Xác định hóa chất bảo vệ thực vật carbamat trong một số loại rau quả bằng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LCMS)

Với những ưu điểm trên, chúng em đã chọn đề tài: “Xác định hóa chất bảo vệ thực vật carbamat trong một số loại rau quả bằng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ LC/MS”... Hóa chất bảo vệthực

MỤC LỤC

MỤC LỤC

MỞ ĐẦU 3

Chương 1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU - HÓA CHẤT BẢO VỆ THỰC VẬT NHÓM CARBAMATE 4

1.1 Giới thiệu về hóa chất bảo vệ thực vật 4

1.1.1 Định nghĩa 4

1.1.2 Phân loại 4

1.1.3 Tác hại của hóa chất bảo vệ thực vật 5

1.2 Giới thiệu về hóa chất bảo vệ thực vật nhóm carbamate 6

1.3 Một số thuốc bảo vệ thực vật nhóm carbamate 7

1.3.1 Carbofuran 7

1.3.2 Carbaryl 7

1.3.3 Fenobucarb 8

1.3.4 Propoxur 8

1.3.5Giới hạn cho phép 9

Chương 2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU - SẮC KÝ LỎNG GHÉP KHỐI PHỔ LC/MS 11

2.1.Phương pháp xác định 11

2.1.1 Phương pháp cực phổ 11

2.1.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử 11

2.1.3 Phương pháp phân tích dòng chảy 11

2.1.4 Phương pháo điện di mao dẫn 12

2.1.5 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao 12

2.1.6 Phương pháp sắc ký khí 13

2.1.7 Phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ 13

2.2 Phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ 14

2.2.1 Phương pháp sắc ký lỏng 15

2.2.1.1 Pha động trong HPLC 15

2.2.1.2 Pha tĩnh trong HPLC 16

2.2.2 Phương pháp khối phổ 17

2.2.2.1 Cấu tạo 17

a Nguồn ion 17

b Bộ phận phân tích khối lượng 19

c Bộ phận phát hiện 21

Chương 3.QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CARBAMATE 22

3.1 Phương tiện nghiên cứu 22

3.1.1 Thiết bị 22

3.1.2 Dụng cụ 22

3.1.3 Dung môi hóa chất 23

3.2 Cách tiến hành 24

3.2.1 Yêu cầu chung 24

3.2.2 Chuẩn bị mẫu 24

3.2.3 Chuẩn bị phần mẫu thử 25

3.2.3.1 Chiết xuất mẫu thu mẫu 25

3.2.3.2 Làm sạch mẫu thử 25

3.2.4 Chuẩn bị phần mẫu trắng 25

3.2.5 Chuẩn bị phần mẫu kiểm tra hiệu suất thu hồi 25

3.2.6 Điều kiện phân tích 26

3.2.7 Dựng đường chuẩn 26

3.2.8 Xác định 27

3.3 Tính toán kết quả 27

3.3.1 Công thức tính kết quả 27

Chương 4 KẾT LUẬN 28

TÀI LIỆU THAM KHẢO 29

MỞ ĐẦU

Thời gian gần đây tình trạng thực phẩm nhiễm dư lượng thuốc bảo vệ thực vật quámức cho phép vẫn đang diễn ra hết sức nghiêm trọng Nhiều vụ ngộ độc thực phẩm xảy rahàng loạt, được xác định có liên quan đến dư lượng thuốc bảo vệ thực vật có trong rau, củ,quả Không chỉ dừng lại ở mức độ gây ngộ độc, dư lượng thuốc bảo vệ thực vật còn lạitrong rau quả còn được nghi ngờ là những mối nguy lớn có khả năng gây ung thư hay độtbiến gen Do đó, việc xác định dư lượng thuốc trừ sâu còn lại trong rau quả là việc làm hếtsức cần thiết để xác định mức độ an toàn của rau và để ngăn chặn ảnh hưởng trên người,động vật và môi trường sống Một trong những nhóm thuốc bảo vệ thực vật được sử dụngrất phổ biến hiện nay là thuốc trừ sâu họ Carbamate(CBM)

Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ là một kĩ thuật mới được phát triển trong nhữngnăm gần đây Về cơ bản, nó là phương pháp sắc ký lỏng sử dụng bộ phận phát hiện làdetector khối phổ Phương pháp này tuy mới ra đời nhưng nó được ứng dụng rộng rãi đểphân tích đồng thời các thuốc trừ sâu đặc biệt là nhóm carbamate Phương pháp có thểphân tích đồng thời từ hàng chục đến hàng trăm các loại thuốc trừ sâu khác nhau Phươngpháp có nhiều ưu điểm như độ chọn lọc cao, giới hạn phát hiện thấp, thời gian phân tíchnhanh, có thể định lượng đồng thời các chất có thời gian lưu giống nhau mà phương pháp

sắc kí lỏng thường không làm được

Với những ưu điểm trên, chúng em đã chọn đề tài: “Xác định hóa chất bảo vệ thực

vật carbamat trong một số loại rau quả bằng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (LC/MS)”.

Chương 1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU HÓA CHẤT BẢO VỆ THỰC VẬT NHÓM CARBAMATE

I.1 Giới thiệu về hóa chất bảo vệ thực vật

1.1.1 Định nghĩa

Hóa chất bảo vệ thực vật là những hợp chất có nguồn gốc tự nhiên hoặc tổng hợp hóahọc được dùng để phòng và trừ sinh vật gây hại cây trồng và nông sản Hóa chất bảo vệthực vật gồm nhiều nhóm khác nhau, gọi theo tên nhóm sinh vật gây hại, như thuốc trừ sâudùng để trừ sâu hại, thuốc trừ bệnh dùng để trừ bệnh cây…

1.1.2 Phân loại

Các loại hóa chất bảo vệ thực vật gồm nhiều loại, chủ yếu gồm 4 nhóm chính:

- Nhóm Clo hữu cơ (organnochlorine) là các dẫn xuất clo của một số hợp chất hữu cơnhư diphenyletan, cyclodien, benzen, hexan Nhóm này bao gồm những hợp chất hữu

cơ rất bền vững trong môi trường tự nhiên và thời gian bán phân huỷ dài (ví dụ nhưDDT có thời gian bán phân huỷ là 20 năm, chúng ít bị đào thải và tích luỹ vào cơ thểsinh vật qua chuỗi thức ăn) Đại diện của nhóm này là Aldrin, Dieldrin, DDT,Heptachlo, Lindan, Methoxychlor

- Nhóm lân hữu cơ (organophosphorus) đều là các este, là các dẫn xuất hữu cơ củaacid photphoric Nhóm này có thời gian bán phân huỷ ngắn hơn so với nhóm Clo hữu

cơ và được sử dụng rộng rãi hơn Nhóm này tác động vào thần kinh của côn trùng bằngcách ngăn cản sự tạo thành men Cholinestaza làm cho thần kinh hoạt động kém, làmyếu cơ, gây choáng váng và chết Nhóm này bao gồm một số hợp chất như parathion,malathion, diclovos, clopyrifos…

- Nhóm Carbamat là các dẫn xuất hữu cơ của acid cacbamic, gồm những hoá chất ítbền vững hơn trong môi trường tự nhiên, song cũng có độc tính cao đối với người vàđộng vật Khi sử dụng, chúng tác động trực tiếp vào men Cholinestraza của hệ thần

kinh và có cơ chế gây độc giống như nhóm lân hữu cơ Đại diện cho nhóm này như:carbofuran, carbaryl, carbosulfan, isoprocarb, methomyl…

- Nhóm Pyrethroid là những thuốc trừ sâu có nguồn gốc tự nhiên, là hỗn hợp của cáceste khác nhau với cấu trúc phức tạp được tách ra từ hoa của những giống cúc nào đó.Đại diện của nhóm này gồm cypermethrin, permethrin, fenvalarate, deltamethrin,…Ngoài ra, còn có một số nhóm khác như: các chất trừ sâu vô cơ (nhóm asen), nhómthuốc trừ sâu sinh học có nguồn gốc từ vi khuẩn, nấm, virus (thuốc trừ nấm, trừ vikhuẩn…), nhóm các hợp chất vô cơ (hợp chất của đồng, thủy ngân, …)

1.1.3 Tác hại của hóa chất bảo vệ thực vật

Hầu hết hóa chất bảo vệ thực vật đều độc với con người và động vật máu nóng ở cácmức độ khác nhau Theo đặc tính hóa chất bảo vệ thực vật được chia làm hai loại: chấtđộc cấp tính và chất độc mãn tính

