Luận văn thạc sĩ Hóa hữu cơ, Phương pháp tổng hợp Corticosteroid, Phương pháp cộng hợp nitril, Hợp chất

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN VIỆN H N L M KHO HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HỐ HỌC NGU ỄN V N ĐẠ NGHIÊN CỨU MỘT S CORT OST RO P Ư NG P TỪ N ROST N P T NG ON V TƯ NG TỰ LUẬN V N T Ạ SĨ K O Hà Nội - 2015 ỌC P P ẤT ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN VIỆN H N L M KHO HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HỐ HỌC NGU ỄN V N ĐẠ NGHIÊN CỨU MỘT S CORT OST RO P Ư NG P TỪ N ROST N P T NG ON V P P TƯ NG TỰ Chuyên ngành: Hóa Hữu Mã số: 60 44 01 14 LUẬN V N T Ạ SĨ K O NG IH NG ỌC N KHO HỌ : PGS.TS Lưu Đức Huy Hà Nội - 2015 ẤT LỜ ẢM N Với lịng biết ơn sâu sắc, tơi xin chân thành cảm ơn PGS.TS Lưu Đứ gi o đ t i v u nh nhi u thời gi n hướng dẫn, giúp đỡ qu tr nh nghi n u, hồn thành luận v n n y Tơi xin chân thành cảm ơn ThS Nguy n Th thể Phòng Ho họ Steroi v i p, CN Ph m Th Thảo v tập lk loi , Vi n Ho họ , Vi n H n lâm Kho họ v ng ngh Vi t N m giúp đỡ, t o u ki n thuận l i ho t i suốt qu tr nh họ tập v nghi n u Họ vi n N u Đ MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU hương 1: T NG QUAN V i n t v Steroid u trú Phân lo i M t số steroi ti u iểu Chuyển h vi sinh steroid Phương ph p t ng h p orticosteroid 12 Phương ph p đ hydrat hóa h p ch t 9α-hydroxysteroid 12 Phương ph p t ng h p m ch bên pregnan 13 1.3.2.1 Phương ph p cyanhydrin t ng h p m ch bên pregnan 14 1.3.2.2 Phương ph p etylen t ng h p m ch bên pregnan 17 1.3.3 T ng h p m h n orticoid 26 1.3.4 Phương ph p 1,2- đ hydro hóa h p ch t steroid 30 hương 2: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 2.1 Phương ph p đ hy r t h 9α-hydroxy-androst-4-en-3,17-dion (9α-OH AD) 37 2.1.1 nh hưởng n ng đ i H2SO4 đến hi u su t phản ng 39 2.1.2 nh hưởng nhi t đ đến hi u su t phản ng 40 Phương ph p ng h p nitril v o h p h t 7-cetosteroid 41 2.2.1 Phương ng ng h p nitril v o 2.2.2 Phương ng ng h p nitril v o Nghi n u phản ng s ng t nhân K N 41 AD 43 ng h p nitril v o h p h t n rost-1,4-dien-3,17- dion (ADD) 46 2.3 Nghi n u phản ng với m t số t nhân ảo v nh m acbonyl 48 2.3.1 Phản ng với neopentyl glycol 48 2.3.2 Phản ng ADD với ethylen glycol 49 Phản ng ADD với ethyl methyl dioxolan 50 Phương ph p 1,2- đ hydro h h p h t - eto steroi s ng SeO2 51 Phản ng 1,2- đ hydro h 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-di-3-on 51 2.4.2 Phản ng 1,2- đ hydro h pregn-4,16-dien-3,20-dion 53 2.4.2 Phản ng 1,2- đ hydro h 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-4-en-3-on 55 hương 3: T ỰC NGHIỆM 58 T ng h p n rost-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) 59 T ng h p 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) s ng KCN 60 3 T ng h p 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9-dien-3-on (5) 61 3.3.1 S ng t nhân acetone cyanohydrin 61 3.3.2 S ng t nhân KCN 61 Nghi n u phản ng Nghi n u phản ng ng nitril v o với s t ng etone cyanohydrin 61 nhân ảo v nh m acbonyl 62 3.5.1 Phản ng với neopentyl glycol 62 3.5.2 Phản ng với ethylen glycol 62 3.5.3 Phản ng với ethyl methyl dioxolan 62 T ng h p 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) 63 T ng h p pregn-1,4,16-trien-3,20-dion (12) 63 T ng h p 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) 64 KẾT LUẬN 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO 66 P Ụ LỤ BẢNG KÍ ỆU Ữ V ẾT TẮT Ac acetyl AD androstendion ADD androstandiendion Đn điểm n ng hảy Et ethyl g gam h KCN kali cyanua ph phút M Mol l t Me methyl ml mililit Ph phenyl Py pyridin SKBM sắ ký ản mỏng t-BuOH tert-Butanol THF tetrahidrofuran