Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu: Máy đã được cài đặt chương trình xét nghiệm C1 Inhibitor. Máy đã được chuẩn với xét nghiệm C1 Inhibitor[r]
(1)QUY TRÌNH
ĐỊNH LƯỢNG HUMAN C1- INHIBITOR I NGUYÊN LÝ
Là phản ứng hóa miễn dịch, protein chứa huyết tương người huyết tạo phức hợp miễn dịch với kháng thể đặc biệt Phức hợp phản xạ ánh sáng xuyên qua mẫu, cường độ ảnh sáng phản xạ tỉ lệ với nồng độ protein cần đo mẫu Kết so sánh với chất chuẩn biết nồng độ
C1 Inhibitor chất điều hòa quan trọng q trình hoạt hóa bổ thể, ức chế hoạt động enzyme serine proteases C1s and C1r4 Định lượng C1 inhibitor hỗ trợ việc chẩn đoán bệnh phù mạch di truyền ( tăng tính thấm mạch máu dẫn tới sưng mô) dạng phù mạch liên quan tới bệnh u lympho Thiếu hụt C1 Inhibitor xảy với bệnh hệ thống tế bào B, liên quan tới mức độ C1 Inhibitor giảm bệnh bạch cầu lympho mạn, đa u tủy
II CHUẨN BỊ
1 Cán thực hiện: 01 Bác sỹ 01cán đại học 01 kỹ thuật viên chuyên ngành Hóa sinh
2 Phương tiện, hóa chất Máy phân tích: BN ProSpec Máy ly tâm
Tủ lạnh để bảo quản hóa chất, chất hiệu chuẩn, QC mẫu bệnh phẩm Ống nghiệm, giá đựng ống nghiệm
2.2 Hóa chất
- Thuốc thử chính: N Antiserum to Human C1-Inhibitor Đóng gói: x mL Thành phần: huyết động vật dạng lỏng sản xuất việc tạo miễn thỏ với C1 Inhibitor người làm tinh khiết Nồng độ kháng thể hoạt động < g/L
- Hóa chất yêu cầu không cung cấp: Chất chuẩn N Protein Standard PY (human)
Chất kiểm chuẩn N/T Protein Control PY (human) Chất đệm N Reaction Buffer
Chất pha loãng N Diluent
N Supplementary Reagent/Precipitation 2.3 Các dụng cụ tiêu hao khác
(2)- Găng tay, nước rửa tay, khăn lau tay, trang;
- Bông, cồn sát trùng, bơm tiêm kim lây máu, dây ga rô
3 Người bệnh: Cần giải thích mục đích xét nghiệm để bệnh nhân người nhà bệnh hiểu, từ hợp tác q trình lấy máu
4 Phiếu xét nghiệm: có đầy đủ thơng tin bệnh nhân bao gồm họ tên, tuổi, khoa phòng, chẩn đốn, tình trạng mẫu, tên BS định, ngày định, ngày lấy mẫu, loại thuốc sử dụng (nếu có)…
III CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
1 Lấy bệnh phẩm xử lý mẫu bệnh phẩm
Thực mẫu máu: huyết tương xitrat huyết người
Mẫu tốt (lưu nhiệt độ đến °C không ngày) mẫu trữ đơng Mẫu huyết huyết tương lưu −20 °C đến tháng mẫu trữ đơng vịng 24 sau lấy mẫu cần tránh chu trình kết đơng-xả đơng
Mẫu huyết cần làm đơng hồn tồn sau li tâm không chứa hạt nhỏ dấu tích fibrin Mẫu mỡ máu bị đục sau rã đông cần làm ly tâm (10 phút 15,000 x g)
2 Tiến hành kỹ thuật 2.1 Chuẩn bị máy phân tích
Dựng đường chuẩn: dựa điểm với nồng độ khác Phân tích QC: level Khi QC đạt tiến hành phân tích mẫu
Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực phân tích mẫu: Máy cài đặt chương trình xét nghiệm C1 Inhibitor Máy chuẩn với xét nghiệm C1 Inhibitor Kết kiểm tra chất lượng với xét nghiệm C1 Inhibitor đạt u cầu: khơng nằm ngồi dải cho phép khơng vi phạm luật kiểm tra chất lượng
2.2 Phân tích mẫu
- Mẫu bệnh phẩm nên tiến hành phân tích vịng 2giờ - Mẫu sau ly tâm chuyển vào khay đựng bệnh phẩm
- Đánh số (hoặc ID bệnh nhân); chọn test vận hành theo protocol máy tự động phân tích
Mẫu pha lỗng tự động 1:5 N Diluent cần đo vòng IV NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
(3)Mẫu huyết tương Citrat: 0.18 - 0.32 g/L Mẫu huyết thanh: 0.21 - 0.39 g/L
Phòng xét nghiệm nên tự định khoảng tham chiếu riêng phù hợp với nhóm dân cư địa phương
V NHỮNG SAI SĨT VÀ XỬ TRÍ
- Các yếu tố ảnh hưởng đến kết khi: Mẫu máu bị huyết tán, mẫu mỡ máu bị đục chứa hạt nhỏ