Nghiên cứu quy trình xác định đồng thời auramine o và rhodamine b trong một số mẫu gia vị bằng phương pháp sắc ký lỏng kết nối detector tử ngoại khả kiến

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH KHOA HĨA HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI AURAMINE O VÀ RHODAMINE B TRONG MỘT SỐ MẪU GIA VỊ BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KẾT NỐI DETECTOR TỬ NGOẠI KHẢ KIẾN Sinh viên thực hiện: Phan Thị Ngọc Trinh MSSV: 40201104 Giáo viên hướng dẫn: Ths Huỳnh Thị Nhàn Ths Nguyễn Thị Tuyết Nhung TP Hồ Chí Minh - Tháng 5/2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH KHOA HĨA HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI AURAMINE O VÀ RHODAMINE B TRONG MỘT SỐ MẪU GIA VỊ BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KẾT NỐI DETECTOR TỬ NGOẠI KHẢ KIẾN Sinh viên thực hiện: Phan Thị Ngọc Trinh MSSV: 40201104 Giáo viên hướng dẫn: Ths Huỳnh Thị Nhàn Ths Nguyễn Thị Tuyết Nhung TP Hồ Chí Minh - Tháng 5/2018 LỜI CẢM ƠN Trước tiên, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô Nguyễn Thị Tuyết Nhung cô Huỳnh Thị Nhàn giao cho em đề tài nghiên cứu Cảm ơn tận tình hướng dẫn, hỗ trợ em suốt thời gian nghiên cứu Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy Nguyễn Ngọc Hưng, thầy Nguyễn Thành Lộc, thầy Trần Bữu Đăng, cô Nguyễn Thị Ánh Tuyết, cô Phạm Thị Thảo Uyên cô Văn Thị Cẩm Duyên giúp đỡ em q trình làm khóa luận Và em không quên gửi lời cảm ơn chân thành đến cô Lê Thị Hồng Vân, thầy Huỳnh Lời, thầy Lê Văn Huấn Trung tâm Khoa học Công nghệ Dược Sài Gòn (Sapharcen) – Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh tạo điều kiện cho em sử dụng trang thiết bị, máy móc cần thiết phục vụ đề tài hết lòng hướng dẫn, giúp đỡ em Cảm ơn gia đình, tất bạn bè ủng hộ, giúp đỡ chỗ dựa tinh thần, nguồn động viên cho em lúc khó khăn Đặc biệt, cảm ơn bạn Nguyễn Thanh Thơi đồng hành em trình thực đề tài Một lần em xin cảm ơn thầy khoa Hóa học – trường Đại học Sư phạm TP Hồ Chí Minh nhiệt tình giảng dạy em bốn năm qua Cuối xin cảm ơn tất người Kính chúc thầy cơ, tất bạn bè gia đình thật nhiều sức khỏe TP Hồ Chí Minh, tháng năm 2018 Sinh viên Phan Thị Ngọc Trinh XÁC NHẬN CỦA CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG Chủ tịch Hội đồng MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Auramine O 1.1.1 Khái quát chung 1.1.2 Cấu tạo, tính chất vật lý hóa học 1.1.3 Độc tính 1.2 Rhodamine B .4 1.2.1 Khái quát chung 1.2.2 Cấu tạo, tính chất vật lý hóa học 1.2.3 Độc tính 1.3 Tình hình nghiên cứu Auramine O Rhodamine B nước 1.4 Cơ sở lý thuyết phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) .8 1.4.1 Định nghĩa .8 1.4.2 Nguyên tắc trình sắc ký 1.4.3 Phân loại sắc ký hấp phụ 1.4.4 Một số đại lượng đặc trưng hệ sắc ký 10 1.4.5 Hệ thống HPLC 15 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM 18 2.1 Hóa chất dụng cụ 18 2.1.1 Hóa chất 18 2.1.2 Dụng cụ - thiết bị 19 2.2 Nội dung nghiên cứu 20 2.3 Các bước tiến hành sắc ký 20 2.3.1 Chuẩn bị dung môi 20 2.3.2 Chuẩn bị mẫu đo 20 2.3.3 Cách vận