p-TSA para-toluen sunfonic acid 9α-OH AD 9α-hydroxy-androst-4-en-3,17-dion -AD androst-4,9-dien-3,17-dion N MỤ S Đ BẢNG B ỂU Trang ảng 1: huyển h vi sinh sản xu t 7-ceto steroid 11 ảng 1: Hi u su t, ảng 2: Khảo s t ảnh hưởng hy r t h iểu đ ảng iểu đ đ trưng h lý v ph n ng đ h p h t 35 i H2SO4 đến hi u su t phản ng đ 39 : S ph thu : Khảo s t ảnh hưởng : S ph thu hi u su t phản ng v o n ng đ i H2SO4 40 nhi t đ đến hi u su t phản ng đ hy r t h 40 hi u su t phản ng v o nhi t đ 41 N MỤ CÁC ÌN VẼ Trang H nh : u trú khung H nh : H nh : T ng qu n v sản xu t steroi t nh m steroi u trú kh ng gi n hi u ản steroi nguy n li u th Hình 1: SKBM c a androst-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) so với 9α- OH AD (1) 37 Hình 2: Ph IR c a androst-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) 38 Hình 3: Ph H-NMR c a androst-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) 38 Hình 4: SKBM c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) so với AD (3) 42 Hình 5: Ph IR c Hình 6: Ph H-NMR c Hình 7: SKBM c dion (6) so với 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) 43 h p h t 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3,17- -AD (5) .44 Hình 8: Ph IR c Hình 9: Ph 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) 42 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3,17-dion (6)44 H-NMR c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3,17- dion (6) 45 Hình 10: SKBM c a androst-1,4-dien-3,17-dion (7) so với sản ph m .46 Hình 11: SKBM c a anandrost-1,4-dien-3,17-dion (7) so với sản ph m .47 Hình 12: SKBM c a anandrost-1,4-dien-3,17-dion (7) so với sản ph m .47 Hình 13: SKBM c a 17,17-(2,2-dimethyl propylene dioxy)- androst-1,4-dien-3on (8) so với ADD (7) .48 Hình 14: Ph IR c a 17,17-(2,2-dimethyl propylene dioxy)- androst-1,4-dien-3on (8) .49 Hình 15: SKBM c a 17,17-(etylene dioxy)- androst-1,4-dien-3-on (9) so với ADD (7) 50 Hình 16: Ph IR c a 17,17-(etylene dioxy)- androst-1,4-dien-3-on (9) .50 Hình 17: SKBM c a 7α-hydroxy-17β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) so với 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (3) 52 Hình 18: Ph IR Hình 19: Ph 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) 52 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) 53 H-NMR Hình 20: SK M pregn-1,16-dien-3,20-on (12) so với pregn-1,4,16-trien- 3,20-on (11) .54 Hình 21: Ph IR c a pregn-1,4,16-trien-3,20-on (12) 54 Hình 22: Ph H-NMR c a pregn-1,4,16-trien-3,20-dion (12) .55 Hình 23: SK M 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) so với 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-4-en-3-on (13) .56 Hình 24: Ph IR c a 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) .56 Hình 25: Ph H-NMR c a 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) 57 Hình : M tả ng , thiết phản ng 58 MỞ ĐẦU Vi t N m n m v ng kh hậu nhi t đới gi m với ngu n t i nguy n thi n nhi n, h đ ng th đư thi n nhi n ưu đãi vật phong phú đ ng v th nh ph n, h ng lo i v tr lư ng – l ti m n ng ph t triển r t lớn ho ng nh nghi p H Tuy nhi n, nh ng n m đ u k kh u tới 90% ho t h t l m thuố , 00% nghi p H g n l huý h ho t I, Vi t N m đ ng phải nhập thuố gố steroi v n n ng hư N m 007, h nh ph Vi t N m ph gi v Ho - ng 007 đến ng nghi p Ho - uy t hương tr nh trọng điểm quố t nh đến 0, nh m thú đ y v t o r ú nướ nh ph t triển Ngày 10/01/2014 Th tướng Chính ph có Quyết đ nh số 68 QĐ-TTg phê t Chiến lư c quốc gia phát triển ng nh c Vi t N m gi i đo n đến n m 2020 t m nh n đến n m 0 Theo đ , đến n m 0, thuốc sản xu t nước chiếm 80% t ng giá tr thuốc tiêu th n m, sản xu t đư c 20% nhu c u