Mẫu chứa mỡ máu hoặc bị đục mà không làm trong được bằng ly tâm cần được loại bỏ.[r]
(1)QUY TRÌNH
N.569 QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG IgG1 I NGUYÊN LÝ
Kháng thể IgG người bao gồm lớp IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 Sự khác lớp thể chức sinh học khác Nhiều nghiên cứu thay đổi nồng độ bất thường IgG lớp liên quan tới giai đoạn bệnh lý khác Nồng độ IgG1 thấp thường thiếu hụt kháng thể nói chung thiếu hụt lớp cụ thể Nồng độ IgG1 thấp đo hội chứng thận hư đặc biệt viêm thận thay đổi nhỏ
Protein chứa dịch thể tạo phức hợp miễn dịch phản ứng hóa miễn dịch với kháng thể đặc hiệu Phức hợp này phản xạ ánh sáng xuyên qua mẫu Mức độ tán xạ ánh sáng tỉ lệ với nồng độ protein cần đo mẫu Kết so sánh với mẫu chuẩn biết nồng độ
II CHUẨN BỊ
1 Cán thực hiện: 01 Bác sỹ 01cán đại học 01 kỹ thuật viên chuyên ngành Hóa sinh
2 Phương tiện, hóa chất
- Phương tiện: Máy phân tích: BN ProSpec- hãng Siemens; + Máy ly tâm;
+ Tủ lạnh để bảo quản hóa chất, chất hiệu chuẩn, QC mẫu bệnh phẩm; + Pipep loại; Ống nghiệm, giá đựng ống nghiệm
- Hóa chất
+ Thuốc thử N AS IgG1: huyết động vật dạng lỏng sản xuất miễn dịch cừu với lớp IgG người làm tinh khiết Nồng độ kháng thể hoạt động < 60 g/L
+ Hóa chất ổn định đến ngày ghi nắp hộp với điều kiện không mở nắp bảo quản nhiệt độ 2-8°C Độ ổn định sau mở, bảo quản 2-8°C lọ đóng kín hai tuần
+ Trong q trình lưu trữ, hóa chất bị kết tủa bị đục mà nhiễm khuẩn không ảnh hưởng đến chất lượng Trong trường hợp cần ly tâm ( 10 phút 1500 x g) lọc màng lọc kích thước 0.45 μm
- Các dụng cụ tiêu hao khác Ống nghiệm;
(2)Bông, cồn sát trùng, bơm tiêm kim lấy máu, dây ga rô
3 Người bệnh: Cần giải thích mục đích xét nghiệm để bệnh nhân người nhà bệnh hiểu, từ hợp tác trình lấy máu
4 Phiếu xét nghiệm: có đầy đủ thơng tin bệnh nhân bao gồm họ tên, tuổi, khoa phòng, chẩn đốn, tình trạng mẫu, tên BS định, ngày định, ngày lấy mẫu, loại thuốc sử dụng (nếu có)…
III CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
1 Lấy bệnh phẩm xử lý mẫu bệnh phẩm
- Thực mẫu máu: huyết thanh, huyết tương, sử dụng ống có chứa chất chống đông heparin EDTA
- Mẫu huyết cần làm đơng hồn tồn sau li tâm không chứa hạt nhỏ dấu tích fibrin Mẫu mỡ máu bị đục sau rã đông cần làm ly tâm (10 phút 15,000 x g)
2 Tiến hành kỹ thuật 2.1 Chuẩn bị máy phân tích
Dựng đường chuẩn: dựa điểm với nồng độ khác Phân tích QC: level Khi QC đạt tiến hành phân tích mẫu 2.2 Phân tích mẫu
Mẫu máu sử dụng sớm tốt, bảo quản 2-8ºC không ngày hoặc1 tháng làm đông -20ºC
Mẫu sau ly tâm chuyển vào khay đựng bệnh phẩm
Đánh số (hoặc ID bệnh nhân); chọn test vận hành theo protocol máy tự động phân tích
Mẫu tự động pha loãng 1:100 với N Diluent phải dùng vòng Nếu kết khoảng, xét nghiệm lặp lại với mẫu pha loãng cao thấp
IV NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Khoảng tham chiếu 405 trẻ em khỏe mạnh Bắc Mỹ châu Âu, 279 người trưởng thành khỏe mạnh từ Châu Âu
Nhóm tuổi IgG1 (g/L)
(3)> to ≤ years 2.65 - 9.38
> to ≤ years 3.62 - 12.28
> to ≤ 12 years 3.77 - 11.31 > 12 to ≤ 18 years 3.62 - 10.27
> 18 years 4.05 - 10.11
V NHỮNG SAI SĨT VÀ XỬ TRÍ
Các yếu tố ảnh hưởng đến kết quả: tán huyết mỡ máu, mẫu bị đục sau rã đông
Xử trí:
+ Khi lấy máu tránh gây vỡ hồng cầu, mẫu bị vỡ hồng cầu nên loại, yêu cầu lấy mẫu máu khác để xét nghiệm