Hóa chất bảo vệ thực vật có thể thâm nhập vào cơ thể con người và động vật quanhiều con đường khác nhau; thông thường qua 03 đường chính: hô hấp, tiêu hoá vàtiếp xúc trực tiếp Khi tiếp xúc với hóa chất bảo vệ thực vật, con người có thể bị nhiễmđộc cấp tính hoặc mãn tính, tùy thuộc vào phạm vi ảnh hưởng của thuốc

 Nhiễm độc cấp tính: Là nhiễm độc tức thời khi một lượng đủ lớn hoá chất bảo

vệ thực vật thâm nhập vào cơ thể Những triệu chứng nhiễm độc tăng tỉ lệ với việctiếp xúc và trong một số trường hợp nặng có thể dẫn tới tử vong Biểu hiện bệnh lýcủa nhiễm độc cấp tính: mệt mỏi, ngứa da, đau đầu, lợm giọng, buồn nôn, hoa mắtchóng mặt, khô họng, mất ngủ, tăng tiết nước bọt, yếu cơ, chảy nước mắt, sảy thai,nếu nặng có thể gây tử vong

 Nhiễm độc mãn tính: Là nhiễm độc gây ra do tích luỹ dần dần trong cơ thể.

Thông thường, không có triệu chứng nào xuất hiện ngay trong mỗi lần nhiễm Saumột thời gian dài, một lượng chất độc lớn tích tụ trong cơ thể sẽ gây ra các triệuchứng lâm sàng Biểu hiện bệnh lý của nhiễm độc mãn tính: kích thích các tế bàoung thư phát triển, gây đẻ quái thai, dị dạng, suy giảm trí nhớ và khả năng tập trung,

suy nhược nghiêm trọng, ảnh hưởng đến hệ thần kinh, gây tổn hại cho gan, thận vànão.

I.2 Giới thiệu về hóa chất bảo vệ thực vật nhóm carbamate

Thuốc trừ sâu carbamat là các dẫn xuất của acid cacbamic có tính độc trừ sâu Nhiềuhợp chất trong nhóm tuy có hiệu lực cao với sâu hại nhưng không có tác dụng trừ nhệnhoặc chỉ có tác dụng trừ một số thuộc nhóm này mà không trừ được nhóm sâu khác

Là nhóm thuốc bảo vệ thực vật rất phổ biến có công thức chung

Được dùng nhiều trong nông nghiệp: thuốc trừ sâu, diệt cỏ, trừ

nấm…Có hơn 50 loại carbamate được biết đến phần lớn là do tổng

hợp Carbamate không bền, dễ bị phân hủy dưới tác động của môi

trường Carbamate là những chất độc và cực độc theo tiêu chuẩn

Việt Nam được xếp vào nhóm độc I hoặc II

 Cơ chế tác động:

- Các thuốc carbamate kìm hãm men cholinesteraza bằng cách cacbaryl hóa các vị trí hoạtđộng của toàn men Nhưng sự liên kết giữa các thuốc carbamate với cholinesteraza thườngkhông bền, nên có trường hợp sâu hại phục hồi được

- Các thuốc carbamate chỉ ức chế được men cholinesteraza khi toàn bộ phân tử của chúnggắn được lên bề mặt của men Các chất carbamate càng bền, càng ức chế mencholinesteraza mạnh

- Carbamate kìm hãm vị trí men tác động, dẫn đến hệ thần kinh không kiểm soát được, làmmất khả năng phối hợp giữa các cơ quan, giải phóng quá mức hormon, sinh vật mất nước

và chết

Các thuốc carbamate an toàn với cây, ít độc đối với cá hơn các thuốc lân hữu cơ;không tồn lưu quá lâu trên nông sản và môi trường sống Độ độc của thuốc đối với độngvật máu nóng rất khác nhau, tùy thuộc vào loại thuốc

Các chất chủ yếu thuộc nhóm bao gồm: carbaryl, methiocarb, pirimicarb, oxamyl,carbendazim, propoxur, aminocarb, aldicarb…

Trong đó: R1 là ankyl R2 là aryl

I.3 Một số thuốc bảo vệ thực vật nhóm carbamate

I.3.1 Carbofuran

Carbofuran là một trong những thuốc trừ sâu nhóm carbamat độc nhất, có tên là dihydro-2,2-dimethyl-7-benzofuranyl methylcarbamate, tên thương mại là Furadan,Curater