nguyên li u cho sản xu t thuố nước Ngay t Đ i h i Ho - th ng 007 i n r H N i, ph n lớn ý kiến nh kho họ đ u nhận đ nh, ng nh Ho ng phải ưu ti n v o ngu n h p h t thi n nhi n sterol đậu tương, fl vonoi … [9], oi l m t nh ng m nh Trướ đây, l nh v t ng h p diosgenin solasodin hiết xu t t nguy n li u số n m Tuy nhi n húng ng nghi p gi y, trở th nh hi n th ng nh lo i thuố ngu n gố steroi , ios ore v Sol num tương ng đư oi ây n y phải tr ng tr n đ t n ng nghi p nhi u thu ho h, o gi th nh ngu n nguy n li u rẻ ti n nhi u nh t v Vi t N m muốn th nh o T lâu người t r s sterol th tr lư ng r t lớn v ng nghi p m đường v vật (phytosterol) đư thể thu h i đư ng nghi p t m kiếm hú ý đến t phế ph thải u đậu tương Đi u n y s u ph t minh r m t số h ng vi sinh phân họn l hương 3: T Ự NG lo i ung m i, ho lo i ung m i đ u đư h t mu ng ty tinh hế v Kiểm tr đ nh t nh ỆM l ri h, Mer k v Trung Quố t l i điểm s i trướ s ng ng ản mỏng tr ng sẵn silufol Mer k 60 F254 Sắ ký ản mỏng u hế ng sili gel G Mer k 60 F254 v sắ k t ng sili gel Mer k h t -200àm, Celiteđ545 (Filter agent) Điểm hảy đo tr n m y oetius ( H Đ ) Ph IR ghi tr n m y FT-IR-IMPACT-410 Ph H-NMR đo tr n m y ng vi n n n K r ruker 500 MHz, Bruker 400 MHz, dung môi CDCl3, DMSO h t hu n TMS đư t ng h p t phytosterol Alk loi , Vi n H ng n phòng th nghi m H họ , Vi n H n lâm Kho họ v v thiết phản ng s ng ngh Vi t Nam ng th nghi m đư 1: n 1: M ứ (1): Sinh h n; (2): Ph u nhỏ giọt; (3): Ống l m kh n (4): M y khu y t , gi nhi t; (5): on t 58 họ Steroi v l 2; m tả T ng h Th nghiệ n -4,9(11)-dien-3,17-dion (2) 1: ml acid H2SO4 55% đư Khu y đảo nhi t đ 00 u, th m nh u h 0, g 9α-OH n đ u h t đ u hư t n hết S u 6h, kiểm tr SK M th y òn h t đ u, để y n qu đ m 0-50C H m s u tiếp t khu y đảo th m h, kiểm tr SK M th y òn t h t đ u th m nướ đ l nh hiết v sản ph m th t qu y thu đư ng hloroform r i r ng phản ng ng h ng nướ đến pH = 7, l m kh n Kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,066 g sản ph m tinh thể s h Hi u su t đ t 70,4% Rf = 0,66 (hexan/aceton = 3: 2) Đn : 201203oC Ph IR (K r, ν, m-1): 1659 (C=O v trí 3), 1733 (C=O v trí 17), 1616 (C=C) Ph H-NMR (CDCl3, 500 MHz, δ, ppm): 5,764 (s, 1H, H-4); 5,567 (m, 1H, H-11); 1,361 (s, 3H, CH3-19); 0,884 (s, 3H, CH3-18) Th nghiệ H2SO4 60 % đư th y đ i n ng đ i ng phản ng sau 7h, x lý sản ph m, kết tinh l i t ethyl et t thu 0,0689 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t , % Th nghiệ H2SO4 65% đư 2: L m tương t qui tr nh th nghi m 3: L m tương t qui tr nh th nghi m th y đ i n ng đ i ng phản ng s u 6h, x lý sản ph m, kết tinh l i t ethyl et t thu 0,0706 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t 75,1% Th nghiệ H2SO4 70% 4: L m tương t qui tr nh th nghi m th y đ i n ng đ i ng phản ng s u h, x lý r i kết tinh l i t ethylacetat thu đư 0,0750 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t 79,7% Th nghiệ H2SO4 75% 5: L m tương t qui tr nh th nghi m ng phản ng s u ,5h, x lý thu đư kết tinh l i t ethyl et t thu đư th y đ i n ng đ i sản ph m th m u v ng đậm, 0,06920 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t 73,6% Th nghiệ H2SO4 80% 6: L m tương t qui tr nh th nghi m ng phản ng s u 0,8h, x lý thu đư kết tinh l i t ethyl et t thu đư Th nghiệ i sản ph m th m u v ng đậm, 0,0675 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t 71,8% 7: ml acid H2SO4 70% đư Khu y đảo nhi t đ th y đ i n ng đ 00 u, 59 th m nh u h 0, g 9α-OH n đ u h t đ u hư t n hết S u 7h, kiểm tr SK M th y òn h t đ u, để y n qu đ m 0-50C H m s u tiếp t khu y đảo th m 7h, kiểm tr SK M th y òn t h t đ u th m nướ đ l nh hiết v sản ph m th Kết tinh l i t ethyl et