Nghiên cứu triển khai tổng hợp mafenid acetat ở quy mô pilot

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI Khammay SENTHAVISOUK NGHIÊN CỨU TRIỂN KHAI TỔNG HỢP MAFENID ACETAT Ở QUY MƠ PILOT KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2020 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI Khammay SENTHAVISOUK Mã sinh viên: 1401523 NGHIÊN CỨU TRIỂN KHAI TỔNG HỢP MAFENID ACETAT Ở QUY MÔ PILOT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: GS.TS Nguyễn Đình Luyện Nơi thực hiện: Bộ mơn Cơng nghiệp Dược Cơng ty Cổ phần Hóa dược Việt Nam HÀ NỘI 2020 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, với lòng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn nước Cộng hòa Xã hội chủ nghĩa Việt Nam, nước Cộng hòa Dân chủ Nhân dân Lào, quý thầy Trường Đại học Dược Hà Nội nói chung, thầy cô môn Công nghiệp Dược - Trường Đại học Dược Hà Nội nói riêng giảng dạy, truyền đạt cho em kiến thức, kinh nghiệm suốt năm học qua, đồng thời giúp đỡ, tạo điều kiện để em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Đặc biệt, em xin gửi lời cảm ơn đến GS.TS Nguyễn Đình Luyện tận tình giúp đỡ, trực tiếp bảo, góp ý, hết lịng hỗ trợ em suốt q trình làm khóa luận môn Em vô biết ơn xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS Nguyễn Văn Hải, TS Nguyễn Văn Giang, hai thầy quan tâm sát sao, giải đáp thắc mắc gặp phải nghiên cứu, cho lời khuyên quý báu học bổ ích công việc sống Nhân dịp này, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới toàn thể cán bộ môn Công nghiệp Dược - Trường Đại học Dược Hà Nội, ban lãnh đạo Công ty cổ phần Hóa dược Việt Nam ln giúp đỡ tạo điều kiện tốt phịng thí nghiệm, thiết bị để em hoàn thành tốt việc nghiên cứu thực nghiệm Bộ môn Công ty Cuối cùng, em xin bày tỏ lòng biết ơn tới gia đình, bạn bè bạn sinh viên nghiên cứu môn Công nghiệp Dược giúp đỡ, động viên cổ vũ em suốt thời gian qua Do thời gian nghiên cứu hạn hẹp, kiến thức cịn hạn chế nên em khơng tránh khỏi việc mắc thiếu sót q trình thực khóa luận Em kính mong nhận ý kiến góp ý q báu q thầy để đề tài khóa luận hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Sinh viên Khammay SENTHAVISOUK MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan mafenid acetat 1.1.1 Cấu trúc, tính chất lý hóa tiêu chuẩn kiểm nghiệm 1.1.2 Tính chất dược lý sử dụng điều trị 1.2 Lựa chọn phương pháp tổng hợp phân tích yếu tố cơng nghệ 1.2.1 Giai đoạn tổng hợp succinimid (2) từ acid succinic (1) ure 1.2.2 Giai đoạn tổng hợp N-benzylsuccinimid (3) từ benzyl clorid 1.2.3 Giai đoạn tổng hợp 4-(2,5-dioxopyrolidin-1-yl)methylbenzensulfonamid (4) từ 1.2.4 Giai đoạn tổng hợp p-[(benzylidenamino)methyl]benzensulfonamid (5) từ giai đoạn tổng hợp mafenid base từ 1.2.5 Giai đoạn tạo muối mafenid acetat từ mafenid base acid acetic 1.2.6 Giai đoạn tinh chế mafenid acetat đạt dược dụng 10 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 