Bệnh nhân bị viêm tụy cấp có nồng độ thấp trong huyết thanh thể hiện mối tương quan với độ nặng của bệnh.. Ở đây, sự tăng tỉ lệ α2- macroglobulin/albumin là một biểu hiện của huyế[r]
(1)QUY TRÌNH
ĐỊNH LƯỢNG α2-MACROGLOBULIN
I NGUYÊN LÝ
Protein chứa dịch thể người hình thành phức thể miễn nhiễm phản ứng hóa miễn dịch với kháng thể đặc hiệu Các phức hợp phân tán chùm ánh sáng chiếu xuyên qua mẫu Cường độ ánh sáng phân tán tỉ lệ thuận với nồng độ protein tương ứng mẫu Kết đánh giá cách so sánh với chuẩn biết nồng độ
α2-macroglobulin chất ức chế protease có tác động đặc biệt đến enzyme tiêu hóa Nó vận chuyển hormone enzyme, thể chức kích thích ức chế việc phát triển hệ thống bạch huyết ức chế thành phần bổ thể hệ thống đông máu Nồng độ thay đổi suốt đời khác giới Với tình trạng tăng tiêu hủy fibrin, sau phẫu thuật lớn, bệnh nhân bị nhiễm trùng huyết suy gan nặng có mức α2-macroglobulin thường thấp Bệnh nhân bị viêm tụy cấp có nồng độ thấp huyết thể mối tương quan với độ nặng bệnh Đối với bệnh nhân nhồi máu tim cấp có nồng độ α2-macroglobulin thấp có tiên lượng tốt với thời gian sống > năm Xét nghiệm α2-macroglobulin xét nghiệm chẩn đoán phân biệt quan trọng hội chứng viêm thận Ở đây, tăng tỉ lệ α2-macroglobulin/albumin biểu huyết niệu thận Ở bệnh nhân xơ hóa gan đái tháo đường, mức α2-macroglobulin tăng
II CHUẨN BỊ
1 Cán thực hiện: 01 Bác sỹ 01cán đại học 01 kỹ thuật viên chuyên ngành Hóa sinh
2 Phương tiện, hóa chất 2.1 Phương tiện
Máy phân tích: BN ProSpec Máy ly tâm
Tủ lạnh để bảo quản hóa chất, chất hiệu chuẩn, QC mẫu bệnh phẩm Ống nghiệm
2.2 Hóa chất:
Hóa chất bao gồm: N Antiserum to Human α2-Macroglobulin huyết động vật sản xuất tạo miễn dịch thỏ với α2-macroglobulin người độ tinh khiết cao Nồng độ kháng thể hoạt động < 26 g/L Chất bảo quản: Sodium azide < g/L
(2)Chưa mở hộp: ổn định 2–8 °C ngày hết hạn ghi hộp thuốc
Đã mở hộp thuốc: tuần lưu trữ 2–8 °C, đậy nắp cẩn thận sau sử dụng không bị nhiễm (eg., vi sinh vật)
Hóa chất yêu cầu không cung cấp hộp thuốc N Protein Standard SL
N/T Protein Controls SL/L, M H N/T Protein Control LC
N Reaction Buffer N Diluent
2.3 Các dụng cụ tiêu hao khác - Ống nghiệm;
- Găng tay, nước rửa tay, khăn lau tay, trang;
- Bông, cồn sát trùng, bơm tiêm kim lây máu, dây ga rô
3 Người bệnh: Cần giải thích mục đích xét nghiệm để bệnh nhân người nhà bệnh hiểu, từ hợp tác q trình lấy máu
4 Phiếu xét nghiệm: có đầy đủ thông tin bệnh nhân bao gồm họ tên, tuổi, khoa phịng, chẩn đốn, tình trạng mẫu, tên BS định, ngày định, ngày lấy mẫu, loại thuốc sử dụng (nếu có)…
III CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
1 Lấy bệnh phẩm xử lý mẫu bệnh phẩm
Thực mẫu máu: mẫu huyết huyết tương heparin
Mẫu huyết phải đơng lại hồn tồn và, sau ly tâm, khơng chứa hạt dấu vết fibrin Mẫu máu nhiễm mỡ bị đục sau rã đông cần phải làm cách ly tâm (10 phút tốc độ 15,000 x g) trước thực xét nghiệm
Tính ổn định mẫu: Mẫu ổn định vịng 21 ngày nhiệt độ 2-8°C; bảo quản lâu nhiệt độ (-20°C) thấp Mẫu huyết làm đông lần
2 Tiến hành kỹ thuật 2.1 Chuẩn bị máy phân tích
(3)Mẫu bệnh phẩm nên tiến hành phân tích vịng 2giờ Mẫu sau ly tâm chuyển vào khay đựng bệnh phẩm
Đánh số (hoặc ID bệnh nhân); chọn test vận hành theo protocol máy tự động phân tích
Mẫu huyết huyết tương pha loãng tự động 1:20 với N Diluent Mẫu pha loãng cần đo vòng Nếu kết thu nằm khoảng đo, cần chạy lại mẫu với độ pha loãng cao thấp
IV NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Đánh giá thực tự động theo g/L huyết huyết tương
Khoảng tham chiếu sau áp dụng cho mẫu huyết huyết tương từ người lớn khỏe mạnh: α2-macroglobulin: 1.3 đến 3.0 g/L
Nồng độ α2-macroglobulin nước tiểu người khỏe mạnh thấp giới hạn phát xét nghiệm
Tuy nhiên, phòng xét nghiệm nên thiết lập khoảng tham chiếu riêng giá trị khác theo nhóm dân số
V NHỮNG SAI SĨT VÀ XỬ TRÍ
Các yếu tố ảnh hưởng đến kết khi: Mẫu máu bị huyết tán, nồng độ bilirubin > 0.6 g/L, hemoglobin tự > 10 g/L, triglycerid máu 5.7 g/L
Xử trí: Khi lấy máu tránh gây vỡ hồng cầu, mẫu bị vỡ hồng cầu nên loại, yêu cầu lấy mẫu máu khác để xét nghiệm
Đối với mẫu có chứa hạt cần ly tâm làm trước thực xét nghiệm Không sử dụng mẫu máu nhiễm mỡ mậu bị đục mà làm cách ly tâm (10 phút 15,000 x g)