t thu đư t qu y thu đư ng hloroform r i r ng phản ng ng h ng nướ đến pH = 7, l m kh n 0,0700 g sản ph m tinh thể Hi u su t đ t 74,5% Th nghiệ 8: L m tương t qui tr nh th nghi m nâng nhi t đ l n ng phản ng s u khoảng 0h, x lý v kết tinh l i sản ph m t ethyl et t thu đư 0,07 g sản ph m tinh thể s h Hi u su t đ t 76,7% Th nghiệ 9: L m tương t qui tr nh th nghi m nâng nhi t đ l n ng phản ng s u h, x lý sản ph m Kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,0780 g sản ph m tinh thể s h Hi u su t đ t ,0% Th nghiệ 10: L m tương t qui tr nh th nghi m nâng nhi t đ l n 0C ng phản ng s u ,5h v x lý sản ph m Kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,0732 g sản ph m tinh thể s h Hi u su t đ t 77,9% Th nghiệ 11: L m tương t qui tr nh th nghi m nâng nhi t đ l n ng phản ng s u ,5h v x lý sản ph m Kết tinh l i t ethyl et t thu đư 0,0643 g sản ph m tinh thể s h Hi u su t đ t 68,4% T ng h 17α-hydroxy-17β-cyanandrost-4-en-3-on (4 Acid aceti ( 8,0 ml) đư v o h n h p đư th m t t khoảng thời gi n phút 5oC khu y đảo n rost-4-en-3,17-dion (AD) (52,0 g) kali cyanua (50,0 g) meth nol ( 00 ml) H n h p đư phòng khoảng thời gi n ụng K N khu y đảo nhi t đ Để y n qu đ m nhi t đ phòng, s u đ th m acid aceti ( ml) Ph loãng với nướ , lọ kết t t hr ,r ng nướ v l m kh t s y hân kh ng 5o , nhận đư sản ph m tinh s h 57,5 g (3) Hi u su t: 90 % Kết tinh l i t eth nol, nhận đư sản ph m (hexan/aceton = 3: 2) Đn : 174-176o ( ≡N); ( =O v tr -3) Ph ng tinh thể Rf = 0,54 Ph IR (K r, ν, m-1): 3244 (O-H); 2233 H-NMR (CDCl3, 500 MHz, δ, ppm): 5,750 (s, 1H, H-4); 2,850 (s, 1H, O-H); 1,207 (s, 3H, CH3-19); 0,993 (s, 3H, CH3-18) 60 3 T ng h 3 S 17α-hydroxy-17β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3-on (5) ụng c nhân acetone cyanohydrin Hò t n 5,60 g h p h t Δ9- h n h p ml meth nol ml acetone cyanohydrin 0,6 ml ung ng với 6, h KOH 3,3M Khu y đảo 5- 36oC Kiểm tr SK M th y òn h t đ u n n thêm vào 3,4 ml acetone cyanohydrin khu y th m h, th y hết h t đ u thêm ml H2O Để y n qu đ m, h m s u thêm 13 ml H2O Khu y đảo h n h p phản ng h nhi t đ phòng, h t rắn đư t hr ,r ng h n h p meth nol nướ ( : ) v uối ng ng nướ nhận đư 4,9 g sản ph m s h Hi u su t: 80% Kết tinh l i t ethyl etat đư ng tinh thể Rf = 0,47 (hexan/aceton = 3: 2) Đn : -183o ): 3236 (O-H); 1645 (C=O) Ph sản ph m Ph IR (K r, ν, cm- H-NMR (CDCl3, 400 MHz, δ, ppm): 5,75 ( r s, 1H, H-4); 5,57 (dd, 1H, H-11); 2,97 (s, 1H, O-H); 1,34 (s, 3H, CH3-19); 0,93 (s, 3H, CH3-18) 3 S ụng c nh n KCN Acid aceti (0, ml) đư c thêm t t khoảng thời gian 30 phút 25oC vào h n h p đư c khu y đảo c a 1,23 g androst-4,9(11)-dien-3,17-dion 1,72 g kali cyanua 8,5 ml methanol H n h p đư c khu y đảo nhi t đ phòng khoảng thời gian Thêm acid acetic (30 ml), pha loãng với nước, kết t t h r , lọ r a b ng nướ đến pH = v l m kh t s y chân không 45o , thu đư , g sản ph m s h Hi u su t: 85% Kết tinh l i t ethanol, nhận đư c sản ph m d ng tinh thể Sản ph m có Rf, Đn , Ph IR 1H-NMR trùng h p với sản ph m nhận đư theo phương ph p s Nghi n cứu ng hản ứng cộng h etone cyanohydrin ni i ụng c ne cyanohydrin Hòa tan 0,3 g h p ch t ADD h n h p ml methanol với 0,8 ml dung d ch NaOH 3,3 M Thêm 0,13 ml acetone cyanohydrin, khu y đảo 35-36o S u 6h kiểm tr SK M khoảng 0% sản ph m n m ưới h t đ u uy tr phản ng th m h, đ u xu t hi n v t sản ph m th h i Th m h n , SK M sản ph m lớn tương đương h t đ u Tiếp t 61 v t th m 5h n , h t đ u kh ng hết, h nh ảnh tr n SK M kh ng th y đ i T ng nhi t đ l n 550 gi khoảng 6h, h t đ u kh ng hết, xu t hi n sản ph m th đư h nh p h tđ uv ng phản ng s u khoảng h, thu sản ph m Nghi n cứu hản ứng c ới c c c nh n ả