hành thiết bị 21 2.4 Khảo sát điều kiện phân tích sắc ký 22 2.4.1 Khoảng bước sóng detector 22 2.4.2 Tối ưu hóa pha động .22 2.5 Thẩm định phương pháp 26 2.5.1 Khoảng tuyến tính xây dựng đường chuẩn 26 2.5.2 Xác định giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) 27 2.5.3 Xác định độ lặp lại phép đo 28 2.6 Lấy mẫu, chuẩn bị mẫu 29 2.6.1 Lấy mẫu 29 2.6.2 Xử lý sơ mẫu phân tích 30 2.7 Khảo sát quy trình xử lý mẫu gia vị 30 2.7.1 Khảo sát giai đoạn chiết pha rắn (SPE) 30 2.7.2 Khảo sát thể tích dung dịch chiết 32 2.7.3 Xác định hệ số thu hồi quy trình 33 2.7.4 Tính chọn lọc quy trình 33 2.8 Phân tích số mẫu gia vị 33 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 3.1 Khảo sát điều kiện phân tích sắc ký 34 3.1.1 Chọn khoảng bước sóng cho detector 34 3.1.2 Tối ưu hóa pha động .34 3.2 Thẩm định phương pháp 46 3.2.1 Xây dựng đường chuẩn 46 3.2.3 Xác định LOD, LOQ 48 3.2.4 Xác định độ lặp lại phương pháp 50 3.3 Khảo sát quy trình xử lý mẫu gia vị 50 3.3.1 Khảo sát giai đoạn SPE .50 3.3.2 Khảo sát thể tích dung dịch chiết 53 3.3.3 Tính chọn lọc quy trình 54 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 56 4.1 Kết luận 56 4.2 Đề xuất 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 PHỤ LỤC .60 DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1.1 Một số phương pháp xác định AO RB Bảng 2.1 Danh mục dung môi 18 Bảng 2.2 Danh mục hóa chất 18 Bảng 2.3 Danh mục thiết bị máy móc phục vụ đề tài nghiên cứu 19 Bảng 2.4 Cách pha dung dịch chuẩn để xây dựng đường chuẩn AO RB 27 Bảng 2.5 Thơng tin mẫu gia vị phân tích 29 Bảng 3.1 Kết bước sóng hấp thụ cực đại, độ hấp thụ quang AO RB MeOH ACN 34 Bảng 3.2 Ảnh hưởng CH3COOH đến phân tách AO, RB 37 Bảng 3.3 Ảnh hưởng HCOOH đến phân tách AO, RB 38 Bảng 3.4 Ảnh hưởng H3PO4 đến phân tách AO, RB 39 Bảng 3.5 Chương trình gradient pha động khảo sát tốc độ dịng 40 Bảng 3.6 Khảo sát tỷ lệ dung môi ban đầu 41 Bảng 3.7 Các chương trình sắc ký với đệm acetate (pH = 4,2) 42 Bảng 3.8 So sánh kết khảo sát dung môi MeOH với dung môi ACN 43 Bảng 3.9 Chương trình pha động tối ưu 45 Bảng 3.10 Giá trị nồng độ diện tích peak AO, RB thu tiến hành phân tích HPLC 46 Bảng 3.11 Kết xác định LOD 48 Bảng 3.12 Kết xác định LOQ 49 Bảng 3.13 Kết độ lặp lại thời gian lưu diện tích peak 50 Bảng 3.14 Kết khảo sát giai đoạn SPE 51 Bảng 3.15 Tỷ lệ phần trăm thể tích ACN khảo sát 52 Bảng 3.16 Tỷ lệ phần trăm thể tích ACN hệ số thu hồi giai đoạn SPE 52 Bảng 3.17 Hệ số thu hồi bước khảo sát thể tích dung dịch chiết mẫu ngũ vị hương lần 53 Bảng 3.18 Hệ số thu hồi bước khảo sát thể tích dung dịch chiết mẫu ngũ vị hương lần 54 Bảng 4.1 Thành phần pha động 56 Bảng 4.2 Phương trình đường chuẩn AO RB 56 DANH MỤC HÌNH VẼ Trang Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo AO Hình 1.2 Cơng thức cấu tạo RB Hình 1.3 Sơ đồ tương tác cột sắc ký Hình 1.4 Thời gian lưu HPLC [6] 10 Hình 1.5 Giản đồ tách hai peak sắc ký A B [6] 14 Hình 1.6 Các thiết bị hệ thống HPLC 15 Hình 2.1 Đồ thị biểu diễn chương trình (MeOH – CH3COOH pH = 3,6) 23 Hình 2.2 Đồ thị