11 2.2 Nội dung nghiên cứu 13 2.2.1 Tổng hợp hoá học, tinh chế sản phẩm 13 2.2.2 Đánh giá sơ độ tinh khiết chất trung gian sản phẩm cuối 15 2.2.3 Xác định cấu trúc sản phẩm 15 2.2.4 Kiểm nghiệm sản phẩm 15 2.3 Phương pháp nghiên cứu 15 2.3.1 Phương pháp tổng hợp hoá học, tinh chế sản phẩm 15 2.3.2 Các phương pháp đánh giá sơ độ tinh khiết chất trung gian sản phẩm cuối 15 2.3.3 Phương pháp xác định cấu trúc 15 2.3.4 Phương pháp kiểm nghiệm 16 Chương THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 17 3.1 Tổng hợp mafenid base 17 3.1.1 Tổng hợp succinimid (2) 17 3.1.2 Tổng hợp N-benzylsuccinimid (3) 19 3.1.3 Tổng hợp 4-(2,5-dioxopyrolidin-1-yl)methylbenzensulfonamid (4) 22 3.1.4 Tổng hợp p-[(benzylidenamino)methyl]benzensulfonamid (5) 25 3.1.5 Tổng hợp mafenid base từ imin 27 3.2 Tạo muối mafenid acetat 30 3.3 Tinh chế mafenid acetat đạt tiêu chuẩn USP 32 3.4 Xác định cấu trúc sản phẩm 33 3.5 Kiểm nghiệm sản phẩm 35 3.6 Bàn luận 35 3.6.1 Về quy trình tổng hợp 35 3.6.2 Về cấu trúc sản phẩm 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 40 4.1 Kết luận 40 4.2 Kiến nghị 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO 41 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ac Acetyl FT-IR Quang phổ chuyển đổi hồng ngoại Fourier HR Phân giải cao IR Phổ hồng ngoại MS Phổ khối lượng NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân SKLM Sắc ký lớp mỏng UV Phổ tử ngoại DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Nguyên liệu, hoá chất nghiên cứu 11 Bảng 2.2 Thiết bị, dụng cụ 12 Bảng 3.1 Thơng số hiệu chỉnh quy trình tổng hợp quy mô kg/mẻ 17 Bảng 3.2 Thơng số hiệu chỉnh quy trình tổng hợp quy mô kg/mẻ 20 Bảng 3.3 Thơng số hiệu chỉnh quy trình tổng hợp quy mô kg/mẻ 23 Bảng 3.4 Thơng số hiệu chỉnh quy trình tổng hợp quy mô kg/mẻ 26 Bảng 3.5 Thơng số hiệu chỉnh quy trình tổng hợp mafenid quy mô kg/mẻ 28 Bảng 3.6 Thông số hiệu chỉnh quy trình tạo muối mafenid acetat quy mô kg/mẻ 31 Bảng 3.7 Kết phân tích phổ IR mafenid acetat 33 Bảng 3.8 Kết phân tích phổ HR-MS mafenid acetat 34 Bảng 3.9 Kết phân tích phổ 1H-NMR mafenid acetat 34 Bảng 3.10 Kết phân tích phổ 13C-NMR mafenid acetat 34 Bảng 3.11 Kết kiểm nghiệm nguyên liệu mafenid acetat theo USP 42 35 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ Hình 1.1 Cấu trúc mafenid acetat Hình 1.2 Biệt dược sulfamylon Hình 1.3 Nguyên lý phản ứng phương pháp tổng hợp mafenid acetat qua trung gian N-benzylsuccinimid Hình 2.1 Sơ đồ tổng quát trình tổng hợp mafenid acetat 14 Hình 2.2 Nguyên lý phản ứng tổng hợp mafenid acetatError! Bookmark not defined Hình 3.1 Sơ đồ phản ứng tổng hợp succinimid (2) từ acid succinic (1) 17 Hình 3.2 Sơ đồ quy trình tổng hợp succinimid từ acid succinic 19 Hình 3.3 Sơ đồ phản ứng tổng hợp N-benzylsuccinimid (3) từ succinimid (2) 19 Hình 3.4 Sơ đồ quy trình tổng hợp N-benzylsuccinimid 22 Hình 3.5 