ệ nh cacbonyl Phản ứng ới neopentyl glycol 1,5 g h p h t ADD hò t n ml L m l nh h n h p ng đ H2Cl2 đư l nh xuống (0-50 ), th m tiếp orthoformat, 2,6 gam neopentyl gly ol v 0, g m p-TS kh N2 trơ S u h ung Để ung h huyển m u t m, kiểm tr SK M th y òn h t đ u h, kiểm tr SK M th y òn t h t đ u, h th m ,5 ml triethyl v hiết aceton thu đư ,75 ml triethyl Khu y đảo òng nh phản ng qu đ m t l nh H m s u, tiếp t kh ng th y kết t h suốt sản ph m ph uy tr phản ng th m ng phản ng ng ml nướ , để v o ng n đ t l nh phút, ng hloroform, r ng nướ đến pH =7 Kết tinh l i 1,603 g sản ph m s h Hi u su t 82% Rf = 0,65 (hexan/aceton = 3: 2) Đn = 153-154oC Ph IR (K r, ν, m-1): 1663 (C=O v tr 3); 1626 (C=C); 1107 (C-O ketal) Phản ứng ới ethylen glycol hò t n ,6 ml H2Cl2, th m v o 2,6 ml ethylene glycol, 1,4 0,2 g ml triethyl orthoform t v 0,0 g m p-TS Khu y đảo nhi t đ phòng òng kh N2 trơ S u h, SK M th y h t đ u òn r t t, sản ph m h nh n m tr n h t đ u, v ml nướ v t sản ph m ph hiết ng phản ng ng hloroform, r m i Kết tinh l i eton thu đư ng h th m 0, ml triethyl ng nướ đến pH =7, t qu y hết ung 0, g sản ph m s h Hi u su t 79% Rf = 0,62 (hexan/aceton = 3: 2) Đn = 174-176oC Ph IR (K r, ν, m-1): 1657 (C=O v tr ); 1619 (C=C) Phản ứng ới ethyl methyl dioxolan 0,19 g ADD đư h t đ u t n hết th m v o ml ethyl methyl dioxolan v 0,0075 g m p-TS , t qu y ưới p su t th p nhi t đ 750 62 S u h 0, kiểm tr SK M sản ph m n m tr n h t đ u, v t h t đ u òn r t t, ng phản ng, trung hò ởi ung pH = Kết tinh l i 76% Sản ph m ph p s h N H O3 eton thu đư hiết v t sản ph m ph ng hloroform, r đến 0,167 g sản ph m s h Hi u su t đ t Rf, Đn , Ph IR tr ng h p với sản ph m nhận đư theo phương ng ethylen glycol 17α-hydroxy-17β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) T ng h Hòa tan g h p h t 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on 65 ml tert- butanol, thêm vào 0,875 g SeO2 v 0,25 ml pyridin H n h p phản ng đư khu y đảo h i lưu nhi t đ 850C òng kh N2 trơ Sau 30h, kiểm tr SK M nhận th y vết h t đ u ịn r t t có h nh ng phản ng vết sản ph m ph mờ ưới sản ph m t qu y ớt tert– butanol, thêm chloroform hò t n sản ph m r i tiến h nh tinh hế sản ph m ung m i hex n: eton đư eton) t h đư sản ph m 2) Đn : 86-188o 60 ( = ) Ph ng sắ k 0,56 g sản ph m h nh s h Kết tinh l i t ng tinh thể Hi u su t 56%, Rf = 0,52 (hexan/aceton = 3: Ph IR (K r, ν, m-1): t (Sili gel elite = 3: , h 76 (O-H); 65 ( =O v tr ); H-NMR (DMSO, 500 MHz, δ, ppm): 7,206 (d, 1H, H-1, J= 10 Hz); 6,110 (dd, 1H, H-2, J1= 10 Hz, J2= Hz); 5,981 (s, 1H, H-4); 6,251 (s, 1H, OH); 1,208 (s, 3H, CH3-19); 0,905 (s, 3H, CH3-18) T ng h p pregn-1,4,16(17)-trien-3,20-dion (12) Hòa tan 0,2 g h p h t pregn-4,16(17)-dien-3,20-dion 12,5 ml tertbutanol, thêm vào 0,175 g SeO2 v 0,05 ml pyridin H n h p phản ng đư khu y đảo h i lưu nhi t đ 850C òng kh N2 trơ Sau 28h, kiểm tr SK M nhận th y vết h t đ u òn r t t n m tr n sản ph m h nh ng phản ng tert– butanol, thêm chloroform hò t n sản ph m Tinh hế sản ph m t (silicagel/celite = 3: , h dung môi hexan: aceton) t h đư h nh s h Kết tinh l i t eton thu đư 0,49 (hexan/aceton = 3: 2) Đn : 1586 (C=C) Ph 0, t qu y ki t ng sắ k g sản ph m sản ph m tinh thể Hi u su t 61%, Rf= 9-221oC Ph IR (K r, ν, m-1): 1661 (C=O); H-NMR (CDCl3, 500 MHz, δ, ppm): 7,057 ( , 1H, H-1, J= 10 Hz); 6,232 (d, 1H, H-2, J= 10 Hz); 6,077 (s, 1H, H-4); 6,690 (t, 1H, H-16, J1= 1,5 63 Hz, J2= 1,5 Hz); 1,267 (s, 3H, CH3-19); 0,970 (s, 3H, CH3-18); 2,260 (s, 3H, CH3CO-21) T ng h p 17α-etynyl-17β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) Hòa tan 0,5 g h p h t 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-4-en-3-on 