2,3-Carbofuran là một trong những thuốc trừ sâu có độc tính cao đối với con người Nó cóthể xâm nhập vào cơ thể qua hô hấp, qua miệng và qua da Triệu chứng khi bị ngộ độccarbofuran: buồn nôn, đau bụng, tiêu chảy, giảm tầm nhìn… Ở liều cao có thể gây tử vong.Chỉ cần uống 1ml carbofuran cũng có thể dẫn tới tử vong

Theo WHO, mức hấp thụ hàng ngày cho phép (ADI) của carbofuran là 0,01mg/kgtrọng lượng cơ thể Liều gây chết trung bình đối với chuột qua miệng là LD50 = 5mg/kg

I.3.2 Carbaryl

Carbaryl có tên là 1-naphthyl methylcarbamate, tên thương mại là Sevin, là một loạithuốc trừ sâu nhóm carbamat Carbayl là tinh thể màu trắng, tan kém trong nước nhưng tannhiều trong dung môi phân cực như đimethyl sulfoxide và đimethyl formaldehyde

Carbaryl là một chất ức chế men cholinesteraza và có độc với con người Nó được xếpvào loại chất gây ung thư đối với con người.

Carbaryl là một thuốc trừ sâu có độc tính trung bình Khi tiếp xúc với carbaryl có thểgây ra ngộ độc cấp và mãn tính với các triệu chứng như: buồn nôn, chuột rút dạ dày, tiêuchảy Các triệu chứng khác ở liều lượng cao bao gồm đổ mồ hôi, làm mờ của tầm nhìn, và

co giật, ảnh hưởng đến phổi, thận và gan

Mức hấp thụ hàng ngày tối đa cho phép ADI của carbaryl là 0,1mg/kg trọng lượng cơthể Đối với chuột, liều gây chết trung bình qua miệng LD50 = 250 – 850mg/kg, liều gâychết trung bình qua hô hấp LC50 = 0,005 – 0,023mg/kg

I.3.4 Propoxur

Propoxur có tên theo IUPAC là 2-isopropoxyphenyl methylcarbamate, là một dẫn xuấtcủa carbamat và được sử dụng làm thuốc trừ sâu

cơ quan sinh sản và hệ thần kinh trung ương

Đối với chuột, liều gây chết trung bình qua miệng là 90 – 128mg/kg, qua da là 800– 1000mg/kg Theo WHO, mức hấp thụ hàng ngày tối đa cho phép ADI của propoxur là0,02mg/kg trọng lượng cơ thể

Liều gây chết trung bình qua miệng đối với chuột là 410mg/kg

I.3.5 Giới hạn cho phép

Dư lượng là phần còn lại của hoạt chất, các sản phẩm chuyển hóa và các thành phầnkhác có trong thuốc, tồn tại trên cây trồng, nông sản, đất, nước sau một thời gian dưới tácđộng của hệ sống và điều kiện ngoại cảnh Dư lượng của thuốc được tính bằng mg thuốc

có trong 1kg nông sản, đất hay nước

Mức dư lượng tối đa cho phép (MRL) là giới hạn dư lượng của một loại thuốc,được phép tồn tại về mặt pháp lí hoặc xem như có thể chấp nhận được ở trong hay trênnông sản, thức ăn gia súc mà không gây hại cho người sử dụng và vật nuôi khi ăn các nôngsản đó

Bảng 1 Mức dư lượng tối đa cho phép sử dụng thuốc bảo vệ thực vật carbamat ở một số

quốc gia

Quốc gia Đối tượng Carbofuran

(mg/kg)

Carbayl(mg/kg)

Propoxur(mg/kg)

Fenobucarb(mg/kg)

Một số nhà phân tích đã xác định carbaryl và carbofuran bằng phương pháp cực phổxung vi phân

2.1.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử

Phương pháp này đã xác định đồng thời 3 loại thuốc trừ sâu nhóm carbamat bằngphương pháp quang phổ hấp thụ phân tử Phương pháp dựa trên sự tạo mầu của carbamatvới thuốc thử p-aminoacetanlide Khoảng nồng độ tuân theo định luật Lambert - Beer củacarbaryl, propoxur và carbosulfan Phương pháp đã được áp dụng để phân tích thuốc trừsâu nhóm carbamat trên các mẫu rau, đất, thức ăn, nước … với hiệu suất thu hồi khoảng95%