Sơ đồ phản ứng tổng hợp sulfonamid từ N-benzylsuccinimid (3) 22 Hình 3.6 Sơ đồ quy trình tổng hợp sulfonamid từ N-benzylsuccinimid 25 Hình 3.7 Sơ đồ phản ứng tổng hợp imin từ sulfonamid 25 Hình 3.8 Sơ đồ quy trình tổng hợp imin từ sulfonamid 27 Hình 3.9 Sơ đồ phản ứng tổng hợp mafenid base từ imin 27 Hình 3.10 Sơ đồ quy trình tổng hợp mafenid base từ imin 30 Hình 3.11 Sơ đồ phản ứng tạo muối mafenid acetat từ mafenid base 30 Hình 3.12 Sơ đồ quy trình tạo muối tinh chế mafenid acetat 33 Hình 3.13 Phổ IR mafenid acetat 37 Hình 3.14 Phổ 1H-NMR mafenid acetat 38 Hình 3.15 Phổ 13C-NMR mafenid acetat 38 ĐẶT VẤN ĐỀ Mafenid acetat (tên khoa học: p-aminomethyl-benzen-sulfonamid) sulfamid kháng khuẩn có tác dụng tốt với hầu hết vi khuẩn gram âm, đặc biệt Pseudomonas aeruginosa Clostridium Thuốc có khả thâm nhập vào vết bỏng mảng mô hoại tử, phá vỡ xâm lấn vết bỏng, nên thuốc dùng ngồi khơng thể thiếu thường dùng trường hợp nhiễm trùng bệnh nhân bỏng độ 2, độ [13,20] Sản phẩm sử dụng phổ biến nhiều nước, góp phần làm giảm đáng kể tỷ lệ tử vong nhiễm trùng bị bỏng, lựa chọn điều trị lựa chọn thứ hai phòng ngừa nhiễm trùng tổn thương bỏng [2,13,20] Hiện nay, nhu cầu sử dụng mafenid acetat viện bỏng ngày tăng, nhiên Việt Nam nhập lượng hạn chế thành phẩm dạng cream [20] Mafenid sulfamid có cấu trúc hố học đơn giản, phương pháp tổng hợp khơng khác nhiều so với phương pháp tổng hợp sulfamid chung, sử dụng nguồn nguyên liệu sản xuất hầu hết hoá chất bản, dễ mua Nhiều phương pháp tổng hợp giới thống kê đánh giá, nhiên hầu hết công bố quy mơ phịng thí nghiệm [2-4, 6-12,14-19,21-26] Tại Việt Nam, nghiên cứu mafenid triển khai từ năm 2015 Trong đó, số phương pháp tổng hợp lựa chọn khảo sát đánh giá quy mơ phịng thí nghiệm đến kg/mẻ [2,11,21] Những kết nghiên cứu ra, tổng hợp từ nguyên liệu N-benzylsuccinimid cho hiệu suất cao nhất, trình thực phản ứng tinh chế sản phẩm tương đối đơn giản, sản phẩm đạt tiêu chuẩn dược dụng, thích hợp để nâng cấp quy mơ cơng nghiệp Đặc biệt, năm 2017, Đề tài nghiên cứu khoa học cấp Nhà nước thuộc Chương trình Hóa dược: “Nghiên cứu xây dựng quy trình tổng hợp mafenid acetat”, mã số nhiệm vụ: CNHD.ĐT.062/15-17, nhóm nghiên cứu Bộ môn Công nghiệp Dược - Trường Đại học Dược Hà Nội thực thành công, nghiệm thu chuyển thành dự án sản xuất thử nghiệm, triển khai thành cơng Quy trình cơng nghệ “Tổng hợp mafenid acetat đạt tiêu chuẩn USP 36 quy mô kg/mẻ” (được ban hành theo Quyết định Ban hành quy trình KHCN thuộc đề tài cấp Quốc gia số 990/QĐDHN ngày 04 tháng 12 năm 2017 Hiệu trưởng Trường Đại học Dược Hà Nội) [11,21] Nhằm tiếp tục việc nghiên cứu tổng hợp mafenid bào chế thành phẩm ứng dụng công nghiệp dược Việt Nam, đề tài “Nghiên cứu triển khai tổng hợp mafenid acetat quy mô pilot” thực với mục tiêu: Triển khai quy trình cơng nghệ tổng hợp mafenid acetat dược dụng quy mô kg/mẻ Quy Thông số hiệu chỉnh Quy