35 ml tert-butanol, thêm vào 0,45 g SeO2 v 0,125 ml pyridin H n h p phản ng đư khu y đảo h i lưu nhi t đ 850C òng kh N2 trơ Sau 31h, kiểm tr SK M nhận th y v t h t đ u r t mờ n m tr n sản ph m h nh, n m ưới sản ph m h nh ng phản ng t qu y ki t tert– butanol, thêm chloroform hò t n sản ph m Tinh hế sản ph m b ng sắ k : ,h ung m i hex n: aceton thu đư Đn : eton) t h đư v i v t sản ph m ph t (sili gel celite = 0,29 g sản ph m h nh Kết tinh l i t sản ph m tinh thể Hi u su t 59%, Rf= 0,55 (hexan/aceton = 3: 2) 6-228oC Ph IR (K r, ν, m-1): 1660 (C=O); 1611 (C=C) Ph H-NMR (DMSO, 500 MHz, δ, ppm): 7,202 (d, 1H, H-1, J= 10 Hz); 6,107 (dd, 1H, H-2, J1= 10 Hz, J2= Hz); 5,973 (s, 1H, H-4); 5,319 (s, 1H, O-H); 3,272 (s, 1H, 1,200 (s, 3H, CH3-19); 0,801 (s, 3H, CH3-18) 64 ≡ H); KẾT LUẬN Đã nghi n hydrat h u th nh ng phương ph p v u ki n tối ưu 9α-OH AD Hi u su t đ t % Đã nghi n u th nh 2 Đã nghi n u th nh - ng h p K N v o Hi u su t đ t 90% ng phương ph p t ng h p 7α-hydroxy- 7βng phản ng cyanandrost-4,9(11)-dien-3-on ng phương ph p t ng h p 7α-hydroxy- 7β- ng phản ng cyanandrost-4-en-3-on v o phản ng đ K N v acetone cyanohydrin Hi u su t tương ng đ t 85% v 80% Đã nghi n u phản ng h r r ng phản ng Nghi n ph ng h p acetone cyanohydrin v o t ph u phản ng os m t Kết h p h t 1(2)-olefin ADD với neopetyl glycol, t ng h p đư h p h t 7, 7-( , - imethyl propylen ioxy)- n rost- , - ien- -on Hi u su t đ t8 % Nghi n u phản ng ADD với ethylene glycol, t ng h p đư 7, 7-(ethylen ioxy)- n rost- , - ien- -on Hi u su t đ t 79% 3 Nghi n đư u phản ng ADD với ethyl methyl dioxolan, t ng h p 7, 7-(ethylen ioxy)- n rost- , - ien- -on Hi u su t đ t 76% Đã nghi n 3-cetosteroi s u th nh ng t ng phương ph p , - đ hy ro h m t số h p h t nhân SeO2 - Đã t ng h p đư 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on Hi u su t đ t 56% - Đã t ng h p đư - Đã t ng h p đư pregn-1,4,16-trien-3,20-dion Hi u su t đ t % 7α-etynyl-17β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on Hi u su t đ t 59% sản ph m đư nhận đ nh v nghi n IR 1H-NMR 65 u u trú ng Đn , R f, ph T L ỆU T M K ẢO T ẾNG V ỆT Lưu Đ Huy (1992), o nt n m t số p ơn p p mớ tổn ợp ort o thông qua 17-cetosteroid trung gian, Luận n Tiến s , Vi n H n lâm Kho họ Li n bang Nga, M tx ơv Lưu Đ mớ Huy (2001), o tổn ợp un mớ u n sterol, m t n u ên l u ort ostero , H i ngh Kho họ v ng ngh Ho H u to n quố l n th h i, H N i, tr 249-254 Lưu Đ Huy (2002), “Phương ph p t ng h p h p h t S Rei hstein t pregnyne”, Tạp Lưu Đ íD ợ ọ , số Huy, Nguy n Th (9), tr 23-25 i p (2000), “Phương ph p t ng h p h t 7α-hydroxy- 7β-etynylsteroi t húng”, Tạp Lưu Đ chí Ho í o Lưu Đ ẫn xu t 7β-hy roxy tương ng ọ , 38(2), tr 40-44 Huy, Nguy n Th ọ , h p i p ( 00 ), “Epime h tr tiếp northin ron”, Tạp (đ ), tr 78-83 Huy, Nguy n Th i p (2002), “ ire t α-hy roxyl tion of 7β-acetyl steroi s using phenylio oso i et te”, J.Advanced in Natural Sciences, 3(2), t 179184 Lưu Đ Huy, L Th uy n (2000), “T ng h p m t v i ẫn xu t bromo-pregn-4-en-3-on-20-yne t pregnyne Phản ng H 16,17alpha-epoxy-pregn-4-en-3-on-20-yne với Py HF”, Tạp í o -bromoọ , 38(1), tr 43-47 Lưu Đ Huy, Nguy n Th Hương (2001), “Nghi n etynylestr iol”, Tạp í o íD ợ 7α- ọ , 39(4), tr 78 T Minh Ko ng (2007), “M t số ý kiến v ph t triển Vi t N m”, Tạp u epime h ọ , 337, tr 39 66 ng nghi p H – T ẾNG N 10 Andryushina V A., Karpova-Rodina N V., Luu Duc Huy (2011), Russian Journal of Applied Biochemistry and Microbiology, 47(3), pp 270-273 11 Baldwin J E., Hoefle G A., Jr Lever O W (1974), J Am Chem Soc, 96(22), pp 7125-7127 12 Baldwin J E., Lever O W., Jr., and Tzodikov N R (1976), J Org