Các phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử chỉ phân tích được một loại carbamatnào đó hoặc phân tích đồng thời một số carbamat Hơn nữa, phương pháp có độ nhạykém Do đó, hiện nay phương pháp này rất ít được ứng dụng để phân tích carbamat

2.1.3 Phương pháp phân tích dòng chảy (flow injection analysis – FIA)

Phân tích dòng chảy là một kĩ thuật phân tích động, trong đó mẫu phân tích ở dạnglỏng được bơm vào dòng chất mang chuyển động liên tục Sau đó trong vòng phản ứngchất phân tích sẽ phản ứng với thuốc thử có trong dòng chất mang, hay được bơm trựctiếp vào đầu vòng phản ứng, để tạo ra một sản phẩm có thể phát hiện được theo một tínhchất hóa lí nào đó nhờ một loại detector phù hợp Các tính chất hóa lí đó thường là: sự

hấp thụ quang phân tử UV-VIS và nguyên tử, tính chất phát xạ của nguyên tử, tính chấthuỳnh quang, sự thay đổi chiết suất, tính chất điện hóa Ứng với mỗi tính chất người ta cómột loại detector Đây là một phương pháp đơn giản, nhanh và dễ dàng kết hợp vớiphương pháp sắc ký lỏng để xác định đồng thời một số carbamat.

Một phương pháp phân tích dòng chảy sử dụng detector huỳnh quang để xác địnhcarbofuran đã được đề cập Phương pháp dựa trên phản ứng của carbofuran với KMnO4

và luminol trong môi trường kiềm nhẹ sẽ tạo thành hợp chất màu Phương pháp đã ứngdụng thành công xác định dư lượng carbofuran trong mẫu rau diếp

Phương pháp phân tích dòng chảy có ưu điểm là nhanh, thiết bị phân tích dễ kiếm và

rẻ tiền Tuy nhiên, phương pháp không thể xác định đồng thời các chất carbamat Do vậy,phương pháp cũng ít được ứng dụng để phân tích carbamat

2.1.4 Phương pháp điện di mao quản

Phương pháp sắc ký mao quản điện động học mixen đã xác định đồng thời aldicarb,carbofuran và một số dạng chuyển hóa của nó trong nước bề mặt

Kĩ thuật điện di mao quản là một kĩ thuật mới được phát triển khoảng hơn 10 năm trởlại đây Đây là một kĩ thuật có thời gian phân tích nhanh, tốn ít dung môi và hóa chất.Việc xác định các hóa chất bảo vệ thực vật bằng thiết bị này vẫn đang được nghiên cứu

và chưa có nhiều loại thuốc trừ sâu được xác định bằng phương pháp này

2.1.5 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao sử dụng detetor huỳnh quang xác định đồngthời các chất carbamat như aldicarb, propoxur, carbofuran, carbaryl và methiocarb trongmật

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao là một phương pháp thông dụng để xác địnhcác hợp chất hữu cơ Phương pháp này đã được ứng dụng để xác định đồng thời các chấtcarbamat Tuy nhiên, phương pháp có độ nhạy kém khi sử dụng detector UV, còn khi sửdụng detector huỳnh quang, phương pháp có độ nhạy tốt hơn nhưng chỉ có thể nhận biếtchất phân tích thông qua thời gian lưu Đối với những nền mẫu phức tạp, các chất phântích rất dễ bị ảnh hưởng bởi nền mẫu, nếu chỉ dựa vào thời gian lưu sẽ rất khó để có thểkhẳng định chất cần phân tích

2.1.6 Phương pháp sắc ký khí

Xác định thuốc trừ sâu carbamat và nhóm nito hữu cơ trong thực phẩm bằng phươngpháp sắc ký khí khối phổ Phương pháp đã xác định đồng thời 29 loại thuốc trừ sâu trongmột số thực phẩm như táo, khoai tây, gạo, chuối… Mẫu được chiết bằng aceton và đượclàm sạch bằng 3 loại cột chiết pha rắn khác nhau: cột diatomaceous, cột diatomit kết hợpvới cột C18, cột florisil Hiệu suất chiết các mẫu thực phẩm bằng 3 loại cột đều trên 80%.Sau đó, mẫu được xác định bằng phương pháp sắc ký khí khối phổ