mô kg/mẻ kg/mẻ mô theo Nhận xét/Bàn luận [21] Công nghệ sấy sản 40 °C 12 60 °C Sấy nhiệt độ thấp phẩm mafenid base áp suất 12 môi trường chân không để giảm áp suất giảm tránh phân hủy nhóm amin tự Cơng nghệ thu hồi 10,0% 8,7% Benzaldehyd phản ứng với mafenid base nước cách tạo imin với dưới, tạo imin dạng tủa, có benzaldehyd thể dễ dàng thu hồi gần mafenid base toàn lượng Kết sản phẩm: + Cảm quan: mafenid base dạng tinh thể hình kim, màu trắng ánh vàng + Khối lượng imin thu hồi: 0,9 kg + Khối lượng sản phẩm mafenid base thu 5,2 kg, hiệu 81,5% + Hiệu suất thu hồi: 90,1% (quy mô kg/mẻ: 87,4%) + Nhiệt độ nóng chảy 150,8-152,2 °C Sơ đồ quy trình (Hình 3.10): 29 Hình 3.10 Sơ đồ quy trình tổng hợp mafenid base từ imin 3.2 Tạo muối mafenid acetat Nguyên lý phản ứng (Hình 3.11): Hình 3.11 Sơ đồ phản ứng tạo muối mafenid acetat từ mafenid base 30 Cách tiến hành: Cho 4,1 kg (23,6 mol) mafenid base vào 20,7 lít EtOH 96% bình cầu 30 lít, đun nóng 60-70 °C tan hồn tồn Nhỏ từ từ 1,5 kg (~25,3 mol) acid acetic băng vào bình cầu giờ, vừa khuấy vừa đun thêm 30 phút Để nguội nhiệt độ phòng, làm lạnh °C 12 Lọc qua phễu lọc Buchner, rửa tủa tinh thể lần IPA lạnh (3 x 300 mL), hong khơ ngồi khơng khí sấy chân khơng 60 °C Kết hiệu chỉnh thông số kg/mẻ so với kg/mẻ (xem bảng 3.6): Bảng 3.6 Thông số hiệu chỉnh quy trình tạo muối mafenid acetat quy mô kg/mẻ Thông số hiệu chỉnh Quy mô kg/mẻ Tỷ lệ dung môi phản 5,0 : Quy mô kg/mẻ theo [21] 5,0 : ứng : mafenid base Nhận xét/Bàn luận Tương đương quy mơ (lít/kg) Phương thức nạp liệu Hịa tan mafenid Hòa tan mafenid Tương đương quy cho phản ứng base vào ethanol base vào ethanol mô 96%, sau từ từ 96%, sau từ acid acetic từ acid acetic Tốc độ khuấy cho phản 150 vòng/phút 50-200 Tốc độ khuấy khơng ứng vịng/phút ảnh hưởng đáng kể 60-70 °C Tương đương quy Nhiệt độ phản ứng 60-70 °C mô Tỷ lệ acid acetic : 1,1 : 1,1 : mafenid base Nhiệt độ kết tinh Tương đương quy mô 0-5 °C °C Tương đương quy mô 31 Thông số hiệu chỉnh Quy mô kg/mẻ Quy mô kg/mẻ theo [21] Nhận xét/Bàn luận Công nghệ tái sử dụng Tái sử dụng dịch Không đưa Dịch kết tinh lần dịch kết tinh kết tinh cho 1-2 phương án chứa nhiều tạp, lần thu hồi để kết tủa mafenid base Kết sản phẩm: + Cảm quan: tinh thể mafenid acetat dạng bột mịn màu trắng + Khối lượng mafenid acetat thu được: 5,2 kg, hiệu suất 96,0% (quy mô kg/mẻ: 94,5%) + Nhiệt độ nóng chảy: 164,3-166,1 °C Rf =0,27 (hệ dung mơi n-butanol : acid acetic : nước = 9: 2: 2,5) 3.3 Tinh chế mafenid acetat đạt tiêu chuẩn USP Cách tiến hành: Hịa tan 5,3 kg mafenid acetat thơ bình 30 lít chứa ~ 22,0 lít ethanol 95% 7580°C điều kiện hồi lưu Sau mafenid acetat tan hồn tồn, làm nguội bình kết tinh nhiệt độ phòng để kết tinh qua đêm nhiệt độ 0°C Sau đó, lọc lấy tinh thể, sấy chân khơng 60 °C giờ, cân thu 5,0 g sản phẩm mafenid acetat (hiệu suất 94,3%) Kết sản phẩm: + Cảm quan: tinh thể mafenid acetat