biểu diễn chương trình (ACN – CH3COOH pH = 3,6) 24 Hình 2.3 Đồ thị biểu diễn gradient pha động – khảo sát pH từ 3,0 đến 4,5 25 Hình 2.4 Đồ thị biểu diễn gradient pha động – khảo sát pH 2,3 2,6 25 Hình 2.5 Cách xác định S/N [4] 27 Hình 2.6 Sơ đồ giai đoạn chiết pha rắn 30 Hình 2.7 Sơ đồ quy trình chiết mẫu gia vị 32 Hình 3.1 Sắc đồ chương trình 35 Hình 3.2 Sắc đồ chương trình 35 Hình 3.3 Sắc đồ chương trình 36 Hình 3.4 Sắc đồ chương trình 36 Hình 3.5 Khảo sát tách AO, RB sử dụng acetic acid (pH = 3,0) 37 Hình 3.6 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc hệ số khơng đối xứng T theo pH 38 Hình 3.7 Sắc đồ khảo sát tách AO, RB sử dụng acid formic (pH = 3,0) 38 Hình 3.8 Khảo sát tách AO, RB sử dụng acid phosphoric 0,03% 39 Hình 3.9 Sắc đồ chuẩn AO RB ứng với tốc độ dòng 0,6 mL/phút 40 Hình 3.10 Sắc đồ chuẩn AO RB ứng với tốc độ dòng 0,7 mL/phút 40 Hình 3.11 Sắc đồ chuẩn AO RB ứng với tốc độ dòng 0,85 mL/phút 40 Hình 3.12 Sắc đồ chuẩn AO RB ứng với tốc độ dòng 1,0 mL/phút 41 Hình 3.13 Quan hệ tuyến tính diện tích peak nồng độ chuẩn AO 47 Hình 3.14 Quan hệ tuyến tính diện tích peak nồng độ chuẩn RB 47 Hình 3.15 Sắc đồ xác định LOD AO RB 48 Hình 3.16 Sắc đồ xác định LOQ AO RB 49 Hình 3.17 Độ tinh khiết peak AO, RB xác định phần mềm 55 Hình 3.18 Sắc đồ chuẩn AO 0,03 ppm RB 0,02 ppm mẫu ngũ vị hương 55 Hình 4.1 Sơ đồ giai đoạn SPE tối ưu 57 3.3.1.2 Khảo sát tỷ lệ phần trăm thể tích ACN dịch chiết Để khảo sát tỷ lệ phần trăm thể tích ACN dịch chiết, tiến hành pha dung dịch thêm chuẩn hỗn hợp AO RB nồng độ với tỷ lệ phần trăm thể tích ACN tương ứng 5, 10, 20, 30, 50, 100% Bảng 3.15 Tỷ lệ phần trăm thể tích ACN khảo sát Ký hiệu Thể tích chuẩn hỗn hợp Thể tích Thể tích H2O Tỷ lệ ACN mẫu 100 ppm thêm vào (mL) ACN (mL) (mL) (%) A 0,06 14,94 100 B 0,06 7,50 7,44 50 C 0,06 4,50 10,44 30 D 0,06 3,00 11,94 20 E 0,06 1,50 13,44 10 F 0,06 0,75 14,19 Ghi chú: Các mẫu A, B, C, D, E, F có nồng độ chuẩn AO RB 0,4 ppm thể tích 15 mL; khác tỷ lệ ACN trình bày Bảng 3.15 Kết luận: Đối với mẫu A B, giai đoạn rửa giải không thu tín hiệu AO RB sắc đồ, nhiên giai đoạn nạp mẫu có tín hiệu AO RB Đối với mẫu C, D, E F khơng thu tín hiệu AO RB giai đoạn nạp mẫu; thu tín hiệu Ao RB giai đoạn rửa giải Và kết mẫu C, D, E F trình bày Bảng 3.16 Bảng 3.16 Tỷ lệ phần trăm thể tích ACN hệ số thu hồi giai đoạn SPE Ký hiệu Tỷ lệ ACN Speak Hệ số thu hồi mẫu (%) AO RB AO RB C 30 4181,88 4900,17 102,00 108,64 D 20 5416,33 6313,22 129,22 140,58 E 10 4837,68 5945,87 116,46 132,28 F 3192,78 4996,56 80,19 110,82 Kết cho thấy tỷ lệ phần trăm thể tích ACN dịch chiết trước cho qua cột SPE tối ưu 30% Và bước quy trình tỷ lệ phần trăm thể tích ACN dịch chiết khơng q 30% 52 3.3.2 Khảo sát thể tích dung dịch chiết Trong đề tài này, tiến hành khảo sát thể tích dung dịch chiết 45 mL với lần chiết thứ 30 mL, lần chiết thứ hai 15 mL Mẫu bột ngũ vị hương sử dụng để khảo sát thể tích dung dịch chiết Bảng 3.17 Hệ số thu hồi bước khảo sát thể tích dung dịch chiết mẫu ngũ vị hương lần Ký hiệu Thể tích rửa Speak Hệ số