Phương pháp sắc ký khí đã được ứng dụng rộng rãi để xác định các hóa chất bảo vệthực vật như các chất clo hữu cơ, lân hữu cơ, pyrethroid và carbamat Tuy nhiên phươngpháp chỉ phân tích được những chất dễ bay hơi, còn các chất khó bay hơi thì phải tạo dẫnxuất nên tốn thời gian và hóa chất Hơn nữa, để phân tích được đồng thời các chất thì cầnthời gian phân tích dài Do vậy, phương pháp ít được ứng dụng để phân tích carbamat

2.1.7 Phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ

Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ là một kĩ thuật mới được phát triển trong nhữngnăm gần đây Về cơ bản, nó là phương pháp sắc ký lỏng sử dụng bộ phận phát hiện làdetector khối phổ Phương pháp này tuy mới ra đời nhưng nó được ứng dụng rộng rãi

để phân tích đồng thời các thuốc trừ sâu đặc biệt là nhóm carbamat Phương pháp có thểphân tích đồng thời từ hàng chục đến hàng trăm các loại thuốc trừ sâu khác nhau

 Phương pháp có nhiều ưu điểm như:

- Độ chọn lọc cao, giới hạn phát hiện thấp, thời gian phân tích nhanh, có thể địnhlượng đồng thời các chất có thời gian lưu giống nhau mà phương pháp sắc kí lỏngthường không làm được

- Tự động hóa, đa năng; hiệu quả tách tốt nên có thể phân tích nhiều hỗn hợp phứctạp; độ chọn lọc cao; giới hạn phát hiện thấp; thời gian phân tích nhanh; có thểđịnh lượng đồng thời các chất có thời gian lưu giống nhau mà phương pháp sắc kí

lỏng thường không làm được.

- Phương pháp này đã được nghiên cứu để khắc phục được một số nhược điểm của các phương pháp sắc kí lỏng thông thường như: mất thời gian, tốn kém hóa chất (mẫu, pha tĩnh, dung môi), tách hỗn hợp phức tạp và kém hiệu quả Từ đó có nó được ứng dụng rộng rãi trong phân tích hóa học, sinh hóa, thực phẩm, dược phẩm, môi trường,…

Với những ưu điểm trên, chúng tôi đã chọn phương pháp sắc kí lỏng khối phổ đểnghiên cứu xác định đồng thời các chất carbamat.

2.2 Phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ

Phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ: là phương pháp được hiểu là mẫu được phân

tách và tinh sạch qua sắc ký,sau đó mẫu được đưa qua máy khối phổ để tiếp tục xác địnhkhối lượng nguyên tử đó Kết thúc quá trình ta thu được lượng mẫu nhất định và cấu trúcphân tử đó

Sơ đồ chung:

Nguyên tắc hoạt động: Nếu chúng ta nạp mẫu phân tích gồm hỗn hợp các chất phân tích

A, B, C … Vào cột phân tích, kết quả các chất A,B,C… Sẽ được tách ra khỏi nhau sau khi

đi qua cột Quyết định hiệu quả của sự tách sắc ký là tổng hợp các tương tác Đối với mỗichất, sự lưu giữ được quy định bởi 3 lực F1, F2, F3 Trong đó F1 và F2 giữ vai trò quyếtđịnh, còn F3 là yếu tố ảnh hưởng không lớn Ở đây F1 là lực giữ chất phân tích trên cột, F2 làlực kéo của pha động đối với chất phân tích ra khỏi cột, F3 là lực tương tác giữa pha động vàpha tĩnh Như vậy với các chất thì F1 và F2 là khác nhau, kết quả là các chất khác nhau sẽ dichuyển trong cột với tốc độ khác nhau và tách ra khỏi nhau khi ra khỏi cột

Mẫu cần phân tích sẽ được chuyển thành trạng thái hơi, sau đó mới bắt đầu quá trình đo khốiphổ Để đo đặc tính của các phân tử cụ thể,máy khối phổ sẽ chuyển chúng thành các ion,chuyển động kiểm soát chuyển động của chúng bởi điện từ trường bên ngoài Quá trình thực