dạng bột mịn màu trắng + Khối lượng mafenid acetat tinh chế: 5,0 kg, hiệu suất 94,4% (quy mô kg/mẻ: 91,5%) + Nhiệt độ nóng chảy: 164,5-166,0 °C Rf =0,27 (hệ dung môi n-butanol : acid acetic : nước = 9: 2: 2,5) 32 Sơ đồ quy trình (Hình 3.12): Hình 3.12 Sơ đồ quy trình tạo muối tinh chế mafenid acetat 3.4 Xác định cấu trúc sản phẩm Kết phân tích phổ IR, HR-MS, 1H-NMR, 13C-NMR trình bày tương ứng bảng 3.7, 3.8, 3.9, 3.10 (các phụ lục kèm theo: 1, 2, 3, 3.a, 3.b, 4, 4.a, 4.b) Kết đo phổ DEPT, phổ chiều XRPD đưa phụ lục 5, 5.a, 6, 6.a, 6.b, 7, 7.a, 7.b Bảng 3.7 Kết phân tích phổ IR mafenid acetat Công thức cấu tạo Đỉnh hấp thụ (cm-1) Nhóm chức 3184, 2962 N-H 3074 C-H thơm 2090 1649, 1604, 1521 C=C 1546, 1415 C=O carboxylat 33 1323, 1145 SO2 Bảng 3.8 Kết phân tích phổ HR-MS mafenid acetat Công thức Khối lượng phân m/z lý thuyết tử 246,28 m/z thực tế 187,0541 187,0529 [M-AcO]+ [M-AcO]+ C9H14N2O4S Bảng 3.9 Kết phân tích phổ 1H-NMR mafenid acetat Cơng thức cấu tạo δ (ppm) Dạng tín hiệu Vị trí H 7,78 d, J = 8,5 Hz, 2H H-2, H-6 7,55 d, J = 8,0 Hz, 2H H-3, H-5 6,50 br.s, 5H NH3 NH2 3,89 s, 2H H-7 1,81 s, 3H H-2’ Bảng 3.10 Kết phân tích phổ 13C-NMR mafenid acetat δ (ppm) Cơng thức cấu tạo 34 Vị trí C 173,5 C-1’ 144,5 C-4 142,8 C-1 128,1 C-3, C-5 125,6 C-2, C-6 43,7 C-7 22,7 C-2’ 3.5 Kiểm nghiệm sản phẩm Sản phẩm đạt tiêu chuẩn Dược điển Mỹ USP 42 Kết trình bày bảng 3.11 Bảng 3.11 Kết kiểm nghiệm nguyên liệu mafenid acetat theo USP 42 TT Chỉ tiêu tiêu chuẩn áp Kết dụng Mô tả Đúng Định tính Đúng Phương pháp IR Phương pháp SKLM Đúng Đạt (0,1%) Đạt (0,1%) Yêu Cầu Bột màu trắng khô tơi Phổ hồng ngoại chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại mafenid acetat chuẩn Trên sắc ký đồ, dung dịch thử phải cho vết có màu sắc, giá trị Rf với vết mafenid acetat thu từ dung dịch chuẩn Cắn sau nung Nước Phương pháp Karlfischer pH Đạt (6,8) 6,4-6,8 Khoảng chảy Đạt Từ 162 °C-171 °C Khoảng chảy không °C Đạt (0,04%) Không 0,5% Tạp hữu Phương pháp SKLM Tạp đơn Tổng tạp Giới hạn Selen Phương pháp AAS Định lượng Phương pháp UV-VIS Đạt (0,04%) Đạt (Không phát hiện) Đạt (99,6%) Không 0,2% Không 1% Không 1,0% Không 30 ppm Hàm lượng mafenid acetat (C7H10N2O2S.C2H4O2) chế phẩm phải đạt từ 98,0% đến 102,0% tính theo chế phẩm khan 3.6 Bàn luận 3.6.1 Về quy trình tổng hợp Các kết thu cho thấy, hầu hết thông số quy mô kg/mẻ tương đương với quy mô nghiên cứu trước (1 kg/mẻ) Một số cách thức nạp liệu, tương thích thiết bị, phương thức xử lý sản phẩm điều chỉnh phù hợp nhằm đơn giản hóa thao 35 tác, dễ nâng cấp quy mơ sản xuất Ngồi ra, số phương án xử lý môi trường nghiên cứu Chẳng hạn, với phản ứng ngưng tụ tạo succinimid, NH3 sinh dẫn đường ống qua dung dịch acid sulfuric lỗng (10%) Ở quy mơ lớn, lượng amoni sulfat sinh thu hồi làm phân bón cho đất Phản ứng tổng hợp N-benzylsuccinimid (3) sử dụng benzyl clorid chất độc, kích ứng có mùi khó