thu hồi (%) mẫu giải (mL) AO RB A1 4057,51 879,37 A2 1917,10 292,37 B1 3919,52 845,92 B2 1758,73 306,74 C1 3511,53 C2 1730,49 AO RB 50,49 52,53 30,07 51,19 - - - - - - Ghi chú: - Ký hiệu mẫu A B thêm vào 0,06 mL chuẩn hỗn hợp AO RB nồng độ 100 ppm, mẫu C không thêm chuẩn - Ký hiệu mẫu A1, B1, C1 tương ứng với lần chiết thứ A2, B2, C2 tương ứng với lần chiết thứ hai mẫu A, B C Nhận xét: - Kết mẫu C cho thấy mẫu ngũ vị hương sử dụng có chứa AO; - Với thể tích dung dịch chiết 45 mL chưa chiết hết CPT khỏi mẫu gia vị Cho nên chúng tơi đề xuất thể tích dung dịch chiết 50 mL với lần chiết Chúng tiến hành khảo sát tiếp sau: phân tích mẫu bột ngũ vị hương thêm chuẩn mẫu ngũ vị hương không thêm chuẩn Và sử dụng 50 mL hỗn hợp ACN : NH3 (0,5%, v:v) (70:30, v:v) chia làm lần chiết, sau dịch chiết tập hợp vào bình định mức định mức nước đến 100 mL Lấy 20 mL dịch chiết bình định mức nạp qua cột SPE, rửa giải thu mL dung dịch, lọc qua màng 0,2 µm, tiêm vào hệ thống HPLC để xác định hệ số thu hồi 53 Bảng 3.18 Hệ số thu hồi bước khảo sát thể tích dung dịch chiết mẫu ngũ vị hương lần Ký hiệu Khối Thể tích mẫu lượng rửa giải (g) (mL) Speak Hệ số thu hồi (%) AO RB AO RB 3487,90 2179,93 33,18 75,83 3812,62 2621,18 44,59 90,80 A 3,02688 B 3,00695 C 3,04706 3729,05 2525,63 40,48 87,56 D 3,04079 2499,03 - - - Ghi chú: Mẫu A, B, C thêm 0,25 mL dung dịch chuẩn hỗn hợp AO RB nồng độ 100 ppm Mẫu D không thêm chuẩn Nhận xét: hệ số thu hồi AO chưa cao, hệ số thu hồi RB mẫu B C lớn 80% đáp ứng kỳ vọng theo AOAC 3.3.3 Tính chọn lọc quy trình Chúng tơi khảo sát tín hiệu chuẩn hỗn hợp AO RB thêm vào mẫu thử thấy peak AO RB bị ảnh hưởng nhiều mẫu Khi đó, độ tin khiết xác định phần mềm với nồng độ chuẩn AO, RB 1,0 ppm đạt 100%, kết luận CPT phân biệt rõ với chất khác Đối với trường hợp nồng độ chuẩn AO, RB nhỏ 0,1 ppm, diện tích peak nhỏ bị ảnh hưởng nhiều nên gây khó khăn bước định lượng dựa vào Speak RB AO a) Sắc đồ chuẩn hỗn hợp AO RB 1,0 ppm thêm vào mẫu thử 54 AO b) Sắc đồ 430 nm RB c) Sắc đồ 540 nm Hình 3.17 Độ tinh khiết peak AO, RB xác định phần mềm RB AO Hình 3.18 Sắc đồ chuẩn AO 0,03 ppm RB 0,02 ppm mẫu ngũ vị hương 55 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 4.1 Kết luận Trong khoảng thời gian thực đề tài: “Nghiên cứu quy trình xác định đồng thời Auramine O Rhodamine B số mẫu gia vị phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao kết nối với detector tử ngoại khả kiến”, thực công việc sau: Chọn điều kiện để tách xác định đồng thời AO RB số mẫu gia vị phương pháp HPLC - Cột tách: ZORBAX Eclipse XDB – C18 (5 μm x 4,6 mm x 250 mm) cột bảo vệ tương ứng - Pha động: gradient với hai kênh, A: MeOH, B: H3PO4 0,03% Bảng 4.1 Thành phần pha động Thời gian (phút) % MeOH % (H3PO4 0,03%) Curve 30 70 30 70 16 80 20 20 30 70 - Tốc độ dịng: 1,0 mL/phút - Thể tích vịng mẫu: 20 μL - Nhiệt độ cột: 35±5oC - Nhiệt độ buồng mẫu: 20±5oC - Bước sóng: 430 nm (AO) 540 nm (RB) Xây dựng đường chuẩn để xác định AO RB Xác định LOD LOQ Bảng 4.2 Phương trình đường chuẩn AO RB Phương trình hồi quy