Chem, 41(13), pp 2312-2314 13 Batist J N M., Barendse Nicholas C M E., Marx A F (1990), Steroids, 5.5, pp 109 14 Batist J N M., Slobbe A F M., Marx A F (1989), Steroids, 54, pp 321 15 Bergstrom C G., Dodson R M (1961), Chem and Ind., (38), pp 1530 16 Beumel O F., Harris F F (1963), J Org Chem., 28(10), pp 2775 17 Chinn L., Dodson R (1959), J Org Chem., 24(6), pp 879 18 Danishefsky S., Nagasawa K: Wang N (1975), J Org Chem., 40(13), pp 1989-1990 19 Daniewski A R., Wojciechowska W (1982), “Synthesis of orti oi si e h in”, J Org Chem., 47(15), pp 2993-2995 20 Ereoli A., Ruggieri P (1953), J Amer Chem Soc., 75(3), pp 650 Fokin , V V , onov , M V ( 00 ), “ -Acetoxy-pregna-4(5), 9(11), 16(17)- triene-21-ol-3,20-dione conversion by Nocardioides simplex VKM Ac- ”, The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology, 87(4), p 319-325 22 Fokina, V V., Sukhodolskaya G V., Baskunov B P., Turchin K F., Grinenko G S, 7α, onov , M V ( 00 ), “Mi ro i l onversion of pregna-4,9(11)-diene-diol-3,20-dione acetates by Nocardioides simplex VKM Ac- ”, Steroids, 68(5), p 415-421 23 Fried J., Edvards J A (1972), Organic Reactiones in Steroid Chemistry, N.Y.,2 24 Fujimoto K., Chen Ch.-S et al (1982), J Amer Chem Soc., 104(17), pp 4718 25 Groebel B-T., Seebach D (1977), “Umpolung of re tivity of Compounds through Sunfur - ont ining re gents”, Synthesis, pp 357-367 67 onyl 26 Gumulka M., Kurek A., Wicha I Pol (1982), J Chem., 56, pp 741-747 27 Halpern O., Djerassi C (1959), J Am Chem Soc., 81(2), pp 439-441 28 Hofmeister H., Annen K et al (1978), Chem Ber., 111, pp 3086 29 Hofmeister H., Annen K., Laurent H Liebigs (1987), Ann Chem., pp 423 30 Horiguchi Y., Nakamura E., Kuwajima I (1986), J Org Chem., 51(22), pp 4323 31 Huffmann J W., Arapakos P G (1965), J Org Chem., 30(5), pp 1604 32 Inhoffen H H., Koster H (1939), Ber., 72, pp 595 33 Inhoffen H H., Logemann W et al (1983), Ber., 71, pp 1024 34 Kanojia R M., Allen G O et al (1979), J Med Chem., 22, p 1538 35 Kanojia R M., Yarmchuck L., Scheer I (1974), J Org Chem., 39(15), p 2304 36 Kamernitsky A V., Turuta A M, Fadeeva T M., Istomina Z I (1985), Synthesis, 3, pp 326 37 Kapur J C., Marx A F., Verweij J (1988), Steroids, 52, pp 181 38 Lever O W., Jr (1976), Tetrahedron, 32, pp 1943-1971 39 Moriarty R M., Hu H., Gupta S C (1981), Tetr Lett., 22, pp 1283 40 Moriarty R M., John L S., Du P C (1981), J Chem Soc Chem Commun, pp 641 41 Nan Xing Hu, Yoshio Aso et al (1986), Tetr Lett., 27(50), pp 6099 42 Nicholas K M ( 1987), Acc Chem Res., 20(6), pp 207 43 Nitta I., Fujimori S., Ueno H (1985), Bull Chem Soc Jp., 58, pp 978 44 Nitta I., Fujimori S., et al (1985)., Bull Chem Soc Jp., 58, pp 981 45 Ogata Y., Urasaki I (1971), J Org Chem., 36(15), pp 2164 46 Pat 57062298 (1982), JP 47 Pat 57197299 (1982), Jp CA., 98, 215894d 48 Pat 53127 455 (1978), Jp CA., 91, 74781f 49 Pat 0253 415 AI (1987), EU CA., 108, 221967w 50 Pat 0294 911 AI (1988), EU CA., 111, 39674h 51 Pat 02 207 096 1990, Jp CA., 114, 43310r 68 52 Pat 282 695 1990, D Germany CA., 115, 9129z 53 Pat 582644 1986, USA CA., 105, 79230t 54 Pat 0188 010 AI 1986, EU CA., 105, 209280x 55 Pat 147 669 1979, D Germany CA., 96, 20370f 56 Pat 82 622, 96 1982, Jp CA., 97, 145148s 57 Pat 500 461 1985, USA CA., 103, 22844a 58 Pat 427486 AI 1986, F Germany CA., 105, 97805p 59 Pat 68400 AI 1988, EU CA., 109, 170717 60 Pat 441 647 1975, F Germany CA., 83, 28456r 61 Pat 023 122 1970, F Germany CA., 76, 72715d 62 Pat 625306 BI 1977 F Germany CA., 88, 105656 63 Pat 63 369 AI 1982 EU CA., 98, 198593k 64 Pat 434 448 AI 1986, F Germany CA., 105, 115286b 65 Pat 2140 291 