chịu Thực tế, phần hiệu chỉnh lượng tác nhân, lượng benzyl clorid rút bớt để tránh dư sau phản ứng, tránh gây ô nhiễm Ở phản ứng tổng hợp 4-(2,5-dioxopyrolidin-1-yl)methylbenzensulfonamid (4), HCl khí sinh hấp thụ qua dung dịch xút nước sữa vôi (CaO) công nghiệp Các dư phẩm (benzaldehyd, mafenid base nước cái) nghiên cứu thu hồi, để nâng cao hiệu suất giảm thải môi trường 3.6.2 Về cấu trúc sản phẩm Dữ liệu phổ IR cho phép phân tích dải hấp thụ đặc trưng dao động hóa trị dao động biến dạng nhóm chức liên kết điển hình cấu trúc phân tử chất ghi phổ Do đó, việc phân tích phổ hồng ngoại chủ yếu xác định nhóm chức để thấy q trình phản ứng tạo thành sản phẩm có nhóm chức mong muốn [1] Kết đo phổ IR mafenid acetat ra, sản phẩm tồn dạng muối N+H3 (amin bậc 1), thể đỉnh hấp thụ 2090 cm-1 Ngồi ra, phổ IR mafenid acetat cịn xuất đỉnh hấp thụ đặc trưng liên kết , C-H thơm 3074 cm-1, C-H no 2962 cm-1, C=C 1649, 1604, 1521 cm-1; C=O acetat 1546 1415 cm-1và đỉnh hấp thụ đặc trưng cho nhóm sulfonamid (SO2NH2): đỉnh hấp thụ 3184 cm-1 đặc trưng cho nhóm NH2; 1323 (ʋas) 1145 cm-1 (ʋs) đặc trưng cho nhóm -SO2- (Hình 3.13) 36 Hình 3.13 Phổ IR mafenid acetat Dữ liệu phổ khối (MS) dùng để xác định khối lượng phân tử chất tổng hợp đuợc số khối mảnh ion bị phân mảnh từ công thức cấu tạo chất [1] Kết đo phổ MS phân giải cao cho thấy, pic thực tế phổ thể giá trị m/z xác theo giá trị lý thuyết tính cho mafenid acetat Trong đó, mảnh anion acetat tách chế độ đo phổ, giá trị đo thuộc píc cation mafenid base: [M-AcO]+ Dữ liệu phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) dùng để khẳng định chắn cấu trúc chất Phổ 1H-NMR xác định có mặt proton dựa vào độ chuyển dịch hóa học, độ bội tín hiệu cộng hưởng, số lượng proton có mặt tạp chất [1] Phổ 13CNMR, DEPT cho biết khung cấu trúc carbon, bậc carbon liên kết nguyên tử C với nguyên tử khác có hợp chất Các phổ chiều (HSQC, HMBC) giúp xác định xác mối tương quan H C [1] Trên phổ đồ 1H-NMR mafenid acetat xuất tín hiệu proton anion acetat ứng với độ chuyển dịch hoá học δ 1,81 ppm dạng singlet Đồng thời xuất 2H nhóm methylen với δ 3,89 ppm, singlet Trên hình ảnh phổ 1H-NMR mafenid acetat vùng ứng với độ chuyển dịch hoá học 7,55 ppm 7,78 ppm tương ứng với proton nhân thơm cho tín hiệu doublet có số tương tác proton J = 8,0-8,5 Hz Điều chứng tỏ rằng, sản phẩm không lẫn tạp đồng phân ortho- (Hình 3.14) 37 Hình 3.14 Phổ 1H-NMR mafenid acetat Trên phổ đồ 13C-NMR mafenid acetat xuất tín hiệu 173,5 ppm đặc trưng trưng cho C=O acetat Như trình tạo muối xảy (Hình 3.15) Hình 3.15 Phổ 13C-NMR mafenid acetat 38 Các kết phân tích trên, kết hợp với kết phân tích phổ chiều (xem phụ lục 6, 6a, 6b, 7, 7a, 7b), phân tích XRPD (xem phụ lục 8) mafenid acetat khẳng định xác cấu trúc sản phẩm 39 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Đã xây dựng quy trình tổng hợp mafenid acetat từ nguyên liệu