xác định khả chống oxy hóa dịch chiêt Ethanol 700 Xác định hàm lượng số chất có khả chống oxy hóa Chọn phương pháp phá vỡ