Hệ số tương quan AO RB y = 3022,8x – 62,647 y = 2949,4x – 20,993 R = 0,9999 R= 0,9998 - LOD = 0,02 ppm - LOQ = 0,05 ppm 56 Tối ưu hóa giai đoạn SPE sử dụng cột Oasis HLB Hoạt hóa cột: mL MeOH, mL H2O Nạp mẫu: 15 mL dung dịch mẫu chuẩn bị Rửa tạp: mL hỗn hợp 5% MeOH H2O Rửa giải: mL HCOOH 2% MeOH (95:5, v:v) Hình 4.1 Sơ đồ giai đoạn SPE tối ưu Chưa hồn tất việc khảo sát thể tích chiết mẫu gia vị nên chưa thể tiến hành phân tích AO RB mẫu gia vị Trong q trình khảo sát, nhận thấy mẫu bị kho có tín hiệu AO nên chúng tơi gửi mẫu phân tích Trung tâm phân tích cơng nghệ cao Hoàn Vũ: hàm lượng AO mẫu bột gia vị bị kho 19,7 ppm khơng phát RB Trong q trình khảo sát, chúng tơi phát mẫu bột ngũ vị hương có hàm lượng AO 4.2 Đề xuất - Tiến hành khảo sát tiếp thể tích dung dịch chiết số lần chiết để tối ưu hóa quy trình xử lý mẫu gia vị - Áp dụng quy trình phân tích xác định đồng thời AO RB cho số mẫu gia vị, có bột gia vị bị kho bột ngũ vị hương 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bùi Thị Ngoan, Trần Thắng, Bùi Thị Kim Ngân (2010) Xác định Rhodamine B thực phẩm kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Y học thực hành, 732 (9), 47 – 49 Cơng ty TNHH Merck Việt Nam Phiếu an tồn hóa chất theo Quy định (EU) số 1907/2006 (sửa đổi, bổ sung: 16/06/2017) Khoa Hóa học (2000) Cơ sở lý thuyết sắc ký lỏng hiệu cao Trường Đại học Tổng hợp Hà Nội Nguyễn Văn Ri (2007) Các phương pháp tách sắc ký Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học quốc gia Hà Nội Phạm Thị Thu Hà (2016) Nghiên cứu phương pháp xác định Auramine O thức ăn chăn nuôi LC-MS/MS Khóa luận tốt nghiệp, Trường Đại học Dược Hà Nội Phạm Luận (2014) Phương pháp phân tích sắc ký chiết tách Nhà xuất Bách khoa Hà Nội Phịng phân tích sắc ký (CASE) (09/02/2012) Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 11/07/2017, truy cập từ http://case.vn/vi-VN/34/96/118/details.case Trần Thị Thanh Nga (2011) Xác định Rhodamine B thực phẩm kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao HPLC sử dụng detector UV Luận văn Thạc sĩ khoa học, Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên, Đại học quốc gia Hà Nội Trần Cao Sơn (2010) Thẩm định phương pháp phân tích hóa học vi sinh vật Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, trang 16 – 59 10 Trung tâm Chất lượng nông nghiệp thủy sản vùng – Cục Quản lý chất lượng Nông lâm sản thủy sản Dự thảo TCVN Thực phẩm – Xác định hàm lượng Auramine – Phương pháp sắc lý lỏng ghép khối phổ (LC – MS/MS) Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ 11 Trung tâm Tiêu chuẩn - Đo lường - Chất lượng khu vực I TCVN 4889:1989 Gia vị - Lấy mẫu Ủy ban Khoa học kỹ thuật Nhà nước 12 Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm quốc gia TCVN 8670-2011 Thực phẩm - xác định Rhodamine B phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ 58 13 Võ Đức Minh (22/08/2013) Lao 29/11/2017, truy cập từ http://voer.edu.vn/m/lao/45519ef5 Tiếng Anh 14 Chiye Tatebe, Xining Zhong, Takashi Ohtsuki, Hiroki Kubota, Kyoko Sato & Hiroshi Akiyama (2014) A simple and rapid chromatographic method to determine unauthorized basic colorants (rhodamine B, auramine O, and pararosaniline) in processed foods Food Science & Nutrition, 2(5), 547– 556p 15 Dixit, Sumita; Khanna, Subhash K.; Das, Mukul (2011) A Simultaneous Determination of by Reversed-Phase Basic Dyes Encountered Simple in Food Method for Preparations HPLC Journal of AOAC International, 94 (6), 1874 – 1881p 16 Juan Li, Xiao-Ming Ding, Dan-Dan Liu, Fei Guo, Yu Chen, Yan-Bing Zhang, Hong-Min Liu (2013) Simultaneous determination of eight illegal dyes in chili products by liquid chromatography–tandem mass spectrometry Journal of Chromatography B, 942–943, 46–52p 17 Juan Li, Xiaoming Ding, Jiaxin Zheng, Dandan Liu, Fei Guo1 Hongmin Liu, Yanbing Zhang (2014) Determination of synthetic dyes in bean and meat products by liquid chromatography with tandem mass spectrometry J Sep Sci., 37, 2439–2445p 18 Government Chemist (2006) Analysis illegal dyes in chilli powder by LC/UV 15p 19 IARC Auramine and Auramine Production IARC Monograph Volume 99 30p 20 I Lopez Arbeloa and P Ruiz Ojeda (1981) Molecular Forms Of Rhodamine B Chemical Physics Letters, 79 (2), 347 – 350p 21 KM Gray, MJ Walker, MJS Burn, M Mazur, K Niedzwiedzka, K Liszka and D Thorburn Burns (2016) Illegal Dyes in Food and Speakes – A 2006 LGC LC UV/Visible Method Reviewed and Updated for 19 Dyes Journal of the Association of Public Analysts, 18 – 39p 22 Sabnis R.W (2010) Handbook of biological dyes and stains The United States: John Wiley & Sons, Inc; P, 27-29p 23 Sigma-Aldrich, Inc Auramine O (A9655) – Product Information Sheet 2p 24 Ruth Winter, M.S (2010) A Consumer’s Dictionary Of Cosmetic Ingredient (6th) Potter/TenSpeed/Harmony; p576 59 PHỤ LỤC Phụ lục Quang phổ hấp thụ chuẩn đơn AO 2,0 ppm MeOH Phụ lục Quang phổ hấp thụ chuẩn đơn AO 2,0 ppm ACN 60 Phụ lục Quang phổ hấp thụ chuẩn đơn RB 2,0 ppm MeOH Phụ lục Quang phổ hấp thụ chuẩn đơn RB 2,0 ppm ACN 61 Phụ lục Quang phổ chuẩn hỗn hợp AO RB MeOH Phụ lục Quang phổ chuẩn hỗn hợp AO RB ACN 62 AO Phụ lục Sắc đồ chương trình AO Phụ lục Sắc đồ chương trình AO RB Phụ lục Sắc đồ chương trình 63 RB AO Phụ lục 10 Sắc đồ chương trình AO Phụ lục 11 Sắc đồ bước sóng 430 nm chương trình RB Phụ lục 12 Sắc đồ bước sóng 540 nm chương trình 64 AO Phụ lục 13 Sắc đồ bước sóng 430 nm chương trình RB Phụ lục 14 Sắc đồ bước sóng 540 nm chương trình 65 66 ... AO RB b? ??t gia vị Xuất phát từ lý trên, định chọn đề tài: ? ?Nghiên cứu quy trình xác định đồng thời Auramine O Rhodamine B số mẫu gia vị phương pháp sắc ký lỏng kết nối detector tử ngoại khả kiến? ??.. .B? ?? GI? ?O DỤC VÀ Đ? ?O T? ?O TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH KHOA HĨA HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI AURAMINE O VÀ RHODAMINE B TRONG MỘT SỐ MẪU GIA VỊ B? ??NG PHƯƠNG... hồi quy trình xác định đồng thời AO RB mẫu gia vị, thực phân tích mẫu gia vị mẫu gia vị có thêm chuẩn Thêm lượng chuẩn AO RB xác định v? ?o mẫu thử, phân tích mẫu thêm chuẩn đó, làm lặp lại lần quy