N-benzylsuccinimid quy mô kg/mẻ Sản phẩm khẳng định cấu trúc qua phân tích phổ IR, MS, 1HNMR, 13C-NMR, XRPD Tinh chế sản phẩm đạt yêu cầu hàm lượng theo USP 42 Hiệu suất tinh chế trung bình đạt 94,4% 4.2 Kiến nghị - Nghiên cứu độ ổn định nguyên liệu tổng hợp - Nghiên cứu hoàn thiện thủ tục pháp lý để đưa vào sản xuất ứng dụng điều trị viện bỏng 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Nguyễn Hữu Đĩnh, Trần Thị Đà (1999), “Ứng dụng số phương pháp phổ nghiên cứu cấu trúc phân tử”, Nhà xuất Giáo Dục, Hà Nội, trang 27-99, 296-320 Nguyễn Văn Giang (2018), “Nghiên cứu xây dựng quy trình tổng hợp tinh chế mafenid acetat đạt tiêu chuẩn dược dụng”, Luận án Tiến sỹ Dược học, Trường Đại học Dược Hà Nội Nguyễn Văn Giang, Hoàng Xuân Nghĩa, Nguyễn Văn Hải, Nguyễn Đình Luyện (2017), “Bước đầu nghiên cứu tổng hợp mafenit axetat qua trung gian phtalimit”, Tạp chí hóa học, tập 55 số 1, tr 96-100 Nguyễn Văn Giang, Nguyễn Văn Thắng, Nguyễn Văn Hải, Nguyễn Đình Luyện (2017), “Phương pháp hiệu tổng hợp mafenit axetat”, Tạp chí hóa học, tập 55 số 4E23, tr 32-35 Lê Thị Thu Hằng, Nguyễn Như Lâm, Nguyễn Văn Giang, Nguyễn Đình Luyện (2017), “Xây dựng tiêu chuẩn sở đánh giá độ ổn định dung dịch mafenid acetat từ nguồn nguyên liệu sản xuất nước.”, Tạp chí Y học thảm họa & Bỏng, tập 4, tr 4247 Nguyễn Văn Giang, Nguyễn Văn Hải, Nguyễn Chính Khoa, Bùi Văn Quân, Nguyễn Đình Luyện (2016), “Phương pháp tổng hợp mafenid acetat từ Nbenzylsuccinimid”, Tạp chí Dược học, số 482, tr 69-72 Nguyễn Văn Giang, Nguyễn Văn Hải, Bùi Phúc Tiến, Nguyễn Đình Luyện, Chu Ngọc Khánh, Nguyễn Như Lâm, (2016), “Nghiên cứu tổng hợp mafenid acetat từ alcol benzylic sử dụng phản ứng Ritter”, Tạp chí Nghiên cứu dược & Thông tin thuốc, tập số 2, tr 2-6 Nguyễn Thị Thu Hường (2015) Bước đầu nghiên cứu tổng hợp mafenid acetat phản ứng Ritter Khóa luận tốt nghiệp Dược sỹ Đại học Trường Đại học Dược Hà Nội Chu Ngọc Khánh (2016) Nghiên cứu xây dựng quy trình tổng hợp mafenid acetat từ alcol benzylic Luận văn Thạc sỹ Dược học Trường Đại học Dược Hà Nội 41 10 Nguyễn Chính Khoa (2015) Nghiên cứu phương pháp tổng hợp mafenid acetat qua trung gian succinimid succinamid Khóa luận tốt nghiệp Dược sỹ Đại học Trường Đại học Dược Hà Nội 11 Nguyễn Đình Luyện (2017), Báo cáo kết Đề tài nghiên cứu khoa học cấp Nhà nước thuộc Chương trình Hóa dược: “Nghiên cứu xây dựng quy trình tổng hợp mafenid acetat”, mã số nhiệm vụ: CNHD.ĐT.062/15-17 12 Nguyễn Đình Luyện, Nguyễn Văn Giang, Nguyễn Văn Hải, Nguyễn Chính Khoa (2018), “Phương pháp điều chế 4-(aminometyl)benzensulfonamit axetat (mafenit axetat) từ N-benzyl sucxinimit”, Bằng độc quyền sáng chế, số 19800, Cục Sở hữu Trí tuệ - Bộ Khoa học Cơng nghệ 13 Nguyễn Viết Lượng, Lương Ngọc Khuê (2011), “Tình hình bỏng Việt Nam năm 2005-2009”, Tạp chí y học thảm họa bỏng, số 2, tr 14-22 14 Tô Phương Ngân (2016) Nghiên cứu xây dựng quy trình tổng