1973 F Germany CA., 78, 124811v 66 Pat 53 845 AI 1982, EU CA., 97, 182740z 67 Pat 57 139, 099 1982, Jp CA., 98, 72567m 68 Pat 71 178 1983, EU CA., 99, 38712 69 Pat 2156255 (2000), RU 70 Pat 281394 (1990), DD 71 Pat 263569 (1988), EP 72 Pat 147669 (1981), DD 73 Pat 0189951 (1986), EP 74 Pat 0153001 (1985), EP 75 Pat 138054 (1986), PL 76 Pat 138150 (1986), PL 77 Pat 141469 (1987), PL 78 Pat 2521567 (1983), FR 79 Pat 4342702 (1982), US 69 80 Pat 4357279 (1982), US 81 Pat 960928 (1964), GB 82 Pat 065146, US 83 Pat 7802302, NL 84 Pat 20528, DDR 85 Pat 2806687, DE 86 Pat 491 7827, US 87 Pat 4839282 (1989), US 88 Pat 1361287 (2002), CN 89 Pat 3715376 (1973), US 90 Pat 1303638 (1973), GB 91 Pat 1364193 (1974), GB 92 Pat 3780177 (1973), US P rez , Falero A., H Luu Duc, Y Balcinde (2006), J Ind Microbiol Biotachnol, 148, pp 719-723 94 P Fernandes , A Cruz , B Angelova , H.M Pinheiro , J.M.S Cabral ( 0 ) , “ Microbial conversion of steroid compounds: recent developments”, Enzyme and Microbial Technology, 32, 688-705 95 Rothman E S, Perlstein T., Wall M E (1960), J Org Chem., 25(11), pp 19661968 96 Salce L., Hazen G G., Schonewaldt E F (1970), J Org Chem., 35(5), pp 1681 97 Seebach D (1974), Chemistry and Industry, pp 687-692 98 Tamura Y., Yakura T et al (1985), Tetr Lett., 26(32), pp 3837 99 Van Rheenen V., Shephard K P (1979), J Org Chem., 44(9), pp 1582 100 Westmijze H., Kleijn H., Vermeer P et al (1980), Tetr Lett., 21(27), pp 2665 T ẾNG NG 101 Меркушев Е Б ( 987), Успехи химии, 56(9), C 1444 70 102 Меркушев Е Б , Карпицкая Л Г , Новосельцева Б И , Райда В С ( 978), Изв АН СССР Сер хим, (5), C 1153 103 Меркушев Е Б , Карпицкая Л Г , Новосельцева Б И ( 979), ДA , 245(3), C 607 104 Меркушев Е Б , Шварцберг М С (1978), ЙодисТые органические соединения и синТезы на их основе, Томск ГПИ, С 05 Физер Л , Физер М ( 96 ), СТероиды, М Мир 71 P Ụ LỤ l ng ố kho họ : Lưu Đ c Huy, Ph m Th Thảo, Nguy n Th Di p, Lưu Đ c Hùng, Nguy n V n Đ i, Tr n Phương Đ t, Bùi Th Hương Gi ng, Đ Quang Huy, p p u tổn ợp 7α-hydroxy- 7β-nitrilandrosten, T p h H p ơn họ , T , số – 2014 l Ph IR c a androst-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) l Ph l Ph IR c l Ph l Ph IR c l 1 H-NMR c a androst-4,9(11)-dien-3,17-dion (2) 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) H-NMR c Ph 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4-en-3-on (4) 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3,17-dion (6) H-NMR c 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-4,9(11)-dien-3,17- dion (6) l Ph IR c a 17,17-(2,2-dimethyl propylen dioxy)- androst-1,4-dien-3- on (8) l Ph IR c a 17,17-(ethylen dioxy)- androst-1,4-dien-3-on (9) l 10: Ph IR l 11: Ph 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) H-NMR 7α-hydroxy- 7β-cyanandrost-1,4-dien-3-on (10) l Ph IR c a pregn-1,4,16-trien-3,20-on (12) l Ph l Ph IR c a 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on (14) l (14) Ph H-NMR c a pregn-1,4,16-trien-3,20-dion (12) H-NMR c a 7α-etynyl- 7β-hydroxyandrost-1,4-dien-3-on ... steroid Phương ph p t ng h p orticosteroid 12 Phương ph p đ hydrat hóa h p ch t 9α-hydroxysteroid 12 Phương ph p t ng h p m ch bên pregnan 13 1.3.2.1 Phương ph p cyanhydrin... Mori rty Phương h 2- ề hydro hóa h p chất steroid 1(2) Theo tài li u tham khảo, vi c t o lập liên kết - đư c th c hi n b ng phương ph p vi sinh ho c hoá học [21, 22] Đã đư c biết nhi u nh t phương. .. hương 2: KẾT QUẢ V T ẢO LUẬN Đã tiến h nh nghi n u m t số phương ph p t ng h p orticosteroi t 7- cetosteroi s u:  Phương h ề hy h 9α-OH AD O O H2SO4 OH O  Phương h O cộng h ni i h chấ 17-cetosteroid