hợp mafenid acetat quy mơ 10g/mẻ qua trung gian N-benzylsuccinimid Khóa luận tốt nghiệp Dược sỹ Đại học Trường Đại học Dược Hà Nội 15 Hoàng Xuân Nghĩa (2015) Nghiên cứu tổng hợp mafenid acetat qua trung gian phthalimid phthalamid Khóa luận tốt nghiệp Dược sỹ Đại học Trường Đại học Dược Hà Nội 16 Bùi Văn Quân (2016) Nghiên cứu xây dựng quy trình tổng hợp mafenid acetat qua trung gian succinimid quy mô 100g/mẻ Luận văn Thạc sỹ Dược học Trường Đại học Dược Hà Nội 17 Nguyễn Văn Thắng (2017) Nghiên cứu xây dựng quy trình tổng hợp mafenid acetat từ N-benzylsuccimid quy mơ 500 g/mẻ Khóa luận tốt nghiệp Dược sỹ Đại học Trường Đại học Dược Hà Nội 18 Bùi Phúc Tiến (2016) Nghiên cứu tổng hợp mafenid acetat từ alcol benzylic quy mơ 100 g/mẻ Khóa luận tốt nghiệp Dược sỹ Đại học Trường Đại học Dược Hà Nội 19 Võ Phi Trúc (2015) Nghiên cứu phương pháp tổng hợp mafenid acetat qua trung gian N-(p-nitrobenzyl)acetatmid Khóa luận tốt nghiệp Dược sỹ Đại học Trường Đại học Dược Hà Nội 42 20 Lê Thế Trung (2008), Bỏng – Những kiến thức chuyên ngành, Nhà xuất Y học 21 Trường Đại học Dược Hà Nội (2017) Quy trình công nghệ “Tổng hợp mafenid acetat đạt tiêu chuẩn USP 36 quy mô kg/mẻ” Quyết định Ban hành quy trình KHCN thuộc đề tài cấp Quốc gia số 990/QĐ-DHN ngày 04 tháng 12 năm 2017 Hiệu trưởng Trường Đại học Dược Hà Nội Tài liệu Tiếng Anh 22 Angyal J S., Jenken R S (1950), “Sulfonamide”, Aust J Sci Re, 3A, pp 461-465 23 Giang N V., Huong N T., Hai N V., Luyen N D (2015), “A novel synthesis of mafenide acetate”, ASEAN PharmNET I – Proceedings, pp 458-463 24 Dash A K., Saha S (1996), “Mafenide Acetate”, Analytical Profiles of Drug Substances and Excipients, Academic Press, 24, pp 277-305 25 Klarer J, Wuppertal-Elberfeld (1942), “Benzenesulphonamide Compounds”, Patent US 2288531A 26 Nikulina T.N al et (1976), “Method for the synthesis of p-aminomethyl benzenesulfonamide salts”, Pharmaceutical Chemistry Journal, 10(1(A)), pp 776782 27 Sweetman S.C (2009), Martindale: The Complete Drug Reference, 36th edition, PhP: London, Chicago 28 The United States Pharmacopeia Convention (2019), The United States Pharmacopeia, USP 42 - NF 37 Website 29 https://dailymed.nlm.nih.gov 30 https://www.drugs.com/ 31 https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/ 43 ... việc nghiên cứu tổng hợp mafenid bào chế thành phẩm ứng dụng công nghiệp dược Việt Nam, đề tài ? ?Nghiên cứu triển khai tổng hợp mafenid acetat quy mô pilot? ?? thực với mục tiêu: Triển khai quy trình... hiệu chỉnh quy trình tổng hợp quy mô kg/mẻ 26 Bảng 3.5 Thông số hiệu chỉnh quy trình tổng hợp mafenid quy mô kg/mẻ 28 Bảng 3.6 Thông số hiệu chỉnh quy trình tạo muối mafenid acetat quy mơ kg/mẻ... Thông số hiệu chỉnh quy trình tổng hợp quy mô kg/mẻ 17 Bảng 3.2 Thông số hiệu chỉnh quy trình tổng hợp quy mô kg/mẻ 20 Bảng 3.3 Thông số hiệu chỉnh quy trình tổng hợp quy mô kg/mẻ 23 Bảng